JP7042291B2 - リンカー及びadcへのその応用 - Google Patents
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Description
Rは、CF2H、CF3、CF2CF3、PhSO2Meから選ばれ、
Qは、
L1は、-(CR1R2)m-(CR3R4)-(CR1R2)n-、-(CR1R2)m-(CR3R4)-O-(CR1R2)n-及び-[(CR1R2)(CR1R2)×]p-(CR1R2)q-から選ばれ、
mは、1、2、3または4であり、
nは、1、2、3または4であり、
pは、1、2、3、4、5または6であり、
qは、1または2であり、
R1は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
R2は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
R3は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
R4は、H、OH、NR5R6、CO2H、P(O)(OH)2、SO3H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基C1-3アルキル基から選ばれ、
R5は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
R6は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
Xは、NR7、O、及びS(O)rから選ばれ、
rは、0、1または2であり、
R7は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
L2は、ジペプチド構造単位であり、
R8は、メチル基、プロピル基、イソプロピル基、sec-ブチル基、ベンジル基、及び
R9は、(CH2)4NH2、(CH2)3NHCONH2、(CH2)3NHC(=NH)NH2、
sは、0、1、2、3または4から選ばれ、
L3は、自己分解のできる構造単位であり、
から選ばれ、
R10は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
各R11は、それぞれ独立的にH、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
同一のCに結合された二つのR11は、同一の炭素原子に任意に結合して、3~6員環を形成することができ、
隣接する二つの位置でのR11は、同一の炭素原子に任意に結合して、5~7員環を形成することができ、
R12は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれ、
R13は、H、または任意に選んだ1~3個のハロゲン、OH、NH2、NHMeまたはNMe2で置換されたC1-3アルキル基から選ばれる。
Yは、抗体であり、
aは、1~8の整数または小数であり、
Mは、薬物であり、
他の変数は、前記のように定義される。
Yは、抗体であり、aは、1~8から選ばれる整数または小数であり、具体的に、aは、1、2、3、3.4、3.5、4、4.2、5、6、7または8から選ばれる。
から選ばれ、
Yは、抗体であり、aは、1~8から選ばれる整数または小数であり、具体的に、aは、1、2、3、3.4、3.5、4、4.2、5、6、7または8から選ばれる。
C1-6は、C1、C2、C3、C4、C5及びC6から選ばれ、C3-6は、C3、C4、C5及びC6から選ばれる。
ステップ1:抗体ジスルフィド結合の還元と精製
240mgの抗体-薬物複合体を得るために、8.955mlのハーセプチン(26.8mg/ml、約30mg/ml)を8.95μLの0.5MのTCEP(反応液中のTCEPの最終濃度は、0.5mMである)と混合させ、室温で2時間反応させた。その後、反応液を1mlのプロテインAアフィニティーカラムで分離し、残留TCEPと他の非モノクローナル抗体不純物を除去した。精製後、1MのTrisで溶出液のpHを6.0程度に調整し、分光光度計でモノクローナル抗体の濃度を測定した。溶液の最終体積は、約20mlであり、モノクローナル抗体の濃度は、約11.6mg/mlであった。
溶液を均等に2本の試験管(10mlずつ)に分け、各試験管に薬物リンカー中間体のDMSO溶液を1ml(25mg/ml)入れた。薬物リンカーと当該クローン抗体の比率は、6:1であった。室温で約12時間反応させた。反応終了後、二つの試験管の溶液を併せてから、5000rpm/分の条件の下で5分間遠心分離し、遠心分離溶液をプロテインAアフィニティーカラムで精製して、未反応の薬物コンジュゲート中間体を除去した。1MのTrisの緩衝液で溶出液のpHを6.0に調整した。薬物抗体比(DAR)は、疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)HPLCにて決定した。
前記グリニャール試薬を-78℃に冷却し、そこに(4S)-4-イソプロピル-2-(トリフルオロメチル)オキサゾリジン(17g、93.4mmol)のTHF(40mL)溶液を滴下した。得られた反応液を0℃まで加温して1.5時間攪拌した。飽和NH4Cl水溶液(50mL)を加えて反応をクエンチさせて、酢酸エチルで抽出した(4×100mL)。有機相は、硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、ろ過し、ろ過液を濃縮させた。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、移動相として石油エーテル/酢酸エチル(0-4%)使用し、黄色の油状物である表題化合物(11.5g、46%)を得た。
窒素存在下、-78℃で、前記グリニャール試薬であるブロモ(ヘキサ-5-エニル)マグネシウム(0.5M、500mL、1.25当量)に、(4S)-4-イソプロピル-2-トリフルオロメチルオキサゾリジン(36.6g、200mmol、1.00当量)のテトラヒドロフラン(300mL)溶液を滴下した。反応液を、-78℃で30分間攪拌した後、20℃まで昇温させ、続いて4.5時間攪拌した。薄層クロマトグラフィー(石油エーテル:酢酸エチル=5:1)により、反応が終了したのを確認した。混合物は、飽和塩化アンモニウム溶液(500mL)でクエンチして、酢酸エチル(1000mL×3)で抽出した。併せた有機相は、飽和食塩水(500mL×2)で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過してから、濃縮した。残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(石油エーテル:酢酸エチル=20:1)で精製して、19g(収率35.5%)の黄色の油状の表題生成物を得た。
中間体2、(S)-MTMH-バリン:1H NMR(CDCl3)δ6.72(s,2H),3.54(t,2H),3.33(d,2H),2.97(m,1H),2.02(m,1H),1.75-1.25(m,8H),1.03(d,3H),0.99(d,3H). LCMS:365.1(MH+)。
ステップ1:Fmoc-Cit
ステップ1:4-((((9H-フルオレン-9-イル)メチルオキシル)カルボニル)アミノ)ブタン酸
20℃で、4-アミノ-N-(4-(ヒドロキシメチル)フェニル)ブタンアミド(600mg、2.9mmol、1当量)とFmoc-cit(1.3g、3.2mmol、1.1当量)のジクロロメタン(8mL)溶液に、EEDQ(1.4g、5.8mmol、2当量)のメタノール(8mL)溶液を滴下し、反応液を20℃で16時間攪拌した。薄層クロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール=5:1)で反応がしたことを確認した後、反応液を濃縮し、残渣を分取用薄層クロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール=5:1)で精製し、白色固体の表題化合物(440mg、収率:26%)を得た。LCMS:588.3(MH+)
5: 1)で精製し、白色固体の表題化合物の粗生成物(320mg)を得た。LCMS: 366.2(MH+)
ステップ1:(S)-MTMH-Val-Cit-PAB-OH
10:1)で精製し、白色固体の表題化合物(410mg、収率52.3%)を得た。LCMS(ESI):627(MH+)
表題化合物の調製方法は、上述した(S)-MTMH-Val-Cit-PABO(CO)-MMAE(実施例2)と同様に、(R)-MTMH-Val(中間体2)とCit-PAB-OH(中間体4)から、ステップ1から3の反応を行って調製した。LCMS(ESI):686.1[(M/2)H+]
ステップ1:(R)-MTMH-DP1-PAB-OH
表題化合物は、(R)-MTMH-DP1-PAB(CO)-MMAE(実施4)と同様であるが、中間体5のモルホリンを、ピペリジンによって置換し、対応する中間体を得た。LCMS(ESI):698.6[(M/2)H+]
ステップ1:(R)-MTMH-Boc-DP3-PAB-OH
ステップ1:(S)-MTMH-Val-Cit-PABO(CO)-ABA
窒素存在下、10℃で、(S)-MTMH-Val-Cit-PABO(CO)-ABA(50mg、66μmol、1当量)とジイソプロピルエチルアミン(26mg、198μmol、3当量)のDMF(3mL)溶液中に、一度にHATU(30mg、79μmol、1.2当量)を加え、30分攪拌した後、MMAE(47.5mg、66μmol、1当量)を加え、28℃で12時間攪拌した。LCMS測定で反応が終了したことを確認した後、反応液を濃縮した。残渣を分取用高速液体クロマトグラフィーで精製(カラム:Phenomenex Synergi C18、150×25×10μm、条件:0.225%ギ酸-CAN、B相初期濃度:45、B相終了濃度:75、勾配時間:10分、100%B保持時間:2分、流速:25mL/分))して、白色固体の表題化合物(25mg、収率26%)を得た。LCMS:728.7[(M/2)H+]
ステップ1:(S)-MTMH-Val-Cit-ABA-PAB-OH
(4-ニトロフェニル)カーボネート
薬物-リンカー中間体に用いられる適切なジペプチド単位を特定するための便利な方法を見出した下記の通りである。パラ-アミノベンジルカルボニル断片を介して蛍光タグ(7-アミノ-4-メチルクラミン、7-AMC)に結合されたCbz-保護ジペプチドは、スキーム1に示すような、標準的なペプチド化学調製法はによって調製した。Dubowchik(Biorg.Med.Chem.Lett.1998,8,3341-3346)の文献に記載された方法と同様の条件下で、これらのジペプチド基質をウシカテプシンBとインキュベーションした。そのウシカテプシンBの加水分解速度は、7-AMC(表3)の放出により測定した。基質Aより遅いも加水分解速度が遅い新規ジペプチドは除いた。FS-9、FS-10及びFS-11の三つのジペプチド単位が、追加のジペプチド単位として選択されて、薬物-リンカー中間体の調製に用いた。
(a)乳癌細胞系HCC1954
乳癌細胞系HCC1954は、10%FBSを含むRPMI1640培地を用い、37℃、5%CO2の加湿インキュベーター内で培養を行った。
投薬する前日に、細胞を収集して、ウェル当たり2000細胞の密度で、96ウェルプレートに播種した。2日目に、ハーセプチンと本発明のADCを、所定の濃度(1、0.3333、0.1111、0.037、0.0123、0.0041、0.0014、0.00046および0.00015μg/ml)に希釈して、細胞に添加した。各薬物濃度で3回実施した。
投薬して72時間後、Cell Titer-Gloキット(Promega)の取扱説明書に従って、該キットを用いて細胞活性を測定した。
本試験は対照ADC(ADC-HA)との比較で行った。対照ADCは、その構造中の通常のアミド結合が、その炭素中心に一つのトリフルオロメチル基を有する。
皮膚がん細胞系A-431は、10%FBSを含むDMEM培地を使用して、37℃、5%CO2の加湿インキュベーター内で培養を行った。
投薬する前日に、細胞を収集して、ウェル当たり2000細胞の密度で、96ウェルプレートに播種した。2日目に、エルビタックスと本発明のADCを、所定の濃度(10、3.33、1.11、0.37、0.123、0.041、0.014、0.0046および0.0015μg/ml)に希釈して、細胞に添加した。各薬物濃度で3回実施した。
投薬して72時間後、Cell Titer-Gloキット(Promega)の取扱説明書に従って、該キットを用いて細胞活性を測定した。
本試験は対照ADC(ADC-EA)との比較で行った。対照ADCは、その構造中の通常のアミド結合が、その炭素中心に一つのトリフルオロメチル基を有する。
(a)HCC1954異種移植マウスモデル
7-8週齢のメスのNOD-SCIDマウスに、HCC1954細胞を皮下接種した。接種から7日後、腫瘍塊の平均体積が153mm3に達したと推定されたところで投与を開始した。腫瘍の体積及びマウスの体重によって、マウスをランダムにグループ化(一グループ当たり8匹である)した。本発明のADC(15mpK)、ハーセプチン(15mpK)及び溶媒対照を、グループ化した後の0日目と15日目にマウスに対して投与した。投与開始から28日後、対照群マウスの腫瘍塊の体積が1092mm3に達した後、マウスに対して安楽死を実施した。
6-8週齢のメスのBalb/cマウスに、A-431細胞を皮下接種した。接種から10日後、腫瘍塊の平均体積が、172mm3に達したと推定されたところで投与を開始した。腫瘍の体積及びマウスの体重によって、マウスをランダムにグループ化(一グループ当たり8匹である)した。本発明のADC(10mpK)、エルビタックス(10mpK)及び溶媒対照を、グループ化した後の0日目と15日目にマウスに対して投与した。投与開始から25日後、対照群マウスの腫瘍塊の体積が2000mm3に達した後、マウスに対して安楽死を実施した。
Claims (4)
- 請求項1または2に記載の抗体-薬物複合体の治療有効量、および、薬学に許容される担体、希釈剤または賦形剤を含む薬物組成物。
- 請求項1または2に記載の抗体-薬物複合体、または請求項3に記載の薬物組成物の、癌の治療のための薬物の調製においての使用。
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WO2019149116A1 (zh) * | 2018-01-30 | 2019-08-08 | 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 | 制备偶联物的方法 |
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CN111670053B (zh) * | 2019-05-20 | 2023-08-22 | 烟台迈百瑞国际生物医药股份有限公司 | 一种抗体药物偶联物中间体的一锅法制备工艺 |
KR102440763B1 (ko) | 2019-05-20 | 2022-09-05 | 맙플렉스 인터내셔널 컴퍼니 리미티드 | 항체-약물 접합체의 중간체를 제조하는 원-포트 방법 |
CN113880731A (zh) * | 2021-10-28 | 2022-01-04 | 成都市科隆化学品有限公司 | 一种Fmoc-D-Cit光学纯度的纯化方法及得到的产品 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004032828A3 (en) | 2002-07-31 | 2006-04-27 | Seattle Genetics Inc | Anti-cd20 antibody-drug conjugates for the treatment of cancer and immune disorders |
JP2007514652A (ja) | 2003-11-06 | 2007-06-07 | シアトル ジェネティックス, インコーポレイテッド | リガンドに結合体化可能なモノメチルバリン化合物 |
JP2010519310A (ja) | 2007-02-21 | 2010-06-03 | メダレックス インコーポレイテッド | 単一のアミノ酸を有する化学リンカーおよびその複合体 |
JP2010526821A (ja) | 2007-05-08 | 2010-08-05 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | システイン改変抗muc16抗体および抗体−薬物結合体 |
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US20030083263A1 (en) | 2001-04-30 | 2003-05-01 | Svetlana Doronina | Pentapeptide compounds and uses related thereto |
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PT1545613E (pt) | 2002-07-31 | 2011-09-27 | Seattle Genetics Inc | Conjugados de auristatina e sua utilização para tratamento do cancro, de uma doença autoimune ou de uma doença infecciosa |
US8088387B2 (en) | 2003-10-10 | 2012-01-03 | Immunogen Inc. | Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates |
RU2402548C2 (ru) | 2004-05-19 | 2010-10-27 | Медарекс, Инк. | Химические линкеры и их конъюгаты |
BRPI0510883B8 (pt) | 2004-06-01 | 2021-05-25 | Genentech Inc | composto conjugado de droga e anticorpo, composição farmacêutica, método de fabricação de composto conjugado de droga e anticorpo e usos de uma formulação, de um conjugado de droga e anticorpo e um agente quimioterapêutico e de uma combinação |
EP1817341A2 (en) | 2004-11-29 | 2007-08-15 | Seattle Genetics, Inc. | Engineered antibodies and immunoconjugates |
JP5171621B2 (ja) | 2005-07-07 | 2013-03-27 | シアトル ジェネティックス, インコーポレイテッド | フェニルアラニン側鎖修飾をc末端に有するモノメチルバリン化合物 |
WO2007008848A2 (en) | 2005-07-07 | 2007-01-18 | Seattle Genetics, Inc. | Monomethylvaline compounds having phenylalanine carboxy modifications at the c-terminus |
EP1813614B1 (en) | 2006-01-25 | 2011-10-05 | Sanofi | Cytotoxic agents comprising new tomaymycin derivatives |
EP2240495B1 (en) * | 2008-02-01 | 2015-07-15 | Genentech, Inc. | Nemorubicin metabolite and analog reagents, antibody-drug conjugates and methods |
US8609105B2 (en) | 2008-03-18 | 2013-12-17 | Seattle Genetics, Inc. | Auristatin drug linker conjugates |
TW201004647A (en) * | 2008-05-20 | 2010-02-01 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | Novel dual targeting antitumoural conjugates |
BRPI1008749B8 (pt) | 2009-02-05 | 2021-05-25 | Immunogen Inc | compostos derivados de benzodiazepina, seus conjugados, composição farmacêutica, seu uso e seus processos de preparação |
FR2949469A1 (fr) | 2009-08-25 | 2011-03-04 | Sanofi Aventis | Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique |
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BR112016013861A2 (pt) * | 2013-12-16 | 2017-10-10 | Genentech Inc | conjugados de droga e anticorpo, compostos, método de tratamento e composição farmacêutica |
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JP2007514652A (ja) | 2003-11-06 | 2007-06-07 | シアトル ジェネティックス, インコーポレイテッド | リガンドに結合体化可能なモノメチルバリン化合物 |
JP2010519310A (ja) | 2007-02-21 | 2010-06-03 | メダレックス インコーポレイテッド | 単一のアミノ酸を有する化学リンカーおよびその複合体 |
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WO2013163229A1 (en) | 2012-04-24 | 2013-10-31 | Seattle Genetics, Inc. | Dr5 ligand drug conjugates |
WO2013173337A2 (en) | 2012-05-15 | 2013-11-21 | Seattle Genetics, Inc. | Self-stabilizing linker conjugates |
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