JP7248658B2 - バリアントRNAi - Google Patents
バリアントRNAi Download PDFInfo
- Publication number
- JP7248658B2 JP7248658B2 JP2020516666A JP2020516666A JP7248658B2 JP 7248658 B2 JP7248658 B2 JP 7248658B2 JP 2020516666 A JP2020516666 A JP 2020516666A JP 2020516666 A JP2020516666 A JP 2020516666A JP 7248658 B2 JP7248658 B2 JP 7248658B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- vector
- nucleic acid
- aav
- promoter
- virus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
- A61K35/761—Adenovirus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/50—Physical structure
- C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
- C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/10011—Adenoviridae
- C12N2710/10023—Virus like particles [VLP]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/10011—Adenoviridae
- C12N2710/10041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/10043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/16043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
- C12N2740/15041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2740/15043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
- C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
本出願は、2017年9月22日付けで出願された米国仮出願第62/561,843号の優先権の利益を主張し、その内容は、その全体が参照によって本明細書に組み入れられる。
ASCIIテキストファイルでの以下の提出物の内容は、参照によってその全体が本明細書に組み入れられる:配列リストのコンピューター読み取り可能な形態(CRF)(ファイル名:159792014740SeqList.txt、記録された日付:2018年9月20日、サイズ:19KB)。
本明細書で記載または言及される技術および手順は、一般的によく認識され、当業者により従来の手法を使用して一般的に採用されており、このような手法は、例えば、Molecular Cloning:A Laboratory Manual(Sambrookら、第4版、Cold Spring Harbor Laboratory Press、Cold Spring Harbor、N.Y.、2012);Current Protocols in Molecular Biology(F.M.Ausubelら編、2003);Methods in Enzymologyのシリーズ(Academic Press,Inc.);PCR 2:A Practical Approach(M.J.MacPherson,B.D.HamesおよびG.R.Taylor編、1995);Antibodies,A Laboratory Manual(HarlowおよびLane編、1988);Culture of Animal Cells:A Manual of Basic Technique and Specialized Applications(R.I.Freshney、第6版、J.Wiley and Sons、2010);Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait編、1984);Methods in Molecular Biology、Humana Press;Cell Biology:A Laboratory Notebook(J.E.Cellis編、Academic Press、1998);Introduction to Cell and Tissue Culture(J.P.MatherおよびP.E.Roberts、Plenum Press、1998);Cell and Tissue Culture:Laboratory Procedures(A.Doyle,J.B.Griffiths、およびD.G.Newell編、J.Wiley and Sons、1993~8);Handbook of Experimental Immunology(D.M.WeirおよびC.C.Blackwell編、1996);Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells(J.M.MillerおよびM.P.Calos編、1987);PCR:The Polymerase Chain Reaction、(Mullisら編、1994);Current Protocols in Immunology(J.E.Coliganら編、1991);Short Protocols in Molecular Biology(Ausubelら編、J.Wiley and Sons、2002);Immunobiology(C.A.Janewayら、2004);Antibodies(P.Finch、1997);Antibodies:A Practical Approach(D.Catty.編、IRL Press、1988~1989);Monoclonal Antibodies:A Practical Approach(P.ShepherdおよびC.Dean編、Oxford University Press、2000);Using Antibodies:A Laboratory Manual(E.HarlowおよびD.Lane、Cold Spring Harbor Laboratory Press、1999);The Antibodies(M.ZanettiおよびJ.D.Capra編、Harwood Academic Publishers、1995);およびCancer:Principles and Practice of Oncology(V.T.DeVitaら編、J.B.Lippincott Company、2011)に記載の広く利用されている手法である。
「ベクター」は、本明細書で使用される場合、インビトロまたはインビボのいずれかで宿主細胞に送達しようとする核酸を含む組換えプラスミドまたはウイルスを指す。
