JP7387088B2 - 心筋緻密化障害の治療方法 - Google Patents
心筋緻密化障害の治療方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7387088B2 JP7387088B2 JP2020568229A JP2020568229A JP7387088B2 JP 7387088 B2 JP7387088 B2 JP 7387088B2 JP 2020568229 A JP2020568229 A JP 2020568229A JP 2020568229 A JP2020568229 A JP 2020568229A JP 7387088 B2 JP7387088 B2 JP 7387088B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lvnc
- ezh2
- simvastatin
- day
- cardiomyocytes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000005056 compaction Methods 0.000 title claims description 25
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 title claims description 22
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 11
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 93
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 claims description 93
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 claims description 93
- 101000882127 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase EZH2 Proteins 0.000 claims description 86
- 102100038970 Histone-lysine N-methyltransferase EZH2 Human genes 0.000 claims description 84
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 claims description 44
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 claims description 32
- 230000006870 function Effects 0.000 claims description 23
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 20
- 230000004217 heart function Effects 0.000 claims description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 19
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 claims description 13
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 12
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 72
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 48
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 42
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 30
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 30
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 28
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 21
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 17
- 206010013801 Duchenne Muscular Dystrophy Diseases 0.000 description 16
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 15
- 230000004898 mitochondrial function Effects 0.000 description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 201000004300 left ventricular noncompaction Diseases 0.000 description 12
- 230000008811 mitochondrial respiratory chain Effects 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 10
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- 201000005943 Barth syndrome Diseases 0.000 description 9
- 101100293244 Mus musculus Mypn gene Proteins 0.000 description 9
- 101150013356 TNNT2 gene Proteins 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- FJLGEFLZQAZZCD-MCBHFWOFSA-N (3R,5S)-fluvastatin Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 FJLGEFLZQAZZCD-MCBHFWOFSA-N 0.000 description 8
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 8
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 8
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 8
- 229960003765 fluvastatin Drugs 0.000 description 8
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 description 8
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 8
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 7
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 7
- 108010063503 Actinin Proteins 0.000 description 6
- 102000010825 Actinin Human genes 0.000 description 6
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 6
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 6
- 230000001973 epigenetic effect Effects 0.000 description 6
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 description 6
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 6
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 6
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 6
- 101000764260 Homo sapiens Troponin T, cardiac muscle Proteins 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 description 5
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102400001263 NT-proBNP Human genes 0.000 description 5
- 102100026893 Troponin T, cardiac muscle Human genes 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 5
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 5
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 5
- 108010008064 pro-brain natriuretic peptide (1-76) Proteins 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 4
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 102000016397 Methyltransferase Human genes 0.000 description 4
- 108010030743 Tropomyosin Proteins 0.000 description 4
- 102000005937 Tropomyosin Human genes 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 4
- 238000009511 drug repositioning Methods 0.000 description 4
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000000297 inotrophic effect Effects 0.000 description 4
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 4
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 4
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 4
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- RPQZTTQVRYEKCR-WCTZXXKLSA-N zebularine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=CC=C1 RPQZTTQVRYEKCR-WCTZXXKLSA-N 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 201000006935 Becker muscular dystrophy Diseases 0.000 description 3
- 102100036279 DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1 Human genes 0.000 description 3
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 3
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 3
- 241001559542 Hippocampus hippocampus Species 0.000 description 3
- 101000931098 Homo sapiens DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1 Proteins 0.000 description 3
- TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N Pravastatin Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N SJ000287055 Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100027548 WW domain-containing transcription regulator protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 229960005110 cerivastatin Drugs 0.000 description 3
- SEERZIQQUAZTOL-ANMDKAQQSA-N cerivastatin Chemical compound COCC1=C(C(C)C)N=C(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 SEERZIQQUAZTOL-ANMDKAQQSA-N 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 3
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 3
- 238000010201 enrichment analysis Methods 0.000 description 3
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 229950009116 mevastatin Drugs 0.000 description 3
- AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N mevastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=CCC[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N 0.000 description 3
- BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N mevastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CCC=C21 BOZILQFLQYBIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 229960002797 pitavastatin Drugs 0.000 description 3
- VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N pitavastatin Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)\C=C\C1=C(C2CC2)N=C2C=CC=CC2=C1C1=CC=C(F)C=C1 VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N 0.000 description 3
- 229960002965 pravastatin Drugs 0.000 description 3
- TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N pravastatin Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)[C@H]2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@H](O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N 0.000 description 3
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 description 3
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N (+-)-Isoprenaline Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMZRVOVNUMQTIN-UHFFFAOYSA-N Carbonyl Cyanide para-Trifluoromethoxyphenylhydrazone Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 BMZRVOVNUMQTIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003964 Histone deacetylase Human genes 0.000 description 2
- 108090000353 Histone deacetylase Proteins 0.000 description 2
- 101000982003 Homo sapiens Myopalladin Proteins 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 102100026786 Myopalladin Human genes 0.000 description 2
- 238000003559 RNA-seq method Methods 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229960004195 carvedilol Drugs 0.000 description 2
- NPAKNKYSJIDKMW-UHFFFAOYSA-N carvedilol Chemical compound COC1=CC=CC=C1OCCNCC(O)COC1=CC=CC2=NC3=CC=C[CH]C3=C12 NPAKNKYSJIDKMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 230000008828 contractile function Effects 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 2
- 230000008995 epigenetic change Effects 0.000 description 2
- 230000006718 epigenetic regulation Effects 0.000 description 2
- 230000006539 extracellular acidification Effects 0.000 description 2
- 230000004129 fatty acid metabolism Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960001317 isoprenaline Drugs 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 210000003632 microfilament Anatomy 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- HRDQQHUKUIKFHT-UHFFFAOYSA-N n-[(4,6-dimethyl-2-oxo-1h-pyridin-3-yl)methyl]-3-methyl-6-[6-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl]-1-propan-2-ylindole-4-carboxamide Chemical compound C1=C2N(C(C)C)C=C(C)C2=C(C(=O)NCC=2C(NC(C)=CC=2C)=O)C=C1C(C=N1)=CC=C1N1CCN(C)CC1 HRDQQHUKUIKFHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 2
- 230000004853 protein function Effects 0.000 description 2
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 2
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002235 sarcomere Anatomy 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N (1r,4s,5e,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,16s,18r,19s,20r,21e,25s,26r,27s,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trio Polymers O([C@@H]1CC[C@@H](/C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)O[C@H]([C@H]2C)[C@H]1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](C[C@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-DJRUDOHVSA-N (1s,4r,5z,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,18r,19r,20s,21e,26r,27s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers O([C@H]1CC[C@H](\C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)C(C)C(=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]2C)C1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](CC(C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-DJRUDOHVSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-YNZHUHFTSA-N (4Z,18Z,20Z)-22-ethyl-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethylspiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2'-oxane]-3,9,13-trione Polymers CC1C(C2C)OC(=O)\C=C/C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)C\C=C/C=C\C(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-YNZHUHFTSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N (5e,5'r,7e,10s,11r,12s,14s,15r,16r,18r,19s,20r,21e,26r,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers C([C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]1C)[C@H]2C)\C=C\C=C\C(CC)CCC2OC21CC[C@@H](C)C(C[C@H](C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N 0.000 description 1
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- AOYNUTHNTBLRMT-SLPGGIOYSA-N 2-deoxy-2-fluoro-aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](F)C=O AOYNUTHNTBLRMT-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers CC1C(C2C)OC(=O)C=CC(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)CC=CC=CC(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005541 ACE inhibitor Substances 0.000 description 1
- 101150059573 AGTR1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100039819 Actin, alpha cardiac muscle 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 101100519158 Arabidopsis thaliana PCR2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002083 C09CA01 - Losartan Substances 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 description 1
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000002330 Congenital Heart Defects Diseases 0.000 description 1
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 description 1
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 description 1
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 102100022183 E3 ubiquitin-protein ligase MIB1 Human genes 0.000 description 1
- 229940126152 EZH2 methyltransferase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102100031948 Enhancer of polycomb homolog 1 Human genes 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 206010019842 Hepatomegaly Diseases 0.000 description 1
- 102100032801 Histone-lysine N-methyltransferase SMYD1 Human genes 0.000 description 1
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 1
- 101000959247 Homo sapiens Actin, alpha cardiac muscle 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000973503 Homo sapiens E3 ubiquitin-protein ligase MIB1 Proteins 0.000 description 1
- 101000920634 Homo sapiens Enhancer of polycomb homolog 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000708638 Homo sapiens Histone-lysine N-methyltransferase SMYD1 Proteins 0.000 description 1
- 101001023021 Homo sapiens LIM domain-binding protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001030243 Homo sapiens Myosin-7 Proteins 0.000 description 1
- 101000982032 Homo sapiens Myosin-binding protein C, cardiac-type Proteins 0.000 description 1
- 101000998596 Homo sapiens NADH-cytochrome b5 reductase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000597928 Homo sapiens Numb-like protein Proteins 0.000 description 1
- 101000745252 Homo sapiens Plasma membrane ascorbate-dependent reductase CYBRD1 Proteins 0.000 description 1
- 101000584499 Homo sapiens Polycomb protein SUZ12 Proteins 0.000 description 1
- 101001003584 Homo sapiens Prelamin-A/C Proteins 0.000 description 1
- 101000713606 Homo sapiens T-box transcription factor TBX20 Proteins 0.000 description 1
- 101000801701 Homo sapiens Tropomyosin alpha-1 chain Proteins 0.000 description 1
- 101000851334 Homo sapiens Troponin I, cardiac muscle Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700021430 Kruppel-Like Factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100035112 LIM domain-binding protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 101150039798 MYC gene Proteins 0.000 description 1
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 102100038934 Myosin-7 Human genes 0.000 description 1
- 102100026771 Myosin-binding protein C, cardiac-type Human genes 0.000 description 1
- 102100033168 NADH-cytochrome b5 reductase 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100036836 Natriuretic peptides B Human genes 0.000 description 1
- 101710187802 Natriuretic peptides B Proteins 0.000 description 1
- 102100036986 Numb-like protein Human genes 0.000 description 1
- 101710126211 POU domain, class 5, transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100039902 Plasma membrane ascorbate-dependent reductase CYBRD1 Human genes 0.000 description 1
- 102100030702 Polycomb protein SUZ12 Human genes 0.000 description 1
- 102100026531 Prelamin-A/C Human genes 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100036985 Protein numb homolog Human genes 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- 101100247004 Rattus norvegicus Qsox1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 102100036833 T-box transcription factor TBX20 Human genes 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- 102100033632 Tropomyosin alpha-1 chain Human genes 0.000 description 1
- 102100036859 Troponin I, cardiac muscle Human genes 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 1
- 206010047281 Ventricular arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 101100459258 Xenopus laevis myc-a gene Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000048 adrenergic agonist Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 229940044094 angiotensin-converting-enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000013176 antiplatelet therapy Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 1
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 229940097320 beta blocking agent Drugs 0.000 description 1
- 102000015005 beta-adrenergic receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040006818 beta-adrenergic receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 229960000830 captopril Drugs 0.000 description 1
- 230000010343 cardiac dilation Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000000280 densification Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000003073 embolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000004049 epigenetic modification Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003883 furosemide Drugs 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 208000014471 histiocytoid cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 230000006195 histone acetylation Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 238000003368 label free method Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- KJJZZJSZUJXYEA-UHFFFAOYSA-N losartan Chemical compound CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C=2[N]N=NN=2)C=C1 KJJZZJSZUJXYEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004773 losartan Drugs 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- PZRHRDRVRGEVNW-UHFFFAOYSA-N milrinone Chemical compound N1C(=O)C(C#N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1C PZRHRDRVRGEVNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003574 milrinone Drugs 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000006540 mitochondrial respiration Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 1
- 108700026460 mouse core Proteins 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 208000018360 neuromuscular disease Diseases 0.000 description 1
- 229930191479 oligomycin Natural products 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N oligomycin A Polymers O([C@H]1CC[C@H](/C=C/C=C/C[C@@H](C)[C@H](O)[C@@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)O[C@@H]([C@@H]2C)[C@@H]1C)CC)[C@@]12CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 238000002638 palliative care Methods 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 1
- 238000003068 pathway analysis Methods 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000000513 principal component analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008672 reprogramming Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004202 respiratory function Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 102220003946 rs104894941 Human genes 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000011222 transcriptome analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
- A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
本発明は、心筋緻密化障害(NCC)に罹患している対象を治療する方法であって、EZH2ダウンレギュレーターの治療上有効量を含む医薬組成物を上記の対象に投与することを含む方法に関する。特に、上記のEZH2ダウンレギュレーターは、NCCの病原性突然変異によって誘発されるEZH2の過剰発現を阻害することができ、その結果、エピジェネティックな変化を引き起こすDNAメチルトランスフェラーゼ(DNMT)の動員を減少させる。したがって、上記のEZH2ダウンレギュレーターは、左心室心筋緻密化障害(LVNC)における機能的な遺伝子発現を回復することにより、心臓代謝および疾患の進行を改善することができる。
左心室心筋緻密化障害(LVNC)は、特に左心室の心尖部に異常な小柱形成を伴う海綿状の左心室(LV)心筋を特徴とする明確な心筋症である。人口調査によると、新たに診断された症例の平均年間発生率は、10歳未満の子供10万人あたり0.11であり、生後1年で最も高かった(乳児10万人あたり0.83)。診断から10年後に死亡または移植がなかったのはわずか48%であった。通常、乳児期初期に主な拡張表現型の症状を示した子供は、長期転帰がさらに悪化した。LVNCは、孤立した状態として現れるか、先天性心疾患、神経筋疾患、または遺伝性症候群に関連する可能性がある。LVNCの病因に関与する遺伝子変異には、MIB1、TBX20、TAZとLMNAの2つのカルシウム処理遺伝子、NUMB/NUMBL、ミトコンドリアゲノム変異(遠位22q11・2)、およびサルコメアをコードする遺伝子(MYH7、ACTC1、 TNNT2、MYBPC3、TPM1、LDB3、およびTNNI3)の変異が含まれる。心血管代謝機能障害は、LVNCの病態生理学の一部としても説明されている。
本発明は、NCCに罹患している対象に、EZH2ダウンレギュレーター、例えばスタチン、特にシンバスタチンの治療上有効量を含む医薬組成物を投与することを含む、心筋緻密化障害(NCC)に罹患している対象を治療する方法を提供する。
左心室緻密化障害(LVNC)の病因は、多因子である。左心室緻密化障害(LVNC)の予後は、特に乳児期に発症した人では不良である。うっ血防止薬が失敗した人は、移植を検討する必要がある。満たされていない医療ニーズと移植のための小さな心臓の欠如のために、精密医療は、乳児期に発症する人々によって緊急に必要とされている。本発明は、安全な治療薬を特定するために、LVNC患者のiPSC(LVNC-hiPSC-CM)に由来するヒト心筋細胞において薬物の転用およびスクリーニングを実施する。さらに、同定された薬剤であるシンバスタチンの効果は、LVNC患者の遺伝子変異に基づく変異マウスにおいてインビボで確認している。このようなアプローチは、重度の心不全表現型を持つこれらのLVNC患者に新しい治療アプローチを提供する。
一実施形態では、心臓代謝は、心臓の脂肪酸代謝、グルコース代謝、およびミトコンドリア呼吸鎖を含む。したがって、スタチンは、心臓代謝とミトコンドリア機能を改善する。なお、心臓代謝は、βアドレナリン作動性応答性を含む。したがって、スタチンは、βアドレナリン作動性応答性を回復することもできる。
したがって、EZH2ダウンレギュレーター(例えば、スタチン)は、NCCまたはLVNCの症状を治療することができる。一実施形態では、EZH2ダウンレギュレーターは、NCCまたはLVNCに罹患している対象の心臓機能を改善して、NCCまたはLVNCを治療する。好ましい実施形態では、スタチンは、NCCまたはLVNCに罹患している対象の心臓機能を改善して、NCCまたはLVNCを治療する。より好ましい実施形態では、心臓機能は、心臓代謝および心室機能を含む。
hiPSC研究
左心室心筋緻密化障害(LVNC)の患者と正常な健康な女性にそれぞれ由来するヒト人工多能性幹細胞(hiPSC)株は、2つのアプローチによって再プログラムされた。各患者の1つの株は、4つのYamanaka因子(Klf4、Myc、Sox2、Oct4。NTUのHong-Nerng Ho博士により実施)を運ぶレンチウイルスによって皮膚細胞から再プログラムされ、もう1つの株は、4つのYamanaka因子を運ぶセンダイウイルス(スタンフォード大学のJoseph C.Wu博士により実施)によって末梢血単球(PBMC)から再プログラムされた。患者は、遺伝子検査、hiPSCへの再プログラミングおよび薬理学的研究のために患者の組織/血球を収集することに同意した。薬物効果は、同じ患者の2つの株に由来するヒト心筋細胞に同じ用量で同じ薬物をテストすることによって検証され、各株には少なくとも3つの独立した繰り返しがあった。細胞の短縮は、Ionoptixシステム(Westwood、MA、USA)で測定され、ミトコンドリア機能は、Agilent seahorse analyzer(Seahorse Bioscience、MA、USA)で評価された。
