JP7428657B2 - 標的物質の分離方法および定量方法 - Google Patents
標的物質の分離方法および定量方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7428657B2 JP7428657B2 JP2020553228A JP2020553228A JP7428657B2 JP 7428657 B2 JP7428657 B2 JP 7428657B2 JP 2020553228 A JP2020553228 A JP 2020553228A JP 2020553228 A JP2020553228 A JP 2020553228A JP 7428657 B2 JP7428657 B2 JP 7428657B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- target substance
- substance
- receptor
- electrophoresis
- complex
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000013076 target substance Substances 0.000 title claims description 218
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 67
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title description 18
- 238000011002 quantification Methods 0.000 title 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 198
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims description 197
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 150
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 claims description 143
- 230000005389 magnetism Effects 0.000 claims description 23
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 20
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 claims description 13
- 238000001997 free-flow electrophoresis Methods 0.000 claims description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 11
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 6
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 120
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 120
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 76
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 75
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 61
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 35
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 29
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 27
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 27
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 27
- 239000000306 component Substances 0.000 description 26
- 102000011026 Fatty Acid Binding Protein 3 Human genes 0.000 description 25
- 108010062715 Fatty Acid Binding Protein 3 Proteins 0.000 description 25
- 102000030914 Fatty Acid-Binding Human genes 0.000 description 23
- 108091022862 fatty acid binding Proteins 0.000 description 23
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 21
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 20
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 19
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 18
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 16
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 15
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 15
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 14
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 14
- VOUAQYXWVJDEQY-QENPJCQMSA-N 33017-11-7 Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)CCC1 VOUAQYXWVJDEQY-QENPJCQMSA-N 0.000 description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 13
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 13
- 108010075254 C-Peptide Proteins 0.000 description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 12
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 12
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 12
- 229920000642 polymer Chemical class 0.000 description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 11
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 11
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 11
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 11
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 11
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 10
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 10
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 9
- -1 etc. Chemical class 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002585 base Substances 0.000 description 8
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 8
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 7
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N nickel Substances [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 4
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 4
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 4
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010001367 Adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 208000017515 adrenocortical insufficiency Diseases 0.000 description 3
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 3
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 3
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 3
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 3
- 206010000599 Acromegaly Diseases 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 2
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 2
- 102400000667 Brain natriuretic peptide 32 Human genes 0.000 description 2
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 2
- 101800002247 Brain natriuretic peptide 45 Proteins 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010004460 Gastric Inhibitory Polypeptide Proteins 0.000 description 2
- 102100039994 Gastric inhibitory polypeptide Human genes 0.000 description 2
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 description 2
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 2
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 208000013260 Hirata disease Diseases 0.000 description 2
- 206010022472 Insulin autoimmune syndrome Diseases 0.000 description 2
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400001263 NT-proBNP Human genes 0.000 description 2
- 101800001904 NT-proBNP Proteins 0.000 description 2
- 229910052779 Neodymium Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000012503 blood component Substances 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 2
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 2
- 238000005370 electroosmosis Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000003219 hemolytic agent Substances 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 2
- 206010022498 insulinoma Diseases 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 2
- 210000004880 lymph fluid Anatomy 0.000 description 2
- 230000005415 magnetization Effects 0.000 description 2
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- QEFYFXOXNSNQGX-UHFFFAOYSA-N neodymium atom Chemical compound [Nd] QEFYFXOXNSNQGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N nesiritide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N 0.000 description 2
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 2
- 208000021255 pancreatic insulinoma Diseases 0.000 description 2
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 208000028591 pheochromocytoma Diseases 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 201000009395 primary hyperaldosteronism Diseases 0.000 description 2
- 239000011164 primary particle Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012780 transparent material Substances 0.000 description 2
- 229910000859 α-Fe Inorganic materials 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- QLAJNZSPVITUCQ-UHFFFAOYSA-N 1,3,2-dioxathietane 2,2-dioxide Chemical compound O=S1(=O)OCO1 QLAJNZSPVITUCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CFBILACNYSPRPM-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[[1,3-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)propan-2-yl]amino]acetic acid Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OCC(CO)(CO)NCC(O)=O CFBILACNYSPRPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGMADIBCHLQMIP-UHFFFAOYSA-N 2-aminoethanethiol;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCCS OGMADIBCHLQMIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVQFQZZGTZFUNF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-[4-(2-hydroxy-3-sulfonatopropyl)piperazine-1,4-diium-1-yl]propane-1-sulfonate Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CN1CCN(CC(O)CS(O)(=O)=O)CC1 LVQFQZZGTZFUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- INEWUCPYEUEQTN-UHFFFAOYSA-N 3-(cyclohexylamino)-2-hydroxy-1-propanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CNC1CCCCC1 INEWUCPYEUEQTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NUFBIAUZAMHTSP-UHFFFAOYSA-N 3-(n-morpholino)-2-hydroxypropanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CN1CCOCC1 NUFBIAUZAMHTSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 3-[[1,3-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)propan-2-yl]azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound OCC(CO)(CO)NCC(O)CS(O)(=O)=O RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XCBLFURAFHFFJF-UHFFFAOYSA-N 3-[bis(2-hydroxyethyl)azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)CS(O)(=O)=O XCBLFURAFHFFJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGZSVBBLLGZHSF-UHFFFAOYSA-N 4,4-diethylpiperidine Chemical compound CCC1(CC)CCNCC1 DGZSVBBLLGZHSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 239000007991 ACES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000011690 Adiponectin Human genes 0.000 description 1
- 108010076365 Adiponectin Proteins 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108700016232 Arg(2)-Sar(4)- dermorphin (1-4) Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 239000007992 BES buffer Substances 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101000800130 Bos taurus Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- 239000008001 CAPS buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008000 CHES buffer Substances 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000867607 Chlorocebus sabaeus Species 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 108091008102 DNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000006173 Good's buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- OWXMKDGYPWMGEB-UHFFFAOYSA-N HEPPS Chemical compound OCCN1CCN(CCCS(O)(=O)=O)CC1 OWXMKDGYPWMGEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GIZQLVPDAOBAFN-UHFFFAOYSA-N HEPPSO Chemical compound OCCN1CCN(CC(O)CS(O)(=O)=O)CC1 GIZQLVPDAOBAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025255 Haptoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108050005077 Haptoglobin Proteins 0.000 description 1
- 101000799549 Homo sapiens Aspartate aminotransferase, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001289 Manganese-zinc ferrite Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000036675 Myoglobin Human genes 0.000 description 1
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 1
- FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N N,N-bis(2-hydroxyethyl)glycine Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)=O FSVCELGFZIQNCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCS(O)(=O)=O JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910001053 Nickel-zinc ferrite Inorganic materials 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000007994 TES buffer Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000013394 Troponin I Human genes 0.000 description 1
- 108010065729 Troponin I Proteins 0.000 description 1
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 1
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 1
- 208000034953 Twin anemia-polycythemia sequence Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JIYIUPFAJUGHNL-UHFFFAOYSA-N [O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[Mn++].[Mn++].[Mn++].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Zn++].[Zn++] Chemical compound [O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[Mn++].[Mn++].[Mn++].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Zn++].[Zn++] JIYIUPFAJUGHNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910045601 alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000956 alloy Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 229910001566 austenite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007998 bicine buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 150000001615 biotins Chemical class 0.000 description 1
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 238000003935 denaturing gradient gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 125000005414 dithiopyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- YAGKRVSRTSUGEY-UHFFFAOYSA-N ferricyanide Chemical compound [Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] YAGKRVSRTSUGEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N ferrocene Chemical compound [Fe+2].C=1C=C[CH-]C=1.C=1C=C[CH-]C=1 KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000004312 hexamethylene tetramine Substances 0.000 description 1
- 235000010299 hexamethylene tetramine Nutrition 0.000 description 1
- VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N hexamethylenetetramine Chemical compound C1N(C2)CN3CN1CN2C3 VKYKSIONXSXAKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005661 hydrophobic surface Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- YTOVAWUSMUMHIM-UHFFFAOYSA-N iron(2+);5-methylcyclopenta-1,3-diene Chemical compound [Fe+2].C[C-]1C=CC=C1.C[C-]1C=CC=C1 YTOVAWUSMUMHIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N iron(II,III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]O[Fe]=O SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 239000000696 magnetic material Substances 0.000 description 1
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000004226 microchip electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 229910001172 neodymium magnet Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002560 nitrile group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920002776 polycyclohexyl methacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920005553 polystyrene-acrylate Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000003906 pulsed field gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 1
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002910 rare earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N ruthenium(2+) Chemical compound [Ru+2] YAYGSLOSTXKUBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPEVHDGLPIIAGH-UHFFFAOYSA-N ruthenium(3+) Chemical compound [Ru+3] BPEVHDGLPIIAGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Chemical class 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000002336 sorption--desorption measurement Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000000539 two dimensional gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N vanadium Chemical compound [V]#[V] GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
- G01N33/561—Immunoelectrophoresis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
- G01N27/44721—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by optical means
- G01N27/44726—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by optical means using specific dyes, markers or binding molecules
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44756—Apparatus specially adapted therefor
- G01N27/44786—Apparatus specially adapted therefor of the magneto-electrophoresis type
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44756—Apparatus specially adapted therefor
- G01N27/44769—Continuous electrophoresis, i.e. the sample being continuously introduced, e.g. free flow electrophoresis [FFE]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
本開示の第1の形態は、標的物質を含むサンプルおよび前記標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子を用いて標的物質-磁性粒子の複合体を形成し、前記標的物質-磁性粒子の複合体を磁気および電気泳動により分離することを有する、標的物質の分離方法である。
標的物質は、目的(診断しようとする疾患の種類)に応じて、適宜選択される。このため、標的物質としては、特に限定されない。具体的には、インスリン、インスリン前駆体(例えば、C-peptide)、GLP-1(グルカゴン様ペプチド-1)、GIP(グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド)、アディポネクチン、H-FABP(心筋型脂肪酸結合タンパク質)、ミオグロビン、トロポニンI、トロポニンT、BNP(脳性ナトリウム利尿ペプチド)、NT-ProBNP(N末端プロ脳性ナトリウム利尿ペプチド)、脂肪酸結合タンパク質等のタンパク質、ペプチド、糖鎖、核酸、低分子化合物、高分子化合物ならびにこれらの複合体などが挙げられる。中でも、有益性や凡用性などの観点から、標的物質は、タンパク質またはペプチドであることが好ましく、血液や尿などの体液の検査に使用されるタンパク質やペプチド(例えば、インスリン、C-peptideなど)がより好ましい。なお、上記タンパク質またはペプチドは、遊離体、リン酸基、メチル基、アセチル基、糖鎖、脂質、ニトリル基等の修飾を受けた修飾体、酸(例、無機酸、有機酸)や塩基(例、アルカリ金属塩)などとの塩、核酸と結合している核タンパク質など他の物質と結合しているタンパク質またはペプチドを包含する。また、上記タンパク質は、天然由来であっても合成物であってもよい。本明細書において、「タンパク質」は、10kDa以上のポリペプチドを意味し、ペプチドは10kDa未満のポリペプチドを意味する。
本開示に係る磁性粒子(第1レセプター固定磁性粒子)は、標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが(例えば、表面に)固定されてなる。
上記標的物質を含むサンプルを、上記本開示に係る磁性粒子(第1レセプター固定磁性粒子)と混合することによって、第1レセプターを介して標的物質と磁性粒子とが結合して、標的物質-磁性粒子の複合体が形成される。この際の標的物質-磁性粒子の複合体形成条件は、所望の複合体が形成される条件であれば特に制限されない。例えば、標的物質を含むサンプルおよび第1レセプター固定磁性粒子を、緩衝液中で混合する。ここで、緩衝液は、特に限定されず、公知の緩衝液が使用できる。具体的には、例えば、クエン酸、コハク酸、酒石酸、リンゴ酸等の有機酸、及び、その塩類等を含有する溶液等;グリシン、タウリン、アルギニン等のアミノ酸類;塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、ホウ酸、酢酸等の無機酸、及び、その塩類等を含有する溶液等が挙げられる。具体的な泳動用緩衝液としては、例えば、グッドバッファー(トリス-グリシン緩衝液、トリス緩衝液、トリス-トリシン緩衝液、Bis-Tris緩衝液、PIPES緩衝液、トリス-塩酸(Tris-HCl)緩衝液、MOPS緩衝溶液、HEPES緩衝液、PIPES緩衝液、ACES緩衝液、MOPSO緩衝液、BES緩衝液、TES緩衝液、DIPSO緩衝液、TAPSO緩衝液、POPSO緩衝液、HEPPSO緩衝液、EPPS緩衝液、TAPS緩衝液、Bicine緩衝液、CHES緩衝液、CAPSO緩衝液、CAPS緩衝液等)、リン酸緩衝液(PBS)、酢酸緩衝液、炭酸緩衝液、グリシン緩衝液などが挙げられる。上記緩衝液は、1種を単独で使用してもまたは2種以上の混合物の形態で使用してもよい。また、緩衝液は、EDTA、ウシ血清アルブミン(BSA)、カゼイン、ポリエチレングリコール等の安定化剤、Tween、Triton-X等の非イオン界面活性剤などを含んでもよい。緩衝液のpHは、特に制限されず、レセプターが標的物質結合活性を維持する環境下であれば特に制限されない。レセプターの標的物質への結合活性維持能などを考慮すると、通常、中性から弱塩基性付近であることが好ましい。かような観点から、緩衝液のpHは、6.0~9.0、特に好ましくは6.0~8.0であることがより好ましい。混合温度は、好ましくは4~40℃、より好ましくは4~25℃である。また、混合時間は、好ましくは1~72時間、より好ましくは8~24時間である。または、混合時間は、好ましくは1~60分、より好ましくは5~30分である。
このようにして形成された標的物質-磁性粒子の複合体を、磁気および電気泳動により分離する。すなわち、磁気によって標的物質-磁性粒子の複合体に含まれる磁性粒子を所定の位置で捕捉する。このため、複合体を磁気で捕捉しながらまたは捕捉した後に、電気泳動を行うと、複合体は磁気により所定の位置に固定されたまま、複合体以外の成分(例えば、血球等の生体由来の成分)は移動するまたは全く移動しない。ゆえに、本開示の方法によると、標的物質の種類にかかわらず、または検出し難い標的物質であっても、標的物質(標的物質-磁性粒子の複合体)を効率よく分離・回収できる。なお、標的物質-磁性粒子の複合体は、上記(標的物質-磁性粒子の複合体の形成)で得られたように、緩衝液中に含まれた形態であってもよい、または緩衝液から分離した形態であっても、または緩衝液から分離した後別の緩衝液に分散させた状態であってもよい。
本開示の第2の形態は、標的物質を含むサンプルと、前記標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子と、前記標的物質の部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定された標識物質と、を混合して、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物を得、磁気および電気泳動により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を分離した後、前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度を検出することを有する、標的物質量の測定方法である。
本開示に係る標識物質(第2レセプター固定標識物質)は、第1レセプターの認識部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが(例えば、表面に)固定されてなる。ここで、第2レセプターは、特に制限されず、本開示に係る磁性粒子(第1レセプター固定磁性粒子)にて説明したのと同様であるため、ここでは、説明を省略する。なお、第2レセプターは、第1レセプターとは異なる部位を認識する、すなわち、第1レセプター、第2レセプター(例えば、抗体)は、1つの標的物質の異なる部位をそれぞれ認識する。例えば、第1レセプターおよび第2レセプターが脂肪酸結合タンパク質を認識する場合には、Monoclonal mouse anti-human fatty acid binding protein (25)を第1レセプターとして使用し、Monoclonal mouse anti-human fatty acid binding protein (28)を第2レセプターとして使用するなど、異なるレセプター(例えば、抗体)を選択する。
上記標的物質を含むサンプルを、上記本開示に係る磁性粒子(第1レセプター固定磁性粒子)および上記本開示に係る標識物質(第2レセプター固定標識物質)と混合することによって、第1レセプターを介して標的物質と磁性粒子とがおよび第2レセプターを介して標的物質と標識物質とが結合して、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体が形成される。この際の標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体形成条件は、所望の複合体が形成される条件であれば特に制限されない。例えば、標的物質を含むサンプル、第1レセプター固定磁性粒子および第2レセプター固定標識物質を、緩衝液中で混合する。ここで、緩衝液は、特に限定されず、公知の緩衝液が使用できる。具体的には、上記(標的物質-磁性粒子の複合体の形成)の項で例示したのと同様の緩衝液等が挙げられる。また、緩衝液のpHは、特に制限されず、レセプターが標的物質結合活性を維持する環境下であれば特に制限されない。ただし、レセプターが標的物質結合活性低下の抑制などを考慮すると、通常、中性から弱塩基性付近であることが好ましい。かような観点から、緩衝液のpHは、6.0~9.0、特に好ましくは6.0~8.0であることがより好ましい。混合温度は、好ましくは4~40℃、より好ましくは25~37℃である。また、混合時間は、好ましくは1~60分、より好ましくは5~30分である。
このようにして形成された標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物に電気泳動を行い、前記電気泳動中に磁気により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を分離する。すなわち、電気泳動する途中または、電気泳動する前に、磁気によって標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体に存在する磁性粒子を捕捉して、目的とする標的物質(標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体)を回収する。なお、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体は、上記(標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体の形成)で得られたように、緩衝液中に含まれた形態であってもよい、または緩衝液から分離した形態であっても、または緩衝液から分離した後、別の緩衝液に分散させた状態であってもよい。ここで、電気泳動は、特に制限されず、公知の電気泳動が使用できる。具体的には、上記(標的物質-磁性粒子の複合体の分離)の項で説明したのと同様であるため、ここでは説明を省略する。
上記にて分離された標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度を検出することにより、目的とする標的物質の量を測定する。なお、上記分離工程では、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体に加えて、標的物質が磁性粒子のみに非特異的に結合した標的物質-磁性粒子の複合体や、未反応の磁性粒子も磁石に捕捉される。本実施形態では、標識物質として、標的物質に特異的に結合する抗体を用いる。このため、未反応の磁性粒子には標的物質が存在しないため、標識物質は未反応の磁性粒子に結合しない。すなわち、未反応の磁性粒子は標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度(ゆえに、測定精度)には実質的な影響を及ぼさない。このため、当該工程では標的物質由来のシグナル強度が選択的に検出される、即ち、標的物質の量を高精度で測定できる。また、感度低下の原因となるサンプル中の他の成分(例えば、血球)、や未反応の標識物質は電気泳動により当該磁石より陰極または陽極側に移動している。標識物質の配合量は、標的物質の種類、磁性粒子等の他の試薬成分の使用量、サンプルの種類を考慮したうえで、標的物質が測定対象範囲において十分検出可能となるように配合する。ゆえに、本開示の方法によれば、目的とする標的物質の存在量を高感度(高精度)で測定できる。
本開示の第3の形態は、第1または第2の実施形態の分離・測定方法を用いた標的物質に関与する疾患の診断方法である。具体的には、被検者から試料を採取する段階と、前記試料中の標的物質と、前記標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子と、前記標的物質の部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定された標識物質と、を混合して、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物を得、前記混合物に電気泳動を行い、磁気および電気泳動により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を分離した後、前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度を検出し、健常者の標的物質の値と比較して被検者が標的物質に関与する疾患に罹患しているか否かを判定することを含む、標的物質に関与する疾患の診断方法である。したがって、本発明は、被検者から試料を採取し、前記試料中の標的物質と、前記標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子と、前記標的物質が認識する部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定された標識物質と、を混合して、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物を得、磁気および電気泳動により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を分離した後、前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度(シグナル強度1)を検出し;健常者から試料を採取し、前記試料中の標的物質と、前記標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子と、前記標的物質の部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定された標識物質と、を混合して、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物を得、磁気および電気泳動により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を分離した後、前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度(シグナル強度2)を検出し;前記シグナル強度1を前記シグナル強度2と比較して被検者が標的物質に関与する疾患に罹患しているか否かを判定することを有する、標的物質に関与する疾患の診断方法をも提供する。ここで、被検者又は健常者は、ヒト又はヒト以外の哺乳動物であることが好ましい。上記疾患としては、例えば、標的物質がインスリンである場合、インスリンノーマ、肥満、肝疾患、クッシング症候群、末端肥大症、異常インスリン血症、インスリン自己免疫症候群、糖尿病、低血糖、低栄養状態、褐色細胞腫、下垂体副腎機能低下症などが挙げられる。健常者の値と比較して被験者のシグナル強度が高ければ、上記したような疾患にインスリンノーマ、肥満、肝疾患、クッシング症候群、末端肥大症、異常インスリン血症、インスリン自己免疫症候群などに罹患している可能性がある。一方、健常者の値と比較して被験者のシグナル強度が低ければ、糖尿病、低血糖、低栄養状態、褐色細胞腫、下垂体副腎機能低下症などに罹患している可能性がある。すなわち、前記標的物質がインスリンであり、前記シグナル強度1を前記シグナル強度2より低い場合には、前記被検者が糖尿病、低血糖、低栄養状態、褐色細胞腫または下垂体副腎機能低下症に罹患しているまたは罹患の危険性を有すると判断する。
本開示の第4の形態は、標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子(第1レセプター固定磁性粒子)、標的物質の部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定された標識物質(第2レセプター固定標識物質)および磁石を含む標的物質に関与する疾患の検査キットである。したがって、本発明は、標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定されてなる磁性粒子、前記標的物質が認識する部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定されてなる標識物質、および磁石を含む標的物質に関与する疾患の検査キットをも提供する。
(第1レセプター固定磁性粒子の調製)
マウス抗ヒト脂肪酸結合タンパク質(H-FABP)IgGモノクローナル抗体28(Monoclonal mouse anti-human fatty acid binding protein (FABP) 28、Hytest Ltd.製)0.032mL(0.2mg)をBiotin Labeling Kit-SH(株式会社同仁化学研究所製)を用い、製造社のプロトコルに従って、ビオチン化して、Biotin標識Anti H-FABP(28)(ビオチン化H-FABP抗体)を含むPBS溶液(pH 7.4)(溶液A-1)0.2mL(1mg/mL)を得た。
マウス抗ヒト脂肪酸結合タンパク質(FABP)IgGモノクローナル抗体25(Monoclonal mouse anti-human fatty acid binding protein (FABP) 25、Hytest Ltd.製)0.055mL(0.3mg)を、50mM EDTAを含む0.1M リン酸バッファー(pH6.0) 0.3mLに添加して、抗体溶液(溶液B-1)を調製した。この抗体溶液(溶液B-1)に、0.1Mメルカプトエチルアミン塩酸塩及び50mM EDTAを含む0.1Mリン酸バッファー(pH6.0)0.05mLを加えた。この液を、37℃で2時間インキュベートして、抗体のジスルフィド結合を還元してスルフヒドリル基(-SH)を形成して、還元抗体を含む溶液(溶液B-2)を得た。この溶液(溶液B-2)について、脱塩処理を行い、還元抗体を含むPBS溶液(溶液B-3)0.4mLを得た。
ヒト脂肪酸結合タンパク質(H-FABP)(Fatty acid binding protein (FABP), human、Hytest Ltd.製)0.1mgに、0.1% BSAを含むPBS溶液 2mLを添加・溶解して、H-FABP溶液(H-FABP濃度:0.05mg/mL)を調製した。
上記にて調製した第1レセプター固定磁性粒子溶液(溶液A-3)、第2レセプター固定標識物質溶液(溶液B-7)、H-FABP溶液、0.1% BSAを含むPBS(pH 7.4)(下記表1中の「0.1% BSA PBS」)および0.1M Tris-HCl(pH8.5)(下記表1中の「Tris-HCl」)を、下記表1に示される組成(pH 8.5)となるように混合して、25℃で5分間、反応させ、脂肪酸結合タンパク質-Biotin標識Anti H-FABP(28)/Streptavidin磁気ビーズ-IRDye800CW標識AntiH-FABP(25)の複合体1~5(複合体1~5)を含む泳動溶液1~5(サンプル1~5)を作製した。なお、下記表1において、「H-FABP溶液の希釈率」とは、上記にて調製したH-FABP溶液を希釈する際の希釈倍率を示し、「希釈後のH-FABP溶液」とは、上記所定の希釈率にて希釈した後のH-FABP溶液の添加量を示す。このため、例えば、サンプル1は、上記にて調製したH-FABP溶液を2倍希釈したものを1μL使用することを意味する。また、下記表1中、「溶液A-3の抗体/H-FABP(モル比)」は、各サンプルにおける脂肪酸結合タンパク質(H-FABP、標的物質)に対するAnti H-FABP(28)(第1レセプター)のモル比を意味する。同様にして、「溶液B-7の抗体/H-FABP(モル比))」は、各サンプルにおける脂肪酸結合タンパク質(H-FABP、標的物質)に対するAnti H-FABP(25)(第2レセプター)のモル比を意味する。なお、磁性粒子へのビオチン結合量は、使用した磁性粒子の取扱説明書に記載の量に基づき算出できる。また、抗体とビオチンは1:1のモル比で、全て結合したと仮定して計算できる。
上記(泳動溶液の作製)にて調製したサンプル1~5 0.04mLを、それぞれ、ガラス製の四角管(外辺:1.5mm、内辺:1.0mm、肉厚:0.25mm、長さ:40mm、材質:石英)に充填した(図2A)。ネオジム永久磁石を、各サンプルを充填した管上を、管の延在方向に沿ってスライドさせて、複合体1~5及び未反応の第1レセプター固定磁性粒子を一カ所(位置A)に集め、ガラス四角管1~5をそれぞれ得た(図2B)。なお、磁石は、陰極から陽極までの距離(X)に対する陰極からの磁石までの距離(Y)の割合(Y/X)が1/5の地点に設置した。
図3に示される電気泳動装置に、上記(泳動溶液の作製)にて作製したガラス四角管1~5を、それぞれセットした後、100Vの電圧で5分間、電気泳動を行った。
4…試薬、
5…電気泳動基材、
6…基板、
7…標的物質を含むサンプル、
8…磁石、
9…標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体。
Claims (6)
- 標的物質を含むサンプルと、前記標的物質の部位を特異的に認識する第1レセプターが固定された磁性粒子と、前記標的物質の部位とは異なる部位を特異的に認識する第2レセプターが固定された標識物質と、を混合して、標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物を得、磁気および電気泳動により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を分離した後、前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度を検出することを有する、標的物質量の測定方法。
- 標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を含む混合物を得た後、磁気により前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体を所定に位置に集めた後、電気泳動を行うことで、前記標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体と、未反応の第2レセプターが固定された標識物質と、を分離する、請求項1に記載の方法。
- 前記電気泳動が無担体電気泳動である、請求項1または2に記載の方法。
- 予め量が既知の標的物質を用いて、標的物質量に対する標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度の検量線を作成し、前記検量線および前記検出された標的物質-磁性粒子-標識物質の複合体のシグナル強度に基づいて、前記サンプル中に含まれる標的物質の量を測定する、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。
- 前記標識物質は、蛍光物質、放射性同位体、酵素およびレドックス物質からなる群より選択される少なくとも一種である、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記サンプルは、血液、間質液および尿からなる群より選択される、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018201908 | 2018-10-26 | ||
JP2018201908 | 2018-10-26 | ||
PCT/JP2019/040657 WO2020085165A1 (ja) | 2018-10-26 | 2019-10-16 | 標的物質の分離方法および定量方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2020085165A1 JPWO2020085165A1 (ja) | 2021-09-24 |
JP7428657B2 true JP7428657B2 (ja) | 2024-02-06 |
Family
ID=70331929
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020553228A Active JP7428657B2 (ja) | 2018-10-26 | 2019-10-16 | 標的物質の分離方法および定量方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210239684A1 (ja) |
EP (1) | EP3859324B1 (ja) |
JP (1) | JP7428657B2 (ja) |
CN (1) | CN112888938B (ja) |
WO (1) | WO2020085165A1 (ja) |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009065880A (ja) | 2007-09-12 | 2009-04-02 | Panasonic Corp | 遺伝子解析方法 |
JP2012042456A (ja) | 2010-07-23 | 2012-03-01 | Arkray Inc | ターゲットの検出方法、バックグラウンド上昇抑制方法および検出装置 |
JP2014145680A (ja) | 2013-01-29 | 2014-08-14 | Terumo Corp | 標的物質−レセプター複合体と遊離レセプターとを分離する方法 |
JP2014226093A (ja) | 2013-05-23 | 2014-12-08 | 国立大学法人福井大学 | プローブ修飾ナノ粒子を用いた有害微生物の高感度バイオセンシングシステム |
JP2017044674A (ja) | 2015-08-28 | 2017-03-02 | 国立大学法人 東京大学 | 電極、センサー、流体デバイスおよび電極の製造方法 |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5770029A (en) * | 1996-07-30 | 1998-06-23 | Soane Biosciences | Integrated electrophoretic microdevices |
US6027945A (en) * | 1997-01-21 | 2000-02-22 | Promega Corporation | Methods of isolating biological target materials using silica magnetic particles |
JP2005233944A (ja) * | 2004-01-20 | 2005-09-02 | Japan Science & Technology Agency | 免疫学的測定方法および免疫学的測定用チップ |
JP2006090825A (ja) * | 2004-09-24 | 2006-04-06 | Citizen Watch Co Ltd | 磁気免疫測定装置 |
JP2007262114A (ja) | 2006-03-27 | 2007-10-11 | Jsr Corp | 磁性粒子およびその製造方法、ならびに磁性粒子分散体 |
JP4639168B2 (ja) * | 2006-06-22 | 2011-02-23 | 株式会社アルバック | 生体物質相互作用検出・回収方法およびその装置 |
JP4840580B2 (ja) | 2006-07-26 | 2011-12-21 | Jsr株式会社 | 磁性粒子およびその製造方法、ならびにプローブ結合粒子 |
JP2009219388A (ja) * | 2008-03-14 | 2009-10-01 | Jsr Corp | イムノpcr用磁性粒子、標的物質の検出方法、および標的物質の検出キット |
JP2011075539A (ja) * | 2009-09-07 | 2011-04-14 | Ngk Insulators Ltd | 目的物質の検出方法及び誘導泳動センサ |
US20120077184A1 (en) * | 2010-09-28 | 2012-03-29 | Starkdx Incorporated | Electromagnetic multiplex assay biosensor |
JP5497620B2 (ja) * | 2010-12-14 | 2014-05-21 | シスメックス株式会社 | 分析装置 |
JP2012177691A (ja) | 2011-02-04 | 2012-09-13 | Hitachi Maxell Ltd | 磁性マーカー粒子 |
JP5634646B1 (ja) * | 2013-05-17 | 2014-12-03 | テルモ株式会社 | シート状細胞培養物の製造方法 |
JP2018201908A (ja) | 2017-06-06 | 2018-12-27 | 株式会社三共 | 遊技機 |
-
2019
- 2019-10-16 JP JP2020553228A patent/JP7428657B2/ja active Active
- 2019-10-16 EP EP19874815.4A patent/EP3859324B1/en active Active
- 2019-10-16 WO PCT/JP2019/040657 patent/WO2020085165A1/ja unknown
- 2019-10-16 CN CN201980070299.9A patent/CN112888938B/zh active Active
-
2021
- 2021-04-21 US US17/236,705 patent/US20210239684A1/en active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009065880A (ja) | 2007-09-12 | 2009-04-02 | Panasonic Corp | 遺伝子解析方法 |
JP2012042456A (ja) | 2010-07-23 | 2012-03-01 | Arkray Inc | ターゲットの検出方法、バックグラウンド上昇抑制方法および検出装置 |
JP2014145680A (ja) | 2013-01-29 | 2014-08-14 | Terumo Corp | 標的物質−レセプター複合体と遊離レセプターとを分離する方法 |
JP2014226093A (ja) | 2013-05-23 | 2014-12-08 | 国立大学法人福井大学 | プローブ修飾ナノ粒子を用いた有害微生物の高感度バイオセンシングシステム |
JP2017044674A (ja) | 2015-08-28 | 2017-03-02 | 国立大学法人 東京大学 | 電極、センサー、流体デバイスおよび電極の製造方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Hong-Xu- Chen et al.,Magnetic Beads Based Immunoaffinity Capillary Electrophoresis of Toal Serum IgE with Lased-Induced Fluorescence Detection,Anal. Chem,2008年,Vol.80,pp.9583-9588 |
Mark A.Hayes et al.,Flow-Based Microimmunoassay,Anal.Chem.,2001年,Vol.73,pp.5896-5902 |
Yolanda H.Tennico et al.,In-line extraction employing functionalized magnetic particles for capillary and mictochip electrophoresis,Electrophoresis,2010年,Vol.31,pp.2548-2557 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN112888938A (zh) | 2021-06-01 |
WO2020085165A1 (ja) | 2020-04-30 |
US20210239684A1 (en) | 2021-08-05 |
EP3859324B1 (en) | 2024-06-12 |
EP3859324A1 (en) | 2021-08-04 |
CN112888938B (zh) | 2024-01-02 |
EP3859324A4 (en) | 2021-11-24 |
JPWO2020085165A1 (ja) | 2021-09-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0158746B1 (en) | Visualization method for the direct or indirect detection of the reaction between a specific binding agent and the corresponding acceptor substance in blot overlay assays | |
JP6861771B2 (ja) | 腎疾患のためのマーカー | |
ES2430290T3 (es) | Utilización de péptidos de tipo PNC para predecir la necesidad de diálisis | |
WO2013132347A2 (en) | Improved elisa immunoassay for calprotectin | |
WO2013132338A2 (en) | Competitive immunoassay for calprotectin | |
US11719697B2 (en) | Immunoassay and antibodies for the detection of chromogranin A | |
US20180113127A1 (en) | Immunoassay method and assay reagent used in said method | |
EP2913670A1 (en) | Method for boosting sensitivity of immunoassay system through pretreatment of urine with denaturant | |
JP7428657B2 (ja) | 標的物質の分離方法および定量方法 | |
JP2013527427A (ja) | 抗体の検出 | |
JP6157862B2 (ja) | 標的物質−レセプター複合体と遊離レセプターとを分離する方法 | |
JP7315965B2 (ja) | ウィルス性肝癌の検出方法 | |
KR19990035755A (ko) | 부갑상선 호르몬 유사 단백질과 관련된 화합물 및 이의 제조방법 | |
EP3779438A1 (en) | Heart failure detection method, instrument for heart failure detection, sandwich immunoassay method, and antibody combination | |
JP6829689B2 (ja) | 免疫試験方法および免疫試験キット | |
US10060925B2 (en) | Miox antibody and assay | |
JP4423426B2 (ja) | アドレノメデュリン前駆体c末端ペプチドの濃度の上昇を循環器疾患又は炎症性疾患の指標とする方法 | |
JP2000266748A (ja) | 抗マウスIgE抗体を用いたマウスIgEの測定キット及び測定方法 | |
US20210230399A1 (en) | Nitrocellulose membrane comprising non-covalently attached organic nanostructured molecule | |
CN115280146A (zh) | 包含人iv型胶原7s结构域的片段的测定方法以及用于该测定方法的试剂盒 | |
JP6183920B2 (ja) | 腎炎の病変部位の検査方法およびそのための試薬 | |
JP2024093998A (ja) | 非特異反応を抑制可能な抗体溶液 | |
US20210278403A1 (en) | Lateral flow assay for assessing recombinant protein expression or reporter gene expression | |
WO2014083861A1 (ja) | 標的物質-レセプター複合体と遊離レセプターとを分離する方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220913 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20231024 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231108 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240109 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240125 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7428657 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |