JP7314441B2 - 選択的cd8陽性t細胞誘導ワクチン抗原 - Google Patents
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Description
〔1〕 抗原タンパク質のアミノ酸配列に含まれる8~12残基のアミノ酸配列を有する多種のペプチドを連結したポリペプチド。
〔2〕 該8~12残基ペプチドが、該抗原タンパク質における順番とは異なる順番で連結されている、〔1〕に記載のポリペプチド。
〔3〕 該抗原タンパク質の13残基以上の連続した部分アミノ酸配列を実質的に含まない、〔1〕または〔2〕に記載のポリペプチド。
〔4〕 該複数種のペプチドのアミノ酸配列は重なり合っていてもよい、〔1〕から〔3〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔5〕 該重なり合いが1~4残基である、〔4〕に記載のポリペプチド。
〔6〕 該連結部のそれぞれにはスペーサーを有していてもよい、〔1〕から〔5〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔7〕 該スペーサーが1~4残基のアミノ酸である、〔6〕に記載のポリペプチド。
〔8〕 該8~12残基ペプチドが少なくとも20種連結されている、〔1〕から〔7〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔9〕 〔1〕から〔8〕のいずれかに記載のポリペプチドをコードする核酸。
〔10〕 〔9〕に記載の核酸を含むベクター。
〔11〕 センダイウイルスベクターである、〔10〕に記載のベクター。
〔12〕 〔1〕から〔8〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターを含むワクチン。
〔13〕 抗原タンパク質がヒト免疫不全ウイルスの抗原タンパクに由来する、〔12〕に記載のワクチン。
〔14〕 〔12〕または〔13〕に記載のワクチンを接種する工程により、標的抗原特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導する方法。
〔15〕 〔1〕に記載のポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸の製造方法であって、
(i) 抗原タンパク質をコードするアミノ酸配列を、8~12残基のアミノ配列に分割する工程であって、該分割アミノ酸配列は互いに重なり合っていてもいなくてもよい工程、
(ii) 該分割アミノ酸配列を、該抗原タンパク質の該アミノ酸配列と同一とならないように連結する工程であって、該分割アミノ酸配列の各連結部にはスペーサーを挟んでも挟まなくてもよい工程、
(iii) 工程(ii)により得られたアミノ酸配列を含むポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸をそれぞれ取得する工程、を含む方法。
〔16〕 該多種のペプチドが、スペーサーを介して連結されている、〔1〕から〔8〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔17〕 該8~12残基のアミノ酸配列が10種以上連結されている、〔1〕から〔8〕および〔16〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔18〕 該8~12残基のアミノ酸配列が20種以上連結されている、〔17〕に記載のポリペプチド。
〔19〕 該8~12残基のアミノ酸配列が30種以上連結されている、〔17〕に記載のポリペプチド。
〔20〕 該8~12残基以下のアミノ酸配列が8~11残基のアミノ配列である、〔1〕から〔8〕および〔16〕から〔19〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔21〕 該抗原タンパク質の13残基以上の連続した部分アミノ酸配列の総残基数が、該連結したアミノ酸配列の総残基数の20%以下である、〔1〕から〔8〕および〔16〕から〔20〕のいずれかにに記載のポリペプチド。
〔22〕 該抗原タンパク質の13残基以上の連続した部分アミノ酸配列の総残基数が、該連結したアミノ酸配列の総残基数の10%以下または5%以下である、〔21〕に記載のポリペプチド。
〔23〕 抗原タンパク質のアミノ酸配列から12残基以下のアミノ配列を複数選択し、これらを連結したアミノ酸配列を含む、〔1〕から〔8〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔24〕 該抗原タンパク質の該アミノ酸配列と同一とならないように連結されている、〔23〕に記載のポリペプチド。
〔25〕 13残基以上の該抗原タンパク質の連続アミノ酸配列が実質的に生成しないように連結されている、〔23〕または〔24〕に記載のポリペプチド。
〔26〕 13残基以上の該抗原タンパク質の連続アミノ酸配列が生成するような連結が、連結総数の20%以下、10%以下、または5%以下となるように連結されている、〔23〕または〔24〕に記載のポリペプチド。
〔27〕 抗原タンパク質のアミノ酸配列から11残基以下のアミノ配列を複数選択して連結されており、12残基以上の該抗原タンパク質の連続アミノ酸配列が生成するような連結が、実質的に生成しないように連結されているか、あるいは連結総数の20%以下、10%以下、または5%以下となるように連結されている、〔26〕に記載のポリペプチド。
〔28〕 スペーサーを介して連結されている、〔23〕から〔27〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔29〕 スペーサーが1~4残基のアミノ酸である、〔28〕に記載のポリペプチド。
〔30〕 該分割アミノ酸配列が互いに重なり合っている、〔20〕から〔29〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔31〕 1~4残基重なり合っている、〔30〕に記載のポリペプチド。
〔32〕 10種以上の分割アミノ酸配列が連結されている、〔23〕から〔31〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔33〕 20種以上の分割アミノ酸配列が連結されている、〔32〕に記載のポリペプチド。
〔34〕 30種以上の分割アミノ酸配列が連結されている、〔32〕に記載のポリペプチド。
〔35〕 抗原タンパク質のアミノ酸配列を5~12残基のアミノ配列に分割する、〔23〕から〔34〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔36〕 抗原タンパク質のアミノ酸配列を8~12残基のアミノ配列に分割する、〔23〕から〔34〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔37〕 抗原タンパク質のアミノ酸配列を8~11残基のアミノ配列に分割する、〔23〕から〔34〕のいずれかに記載のポリペプチド。
〔38〕 〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドをコードする核酸。
〔39〕 〔38〕に記載の核酸を含むベクター。
〔40〕 センダイウイルスベクターである、〔39〕に記載のベクター。
〔41〕 〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターを含むワクチン。
〔42〕 抗原タンパク質がヒト免疫不全ウイルスの抗原タンパクに由来する、〔41〕に記載のワクチン。
〔43〕 〔41〕または〔42〕に記載のワクチンを接種する工程により、標的抗原特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導する方法。
〔44〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターの、標的抗原特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導するための使用。
〔45〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターの、標的抗原特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導するための医薬または薬剤の製造のための使用。
〔46〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターを接種する工程を含む、ワクチネーション方法。
〔47〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターであって、それぞれ複数種のポリペプチド、核酸、またはベクターを投与する、〔46〕に記載の方法。
〔48〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターをさらに接種する工程を含む、〔46〕または〔47〕に記載の方法。
〔49〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターを先に接種する、〔48〕に記載の方法。
〔50〕 該他のポリペプチドが、該抗原タンパク質またはその部分ペプチドである、〔48〕または〔49〕に記載の方法。
〔51〕 該他のポリペプチドをコードする核酸を含むベクターが、DNAベクターである、〔48〕から〔50〕のいずれかに記載の方法。
〔53〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターであって、それぞれ複数種のポリペプチド、核酸、またはベクターを投与するための、〔52〕に記載の使用。
〔54〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターをさらに接種する、〔52〕または〔53〕に記載の使用。
〔55〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターを先に接種する、〔54〕に記載の使用。
〔56〕 該他のポリペプチドが、該抗原タンパク質またはその部分ペプチドである、〔54〕または〔55〕に記載の使用。
〔57〕 該他のポリペプチドをコードする核酸を含むベクターが、DNAベクターである、〔54〕から〔56〕のいずれかに記載の使用。
〔59〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターであって、それぞれ複数種のポリペプチド、核酸、またはベクターを投与するための、〔58〕に記載の使用。
〔60〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターをさらに接種する、〔58〕または〔59〕に記載の使用。
〔61〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターを先に接種する、〔60〕に記載の使用。
〔62〕 該他のポリペプチドが、該抗原タンパク質またはその部分ペプチドである、〔60〕または〔61〕に記載の使用。
〔63〕 該他のポリペプチドをコードする核酸を含むベクターが、DNAベクターである、〔60〕から〔62〕のいずれかに記載の使用。
〔65〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチド、該ポリペプチドをコードする核酸、または該核酸を含むベクターであって、それぞれ複数種のポリペプチド、核酸、またはベクターを投与するための、〔64〕に記載の使用。
〔66〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターをさらに接種する、〔64〕または〔65〕に記載の使用。
〔67〕 〔1〕から〔8〕、および〔16〕から〔37〕のいずれかに記載のポリペプチドではない他のポリペプチド、該他のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターを先に接種する、〔66〕に記載の使用。
〔68〕 該他のポリペプチドが、該抗原タンパク質またはその部分ペプチドである、〔66〕または〔67〕に記載の使用。
〔69〕 該他のポリペプチドをコードする核酸を含むベクターが、DNAベクターである、〔66〕から〔68〕のいずれかに記載の使用。
本発明において「ワクチン」とは、抗原に対する免疫反応を惹起させるための組成物を言い、例えば、伝染病や感染症等の予防または治療のために使用される組成物を言う。ワクチンは抗原を含んでいるか、または抗原を発現可能であり、これにより抗原に対する免疫応答を誘導することができる。病原微生物の感染、伝播、および流行の予防または治療のために、本発明のポリペプチド、該ポリペプチドを発現する核酸およびベクターはワクチンとして有用である。このワクチンは、所望の形態で用いることができる。
(i) 所望の標的抗原タンパク質をコードするアミノ酸配列を、MHCクラスIエピトープの典型長を少なくとも有し、MHCクラスIIエピトープの典型長を有しない長さとなるよう分割する工程であって、当該分割アミノ酸配列は互いに重なり合っていてもいなくてもよい工程、
(ii) 当該分割アミノ酸配列を、当該抗原タンパク質の当該アミノ酸配列(すなわちもとのアミノ酸配列)と同一とならないように連結する工程であって、当該分割アミノ酸配列の各連結部にはスペーサーを挟んでも挟まなくてもよい工程、
(iii) 工程(ii)により得られたアミノ酸配列を含むポリペプチドを取得する工程。
(i) 所望の標的抗原タンパク質をコードするアミノ酸配列を、MHCクラスIエピトープの典型長を少なくとも有し、MHCクラスIIエピトープの典型長を有しない長さとなるよう分割する工程であって、当該分割アミノ酸配列は互いに重なり合っていてもいなくてもよい工程、
(ii) 当該分割アミノ酸配列を、当該抗原タンパク質の当該アミノ酸配列(すなわちもとのアミノ酸配列)と同一とならないように連結する工程であって、当該分割アミノ酸配列の各連結部にはスペーサーを挟んでも挟まなくてもよい工程、
(iii) 工程(ii)により得られたアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸を取得する工程。
YPVQQIGGNYVHLPLSPRTLNAWVKLIEEKKFGAEVVPGFQALSEGCTPYDINQMLNCVG...(配列番号1)
YPVQQIGGNYV(配列番号2)
HLPLSPRTLNA(配列番号3)
WVKLIEEKKFG(配列番号4)
AEVVPGFQALS(配列番号5)
EGCTPYDINQM(配列番号6)
.....
YPVQQIGGNYV(配列番号2)
LSPRTLNAWVK(配列番号7)
EKKFGAEVVPG(配列番号8)
LSEGCTPYDIN(配列番号9)
.....
YPVQQIGGNYV(配列番号2)
NYVHLPLSPRT(配列番号10)
PRTLNAWVKLI(配列番号11)
KLIEEKKFGAE(配列番号12)
GAEVVPGFQAL(配列番号13)
QALSEGCTPYD(配列番号14)
PYDINQMLNCV(配列番号15)
.....
YPVQQIGGNYV(配列番号2)
NYVHLPLS(配列番号16)
SPRTLNAWVK(配列番号17)
EEKKFGAEV(配列番号18)
EVVPGFQALSE(配列番号19)
.....
SIVmac239感染サルエイズモデルでの評価のため、SIVmac239 (GenBank Accession No.M33262) のGag CA およびVifタンパクを標的抗原として TCT11(SCaV11と呼ぶ)抗原を設計した。SIVmac239のGag CA(アミノ酸配列 Accession:AAA47632.1 (配列番号21))およびVif(アミノ酸配列 Accession:AAA47634.1 (配列番号22))タンパクのアミノ酸配列をもとにして、これら抗原タンパクのアミノ酸配列を、互いに3アミノ酸が重複する11 merのペプチドに断片化し、これらのペプチド群の順序を並び替えた上で、アラニンをスペーサーとしてタンデムに連結した(SCaV11)(図1)。3アミノ酸の重複は相同組換えを防ぐためである。同様の手順で、標的抗原領域のペプチド開始アミノ酸位置を1アミノ酸ずつシフトさせたタンデム連結抗原を計8種類(SCaV11A~H)設計した(順に配列番号:23~30)。次にこれら抗原の塩基配列のコドンをヒト用に最適化し、さらに相同組換えを防ぐための変異を導入した上で遺伝子全体を化学合成し(Eurofins Genomics社)、プラスミドに搭載した。これらプラスミドをpSCaV11A~H(順に配列番号:31~38)と名付けた。
(1)SCaV11抗原遺伝子搭載F欠失型センダイウイルス作製用プラスミドの構築
SCaV11A抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11A_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCTACCCTGTGCAGCAG-3’(配列番号:39))及びSCaV11A_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAGGCTTTGCCTCCCCTCTGC-3’(配列番号:40))をプライマーとし、KOD-Plus-Ver.2 kitを使用し、94℃ 2分、(98℃ 10秒、55℃ 30秒、68℃ 2.5分)のサイクルを30サイクル行い、その後68℃ 7分で反応させた後、4℃ で維持する条件でPCRを行い、増幅されたSCaV11Aフラグメントをアガロースゲル電気泳動で分離した後、NucleoSpin Gel and PCR Clean-up kit(タカラバイオ)にて精製した。なお、上記プライマーの配列中の大文字はSCaV11抗原遺伝子の配列、小文字はSeVベクターの配列を表す(以下同様)。
同様に、SCaV11C抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11C_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCGTGCAGCAGATCGGAG-3’(配列番号:43))及びSCaV11C_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAAGCAGGAGGTTTCCCTCCCC-3’(配列番号:44))をプライマーとしたPCRによって増幅したフラグメントをpSeV18+/ΔFプラスミドのNotIサイトに挿入してpSeV18+SCaV11C/ΔFプラスミドを得た。
同様に、SCaV11D抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11D_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCCAGCAGATCGGAGGC-3’(配列番号:45))及びSCaV11D_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAGGCTGTTGGGGGTTTCCCTC-3’(配列番号:46))をプライマーとしたPCRによって増幅したフラグメントをpSeV18+/ΔFプラスミドのNotIサイトに挿入してpSeV18+SCaV11D/ΔFプラスミドを得た。
同様に、SCaV11E抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11E_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCCAGATCGGAGGCAATTATG-3’(配列番号:47))及びSCaV11E_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAGGCCTTGGTAGGGGGTTTCC-3’(配列番号:48))をプライマーとしたPCRによって増幅したフラグメントをpSeV18+/ΔFプラスミドのNotIサイトに挿入してpSeV18+SCaV11E/ΔFプラスミドを得た。
同様に、SCaV11F抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11F_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCATCGGAGGCAATTATG-3’(配列番号:49))及びSCaV11F_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAGGCGCCTTTTGTAGGGGG-3’(配列番号:50))をプライマーとしたPCRによって増幅したフラグメントをpSeV18+/ΔFプラスミドのNotIサイトに挿入してpSeV18+SCaV11F/ΔFプラスミドを得た。
同様に、SCaV11G抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11G_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCGGAGGCAATTATGTG-3’(配列番号:51))及びSCaV11G_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAGGCGGCGCCCTTTGTAGGGG-3’(配列番号:52))をプライマーとしたPCRによって増幅したフラグメントをpSeV18+/ΔFプラスミドのNotIサイトに挿入してpSeV18+SCaV11G/ΔFプラスミドを得た。
同様に、SCaV11H抗原遺伝子搭載プラスミドを鋳型として、Not1_SCaV11H_N(5’-ATATgcggccgcgacgccaccATGGCCGGAGGCAATTATGTG-3’(配列番号:53))及びSCaV11H_EIS_Not1_C (5’-ATATGCGGCCGCgatgaactttcaccctaagtttttcttactacggTCAGGCGGCGCCCTTTGTAGGGG-3’(配列番号:54))をプライマーとしたPCRによって増幅したフラグメントをpSeV18+/ΔFプラスミドのNotIサイトに挿入してpSeV18+SCaV11H/ΔFプラスミドを得た。
上記のように作製したSCaV11抗原遺伝子搭載F欠失型センダイウイルス作製用プラスミドpSeV18+SCaV11A/ΔF~pSeV18+SCaV11H/ΔFからのSCaV11抗原遺伝子搭載F欠失型センダイウイルスの作製(再構成)と増幅は、公知の方法(例えばWO2005/071092)を用いて行い、得られたウイルスの名称をそれぞれSeV18+SCaV11A/ΔF、SeV18+SCaV11B/ΔF、SeV18+SCaV11C/ΔF、SeV18+SCaV11D/ΔF、SeV18+SCaV11E/ΔF、SeV18+SCaV11F/ΔF、SeV18+SCaV11G/ΔF、SeV18+SCaV11H/ΔFとした。
単独エピトープ(Gag CA)を発現するワクチン接種後のSIVmac239経静脈接種で、SIV複製が制御されたアカゲサル(SIV controller)の慢性期において、本SCaV11発現センダイウイルス(SeV)ベクターを接種し、誘導されるSIV Gag・Vif抗原特異的T細胞反応を調べた。
非感染アカゲザル6頭に、SCaV11抗原発現ワクチンを接種し、誘導されるSIV抗原特異的T細胞反応を調べた。
サル6頭に、SCaV11A~H抗原(8種類)を各々発現するプラスミドDNA(pcDNA-SCaV11A~H、各5 mg)ワクチンを各々2回ずつ筋注した後、SCaV11A~H抗原(8種類)を各々発現するF欠失型SeVベクター(SeV18+SCaV11A/ΔF~SeV18+SCaV11H/ΔF、各6 x 109 CIU)ワクチンを各々1回ずつ経鼻接種および筋注した(図3)。最後のワクチン接種後1週の血液よりPBMCを分離し、実施例3と同様の方法でSIV Gag・Vif抗原特異的T細胞反応を解析した。
非感染アカゲザル8頭に、SCaV11抗原発現ワクチンを接種し、誘導されるSIV抗原特異的T細胞反応を調べた。
サル8頭に、SCaV11A~H抗原(8種類)を各々発現するプラスミドDNA(pcDNA-SCaV11A~H、各5 mg)ワクチンを各々2回ずつ筋注した後、SCaV11A~H抗原(8種類)を各々発現するF欠失型SeVベクター(SeV18+SCaV11A/ΔF~SeV18+SCaV11H/ΔF、各1x 109 CIU)ワクチンを各々1回ずつ経鼻接種および筋注した(図4)。最後のワクチン接種後1週の血液よりPBMCを分離し、実施例3と同様の方法でSIV Gag・Vif抗原特異的T細胞反応を解析した。また、リンパ節における免疫誘導能を評価するため、3回目のSeVベクターワクチン接種後2週においてリンパ節生検を実施し、同様にSIV Gag・Vif抗原特異的T細胞反応を解析した。
Claims (20)
- MHCクラスIエピトープの同定を要せずに、標的抗原蛋白質特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導することができるポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸を製造する方法であって、
(i) 抗原タンパク質をコードするアミノ酸配列を、8~12残基のアミノ配列に分割する工程であって、該分割アミノ酸配列は互いに重なり合っていてもいなくてもよい工程、
(ii) 該分割アミノ酸配列を、該抗原タンパク質の該アミノ酸配列と同一とならないように連結する工程であって、該分割アミノ酸配列の各連結部にはスペーサーを挟んでも挟まなくてもよい工程、
(iii) 工程(ii)により得られたアミノ酸配列を含むポリペプチドまたは該ポリペプチドをコードする核酸をそれぞれ取得する工程、を含み、
該ポリペプチドは、該抗原タンパク質のアミノ酸配列に含まれる8~12残基のアミノ酸配列を有する多種のペプチドが連結されたポリペプチドである、方法。 - 該8~12残基ペプチドが、該抗原タンパク質における順番とは異なる順番で連結されている、請求項1に記載の方法。
- 該ポリペプチドは、該抗原タンパク質の13残基以上の連続した部分アミノ酸配列を実質的に含まない、請求項1または2に記載の方法。
- 該複数種のペプチドのアミノ酸配列は重なり合っていてもよい、請求項1から3のいずれかに記載の方法。
- 該重なり合いが1~4残基である、請求項4に記載の方法。
- 該連結部のそれぞれにはスペーサーを有していてもよい、請求項1から5のいずれかに記載の方法。
- 該スペーサーが1~4残基のアミノ酸である、請求項6に記載の方法。
- 該8~12残基ペプチドが少なくとも20種連結されている、請求項1から7のいずれかに記載の方法。
- 抗原タンパク質のアミノ酸配列に含まれる8~12残基のアミノ酸配列を有する多種のペプチドを連結したポリペプチドを含む組成物であって、MHCクラスIエピトープの同定を要せずに、標的抗原蛋白質特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導するために用いる組成物。
- 該ポリペプチドが、 該8~12残基ペプチドが該抗原タンパク質における順番とは異なる順番で連結されているポリペプチドである、請求項9に記載の組成物。
- 該ポリペプチドが、 該抗原タンパク質の13残基以上の連続した部分アミノ酸配列を実質的に含まないポリペプチドである、請求項9または10に記載の組成物。
- 該複数種のペプチドのアミノ酸配列は重なり合っていてもよい、請求項9から11のいずれかに記載の組成物。
- 該重なり合いが1~4残基である、請求項12に記載の組成物。
- 該連結部のそれぞれにはスペーサーを有していてもよい、請求項9から13のいずれかに記載の組成物。
- 該スペーサーが1~4残基のアミノ酸である、請求項14に記載の組成物。
- 該ポリペプチドが、 該8~12残基ペプチドが少なくとも20種連結されているポリペプチドである、請求項9から15のいずれかに記載の組成物。
- 請求項9から16のいずれかに記載のポリペプチドをコードする核酸または該核酸を含むベクターを含む組成物であって、MHCクラスIエピトープの同定を要せずに、標的抗原蛋白質特異的CD8陽性T細胞を選択的に誘導するために用いる組成物。
- 該ベクターが センダイウイルスベクターである、請求項17に記載の組成物。
- 請求項9から18のいずれかに記載の組成物からなるワクチン。
- 抗原タンパク質がヒト免疫不全ウイルスの抗原タンパクに由来する、請求項19に記載のワクチン。
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