JP7258362B2 - 炎症抑制用の組成物 - Google Patents
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Description
本願は、炎症抑制用の組成物に関する。
(a)レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域と連結したレポーター遺伝子およびレグナーゼ-1遺伝子を発現する細胞に、候補物質を導入する工程、
(b)前記細胞におけるレポーター遺伝子の発現量を測定する工程、および、
(c)候補物質の非存在下において測定した発現量と比較して発現量を増加させる候補物質を、炎症抑制薬として選択する工程、
を含む、方法を提供する。
(a-1)配列番号1の第206位~第242位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第233位~第235位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号1の第234位~第270位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第241位~第243位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択される。
(b-1)配列番号1の第399位~第439位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第426位~第428位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号1の第427位~第467位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第438位~第440位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択される。
(a-1’)配列番号2の第171位~第207位のヌクレオチド配列のうち、配列番号2の第198位~第200位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(a-2’)配列番号2の第199位~第235位のヌクレオチド配列のうち、配列番号2の第206位~第208位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択される。
(b-1’)配列番号2の第354位~第388位のヌクレオチド配列のうち、配列番号2の第381位~第383位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(b-2’)配列番号2の第382位~第416位のヌクレオチド配列のうち、配列番号2の第387位~第389位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択される。
ある実施態様では、(a-1’)、(a-2’)、(b-1’)および(b-2’)のオリゴヌクレオチドは、各々、配列番号11(5'-aatgtgtatcaacagggtgatca-3')、配列番号12(5'-cttaaatgacagagatacaatgt-3')、配列番号13(5'-atggtgcctaactagccggt-3')、配列番号14(5'-cctcagagagcaggcacatg-3')と、少なくとも約60%、約70%、約80%、約85%、約90%、約95%、約96%、約97%、約98%または約99%以上の配列同一性を有する。別の実施態様では、(a-1’)、(a-2’)、(b-1’)および(b-2’)のオリゴヌクレオチドは、各々、配列番号11~14のヌクレオチド配列において、1個または数個、例えば、2個もしくは3個のヌクレオチドが欠失、置換、付加または挿入されたヌクレオチド配列からなる。ある実施態様では、(a-1’)、(a-2’)、(b-1’)および(b-2’)のオリゴヌクレオチドは、各々、配列番号10~14と約90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を有する。ある実施態様では、(a-1’)、(a-2’)、(b-1’)および(b-2’)のオリゴヌクレオチドは、各々、配列番号11~14のヌクレオチド配列を含む。ある実施態様では、(a-1’)、(a-2’)、(b-1’)および(b-2’)のオリゴヌクレオチドは、各々、配列番号11~14のヌクレオチド配列からなる。
破線は隣接する構造との結合点である)。
ある実施態様では、アンチセンス核酸は一本鎖DNAである。
ある態様では、炎症を抑制するための、レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質が提供される。
ある態様では、炎症を抑制するための、レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質の使用が提供される。
ある態様では、炎症を抑制するための医薬組成物の製造における、レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質の使用が提供される。
ある態様では、炎症を伴う疾患を処置および/または予防するための、レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質が提供される。
ある態様では、炎症を伴う疾患を処置および/または予防するための、レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質の使用が提供される。
ある態様では、炎症を伴う疾患を処置および/または予防するための医薬組成物の製造における、レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質の使用が提供される。
上記方法の工程(c)では、候補物質の非存在下において測定した発現量と比較して発現量を増加させる候補物質を、炎症抑制薬として選択する。レポーター遺伝子の発現を、候補物質の非存在下において測定した発現量と比較して、例えば、約10%以上、好ましくは約20%以上、より好ましくは約30%以上、さらに好ましくは約50%以上増加させる候補物質を、炎症抑制薬として選択し得る。
[1]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質を含む、炎症抑制用の組成物。
[2]炎症を伴う疾患を処置および/または予防するための、第1項に記載の組成物。
[3]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質を含む、炎症を伴う疾患を処置および/または予防するための組成物。
[4]炎症を伴う疾患を処置するための、第2項または第3項に記載の組成物。
[5]炎症を伴う疾患が自己免疫性疾患、敗血症性ショックまたは移植片拒絶である、第2項~第4項のいずれかに記載の組成物。
[6]炎症を伴う疾患が自己免疫性疾患である、第2項~第5項のいずれかに記載の組成物。
[7]自己免疫性疾患が、多発性硬化症、自己免疫性脳脊髄炎、関節リウマチまたは全身性エリテマトーデスである、第6項に記載の組成物。
[8]自己免疫性疾患が多発性硬化症である、第6項または第7項に記載の組成物。
[9]炎症を伴う疾患が敗血症性ショックである、第2項~第5項のいずれかに記載の組成物。
[10]敗血症性ショックが急性呼吸窮迫症候群、特発性肺線維症または間質性肺炎である、第9項に記載の組成物。
[11]敗血症性ショックが急性呼吸窮迫症候群である、第9項または第10項に記載の組成物。
[13]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域が配列番号5のヌクレオチド配列を含む、第1項~第12項のいずれかに記載の組成物。
[14]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域が配列番号1のヌクレオチド配列を含む、第1項~第13項のいずれかに記載の組成物。
[15]ステムループ構造を破壊する物質が、ステムループ構造を形成するヌクレオチド配列に結合するオリゴヌクレオチドである、第1項~第14項のいずれかに記載の組成物。
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号1の第206位~第242位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第233位~第235位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号1の第234位~第270位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第241位~第243位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号1の第399位~第439位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第426位~第428位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号1の第427位~第467位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第438位~第440位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、第1項~第15項のいずれかに記載の組成物。
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号1の第206位~第242位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第233位~第235位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号7と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号1の第234位~第270位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第241位~第243位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号8と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号1の第399位~第439位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第426位~第428位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号9と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号1の第427位~第467位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第438位~第440位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号10と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、第1項~第16項のいずれかに記載の組成物。
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号1の第206位~第242位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第233位~第235位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号7において1個、2個または3個のヌクレオチドが欠失、置換、付加または挿入されたヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号1の第234位~第270位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第241位~第243位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号8において1個、2個または3個のヌクレオチドが欠失、置換、付加または挿入されたヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド、
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号1の第399位~第439位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第426位~第428位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号9において1個、2個または3個のヌクレオチドが欠失、置換、付加または挿入されたヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号1の第427位~第467位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第438位~第440位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号10において1個、2個または3個のヌクレオチドが欠失、置換、付加または挿入されたヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド、
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、第1項~第16項のいずれかに記載の組成物。
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号7のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号8のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号9のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号10のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、第1項~第18項のいずれかに記載の組成物。
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号7のヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号8のヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号9のヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号10のヌクレオチド配列からなるオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、第1項~第19項のいずれかに記載の組成物。
[22]オリゴヌクレオチドが15個~27個のヌクレオチドからなる、第15項~第21項のいずれかに記載の組成物。
[23]オリゴヌクレオチドが18個~25個のヌクレオチドからなる、第15項~第22項のいずれかに記載の組成物。
[24]オリゴヌクレオチドが20個~23個のヌクレオチドからなる、第15項~第23項のいずれかに記載の組成物。
[26]第1のオリゴヌクレオチドが、(a-2)のオリゴヌクレオチドである、第16項~第24項のいずれかに記載の組成物。
[27]第2のオリゴヌクレオチドが、(b-1)のオリゴヌクレオチドである、第16項~第26項のいずれかに記載の組成物。
[28]第2のオリゴヌクレオチドが、(b-2)のオリゴヌクレオチドである、第16項~第26項のいずれかに記載の組成物。
[29]第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せを含む、第16項~第28項のいずれかに記載の組成物。
[30]第1のオリゴヌクレオチドを含む第16項~第28項のいずれかに記載の組成物と、第2のオリゴヌクレオチドを含む第16項~第28項のいずれかに記載の組成物の組合せ。
[31](a-1)のオリゴヌクレオチドと(b-1)のオリゴヌクレオチドを含む、第29項に記載の組成物または第30項に記載の組合せ。
[32](a-1)のオリゴヌクレオチドと(b-2)のオリゴヌクレオチドを含む、第29項に記載の組成物または第30項に記載の組合せ。
[33](a-2)のオリゴヌクレオチドと(b-1)のオリゴヌクレオチドを含む、第29項に記載の組成物または第30項に記載の組合せ。
[34](a-2)のオリゴヌクレオチドと(b-2)のオリゴヌクレオチドを含む、第29項に記載の組成物または第30項に記載の組合せ。
(a)レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域と連結したレポーター遺伝子およびレグナーゼ-1遺伝子を発現する細胞に、候補物質を導入する工程、
(b)前記細胞におけるレポーター遺伝子の発現量を測定する工程、および、
(c)候補物質の非存在下において測定した発現量と比較して発現量を増加させる候補物質を、炎症抑制薬として選択する工程、
を含む、方法。
[36]炎症を伴う疾患の処置および/または予防薬のスクリーニング方法であって、以下の工程
(a)レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域と連結したレポーター遺伝子およびレグナーゼ-1遺伝子を発現する細胞に、候補物質を導入する工程、
(b)前記細胞におけるレポーター遺伝子の発現量を測定する工程、および、
(c)候補物質の非存在下において測定した発現量と比較して発現量を増加させる候補物質を、炎症を伴う疾患の処置および/または予防薬として選択する工程、
を含む、方法。
[37]炎症を伴う疾患が自己免疫性疾患、敗血症性ショックまたは移植片拒絶である、第36項に記載のスクリーニング方法。
[38]炎症を伴う疾患が自己免疫性疾患である、第36項または第37項に記載のスクリーニング方法。
[39]自己免疫性疾患が、多発性硬化症、自己免疫性脳脊髄炎、関節リウマチまたは全身性エリテマトーデスである、第38項に記載のスクリーニング方法。
[40]自己免疫性疾患が多発性硬化症である、第38項または第39項に記載のスクリーニング方法。
[41]炎症を伴う疾患が敗血症性ショックである、第36項に記載のスクリーニング方法。
[42]敗血症性ショックが急性呼吸窮迫症候群、特発性肺線維症または間質性肺炎である、第41項に記載のスクリーニング方法。
[43]敗血症性ショックが急性呼吸窮迫症候群である、第41項または第42項に記載のスクリーニング方法。
[44]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域が、配列番号5のヌクレオチド配列を含む、第35項~第43項のいずれかに記載のスクリーニング方法。
[45]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域が、配列番号1のヌクレオチド配列を含む、第35項~第44項のいずれかに記載のスクリーニング方法。
[46]レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域に存在するステムループ構造に基づいて候補物質を設計する工程をさらに含む、第35項~第45項のいずれかに記載のスクリーニング方法。
上記の説明は、すべて非限定的なものであり、添付の特許請求の範囲において定義される本発明の範囲から逸脱せずに、変更することができる。さらに、下記の実施例は、すべて非限定的な実施例であり、本発明を説明するためだけに供されるものである。
配列番号2のヌクレオチド配列を有するマウスレグナーゼ-1(Zc3h12a)3’UTRを使用した。図4に示す通り、3’UTRのステムループ非形成配列(配列番号2の第244位~第379位または第400位~第731位)またはステムループ形成配列(配列番号2の第191位~第211位または第378位~第392位)の断片と、その下流にb-グロビンの3’UTRを含むpGL3ルシフェラーゼレポータープラスミド(Promega)を作製した。
次いで、各pGL3レポータープラスミドを、レグナーゼ-1(Reg-1)もしくはそのヌクレアーゼ活性欠損変異体(D141N)の発現プラスミド、または空のプラスミド(対照)と共に、HeLa細胞に導入した。24時間培養した後、細胞を溶解し、溶解物のルシフェラーゼ活性を Dual-luciferase Reporter Assay system(Promega)で測定した。内部対照として、ウミシイタケルシフェラーゼをコードする遺伝子を同時に導入した。
HEK293細胞に、マウスレグナーゼ-1の3’UTR全長を有するpGL3ルシフェラーゼレポータープラスミドおよび図5に示すMO(GeneTools)を、Endo-Porter(GeneTools)を使用して導入した。導入の24時間後に細胞を回収し、細胞溶解物のルシフェラーゼ活性を Dual-luciferase Reporter Assay system(Promega)で測定した。内部対照として、ウミシイタケルシフェラーゼをコードする遺伝子を同時に導入した。
(A)BMMを12ウェルプレートに播種し、実施例2に記載の191-210MOおよび378-392MO(各MOにつき、2μM)を、Endo-porter(6μl/ウェル)(Gene Tools, LLC)を使用して導入した。24時間後、細胞をLPS(10ng/ml)またはTNFα(10ng/ml)でそれぞれ2時間処理した。細胞を回収し、RNAを抽出した。IL-6、TNFα、IL-1β、レグナーゼ-1のmRNA量をQPCRにより測定した。
(B)上記の通りMOで処理し、LPSまたはTNFαで処理したBMMを溶解し、抗レグナーゼ-1抗体を用いるウェスタンブロットにより、レグナーゼ-1タンパク質のレベルを測定した。
ペントバルビタールの腹腔内注射により、マウスを麻酔した。次いで、実施例2に記載の191-210MOおよび378-392MOと同じヌクレオチド配列を有するビボ-モルフォリノオリゴ(MO)(GeneTools)を、マウスに25μg/MO/匹(20μl/注入)で気管内投与した。24時間後に、ペントバルビタールの腹腔内注射によりマウスを再度麻酔し、LPS(10μg/20μl PBS;リン酸緩衝生理食塩水)を気管内投与した。8時間後に、マウスを安楽死させた。RNAの分析のために、肺のサンプルを、RNAlater (Qiagen) 中、-80℃で使用時まで保存した。RNAを Trizol (Thermo Fisher Scientific) により調製し、IL-6、TNFα、IL-1βとレグナーゼ-1のmRNA量をQPCR分析により測定した。
ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質(MOG)ペプチド (35-55) (ANASPEC Inc) を、PBS中で2μg/uLの濃度に希釈した。完全フロイントアジュバント (Sigma) と希釈したMOGを、1.5mLのエッペンドルフチューブ中で1:1の比で混合した。マイクロチップ付のソニケーターを使用して、超音波処理により乳液を生成させた。乳液の形成は、ビーカーの水面に乳液を一滴落とし、それが拡散せず沈むことにより確認した。形成が不十分である場合は、チューブを氷上で2~3分間冷却し、超音波処理を繰り返した。この乳液200μLを、各マウスの免疫処置に使用した。
ヒト単球様セルラインTHP-1細胞を12ウェルプレートに播種し、PMA(5ng/ml)で48時間処理し、マクロファージへ分化させた。その後、表2に記載の231-245MOおよび424-442MO(各MOにつき、2μM)を、Endo-porter(6μl/ウェル)(Gene Tools, LLC)を使用して導入した。24時間後、細胞をLPS(100ng/ml)で4時間処理した。細胞を回収し、RNAを抽出した。ヒトIL-6、TNFα、IL-1β、レグナーゼ-1(Zc3h12a)のmRNA量をQPCRにより測定した。
Claims (9)
- 炎症抑制用の組成物であって、
レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域におけるステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質を含み、
ステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質が、ステムループ構造を形成するヌクレオチド配列に結合するオリゴヌクレオチドであり、
ステムループ構造が、配列番号1の第231位~第245位に相当する領域で形成される第1のステムループ構造および配列番号1の第424位~第442位に相当する領域で形成される第2のステムループ構造から選択される少なくとも1つのステムループ構造である、組成物。 - レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域が配列番号5のヌクレオチド配列を含む、請求項1に記載の組成物。
- ステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質が、
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号1の第206位~第242位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第233位~第235位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号1の第234位~第270位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第241位~第243位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号1の第399位~第439位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第426位~第428位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号1の第427位~第467位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第438位~第440位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、10個~30個のヌクレオチドからなるオリゴヌクレオチド、
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、請求項1または2に記載の組成物。 - ステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質が、
(a)第1のオリゴヌクレオチドであって、
(a-1)配列番号1の第206位~第242位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第233位~第235位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号7と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド、および、
(a-2)配列番号1の第234位~第270位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第241位~第243位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号8と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、
(b)第2のオリゴヌクレオチドであって、
(b-1)配列番号1の第399位~第439位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第426位~第428位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号9と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド、および、
(b-2)配列番号1の第427位~第467位のヌクレオチド配列のうち、配列番号1の第438位~第440位を含む連続する10個~30個のヌクレオチドからなる配列に結合する、配列番号10と90%以上の同一性を有するヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチド
から選択されるオリゴヌクレオチド、または、
(c)第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せ、
である、請求項1~3のいずれかに記載の組成物。 - ステムループ構造を破壊する少なくとも1つの物質が、第1のオリゴヌクレオチドと第2のオリゴヌクレオチドの組合せである、請求項1~4のいずれかに記載の組成物。
- 自己免疫性疾患または敗血症性ショックを処置するための、請求項1~5のいずれかに記載の組成物。
- 多発性硬化症を処置するための、請求項1~6のいずれかに記載の組成物。
- 急性呼吸窮迫症候群、特発性肺線維症または間質性肺炎を処置するための、請求項1~6のいずれかに記載の組成物。
- 炎症抑制薬のスクリーニング方法であって、以下の工程
(a)レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域と連結したレポーター遺伝子およびレグナーゼ-1遺伝子を発現する細胞に、候補物質を導入する工程、
(b)前記細胞におけるレポーター遺伝子の発現量を測定する工程、および、
(c)候補物質の非存在下において測定した発現量と比較して発現量を増加させる候補物質を、炎症抑制薬として選択する工程、
を含み、
レグナーゼ-1 mRNAの3’非翻訳領域が、配列番号5のヌクレオチド配列を含む、
方法。
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