JP7500704B2 - 液体包帯剤組成物およびその獣医学的な使用 - Google Patents
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Description
本発明の組成物において、セラックまたはセラック誘導体を使用してもよく、本明細書における「セラック」への言及は、セラックとセラック誘導体の両方を含む。これは、蝋非含有のセラック、脱蝋セラック、脱蝋漂白セラック、脱蝋脱色セラック、セラックエステルまたは蝋含有セラックを含み得る。加えて、使用されるセラックは、粉末、フレーク、塊であってもよいし、または特定の場合において、溶液として供給されてもよい。セラックは、木の上で雌のラック虫により分泌された樹脂であり、一般的にインドやタイで生産される。これは加工され、一般的に乾燥フレークとして販売されるか、またはアルコールなどの溶媒中に溶解させて液体セラックを作製することができる。セラックは、シグマ(Sigma)またはAF Suter&Coなどの供給元から容易に商業的に入手可能である。好ましくは、本発明のバリア組成物は、10%w/w~70%w/wのセラック、より好ましくは20%w/w~70%w/wのセラック、より好ましくは30%~70%のセラック、より好ましくは35%~70%のセラック、より好ましくは35%~60%のセラック、最も好ましくは40%~60%のセラックを含み、ここでセラックの量は、それが適用される前の組成物中の%w/wの量に対して示される。一部の実施態様において、使用されるセラックのタイプは、食品添加剤として承認されているものであることが好ましい。
一般的に、本発明で使用される組成物は、揮発性溶媒中で成分を混合して、均質な混合物を生産することにより得ることができる。これは通常、揮発性溶媒中に金属活性物質、続いてあらゆる添加剤を溶解させ、最後にセラックを添加するのに有利である。この順序は、添加剤(例えばPEG、TECおよびグリセロール)の添加の前に金属化合物を適切に溶解させることを可能にし、生じる混合物が例えばセラックの塊によって不均質になるのを回避することを助ける。工程の順序はまた、一部の添加剤は組成物中に分散する前のより高い濃度のときにセラックを沈殿させる可能性があるため、セラックを添加する前に添加剤がよく分散されていることも意味する。一部の場合において、金属活性物質は、抗感染性金属活性物質であると予想される。
本発明に従って使用される組成物は、対象への局所適用に好適な粘度を有し、それを保ちながら保護的疎水性バリアを形成することが見出された。好適な粘度の例としては、50cPより大きい、より好ましくは75cPより大きい、より好ましくは100cPより大きい、より好ましくは200より大きい、より好ましくは500より大きい、より好ましくは750より大きい、より好ましくは1000cPより大きい、より好ましくは2500cPより大きい、より好ましくは5000cPより大きい、最も好ましくは10000cPより大きい粘度が挙げられる。一般的に、スプレーとして適用される組成物の場合、粘度は、10cP~3000cPであってもよい。組成物が塗布剤として適用される場合、より粘性の組成物を使用してもよく、例えば、1000cPより大きい粘度、より好ましくは2000cPより大きい粘度を有する組成物を使用してもよい。粘度測定は、室温で、すなわち25℃でなされてもよい。一部の実施態様において、金属活性物質の添加は、組成物の粘度を、25℃で測定した場合、金属活性物質を含まない対応する組成物と比較して、例えば少なくとも50%、より好ましくは少なくとも100%、より一層好ましくは少なくとも200%、最も好ましくは少なくとも500%増加させるのに役立つ。
一部の場合において、例えばネオマイシン、ポリミキシンおよびバシトラシンなどの上記の抗生物質または他の治療剤の組合せも、効能を増加させるのに使用することができる。
一部の場合において、組成物は、無痛化剤、例えばメントール、ユーカリ油、桂皮油および/またはカンファーをさらに含む。
好ましくは、組成物の全ての成分は、承認された食品または飼料添加剤であるか、および/またはGRAS試薬(「一般的に安全とみなされる(Generally Recognised As Safe)」)としての資格を有する。
本発明に従って使用するための組成物は、感染および/または創傷の防止または処置のために採用することができる。組成物が感染を処置または防止するために使用される場合、感染は、細菌感染、真菌感染、寄生虫感染またはウイルス感染であり得る。一般的に、組成物は、細菌感染を処置または防止するのに特に好適であり、すなわち組成物は、抗微生物組成物である。
一般的に、揮発性溶媒中にセラックおよび金属活性物質または抗感染性金属活性物質を含む本発明に従って使用される組成物は、非ヒト動物(例えば哺乳類)対象に局所適用されると、疎水性バリアを形成することが可能である。対象に局所適用されると、本発明の組成物は、一般的に、固体界面を形成する。しかしながら、環境の水分との接触、またはウシなどの家畜の処置の場合は糞便のスラリーとの接触は、疎水性バリアの即時の形成をもたらすことになり、それにより本発明を、問題のある環境、例えば趾皮膚炎(例えばウシ趾皮膚炎)および***の感染、例えば***の潰瘍形成、***の皮膚炎または***の病変における使用に十分適合したものにするため、これは必須ではない。さらなる獣医学的な使用としては、乳首のシーリングまたは角の除去のための液体包帯剤組成物の使用が挙げられる。
代替として、またはそれに加えて、本発明で使用される組成物は、例えば油、例えば不乾性または半乾性油などの柔軟剤を実質的に含まない。柔軟剤の例は、トリグリセリド油、例えば動物性、植物性、鉱物性または合成起源のトリグリセリド油である。好適な不乾性または半乾性油の例としては、マツ油、ユーカリ油、ティーツリー油、ローズヒップ油、ダイズ油、ヤシ油、ヒマシ油、オリーブ油、ベニバナ油およびヒマワリが挙げられる。
本発明の組成物の1つの利点は、バリアが水に対して非多孔性であることである。組成物が細孔を有するバリアを形成する場合、それらは、一般的に小さいサイズの細孔、例えば直径が1μmまたはそれ未満の平均直径を有する細孔である。
本明細書において定義される揮発性溶媒中にセラックおよび金属活性物質(例えば抗感染性金属活性物質)を含む組成物を含有する第1のチャンバーおよび非溶媒を含有する第2のチャンバー;
第1および第2のチャンバーと連通する混合チャンバー;
混合チャンバーに組成物および非溶媒を送達して、混合された組成物を提供するための作動手段;
および
対象上の場所に該混合された組成物を適用するための、該混合チャンバーと連通するアプリケーター
を含み、該組成物は、対象に局所適用されるとバリアを形成することが可能である、デバイスを提供する。
用語「抗微生物性」は、本明細書で使用される場合、グラム陰性およびグラム陽性微生物によって引き起こされる感染の処置または防止を含み、特に、環境から創傷への微生物の進入または微生物の包帯剤への定着を防止することを指し、このような微生物としては、以下が挙げられる:スピロヘータ属(Spirochaete)種、エシェリキア属(Escherichia)種、例えば大腸菌(E.coli)、ブドウ球菌属(Staphylococcus)種、例えば皮膚常在菌(S.epidermis)、黄色ブドウ球菌(S.aureus)およびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(「MRSA」)、バチルス属(Bacillus)種、例えば枯草菌(B.subtilis)または炭疽菌(B.anthracis)、シュードモナス属(Pseudomonas)種、例えば緑膿菌(P.aeruginosa)、ビブリオ属(Vibrio)種、例えばV.フィシェリ(V.fisheri)、連鎖球菌属(Streptococcus)種、例えばS.ズーエピデミカス(S.zooepidemicus)、S.エクイ(S.equi)、S.スイス(S.suis)、S.ウベリス(S.uberis)、S.ピオゲネス(S.pyogenes)および肺炎連鎖球菌(S.pneumoniae)、クレブシエラ属(Klebsiella)種、例えばK.ニューモニエ(K pneumoniae)、ミクロコッカス属(Micrococcus)種、例えばM.ルテウス(M.luteus)、クロストリジウム属(Clostridium)種、例えばC.ディフィシレ(C.difficile)またはC.パーフリンジェンス(C.perfringens)、アシネトバクター属(Acinetobacter)種、例えばA.バウマンニ(A.baumannii)、マイコバクテリウム属(Mycobacterium)種、例えば結核菌(M.tuberculosis)およびM.ボビス(M.bovis)、サルモネラ属(Salmonella)種、エリジペロスリックス属(Erysipelothrix)種、例えばブタ丹毒菌(E.rhusiopathiae)または潜在性エリジペロトリックス(E.insidiosa)、コリネバクテリウム属(Corynebacterium)種、例えばC.ミヌチシマム(C minutissimum)、レプトスピラ属(Leptospira)種、例えばL.インタロガンス(L.interrogans)、キューティバクテリウム属(Cutibacterium)種、例えばC.アクネス(C.acnes)、カンピロバクター属(Campylobacter)種、例えばC.フィタス(C.fetus)、クレブシエラ属(Klebsiella)種、例えばK.ニューモニエ(K.pneumoniae)、鼻硬腫菌(K.rhinoscleromatis)、キャプノサイトファガ属(Capnocytophaga)種、例えばC.カニモルサス(C.canimorsus)、ビブリオ属(Vibrio)種、例えばV.バルニフィカス(V.vulnificus)、パスツレラ属(Pasteurella)種、例えばP.ムルトシダ(P.multocida)、エロモナス属(Aeromonas)種、例えばA.ハイドロフィラ(A.hydrophila)、エイケネラ属(Eikenella)種、例えばE.コローデンス(E.corrodens)、マイコプラズマ属(Mycoplasma)種、例えばM.ニューモニエ(M.pneumoniae)、カリマトバクテリウム属(Calymmatobacterium)種、例えばC.ダラヌロマティス(C granulomatis)、リステリア属(Listeria)種、例えばL.モノサイトゲネス(L.monocytogenes)、トレポネーマ属(Treponema)、例えばT.カラテウム(T.carateum)またはT.ビンセンティ(T.vincentii)またはT.マルトフィラム(T.maltophilum)またはT.レシチノリティカム(T.lecithinolyticum)、バルトネラ属(Bartonella)種、例えばB.ヘンセラ(B.henselae)、ノカルジア属(Nocardia)種、例えばN.ブラジリエンシス(N.brasiliensis)、エルシニア属(Yersinia)種、例えばペスト菌(Y.pestis)、セラチア属(Serratia)種、例えばS.マルセセンス(S.marcescens)、バークホルデリア属(Burkholderia)種、例えばB.シュードマレイ(B.pseudomallei)、放線菌属(Actinomyces)種、例えばA.イスラエリー(A.israelii)、ボレリア属(Borrelia)種、例えばライム病ボレリア(B.burgdorferi)、エンテロコッカス属(Enterococcus)種、例えばE.フェカーリス(E.faecalis)、または以下のような真菌、例えば、カンジダ属(Candida)種、例えばC.アルビカンス(C.albicans)、マラセチア属(Malassezia)種、例えば癜風菌(M.furfur)およびM.パチデルマティス(M.pachydermatis)、トリコフィトン属(Trycophyton)種、例えばT.ルブルム(T.rubrum)またはT.インテルディジタレ(T.interdigitale)、ミクロスポルム属(Microsporum)種、例えばM.カニス(M.canis)、M.エクイヌム(M.equinum)、M.オーズアニー(M.audouinii)、M.ジプセウム(M.gypseum)、またはM.ナヌム(M.nanum)、表皮菌属(Epidermophyton)種、例えば有毛表皮糸状菌(E.floccosum)、フザリウム属(Fusarium)種、例えばF.ソラニ(F.solani)、クモノスカビ(Rhizopus microspores)、リゾムコール属(Rhizomucor)種、例えばR.プシリス(R.pusillis)、ムコール属(Mucor)種、例えばM.インディカス(M.indicus)、シンセファラストラム属(Syncephalastrum)種、例えばS.ラセモスム(S.racemosumm)、カニングハメラ属(Cunninghamella)種、例えばC.ベルトレチアエ(C.bertholletiae)、アポフィソミセス属(Apophysomyces)種、例えばA.エレガンス(A.elegans)、リクテイミア属(Lichtheimia)、例えばL.コリムビフェラ(L.corymbifera)、サクセナエア属(Saksenaea)種、例えばS.エリスロスポラ(S.erythrospora)、アスペルギルス属(Aspergillus )種、例えばA.グラウクス(A.glaucus)、ブラストマイセス属(Blastomyces)種、例えばB.デルマチチジス(B.dermatitidis)、コクシジオイデス属(Coccidioides)種、例えばC.イミチス(C.immitis)、クリプトコックス属(Cryptococcus)種、例えばC.ネオフォルマンス(C.neoformans)、ヒストプラスマ属(Histoplasma)種、例えばH.カプスラーツム(H.capsulatum)、コクリオボルス属(Cochliobolus)種、例えばC.ルナタス(C.lunatus)、クラドフィアロフォラ属(Cladophialophora)種、例えばC.バンティアナ(C.bantiana)、エクソフィアラ属(Exophiala)種、例えばE.ジェンセルメイ(E.jeanselmei)、ピレノケータ属(Pyrenochaeta)種、例えばP.ロメロイ(P.romeroi)、ニューモシスチス属(Pneumocystis)種、例えばP.ジロベシ(P.jirovecii)、パラコクシジオイデス属(Paracoccidioides)種、例えばP.ブラジリエンシス(P.brasiliensis)、スポロトリクス属(Sporothrix)種、例えばS.シェンキィ(S.schenckii)、タラロミセス属(Talaromyces)種、例えばT.マルネフェイ(T.marneffei)など、または以下のような寄生虫、例えば、サルコプテス属(Sarcoptes)種、例えばヒゼンダニ(S.scabiei)、リーシュマニア属(Leishmania)種、例えばドノバンリーシュマニア(L.donovani)、ブラジルリーシュマニア(L.braziliensis)、L.パナメンシス(L.panamensis)、鉤虫科(Ancylostomatidae)、例えば鉤虫属(Ancylostoma)種またはアメリカ鉤虫属(Necator)種、ストロンギロイデス属(Strongyloides)種、例えば糞線虫(S.stercoralis)、オンコセルカ属(Onchocerca)種、例えば回旋糸状虫(O.volvulus)、双翅目幼虫、例えばヒロズキンバエ(Lucilia sericata)、ルリキンバエ(Protophormia terraenovae)、ラセンウジバエ(Cochliomyia hominivorax)、ヒトクイバエ(Cordylobia anthropophaga)、またはニクバエ(Sarcophaga bercaea)、バラムチア属(Balamuthia)種、例えばB.マンドリルリス(B.mandrillaris)、またはアカントアメーバ属(Acanthamoeba)種など、または以下のようなウイルス、例えばパピローマウイルス、エンテロウイルス、例えばコクサッキーウイルス、モラシポックスウイルス属種、例えば伝染性軟属腫、ワリセロウイルス属、またはヘルペスウイルス属など。用語「抗微生物性」は、本明細書で使用される場合、表面への微生物の付着を阻害する、微生物を致死させる、および/または微生物の繁殖を阻害する、特に環境から宿主への微生物の進入、もしくは微生物による定着もしくは包帯剤のバイオフィルム形成を防止する物質などの物質に適用するものとして理解される。用語「微生物」は、上記で詳述したような細菌、加えて酵母などの真菌、古細菌および原生生物およびウイルスを含む全ての微生物を含むものとして理解される。用語「微生物の」および「抗微生物性」は、そのように解釈されるものとする。
対象に感染する可能性があり、本発明の組成物を使用して処置または防止することができるウイルスの例としては、呼吸器ウイルス、胃腸ウイルスおよび皮膚ウイルスが挙げられる。
皮膚ウイルス:イヌパルボウイルス、、エプスタイン-バーウイルス、サイトメガロウイルス(cytomegolavirus)、デング熱ウイルス、ジカウイルス、サル痘ウイルス、牛痘ウイルス、ウシパピローマウイルス1および2、***ウイルス。
以下の実施例は、本発明の好ましい形態を例示するために提供され、本発明の範囲を限定することは意図しない。
実施例1.1.S1B1
エタノール中の30%の脱蝋したセラック、100mMolalの酢酸銅、100mMolalの塩化亜鉛。酢酸銅、および塩化亜鉛を50mLファルコンチューブに量り入れ、次いでエタノールを添加した。混合物を手動でホモジナイズし、そのまま約1時間混合した。次にセラックをプラスチックボトルに添加し、混合物を再び均質になるまでそのまま混合した。
エタノール中の40%の脱蝋したセラック、100mMolalの酢酸銅、100mMolalの塩化亜鉛。セラック濃度を30%の代わりに40%としたことを除いて、実施例1.1.に従った。
エタノール中の50%の脱蝋したセラック、80mMolalの酢酸銅、20mMolalの塩化銅、100mMolalの塩化亜鉛。酢酸銅、塩化銅および塩化亜鉛を500mlプラスチックボトルに量り入れ、次いでエタノールを添加した。混合物を手動でホモジナイズし、そのまま約1時間混合した。次にセラックをプラスチックボトルに添加し、混合物を再び完全に均質になるまでそのまま混合した。
エタノール中の60%の脱蝋したセラック、50mMolalの酢酸銅、50mMolalの塩化銅、100mMolalの塩化亜鉛。酢酸銅、塩化銅および塩化亜鉛を500mlプラスチックボトルに量り入れ、次いでエタノールを添加した。混合物を手動でホモジナイズし、そのまま約1時間混合した。次にセラックをプラスチックボトルに添加し、混合物を再び完全に均質になるまでそのまま混合した。
エタノール中の40%の脱蝋したセラック(ブレンド済み)、12%PEG-400、5%グリセロール、100mMolalの酢酸銅、100mMolalの塩化亜鉛。PEG-400およびグリセロールを金属のエタノール溶液に添加し、セラック添加の前によく混合したことを除いて、実施例1.2.に従った。
エタノール中の40%の脱蝋したセラック(ブレンド済み)、8%クエン酸トリエチル(TEC)、1%ZnO、100mMolalの酢酸銅、100mMolalの塩化亜鉛。
TECおよびZnOを金属のエタノール溶液に添加し、セラック添加の前によく混合したことを除いて、実施例1.2に従った。
エタノール中の50%の脱蝋したセラック(ブレンド済み)、10%クエン酸トリエチル(TEC)、5%デカン酸、100mMolalの酢酸銅、100mMolalの塩化亜鉛。セラックの濃度を60%の代わりに50%とし、セラック添加の前にTECおよびデカン酸も混合したことを除いて、配合は、実施例1.2に従った。
配合は、より高い金属濃度(190mMolalの塩化亜鉛、126mMolalの酢酸銅)および109mMolalのサリチル酸を用いたことを除いて、実施例1.5に従った。1.204gの酢酸銅、1.236gの塩化亜鉛および0.7147gのサリチル酸を、17.38gのエタノールに添加し、よく混合した。その後、グリセロール(2.1236g)、PEG-400(5.1359g)およびセラック(19.75g)を添加し、スラリーを均質になるまで混合した。
43%のセラック、174mMolalの酢酸銅、174mMolalの塩化亜鉛、101mMolalのサリチル酸、8%グリセロール、10.5%PEG400、4.3%アゼライン酸、2.2%デカン酸、1.8%アジピン酸。1.2093gの酢酸銅、0.8273gの塩化亜鉛および0.4843gのサリチル酸を、7.82gのエタノールに添加し、よく混合した。その後、アゼライン酸(1.5053g)、デカン酸(0.756g)、アジピン酸(0.642g)、グリセロール(2.802g)、PEG-400(3.6421g)およびセラック(15.1195g)を添加し、スラリーを均質になるまで混合した。
500mMolalの塩化銅、450mMolalの塩化亜鉛、50mMolalの酸化亜鉛、セラック40%。
500mMolalの塩化銅および500mMolalの塩化亜鉛(最終濃度に従って)をKOHでpH4に中和し、次いで40%w/wまでセラックを添加した。
3.92gのカオリンを、15.65gのエタノール中の50%(w/w)のエステル化したセラックに添加し、よく混合した。カオリンは、抗微生物性アルミニウムの供給源として、さらに止血剤として使用されてきた。
エタノール中の40%の脱蝋したセラック(ブレンド済み)、12%PEG-400、5%グリセロール、100mMolalの酢酸銅、100mMolalの塩化亜鉛。酢酸銅、および塩化亜鉛を50mLファルコンチューブに量り入れ、次いでエタノールを添加した。混合物を手動でホモジナイズし、そのまま約1時間混合した。PEG-400およびグリセロールを金属のエタノール溶液に添加し、セラック添加の前によく混合した。セラックを完全に分散させた後、カオリンを11%(w/w)で添加した。
実施例2.1
実施例1.4で生産された材料を二成分カートリッジの一方のチャンバーにローディングし、他方のチャンバーはグリセロールを含有し、手動のアプリケーターガンで活動性の趾皮膚炎病変に適用した。2つの成分を混合すると、ゴム様のバリアが即座に形成された。これは、アプリケーターガンデバイスを使用して本発明の組成物を送達することの実行可能性を実証する。
供給源およびセラックのタイプの略語:
S-シグマからの蝋非含有のセラック
AFD-AF Suter&Coからの脱蝋した(<0.5%)セラック
AFW-AF Suter&Coからの蝋含有セラック
AFE-AF Suter&Coからの事前にエステル化したセラック(セラックエステル)
F-供給元から得られた状態のまま使用されるセラック、すなわちフレーク(供給元から得られた状態のまま)
B-フレークを粉末にブレンドした後に使用されるセラック。
CuAc-酢酸第二銅水和物(Cu(CH3COO)2.xH2O)
FeCl-塩化第二鉄六水和物(FeCl3.6H2O)
CuCl-塩化銅(II)(CuCl2.2H2O)
ZnCl-塩化亜鉛(ZnCl2)
ZnAc-酢酸亜鉛二水和物(Zn(CH3COO)2.2H2O)
AlCl-塩化アルミニウム(AlCl3.6H2O)
MoAc-酢酸モリブデン(Mo2(CH3COO)4)。
実施例3.1
エタノール中の70%のセラックの溶液を調製したところ、これは透明なコハク色の粘性の溶液になった。エタノールで5倍希釈すると、流動しやすい透明な黄色の溶液が得られ、目に見える沈殿はなかった。
200mMolalの酢酸銅をエタノール中に溶解させたところ、紺青色/緑色の溶液が生じた。これをエタノールで1:10に希釈したところ、透明な薄青色の溶液が生じた。しかしながら、それが17%のセラック溶液で1:10に希釈される場合、大量の沈殿を有する濁った緑色を帯びた溶液が生じる。
固体セラックを酢酸銅のエタノール溶液(100mMolal)に添加して、目に見える沈殿がない40%のセラックを含む均質な溶液を得ることができる。
材料
酢酸銅および塩化亜鉛をファルコンチューブに量り入れ、エタノール中に溶解させた。次にセラックまたはロジンも添加し、そのまま一晩ローラーミキサーで溶解させた。一晩ローラーミキサーを使用してエタノール中にセラック(40および60%)またはロジン(40%)を単に溶解させることによって、酢酸銅および亜鉛を含まない等価な材料を調製した。表2に、調製された材料およびその組成を列挙した。
構成
湿ったウシの蹄が遭遇する環境に近い環境として、ビチューメンの副次的な裏張り(すなわち裏面;詳細は以下の表の通り)を有する加湿した四角のカーペット(5.5cm×5.5cm)を使用した。簡単に言えば、四角形を水道水が入ったビーカー中に5~10秒浸漬し、次いでクランプを使用して裏面(すなわちビチューメン裏張り)と上向きに27°の垂直角度でスタンド上に固定した。
試験ごとに新しいカーペット表面を使用した。プラスチックシリンジ(5mL)を用いて組成物を常に同じ領域に適用した。適用した量とその後失われた割合(すなわちカーペットに接着しなかった割合)を重量測定により決定した(表4)。
CuAcおよびZnClを含む40%のセラックを含む組成物は最良のバリアを形成した。第2番目に良好であったのは60%のセラックであった。他の材料はそれほど粘性ではなく、薄くもろいバリア形成した。
驚くべきことに、抗微生物性金属の添加は、より少ない量のセラックを使用ながらも粘度増加および保持の改善の達成を可能にした。これらの実験の結果は、金属活性物質およびセラックを含む組成物のみが、粘着特性を有する自立式疎水性バリアを形成するための必要な粘度および粘着特性を有していたことを示した。対照的に、ロジンへの金属活性物質の添加は実用的なバリアを提供できなかった。
本発明者らは、セラック組成物において粘度増加を引き起こすのに金属も使用することができることを見出した。以下の表(主要な編集表から抽出)は、金属の添加を介して粘度が強化された組成物のいくつか例を提供する。誤解を避けるために言えば、この表は、様々な金属の組合せおよび/または濃度で粘度の強を達成できることを単に例示する目的である。
セラック組成物は、可溶性アルカリ性条件下で(pH>7)である。一般的に生理学的な流体はpH7.0を超えるため、これは局所バリアに関するその有用性を限定する。加えて、外部の環境は、特定には獣医学的な適用において、アルカリ性であることが多い。趾皮膚炎の場合、バリアは、通常アルカリ性の堆肥スラリー(pH9.0まで)との接触に耐えなければならない(Salazarら、Characterization of dairy slurry in southern Chile farms. Agricultura Tecnica、67(2)、155、2007; FordhamおよびSchwertmann、Composition and Reactions of Liquid Manure (Gulle), with Particular Reference to Phosphate: III. pH-Buffering Capacity and Organic Components 1. Journal of Environmental Quality、6(2)、140~144、1977;およびUC Manure Technical Guide Series; Dairy Manure Nutrient Content and Formsを参照)。このような溶液との接触により、セラックバリアの完全性が迅速に失われると予想される。
75mmolalの炭酸アンモニウム(pH8.9)は、ウシ飼育場における糞便のスラリーの化学的範囲であることがこれまでに示されているため、SSは75mmolalの炭酸アンモニウム(pH8.9)からなっていた(FordhamおよびSchwertmannら、および上記のUC manure Technical Guideシリーズを参照)。
本発明の組成物は、抗生物質の周囲の環境への喪失を防止することにおいて効果的である。これは、オキシテトラサイクリン(0.5%)の溶液を模擬病変表面に適用した実施例7.1で例示される。バリア非存在下では、さらに、わずか1mlの流体に曝露されただけにもかかわらず、90分以内に模擬病変表面から抗生物質の42%が失われた。対照的に、保護バリアを抗生物質の上に適用した場合、周囲の流体へのオキシテトラサイクリンの喪失は0.2%未満であった。実施例7.2において、クロルテトラサイクリンスプレー(趾皮膚炎を処置するのに一般的に使用される)をウシ死体の肢(指間の溝と上指との間)に適用し、模擬スラリーに1時間曝露した。バリアの非存在下で(n=4)、実質的な喪失が観察された(93%±3.6%)。バリアを適用すると(n=4)、喪失が18%±3.5%に低減された(5分の1)。
抗生物質喪失実験を24ウェルプレートで行った。1mlの10%ウシゼラチン溶液(50℃で調製された)を各ウェルの底に添加し、そのまま7±2℃で90分静置した。次に20μLの0.5%オキシテトラサイクリンのエタノール溶液を各ウェルの底に添加し、そのまま5~10分乾燥させた。次いで実験ウェルの半分(各群につきN=6)に0.50±0.05gのS1B2(実施例1.2に従って調製した)を添加することにより、抗生物質の上に保護バリアを形成し、そのまま5~10分乾燥させた(バックグラウンド補正のための適切なOTCフリーのウェルも調製した)。次に1mLのUHP水を全てのウェルに添加した。これらを暗所で90分維持し、その後、オキシテトラサイクリン標準(グラフパッド(Graphpad)によるカーブフィッティング)に対するプレートリーダー(355/590)での蛍光測定のために水性画分のサンプルを収集した。水性相への抗生物質喪失は、抗生物質のみの場合は42%、抗生物質に加えてバリアの場合は0.1%であると決定された。
ウシ死体の肢を用いてエクスビボでの抗生物質喪失実験を行った。趾皮膚炎を処置するために使用された抗生物質スプレー懸濁液(アニメダゾン(Animedazon)スプレー、活性物質としてクロルテトラサイクリンおよび色素としてパテントブルーVを含有する)を、一般的に病変に罹患した領域(指間の溝と上指との間の領域)に2秒スプレーすることによって各肢に適用した。適用されたスプレーの量を制御するために各適用の前および後にスプレー缶の質量を記録した。適用された抗生物質スプレーをそのまま60秒乾燥させ、次いで肢を、(a)対照グループ(n=4):1リットルの模擬スラリー(SS;75mM炭酸アンモニウム)中に直接浸すか、または(b)バリアグループ(n=4):抗生物質スプレー部位を覆うように適用されたバリア配合物(15±5gの実施例1.2からのS1B2)で処置し、さらに120秒そのまま乾燥させ、次いで1リットルのSS中に浸すかのいずれかとした。1時間の浸漬後、各肢につきSSの10mLサンプルを取り、アッセイを終結させた。サンプルを吸光度に関して分析して、模擬スラリー流体に失われた抗生物質配合物の比率を決定した;パテントブルーVの強く特徴的な分光化学的なプロファイル(λmaxH2O=639nm[J. Chem. Sci. (2018) 130:12])のために、吸光度測定が抗生物質喪失の便利な代用となった。量った質量の抗生物質スプレーの模擬スラリー溶液での連続希釈によって吸光度標準を調製した。その後、各標準およびアッセイサンプルからの6連のアリコート(各200μL)をプレーティングし(コーニング(Corning)のCo-star96ウェル)、吸光度350~850nmで測定した。測定したままのスペクトルはいくらかノイズが入った変動的なベースラインを有し(肢上の有機汚染物質による)、信頼できる吸光度最大値を得るためにMATLAB(登録商標)(サビツキー・ゴーレイ(Savitsky Golay)フィルタリング、それに続く二次多項式でのベースラインサブトラクション)での処理を必要とした。最後に、直線状の標準曲線(濃度対639nmでの吸光度)を使用して、アッセイサンプルごとの喪失データを作成した。バリア保護の非存在下で、適用されたパテントブルーの93%がアッセイ流体に失われた;バリア配合物を使用した場合、喪失が5分の1より少ない18%に低減された。
本明細書で開示される組成物の多くが、流体と接触したとき、極めて低いレベルの金属を放出する。それにもかかわらず、これらの組成物は、接触のときに殺菌活性を有する。対照的に、セラックのみのバリアは、測定可能な接触致死活性を有さないことが見出された。
1mLの各材料を12ウェルプレート上のウェルに移し、そのまま一晩静置した。翌日、LB中の1mlの大腸菌培養物(約106~107CFU/ml)を各材料の上に添加し、穏やかにかき混ぜながら(100rpm)30℃で24時間インキュベートした。24時間後、細菌用培地からのサンプルを収集して、細菌濃度(寒天プレート上の数)および金属放出(ICP-OES)を定量した。
LB(細菌用培地)中、穏やかにかき混ぜながら30℃で24時間後に、接触致死アッセイからサンプルを直接収集した。図2は、バリアからのZnおよびCuの放出を示す。上のグラフは、絶対濃度(ppm)を指し、それに対して下のグラフは、相対的な放出を指す。
図3は、接触致死の結果であるLB中での大腸菌とのインキュベーションから24時間後のLog CFU/mlでのK12を示す。F0は、セラックのみの組成物からなり、これは、対照実験(セラックなし)と同じ細菌増殖を有していた。1.7Log CFU/mlが検出限界であり、それゆえにこの結果を有していた材料(F4、F6、F8、F11、F13、F14、F26、F27およびF30)の場合、細菌コロニーは形成されなかった。
S1B2を、趾皮膚炎に罹った乳牛の8つの蹄に適用した。簡単に言えば、蹄を固定し、ホースで水を流し、スラリーと他の退廃物を除去した。クロルテトラサイクリンを適用し(スプレー可能な配合物)、そのまま数秒乾燥させた。その後、趾皮膚炎病変が完全に覆われるように5~10gのS1B2を適用した。1分後、ウシを解放して囲いに戻し、そこで蹄をスラリーと接触させ、ホルムアルデヒド槽中に1日数回(ウシをロボットで搾乳した後)浸した。適用後2日に、6つの蹄についてバリアの完全性を評価したところ、これらのうち4つはほぼ完全に創傷を被覆しており、1つは多少のバリア残留物を有しており、1つは、目に見えるバリアを有していなかった。対照的に、7日目に、評価された7つの蹄のうち1つのみが何らかの残留物を有し、他の6つは目に見えるバリアを全く有していなかった。
数種の配合物(表8)を、趾皮膚炎に罹った乳牛の蹄上に適用した。実施例9に従って、様々な適用戦略を使用して製品を適用した。
乳牛の2つの白癬病変上にS1B2を適用した。5~10gのS1B2を各創傷上に直接適用した(すなわち抗生物質は適用しなかった)。7日後、バリアは、1つの病変(大腿部領域における)からは完全になくなっていたが、他の病変(ウシの背中のセクションにおける)では部分的な被覆(病変部位の約50%)が観察された。
大規模な潰瘍形成をその***に呈するウシを、S1B2で処置した。病変をまず洗浄し、0.5%クロルヘキシジンで消毒した。クロルテトラサイクリンスプレーを適用し、次いでブラシを使用して病変をS1B2で覆った。適用中に製品の明らかな喪失は観察されなかった。
S1B2の代わりにS1B1組成物を使用して実施例12で計画された実験を繰り返した。
実施例12で計画された実験を繰り返したが、病変をペーパータオルで拭くだけとし、次いでクロルテトラサイクリンスプレーを適用した(すなわちクロルヘキシジンは使用されなかった)。3日後、病変部位のおよそ75%がそれでもなおバリアでカバーされ、病変は目に見える改善を示した。
趾皮膚炎に罹患したウシをクロルテトラサイクリンスプレーで処置し、次いで実施例9に従ってS1B2バリアを添加した。処置の日(0日目)および7日後に、その可動性(跛行)を、獣医によって、表9に記載される標準的な可動性スコアリングシステム(Griffithsら、2018)を使用して評価した。図4に結果を示す。このシステムにおいて、より低いスコアは、より優れた可動性を意味する;0日目、可動性スコアは1(不完全)からの3(著しく機能が損なわれた)まで様々であった。7日目に、可動性スコアにおいて統計学的に有意な改善が見られ、これを0(優れた可動性)または1に対して正規化した。
動物可動性を、獣医によって、表9に記載される標準的なスコアリングシステムを使用して評価した。片側ウィルコクソンマッチドペア符号順位検定を採用して、統計的有意性を試験した。P値<0.05を統計学的に有意とみなした。可動性スコア付けは、Griffiths, B. E.、Grove White, D.およびOikonomou, G. A Cross-Sectional Study Into the Prevalence of Dairy Cattle Lameness and Associated Herd-Level Risk Factors in England and Wales. Front. Vet. Sci.5、65 (2018)に記載されている。
Claims (51)
- 感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物であって、セラック、金属活性物質および揮発性溶媒を含み、該金属活性物質はCu、Zn、Fe、Al、MoおよびCaの1種またはそれより多くから選択される抗感染性金属活性物質を含み、該組成物は対象に局所適用されるとバリアを形成することが可能であり、該組成物は獣医学的な投与のためである、上記液体包帯剤組成物。
- 前記液体包帯剤組成物が、前記対象の創傷もしくは感染の部位または創傷もしくは感染を発生させるリスクがある部位に適用される、請求項1に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記金属活性物質が、Cu、Zn、Fe、AlおよびMoの1種またはそれより多くから選択される抗感染性金属活性物質を含む、請求項1または2に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記バリアが、疎水性バリアである、請求項1~3のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 対象に局所適用されると、自立式疎水性バリアを形成することが可能である、請求項1~4のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 細菌、真菌、寄生虫またはウイルス感染の処置または防止における使用のためである、請求項1~5のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記感染が、グラム陰性またはグラム陽性細菌によって引き起こされる、請求項1~6のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記細菌感染が、スピロヘータ属種、エシェリキア属種、ブドウ球菌属種、バチルス属種、シュードモナス属種、ビブリオ属種、連鎖球菌属種、クレブシエラ属種、ミクロコッカス属種、クロストリジウム属種、アシネトバクター属種、マイコバクテリウム属種、サルモネラ属種、クラミジア属種、エリジペロスリックス属種、コリネバクテリウム属種、レプトスピラ属種、キューティバクテリウム属種、ガードネレラ属種、カンピロバクター属種、クレブシエラ属種、キャプノサイトファガ属種、ビブリオ属種、パスツレラ属種、エロモナス属種、エイケネラ属種、マイコプラズマ属種、カリマトバクテリウム属種、ヘリコバクター属種、クロストリジウム属種、リステリア属種、トレポネーマ属種、バルトネラ属種、ノカルジア属種、エルシニア属種、セラチア属種、バークホルデリア属種、放線菌属種、ボレリア属種、またはエンテロコッカス属種によって引き起こされる、請求項7に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記真菌感染が、カンジダ属種、マラセチア属種、トリコフィトン属種、ミクロスポルム属種、表皮菌属種、フザリウム属種、クモノスカビ属種、リゾムコール属種、ムコール属種、シンセファラストラム属種、カニングハメラ属種、アポフィソミセス属種、リクテイミア属種、サクセナエア属種、アスペルギルス属種、ブラストマイセス属種、コクシジオイデス属種、クリプトコックス属種、ヒストプラスマ属種、コクリオボルス属種、クラドフィアロフォラ属種、エクソフィアラ属種、マズレラ属種、ピレノケータ属種、ニューモシスチス属種、Paraコクシジオイデス属種、スポロトリクス属種、またはタラロミセス属種によって引き起こされる、請求項1~5のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記寄生虫感染が、サルコプテス属種、リーシュマニア属種、鉤虫属種またはアメリカ鉤虫属種などの鉤虫科、ストロンギロイデス属種、オンコセルカ属種、双翅目幼虫、ルリキンバエ、ラセンウジバエ、ヒトクイバエ、またはニクバエ、バラムチア属種またはアカントアメーバ属種によって引き起こされる、請求項1~5のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記ウイルス感染が、パピローマウイルス、エンテロウイルス、例えばコクサッキーウイルス、モラシポックスウイルス属種、ワリセロウイルス属、またはヘルペスウイルスによって引き起こされる、請求項1~5のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記感染が、アデノウイルス科のウイルス、カリチウイルス科のウイルス、コロナウイルス科のウイルス、フラビウイルス科のウイルス、ヘルペスウイルス科のウイルス、オルソミクソウイルス科のウイルス、パピローマウイルス科のウイルス、パラミクソウイルス科のウイルス、パルボウイルス科のウイルス、ポックスウイルス科のウイルス、レオウイルス科のウイルスまたはフェニュイウイルス科のウイルスによって引き起こされる、請求項1~5のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記処置が、前記対象上の部位に第2の活性薬剤を適用すること、および該部位の上に前記液体包帯剤組成物を適用して、該第2の活性薬剤を封じ込めることを含む、請求項1~12のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記第2の活性薬剤が、抗生物質製剤、抗微生物剤および/または止血活性物質を含む、請求項13に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記第2の活性薬剤がヨウ素を含む、請求項13に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記自立式疎水性バリアが、前記自立式疎水性バリアが適用されない処置と比較して、前記第2の活性薬剤の喪失を少なくとも20%、任意選択で少なくとも30%低減する、請求項13~15のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 非ヒト動物対象を処置するためである、請求項1~16のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記局所適用が、非ヒト動物対象への適用である、請求項1~17のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記液体包帯剤組成物が、ウシ、スイギュウ、ヤク、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ラマ、アルパカ、シカ、ロバ、コブウシ、シマウマ、ゾウ、オランウータン、チンパンジー、ゴリラ、キツネザル、テナガザル、ヒヒ、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、エミュー、ガチョウ、ダチョウ、ネコ、イヌ、フェレット、アレチネズミ、ハムスター、チンチラ、ラット、ウサギ、オウム、カナリア、キジ目、ガンカモ目またはスズメ目の処置のためである、請求項1~18のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 塗布剤組成物として適用され、該塗布剤組成物は、25℃で1000cP~5000cPの粘度を有していてもよい、請求項1~19のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- スプレー組成物として適用され、該スプレー組成物は、25℃で10cP~3000cPの粘度を有していてもよい、請求項1~20のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- ウシ趾皮膚炎、***感染、リーシュマニア症、糖尿病性潰瘍またはブルリ潰瘍、乳首のシーリング、角の除去、***の皮膚炎、切断後、ヒツジにおける足腐敗症またはウマにおける泥土熱の処置のためである、請求項1~21のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記セラックが、蝋非含有のセラック、脱蝋セラック、脱蝋漂白セラック、脱蝋脱色セラック、セラックエステルまたは蝋含有セラックである、請求項1~22のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 10~70%w/wのセラックを含み、任意に40%w/w~60%w/wのセラックを含んでいてもよい、請求項1~23のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記溶媒が、エタノール、アセトン-水混合物、イソプロパノール、プロパノールおよびブタノール、またはそれらの組合せである、請求項1~24のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記抗感染性金属活性物質が、塩化銅、酢酸銅、酸化銅、オキソ水酸化銅、水酸化銅、塩化亜鉛、酢酸亜鉛、ナノ酸化亜鉛、ノルマル酸化亜鉛、塩化鉄、塩化アルミニウム、酢酸モリブデンまたはカオリンの一種またはそれ以上である、請求項1~25のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記抗感染性金属活性物質が、酢酸銅および塩化亜鉛の一種またはそれ以上である、請求項1~26のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記抗感染性金属活性物質が、20mM olal~500mM olalの濃度で存在する、請求項1~27のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記金属活性物質の添加が、セラック単独を含む組成物と比べて、前記組成物の粘度および/または前記バリアの厚さを増加させる、請求項1~28のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 1種またはそれより多くの抗生物質と共投与される、請求項1~29のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 1種またはそれより多くの抗生物質がすでに適用されている位置で対象に適用される、請求項1~30のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 抗生物質、抗真菌剤、および/または消毒剤を含むかまたはそれと共投与される、請求項1~31のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記組成物が対象に適用されたときに形成されたバリアが、pH9.0より高いpHを有する環境に対して耐性を有する、請求項1~32のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- さらなる樹脂成分を含む、請求項1~33のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 繊維を、好ましくは1~15%w/w、より好ましくは2.5~10%、最も好ましくは2.5%~7.5%で含む、請求項1~34のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 繊維が、セルロース繊維である、請求項35に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 可塑剤として、および/または前記自立式疎水性バリアの形成を促進するために、1種またはそれより多くの親水性添加剤をさらに含む、請求項1~36のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記親水性添加剤が、TEC、ポリエチレングリコール、グリセロール、ヘキシレングリコール等のポリアルキレングリコール、および/またはトリアセチンから選択される、請求項37に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 耐水性を強化するための、1種またはそれより多くの疎水性バリアを強化する物質をさらに含む、請求項1~38のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記疎水性バリアを強化する物質が、デカン酸、オクタン酸、オレイン酸および/またはラウリン酸から選択される、請求項39に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- バリアの分解を阻害または低減するための、1種またはそれより多くの緩衝剤をさらに含む、請求項1~40のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記緩衝剤が、ジカルボン酸であり、該ジカルボン酸は、アジピン酸、アゼライン酸、コハク酸、ピメリン酸またはデカン酸であってもよい、請求項41に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記金属活性物質の負荷量または溶解性を強化するための、抗炎症剤または錯化剤をさらに含む、請求項1~42のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記抗炎症剤または前記錯化剤が、サリチル酸、サリチル酸ナトリウムおよび/またはプロピオン酸から選択される、請求項43に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記液体包帯剤組成物が、カオリン、硫酸アルミニウム、またはゼオライト等の止血剤をさらに含む、請求項1~44のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 前記止血剤が、急性創傷ケアにおける使用のために凝固作用を強化する、請求項1~45のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 1mmまたはそれより大きい液滴サイズを有し、スプレー不可能である、請求項1~46のいずれか一項に記載の感染および/または創傷の処置または防止における使用のための液体包帯剤組成物。
- 感染および/または創傷の処置における使用のための液体包帯剤組成物を適用するためのデバイスであって、
揮発性溶媒中にセラックおよび金属活性物質を含む請求項1~47のいずれか一項で定義された組成物を含有する第1のチャンバーおよび非溶媒を含有する第2のチャンバー;
該第1および第2のチャンバーと連通する混合チャンバー;
該混合チャンバーに該組成物および非溶媒を送達して、混合された組成物を提供するための作動手段;および
対象上の場所に該混合された組成物を適用するための、該混合チャンバーと連通するアプリケーター
を含み、該組成物は、対象に局所適用されると疎水性バリアを形成することが可能である、デバイス。 - 前記非溶媒が、グリセロールまたはPEGのようなポリアルキレングリコール、である、請求項48に記載のデバイス。
- デュアルカートリッジアプリケーターである、請求項48または49に記載のデバイス。
- 揮発性溶媒中にセラックおよび金属活性物質を含む請求項1~47のいずれか一項で定義された組成物、および該組成物を送達するための噴射剤を含む、加圧スプレー送達デバイス。
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