JP7186957B2

JP7186957B2 - Cell thawing device

Info

Publication number: JP7186957B2
Application number: JP2019011489A
Authority: JP
Inventors: 慶次郎山内; 和幸阿部; 広之小式澤; 千春藤田
Original assignee: LABORATORY OF CELL APPLIED TECHNOLOGIES, CO; YSEC CO Ltd
Current assignee: LABORATORY OF CELL APPLIED TECHNOLOGIES, CO; YSEC CO Ltd
Priority date: 2019-01-25
Filing date: 2019-01-25
Publication date: 2022-12-12
Anticipated expiration: 2039-01-25
Also published as: JP2020115813A

Description

本発明は、細胞凍結容器内で凍結保存された細胞（例えば、培養表皮細胞や培養線維芽細胞）を解凍できる細胞解凍装置に関する。 TECHNICAL FIELD The present invention relates to a cell thawing device capable of thawing cells (for example, cultured epidermal cells and cultured fibroblasts) cryopreserved in a cell freezing container.

（難治性皮膚潰瘍）
難治性皮膚潰瘍とは、寝たきりの患者や末梢循環が悪くなった糖尿病や閉塞性動脈硬化症の患者等に好発する、広範囲に皮膚が欠損し時に感染している皮膚の状態の事を指す。難治性皮膚潰瘍によって下肢切断を施さねばならない患者は年間約１万人と言われ、手術を施しても５年後の生存率は約３０パーセントであり、生存できたとしても高額な医療費が必要となる。 (refractory skin ulcer)
Intractable skin ulcer refers to a skin condition in which the skin is extensively deficient and sometimes infected. It is said that about 10,000 patients a year have to have their lower limbs amputated due to intractable skin ulcers. necessary.

（難治性皮膚潰瘍に対する再生医療の試み）
上述のような欠点を有する下肢切断に代えて、難治性皮膚潰瘍の患部に、培養表皮細胞を移植して自己再生を促す再生医療を施す試みもある。培養表皮細胞はクライオチューブ等の細胞凍結容器に収容され、通常、－８０℃から－１９６℃で凍結保存される。末端の病院では、この凍結細胞を細胞凍結容器に入れて輸送・保管されるため、施術の際には、細胞凍結容器に入った凍結細胞を解凍する必要がある。 (Trials of regenerative medicine for intractable skin ulcers)
As an alternative to leg amputation, which has the drawbacks described above, there is also an attempt to apply regenerative medicine to the affected area of an intractable skin ulcer by transplanting cultured epidermal cells to promote self-regeneration. The cultured epidermal cells are placed in a cell-freezing container such as a cryotube and are usually cryopreserved at -80°C to -196°C. In terminal hospitals, these frozen cells are transported and stored in cell-freezing containers, so it is necessary to thaw the frozen cells in the cell-freezing containers during treatment.

（凍結保存された培養表皮細胞の従来の解凍技術：ウォーターバス）
この凍結表皮細胞を解凍する従来技術として、ウォーターバスを使用した方法がある。これは、バス内の水を加温して約３７℃のぬるま湯にし、このぬるま湯に細胞入りチューブを温浴させ、手早く撹拌させながらチューブ内の細胞を融解させる方法である。しかしながら、ウォーターバスでの上記撹拌・解凍操作は高い熟練度が必要であるだけでなく、水がチューブ内に浸入する危険性もあった。 (Conventional thawing technique for cryopreserved cultured epidermal cells: water bath)
As a conventional technique for thawing the frozen epidermal cells, there is a method using a water bath. In this method, the water in the bath is heated to lukewarm water of about 37.degree. However, the stirring and thawing operation in the water bath not only requires a high degree of skill, but also poses a risk of water entering the tube.

（従来の凍結細胞解凍装置）
上述のウォーターバスの他に、非特許文献１に示すような凍結細胞解凍装置が既に利用可能である。解凍装置の上面には複数の有底開口穴が設けられ、これらの穴に細胞容器を載置して加温する。しかしながら、上記開口穴は所定の寸法で作られており、この寸法に適合した専用の細胞容器以外の容器には適用できない。全国には、多くの病院が存在し、これらの病院に医療機器を納入するベンダーも数多く存在する。このことも影響してか、細胞容器の形状、構造、寸法等は千差万別であるから、これら全ての細胞容器に対応可能な細胞解凍装置が要望されている。 (Conventional frozen cell thawing device)
In addition to the water bath described above, a frozen cell thawing device as shown in Non-Patent Document 1 is already available. A plurality of bottomed open holes are provided on the upper surface of the thawing device, and the cell containers are placed in these holes and heated. However, the opening hole is made with a predetermined size, and cannot be applied to containers other than a dedicated cell container adapted to this size. There are many hospitals all over the country, and there are many vendors who deliver medical equipment to these hospitals. Perhaps because of this fact, cell containers vary widely in shape, structure, size, and the like, and there is a demand for a cell thawing apparatus that can handle all of these cell containers.

特開昭５８－２２５０１９号公報JP-A-58-225019 特開２００７－０６１２４５号公報JP 2007-061245 A 特開２０１３－２５２２０４号公報JP 2013-252204 A

カタログＮｏ：ＹＳ－１凍結細胞融解装置、ビーエム機器株式会社のホームページ、［平成31年1月13日検索］、インターネット＜https://www.bmbio.com/product/tabid73.html?pdid1=YS-1＞Catalog No: YS-1 Frozen Cell Thawing Apparatus, BM Equipment Co., Ltd. website, [searched on January 13, 2019], Internet <https://www.bmbio.com/product/tabid73.html?pdid1=YS -1>

（他の分野の解凍装置）
凍結細胞以外の他分野に目を向けると、現在までに、凍結血漿バッグを解凍するための装置が提案されている（特許文献１～３参照）。 (Defrosting equipment in other fields)
Looking to fields other than frozen cells, devices for thawing frozen plasma bags have been proposed so far (see Patent Documents 1 to 3).

（凍結血漿の凍結容器と凍結細胞の凍結容器との違い）
凍結血漿バッグの場合は袋状の容器に限定されるが、凍結細胞用の容器には、袋状の他、板状やチューブ状など様々な形状のものが存在し、これら全ての容器の形状に対応可能な解凍装置が望まれている。 (Difference between freezing container for frozen plasma and freezing container for frozen cells)
Frozen plasma bags are limited to bag-shaped containers, but containers for frozen cells have various shapes such as plate-shaped and tube-shaped in addition to bag-shaped, and all of these container shapes There is a demand for a thawing device that can handle

（凍結血漿の保管温度と凍結細胞の保管温度との違い）
また、凍結血漿は通常－２０℃で保管されるが、細胞は－８０℃から－１９６℃で保管されるため、凍結血漿の場合に比べ凍結細胞の解凍には多くの熱量が必要である。また、細胞を含むため、３分以内と短い時間で解凍を行う必要もある。 (Difference between storage temperature of frozen plasma and storage temperature of frozen cells)
In addition, frozen plasma is usually stored at −20° C., whereas cells are stored at −80° C. to −196° C. Therefore, thawing frozen cells requires more heat than frozen plasma. In addition, since it contains cells, it is also necessary to thaw within a short time of 3 minutes.

（特許文献１の解凍装置）
上述したように、特許文献１～３はいずれも「凍結血漿」を解凍対象とするものであるが、その構成について簡単に説明しておく。特許文献１の解凍装置は、凍結血液入りの袋状容器を、一対の移動自在なヒータープレートを互いに接近するように押圧して上記凍結血液を加熱すると同時に、モーター等を含んだ駆動機構により該ヒータープレートを旋回移動させて、凍結血液内の対流を促進させるものである。 (Defrosting device of Patent Document 1)
As described above, Patent Documents 1 to 3 all deal with thawing "frozen plasma". The thawing apparatus of Patent Document 1 presses a pair of movable heater plates close to each other to heat a bag-like container containing frozen blood, and at the same time heats the frozen blood by a driving mechanism including a motor. A heater plate is rotated to promote convection in the frozen blood.

（特許文献１の挟持体）
また、特許文献１の解凍対象は、凍結された血液等が貯蔵された袋状容器（具体的にはプラスチック製バッグ）である。つまり、解凍対象は柔軟であり、一対のヒーターで挟持した際に解凍対象自体が変形可能である。従って、ヒーター側の挟持部は単なる剛体（板状銅シート）のままでも良く、特許文献１では板状銅シートが袋状容器に接触し、これを押圧した際には、袋状容器が銅シート形状に対応して変形することになる。 (Clamping body of Patent Document 1)
The thawing object of Patent Document 1 is a bag-like container (specifically, a plastic bag) in which frozen blood or the like is stored. In other words, the object to be thawed is flexible, and the object itself to be thawed can be deformed when sandwiched between the pair of heaters. Therefore, the sandwiching part on the heater side may be a simple rigid body (plate-shaped copper sheet). It deforms according to the shape of the sheet.

（特許文献１の装置を本発明の用途に適用しようとする場合の課題）
しかしながら、凍結細胞の場合は、細胞凍結容器の形状は多岐に亘り、例えば、チューブ状の容器の場合は容器自体が変形しないため、ヒーター側の挟持部を変形させて該容器を挟持する必要がある。従って、特許文献１の装置を単にその構成のまま凍結細胞の分野に適用したとしても、これらの細胞が貯蔵された容器（例えば、硬い円筒形の上記容器）を適切に解凍できない。 (Problem when trying to apply the device of Patent Document 1 to the use of the present invention)
However, in the case of frozen cells, the cell freezing container has a wide variety of shapes. For example, in the case of a tube-shaped container, the container itself does not deform, so it is necessary to deform the holding part on the heater side to hold the container. be. Therefore, even if the device of Patent Document 1 were simply applied to the field of frozen cells as it is, it would not be possible to properly thaw containers in which these cells were stored (for example, the rigid cylindrical containers described above).

（特許文献２の解凍装置）
特許文献２にも同様に凍結血漿入りの血液バッグを一対のヒーターで挟持・加温しながら、揺動手段で揺動させる解凍装置を開示されている。なお、特許文献２では解凍対象に直接接触するのは、流動可能な熱媒体が密閉された第１・第２熱媒体バッグである。 (Defrosting device of Patent Document 2)
Similarly, Patent Document 2 also discloses a thawing device in which a blood bag containing frozen plasma is sandwiched and heated by a pair of heaters and rocked by a rocking means. In Patent Document 2, it is the first and second heat medium bags in which the flowable heat medium is sealed that come into direct contact with the object to be thawed.

（特許文献２の装置を本発明の用途に適用しようとする場合の課題）
第１・第２熱媒体バッグは、可撓性を有するものの、解凍対象（挟持対象）が変形可能な血液バッグであれば問題無いが、解凍対象が、凍結細胞を収容する硬い細胞凍結容器であったり、扁平で縁部が尖った細胞凍結容器などであったりする場合には、使用中の熱媒体バッグの破裂やバッグ中身の高温の熱媒体の飛散等の懸念が残る。 (Problem when trying to apply the device of Patent Document 2 to the use of the present invention)
Although the first and second heat medium bags are flexible, there is no problem if the object to be thawed (the object to be clamped) is a deformable blood bag. Or, if the cell freezing container is flat and has sharp edges, there remains a concern that the heat medium bag may burst during use or the high-temperature heat medium inside the bag may scatter.

また、特許文献２に開示の揺動機構は、挟持部の一端を上下に移動させ、つまり、挟持部の該一端と他端とをシーソーのように揺動させるものであるが、凍結血漿の解凍ならまだしも、本発明者らの経験上、ごく短い時間で高い熱量の付与が必要な凍結細胞の解凍を想定した場合、この揺動方法では不十分であり、揺動機構にも改善を加える必要がある。つまり、特許文献２の装置を単にその構成のまま、凍結細胞の解凍に適用できない。 Further, the rocking mechanism disclosed in Patent Document 2 moves one end of the clamping part up and down, that is, rocks the one end and the other end of the clamping part like a seesaw. Thawing is fine, but in the experience of the present inventors, when assuming the thawing of frozen cells that require the application of a high amount of heat in a very short time, this rocking method is insufficient, and the rocking mechanism should also be improved. There is a need. In other words, the apparatus of Patent Document 2 cannot be applied to thawing frozen cells simply with its configuration.

（特許文献３の解凍装置）
特許文献３も、変形可能な袋状容器に入った凍結血漿を解凍する装置であり、これを挟持する一対の融解プレートはアルミニウム板や銅板からなる硬い板状体であり、これらの点は特許文献１と同様である。また、揺動機構は、挟持部をシーソー状に上下に揺動させる点は特許文献２と同様である。従って、特許文献３の装置を凍結細胞の解凍に適用した場合も、特許文献１，２の欄で説明した上記課題が懸念される。 (Defrosting device of Patent Document 3)
Patent Document 3 is also a device for thawing frozen plasma contained in a deformable bag-like container, and a pair of thawing plates sandwiching this is a hard plate-like body made of an aluminum plate or a copper plate. It is the same as document 1. Further, the rocking mechanism is the same as that of Patent Document 2 in that it rocks the holding portion up and down like a seesaw. Therefore, even when the apparatus of Patent Document 3 is applied to thawing frozen cells, the above problems described in the columns of Patent Documents 1 and 2 are concerned.

（特許文献１～３に共通した課題）
また、特許文献１～３のどの解凍装置にも言えることであるが、凍結容器を挟持・加温する挟持部は、使用回数が増える程、汚れ等が付着して衛生的で無くなり、これ（特に接触部分）を取り換える必要があるだけでなく、挟持部内のヒーター等の点検・交換も必要となる。しかしながら、特許文献１～３の装置は、これらのメンテナンスが容易に行える構造になっているとはいえない。 (Problems common to Patent Documents 1 to 3)
In addition, as can be said for any of the thawing devices of Patent Documents 1 to 3, the clamping portion that clamps and heats the freezing container becomes dirty and unhygienic as the number of times of use increases. In particular, it is necessary not only to replace the contact part), but also to inspect and replace the heater and the like in the holding part. However, it cannot be said that the devices disclosed in Patent Documents 1 to 3 have a structure that facilitates such maintenance.

また、特許文献１～３のどの解凍装置も、凍結血漿入りの比較的大きな血液バッグを対象とするため、通常、１回の使用で１つの血液バッグの挟持・解凍を目的とする。しかしながら、本発明で対象とする凍結細胞入りの細胞凍結容器は、通常、血液バッグと比較すると格段に小さく、１回の使用で多数の細胞凍結容器を解凍できることが望まれている。この多数の容器を一度に挟持・解凍する場合には、加温条件等の熱環境を細胞凍結容器毎に個別管理できることが望ましい。これらの要望及び用途につき、更なる改善の余地がある。 In addition, since any of the thawing devices of Patent Documents 1 to 3 is intended for a relatively large blood bag containing frozen plasma, it is usually intended to pinch and thaw one blood bag in one use. However, the cell freezing container containing frozen cells targeted by the present invention is usually much smaller than a blood bag, and it is desired that a large number of cell freezing containers can be thawed in one use. When clamping and thawing a large number of containers at once, it is desirable to be able to individually manage the thermal environment such as heating conditions for each cell freezing container. There is room for further improvement in these needs and applications.

（本発明の目的）
本発明は、このような事情に鑑みてなされたものであり、専門病院ではない末端病院においても、容器内で凍結保存された細胞（より具体的には、培養表皮細胞）を誰でも簡単に解凍できる細胞解凍装置を提供することを目的とする。 (Object of the present invention)
The present invention has been made in view of such circumstances, so that anyone can easily obtain cells (more specifically, cultured epidermal cells) cryopreserved in a container even in terminal hospitals that are not specialized hospitals. An object of the present invention is to provide a cell thawing device capable of thawing.

また、本発明の別の目的は、様々な形状の細胞凍結容器に対応可能で、該容器に頻繁に接触する解凍部のメンテナンスが容易な細胞解凍装置を提供することである。 Another object of the present invention is to provide a cell thawing apparatus that can be used with cell freezing containers of various shapes and that facilitates maintenance of the thawing section that frequently contacts the container.

また、本発明の別の目的は、多数の細胞凍結容器を一度に挟持可能で、かつ、細胞凍結容器毎の熱環境を個別に管理可能な細胞解凍装置を提供することである。 Another object of the present invention is to provide a cell thawing apparatus capable of sandwiching a large number of cell freezing containers at once and individually managing the thermal environment of each cell freezing container.

本発明者らは、鋭意検討の末、下記構造を具備した細胞解凍装置を用いれば、上記課題を見事に解決できることを見出し、本発明を完成した。 After intensive studies, the present inventors have found that the above problems can be solved admirably by using a cell thawing apparatus having the following structure, and completed the present invention.

すなわち本発明は、例えば、以下の構成・特徴を備えるものである。
（態様１）
細胞凍結容器に貯蔵された凍結細胞を解凍する細胞解凍装置であって、
上側筐体と、下側筐体と、前記上側筐体及び前記下側筐体を開閉可能に接続するヒンジ部と、前記上側筐体及び前記下側筐体の内側に設けられかつ前記細胞凍結容器を挟持可能な一対の解凍面と、前記解凍面を加熱可能な面状ヒーターと、が設けられた解凍部と、
前記解凍部を載置可能な天板と、前記天板を揺動可能な揺動手段と、が設けられたベース部と、
を備え、かつ、
前記解凍面は、変形しながら前記細胞凍結容器を複数、包み込むことが可能であり、かつ、前記細胞凍結容器の形状又は寸法が異なる場合でも解凍可能であり、
前記上側筐体及び前記下側筐体には、それぞれ、前記解凍面に近い順に、熱伝導ゴム層又は蓄熱ゲル層と、前記面状ヒーターと、を少なくとも含んだ積層部材が収容され、
前記熱伝導ゴム層又は前記蓄熱ゲル層は変形性を有し、
前記面状ヒーターは、柔軟性を有したフィルム状ヒーター又は柔軟性を有したラバーヒーターであり、
前記上側筐体及び前記下側筐体には、前記積層部材を保持可能な枠体が着脱自在に取り付けられていること
を特徴とする細胞解凍装置。
（態様２）
前記解凍面は、プラスティック製フィルムで覆われていること
を特徴とする態様１に記載の細胞解凍装置。
（態様３）
前記解凍部が前記天板に着脱自在に取り付けられていること
を特徴とする態様１又は２に記載の細胞解凍装置。
（態様４）
前記解凍面を分割するように複数の前記面状ヒーターが並置されていること
を特徴とする態様１～３のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。
（態様５）
前記揺動手段は、前記天板の平面視で円を描くように該天板を揺動させること
を特徴とする態様１～４のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。
（態様６）
前記ベース部には、種類の異なる凍結細胞に適した複数の解凍モードを予め保存したメモリと、前記解凍モードの一つを選択可能な制御手段と、をさらに備えること
を特徴とする態様１～５のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。
（態様７）
前記凍結細胞に培養表皮細胞又は培養線維芽細胞が使用されること
を特徴とする態様１～６のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。
（態様８）
前記細胞凍結容器が、変形性を有さない堅固な容器であること
を特徴とする態様１～７のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。 That is, the present invention has, for example, the following configurations and features.
(Aspect 1)
A cell thawing device for thawing frozen cells stored in a cell freezing container,
an upper housing, a lower housing, a hinge section connecting the upper housing and the lower housing so that they can be opened and closed, and the cell freezing provided inside the upper housing and the lower housing. a thawing section provided with a pair of thawing surfaces capable of sandwiching a container and a planar heater capable of heating the thawing surfaces;
a base portion provided with a top plate on which the thawing portion can be placed, and a swing means capable of swinging the top plate;
and
The thawing surface can wrap a plurality of the cell freezing containers while deforming, and can be thawed even if the cell freezing container has a different shape or size ,
Each of the upper housing and the lower housing accommodates a laminated member containing at least a heat conductive rubber layer or a heat storage gel layer and the planar heater in order of proximity to the thawing surface,
The heat conductive rubber layer or the heat storage gel layer has deformability,
The planar heater is a flexible film heater or a flexible rubber heater,
A frame capable of holding the laminated member is detachably attached to the upper housing and the lower housing.
A cell thawing device characterized by:
(Aspect 2)
The cell thawing device according to aspect 1, wherein the thawing surface is covered with a plastic film.
(Aspect 3)
The cell thawing device according to aspect 1 or 2, wherein the thawing unit is detachably attached to the top plate.
(Aspect 4)
The cell thawing device according to any one of aspects 1 to 3 , wherein a plurality of the planar heaters are arranged so as to divide the thawing surface.
(Aspect 5)
The cell thawing device according to any one of aspects 1 to 4 , wherein the rocking means rocks the top plate so as to draw a circle in a plan view of the top plate.
(Aspect 6)
Aspects 1 to 3, wherein the base further comprises a memory pre-stored with a plurality of thawing modes suitable for different types of frozen cells, and control means capable of selecting one of the thawing modes. 6. The cell thawing device according to any one of 5 .
(Aspect 7)
The cell thawing device according to any one of aspects 1 to 6 , wherein cultured epidermal cells or cultured fibroblasts are used as the frozen cells.
(Aspect 8)
The cell thawing device according to any one of aspects 1 to 7 , wherein the cell freezing container is a rigid container that does not have deformability.

（１．形状・寸法が様々な細胞凍結容器に対応可能であること）
本発明の解凍装置によれば、従来の解凍装置とは異なり、柔らかい加熱面（及びこれに近接した変形性を有する熱伝導ゴム層や蓄熱ゲル、フィルム状ヒーターなど）を有する事で、形状・寸法が様々な細胞凍結容器を包み込むような形で加熱できる。この加熱面は、解凍部の筐体サイズや、熱伝導ゴム層及びヒーター等の種類・サイズ・積層数・組合せを変更することで、多種多様な種類の細胞凍結容器に対応可能となる。 (1. Compatible with various cell freezing containers in shape and size)
According to the thawing device of the present invention, unlike the conventional thawing device, it has a soft heating surface (and a deformable heat conductive rubber layer, heat storage gel, film heater, etc.) that is close to this, so that the shape and shape can be changed. It can be heated in such a way as to envelop cell freezing containers of various sizes. This heating surface can be adapted to various types of cell freezing containers by changing the housing size of the thawing section, the type, size, number of layers, and combination of heat conductive rubber layers, heaters, and the like.

なお、解凍部がベース部に対して着脱可能な構成を成し、解凍部の上側筐体及び下側筐体がこれらの筐体内に積層部材を着脱自在に保持する枠体を備える構成を成すことで、解凍部のメンテナンスが容易となるばかりで無く、広狭様々な解凍面を有した異なる解凍部への交換も可能となる。 The thawing section is detachable from the base section, and the upper and lower housings of the thawing section are provided with frames for detachably holding the laminated members in these housings. This not only facilitates the maintenance of the thawing section, but also enables the replacement of the thawing section with a different thawing section having various wide and narrow thawing surfaces.

また、加熱中に細胞凍結容器の形状・寸法に適した揺動や振動を与えることで、どんな形状の細胞凍結容器を用いても細胞（凍結状態から固液状態ひいては液体状態に進行する細胞）を均一に攪拌し、該細胞に均一に熱を伝えることができる。 In addition, by applying shaking and vibration suitable for the shape and size of the cell freezing container during heating, cells (cells that progress from a frozen state to a solid-liquid state and then a liquid state) can be obtained regardless of the shape of the cell freezing container. can be uniformly stirred and the heat can be uniformly transferred to the cells.

（２．多種の細胞の解凍が可能であること）
また、本発明の解凍装置は、加熱条件や揺動条件を制御する制御手段を有する為、操作者は、解凍対象に適合するように都度、解凍条件を自由に設定変更することができる。 (2. Capable of thawing various types of cells)
Moreover, since the thawing apparatus of the present invention has control means for controlling the heating conditions and the shaking conditions, the operator can freely change the setting of the thawing conditions each time so as to suit the thawing target.

（３．一度に複数の解凍が可能であること）
解凍部に設けられた加熱面は、この面を含有又は近接した熱伝導ゴム層やフィルム状ヒーターの存在により、広範囲かつ柔軟な平坦面であるため、複数の細胞凍結容器を加熱面の所望の場所に配置することができる。これにより、本発明の装置は、一度に多数の凍結細胞を均一に解凍することができ、広範囲で多量の細胞を必要とする移植手術にも対応することができる。 (3. It is possible to unzip multiple files at once)
The heating surface provided in the thawing section is a wide and flexible flat surface due to the presence of a heat-conducting rubber layer and a film heater that include or are adjacent to this surface. can be placed in place. As a result, the apparatus of the present invention can uniformly thaw a large number of frozen cells at one time, and can be used for transplantation operations that require a large amount of cells over a wide area.

（４．誰でも簡単に解凍が可能であること）
本発明の解凍装置を用いた解凍方法は、ウォーターバスを用いた従来法に要求されるような熟練した操作スキルを必要としない。操作者は、単に操作パネル等を用いて解凍対象に適した解凍条件を選択或いは入力して装置を作動させればよい。 (4. Anyone can easily decompress)
The thawing method using the thawing apparatus of the present invention does not require the skilled operating skills required for conventional methods using water baths. The operator can simply use the operation panel or the like to select or input the thawing conditions suitable for the thawing target to operate the apparatus.

（５．異物混入の防止）
本発明の解凍装置を用いた解凍方法は、ウォーターバス法に必須な細胞凍結容器の温浴は不要であり、異物が混入する可能性が格段に低くなる。なお、細胞凍結容器に触れる部分は全て交換式（交換可能）となっており、常に清潔な環境で細胞の解凍を実施できる。 (5. Prevention of foreign matter contamination)
The thawing method using the thawing apparatus of the present invention does not require warm bathing of the cell freezing container, which is essential for the water bath method, and the possibility of contamination by foreign matter is remarkably reduced. All parts that touch the cell freezing container are replaceable (replaceable), so cells can be thawed in a clean environment at all times.

本発明の細胞解凍装置を示した斜視図及び分解斜視図である。It is the perspective view and exploded perspective view which showed the cell thawing apparatus of this invention. 本発明の細胞解凍装置（分離状態）を示した正面図及び側面図である。It is the front view and side view which showed the cell thawing apparatus (separation state) of this invention. 解凍部の主要な構成部材を示した解凍部の分解斜視図である。FIG. 3 is an exploded perspective view of the thawing section showing main constituent members of the thawing section; 一枚又は複数枚のヒーター及び断熱材層に取り付けた温度センサを示した図である。FIG. 3 shows a temperature sensor attached to one or more heaters and layers of insulation. ベース部の装置の基本構成を示した図である。It is the figure which showed the basic composition of the apparatus of a base part. ベース部の主要部を示した平面図及び底面図である。4A and 4B are a plan view and a bottom view showing the main part of the base part; FIG. ベース部の主要部を示した側面図である。FIG. 4 is a side view showing the main parts of the base; 解凍対象である細胞凍結容器及び枠体の変形例を示した図であるFIG. 10 is a diagram showing a modified example of the cell freezing container and the frame to be thawed. 解凍装置の操作パネルの解凍部の外観を示す画像である。4 is an image showing the appearance of the decompression unit of the operation panel of the decompression device.

以下、添付の図面を参照しながら下記の具体的な実施形態に基づき本発明を説明するが、本発明はこれらの実施形態に何等限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described based on the following specific embodiments with reference to the accompanying drawings, but the present invention is not limited to these embodiments.

（装置の概要）
本実施例の細胞解凍装置（以下、単に「解凍装置」又は「装置」とも呼ぶ。）１００は、主に、解凍部（挟持部）２００と、ベース部３００と、から構成される。解凍部２００は、後述するように、ベース部３００の上部に着脱自在に載置可能である。なお、図１（ｂ）は、解凍部２００と、ベース部３００とを分離した状態を示し、図１（ａ）は、解凍部２００をベース部３００の上部（具体的には、後述の天板）に載置し、解凍部２００の一方の解凍面２５０に複数の細胞凍結容器１（１Ａ）を並べた状態を示す。 (Apparatus overview)
A cell thawing device (hereinafter also simply referred to as “thawing device” or “apparatus”) 100 of this embodiment mainly comprises a thawing section (clamping section) 200 and a base section 300 . The thawing section 200 can be detachably mounted on the upper portion of the base section 300, as will be described later. FIG. 1(b) shows a state in which the decompression unit 200 and the base unit 300 are separated, and FIG. plate), and a plurality of cell freezing containers 1 ( 1 A) are arranged on one thawing surface 250 of the thawing unit 200 .

（解凍対象）
本発明の装置１００で解凍を行う対象は、凍結細胞を貯蔵し搬送又は保存するための容器１（以下、「細胞凍結容器」又は「容器」とも呼ぶ。）である。この容器１に貯蔵される凍結細胞は、本実施例では培養された線維芽細胞や表皮細胞等の皮膚細胞を想定したが、必ずしもこれらの細胞に限定されない。 (to be decompressed)
An object to be thawed by the device 100 of the present invention is a container 1 (hereinafter also referred to as "cell freezing container" or "container") for storing, transporting or preserving frozen cells. Although the frozen cells stored in the container 1 are assumed to be cultured skin cells such as fibroblasts and epidermal cells in this embodiment, they are not necessarily limited to these cells.

（細胞凍結容器の具体例）
なお、凍結細胞用の容器１には多種多様な形状・寸法を有するタイプが存在する。細胞凍結容器１の具体例として、例えば、図３や図８などに示すようなクライオチューブなどの硬い中空円筒状容器１Ｂや、細胞収容領域１Ａｃ以外の縁部１Ａｅが扁平状を成す細胞凍結容器１Ａがある。本発明の解凍装置１００は、後述するように、これ一つで、多種多様な容器１の形状や容量に対応してこれを挟持・加熱することができることから、凍結線維芽細胞や凍結表皮細胞の解凍の用途に適しているといえる。また、解凍装置１００は、後述するように解凍面２５０やその付近の積層部材が変形性を有するため、解凍対象が変形性を有さない堅固な容器１でも、これを柔軟にすっぽりと包み込むことが可能となる。 (Specific example of cell freezing container)
There are various types of containers 1 for frozen cells having various shapes and sizes. Specific examples of the cell freezing container 1 include, for example, a rigid hollow cylindrical container 1B such as a cryotube as shown in FIGS. There is 1A. As will be described later, the thawing apparatus 100 of the present invention can clamp and heat various containers 1 in various shapes and capacities. It can be said that it is suitable for the purpose of thawing of In the thawing device 100, as will be described later, the thawing surface 250 and the laminated members in the vicinity thereof are deformable. becomes possible.

（解凍部の概要）
解凍部２００は、図１～３に示すように、一対を成す上側筐体２１０と下側筐体２２０と、これらの筐体を開閉可能に接続するヒンジ部２３０と、を有する。また、解凍部２００には、上側筐体２１０と下側筐体２２０とが接触して閉じた状態を保持するロック機構が設けられている。実施例では、２つの第１ロック部材２４１が上側筐体２１０の前側縁部に並置され、これらに対応して、２つの第２ロック部材２４２が下側筐体２２０の前側縁部に並置されている。第１ロック部材２４１には下側に延びた楔状凸部２４３が設けられ、第２ロック部材２４２には上側に向いた施錠穴２４４が設けられ、上側筐体２１０と下側筐体２２０とが接触する際に、楔状凸部２４３が施錠穴２４４に入ると、図示しない係合部材により楔状凸部２４３を係合して楔状凸部２４３を一時的に保持・固定する。 (outline of decompression part)
As shown in FIGS. 1 to 3, the thawing section 200 has a pair of upper housing 210 and lower housing 220, and a hinge section 230 connecting these housings so that they can be opened and closed. In addition, the defrosting unit 200 is provided with a locking mechanism that keeps the upper housing 210 and the lower housing 220 in contact with each other and in a closed state. In an embodiment, two first locking members 241 are juxtaposed at the front edge of the upper housing 210 and correspondingly two second locking members 242 are juxtaposed at the front edge of the lower housing 220. ing. The first locking member 241 is provided with a wedge-shaped protrusion 243 extending downward, and the second locking member 242 is provided with a locking hole 244 facing upward, so that the upper housing 210 and the lower housing 220 are separated. When the wedge-shaped protrusion 243 enters the locking hole 244 during contact, the wedge-shaped protrusion 243 is engaged by an engaging member (not shown) to temporarily hold and fix the wedge-shaped protrusion 243 .

（上側筐体）
上側筐体２１０には、ほぼ同一寸法（実施例では略Ａ５サイズ）を有した層状部材が、積層された状態で内部に収納されている。図３に示す例では、上側筐体２１０から近い順に、断熱材層２１１、熱伝導ゴム層２１２、面状ヒーター（好ましくは、図示のようなフィルム状ヒーターや図示しないラバーヒーター（例えば、シリコンラバーヒーター））２１３、熱伝導ゴム層２１４が積層され、開口部２１６を有した枠体２１５によって、これらの部材２１１～２１４が、上側筐体２１０の内側に一体保持されている。従って、最下層たる熱伝導ゴム層２１４の下面の大部分（つまり、上側の解凍面２５０）は、開口部２１６から露出し、後述の細胞凍結容器１に上側から接触・押圧する。 (upper housing)
In the upper housing 210, layered members having substantially the same size (approximately A5 size in the embodiment) are housed inside in a stacked state. In the example shown in FIG. 3, in order from the upper housing 210, a heat insulating material layer 211, a heat conductive rubber layer 212, a planar heater (preferably a film heater as shown or a rubber heater not shown (for example, silicon rubber) A heater )) 213 and a heat-conducting rubber layer 214 are laminated, and these members 211 to 214 are integrally held inside the upper housing 210 by a frame 215 having an opening 216 . Therefore, most of the lower surface of the heat-conducting rubber layer 214, which is the bottom layer (that is, the upper thawing surface 250) is exposed through the opening 216, and contacts and presses the cell freezing container 1, which will be described later, from above.

なお、熱伝導ゴム層２１２は必須では無く、排除しても良い。つまり、上側筐体２１０に熱伝導ゴム層２１４だけを設置してもよい。なお、図３では、説明の便宜のため、上述したロック機構やヒンジ部２３０を省略する。 Note that the heat-conducting rubber layer 212 is not essential and may be omitted. In other words, only the heat-conducting rubber layer 214 may be provided on the upper housing 210 . For convenience of explanation, FIG. 3 omits the above-described lock mechanism and hinge portion 230 .

（下側筐体）
一方、下側筐体２２０にも、ほぼ同一寸法を有した層状部材が、積層された状態で内部に収納されている。本実施例では、下側筐体２２０から近い順に、断熱材層２２１、フィルム状ヒーター２２２、熱伝導ゴム層２２３、フィルム状ヒーター２２４、熱伝導ゴム層２２５が積層され、開口部２２７を有した枠体２２６によって下側筐体２２０の内側に一体保持されている。従って、最上層たる熱伝導ゴム層２２５の上面の大部分（つまり、下側の解凍面２５０）は、開口部２２７から露出し、後述の細胞凍結容器１に下側から接触・押圧する。 (lower housing)
On the other hand, the lower housing 220 also accommodates layered members having substantially the same dimensions in a stacked state. In this embodiment, a heat insulating material layer 221 , a film heater 222 , a thermally conductive rubber layer 223 , a film heater 224 , and a thermally conductive rubber layer 225 are laminated in order from the lower housing 220 and have an opening 227 . It is integrally held inside the lower housing 220 by a frame 226 . Therefore, most of the upper surface of the heat-conducting rubber layer 225 as the uppermost layer (that is, the lower thawing surface 250) is exposed from the opening 227, and contacts and presses the cell freezing container 1 described below from below.

なお、本実施例では、単位時間あたりに細胞凍結容器１に付与する熱量を高めるため、フィルム状ヒーター２２２、２２４の複数（２つ）を用意したが、この例に限定されず、解凍対象の細胞凍結容器１に応じて、ヒーター数を増減可能である。例えば、上側筐体２１０と同様に、１つのヒーター２２４のみの構成にしてもよい。 In this example, a plurality (two) of the film heaters 222 and 224 were prepared in order to increase the amount of heat applied to the cell freezing container 1 per unit time. The number of heaters can be increased or decreased according to the cell freezing container 1 . For example, like the upper housing 210, only one heater 224 may be provided.

（筐体に着脱自在な枠体）
枠体２１５及び枠体２２６は、例えば、ビスＳ（図２（ａ）参照）などの公知の接続手段により、上側筐体２１０及び下側筐体２２０に着脱可能に取り付けられていることが好ましい。これにより、ヒーター２１３，２２２，２２４や熱伝導ゴム層２１２，２１４，２２３，２２５などの積層部材の一部又は全部を容易に取り外して、交換或いは清掃することが可能となる。 (frame body detachable from housing)
The frame 215 and the frame 226 are preferably detachably attached to the upper housing 210 and the lower housing 220 by known connection means such as screws S (see FIG. 2(a)). . As a result, part or all of the laminated members such as the heaters 213, 222, 224 and the heat conductive rubber layers 212, 214, 223, 225 can be easily removed for replacement or cleaning.

（枠体の変形例）
なお、図３に示す枠体２１５（２２６）の開口部２１６（２２７）は、筐体内側面積の枠体２１５（２２６）を除く大部分（つまり、解凍面２５０）を露出する構成であるが、これに限定されない。例えば、図８（ｃ）及び（ｄ）に示すように、細胞凍結容器１Ａの外形に対応した開口部２１６Ａ（２２７Ａ）を複数設けた枠体２１５Ａ（２２６Ａ）や、細胞凍結容器１Ｂの外形に対応した開口部２１６Ｂ（２２７Ｂ）を複数設けた枠体２１５Ｂ（２２６Ｂ）を用意・使用してもよい。 (Modified example of frame)
Note that the opening 216 (227) of the frame 215 (226) shown in FIG. , but not limited to. For example, as shown in FIGS. 8(c) and (d), a frame 215A (226A) provided with a plurality of openings 216A (227A) corresponding to the outer shape of the cell freezing container 1A, or the outer shape of the cell freezing container 1B. A frame 215B (226B) having a plurality of corresponding openings 216B (227B) may be prepared and used.

このように、解凍対象（細胞凍結容器１）の形状・寸法に合わせた開口部２１６Ａ（２２７Ａ），２１６Ｂ（２２７Ｂ）などを使用することにより、細胞凍結容器１Ａ，１Ｂが枠体２１５Ａ（２２６Ａ），２１５Ｂ（２２６Ｂ）によってより確実に適切な場所で保持されるようになり、解凍部２００の開閉操作や解凍工程時に、誤って容器１Ａ，１Ｂが解凍部２００から落下するような不測の事態も格段に減らすことができる。また、解凍中に、容器１Ａ（１Ｂ）同士が接触する危険も無くなる。また、解凍部２００を閉鎖する際に細胞凍結容器１Ａ（１Ｂ）が移動することも無くなるため、各容器１Ａ（１Ｂ）とフィルム状ヒーター（例えば、上記分割ヒーターのうち各開口部２１６Ａ（２２７Ａ），２１６Ｂ（２２７Ｂ）の投影面積上に置かれるヒーター）との間の対応関係がより確実となるため、解凍面２５０におけるより適切な温度監視や加温が可能となる。 In this way, by using the openings 216A (227A), 216B (227B) and the like that match the shape and dimensions of the object to be thawed (the cell freezing container 1), the cell freezing containers 1A, 1B can be , 215B (226B), the container 1A, 1B can be held in an appropriate place more reliably, and an unforeseen situation such as the container 1A, 1B accidentally falling from the defrosting section 200 during the opening/closing operation of the defrosting section 200 or the defrosting process can be prevented. can be reduced significantly. Also, there is no risk of the containers 1A (1B) coming into contact with each other during defrosting. In addition, since the cell freezing container 1A (1B) does not move when the thawing unit 200 is closed, each container 1A (1B) and the film heater (for example, each opening 216A (227A) of the split heater) , 216B (227B)), the temperature of the thawing surface 250 can be monitored and warmed more appropriately.

なお、容器１の形状・寸法が新規なものであっても、変形例の枠体２１５Ａ（２２６Ａ），２１５Ｂ（２２６Ｂ）を３Ｄプリンタ等で製作することで、迅速に顧客の要求に応えることもできる。 Even if the shape and dimensions of the container 1 are new, it is possible to quickly meet the customer's request by manufacturing the modified frames 215A (226A) and 215B (226B) with a 3D printer or the like. can.

（熱伝導ゴム層）
上側筐体２１０及び下側筐体２２０に設けられる熱伝導ゴム層２１２，２１４，２２３，２２５は、変形性を有することを特徴とし、更に、僅かながらに形状記憶性を有することが好ましい。これにより、どんな細胞凍結容器１を載置しても、これらの層の方が容器形状に柔軟に対応して変形し、これらを包み込み、層内の温度をより安定かつ一定に保つことができるようになる。なお、熱伝導ゴム層２１２，２１４，２２３，２２５の一部又は全部を蓄熱ゲル層で代用してもよい。 (Thermal conductive rubber layer)
The heat-conducting rubber layers 212, 214, 223, and 225 provided on the upper housing 210 and the lower housing 220 are characterized by having deformability, and preferably have a slight shape memory property. As a result, no matter what kind of cell freezing container 1 is placed, these layers flexibly deform to conform to the shape of the container, envelop them, and keep the temperature in the layers more stable and constant. become. A part or all of the heat-conducting rubber layers 212, 214, 223, 225 may be replaced with a heat storage gel layer.

（解凍面）
細胞凍結容器１が接触する上下の解凍面２５０は、図１などに示した例では、熱伝導ゴム層２１４，２２５の内側表面であるが、これらの表面をビニール製シートなどのプラスティック製フィルム２５１で覆い、これを解凍面２５０にするようにしてもよい（図９（ｃ）参照）。これにより、装置１を何回か使用した後に解凍面２５０が汚れた場合、新品に取り換えるだけで良いため、解凍面２５０の清掃や交換の際に掛る費用・時間を削減することが可能となる。 (Thawed surface)
The upper and lower thawing surfaces 250 with which the cell freezing container 1 contacts are the inner surfaces of the heat-conducting rubber layers 214 and 225 in the example shown in FIG. , which may be the thawing surface 250 (see FIG. 9(c)). As a result, when the thawing surface 250 becomes dirty after using the device 1 several times, it is sufficient to replace it with a new one, so it is possible to reduce the cost and time required for cleaning or replacing the thawing surface 250.例文帳に追加.

（フィルム状ヒーター）
上述のフィルム状ヒーター２１３，２２２，２２４には、例えば、エッチングされた金属箔（例えば、ステンレス箔）を両側からポリイミド製又はポリエステル製のフィルムで挟んだものを使用可能である。フィルム状ヒーターは極薄（厚みは通常、０．１ｍｍ～０．３ｍｍ程度）であるため、近接した熱伝導ゴム層の変形に応じて変形可能である。なお、図示しないラバーヒーターで柔軟性を有したものを使用してもよい。 (Film heater)
For the film heaters 213, 222, 224 described above, for example, an etched metal foil (for example, stainless steel foil) sandwiched between polyimide or polyester films can be used. Since the film heater is extremely thin (usually about 0.1 mm to 0.3 mm in thickness), it can be deformed according to the deformation of the adjacent heat-conducting rubber layer. A flexible rubber heater (not shown) may be used.

（温度センサ）
このヒーター２１３，２２４の上下面には、図４（ａ）に示すようにサーミスタ２４１（図示の例では１５本）や熱電対２４２の温度センサが設けられる。このような温度センサ２４１，２４２は、電線を通じて、ベース部３００内の制御手段３２０に信号を送信する。なお、より正確な温度監視のために、フィルム状ヒーター１枚につき、複数（例えば、８～２０個）の温度センサで温度測定し、制御手段３２０にて平均温度を算出し、この平均温度をそのヒーターの代表温度として使用してもよい。 (temperature sensor)
Temperature sensors such as thermistors 241 (15 in the illustrated example) and thermocouples 242 are provided on the upper and lower surfaces of the heaters 213 and 224 as shown in FIG. Such temperature sensors 241 and 242 transmit signals to the control means 320 in the base portion 300 through electric wires. For more accurate temperature monitoring, a plurality of (for example, 8 to 20) temperature sensors are used to measure the temperature of each film heater, the average temperature is calculated by the control means 320, and the average temperature is calculated. You may use it as a representative temperature of the heater.

また、温度センサ２４１の他に、過熱防止用の温度センサや安全装置を別途設けるようにしてもよい。例えば、図４（ａ）に示すように、過熱防止用の温度センサ及び安全装置として熱電対２４２（図示の例では２本）及び温度ヒューズ２４３がヒーター２１３，２２４に設けられる。一方、図４（ｂ）に示すように、熱電対２４２が断熱材層２１１（２２１）に設けられる。 In addition to the temperature sensor 241, a temperature sensor for preventing overheating and a safety device may be provided separately. For example, as shown in FIG. 4A, the heaters 213 and 224 are provided with thermocouples 242 (two in the illustrated example) and thermal fuses 243 as temperature sensors and safety devices for overheating prevention. On the other hand, as shown in FIG. 4B, a thermocouple 242 is provided on the heat insulating material layer 211 (221).

（複数枚のヒーター貼付による解凍面の分割加熱）
また、フィルム状ヒーター２１３，２２２，２２４は、各解凍面２５０の全てを１枚のヒーターで覆うように貼付しても良いが、図４（ｃ）に示すように、解凍面２５０を幾つかの区画（ブロック）に分割するように、複数枚（図示の例では１６枚）の比較的小さなヒーター（つまり、分割ヒーター）２６０及び温度センサ（図示の例では、各分割ヒーター２６０の中央に熱電対２４２）を並置させてもよい。分割ヒーター２６０の分割数を敢えて制限する必要は無いが、上述のようなＡ５サイズの解凍面２５０であれば、１６分割（ヒーター数１６個）程度までが現実的であろう。 (Split heating of thawing surface by attaching multiple heaters)
Also, the film heaters 213, 222, 224 may be attached so as to cover all the thawing surfaces 250 with one heater, but as shown in FIG. A plurality of relatively small heaters (that is, divided heaters) 260 (16 in the illustrated example) and temperature sensors (in the illustrated example, thermoelectric 242) may be juxtaposed. Although it is not necessary to limit the number of divisions of the divided heater 260, if the defrosting surface 250 is of A5 size as described above, up to about 16 divisions (the number of heaters is 16) would be realistic.

この場合も、断熱材層２１１（２２１）に過熱防止用の温度センサとして熱電対２４２を設けてもよい。なお、分割ヒーター２６０を含んだ面には塔載することが困難になった温度ヒューズ２４３を断熱材層２１１（２２１）上に設置してもよい。 Also in this case, a thermocouple 242 may be provided in the heat insulating material layer 211 (221) as a temperature sensor for preventing overheating. Note that the thermal fuse 243, which is difficult to mount on the surface including the split heater 260, may be installed on the heat insulating material layer 211 (221).

（分割加熱のメリット１）
このように解凍面２５０を分割するように貼付された複数の小さなフィルム状ヒーター（以下、「分割ヒーター」とも呼ぶ。）２６０及び温度センサ２４２を利用すれば、複数の細胞凍結容器１を細胞解凍装置１００にて同時に挟持・解凍する際に、容器１毎にピンポイントで温度測定しながら熱量を付与できるため、容器１毎の温度制御が可能となる。 (Merit 1 of split heating)
By using a plurality of small film-like heaters (hereinafter also referred to as “split heaters”) 260 attached so as to divide the thawing surface 250 and the temperature sensor 242, a plurality of cell freezing containers 1 can be used to thaw cells. When the device 100 simultaneously pinches and defrosts, the heat quantity can be applied while pinpointing the temperature of each container 1, so that the temperature of each container 1 can be controlled.

（分割加熱のメリット２）
また、複数の分割ヒーター２６０及び温度センサ２４２が設置されている方が、１枚のヒーターを設置した場合より、解凍面２５０を全体に亘って均一に加熱することが可能となり、解凍面２５０の何処に解凍対象（細胞凍結容器１）を載置しても略同一の温度条件で解凍することも可能となる。 (Merit 2 of split heating)
In addition, when a plurality of divided heaters 260 and temperature sensors 242 are installed, it is possible to uniformly heat the entire thawing surface 250 compared to when a single heater is installed. It is also possible to thaw under substantially the same temperature conditions no matter where the object to be thawed (the cell freezing container 1) is placed.

（分割加熱のメリット３）
また、この解凍装置１００で一度に解凍すべき細胞凍結容器１が少ない場合には、いずれの解凍面２５０においても加熱が不要な領域が生じ得る。例えば、解凍面２５０の左右両側が不要となり、中央領域のみ加熱が必要となり得る。この分割加熱の実施態様であれば、加熱不要な領域（例えば、左右両側の領域）に置かれた分割ヒーター２６０にだけ給電を抑えれば、消費電力・エネルギーの省力化にもつながる。 (Merit 3 of split heating)
In addition, when the number of cell freezing containers 1 to be thawed at one time by this thawing apparatus 100 is small, there may be areas where heating is unnecessary on any thawing surface 250 . For example, the left and right sides of thawing surface 250 may not be needed, and only the central region may require heating. In this embodiment of divided heating, power consumption and energy can be saved by suppressing the power supply only to the divided heaters 260 placed in areas where heating is not required (for example, left and right areas).

（分割加熱のメリット４）
また、ヒーターを含んだ面が、図４（ｃ）（魚の鱗片）のように分割されることにより、その部分の柔軟性や局所的な可動性も増し、容器１の形状や寸法に適合し易くなるため、これらの容器１の包み込みが更に容易となる。 (Advantage 4 of split heating)
In addition, by dividing the surface including the heater as shown in FIG. As a result, packaging of these containers 1 becomes easier.

上述した変形性を有する熱伝導ゴム層２１２，２１４，２２３，２２５及びフィルム状ヒーター２１３，２２２，２２４が解凍面２５０を含む又は解凍面２５０に近接して設けられているため、例えば、互いに異なる形状の複数の細胞凍結容器１を同時に挟持した場合でも、これらを隙間なく挟み込んで、加温（融解）することが可能である。 Since the deformable thermal conductive rubber layers 212, 214, 223, 225 and the film heaters 213, 222, 224 include the thawing surface 250 or are provided in the vicinity of the thawing surface 250, for example, they are different from each other. Even when a plurality of shaped cell freezing containers 1 are sandwiched at the same time, it is possible to heat (thaw) them by sandwiching them without gaps.

（ベース部）
次に、ベース部３００について詳しく説明する。ベース部３００は、図１などに示すように、ベース部筐体３０１と、ベース部筐体３０１を支持する脚部３０２と、天板３４０とを備える。なお、脚部３０２には防振パッドが設置されていることが好ましく、これにより、ベース部３００で発生する振動が外部構造物（図示しない）に伝達することが抑制される。また、図１（ｂ）は、参考のため、ベース部３００の内部構造を破線で示す。 (base part)
Next, the base portion 300 will be described in detail. The base portion 300 includes a base portion housing 301 , legs 302 supporting the base portion housing 301 , and a top plate 340 , as shown in FIG. 1 and the like. A vibration isolation pad is preferably installed on the leg portion 302 to suppress transmission of vibration generated in the base portion 300 to an external structure (not shown). In addition, FIG. 1B shows the internal structure of the base portion 300 with broken lines for reference.

（ベース部の基本構成）
また、図５は、ベース部３００の基本構成を概念的に説明した図である。ベース部筐体３０１には、解凍部２００を駆動可能な揺動手段３１０と、揺動動作を制御したり、温度センサから温度信号を取得・処理したり、解凍条件を設定・変更・保存するための制御手段３２０と、これらの手段３１０，３２０に給電可能な電源手段３３０と、が設けられる。 (Basic composition of the base part)
FIG. 5 is a diagram conceptually explaining the basic configuration of the base section 300. As shown in FIG. The base housing 301 includes a swinging means 310 capable of driving the defrosting section 200, a swinging means for controlling the swinging operation, acquiring and processing temperature signals from a temperature sensor, and setting, changing, and saving defrosting conditions. Control means 320 for and power supply means 330 capable of supplying power to these means 310, 320 are provided.

なお、ベース部筐体３０１の外面上面には、図１に示すように、主電源スイッチ３５０、及び操作パネル３６０が設けられ、ヒーターの加熱条件や揺動条件を表示・入力することができる。また、ブザー３８０も取り付けられており、警告音や起動音や終了音などを発することができる。 As shown in FIG. 1, a main power switch 350 and an operation panel 360 are provided on the outer surface of the base housing 301 to display/input the heating conditions and swing conditions of the heater. A buzzer 380 is also attached to emit a warning sound, a start sound, an end sound, and the like.

また、図示しないが、ブザー３８０の機能に代えて、又はブザー３８０の機能とともに、制御手段３２０に、操作者（看護婦等の医療従事者）の携帯端末に解凍終了や異常停止に関する信号を送る機能を付加してもよい。 Also, although not shown, instead of the function of the buzzer 380 or together with the function of the buzzer 380, the control means 320 sends a signal regarding the end of defrosting or an abnormal stop to the mobile terminal of the operator (medical worker such as a nurse). Functions may be added.

（ベース部と解凍部との接続）
天板３４０の上面３４１には、図１（ｂ）や図２に示すように、下側筐体２２０の下面２２０ｂに設けられた凸部２２０ｐを収容可能な接続孔３４２が設けられる。これにより、下側筐体２２０を含んだ解凍部２００が、ベース部３００の上部に位置する天板３４０に着脱可能となる。また、大小異なるサイズを有した解凍部（図示せず、例えばＡ４又はＢ５サイズの解凍面を有した解凍部）を用意していれば、解凍対象の容器１の寸法や数に合った適切なサイズの解凍部に適宜交換してベース部３００に載置することができるようになる。なお、図１（ｂ）などの図面には、ベース部３００の電源手段３３０や制御手段３２０から、電力や通信を要する解凍部２００内の構成要素（温度センサ２４１，２４２や面状ヒーター２１３，２２４など）へ繋がる配線等の描画を省略している。 (Connection between base part and thawing part)
As shown in FIGS. 1B and 2, the upper surface 341 of the top plate 340 is provided with a connection hole 342 capable of accommodating the protrusion 220p provided on the lower surface 220b of the lower housing 220. As shown in FIG. As a result, the thawing section 200 including the lower housing 220 can be attached to and detached from the top plate 340 positioned above the base section 300 . In addition, if thawing units having different sizes (not shown, for example, having a thawing surface of A4 or B5 size) are prepared, an appropriate size suitable for the size and number of containers 1 to be thawed can be used. It can be replaced with a thawing portion of the appropriate size and placed on the base portion 300 . In the drawings such as FIG. 224, etc.) are omitted.

図６及び図７などを参照しながら、ベース部筐体３０１内の構造について説明する。なお、図７は、説明の便宜のため、ベース部筐体３０１と天板３４０とを除去したうえで、ベース部３００の側面を示す。 The internal structure of the base housing 301 will be described with reference to FIGS. 6 and 7. FIG. For convenience of explanation, FIG. 7 shows a side surface of the base portion 300 after removing the base portion housing 301 and the top plate 340 .

（電源手段）
電源手段３３０の構成部材として電源インレット３３１と制御・モーター電源３３２とがベース部筐体３０１内に設けられる。制御・モーター電源３３２は、電源インレット３３１で得られたＡＣ１００Ｖの電圧をＤＣ２４Ｖの電圧に変換してモーター３１１に電力を供給する。 (Power supply means)
A power supply inlet 331 and a control/motor power supply 332 are provided in the base housing 301 as constituent members of the power supply means 330 . The control/motor power supply 332 converts the voltage of AC 100V obtained at the power inlet 331 into a voltage of DC 24V and supplies power to the motor 311 .

（揺動手段の具体的な構成）
また、揺動手段３１０の構成部材として、モーター３１１、増速ギア群３１２、偏芯軸３１３、天板３４０等が設けられる。また、制御手段３２０の構成部材としてモータードライバ３２１の他、操作モニター基板３２２や制御基板３２３などが設けられる。操作モニター基板３２２及び制御基板３２３は、解凍温度の設定・監視・制御の役割も担う。 (Specific configuration of rocking means)
Further, as constituent members of the rocking means 310, a motor 311, a speed increasing gear group 312, an eccentric shaft 313, a top plate 340 and the like are provided. In addition to the motor driver 321, an operation monitor board 322, a control board 323, and the like are provided as components of the control means 320. FIG. The operation monitor board 322 and the control board 323 also play a role of setting, monitoring and controlling the thawing temperature.

なお、上述の構成部材の他、電気回路を構成するために、制御基板リレー３２４、ヒーター用リレー３２５、電力ヒューズ３２６なども併せて設置されている。 In addition to the above components, a control board relay 324, a heater relay 325, a power fuse 326, and the like are also installed to form an electric circuit.

（揺動手段による解凍部の揺動）
モーター３１１は、制御・モーター電源３３２により給電されて動作可能となり、モータードライバ３２１及び制御基板３２３によって回転数等の回転動作が制御される。モーター３１１は、ベース部筐体３０１の下側に設けられた増速ギア群３１２の歯車（３１２ａ）と噛み合っており、モーター３１１の動力が増速ギア群３１２内の歯車３１２ａ，３１２ｂ，３１２ｃ，３１２ｄ内を順次伝達する。そして、歯車伝達の面でモーター３１１から最も離れた歯車３１２ｄが偏芯軸３１３と接続している。偏芯軸３１３の上部は天板３４０に接続されている。 (Oscillation of thawing section by oscillation means)
The motor 311 is powered by a control/motor power supply 332 and becomes operable, and the rotational operation such as the number of revolutions is controlled by a motor driver 321 and a control board 323 . The motor 311 meshes with the gears (312a) of the speed increasing gear group 312 provided on the lower side of the base housing 301, and the power of the motor 311 is applied to the gears 312a, 312b, 312c, 312d sequentially. A gear 312 d that is farthest from the motor 311 in terms of gear transmission is connected to the eccentric shaft 313 . An upper portion of the eccentric shaft 313 is connected to the top plate 340 .

以上の構成により、モーター３１１が回転すると、増速ギア群３１２の各歯車３１２ａ～３１２ｄも回転速度を増加させながら回転する。増速ギア群３１２の最終の歯車３１２ｄの回転中心と、偏芯軸３１３とは、互いに数ミリ（１～１０ｍｍ、例えば５ｍｍ）ずれているため、増速ギア群３１２が回転すると、偏芯軸３１３及び天板３４０が５ｍｍ偏芯しながら駆動つまり揺動する。つまり、平面視で天板３４０が上記偏芯によって生じた距離（ずれ）を回転半径とした円を描くように動く。また、図６（ａ）に示すように、偏芯軸３１３が連結板３４３を介して天板３４０に接続されるようにしてもよい。 With the above configuration, when the motor 311 rotates, the gears 312a to 312d of the speed increasing gear group 312 also rotate while increasing the rotational speed. Since the center of rotation of the final gear 312d of the speed increasing gear group 312 and the eccentric shaft 313 are deviated from each other by several millimeters (1 to 10 mm, for example 5 mm), when the speed increasing gear group 312 rotates, the eccentric shaft 313 and the top plate 340 are driven, that is, rocked while being eccentric by 5 mm. In other words, in a plan view, the top plate 340 moves so as to draw a circle whose radius of rotation is the distance (deviation) caused by the eccentricity. Alternatively, as shown in FIG. 6A, the eccentric shaft 313 may be connected to the top plate 340 via a connecting plate 343. As shown in FIG.

なお、図６及び図７に示すように、揺動手段３１０に複数の偏芯軸３１３，３１４を設けるようにしてもよい。具体的には、第１偏芯軸（駆動側）３１３から平行に離間した第２偏芯軸（追従側）３１４も設けられており、第１偏芯軸３１３と第２偏芯軸３１４とは、図示しない伝達ベルトや歯車によって接続されている。このように複数の偏芯軸３１３，３１４を設けることで、解凍部２００の重量が増加しても、支障なく確実に解凍部２００を揺動させることができる。 In addition, as shown in FIGS. 6 and 7, the swing means 310 may be provided with a plurality of eccentric shafts 313 and 314 . Specifically, a second eccentric shaft (following side) 314 is also provided parallel to and separated from the first eccentric shaft (driving side) 313 , and the first eccentric shaft 313 and the second eccentric shaft 314 are separated from each other. are connected by transmission belts and gears (not shown). By providing a plurality of eccentric shafts 313 and 314 in this way, even if the weight of the defrosting section 200 is increased, the defrosting section 200 can be reliably swung without any trouble.

上述の揺動手段３１０に加えて、第２揺動手段（例えば、図示しない振動モーター）を天板３４０等に設置するようにしてもよい。これにより、揺動手段３１０による平面方向の上記回転動作（１００～１，０００ｒｐｍの揺動）だけでなく、第２揺動手段による鉛直方向の微振動（例えば、２，０００～３，０００ｒｐｍ程度の振動）をも天板３４０及び解凍部２００に付与することが可能となる。 In addition to the swinging means 310 described above, a second swinging means (for example, a vibration motor (not shown)) may be installed on the top plate 340 or the like. As a result, not only the rotational movement (100 to 1,000 rpm) in the plane direction by the oscillating means 310, but also the microscopic vibration (for example, about 2,000 to 3,000 rpm) in the vertical direction by the second oscillating means vibration) can also be applied to the top plate 340 and the defrosting section 200 .

制御手段３２０は、細胞凍結容器１の形状及び数量（容量）に応じた揺動動作を実現するための最適なパラメータを設定することができる。また、制御手段３２０では、揺動数の他にも、加熱温度（例えば、室温～７０℃）、待機温度（例えば、室温～７０℃）、最低温度からの温度上昇率（例えば、０～１００％）、最低温度からの温度上限（例えば、室温～７０℃）、解凍時間（例えば、１～１０分）などの昇温プログラムに関するパラメータ、その他の安全に関するパラメータ（例えば、過熱防止温度）を設定できる。 The control means 320 can set optimum parameters for realizing the rocking motion according to the shape and quantity (capacity) of the cell freezing container 1 . In addition to the number of oscillations, the control means 320 controls the heating temperature (eg, room temperature to 70° C.), the standby temperature (eg, room temperature to 70° C.), the rate of temperature rise from the lowest temperature (eg, 0 to 100 %), temperature upper limit from the lowest temperature (e.g. room temperature to 70°C), temperature raising program parameters such as thawing time (e.g. 1 to 10 minutes), and other safety related parameters (e.g. overheating prevention temperature) can.

また、制御手段３２０は、細胞凍結容器１の形状・種類に合わせて上述のパラメータを組み合わせた解凍条件を複数（例えば、３種）までメモリ３２７（図５参照）に予め保存することができる。また、温度センサから逐次取得する温度情報を表示ディスプレイ３６６（図９（ａ）参照）などの表示部に表示させたり、安全パラメータと比較させたり、メモリ３２７に保存させたりすることも可能である。 In addition, the control means 320 can store in the memory 327 (see FIG. 5) in advance up to a plurality (for example, three types) of thawing conditions obtained by combining the above parameters according to the shape and type of the cell freezing container 1 . In addition, it is also possible to display the temperature information sequentially acquired from the temperature sensor on a display unit such as the display 366 (see FIG. 9A), compare it with safety parameters, or store it in the memory 327. .

（操作パネル）
図９（ａ）に示す操作パネル３６０には、モードスイッチ３６１、スタートスイッチ３６２、セットスイッチ３６３、エンタースイッチ３６４、上下スイッチ３６５などのスイッチ類が設けられる他、表示ディスプレイ３６６、モード表示灯３６７、運転状態表示灯３６８（スタンバイ表示灯、ラン表示灯、エラー表示灯など）が設けられる。 (control panel)
The operation panel 360 shown in FIG. 9A is provided with switches such as a mode switch 361, a start switch 362, a set switch 363, an enter switch 364, and an up/down switch 365, as well as a display 366, a mode indicator lamp 367, An operating status indicator light 368 (standby indicator light, run indicator light, error indicator light, etc.) is provided.

（操作パネル上の各種スイッチ）
モードスイッチ３６１は、予め設定した複数の解凍条件（解凍モード）から所望のモードを選択することができる。最終決定された解凍モードは、いずれかのモード表示灯３６７の点灯状態で確認することができる。スタートスイッチ３６２は、例えば、運転の開始や停止を選択することができる。セットスイッチ３６３は、例えば、解凍条件を構成する種々のパラメータの設定変更を行うためにパラメータの表示・切替えが可能である。エンタースイッチ３６４は、例えば、上述のパラメータの設定変更の確定を行う。上下スイッチ３６５は、例えば、パラメータ設定値を入力・変更する。 (Various switches on the operation panel)
The mode switch 361 can select a desired mode from a plurality of preset thawing conditions (thawing modes). The defrosting mode that has been finally determined can be confirmed by the lighting state of any of the mode indicator lamps 367 . The start switch 362 can select, for example, starting or stopping operation. The set switch 363 can display/switch parameters, for example, to change the settings of various parameters that make up the thawing conditions. The enter switch 364, for example, confirms the setting change of the parameters described above. The up/down switch 365, for example, inputs/changes parameter setting values.

（操作パネルでの解凍モードの選択及び設定）
実施例の解凍装置１００では、細胞凍結容器１又は細胞の種類に合わせた解凍条件を３種（３つのモード）までメモリ３２７に予め保存できるが、この例に限定されず、モード数は増減してもよい。操作者は、これら予め設定された複数の解凍モードから、解凍対象に適合した解凍モードを単に選択するだけでよいので、解凍対象毎の設定変更に手間が殆ど掛からないで済む。予め設定されたモードに適さない解凍対象（例えば、新種の細胞や新規形状の細胞凍結容器）を解凍する場合には、セットスイッチ３６３、エンタースイッチ３６４、上下スイッチ３６５などを使用して、新たな解凍モードに設定変更してもよい。 (Selection and setting of defrosting mode on the operation panel)
In the thawing device 100 of the embodiment, up to three types (three modes) of thawing conditions according to the type of cell freezing container 1 or cells can be stored in advance in the memory 327, but the number of modes is not limited to this example, and the number of modes can be increased or decreased. may Since the operator only has to select the defrosting mode suitable for the defrosting target from among these preset defrosting modes, it takes little time and effort to change the setting for each defrosting target. When thawing a thawing object that is not suitable for the preset mode (for example, a new type of cell or a cell freezing container with a new shape), set switch 363, enter switch 364, up/down switch 365, etc. are used to thaw a new You may change the setting to defrost mode.

（解凍装置の使用方法）
次に、上述した解凍装置１００の使用方法の一例について、説明する。
（１）電源インレット３３１と電源コンセント（ＡＣ１００Ｖ、図示せず）をつなぎ、主電源スイッチ３５０をＯＮにする。
（２）操作パネル３６０上のモードスイッチ３６１を押下げすることで、解凍対象に応じた解凍条件を３種の解凍モードから選択する。
（３）予熱が開始され、設定温度に達すると、ブザー３８０と運転状態表示灯３６８により解凍可能状態が告知される。
（４）解凍面２５０をエタノール等で清掃し、解凍面２５０に細胞凍結容器１をセットする。
（５）解凍部２００の上側筐体２１０を下側筐体２２０に近づけて解凍空間を閉鎖・施錠する。
（６）スタートスイッチ３６２を押下げする。
（７）解凍が完了すると、ブザー３８０と運転状態表示灯３６８により解凍完了が告知される。
（８）解凍部２００の施錠を解除し、上側筐体２１０を持ち上げて解凍空間を静かに開放し、細胞凍結容器１を取り出す。
（９）細胞凍結容器１を取り出した後、解凍可能状態を示す運転状態表示灯３６８が点灯していれば、別（残り）の細胞凍結容器１に対して上記（４）～（８）の工程を繰り返す。消灯していれば、上記（３）の工程から開始する。
（１０）全ての細胞凍結容器１に対して解凍作業が終了した場合、必ず主電源スイッチ３５０をＯＦＦにし、電源コンセントを抜く。 (How to use the thawing device)
Next, an example of how to use the decompression device 100 described above will be described.
(1) Connect the power inlet 331 to a power outlet (100 V AC, not shown), and turn on the main power switch 350 .
(2) Depressing the mode switch 361 on the operation panel 360 selects the thawing conditions according to the thawing target from 3 types of thawing modes.
(3) Preheating is started, and when the set temperature is reached, the buzzer 380 and the operation status indicator lamp 368 announce that the thawing is possible.
(4) Clean the thawing surface 250 with ethanol or the like, and set the cell freezing container 1 on the thawing surface 250 .
(5) The upper housing 210 of the defrosting section 200 is brought closer to the lower housing 220 to close and lock the defrosting space.
(6) Depress the start switch 362;
(7) When defrosting is completed, buzzer 380 and operating status indicator light 368 notify the completion of defrosting.
(8) Unlock the thawing unit 200, lift the upper housing 210 to gently open the thawing space, and take out the cell freezing container 1.
(9) After taking out the cell freezing container 1, if the operation status indicator lamp 368 indicating the thawing possible state is lit, perform the above (4) to (8) for another (remaining) cell freezing container 1. Repeat process. If the light is off, the process starts from the above step (3).
(10) When all the cell freezing containers 1 have been thawed, be sure to turn off the main power switch 350 and unplug the power supply.

（解凍装置の使用後のメンテナンス）
解凍装置１００の使用後、解凍面２５０が汚れていた場合、消毒用エタノール等で清掃する。もし解凍面２５０の汚損が激しい場合、解凍面２５０を構成するビニール製シート２５１や熱伝導ゴム層２１２，２１４，２２３，２２５や、上下の枠体２１５，２２６を新品に交換する。なお、このメンテナンスを行う際は、安全の為、必ず主電源スイッチ３５０をＯＦＦにし、電源コンセントを抜いておく。 (Maintenance after use of thawing equipment)
After using the defrosting device 100, if the defrosting surface 250 is dirty, clean it with disinfecting ethanol or the like. If the thawing surface 250 is severely damaged, the vinyl sheet 251, the heat conductive rubber layers 212, 214, 223, 225 and the upper and lower frames 215, 226 constituting the thawing surface 250 are replaced with new ones. For safety, always turn off the main power switch 350 and unplug the power supply when performing this maintenance.

（実証試験）
本発明の解凍装置１００を用いて、凍結細胞を実際に解凍し、その細胞の生存率を測定する実験（実証試験）を行った。また、比較例としてウォーターバスを用いた温浴による細胞の解凍も行い、その細胞の生存率も測定した。 (Verification test)
Using the thawing apparatus 100 of the present invention, an experiment (demonstration test) was conducted in which frozen cells were actually thawed and the viability of the cells was measured. In addition, as a comparative example, the cells were thawed by a warm bath using a water bath, and the viability of the cells was also measured.

（細胞の培養及び培養時の細胞生存率の測定）
本実施例の供試細胞は以下の方法に従って培養した。すなわち、３Ｔ３－Ｊ２細胞を定法に従い８０％コンフルエントになるまで培養し、この細胞を回収後、細胞保存液（１０％ＢＳ、１０％ＤＭＳＯ、８０％ＤＭＥ培地）に懸濁し、生存率を自動蛍光細胞計数装置ＬＵＮＡ－ＦＬ（ロゴスバイオ社）にて計測した。 (Cell culture and measurement of cell viability during culture)
The test cells of this example were cultured according to the following method. That is, 3T3-J2 cells were cultured to 80% confluence according to a standard method, and after collecting the cells, they were suspended in a cell preservation medium (10% BS, 10% DMSO, 80% DME medium), and the viability was measured by automatic fluorescence. Measurement was performed using a cell counter LUNA-FL (Logos Bio).

（細胞の凍結保存）
細胞保存液に懸濁した細胞を２ｍｌずつ、細胞凍結容器（扁平状容器）１Ａ（ジェイ・エム・エス社製）又は細胞凍結容器（円筒状容器、クライオチューブ）１Ｂ（バイオロジックス社製＃８８－３２０２）に分注し、定法に従い液体窒素内で凍結保存した。 (Cryopreservation of cells)
2 ml each of cells suspended in a cell preservation solution was placed in a cell freezing container (flat container) 1A (manufactured by JMS) or a cell freezing container (cylindrical container, cryotube) 1B (manufactured by Biologics #88). -3202) and cryopreserved in liquid nitrogen according to the standard method.

（細胞の解凍及び生存細胞率の測定）
一定期間液体窒素内で保管した細胞を、ウォーターバスによる３７℃の温浴（比較例）又は本発明の解凍装置１００を用いて解凍し、上記自動蛍光細胞計数装置にて細胞の生存率を計測した。 (Thawing of cells and measurement of viable cell rate)
Cells stored in liquid nitrogen for a certain period of time were thawed using a water bath at 37°C (comparative example) or using the thawing device 100 of the present invention, and the viability of the cells was measured using the automatic fluorescent cell counter. .

（計測結果）
各試験条件での細胞生存率の計測結果を表１に示す。本発明の解凍装置では、解凍対象の凍結細胞に対し最適な昇温プログラムを設定できるため、細胞にとって最適な状態で解凍することができる。このため、従来の温浴法（比較例）に比べて細胞の生存率が格段に高くなる結果となった。また、細胞凍結容器として形状・寸法の異なった容器１Ａ，１Ｂを使用したが、どちらの形状の容器１Ａ，１Ｂを使用しても、本発明の解凍装置の方が、解凍後の細胞生存率が高く維持できることが判った。 (Measurement result)
Table 1 shows the measurement results of the cell viability under each test condition. In the thawing apparatus of the present invention, since an optimum heating program can be set for the frozen cells to be thawed, the cells can be thawed in an optimum state. As a result, the survival rate of the cells was remarkably increased compared to the conventional hot bath method (comparative example). In addition, although containers 1A and 1B having different shapes and sizes were used as cell freezing containers, the thawing device of the present invention has a higher cell viability after thawing regardless of which shape of container 1A or 1B is used. was found to be able to be maintained at a high level.

（解凍後の細胞培養及び細胞増殖能の評価）
次に、上述のように円筒状の細胞凍結容器１Ｂにて凍結保存した細胞を、本発明の解凍装置１００を用いて解凍し、その５分の１の量をシャーレ（１０ｃｍ径）にて一週間培養し、培養終了時点での細胞の***回数を計測し、増殖能力を評価した。 (Evaluation of cell culture and cell proliferation ability after thawing)
Next, the cells cryopreserved in the cylindrical cell freezing container 1B as described above are thawed using the thawing apparatus 100 of the present invention, and one-fifth of the thawed cells are thawed in a petri dish (10 cm diameter). The cells were cultured for a week, and the number of cell divisions was counted at the end of the culture to evaluate the proliferation ability.

（評価結果）
各試験条件での細胞の***回数の観察結果を表１に示す。本発明の解凍装置では、解凍対象の凍結細胞に対し最適な昇温プログラムを設定できるため、細胞にとって最適な状態で解凍することができる。このため、従来の温浴法（比較例）に比べ、解凍後の細胞を、より高い細胞増殖能を保持した状態で生存させることが明らかとなった。 (Evaluation results)
Table 1 shows the observation results of the number of cell divisions under each test condition. In the thawing apparatus of the present invention, since an optimum heating program can be set for the frozen cells to be thawed, the cells can be thawed in an optimum state. Therefore, compared with the conventional warm bath method (comparative example), it was found that the cells after thawing are allowed to survive while maintaining a higher cell proliferation ability.

以上説明したように、本発明の細胞解凍装置を用いれば、専門病院ではない末端病院においても、細胞凍結容器内で凍結保存された細胞（より具体的には、培養線維芽細胞や培養表皮細胞）を誰でも簡単に解凍することができる。 As described above, if the cell thawing apparatus of the present invention is used, cells cryopreserved in a cell freezing container (more specifically, cultured fibroblasts and cultured epidermal cells) can be used even in terminal hospitals that are not specialized hospitals. ) can be easily decompressed by anyone.

また、本発明の細胞解凍装置は、様々な形状の細胞凍結容器に対応可能で、細胞凍結容器に頻繁に接触する解凍部の構成部材（例えば、解凍面）のメンテナンスが容易である。 In addition, the cell thawing apparatus of the present invention is compatible with cell freezing containers of various shapes, and maintenance of the constituent members (eg, thawing surface) of the thawing section that frequently come into contact with the cell freezing container is easy.

また、本発明の細胞解凍装置は、多数の細胞凍結容器を一度に挟持可能で、かつ、細胞凍結容器毎に熱環境を設定管理可能な細胞解凍装置を提供することができる。 In addition, the cell thawing apparatus of the present invention can provide a cell thawing apparatus that can clamp a large number of cell freezing containers at once and can set and manage the thermal environment for each cell freezing container.

このように、本発明は、上記再生医療分野での凍結細胞を利用した病院間連携を後押しするだけでなく、従来の下肢切断に代わる治療手法としての培養細胞移植の確立・普及に貢献することは間違いなく、産業上の利用価値は非常に高い。 In this way, the present invention not only supports cooperation between hospitals using frozen cells in the field of regenerative medicine, but also contributes to the establishment and spread of cultured cell transplantation as a therapeutic method to replace conventional lower limb amputation. There is no doubt that the industrial utility value is very high.

１，１Ａ，１Ｂ細胞凍結容器
１００細胞解凍装置
２００解凍部
２１０上側筐体
２１１断熱材層
２１２，２１４熱伝導ゴム層
２１３面状ヒーター（フィルム状ヒーター）
２１５枠体
２２０下側筐体
２２１断熱材層
２２２，２２４面状ヒーター（フィルム状ヒーター）
２２３，２２５熱伝導ゴム層
２２６枠体
２３０ヒンジ部
２４１，２４２，２４３温度センサ（サーミスタ，熱電対，温度ヒューズ）
２５０解凍面
２５１プラスティック製フィルム（ビニール製シート）
２６０分割ヒーター
３００ベース部
３０１ベース部筐体
３０２ベース部の脚部
３１０揺動手段
３２０制御手段
３３０電源手段
３４０天板
３５０主電源スイッチ
３６０操作パネル Reference Signs List 1, 1A, 1B cell freezing container 100 cell thawing device 200 thawing unit 210 upper housing 211 heat insulating material layer 212, 214 heat conductive rubber layer 213 planar heater (film heater)
215 frame 220 lower housing 221 heat insulating material layer 222, 224 planar heater (film heater)
223, 225 Thermal conductive rubber layer 226 Frame body 230 Hinge part 241, 242, 243 Temperature sensor (thermistor, thermocouple, thermal fuse)
250 thawing surface 251 plastic film (vinyl sheet)
260 Split heater 300 Base part 301 Base part housing 302 Leg part of base part 310 Swing means 320 Control means 330 Power supply means 340 Top plate 350 Main power switch 360 Operation panel

Claims

細胞凍結容器に貯蔵された凍結細胞を解凍する細胞解凍装置であって、
上側筐体と、下側筐体と、前記上側筐体及び前記下側筐体を開閉可能に接続するヒンジ部と、前記上側筐体及び前記下側筐体の内側に設けられかつ前記細胞凍結容器を挟持可能な一対の解凍面と、前記解凍面を加熱可能な面状ヒーターと、が設けられた解凍部と、
前記解凍部を載置可能な天板と、前記天板を揺動可能な揺動手段と、が設けられたベース部と、
を備え、かつ、
前記解凍面は、変形しながら前記細胞凍結容器を複数、包み込むことが可能であり、かつ、前記細胞凍結容器の形状又は寸法が異なる場合でも解凍可能であり、
前記上側筐体及び前記下側筐体には、それぞれ、前記解凍面に近い順に、熱伝導ゴム層又は蓄熱ゲル層と、前記面状ヒーターと、を少なくとも含んだ積層部材が収容され、
前記熱伝導ゴム層又は前記蓄熱ゲル層は変形性を有し、
前記面状ヒーターは、柔軟性を有したフィルム状ヒーター又は柔軟性を有したラバーヒーターであり、
前記上側筐体及び前記下側筐体には、前記積層部材を保持可能な枠体が着脱自在に取り付けられていること
を特徴とする細胞解凍装置。 A cell thawing device for thawing frozen cells stored in a cell freezing container,
an upper housing, a lower housing, a hinge section connecting the upper housing and the lower housing so that they can be opened and closed, and the cell freezing provided inside the upper housing and the lower housing. a thawing unit provided with a pair of thawing surfaces capable of sandwiching a container and a planar heater capable of heating the thawing surfaces;
a base portion provided with a top plate on which the thawing portion can be placed, and a swing means capable of swinging the top plate;
and
The thawing surface can wrap a plurality of the cell freezing containers while deforming, and can be thawed even if the cell freezing container has a different shape or size.the law of nature,
The upper housing and the lower housing each accommodate a laminated member containing at least a heat conductive rubber layer or a heat storage gel layer and the planar heater in order of proximity to the thawing surface,
The heat conductive rubber layer or the heat storage gel layer has deformability,
The planar heater is a flexible film heater or a flexible rubber heater,
A frame capable of holding the laminated member is detachably attached to the upper housing and the lower housing.
A cell thawing device characterized by:

前記解凍面は、プラスティック製フィルムで覆われていること
を特徴とする請求項１に記載の細胞解凍装置。 The cell thawing device according to claim 1, wherein the thawing surface is covered with a plastic film.

前記解凍部が前記天板に着脱自在に取り付けられていること
を特徴とする請求項１又は２に記載の細胞解凍装置。 The cell thawing device according to claim 1 or 2, wherein the thawing unit is detachably attached to the top plate.

前記解凍面を分割するように複数の前記面状ヒーターが並置されていること
を特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。 The cell thawing device according to any one of claims 1 to 3 , wherein a plurality of said planar heaters are arranged so as to divide said thawing surface.

前記揺動手段は、前記天板の平面視で円を描くように該天板を揺動させること
を特徴とする請求項１～４のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。 The cell thawing device according to any one of claims 1 to 4 , wherein the rocking means rocks the top plate so as to draw a circle in a plan view of the top plate.

前記ベース部には、種類の異なる凍結細胞に適した複数の解凍モードを予め保存したメモリと、前記解凍モードの一つを選択可能な制御手段と、をさらに備えること
を特徴とする請求項１～５のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。 2. The base part further comprises a memory pre-stored with a plurality of thawing modes suitable for different types of frozen cells, and a control means capable of selecting one of the thawing modes. 6. The cell thawing device according to any one of 1 to 5 .

前記凍結細胞に培養表皮細胞又は培養線維芽細胞が使用されること
を特徴とする請求項１～６のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。 The cell thawing device according to any one of claims 1 to 6, wherein cultured epidermal cells or cultured fibroblasts are used as the frozen cells.

前記細胞凍結容器が、変形性を有さない堅固な容器であること
を特徴とする請求項１～７のいずれか１項に記載の細胞解凍装置。 The cell thawing device according to any one of claims 1 to 7 , wherein the cell freezing container is a rigid container that does not have deformability.