Seahorseアッセイを70日目に実施し、矢印で示された試薬を含むXFミトストレステストキットを順次追加する条件下で、ミトコンドリアOCR(酸素消費率)およびECAR(細胞外酸性化率)を測定した。データは、各ウェルの総細胞タンパク質で正規化された。OCRとECARの関係は、基礎(オリゴマイシン前)および最大呼吸容量(FCCP後)の条件下で測定された。
プロテオミクス分析
シンバスタチンの有りまたは無しで処理されたhiPSC由来心筋細胞の総タンパク質は、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤カクテルを含むRIPAバッファー(Thermo Fisher Scientific株式会社、USA)によって抽出された。サンプルは、トリプシンによってさらに消化された。脱塩および乾燥後、LTQ-OrbitrapVelos質量分析計システムによってLC-MS/MS分析を実行した。ペプチドおよびタンパク質グループIDは、MASCOTデータベース検索によって7ppmのプリカーサー質量精度と0.5DaのMS/MS精度で取得された。大規模な質量分析の生データは、ラベルフリーの定量化方法でUniprotヒトデータベースに基づいてMaxQuantソフトウェアによってさらに分析され、続いてPerseusソフトウェアを使用して統計分析が行われた。
シンバスタチンの有りまたは無しで処理されたhiPSC由来の心筋細胞の全RNAは、TRIzol試薬(Introgen、Thermo Fisher Scientific株式会社、USA)によって抽出された。全RNAは、Quick-RNAキット(Zymol Research、CA、USA)により、TRIzol-クロロホルムホモジネートの上部水層からさらに精製された。TruSeq Stranded mRNAシーケンスは、PhalanxBiotechによって実行された。簡単に説明すると、500ngの高品質な全RNA(RIN値>8)のインプットからpolyA mRNAを精製、断片化し、第1鎖および第2鎖のcDNAを合成した。バーコード化されたリンカーをライゲーションして、インデックス付きライブラリを生成した。ライブラリは、Quantus Fluorometer(Promega、Madison、WI)でPromega QuantiFluordsDNAシステムを使用して定量化された。ライブラリのサイズと純度は、Agilent 2200TapeStation機器で高感度D1000スクリーンテープを使用して分析した。ライブラリをプールし、ペアエンド100 bp Rapid Runフォーマットを使用してIllumina HiSeq2500シーケンサーで実行し、サンプルあたり合計4,000万回のリードを生成した。シーケンシング後、低品質の塩基を除去するために、トリミングされた生のリードがTrimmomaticによるシーケンシングに使用された。生データのクレンジングにも、次の基準が適用された:(1)スライディングウィンドウ(4ベース幅)の平均品質が15を下回ったときにカットオフすること、および(2)35bpより短い読み取りは破棄されること。リードがゲノムにアラインメントされた後、Cuffquantを結果のアラインメントファイルで使用して、遺伝子および転写産物の発現プロファイルを計算した。Cufflinksパッケージの一部であるCuffdiffは、2つ以上の条件から発現プロファイルを取得してアセンブリをマージし、マッピングされた総ミリオン(FPKM)フラグメントあたりの転写産物のキロベースあたりのRNA-Seqフラグメントの数を計算することによって、発現レベルを推定した。Cuffdiffは、観察された変化の統計的有意性をテストし、転写時または転写後のレベルで差次的に調節された遺伝子を特定した。クロスオミクスデータは、プロテオームとトランスクリプトームのデータを1つのペルセウスマトリックスに結合することにより、Perseusソフトウェアによってさらに分析された。両方のオミクス列がソートされ、ランクに変換された。各注釈用語に対して2変量テストが実行された。遺伝子オントロジー(GO)濃縮分析を実行して、分類のGOシステムに基づいて機能特性を備えた遺伝子のセットを解釈した。分子間の潜在的な相互作用は、STRINGによって予測された。
シンバスタチンの有りまたは無しで処理された心筋細胞の遺伝子発現の違いは、Illumina Eco リアルタイムPCRシステムを用いた絶対定量法によって確認された。簡単に説明すると、抽出したmRNAの逆転写に続いて、テンプレートcDNAをOmiGreenバッファーで目的の遺伝子のプライマーと混合し、未知のサンプルの範囲をカバーする5つの10倍段階希釈の標準でPCRを実行した。各サンプルにおける18SRNAの発現も、内部対照として定量化された。
C57BL/6jバックグラウンドにおけるTnnt2(R154W)-およびMypn(S1291T)-ノックインマウスは、国立台湾大学ゲノム医学センターの遺伝子ノックアウトマウスコア研究所によって作成された。遺伝的にヘテロ接合のLVNCマウス(Tnnt2(R154W)+/-::Mypn(S1291T)+/-)は、Tnnt2(R154W)+/-とMypn(S1291T)+/-マウスの交配から得られた。遺伝子型を確認するために、PCRおよびDNAシーケンシングを行った。すべての動物の手順とプロトコルは、AAALAC認定施設によって承認された。
テューキー検定による多重比較を伴う反復測定二元配置分散分析を使用して、iFaおよびiHのLVNC-hiPSC-CMにおける50日目と70日目に、DMSO群とシンバスタチン群との間の細胞短縮速度の違いを区別した。線形回帰分析を実施して、LVNC-hiPSC-CMにおけるβアドレナリン作動性刺激に対する変力反応の違い、およびDMSOベヒクル群とシンバスタチン群との間のLVNCマウスにおけるグルコースのLVEFまたは心臓代謝率の変化を明らかにした。
患者の特徴と遺伝情報
患者(iH)は、1週間の活動が不十分であったため、生後6か月で施設に入院した。初期評価では、灌流不良、肝臓腫大、心臓肥大、および著しく上昇したNT-proBNP(>35000pg/mL)が明らかになった。強心薬サポート下の心エコー図は、左心室(LV)の拡張(LV拡張末期径のZスコア、4.7)と左心室収縮性の障害(LV駆出率、30.3%)を示した。コンピューター断層撮影は、正常な冠状動脈、左心室収縮性が低くて緻密化がない拡張型左心室を示した。心筋炎調査は陰性であった。左心室緻密化障害を伴う拡張型心筋症と診断された。全身状態は徐々に改善したが、投与量の減少(lose dosage)の範囲でミルリノンを離脱することの困難が観察された。患者(iH)は入院42日後に退院した。家族のスクリーニングにより、患者(iH)の父親(iFa)も拡張型LVと低LV駆出率を持っていることが確認された。
LVNC患者(iH)および患者(iH)の父親(iFa)に由来するヒト心筋細胞による疾患モデリングを実施して、心機能障害の進行を再現した機能異常を特徴づけた。インビトロ分化後50日目に、LVNC-hiPSC-CMは、筋細胞収縮の低下(図1A~図1B)、βアドレナリン作動性応答性の喪失(図1C)、心血管代謝機能障害(図1D)、および心臓収縮とミトコンドリア呼吸鎖の機能性分子における異常なオミクス(図1E~図1F)を含む異常な心臓表現型を発症した。経路分析は、異常なエピジェネティックな調節が異常な新代謝および筋肉構造に関連している可能性があることを予測した(図2A)。絶対定量的リアルタイムPCR検証により、LVNC心筋細胞(iH&iFa)でEZH2の異常な過剰発現が見つかった(図2B)。直接EZH2阻害剤(gsk)は、心臓ミトコンドリア機能障害を変化させなかったが、DNMT阻害剤(zeb)は、LVNC心臓ミトコンドリア機能を回復することができた(図2C)。EZH2の過剰発現は、DNMTの動員を増加させて、LVNC筋細胞のエピジェネティックな特徴を変化させ、その結果、機能的な遺伝子発現の障害を引き起こす可能性があることを示した。したがって、EZH2発現のダウンレギュレーションは、病態特異的な作用様式でLVNC心筋細胞の心機能を改善するための実行可能な治療戦略となると考えられた。このLVNC-hiPSC-CMモデルでの薬物リポジショニングスクリーニングにより、シンバスタチンは、LVNC心筋細胞におけるEZH2発現を選択的にダウンレギュレートできるものとして特定された(図3A)。30日目から70日目までのシンバスタチン治療後の心臓収縮およびβアドレナリン作動性反応の回復において、シンバスタチンの有益な効果は、他のもの(アトルバスタチン、ロバスタチン、フルバスタチンを含む)よりも優れた(図3B)。これらのLVNC-hiPSC-CMの心臓代謝機能の改善において、低用量のシンバスタチン治療(図3Cの5μM、iH、s5)は、高用量の治療(図3Cの10μM、iH、s10)よりも優れた効果を示した。シンバスタチン治療は、ミトコンドリア呼吸鎖分子(図3D)および心臓代謝(図3E)における遺伝子発現を有意に増加させることができた。さらに、LVNC心筋細胞の細胞サイズは、分化後70日目に大きくなった(図4A)。30日目から70日目までのシンバスタチン治療は、筋細胞サイズの変化を著しく弱めた(図4A)。サルコメアアクチニンαまたはトロポニンTのいずれかの密度も、シンバスタチンで処理された心筋細胞では著しく増加した。プロテオミクス分析により、シンバスタチンは、iH-およびiFa-LVNC心筋細胞の両方で、筋肉の収縮および代謝過程の機能を備えたタンパク質の発現を有意に回復できることが実証された(図4B~図4D)。
薬物投与(シンバスタチン:3.5mg/3.6μL/kg/日、DMSO:3.6μL/kg/日)は、ミニ浸透圧ポンプ(ALZETモデル2006、Durect株式会社クパチーノ、CA、USA)をLVNCマウスの背中の皮下空間に移植して、それぞれ10、12、14週齢から、6週間行われた。エンドポイントで、空腹時LVNCマウスの心臓グルコース代謝率(MRGlu)を測定した。ベヒクル処置LVNCマウスの心臓グルコース取り込みは、高齢のLVNCマウスの心臓機能の悪化と並行して徐々に減少した(図5A)。シンバスタチンは、LVNCマウスの加齢後に発生した心臓のグルコース代謝率の低下を有意に逆転させ、これは、シンバスタチンがLVNCマウスの心臓のグルコース代謝を改善したことを示した。また、シンバスタチンは心臓収縮機能を有意に改善した(図5B)。さらに、LVNC心機能の良好な予後を維持するために、継続的な低用量シンバスタチン治療が必要であった。
Claims (9)
- EZH2ダウンレギュレーターの治療上有効量を含み、前記EZH2ダウンレギュレーターはシンバスタチンである、対象における心筋緻密化障害を治療するための医薬組成物。
- 前記心筋緻密化障害は、左心室緻密化障害を含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記EZH2ダウンレギュレーターの治療上有効量は、病原性突然変異で引き起こされるEZH2過剰発現を阻害することにより、心筋緻密化障害を治療するのに十分である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記EZH2ダウンレギュレーターの治療上有効量は、心臓機能を改善することにより、心筋緻密化障害を治療するのに十分である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記心臓機能は、心臓代謝および心室機能を含む、請求項4に記載の医薬組成物。
- 前記EZH2ダウンレギュレーターは、少なくとも4週間、毎日対象に投与される、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記対象は心筋緻密化障害に罹患しているヒトである、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記EZH2ダウンレギュレーターの治療上有効量は、0.01mg/kg/日から10mg/kg/日の範囲にある、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記シンバスタチンの治療上有効量は、0.01mg/kg/日から10mg/kg/日の範囲にある、請求項1に記載の医薬組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201862679968P | 2018-06-03 | 2018-06-03 | |
US62/679,968 | 2018-06-03 | ||
PCT/CN2019/088156 WO2019233285A1 (en) | 2018-06-03 | 2019-05-23 | Method for treating non-compaction cardiomyopathy |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021525782A JP2021525782A (ja) | 2021-09-27 |
JPWO2019233285A5 JPWO2019233285A5 (ja) | 2022-04-01 |
JP7387088B2 true JP7387088B2 (ja) | 2023-11-28 |
Family
ID=68769233
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020568229A Active JP7387088B2 (ja) | 2018-06-03 | 2019-05-23 | 心筋緻密化障害の治療方法 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11690822B2 (ja) |
EP (1) | EP3801497B1 (ja) |
JP (1) | JP7387088B2 (ja) |
KR (1) | KR20210014126A (ja) |
CN (1) | CN112512519B (ja) |
ES (1) | ES2941777T3 (ja) |
TW (1) | TWI745700B (ja) |
WO (1) | WO2019233285A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP4151208A1 (en) * | 2021-09-17 | 2023-03-22 | Universite De Bordeaux | Novel synergistic combinations and methods of uses thereof for treating cancers |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2012213217B2 (en) * | 2011-02-04 | 2017-04-20 | Infirst Healthcare Limited | Compositions and methods for treating cardiovascular diseases |
BR112016006261A2 (pt) * | 2013-09-23 | 2017-09-26 | Regeneron Pharma | camundongo, célula ou tecido de camundongo isolado, e, métodos para produzir um camundongo, para enxertar células humanas em um camundongo e para avaliar a eficácia terapêutica de uma droga que alveja células humanas |
WO2015077334A2 (en) * | 2013-11-19 | 2015-05-28 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Therapies for left ventricular non-compaction and dilated cardiomyopathy |
WO2015120372A2 (en) * | 2014-02-10 | 2015-08-13 | University Of Rochester | Compositions and methods to inhibit ezh2 for the treatment of cardiovascular diseases |
US9974767B2 (en) | 2014-07-14 | 2018-05-22 | University Of Washington | Statins in the treatment of muscular dystrophies and myopathies |
CN106963750A (zh) * | 2017-03-30 | 2017-07-21 | 四川省人民医院 | 一种建立心肌致密化不全的动物模型的方法 |
-
2019
- 2019-05-23 US US15/734,315 patent/US11690822B2/en active Active
- 2019-05-23 ES ES19814175T patent/ES2941777T3/es active Active
- 2019-05-23 KR KR1020207036469A patent/KR20210014126A/ko unknown
- 2019-05-23 CN CN201980038077.9A patent/CN112512519B/zh active Active
- 2019-05-23 EP EP19814175.6A patent/EP3801497B1/en active Active
- 2019-05-23 WO PCT/CN2019/088156 patent/WO2019233285A1/en unknown
- 2019-05-23 JP JP2020568229A patent/JP7387088B2/ja active Active
- 2019-05-31 TW TW108119253A patent/TWI745700B/zh active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Marshall J Med.,2016年,2(3),47 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TWI745700B (zh) | 2021-11-11 |
EP3801497A1 (en) | 2021-04-14 |
US20210220327A1 (en) | 2021-07-22 |
TW202011958A (zh) | 2020-04-01 |
EP3801497B1 (en) | 2023-03-22 |
ES2941777T3 (es) | 2023-05-25 |
US11690822B2 (en) | 2023-07-04 |
CN112512519B (zh) | 2023-09-15 |
WO2019233285A1 (en) | 2019-12-12 |
EP3801497A4 (en) | 2022-04-06 |
CN112512519A (zh) | 2021-03-16 |
KR20210014126A (ko) | 2021-02-08 |
JP2021525782A (ja) | 2021-09-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Lucchinetti et al. | Gene Regulatory Control of Myocardial Energy Metabolism Predicts Postoperative Cardiac Function in Patients Undergoing Off-pump Coronary Artery Bypass Graft Surgery: Inhalational versusIntravenous Anesthetics | |
Auguste et al. | BET bromodomain inhibition attenuates cardiac phenotype in myocyte-specific lamin A/C–deficient mice | |
US11788112B2 (en) | L-2-hydroxyglutarate and stress induced metabolism | |
Haywood et al. | Transcriptome signature of ventricular arrhythmia in dilated cardiomyopathy reveals increased fibrosis and activated TP53 | |
EP4035680A1 (en) | Therapy for diabetes using stem cell migration agent | |
Uematsu et al. | Sustained myocardial production of stromal cell-derived factor-1α was associated with left ventricular adverse remodeling in patients with myocardial infarction | |
Mareedu et al. | Sarcolipin haploinsufficiency prevents dystrophic cardiomyopathy in mdx mice | |
Ren et al. | Application quantitative proteomics approach to identify differentially expressed proteins associated with cardiac protection mediated by cycloastragenol in acute myocardial infarction rats | |
JP7387088B2 (ja) | 心筋緻密化障害の治療方法 | |
Yu et al. | Circulating visfatin level at admission is associated with occlusion of the infarct-related artery in patients with acute ST-segment elevation myocardial infarction | |
Liu et al. | Identification of three novel pathogenic mutations in sarcomere genes associated with familial hypertrophic cardiomyopathy based on multi-omics study | |
US20230416822A1 (en) | Detection and treatment of conditions characterized by perfusion shortage | |
Huffman et al. | Exercise protects against cardiac and skeletal muscle dysfunction in a mouse model of inflammatory arthritis | |
US20210278391A1 (en) | Compositions and methods for treating cardiovascular and metabolic conditions | |
Yang et al. | Myocardial reperfusion injury exacerbation due to ALDH2 deficiency is mediated by neutrophil extracellular traps and prevented by leukotriene C4 inhibition | |
EP3615694B1 (en) | Il-8, il-6, il-1b and tet2 and dnmt3a in atherosclerosis | |
Lin et al. | Genetic mutation of familial dilated cardiomyopathy based on next‑generation semiconductor sequencing | |
Dong et al. | Multisite and multitimepoint proteomics reveal that patent foramen ovale closure improves migraine and epilepsy by reducing right‐to‐left shunt‐induced hypoxia | |
CN110785167B (zh) | 涉及布新洛尔治疗心房颤动的方法和组合物 | |
Smart et al. | Immune profiling of murine cardiac leukocytes identifies triggering receptor expressed on myeloid cells 2 as a novel mediator of hypertensive heart failure | |
Su et al. | Transfer RNA-derived small RNAs and their potential roles in the therapeutic heterogeneity of sacubitril/valsartan in heart failure patients after acute myocardial infarction | |
EP4035679A1 (en) | Diabetes therapy targeting abnormal stem cells | |
Qi et al. | Reticulon 3 deficiency ameliorates post‐myocardial infarction heart failure by alleviating mitochondrial dysfunction and inflammation | |
Herbst | Characterization of Genetic Causes of Pediatric Cardiomyopathies–Analysis of PRDM16 as a Major Disease Gene | |
Lance et al. | Hereditary chronic neutrophilic leukemia in a four‐generation family without transformation to acute leukemia |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20210204 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20210202 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220324 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220324 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230404 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230616 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230829 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20230928 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230928 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20230929 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7387088 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |