JP7460134B2 - Desmoglein reducer - Google Patents
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Description
本発明は、デスモグレイン減少剤に関する。 The present invention relates to desmoglein reducing agents.
肌荒れ、日焼けや乾燥により生じる角層の落屑等の肌状態の悪化に関し、デスモゾーム蛋白質の増加が原因の一つとして知られている。
デスモゾーム蛋白質の量をコントロールする方法として、角層に蓄積したデスモゾーム蛋白質をプロテアーゼにより分解し、ニキビ、フケ、落屑を改善する方法がこれまでに報告されている（特許文献１）。
It is known that an increase in desmosomal proteins is one of the causes of deterioration of skin conditions, such as rough skin and desquamation of the stratum corneum caused by sunburn or dryness.
As a method for controlling the amount of desmosomal proteins, a method has been reported in which decomposition of desmosomal proteins accumulated in the stratum corneum with proteases is used to improve acne, dandruff, and desquamation (Patent Document 1).
ここで、デスモゾーム蛋白質のうち、特に、デスモグレインが表皮細胞間及び角質細胞間の接着に関与していることが知られている（特許文献２－４）。 Among desmosomal proteins, desmoglein in particular is known to be involved in adhesion between epidermal cells and keratinocytes (Patent Documents 2-4).
従来技術として、特許文献２では、アスタキサンチンを含有する角層細胞におけるデスモグレイン減少剤が報告されている。
また、特許文献４では、甘草エキスを有効成分とする皮膚における細胞間接着抑制用経口投与剤が報告されている。
As a prior art, Patent Document 2 reports an agent for reducing desmoglein in stratum corneum cells, which contains astaxanthin.
Furthermore, Patent Document 4 reports an orally administered agent for inhibiting intercellular adhesion in the skin, which contains licorice extract as an active ingredient.
ところで、特許文献５－７には、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物やシソ科イブキジャコウソウ属（Ｔｈｙｍｕｓ）植物の抽出物が水分保持機能の向上効果、抗炎症効果、皮膚老化防止効果、紫外線防御効果を有することが報告されている。 By the way, in Patent Documents 5 to 7, extracts of Wild Thyme (T. serpyllum) and extracts of Thymus plants of the Lamiaceae family have an effect of improving water retention function, an anti-inflammatory effect, It has been reported to have skin anti-aging effects and UV protection effects.
前述の先行技術のあるところ、本発明は、デスモグレインを減少させる新規な技術を提供することを課題とする。 While there are the above-mentioned prior art techniques, it is an object of the present invention to provide a novel technique for reducing desmogleins.
本発明者らは鋭意研究努力の結果、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物にデスモグレインの減少作用があることを見出し、本発明を完成させた。 As a result of intensive research efforts, the inventors discovered that an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) has the effect of reducing desmoglein, and thus completed the present invention.
上記課題を解決する本発明は、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を有効成分とする、デスモグレイン減少剤である。
なお、本明細書において、「デスモグレイン減少」の概念は、デスモグレインの減少、デスモグレインの増加抑制の何れも含む。
The present invention, which solves the above problems, provides a desmoglein reducer containing an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) as an active ingredient.
In this specification, the concept of "reduction of desmoglein" includes both a reduction in desmoglein and inhibition of an increase in desmoglein.
本発明の好ましい形態では、前記有効成分がヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部抽出物である。 In a preferred embodiment of the present invention, the active ingredient is an extract of the aerial parts of Wild Thyme (T. serpyllum).
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、ヒト表皮角化細胞の細胞間接着抑制のために用いられる。 In a preferred embodiment of the present invention, the desmoglein-reducing agent is used to inhibit intercellular adhesion of human epidermal keratinocytes.
本発明の好ましい形態では、本発明のデスモグレイン減少剤は、デスモグレイン１の減少のために用いられる。
デスモグレイン１は、主に皮膚に存在する。そのため、デスモグレイン１の減少作用を有する本発明のデスモグレイン減少剤によれば、より効率よく、肌状態悪化の予防又は改善をすることができる。
In a preferred embodiment of the present invention, the desmoglein reducing agent of the present invention is used for reducing desmoglein 1.
Desmoglein 1 is mainly present in the skin. Therefore, the desmoglein-reducing agent of the present invention, which has the effect of reducing desmoglein 1, can more efficiently prevent or improve deterioration of skin conditions.
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、敏感肌の予防又は改善のために用いられる。 In a preferred form of the present invention, the desmoglein reducing agent is used to prevent or improve sensitive skin.
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌の明度改善のために用いられる。 In a preferred form of the invention, the desmoglein reducing agent is used to improve skin brightness.
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌の透明感向上のために用いられる。 In a preferred form of the present invention, the desmoglein reducing agent is used to improve skin transparency.
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌の軟化のために用いられる。 In a preferred form of the invention, the desmoglein reducing agent is used for skin softening.
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、肌への薬効成分浸透補助のために用いられる。 In a preferred embodiment of the present invention, the desmoglein reducer is used to aid in the penetration of medicinal ingredients into the skin.
本発明の好ましい形態では、前記デスモグレイン減少剤は、角層重層剥離の改善及び／又は予防のために用いられる。 In a preferred embodiment of the present invention, the desmoglein reducing agent is used to improve and/or prevent stratum corneum desquamation.
本発明の好ましい形態では、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と、１，３－ブチレングリコールと、を含む組成物を有効成分とする。 In a preferred embodiment of the present invention, the active ingredients are a composition containing an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) and 1,3-butylene glycol.
本発明は、前述のデスモグレイン減少剤を含む、デスモグレイン減少用皮膚外用組成物でもある。 The present invention also provides an external skin composition for reducing desmoglein, which includes the desmoglein reducing agent described above.
本発明の好ましい形態では、前記のデスモグレイン減少用皮膚外用組成物は、化粧料である。 In a preferred embodiment of the present invention, the composition for topical application to the skin for reducing desmoglein is a cosmetic.
本発明の好ましい形態では、前記のデスモグレイン減少用皮膚外用組成物は、医薬品である。 In a preferred embodiment of the present invention, the composition for topical application to the skin for reducing desmoglein is a pharmaceutical product.
本発明によれば、デスモグレインを減少させる新規な技術を提供することができる。 The present invention provides a new technology for reducing desmogleins.
本発明のデスモグレインの減少剤は、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を有効成分とする。
中でも、本発明のデスモグレインの減少剤は、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部抽出物を有効成分とすることが好ましい。
The desmoglein reducing agent of the present invention contains an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) as an active ingredient.
Among these, it is preferable that the desmoglein reducing agent of the present invention contains an extract of the aerial part of Wild Thyme (T. serpyllum) as an active ingredient.
ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物は、植物原料を扱う会社より販売されている市販のヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を購入し、使用することができる。 For the extract of Wild Thyme, T. serpyllum, a commercially available extract of Wild Thyme, T. serpyllum, which is sold by a company that handles plant materials, is purchased and used. be able to.
また、自生又は生育されたウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）を抽出することで、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を作製することができる。
ここで、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部を抽出することで、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を作製することが望ましい。
Furthermore, an extract of Wild Thyme, T. serpyllum can be produced by extracting wild Thyme, T. serpyllum.
Here, it is desirable to prepare an extract of Wild Thyme, T. serpyllum, by extracting the aerial part of Wild Thyme, T. serpyllum.
ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出に際し、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部は予め、粉砕あるいは細切して抽出効率を向上させるように加工することが好ましい。 When extracting Wild Thyme (T. serpyllum), it is preferable to process the above-ground parts of Wild Thyme (T. serpyllum) in advance by crushing or shredding them to improve the extraction efficiency.
抽出物は、例えば、次の方法で得ることができる。まず、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部又はその乾燥物１質量部に対して、溶媒を１～３０質量部加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬する。浸漬後、室温まで冷却し、所望により不溶物を除去した後、溶媒を減圧濃縮するなどにより除去する。しかる後、シリカゲルやイオン交換樹脂を充填したカラムクロマトグラフィ－などで分画精製することで、所望の抽出物を得ることができる。 The extract can be obtained, for example, by the following method. First, 1 to 30 parts by mass of a solvent is added to 1 part by mass of the above-ground part of Wild Thyme (T. serpyllum) or its dried material, and the mixture is incubated at room temperature for several days or at a temperature near the boiling point. Soak for several hours. After immersion, the solution is cooled to room temperature, and if desired, insoluble matter is removed, and then the solvent is removed by concentrating under reduced pressure or the like. Thereafter, the desired extract can be obtained by fractionation and purification using column chromatography packed with silica gel or ion exchange resin.
抽出溶媒としては、極性溶媒が好ましく、水、エタノ－ル、イソプロピルアルコ－ル、ブタノ－ルなどのアルコ－ル類、１，３－ブチレングリコール、ポリプロピレングリコ－ルなどの多価アルコ－ル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジエチルエ－テル、テトラヒドロフランなどのエ－テル類から選択される１種乃至は２種以上が好適に例示できる。
中でも、抽出溶媒として１，３－ブチレングリコールを好ましく挙げることができる。
The extraction solvent is preferably a polar solvent, and suitable examples thereof include one or more selected from water, alcohols such as ethanol, isopropyl alcohol, and butanol, polyhydric alcohols such as 1,3-butylene glycol and polypropylene glycol, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, and ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran.
Among these, 1,3-butylene glycol is preferred as the extraction solvent.
本発明のデスモグレイン減少剤におけるヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物の含有量は、好ましくは０．０２質量％以上、より好ましくは０．０５質量％以上、さらに好ましくは０．０８質量％以上、特に好ましくは０．１質量％以上である。
また、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物の含有量は、２質量％以下、好ましくは１．５質量％以下、より好ましくは１．２質量％以下である。
別の実施形態として、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物の含有量は、好ましくは１質量％以下より好ましくは０．５質量％以下、さらに好ましくは０．３質量％以下、特に好ましくは０．２質量％以下である。
The content of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) in the desmoglein-reducing agent of the present invention is preferably 0.02% by mass or more, more preferably 0.05% by mass or more, even more preferably 0.08% by mass or more, and particularly preferably 0.1% by mass or more.
The content of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) is 2% by mass or less, preferably 1.5% by mass or less, and more preferably 1.2% by mass or less.
In another embodiment, the content of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) is preferably 1% by mass or less, more preferably 0.5% by mass or less, even more preferably 0.3% by mass or less, and particularly preferably 0.2% by mass or less.
本発明のデスモグレイン減少剤は、デスモグレイン１を減少対象とすることが好ましい。 The desmoglein reducer of the present invention preferably targets desmoglein 1 for reduction.
本発明のデスモグレイン減少剤は、敏感肌の改善及び／又は予防のために用いられることが好ましい。
ここで、本明細書における「敏感肌」は、外部刺激（乾燥、紫外線、化合物の塗布）抵抗性が低下（皮膚刺激閾値が低下）した肌質をいう。
The desmoglein reducing agent of the present invention is preferably used for improving and/or preventing sensitive skin.
Here, "sensitive skin" in this specification refers to a skin quality with reduced resistance to external stimuli (drying, ultraviolet rays, application of compounds) (lower skin irritation threshold).
より具体的には、本明細書における「敏感肌」は、（１）及び／又は（２）で提起される肌質をいう。 More specifically, "sensitive skin" in this specification refers to the skin types listed in (1) and/or (2).
（１）「医薬品外用剤、化粧品、植物、紫外線、金属などの物質に反応し、皮膚トラブルを起こしやすい肌。また、アレルギー性物質（花粉、香料など）や刺激性物質（アルコールなど）に過敏な肌」
（２）「睡眠不足、過労、生理、季節の変わり目、精神的なストレスなどの状況下で、刺激物に対して一時的に皮膚トラブルを起こしやすくなる肌。」
(1) "Skin that reacts to substances such as topical medicines, cosmetics, plants, ultraviolet rays, and metals and is prone to skin problems. Also, skin that is hypersensitive to allergens (pollen, fragrances, etc.) and irritants (alcohol, etc.)."
(2) "Skin that is temporarily more susceptible to skin problems due to lack of sleep, overwork, menstruation, seasonal changes, mental stress, etc."
また、本明細書における「敏感肌の改善及び／又は予防のため」は、外部刺激抵抗性が低下（皮膚刺激閾値が低下）した肌質の改善、及び／又は、肌質における外部刺激抵抗性の低下（皮膚刺激閾値の低下）の予防を指す。 In addition, in this specification, "for the improvement and/or prevention of sensitive skin" refers to the improvement of skin quality with reduced resistance to external stimuli (reduced skin irritation threshold) and/or the prevention of reduced resistance to external stimuli in skin quality (reduced skin irritation threshold).
また、本発明のデスモグレイン減少剤は、ヒト表皮角化細胞の細胞間接着抑制のために用いられることが好ましい。
なお、本明細書において、「細胞間接着」の語は、デスモゾーム蛋白質（デスモグレインを含むたんぱく質群）の増加による角層接着機能異常（細胞接着性の亢進により角層の重層化が進むこと）をいう（要すれば、特許４１９７１９４号、特許第４００２６３５号 参照）。
また、本明細書において、「細胞間接着抑制」の概念は、細胞間接着の予防又は改善の何れも含む。
Furthermore, the desmoglein reducing agent of the present invention is preferably used to suppress intercellular adhesion of human epidermal keratinocytes.
In this specification, the term "cell-to-cell adhesion" refers to an abnormality in the stratum corneum adhesion function due to an increase in desmosomal proteins (a group of proteins including desmoglein) (progressing stratification of the stratum corneum due to increased cell adhesion). (If necessary, refer to Patent No. 4197194 and Patent No. 4002635).
Furthermore, in this specification, the concept of "inhibiting cell-cell adhesion" includes both prevention and improvement of cell-cell adhesion.
ここで、ヒト表皮角化細胞の細胞間接着が抑制されることで、角層の重層化が抑制され、角層重層剥離を抑制する作用を得ることができる。
すなわち、本願発明のデスモグレイン減少剤は、角層重層剥離の予防、又は改善のために用いることができる。
なお、本明細書において、「角層重層剥離」とは、角層が複数枚重なった状態で皮膚表面から剥がれ落ちることをいう。皮膚が角層重層剥離する状態か否かは、テープストリッピング法により角層を採取し、採取した角層を染色して観察することで確認することができる。
Here, by suppressing intercellular adhesion of human epidermal keratinocytes, stratification of the stratum corneum is suppressed, and an effect of suppressing delamination of the stratum corneum can be obtained.
That is, the desmoglein reducing agent of the present invention can be used to prevent or improve stratum corneum exfoliation.
In this specification, "stratum corneum layer exfoliation" refers to peeling off from the skin surface in a plurality of overlapping layers of the stratum corneum. Whether or not the skin is in a state where the stratum corneum layer is exfoliated can be confirmed by collecting the stratum corneum using a tape stripping method, staining the collected stratum corneum, and observing it.
また、後述する実施例に示すように、肌の明度の低い箇所では、デスモグレイン１が多く存在する。ここで、肌の明度の低下は、角層の重層化によるものと考えられる。
上記知見に鑑みると、本発明の有効成分によりデスモグレインを減少させることで、肌の明度改善作用を得ることができる。
すなわち、本発明の有効成分は、肌の明度改善剤としても、使用することができる。
ここで、本明細書において、「肌の明度改善」は、正常状態の肌とデスモグレインの過剰存在により明度の低下した肌との間における、明度の差が少なくなることを指す。
Furthermore, as shown in the examples described later, a large amount of desmoglein 1 exists in areas where the skin brightness is low. Here, the decrease in skin brightness is considered to be due to stratification of the stratum corneum.
In view of the above findings, by reducing desmoglein with the active ingredient of the present invention, an effect of improving skin brightness can be obtained.
That is, the active ingredient of the present invention can also be used as a skin brightness improving agent.
Here, in this specification, "skin brightness improvement" refers to a reduction in the difference in brightness between skin in a normal state and skin whose brightness has decreased due to the excessive presence of desmoglein.
また、後述する実施例に示すように、本発明の有効成分によれば、より透明感のある肌状態を得ることができる。すなわち、本発明の有効成分は、肌の透明感向上剤としても使用できる。 Further, as shown in the Examples described below, the active ingredients of the present invention can provide a more transparent skin condition. That is, the active ingredient of the present invention can also be used as an agent for improving skin clarity.
また、後述する実施例に示すように、肌の硬度が高い箇所では、デスモグレイン１が多く存在する。ここで、肌の硬さの要因は、角層の重層化によるものと考えられる。
上記知見に基づくと、デスモグレインを減少させることにより、肌が柔らかくなる。
つまり、本発明の有効成分によりデスモグレインを減少させることで、肌が柔らかくなる効果を得られる。すなわち、本発明の有効成分は、肌の軟化剤としても、使用できる。
Furthermore, as shown in the Examples described later, areas of high skin hardness contain a large amount of desmoglein 1. Here, the cause of skin hardness is thought to be the stratification of the stratum corneum.
Based on the above findings, reducing desmoglein makes the skin softer.
In other words, the active ingredient of the present invention can reduce desmoglein, thereby softening the skin, and therefore the active ingredient of the present invention can also be used as a skin softener.
ここで、肌が柔らかくなることにより、他の薬剤成分の浸透をより効率的に行うことができる。そのため、本発明の有効成分によりデスモグレインを減少させることで、美白剤といった薬効成分をより効率よく肌に浸透させる効果を得られる。
すなわち、本発明の有効成分は、肌への薬効成分浸透補助剤としても、使用できる。
Here, by softening the skin, other medicinal ingredients can penetrate more efficiently, and therefore by reducing desmoglein with the active ingredient of the present invention, it is possible to obtain the effect of allowing medicinal ingredients such as whitening agents to penetrate the skin more efficiently.
That is, the active ingredient of the present invention can also be used as an agent for aiding the penetration of medicinal ingredients into the skin.
特に、本発明の有効成分は、美白剤と併用するための、美白成分浸透補助剤として使用することが好ましい。 In particular, the active ingredient of the present invention is preferably used as a skin whitening component penetration aid for use in combination with a whitening agent.
本発明においては、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と１，３－ブチレングリコールとを組み合わせて用いることが好ましい。
ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と、１，３－ブチレングリコールとを組み合わせることで、より効率よく、デスモグレインを減少させることができる。
In the present invention, it is preferable to use an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) in combination with 1,3-butylene glycol.
Desmoglein can be reduced more efficiently by combining an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) with 1,3-butylene glycol.
本発明のデスモグレイン減少剤における１，３－ブチレングリコールの含有量は、好ましくは２０質量％以上、さらに好ましくは５０質量％以上である。
また、本発明のデスモグレイン減少剤における１，３－ブチレングリコールの含有量は、７０質量％以下、好ましくは５０質量％以下である。
The content of 1,3-butylene glycol in the desmoglein-reducing agent of the present invention is preferably 20% by mass or more, and more preferably 50% by mass or more.
Furthermore, the content of 1,3-butylene glycol in the desmoglein reducing agent of the present invention is 70% by mass or less, preferably 50% by mass or less.
本発明のデスモグレイン減少剤におけるヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と、１，３－ブチレングリコールの含有比は、好ましくは、１：２０～１：８０、より好ましくは１：５０～１：７０である。 The ratio of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) to 1,3-butylene glycol in the desmoglein reducing agent of the present invention is preferably 1:20 to 1:80, more preferably 1:50 to 1:70.
ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と、１，３－ブチレングリコールの含有量を上記範囲とすることで、より効率よく、デスモグレインを減少させることができる。 Desmoglein can be reduced more efficiently by setting the contents of Wild Thyme (T. serpyllum) extract and 1,3-butylene glycol within the above ranges.
本発明のデスモグレイン減少剤は、皮膚外用組成物又は経口用組成物の形態とすることができる。
中でも、本発明のデスモグレイン減少剤は、皮膚外用組成物の形態とすることが好ましい。
The desmoglein reducing agent of the present invention can be in the form of a composition for external use on the skin or a composition for oral use.
Among these, the desmoglein reducing agent of the present invention is preferably in the form of a composition for external use on the skin.
皮膚外用組成物としては化粧料、医薬品などが好適に例示できる。 Suitable examples of compositions for external use on the skin include cosmetics and pharmaceuticals.
中でも、継続的に使用できる化粧料の形態とすることが好ましく、例えば化粧水、乳液、美容液、クリーム、ジェル、サンケア品等の形態とすることができる。 In particular, it is preferable for the product to be in the form of a cosmetic product that can be used continuously, such as a lotion, milky lotion, serum, cream, gel, sun care product, etc.
皮膚外用組成物におけるヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物の含有量は、０．０２質量％以上、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上である。
また、皮膚外用組成物におけるヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物の含有量は、２質量％以下、好ましくは１．５質量％以下、より好ましくは１．２質量％以下である。
また、ヨウシュイブキジャコウソウの抽出物の含有量は、好ましくは１質量％以下、より好ましくは０．５質量％以下、さらに好ましくは０．３質量％以下、特に好ましくは０．２質量％以下である。
The content of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) in the composition for external skin application is 0.02% by mass or more, preferably 0.05% by mass or more, and more preferably 0.1% by mass or more.
The content of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) in the composition for external skin application is 2% by mass or less, preferably 1.5% by mass or less, and more preferably 1.2% by mass or less.
The content of the extract of Thymus vulgare is preferably 1 mass % or less, more preferably 0.5 mass % or less, even more preferably 0.3 mass % or less, and particularly preferably 0.2 mass % or less.
皮膚外用組成物における１，３－ブチレングリコールの含有量は、好ましくは２０質量％以上、さらに好ましくは５０質量％以上である。
また、皮膚外用組成物における１，３－ブチレングリコールの含有量は、７０質量％以下、好ましくは５０質量％以下である。
別の実施形態では、皮膚外用組成物における１，３－ブチレングリコールの含有量は、好ましくは０．５質量％以上であり、より好ましくは１質量％以上であり、さらに好ましくは３質量％以上である。
また、皮膚外用組成物における１，３－ブチレングリコールの含有量は、好ましくは２０質量％以下であり、より好ましくは１５質量％以下であり、さらに好ましくは１０質量％以下であり、特に好ましくは７質量％以下である。
The content of 1,3-butylene glycol in the composition for external use on skin is preferably 20% by mass or more, and more preferably 50% by mass or more.
The content of 1,3-butylene glycol in the composition for external use on skin is 70% by mass or less, preferably 50% by mass or less.
In another embodiment, the content of 1,3-butylene glycol in the composition for external use on skin is preferably 0.5% by mass or more, more preferably 1% by mass or more, and even more preferably 3% by mass or more.
Furthermore, the content of 1,3-butylene glycol in the composition for external use on skin is preferably 20% by mass or less, more preferably 15% by mass or less, even more preferably 10% by mass or less, and particularly preferably 7% by mass or less.
ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と、１，３－ブチレングリコールの含有量を上記範囲とすることで、より効果的に、デスモグレインを減少することができる。 Desmoglein can be more effectively reduced by setting the contents of Wild Thyme (T. serpyllum) extract and 1,3-butylene glycol within the above ranges.
皮膚外用組成物の形態として提供する場合、その組成も特に限定されず、本発明の効果を損ねない限度において、通常使用される任意成分を含有することもできる。このような任意成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボカド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリスチルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール等；イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ－２－エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ－２－エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ－２－ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ－２－エチルヘキサン酸グリセリン、トリ－２－エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ－２－エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類等の油剤類；脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２－ココイル－２－イミダゾリニウムヒドロキサイド－１－カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ－ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ－グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２－オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２－デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレングリコール、グリセリン、エリスリトール、ソルビトール、マルチトール、プロピレングリコール、２，４－ヘキサンジオール等の多価アルコール類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収剤；桂皮酸系紫外線吸収剤；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２－（２'－ヒドロキシ－５'－ｔ－オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、４－メトキシ－４'－ｔ－ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類などが好ましく例示できる。 When the composition is provided in the form of a skin topical composition, the composition is not particularly limited, and it may contain any optional ingredient that is normally used, provided that the effect of the present invention is not impaired. Examples of such optional ingredients include oils and waxes such as macadamia nut oil, avocado oil, corn oil, olive oil, rapeseed oil, sesame oil, castor oil, safflower oil, cottonseed oil, jojoba oil, coconut oil, palm oil, liquid lanolin, hydrogenated coconut oil, hydrogenated oil, Japan wax, hydrogenated castor oil, beeswax, candelilla wax, carnauba wax, Japanese laurel wax, lanolin, reduced lanolin, hard lanolin, and jojoba wax; liquid paraffin, squalane, pristane, ozokerite, and paraffin. Hydrocarbons such as oleic acid, isostearic acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, behenic acid, undecylenic acid, and the like; higher fatty acids such as cetyl alcohol, stearyl alcohol, isostearyl alcohol, behenyl alcohol, octyldodecanol, myristyl alcohol, cetostearyl alcohol, and the like; cetyl isooctanoate, isopropyl myristate, Synthetic ester oils such as hexyldecyl isostearate, diisopropyl adipate, di-2-ethylhexyl sebacate, cetyl lactate, diisostearyl malate, ethylene glycol di-2-ethylhexanoate, neopentyl glycol dicaprate, glycerin di-2-heptylundecanoate, glycerin tri-2-ethylhexanoate, trimethylolpropane tri-2-ethylhexanoate, trimethylolpropane triisostearate, and pentane erythritol tetra-2-ethylhexanoate; anionic surfactants such as fatty acid soaps (sodium laurate, sodium palmitate, etc.), potassium lauryl sulfate, and alkyl sulfate triethanolamine ether; cationic surfactants such as stearyl trimethylammonium chloride, benzalkonium chloride, and laurylamine oxide; imidazoline-based amphoteric surfactants (2-cocoyl-2-imidazolinium hydroxide-1-carboxyethyloxy 2-sodium salts, etc.), betaine surfactants (alkyl betaines, amido betaines, sulfobetaines, etc.), amphoteric surfactants such as acyl methyl taurine; sorbitan fatty acid esters (sorbitan monostearate, sorbitan sesquioleate, etc.), glycerin fatty acids (glycerin monostearate, etc.), propylene glycol fatty acid esters (propylene glycol monostearate, etc.), hydrogenated castor oil derivatives, glycerin alkyl ethers, POE sorbitan fatty acid esters (POE sorbitan monooleate, polyoxyethylene sorbitan monostearate, etc.), POE sorbitan fatty acid esters (POE-sorbitan monolaurate, etc.), POE glycerin fatty acid esters (POE-glycerin monoisostearate, etc.), POE fatty acid esters (polyethylene glycol monooleate, POE distearate, etc.), POE alkyl ethers (POE 2-octyldodecyl ether, etc.), POE alkyl phenyl ethers nonionic surfactants such as POE nonylphenyl ether, Pluronic types, POE-POP alkyl ethers (POE-POP 2-decyltetradecyl ether, etc.), Tetronics, POE castor oil/hydrogenated castor oil derivatives (POE castor oil, POE hydrogenated castor oil, etc.), sucrose fatty acid esters, and alkyl glucosides; polyethylene glycol, glycerin, erythritol, sorbitol, maltitol, propylene glycol, 2,4-hexanediol, etc. Preferred examples include polyhydric alcohols such as ol; moisturizing ingredients such as sodium pyrrolidone carboxylate, lactic acid, and sodium lactate; para-aminobenzoic acid-based UV absorbers; anthranilic acid-based UV absorbers; salicylic acid-based UV absorbers; cinnamic acid-based UV absorbers; benzophenone-based UV absorbers; sugar-based UV absorbers; and UV absorbers such as 2-(2'-hydroxy-5'-t-octylphenyl)benzotriazole and 4-methoxy-4'-t-butyldibenzoylmethane.
経口組成物とする場合、本発明の有効成分を含む食品用組成物とすることが好ましい。
具体的には、一般食品、錠剤、顆粒剤、ドリンク剤等の剤形を有するサプリメントの形態とすることができる。
When the composition is prepared as an oral composition, it is preferable to prepare a food composition containing the active ingredient of the present invention.
Specifically, the composition may be in the form of a supplement having a dosage form such as a general food, tablet, granule, or drink.
ここで、経口組成物におけるヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物の含有量、及び含有量比については、前述の皮膚外用組成物の好ましい実施の形態の記載を準用することができる。 Here, regarding the content and content ratio of the extract of Wild Thyme (T. serpyllum) in the oral composition, the description of the preferred embodiment of the skin external composition described above may be applied mutatis mutandis. Can be done.
また、経口組成物とする場合、本発明の効果を損なわない範囲において、任意成分を適宜配合してもよい。 In addition, when preparing an oral composition, optional ingredients may be added as appropriate within a range that does not impair the effects of the present invention.
また、本発明は、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を含む組成物と、１，３－ブチレングリコールを含む組成物とを含むキットの形態とすることもできる。
ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を含む組成物と、１，３－ブチレングリコールを含む組成物とを含むキットにおける、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を含む組成物と、１，３－ブチレングリコールを含む組成物とを混合したときの各有効成分の含有量は、前述の事項を適用することができる。
The present invention may also be in the form of a kit comprising a composition containing an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) and a composition containing 1,3-butylene glycol.
In a kit including a composition containing an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) and a composition containing 1,3-butylene glycol, the contents of the active ingredients when the composition containing an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) and the composition containing 1,3-butylene glycol are mixed can be determined in the above-mentioned manner.
また、本発明は、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を皮膚に適用することを特徴とする、皮膚上のデスモグレイン調整方法とすることもできる。
本発明に依れば、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物を皮膚に適用することで、敏感肌の予防又は改善をすることができる。
The present invention can also be a method for adjusting desmoglein on the skin, which comprises applying an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) to the skin.
According to the present invention, sensitive skin can be prevented or improved by applying an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) to the skin.
ここで、本発明の皮膚上のデスモグレイン調整方法は非治療的方法であり、好ましくは美容方法、さらに好ましくは皮膚の美容方法である。 Here, the method for adjusting desmoglein on the skin of the present invention is a non-therapeutic method, preferably a cosmetic method, more preferably a skin cosmetic method.
また、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の抽出物と、１，３－ブチレングリコールとを皮膚に適用し上述のデスモグレイン調整をすることにより、敏感肌の予防又は改善をすることができる。 In addition, by applying an extract of Wild Thyme (T. serpyllum) and 1,3-butylene glycol to the skin and adjusting desmoglein as described above, sensitive skin can be prevented or improved. Can be done.
なお、本発明の皮膚上のデスモグレイン調整方法における好ましい実施の形態には、前述した内容を適用することができる。 The above-mentioned contents can be applied to the preferred embodiment of the method for adjusting desmoglein on the skin of the present invention.
［実施例１］デスモグレイン減少効果の測定
以下、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部抽出物のデスモグレイン減少能を調べた。
[Example 1] Measurement of desmoglein reducing effect The desmoglein reducing ability of the above-ground extract of Wild Thyme (T. serpyllum) was investigated below.
＜角層細胞試料の調製工程＞
ヒト前腕外側より、セロハンテープで採取した角層を、スライドガラス（「ＭＡＳコート」、松浪硝子工業株式会社製）に転写し、当該スライドガラスをキシレンに一晩浸漬した。
次いで、当該スライドガラスをキシレンで１０分間、２回洗浄した後、ＰＢＳで洗浄し、角層細胞試料を調製した。
<Preparation process of stratum corneum cell sample>
The stratum corneum collected from the outside of a human forearm with cellophane tape was transferred onto a glass slide ("MAS coat", manufactured by Matsunami Glass Industries Co., Ltd.), and the slide glass was immersed in xylene overnight.
Next, the slide glass was washed twice with xylene for 10 minutes, and then washed with PBS to prepare a stratum corneum cell sample.
＜被験試料、及び対照試料の調製＞
ワイルドタイム抽出液（ワイルドタイムエキス 一丸ファルコス社 製、ヨウシュイブキジャコウソウ（Ｗｉｌｄ Ｔｈｙｍｅ，Ｔ．ｓｅｒｐｙｌｌｕｍ）の地上部抽出物）を、それぞれ濃度が０．１質量％、０．０５質量％、０．０２５質量％、０．０１２５質量％となるようにＰＢＳで希釈し、被験試料を得た。
<Preparation of test samples and control samples>
Wild thyme extract (Wild Thyme Extract, manufactured by Ichimaru Falcos Co., Ltd., aboveground extract of Wild Thyme, T. serpyllum) was prepared at a concentration of 0.1% by mass, 0.05% by mass, and 0% by mass, respectively. A test sample was obtained by diluting the sample with PBS to a concentration of 0.025% by mass and 0.0125% by mass.
＜測定用試料の調製＞
前述の被験試料に、角層細胞を一晩浸漬し、実施例１～４の測定用試料を得た。
また、参考例（コントロール）として、上述の被験試料に浸漬させない角層細胞を用意した。
<Preparation of measurement sample>
Corner layer cells were immersed in the above-mentioned test sample overnight to obtain measurement samples of Examples 1 to 4.
In addition, as a reference example (control), stratum corneum cells that were not immersed in the above-mentioned test sample were prepared.
＜免疫染色試験＞
測定用試料をＰＢＳで洗浄後、４％ＰＦＡ・リン酸緩衝液中、室温で１５分間インキュベートした。インキュベート後の測定用試料をＰＢＳで洗浄し、２０％ブロックエース（ＤＳバイオファーマメディカル社製）水溶液中、室温条件下で、１時間インキュベートした。
その後、一次抗体（Ａｎｔｉ－Ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ １，Ｍｏｕｓｅ－Ｍｏｎｏ）を加え、湿潤箱中、室温条件下で、２時間インキュベートした。
<Immunostaining test>
After washing the measurement sample with PBS, it was incubated in 4% PFA/phosphate buffer at room temperature for 15 minutes. After the incubation, the measurement sample was washed with PBS and incubated in a 20% Block Ace (manufactured by DS Biopharma Medical) aqueous solution at room temperature for 1 hour.
Thereafter, a primary antibody (Anti-Desmoglein 1, Mouse-Mono) was added and incubated for 2 hours at room temperature in a humid chamber.
各測定用試料をＰＢＳで５分間、３回洗浄した後、二次抗体（Ａｌｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ＠４８８ Ｇｏａｔ Ａｎｔｉ－ｍｏｕｃｅ ＩｇＧ）、を加え、湿潤箱中、室温で１時間インキュベートした。
それぞれの測定用試料をＰＢＳで５分間、３回洗浄し、蒸留水で２回洗浄した後、Ｆｌｕｏｒｏｍｏｕｔ－Ｇ（ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｉｏｔｅｃｈ社製）を用いて封入した。
Each measurement sample was washed three times with PBS for 5 minutes each, and then a secondary antibody (Allexa Fluor@488 Goat Anti-mouse IgG) was added and incubated in a humidified box at room temperature for 1 hour.
Each measurement sample was washed three times with PBS for 5 minutes each, washed twice with distilled water, and then sealed using Fluoromout-G (manufactured by Southern Biotech).
その後、測定用試料を、共焦点レーザー顕微鏡を用いて、それぞれ解析用画像を撮影し、蛍光（染色）の確認を行った。結果を図１に示す。 Thereafter, images for analysis were taken of each measurement sample using a confocal laser microscope, and fluorescence (staining) was confirmed. The results are shown in Figure 1.
併せて、実施例１～４の測定用試料の蛍光（染色）部分を、コントロールの蛍光（染色）部分の面積を１００％として、算出した。結果を表１、図２に示す。なお、図２において、＊は、ｐ＜０．０５であり、＊＊＊は、ｐ＜０．００１である。 In addition, the fluorescent (stained) areas of the measurement samples in Examples 1 to 4 were calculated by taking the area of the fluorescent (stained) areas of the control as 100%. The results are shown in Table 1 and Figure 2. In Figure 2, * means p<0.05, and *** means p<0.001.
図１及び図２に示す通り、ワイルドタイム抽出液を添加した測定用試料（実施例１～４）は、ワイルドタイム抽出液を添加していない試料（参考例１）に比して、デスモグレイン１の発現量が減少していることがわかった。
この結果から、ワイルドタイム抽出液は、デスモグレイン１の量を減少させる作用を有することがわかった。
As shown in Figures 1 and 2, it was found that the expression level of desmoglein 1 was reduced in the measurement samples (Examples 1 to 4) to which wild thyme extract was added, compared to the sample (Reference Example 1) to which wild thyme extract was not added.
These results demonstrate that wild thyme extract has the effect of reducing the amount of desmoglein 1.
［実施例２］肌の明度及び／又は肌の硬度とデスモグレイン１の存在量の関係性
以下、肌の明度の相違とデスモグレイン１の存在量の関係性及び、デスモグレイン１の存在量と肌の硬度の関係性を裏付ける試験結果を示す。
[Example 2] Relationship between skin brightness and/or skin hardness and the amount of desmoglein 1 The relationship between the difference in skin brightness and the amount of desmoglein 1, and the amount of desmoglein 1 present Test results supporting the relationship between skin hardness are shown.
（１）被験者及び測定部位
本実施例では、４０歳から５２歳の女性を２０名を被験者とした。
そして、本実施例では、被験者顔面における、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）と正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）を測定部位として選定した。
(1) Subjects and Measurement Sites In this example, 20 women aged between 40 and 52 years old were used as subjects.
In this embodiment, the areas on the subject's face where a decrease in brightness was visually confirmed (the dark areas, see area A in the figure) and an area in a normal state (see area B in the figure) were selected as measurement areas.
（２）測定
（２－１）L＊値、a＊値、b＊値測定
上記の測定部位に分光光度計を当て、各部位５回ずつ測定に供することにより、L＊値、a＊値、b＊値を測定した。
結果を、図３～図５に示す。
(2) Measurement (2-1) Measurement of L * value, a * value, and b * value A spectrophotometer was placed on the above measurement sites, and the L * value, a * value, and b * value were measured by measuring each site five times.
The results are shown in Figures 3 to 5.
L＊値に関し、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、有意に低い値を示した。すなわち、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、暗いことが確認できた。 Regarding the L * value, the areas where a decrease in brightness was visually confirmed (the dark areas, see area A in the figure) showed significantly lower values than the areas in a normal state (see area B in the figure). In other words, the areas where a decrease in brightness was visually confirmed (the dark areas, see area A in the figure) were confirmed to be darker than the areas in a normal state (see area B in the figure).
a＊値に関し、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、有意に高い値を示した。すなわち、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、赤みが強いことが確認できた。 Regarding the a * value, the areas where a decrease in brightness was visually confirmed (blackish areas, see area A in the figure) showed significantly higher values than the areas in a normal state (see area B in the figure). In other words, the areas where a decrease in brightness was visually confirmed (blackish areas, see area A in the figure) were confirmed to be redder than the areas in a normal state (see area B in the figure).
b＊値に関し、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、有意に高い値を示した。すなわち、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、黄みが強いことが確認できた。 Regarding the b * value, the areas where it was confirmed by visual inspection that the brightness had decreased (the dark areas, see area A in the figure) showed significantly higher values than the areas in the normal state (see area B in the figure). In other words, it was confirmed that the areas where it was confirmed by visual inspection that the brightness had decreased (the dark areas, see area A in the figure) were more yellowish than the areas in the normal state (see area B in the figure).
（２－２）硬度測定
上記（２－１）の試験に供した各測定部位にインデントメーターを押し当て５回ずつ測定に供することにより、硬度を測定した。
結果を、図６に示す。
(2-2) Hardness Measurement Hardness was measured by pressing an indentation meter against each measurement site subjected to the test in (2-1) above and performing the measurement five times.
The results are shown in FIG.
硬度に関し、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、有意に低い値を示した。すなわち、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、硬いことが確認できた。 Regarding hardness, the areas where it was confirmed that the brightness had decreased by visual inspection (darkish area, see area A in the figure) were significantly lower than the areas in a normal state (see area B in the figure). The value was shown. In other words, the area where the brightness was visually confirmed to have decreased (darkish area, see area A in the figure) was confirmed to be harder than the area in a normal state (see area B in the figure). did it.
（２－３）デスモグレイン１（Ｄｓｇ１）染色
上記（２－１）、（２－２）の試験に供した各測定部位の角層細胞をテープストリッピング法で採取し、スライドガラスに貼付した。
(2-3) Desmoglein 1 (Dsg1) staining The stratum corneum cells from each measurement site used in the tests (2-1) and (2-2) above were collected by tape stripping and pasted on a glass slide.
角層細胞を貼付したスライドガラスを、キシレンに一晩浸漬させた。
浸漬後、洗浄、風乾させたのち、４％パラホルムアルデヒド・リン酸緩衝液中で室温、条件下、１５分間静置した。
The glass slide with the stratum corneum cells attached was immersed in xylene overnight.
After immersion, the sample was washed, air-dried, and then allowed to stand for 15 minutes at room temperature in a 4% paraformaldehyde phosphate buffer.
１５分後、角層細胞をＰＢＳで洗浄し、０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ（ナカライテスク社製）／ＰＢＳ溶液に、室温条件下、５分間浸漬させた。 After 15 minutes, the stratum corneum cells were washed with PBS and immersed in a 0.5% TritonX (Nacalai Tesque)/PBS solution at room temperature for 5 minutes.
浸漬後、洗浄し、ブロックエース水溶液中（ＤＳバイオファーマメディカル ＵＫ－Ｂ８０）、室温条件下、１時間静置した。 After immersion, the sample was washed and then left to stand in an aqueous solution of Block Ace (DS Biopharma Medical UK-B80) at room temperature for 1 hour.
静置後、リキッドブロッカー（大道産業社 製）で枠付けし、一次抗体を加え、湿潤箱中、室温条件下、２時間静置した。
一次抗体として、Ａｎｔｉ Ｄｅｓｍｏｇｌｅｉｎ １，Ｍｏｕｓｅ Ｍｏｎｏ(Ｄｓｇ１ Ｐ２３) Ｐｒｏｇｅｎ，６５１１１０ 原液（ＩｇＧ 濃度：１０－１５ｇ／ｍＬ）を使用した。
After standing, the plate was framed with Liquid Blocker (manufactured by Daido Sangyo Co., Ltd.), a primary antibody was added, and the plate was left standing in a humid box at room temperature for 2 hours.
As the primary antibody, Anti Desmoglein 1, Mouse Mono (Dsg1 P23) Progen, 651110 stock solution (IgG concentration: 10-15 g/mL) was used.
静置後、ＰＢＳを用い洗浄し、二次抗体を加え、湿潤箱中、室温条件下、１時間静置した。
二次抗体として、Ａｌｌｅ ｘａ Ｆｌｕｏｒ＠４８８ Ｇｏａｔ Ａｎｔｉ ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ａ １１００１ ＰＢＳ２００倍希釈溶液を使用した。
After standing, the plate was washed with PBS, a secondary antibody was added, and the plate was left standing in a humidified box at room temperature for 1 hour.
As the secondary antibody, Allexa Fluor@488 Goat Anti-mouse IgG Invitrogen, A11001, 200-fold diluted solution in PBS was used.
静置後洗浄し、Ｆｌｕｏｒｏｍｏｕｔ－Ｇ（ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｉｏｔｅｃｈ 社製）で封入し、室温で３０分乾燥させた。 After leaving it to stand, it was washed, sealed with Fluoromout-G (Southern Biotech), and dried at room temperature for 30 minutes.
乾燥後、マニキュアでカバーガラスを固定し、乾燥させたのち、（撮影）共焦点レーザー顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ Ａ１）、×２０での観察に供した。
結果を、図７、図８に示す。
After drying, the cover glass was fixed with nail polish, dried, and then (photographed) observed using a confocal laser microscope (Nikon A1) at ×20.
The results are shown in FIGS. 7 and 8.
デスモグレイン１（Ｄｓｇ１）量に関し、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、有意に高い値を示した。すなわち、目視により明度の低下していることが確認できた部位（黒みがかった部分、図中部位Ａ 参照）は、正常状態の部位（図中部位Ｂ 参照）に比して、デスモグレイン１（Ｄｓｇ１）量が多いことが確認できた。 Regarding the amount of desmoglein 1 (Dsg1), the areas where a decrease in brightness was confirmed by visual inspection (the dark areas, see area A in the figure) showed significantly higher values than the areas in a normal state (see area B in the figure). In other words, it was confirmed that the areas where a decrease in brightness was confirmed by visual inspection (the dark areas, see area A in the figure) had a higher amount of desmoglein 1 (Dsg1) than the areas in a normal state (see area B in the figure).
（３）考察
図３～図８に示すように、肌の明度の低い箇所では、デスモグレイン１が多く存在することが分かった。ここで、肌の明度の低下は、肌のｐＨが低くデスモグレイン１を分解するセリンプロテアーゼの活性が低いために、角層の重なりが密になったこと（角層の重層化）によるものと考えられる。
(3) Discussion As shown in FIGS. 3 to 8, it was found that desmoglein 1 was present in large amounts in areas with low skin brightness. Here, the decrease in skin brightness is thought to be due to the dense overlapping of the stratum corneum (stratification of the stratum corneum) due to the low skin pH and low activity of serine protease that degrades desmoglein 1. Conceivable.
そして、前述の通り、本願発明の有効成分はデスモグレイン減少作用を奏する。
上記知見に鑑みると、本発明の有効成分は、デスモグレイン１を減少させることによる肌の明度改善作用を奏することがわかった。
As mentioned above, the active ingredient of the present invention exhibits a desmoglein reducing effect.
In view of the above findings, it was found that the active ingredient of the present invention has an effect of improving skin brightness by reducing desmoglein 1.
図３～図８に示すように、肌の硬度が高い箇所では、デスモグレイン１が多く存在するが分かった。ここで、肌の硬さの要因は、肌のｐＨが低くデスモグレイン１を分解するセリンプロテアーゼの活性が低いために、角層の重なりが密になったこと（角層の重層化）によるものと考えられる。 As shown in Figures 3 to 8, it was found that desmoglein 1 is present in large amounts in areas of high skin hardness. Here, the cause of skin hardness is thought to be the dense layering of the stratum corneum (stratification of the stratum corneum) due to the low pH of the skin and low activity of serine protease, which breaks down desmoglein 1.
上記知見に基づくと、デスモグレイン１を減少させることにより、肌が柔らかくなることがわかった。
そして、前述の通り、本願発明の有効成分はデスモグレイン減少作用を奏する。
つまり、本発明の有効成分は、デスモグレイン１を減少させることによる肌の軟化作用を奏することがわかった。
Based on the above findings, it has been found that reducing desmoglein 1 can soften the skin.
As described above, the active ingredient of the present invention has the effect of reducing desmoglein.
In other words, it was found that the active ingredient of the present invention has the effect of softening the skin by reducing desmoglein 1.
［実施例３］ワイルドタイム抽出物を含む組成物のデスモグレイン減少作用の検証
以下、デスモグレイン減少作用を有する成分を含む組成物のデスモグレイン減少能を調べた。
Example 3: Verification of the desmoglein-reducing effect of a composition containing wild thyme extract The desmoglein-reducing ability of a composition containing a component having a desmoglein-reducing effect was examined below.
＜組成物の調製＞
下記表２に示す処方に従って、ワイルドタイム抽出物を含む化粧料（乳液）を調製した。即ち、（イ）、（ロ）、（ハ）の成分をそれぞれ７０℃に加熱し、（ロ）に（ハ）を加えて中和し、これを撹拌しながら（イ）を徐々に加えて乳化し、ホモジナイザーを用いて均質化した後、撹拌しながら冷却し、製造例１の乳液を得た。
<Preparation of Composition>
A cosmetic preparation (lotion) containing wild thyme extract was prepared according to the recipe shown in Table 2 below. That is, the ingredients (a), (b), and (c) were each heated to 70° C., (c) was added to (b) to neutralize it, (a) was gradually added while stirring to emulsify, the mixture was homogenized using a homogenizer, and then cooled while stirring to obtain the lotion of Production Example 1.
（２）被験者及び測定部位
本実施例では、４０歳から５２歳の女性２０名を被験者とした。
そして、本実施例では、被験者顔面における、シミが存在する部位（９２箇所）を測定部位として選定した。
各被験者のシミが存在する部位に、製造例１の乳液を１日２回塗布し、これを１２週間続けた。
(2) Subjects and Measurement Sites In this example, 20 women aged between 40 and 52 years old were used as subjects.
In this embodiment, the areas (92 areas) on the subject's face where blemishes were present were selected as measurement areas.
The emulsion of Preparation Example 1 was applied twice a day to the areas of the skin where blemishes existed on each subject, and this was continued for 12 weeks.
（３）測定
製造例１の乳液の使用前、使用継続６週間経過時点、及び１２週間経過時点において、実施例１の「＜角層細胞試料の調製工程＞」に記載の方法に準拠して、被験者のシミが存在する部位の角層細胞を採取し、角層細胞試料を調製した。次いで、実施例１の「＜免疫染色試験＞」に記載の方法により準拠して、それぞれの角層細胞試料におけるデスモグレイン１を染色し、共焦点レーザー顕微鏡を用いて、製造例１の使用前後の解析用画像を撮影し、蛍光（染色）の確認行った。
(3) Measurement Before using the emulsion of Production Example 1, after 6 weeks of continued use, and after 12 weeks, the emulsion was measured according to the method described in "<Preparation step of stratum corneum cell sample>" of Example 1. Corner layer cells were collected from the subject's site where the stain was present, and a corneum cell sample was prepared. Next, desmoglein 1 in each corneal cell sample was stained according to the method described in "<Immunostaining test>" in Example 1, and the results were stained before and after use in Production Example 1 using a confocal laser microscope. Images for analysis were taken and fluorescence (staining) was confirmed.
解析用画像全体の面積を１００％として、蛍光部分の面積を選出した。結果を表３、表４、及び図９（代表）、図１０、１１に示す。なお、乳液使用１２週間経過後のデータは、シミ部位９３箇所のうち、８０箇所のデータを集計し、同箇所における乳液使用前のデータと比較した。また、図１０において、＊＊はｐ＜０．０１であり、図１１において、＊＊＊はｐ＜０．００１である。 The area of the entire image for analysis was taken as 100%, and the area of the fluorescent portion was selected. The results are shown in Tables 3 and 4, and Figures 9 (representative), 10 and 11. Note that data after 12 weeks of using lotion was compiled from data for 80 out of 93 spots on the skin, and compared with data for the same spots before using lotion. In Figure 10, ** means p<0.01, and in Figure 11, *** means p<0.001.
表３～４、及び図９～１１に示す通り、ワイルドタイム抽出物を含む乳液を継続的に使用することで、シミ部位におけるデスモグレイン１量が有意に減少することが確認できた。 As shown in Tables 3 and 4 and Figures 9 to 11, it was confirmed that the amount of desmoglein 1 in the blemished area was significantly reduced by continuously using a lotion containing wild thyme extract.
本発明は、化粧料に応用できる。
The present invention can be applied to cosmetics.
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