一部の態様において、本発明は、ハンチントン病の処置のための、htt RNAを標的化する改善されたRNAiを提供する。一部の実施形態において、RNAiは、低分子阻害性RNA(siRNA)、マイクロRNA(miRNA)、または小ヘアピンRNA(shRNA)である。低分子阻害性または干渉RNA(siRNA)は、長さがおよそ19~25(例えば、19~23)塩基対の、細胞中でRNAiを誘導する二本鎖RNA分子として当業界で公知である。小ヘアピンRNA(shRNA)は、短いループ(例えば、約4~11ヌクレオチド)によって連結された二本鎖RNAのおよそ19~25(例えば、19~23)塩基対を含む、細胞中でRNAiを誘導するRNA分子として当業界で公知である。一部の実施形態において、RNAiは、第1の鎖および第2の鎖を含み、a)第1の鎖および第2の鎖は、二重鎖を形成し;b)第1の鎖は、ガイド領域を含み、ガイド領域は、核酸配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)または5’-AGUCGGUGUGGUUGACAAGCA-3’(配列番号7)を含み;c)第2の鎖は、非ガイド領域を含む。一部の実施形態において、ガイド領域の核酸は、核酸配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)を含み、非ガイド領域は、配列5’-CGGGUCCAAGAUGGACGGCCA-3’(配列番号2)を含む。他の実施形態において、ガイド領域の核酸は、核酸配列5’-AGUCGGUGUGGUUGACAAGCA-3’(配列番号7)を含み、非ガイド領域は、配列5’-UGCUUGUCAACCACACCGACU-3’(配列番号8)を含む。
ハンチントン病(HD)は、ハンチンチン遺伝子(HTT)のエクソン1におけるCAGリピートの拡大によって引き起こされる遺伝性神経変性疾患である。結果生じたN末端領域中のポリグルタミン鎖の伸長は、突然変異ハンチンチンタンパク質(mHtt)に毒性の機能獲得をもたらす。mHttの毒性は、不溶性mHttを含有する凝集体の形成、転写調節異常、およびタンパク質ホメオスタシスにおける不安定さに起因する可能性があり、これらは全て、ニューロンの死によって引き起こされる可能性がある(Saudouら(1998)Cell、95:55~66;Zuccatoら(2003)Nat.Genet.35:76~83;Schaffarら(2004)Mol.Cell.15:95~105;Bennら、(2008)J.Neurosci.28:10720~10733)。HDを有する患者における病理学的所見としては、皮質が薄くなること、および線条体ニューロンの著しい進行性消失が挙げられる(Rosasら、(2002)Neurology 58:695~701)。疾患の発病は、典型的には、人生の30代から40代の間に起こり、症状としては、舞踏病に似た動き、協調の損失、進行性認知症、および他の精神医学的障害が挙げられる(Vonsattelら、(1985)J.Neuropathol.Exp.Neurol.44:559~577)。ほとんどの場合、症状は、30歳から40歳の間に、運動技能、認知、および人格の潜行性の崩壊を伴って出現し始める。時間が経つにつれて、これらは、ぎくしゃくしたコントロール不可能な動きおよび筋肉のコントロールの損失、認知症、ならびにうつ病などの精神医学的な疾患、攻撃性、不安、ならびに強迫行動に進む。典型的には、症状発病から10~15年後に死に至る。HDのケースの10%未満は、より速い疾患の進行を特徴とする疾患の若年発症型を含む。米国人10,000人中およそ1人が、HDを有すると考えられる。
一部の態様において、本発明は、哺乳動物におけるハンチントン病を処置するための方法および組成物であって、本発明の開示の医薬組成物(例えば、本発明の開示のウイルス粒子を含む医薬組成物)を哺乳動物に投与することを含む、方法および組成物を提供する。一部の態様において、本発明は、ハンチントン病を有する哺乳動物におけるhttの発現を阻害するための方法および組成物であって、本発明の開示の医薬組成物(例えば、本発明の開示のウイルス粒子を含む医薬組成物)を哺乳動物に投与することを含む、方法および組成物を提供する。一部の態様において、本発明は、ハンチントン病を有する哺乳動物の細胞におけるhttの蓄積を阻害するための方法および組成物であって、本発明の開示の医薬組成物(例えば、本発明の開示のウイルス粒子を含む医薬組成物)を哺乳動物に投与することを含む、方法および組成物を提供する。
本発明は、本明細書に記載のRNAiの発現のための発現コンストラクト、ベクターおよびウイルス粒子を提供する。
本発明は、とりわけ、本発明の開示のRNAiをコードする核酸を含む組換えウイルス粒子、加えて、哺乳動物における疾患または障害;例えばハンチントン病を処置するためのそれらの使用方法を提供する。
本発明は、本明細書で開示されるRNAiを含むウイルス粒子を提供する。一部の実施形態において、本発明は、本明細書で開示される本発明のRNAiを送達するためのウイルス粒子を提供する。例えば、本発明は、哺乳動物において疾患または障害を処置するためのRNAiを送達するための、組換えウイルス粒子を使用する方法;例えば、HDを処置するためのRNAiを含むrAAV粒子を使用する方法を提供する。一部の実施形態において、組換えウイルス粒子は、組換えAAV粒子である。一部の実施形態において、ウイルス粒子は、1または2つのITRが隣接する本発明の開示のRNAiの配列を含む核酸を含む組換えAAV粒子である。核酸は、AAV粒子中にキャプシド化されている。またAAV粒子は、キャプシドタンパク質も含む。一部の実施形態において、核酸は、転写方向で構成要素に作動可能に連結された目的のコード配列(例えば、本発明の開示のRNAiの核酸)、転写開始および終結配列を包含する制御配列を含み、それにより発現カセットが形成される。発現カセットは、5’および3’末端に少なくとも1つの機能的なAAVのITR配列を有する。「機能的なAAVのITR配列」は、AAVビリオンのレスキュー、複製およびパッケージ化を目的としたITR配列機能を意味する。全て参照によってそれらの全体が本明細書に組み入れられる、Davidsonら、PNAS、2000、97(7)3428~32;Passiniら、J.Virol.、2003、77(12):7034~40;およびPechanら、Gene Ther.、2009、16:10~16を参照されたい。本発明の一部の態様を実施するために、組換えベクターは、少なくともキャプシド化に必須なAAVの配列の全て、およびrAAVによる感染のための物理的構造を含む。本発明のベクターで使用するためのAAVのITRは、野生型ヌクレオチド配列を有していなくてもよく(例えば、Kotin,Hum.Gene Ther.、1994、5:793~801で説明されている通り)、ヌクレオチドの挿入、欠失または置換によって変更されてもよく、またはAAVのITRは、数々のAAV血清型のいずれかからから誘導されてもよい。40種を超えるAAV血清型がこれまでに知られており、新しい血清型および既存の血清型のバリアントが同定され続けている。Gaoら、PNAS、2002、99(18):11854~6;Gaoら、PNAS、2003、100(10):6081~6;およびBossisら、J.Virol.、2003、77(12):6799~810を参照されたい。あらゆるAAV血清型の使用が、本発明の範囲内であるとみなされる。一部の実施形態において、rAAVベクターは、これらに限定されないが、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAVrh8、AAVrh8R、AAV9、AAV10、AAVrh10、AAV11、AAV12、AAV2R471A、AAV DJ、ヤギAAV、ウシAAV、またはマウスAAVキャプシド血清型ITRなどのAAV血清型から誘導されたベクターである。一部の実施形態において、AAVにおける核酸は、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAVrh8、AAVrh8R、AAV9、AAV10、AAVrh10、AAV11、AAV12、AAV2R471A、AAV DJ、ヤギAAV、ウシAAV、またはマウスAAVキャプシド血清型ITRなどのITRを含む。一部の実施形態において、AAVにおける核酸は、本明細書に記載のRNAiをさらにコードする。例えば、AAVにおける核酸は、本明細書において予期されるあらゆるAAV血清型の少なくとも1つのITRを含んでいてもよく、ガイド領域を含む1つの鎖および非ガイド領域を含む別の鎖を含むRNAiをさらにコードしていてもよい。一実施形態において、AAVにおける核酸は、あらゆるAAV血清型の少なくとも1つのITRを含んでいてもよく、配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)を含む第1の核酸を含む第1の鎖および配列5’-CGGGUCCAAGAUGGACGGCCA-3’(配列番号2)を含む第2の核酸を含む第2の鎖を含むRNAiをさらにコードしていてもよい。一部の実施形態において、AAVにおける核酸は、5’から3’へ、以下:ITR(例えば、AAV2のITR)、プロモーター、本明細書で開示されるRNAiをコードする核酸、ポリアデニル化シグナル、ならびにAAVのITR(例えば、AAV2のITR)をコードする核酸を含む。一部の実施形態において、AAVにおける核酸は、5’から3’へ、以下:ITR(例えば、AAV2のITR)、プロモーター、配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)を含む第1の核酸を含む第1の鎖および配列5’-CGGGUCCAAGAUGGACGGCCA-3’(配列番号2)を含む第2の核酸を含む第2の鎖を含むRNAiをコードする核酸、ポリアデニル化シグナル、ならびにAAVのITR(例えば、AAV2のITR)をコードする核酸を含む。一部の実施形態において、AAVにおける核酸は、5’から3’へ、以下:ITR(例えば、AAV2のITR)、CBAプロモーター、本明細書で開示されるRNAiをコードする核酸、ポリアデニル化シグナル(例えば、ウシ成長ホルモンのポリA)、ならびにAAVのITR(例えば、AAV2のITR)をコードする核酸を含む。一部の実施形態において、AAVにおける核酸は、5’から3’へ、以下:ITR(例えば、AAV2のITR)、CBAプロモーター、イントロン(例えば、キメライントロン)、配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)を含む第1の核酸を含む第1の鎖および配列5’-CGGGUCCAAGAUGGACGGCCA-3’(配列番号2)を含む第2の核酸を含む第2の鎖を含むRNAiをコードする核酸、ポリアデニル化シグナル(例えば、ウシ成長ホルモンのポリA)、およびAAVのITR(例えば、AAV2のITR)の全部または機能的な部分をコードする核酸を含む。一部の実施形態において、第1の鎖および第2の鎖は二重鎖を形成する。一部の実施形態において、第1の鎖は、リンカーによって第2の鎖に連結されている。一部の実施形態において、リンカーは、配列番号13の核酸配列を含む。
rAAV粒子は、当業界において公知の方法を使用して生産することができる。例えば、米国特許第6,566,118号;6,989,264号;および6,995,006号を参照されたい。本発明の実施において、rAAV粒子を生産するための宿主細胞としては、哺乳類細胞、昆虫細胞、植物細胞、微生物および酵母が挙げられる。宿主細胞はまた、AAVベクターゲノムが安定して維持される宿主細胞またはプロデューサー細胞中でAAVのrepおよびcap遺伝子が安定して維持されるパッケージング細胞であってもよい。例示的なパッケージングおよびプロデューサー細胞は、293、A549またはHeLa細胞から誘導される。AAVベクターは、当業界において公知の標準的な技術を使用して精製され、製剤化される。
本明細書に記載の方法で使用するためのキットまたは製造品も提供される。態様において、キットは、好適なパッケージ中に、本明細書に記載の組成物(例えば、本発明の開示の組換えウイルス粒子、例えば本発明の開示のRNAiをコードする核酸を含むrAAV粒子)を含む。本明細書に記載の組成物(例えば線条体内用の組成物)のための好適なパッケージは、当業界において公知であり、例えば、バイアル(例えば密封バイアル)、容器、アンプル、ボトル、ジャー、フレキシブルなパッケージ(例えば、密封したマイラーまたはプラスチックバッグ)などが挙げられる。これらの製造品は、さらに滅菌および/または密封してもよい。
RNA干渉(RNAi)は、多くのヒト疾患の処置のためのアプローチを提供する。しかしながら、RNAiベースの療法の安全性は、オフターゲットの遺伝子サイレンシングとして公知の作用である、意図されないmRNAに結合してそれらの発現を低減する低分子阻害性RNA(siRNA)の能力によって妨げられる可能性がある。オフターゲティングは主として、シード領域(低分子RNAのヌクレオチド2~8)が意図されないmRNAの3’-UTR中の配列と対合して、それらの転写物の翻訳の抑制および不安定化を指示するときに起こる。これまで、ほとんどの治療的RNAi配列は、主として遺伝子サイレンシング効能に関して選択され、安全性に関しては後で評価される。最小のオフターゲット能を有する2つのsiRNA(すなわち、全ての公知のヒトおよびアカゲザル3’-UTR内におけるシード相補体を欠くもの)を生成して、優性神経変性障害であるハンチントン病(HD)を処置した。このsiRNAは、低いインシリコのオフターゲットプロファイルを有するマウス脳において有力なハンチンチンのサイレンシングを実証する(表1、図1A)。1つの配列(207)を、HDのYAC128マウスモデルにおける行動表現型を回復させるその能力について試験した。AAV2/1-miRNA-Htt-207の線条体への送達は、YAC128マウスにおいて、脳中のHttのmRNAおよびタンパク質レベルを低減するだけでなく、異常な行動プロファイルも修正し、高いガイド鎖活性および正確な5’プロセシングを実証し、オフターゲット作用の可能性を最小化する。
YAC128HDマウスの線条体においてHTTタンパク質レベルを低減させるAAV2/1-miRNA-206および207の能力を試験した。成体YAC128マウスに、AAV2/1-miRNA-Htt206(1e10vg/部位)またはAAV2/1-miRNA-Htt207(1e10vg/部位)、またはAAV2/1-CTL3(非コードmiRNA対照)(1e10vg/部位)の両側の線条体内注射を行った。AAV注射後の1カ月に、動物を殺し、PBSで潅流した。組織学および生化学分析のために脳を収集した。生化学分析のために、1つの半球の線条体領域を顕微解剖し、液体窒素中で急速冷凍した。突然変異ヒトおよびマウスHttのmRNAおよびHTTタンパク質の線条体のレベルを、それぞれQPCRおよびウェスタンブロットによって評価した。突然変異ヒトHttおよびマウスHttのmRNAは、CTL3対照動物と比較した場合、AAV2/1-miRNA-Htt 206およびAAV2/1-miRNA-Htt 207が注射されたマウスにおいて有意に低減した(図3A)。PPIAは、全てのQPCRアッセイで正規化の対照遺伝子として役立てた。突然変異ヒトおよびマウスHTTタンパク質は、CTL3対照動物と比較した場合、全てのAAV2/1-miRNA-Httが注射されたマウスにおいて有意に低減し、全ての処置にわたり同程度の低減(およそ50%、p<0.05)を記録した(図3B)。ベータ-チューブリンを全てのウェスタンブロットのための正規化の対照遺伝子として役立てた。
AAV2/1-miRNA-Htt-207の線条体への送達の、YAC128マウスにおける異常な行動表現型を修正する能力を評価した。また、HDのYAC128マウスモデルに存在するよく特徴付けられた表現型の欠陥に対する、突然変異Httのレベルの低減を媒介したAAV2/1-miRNA-Htt207の影響も検査した。年齢を適合させた(3月齢)YAC128およびFVB野生型同腹子マウスに、AAV2/1-miRNA-Htt-207(2e10vg/部位)またはAAV2/1-CTL3対照ベクター(2e10vg/部位)のいずれかの両側の線条体内注射を行った。マウスに行動試験を行い、処置の3カ月後に屠殺した。脳ホモジネートのウェスタンブロット分析から、突然変異ヒトHTTタンパク質のレベルが、AAV2/1-CTL3で処置した対照と比較した場合、AAV2/1-miRNA-Htt-207が注射されたYAC128およびFVB野生型同腹子マウスの線条体を有意に低減させたことが示された(およそ50%の低減、p<0.01)。この研究において、マウスHTTタンパク質レベルは有意に低減しなかった(図5Aおよび5B)。リアルタイム定量PCR分析から、mRNAレベルにおける同程度の低減が示された(図5Cおよび5D)。
YAC128マウスを、AAV2/1-miRNA-Htt206またはAAV2/1-miRNA-Htt207で頭蓋内注射により処置した。処置後、線条体を除去し、全RNAを単離した。NEBNext低分子RNAライブラリープレップセット(New England Biolabs)を使用して低分子RNAシーケンシングライブラリーを構築し、Illumina MiSeq機器でシーケンシングを実行した。各処置につき2匹の別個のマウスからのサンプルを分析した。ここで全ての内因性配列を含む全てのmiRNAリードが、各処置ベクターにつき全てのガイドおよびパッセンジャーリードと同様に示される。この実験において、AAV2/1-miRNA-Htt202Tベクターは、これまでにシーケンシングされているため、それによる処置が対照として包含された。各ガイドおよびパッセンジャー鎖の予測される開始位置のパーセントは、>99%であり、207ベクターは、76.1%および79.3%の高いガイド:パッセンジャー鎖の比率を有していた。
207miRHtt発現カセットは、自己相補的ベクターゲノムとしてパッケージ化することができる。これを達成するために、ITRプラスミドは、サイズがわずか2.3kbになるように設計され、それにより、4.6kbの二量体ベクターのパッケージ化が容易になる。4.6kbは、AAVベクターのパッケージ化容量である。ITRプラスミドは、図8に描写されたように、5’WT ITRおよび突然変異D欠失、短縮3’ITR(ΔITR)を有するように設計することができる。パッケージ化できる予測のベクターゲノムは、自己相補的なベクターゲノムであり、これは、3165bpであると予想され、5’および3’WT ITR、ならびに第3の内部デルタITR(例えば、キメライントロン)を含有すると予想される。加えて、一部の単量体ベクターゲノムがパッケージ化されることが予測され、これらのサイズは、1656bpと予想される。
全てのポリペプチド配列は、別段の指定がない限りN末端からC末端として提示される。全ての核酸配列は、別段の指定がない限り5’から3’として提示される。
ctggaggcttgctggaggctgtatgctgttagacaatgattcacacggtgttttggccactgactgacaccgtgtgtcattgtctaacaggacacaaggcctgttactagcactcacatggaacaaatggcc(配列番号14)
CCACTCCCTCTCTGCGCGCTCGCTCGCTCACTGAGGCCGGGCGACCAAAGGTCGCCCGACGCCCGGGCTTTGCCCGGGCGGCCTCAGTGAGCGAGCGAGCGCGCAGAGAGGGA(配列番号15)。
ggagtcgctgcgcgctgccttcgccccgtgccccgctccgccgccgcctcgcgccgcccgccccggctctgactgaccgcgttactcccacaggtgagcgggcgggacggcccttctcctccgggctgtaattagcgcttggtttaatgacggcttgtttcttttctgtggctgcgtgaaagccttgaggggctccgggagctagagcctctgctaaccatgttcatgccttcttctttttcctacagctcctgggcaacgtgctggttattgtgctgtctcatcattttggcaaagaattcctcgaagatccggtacccaattccggggccccacgctgcgcatccgcg
(配列番号21)
Claims (21)
- 第1の鎖および第2の鎖を含むRNA分子であって、前記RNA分子は低分子阻害性RNA(siRNA)、マイクロRNA(miRNA)、または小ヘアピンRNA(shRNA)であり、
a)該第1の鎖および該第2の鎖は、二重鎖を形成し;
b)該第1の鎖は、ガイド領域であって、該ガイド領域は、核酸配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)、もしくは配列番号1に対して90%以上の同一性を有する核酸配列;または核酸配列5’-AGUCGGUGUGGUUGACAAGCA-3’(配列番号7)、もしくは配列番号7に対して90%以上の同一性を有する核酸配列であり;ならびに
c)該第2の鎖は、非ガイド領域である、
前記RNA分子。 - (i)ガイド領域の核酸は、核酸配列5’-UGGCCGUCCAUCUUGGACCCG-3’(配列番号1)、もしくは配列番号1に対して約90%以上の同一性を有する核酸配列であり;非ガイド領域は、配列5’-CGGGUCCAAGAUGGACGGCCA-3’(配列番号2)、もしくは配列番号2に対して約90%以上の同一性を有する核酸配列であり;または
(ii)ガイド領域の核酸は、核酸配列5’-AGUCGGUGUGGUUGACAAGCA-3’(配列番号7)、もしくは配列番号7に対して90%以上の同一性を有する核酸配列であり;非ガイド領域は、配列5’-UGCUUGUCAACCACACCGACU-3’(配列番号8)、もしくは配列番号8に対して90%以上の同一性を有する核酸配列である、
請求項1に記載のRNA分子。 - 第1の鎖および第2の鎖は、ループ構造を形成することが可能なRNAリンカーによって連結されており、場合により、ここで:
(i)該RNAリンカーは、4~50ヌクレオチドを含む;および/または
(ii)該ループ構造は、4~20ヌクレオチドを含む;および/または
(iii)5’から3’へ、該第2の鎖、該RNAリンカー、および該第1の鎖を含む;または
(iv)5’から3’へ、該第1の鎖、該RNAリンカー、および該第2の鎖を含む、請求項1または2に記載のRNA分子。 - RNA分子は、5’から3’へ、第1の鎖、RNAリンカー、および第2の鎖を含み、該RNA分子は、配列番号4もしくは配列番号10の核酸配列、または配列番号4もしくは配列番号10のヌクレオチド配列と90%以上同一なヌクレオチド配列である、請求項3に記載のRNA分子。
- 低分子阻害性RNA(siRNA)、マイクロRNA(miRNA)、または小ヘアピンRNA(shRNA)である、請求項1~4のいずれか1項に記載のRNA分子。
- ハンチントン病に関連するポリペプチドをコードするRNAを標的化し、場合により、該ポリペプチドは、ハンチンチンであり、そして場合により、該ハンチンチンは、ハンチントン病に関連する突然変異を含む、請求項1~5のいずれか1項に記載のRNA分子。
- 請求項1~6のいずれか1項に記載のRNA分子をコードする核酸を含む発現コンストラクト。
- 請求項7に記載の発現コンストラクトであって、以下の:
(i)RNA分子をコードする核酸は、miRNA足場を含む;および/または
(ii)RNA分子をコードする核酸は、プロモーターに機能するように連結されており、場合により、該プロモーターは、サイトメガロウイルス(CMV)前初期プロモーター、RSV LTR、MoMLV LTR、ホスホグリセリン酸キナーゼ-1(PGK)プロモーター、シミアンウイルス40(SV40)プロモーター、CK6プロモーター、トランスチレチンプロモーター(TTR)、TKプロモーター、テトラサイクリン応答プロモーター(TRE)、HBVプロモーター、hAATプロモーター、LSPプロモーター、キメラ肝臓特異的プロモーター(LSP)、E2Fプロモーター、テロメラーゼ(hTERT)プロモーター;サイトメガロウイルスエンハンサー/ニワトリベータ-アクチン/ウサギβ-グロビンプロモーター(CAG)プロモーター、延長因子1-アルファプロモーター(EF1-アルファ)プロモーター、ヒトβ-グルクロニダーゼプロモーター、ニワトリβ-アクチン(CBA)プロモーター、レトロウイルス性のラウス肉腫ウイルス(RSV)LTRプロモーター、ジヒドロ葉酸レダクターゼプロモーター、および13-アクチンプロモーターから選択される;および/または
(iii)該発現コンストラクトは、イントロンをさらに含み、場合により、該イントロンは、キメライントロンであり、そして場合により、発現ベクターは、自己相補的なベクターであり、該イントロンは、デルタキメライントロンである;および/または
(iv)発現コンストラクトは、ポリアデニル化シグナルをさらに含み、場合により、該ポリアデニル化シグナルは、ウシ成長ホルモンのポリアデニル化シグナル、SV40のポリアデニル化シグナル、またはHSV TK pAである、
上記発現コンストラクト。 - 請求項7または8に記載の発現コンストラクトを含むベクター。
- 請求項9に記載のベクターであって、以下の:
(i)該ベクターは、組換えアデノウイルスベクターであり、場合により、該組換えアデノウイルスベクターは、アデノウイルス血清型2、1、5、6、19、3、11、7、14、16、21、12、18、31、8、9、10、13、15、17、20、22、23、24~30、37、40、41、AdHu2、AdHu3、AdHu4、AdHu24、AdHu26、AdHu34、AdHu35、AdHu36、AdHu37、AdHu41、AdHu48、AdHu49、AdHu50、AdC6、AdC7、AdC69、ウシAd3型、イヌAd2型、ヒツジAd、またはブタAd3型から誘導される;または
(ii)該ベクターは、組換えレンチウイルスベクターであり、場合により、該組換えレンチウイルスベクターは、水疱性口内炎ウイルス(VSV)、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)、ロスリバーウイルス(RRV)、エボラウイルス、マールブルグウイルス、モコラウイルス、狂犬病ウイルス、RD114またはそれらのバリアントで偽型化したレンチウイルスから誘導される;または
(iii)該ベクターは、組換え単純疱疹ウイルス(rHSV)ベクターであり、場合により、該rHSVベクターは、rHSV-1またはrHSV-2から誘導される、
上記ベクター。 - rAAVベクターである、請求項9に記載のベクター。
- 発現コンストラクトに、1つまたはそれ以上のAAVの逆方向末端反復(ITR)配列が隣接し、場合により、ここで:
(i)該発現コンストラクトに、2つのAAVのITRが隣接する;および/または
(ii)該AAVのITRは、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAVrh8、AAVrh8R、AAV9、AAV10、AAVrh10、AAV11、AAV12、AAV2R471A、AAV DJ、ヤギAAV、ウシAAV、またはマウスAAV血清型のITRであり、場合により、該AAVのITRは、AAV2のITRである、
請求項11に記載のrAAVベクター。 - スタッファー核酸をさらに含み、場合により、該スタッファー核酸が、RNA分子をコードする核酸の上流または下流に配置されている、請求項11または12に記載のrAAVベクター。
- ベクターは、自己相補的なrAAVベクターであり、場合により、該ベクターは、RNA分子をコードする第1の核酸配列およびRNA分子の相補物をコードする第2の核酸配列を含み、該第1の核酸配列は、その長さのほとんどまたは全てにわたり、該第2の核酸配列と鎖内の塩基対を形成することができ、かつ場合により、該第1の核酸配列および該第2の核酸配列は、突然変異したAAVのITRによって連結されており、該突然変異したAAVのITRは、D領域の欠失を含み、そして末端分解配列の突然変異を含む、請求項11~13のいずれか1項に記載のrAAVベクター。
- 請求項9もしくは10に記載のベクター、または請求項11~14のいずれか1項に記載のrAAVベクター、を含む細胞。
- 請求項9に記載のベクターを含むウイルス粒子であって、ここで:
(i)該ウイルス粒子は、組み換えアデノウイルスベクターをキャプシド化するアデノウイルス分子であり、場合により、該アデノウイルス粒子は、アデノウイルス血清型2、1、5、6、19、3、11、7、14、16、21、12、18、31、8、9、10
、13、15、17、20、22、23、24~30、37、40、41、AdHu2、AdHu3、AdHu4、AdHu24、AdHu26、AdHu34、AdHu35、AdHu36、AdHu37、AdHu41、AdHu48、AdHu49、AdHu50、AdC6、AdC7、AdC69、ウシAd3型、イヌAd2型、ヒツジAd、もしくはブタAd3型由来のキャプシドを含む;または
(ii)該ウイルス粒子は、組換えアデノウイルスベクターをキャプシド化するアデノウイルス粒子であり、場合により、該アデノウイルス粒子は、アデノウイルス血清型2のキャプシドもしくはアデノウイルス血清型5のキャプシドを含む;または
(iii)該ウイルス粒子は、組換えレンチウイルスベクターをキャプシド化するレンチウイルス粒子であり、場合により、該レンチウイルス粒子は、水疱性口内炎ウイルス(VSV)、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)、ロスリバーウイルス(RRV)、エボラウイルス、マールブルグウイルス、モコラウイルス、狂犬病ウイルス、RD114もしくはそれらのバリアントで偽型化したキャプシドを含む;または
(iv)該ウイルス粒子は、組換えHSVベクターをキャプシド化するHSV粒子であり、場合により、該HSV粒子は、rHSV-1粒子またはrHSV-2粒子である、
上記ウイルス粒子。 - 請求項11~14のいずれか1項に記載のrAAVベクターを含む組換えAAV粒子であって、場合により、ここで:
(i)AAVウイルス粒子は、AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAVrh8、AAVrh8R、AAV9、AAV10、AAVrh10、AAV11、AAV12、AAV2R471A、AAV2/2-7m8、AAV DJ、AAV2 N587A、AAV2 E548A、AAV2 N708A、AAV V708K、AAV2-HBKO、AAVDJ8、AAVPHP.B、AAVPHP.eB、AAVBR1、AAVHSC15、AAVHSC17、ヤギAAV、AAV1/AAV2キメラ、ウシAAV、またはマウスAAVキャプシド rAAV2/HBoV1血清型キャプシドを含む;および/または
(ii)ITRおよびrAAVウイルス粒子のキャプシドは、同じAAV血清型から誘導される;または
(iii)ITRおよびrAAVウイルス粒子のキャプシドは、異なるAAV血清型から誘導され、場合により、該ITRは、AAV2から誘導され、該rAAV粒子のキャプシドは、AAV1から誘導される、
上記組換えAAV粒子。 - 請求項16に記載のウイルス粒子または請求項17に記載のrAAV粒子を含む組成物であって、場合により、該組成物は、医薬的に許容される担体をさらに含む、上記組成物。
- 請求項1~6のいずれか1項に記載のRNA分子、請求項16に記載のウイルス粒子、請求項17に記載のrAAV粒子、または請求項18に記載の組成物を含むキットであって、場合により、使用説明書をさらに含む、上記キット。
- 哺乳動物におけるハンチントン病を処置するための、請求項2~6のいずれか1項に記載のRNA分子、請求項16に記載のウイルス粒子、請求項17に記載のrAAV粒子、または請求項18に記載の組成物。
- ハンチントン病を有する哺乳動物における、httの発現を阻害するための、またはhttの細胞における蓄積を阻害するための、請求項2~6のいずれか1項に記載のRNA分子、請求項16に記載のウイルス粒子、請求項17に記載のrAAV粒子、または請求項18に記載の組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762561843P | 2017-09-22 | 2017-09-22 | |
US62/561,843 | 2017-09-22 | ||
PCT/US2018/052221 WO2019060726A1 (en) | 2017-09-22 | 2018-09-21 | VARIANT OF ARNI |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020535803A JP2020535803A (ja) | 2020-12-10 |
JP2020535803A5 JP2020535803A5 (ja) | 2021-10-28 |
JP7248658B2 true JP7248658B2 (ja) | 2023-03-29 |
Family
ID=64017428
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020516666A Active JP7248658B2 (ja) | 2017-09-22 | 2018-09-21 | バリアントRNAi |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11603529B2 (ja) |
EP (1) | EP3684932A1 (ja) |
JP (1) | JP7248658B2 (ja) |
CN (1) | CN111356763B (ja) |
AR (1) | AR113134A1 (ja) |
AU (1) | AU2018335410A1 (ja) |
BR (1) | BR112020005569A2 (ja) |
CA (1) | CA3076191A1 (ja) |
CO (1) | CO2020003187A2 (ja) |
IL (1) | IL273394A (ja) |
MX (1) | MX2020003095A (ja) |
PH (1) | PH12020550117A1 (ja) |
SG (1) | SG11202002488UA (ja) |
TW (1) | TW201923079A (ja) |
UY (1) | UY37897A (ja) |
WO (1) | WO2019060726A1 (ja) |
ZA (1) | ZA202001586B (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TN2017000354A1 (en) | 2015-02-10 | 2019-01-16 | Genzyme Corp | VARIANT RNAi |
RU2764587C2 (ru) | 2016-05-18 | 2022-01-18 | Вояджер Терапьютикс, Инк. | Способы и композиции для лечения хореи гентингтона |
EP3619308A4 (en) | 2017-05-05 | 2021-01-27 | Voyager Therapeutics, Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS OF TREATMENT FOR HUNTINGTON'S MORBUS |
AR113134A1 (es) | 2017-09-22 | 2020-01-29 | Genzyme Corp | Arni variante |
CN112980837B (zh) * | 2019-12-13 | 2023-07-04 | 深圳艾码生物科技有限公司 | 一种抑制HTT基因表达的siRNA及其前体和应用 |
CN115141848A (zh) * | 2021-03-30 | 2022-10-04 | 南京大学 | 一种用于治疗亨廷顿病的rna递送*** |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016130589A2 (en) | 2015-02-10 | 2016-08-18 | Genzyme Corporation | VARIANT RNAi |
Family Cites Families (35)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1998010088A1 (en) | 1996-09-06 | 1998-03-12 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | An inducible method for production of recombinant adeno-associated viruses utilizing t7 polymerase |
US6989264B2 (en) | 1997-09-05 | 2006-01-24 | Targeted Genetics Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of released recombinant AAV vectors |
US6566118B1 (en) | 1997-09-05 | 2003-05-20 | Targeted Genetics Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of released recombinant AAV vectors |
JP4827353B2 (ja) | 1999-08-09 | 2011-11-30 | ターゲティッド ジェネティクス コーポレイション | 鎖内塩基対を形成するような配列の設計による、組換えウイルスベクターからの一本鎖の異種ヌクレオチド配列の発現の増大 |
DE60117550T2 (de) | 2000-06-01 | 2006-12-07 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Doppelsträngige parvovirus-vektoren |
US6723551B2 (en) | 2001-11-09 | 2004-04-20 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Production of adeno-associated virus in insect cells |
SG157224A1 (en) | 2001-11-13 | 2009-12-29 | Univ Pennsylvania | A method of detecting and/or identifying adeno-associated virus (aav) sequences and isolating novel sequences identified thereby |
US20050255086A1 (en) * | 2002-08-05 | 2005-11-17 | Davidson Beverly L | Nucleic acid silencing of Huntington's Disease gene |
JP2004101787A (ja) | 2002-09-09 | 2004-04-02 | Fuji Xerox Co Ltd | 画像形成装置及び現像装置 |
CA2500224C (en) | 2002-09-25 | 2015-04-28 | University Of Massachusetts | In vivo gene silencing by chemically modified and stable sirna |
WO2006083800A2 (en) * | 2005-01-31 | 2006-08-10 | University Of Iowa Research Foundation | Nucleic acid silencing of huntington's disease gene |
WO2006119432A2 (en) | 2005-04-29 | 2006-11-09 | The Government Of The U.S.A., As Rep. By The Sec., Dept. Of Health & Human Services | Isolation, cloning and characterization of new adeno-associated virus (aav) serotypes |
US7902352B2 (en) | 2005-05-06 | 2011-03-08 | Medtronic, Inc. | Isolated nucleic acid duplex for reducing huntington gene expression |
EP2007795B1 (en) | 2006-03-30 | 2016-11-16 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Aav capsid proteins |
US8173614B2 (en) * | 2007-01-03 | 2012-05-08 | Medtronic, Inc. | Therapeuting compositions comprising an RNAi agent and a neurotrophic factor and methods of use thereof |
EP2152874A2 (en) | 2007-04-26 | 2010-02-17 | University of Iowa Research Foundation | Rna interference suppression of neurodegenerative diseases and methods of use thereof |
CA2691617C (en) | 2007-05-31 | 2020-07-21 | University Of Iowa Research Foundation | Reduction of off-target rna interference toxicity |
EP2240783A2 (en) | 2008-02-04 | 2010-10-20 | Galapagos N.V. | Molecular targets and compounds, methods to identify the same, useful in the treatment of neurodegenerative diseases. |
WO2009100502A1 (en) | 2008-02-14 | 2009-08-20 | Monash University | Immunostimulatory sirna molecules |
FR2929292A1 (fr) * | 2008-03-28 | 2009-10-02 | Exonhit Therapeutics S A Sa | Procede et methodes de diagnostic de la maladie d'alzheimer |
US8796238B2 (en) | 2009-09-17 | 2014-08-05 | Sigma-Aldrich Co. Llc | Short RNA mimetics |
DK2561073T3 (en) | 2010-04-23 | 2016-12-12 | Univ Massachusetts | Aav vectors targeted to central nervous system and methods of use thereof |
US8663624B2 (en) | 2010-10-06 | 2014-03-04 | The Regents Of The University Of California | Adeno-associated virus virions with variant capsid and methods of use thereof |
SG10201601110VA (en) | 2011-02-17 | 2016-03-30 | Univ Pennsylvania | Compositions and methods for altering tissue specificity and improving aav9-mediated gene transfer |
AU2013225950B2 (en) * | 2012-02-29 | 2018-02-15 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for treating huntington's disease |
CN103224556B (zh) * | 2013-01-31 | 2015-04-15 | 清华大学 | 亨廷顿舞蹈症的靶位蛋白质及其编码基因和应用 |
US9550989B2 (en) | 2013-10-03 | 2017-01-24 | Washington University | Rational design of microRNA-siRNA chimeras for multi-functional target suppression |
KR102431079B1 (ko) * | 2013-11-11 | 2022-08-11 | 상가모 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | 헌팅턴병을 치료하기 위한 방법 및 조성물 |
MA39390B2 (fr) * | 2014-03-21 | 2022-04-29 | Genzyme Corp | Thérapie génique pour le traitement de la rétinite pigmentaire |
DK3137497T3 (da) | 2014-05-02 | 2021-07-12 | Genzyme Corp | Aav-vektorer til retinal- og cns-genterapi |
AU2015264263B2 (en) * | 2014-05-20 | 2021-08-05 | University Of Iowa Research Foundation | Huntington's disease therapeutic compounds |
CA2971920C (en) * | 2014-12-24 | 2024-05-07 | Uniqure Ip B.V. | Rnai induced huntingtin gene suppression |
RU2764587C2 (ru) * | 2016-05-18 | 2022-01-18 | Вояджер Терапьютикс, Инк. | Способы и композиции для лечения хореи гентингтона |
AR113134A1 (es) | 2017-09-22 | 2020-01-29 | Genzyme Corp | Arni variante |
CA3108526A1 (en) * | 2018-08-03 | 2020-02-06 | Genzyme Corporation | Variant rnai against alpha-synuclein |
-
2018
- 2018-09-21 AR ARP180102723A patent/AR113134A1/es unknown
- 2018-09-21 BR BR112020005569-7A patent/BR112020005569A2/pt unknown
- 2018-09-21 AU AU2018335410A patent/AU2018335410A1/en active Pending
- 2018-09-21 UY UY0001037897A patent/UY37897A/es not_active Application Discontinuation
- 2018-09-21 WO PCT/US2018/052221 patent/WO2019060726A1/en unknown
- 2018-09-21 US US16/649,042 patent/US11603529B2/en active Active
- 2018-09-21 CA CA3076191A patent/CA3076191A1/en active Pending
- 2018-09-21 CN CN201880073881.6A patent/CN111356763B/zh active Active
- 2018-09-21 MX MX2020003095A patent/MX2020003095A/es unknown
- 2018-09-21 JP JP2020516666A patent/JP7248658B2/ja active Active
- 2018-09-21 SG SG11202002488UA patent/SG11202002488UA/en unknown
- 2018-09-21 EP EP18793503.6A patent/EP3684932A1/en active Pending
- 2018-09-25 TW TW107133661A patent/TW201923079A/zh unknown
-
2020
- 2020-03-13 ZA ZA2020/01586A patent/ZA202001586B/en unknown
- 2020-03-16 PH PH12020550117A patent/PH12020550117A1/en unknown
- 2020-03-18 CO CONC2020/0003187A patent/CO2020003187A2/es unknown
- 2020-03-18 IL IL273394A patent/IL273394A/en unknown
-
2023
- 2023-02-15 US US18/169,779 patent/US20230392149A1/en active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016130589A2 (en) | 2015-02-10 | 2016-08-18 | Genzyme Corporation | VARIANT RNAi |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
MINIARIKOVA, J. et al.,Design, Characterization, and Lead Selection of Therapeutic miRNAs Targeting Huntingtin for Development of Gene Therapy for Huntington's Disease,Molecular therapy. Nucleic acids,2016年,Vol. 5,e297 |
PFISTER, E. L. et al.,Safe and Efficient Silencing with a Pol II, but Not a Pol III, Promoter Expressing an Artificial miRNA Targeting Human Huntingtin,Molecular therapy. Nucleic acids,2017年06月,Vol. 7,P. 324-334 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
UY37897A (es) | 2019-04-30 |
AR113134A1 (es) | 2020-01-29 |
ZA202001586B (en) | 2024-01-31 |
CN111356763B (zh) | 2024-03-12 |
BR112020005569A2 (pt) | 2020-10-06 |
US20200216848A1 (en) | 2020-07-09 |
RU2020114229A (ru) | 2021-10-22 |
US20230392149A1 (en) | 2023-12-07 |
JP2020535803A (ja) | 2020-12-10 |
CO2020003187A2 (es) | 2020-04-13 |
SG11202002488UA (en) | 2020-04-29 |
AU2018335410A1 (en) | 2020-05-07 |
MX2020003095A (es) | 2020-10-15 |
WO2019060726A1 (en) | 2019-03-28 |
CN111356763A (zh) | 2020-06-30 |
TW201923079A (zh) | 2019-06-16 |
RU2020114229A3 (ja) | 2022-02-01 |
US11603529B2 (en) | 2023-03-14 |
PH12020550117A1 (en) | 2020-12-07 |
CA3076191A1 (en) | 2019-03-28 |
EP3684932A1 (en) | 2020-07-29 |
IL273394A (en) | 2020-05-31 |
KR20200056428A (ko) | 2020-05-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11781137B2 (en) | Variant RNAi | |
JP7248658B2 (ja) | バリアントRNAi | |
JP2024073536A (ja) | 深部イントロン突然変異の遺伝子編集 | |
US20210309999A1 (en) | VARIANT RNAi AGAINST ALPHA-SYNUCLEIN | |
JP2022545378A (ja) | SCA1の治療のための、導入遺伝子およびイントロン由来miRNAを組み合わせた治療法 | |
KR102686857B1 (ko) | 변이체 RNAi | |
RU2789647C2 (ru) | ВАРИАНТ СРЕДСТВА ДЛЯ RNAi | |
US20230365968A1 (en) | Targeted gene therapy for dm-1 myotonic dystrophy |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210917 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210917 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220818 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220830 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221130 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230214 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230316 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7248658 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |