JP7032723B2 - 薬剤の心毒性評価方法及びそのための試薬又はキット - Google Patents
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Description
本発明の課題は、従来技術に比べて簡便かつ再現性良く薬物の心毒性を包括的に評価できる方法を提供することである。
(1) cytochrome P450, family 51, subfamily A, polypeptide 1 (CYP51A1) (NM_000786)
(2) 7-dehydrocholesterol reductase (DHCR7) (NM_001360)
(3) farnesyl diphosphate synthase (FDPS) (NM_002004)
(4) squalene epoxidase (SQLE) (NM_003129)
(5) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase (HMGCR) (NM_000859)
(6) lipin 1 (LPIN1) (NM_145693)
(7) farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1 (FDFT1) (NM_004462)
(8) fatty acid synthase (FASN) (NM_004104)
(9) transmembrane protein 97 (TMEM97) (NM_014573)
(10) hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase 7 (HSD17B7) (NM_016371)
(11) StAR-related lipid transfer (START) domain containing 4 (STARD4) (NM_139164)
(12) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase 1 (soluble) (HMGCS1) (NM_002130)
(13) methylsterol monooxygenase 1 (MSMO1) (NM_006745)
(14) isopentenyl-diphosphate delta isomerase 1 (IDI1) (NM_004508)
(15) acetyl-CoA acetyltransferase 2 (ACAT2) (NM_005891)
(16) 24-dehydrocholesterol reductase (DHCR24) (NM_014762)
(17) insulin induced gene 1 (INSIG1) (NM_005542)及び
(18) stearoyl-CoA desaturase (delta-9-desaturase) (SCD) (NM_005063)
から選択される1以上の遺伝子の塩基配列からなるヌクレオチド又はその一部配列を含むヌクレオチドを含むことを特徴とする。
薬剤の心毒性を評価するための遺伝子は、複数の催不整脈性薬剤のそれぞれで処理した細胞と処理しなかった細胞とにおける包括的な遺伝子発現を解析することにより選択される。後述する実施例で詳細に説明するように、臨床上、副作用として催不整脈を持つ薬剤化合物を処理した細胞群(以下「催不整脈群」という。)と、これらの薬剤処理をしなかった細胞群との間でt検定による2群比較を行い、発現レベルに有意差のある遺伝子群を抽出する。さらに、両群それぞれにおいて平均値を算出し、それらの平均値の差が2倍以上になる遺伝子群、かつ、催不整脈群で発現レベルが上昇する遺伝子群を抽出することにより、薬剤処理をしなかった細胞の遺伝子発現と比較して、催不整脈を持つ薬剤化合物を処理したすべての細胞で発現レベルが上昇する複数の遺伝子を選択することができる。選択された遺伝子の発現レベルを数値化(以下「スコア化」と称する場合もある。)し、薬剤の催不整脈リスクを評価し、その閾値を適宜設定することにより、催不整脈を持つ薬剤化合物と、催不整脈を持たない薬剤化合物を識別することができる。
(1) cytochrome P450, family 51, subfamily A, polypeptide 1 (CYP51A1) (NM_000786)
(2) 7-dehydrocholesterol reductase (DHCR7) (NM_001360)
(3) farnesyl diphosphate synthase (FDPS) (NM_002004)
(4) squalene epoxidase (SQLE) (NM_003129)
(5) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase (HMGCR) (NM_000859)
(6) lipin 1 (LPIN1) (NM_145693)
(7) farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1 (FDFT1) (NM_004462)
(8) fatty acid synthase (FASN) (NM_004104)
(9) transmembrane protein 97 (TMEM97) (NM_014573)
(10) hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase 7 (HSD17B7) (NM_016371)
(11) StAR-related lipid transfer (START) domain containing 4 (STARD4) (NM_139164)
(12) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase 1 (soluble) (HMGCS1) (NM_002130)
(13) methylsterol monooxygenase 1 (MSMO1) (NM_006745)
(14) isopentenyl-diphosphate delta isomerase 1 (IDI1) (NM_004508)
(15) acetyl-CoA acetyltransferase 2 (ACAT2) (NM_005891)
(16) 24-dehydrocholesterol reductase (DHCR24) (NM_014762)
(17) insulin induced gene 1 (INSIG1) (NM_005542)及び
(18) stearoyl-CoA desaturase (delta-9-desaturase) (SCD) (NM_005063)
本発明に係る心毒性評価に用いるヌクレオチドは、上記18種類の遺伝子から選択される1以上の遺伝子配列を含むヌクレオチド又はその断片配列からなるヌクレオチドを含む。また、本発明に用いるヌクレオチドは、上記ヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズするヌクレオチド及びその断片配列からなるヌクレオチドも含まれる。このようなヌクレオチドとしては、例えば、上記塩基配列との配列同一性の程度が、全体の平均で約80%以上、好ましくは約90%以上、より好ましくは約95%以上、特に好ましくは約98%以上である塩基配列を含むヌクレオチド等を挙げることができる。ハイブリダイゼーションは、カレント・プロトコールズ・イン・モレキュラー・バイオロジー(Current protocols in molecular biology(edited by Frederick M. Ausubel et al., 1987))に記載の方法等、当業界で公知の方法あるいはそれに準じる方法に従って行なうことができる。また、市販のライブラリーを使用する場合、添付の使用説明書に記載の方法に従って行なうことができる。ここで、「ストリンジェントな条件」とは、例えば、「1XSSC、0.1%SDS、37℃」程度の条件であり、より厳しい条件としては「0.5XSSC、0.1%SDS、42℃」程度の条件であり、さらに厳しい条件としては「0.2XSSC、0.1%SDS、65℃」程度の条件である。このようにハイブリダイゼーションの条件が厳しくなるほどプローブ配列と高い配列同一性を有するヌクレオチドを単離し得る。ただし、上記のSSC、SDS及び温度の条件の組み合わせは例示であり、当業者であればハイブリダイゼーションのストリンジェンシーを決定する上記もしくは他の要素(例えば、プローブ濃度、プローブの長さ、ハイブリダイゼーションの反応時間など)を適宜組み合わせることにより、上記と同様のストリンジェンシーを実現することが可能である。さらに、これらの遺伝子はバリアントを有する場合もあり、本発明で用いる遺伝子には上記遺伝子のバリアントも含まれる。バリアントの塩基配列は遺伝子データベースにアクセスすることにより得ることができる。本発明のヌクレオチドは該バリアントの塩基配列を含むヌクレオチド又はその断片配列からなるヌクレオチドも含む。
固定基板としては、ガラス板、石英板、シリコンウェハーなどが挙げられる。基板の大きさとしては、例えば3.5mm×5.5mm、18mm×18mm、22mm×75mmなどが挙げられるが、これは基板上のプローブのスポット数やそのスポットの大きさなどに応じて様々に設定することができる。ポリヌクレオチド又はその断片の固定化方法としては、ヌクレオチドの荷電を利用して、ポリリジン、ポリエチレンイミン、ポリアルキルアミンなどのポリ陽イオンで表面処理した固相担体に静電結合させたり、アミノ基、アルデヒド基、エポキシ基などの官能基を導入した固相表面に、アミノ基、アルデヒド基、SH基、ビオチンなどの官能基を導入したヌクレオチドを共有結合により結合させたりすることもできる。固定化は、アレイ機を用いて行ってもよい。上記18個の遺伝子から選択される1以上の遺伝子又はその断片を基板に固相化してDNAマイクロアレイを作製し、該DNAマイクロアレイと蛍光物質で標識した被験体由来のmRNA又はcDNAを接触させ、ハイブリダイズさせ、DNAマイクロアレイ上の蛍光強度を測定することにより、mRNAの種類と量を決定することができる。その結果、被験体において発現レベルが変動している遺伝子がわかり、遺伝子発現プロファイルを得ることができる。被験体由来のmRNAを標識する蛍光物質は、限定されず、市販の蛍光物質を用いることができる。例えば、Cy3、Cy5等を用いればよい。mRNAの標識は公知の方法で行うことができる。DNAマイクロアレイを用いた方法は、上記遺伝子のmRNAにハイブリダイズするヌクレオチドプローブの使用により測定することができる。測定に用いるプローブの塩基長は、10~100 mer、好ましくは10~80 mer、さらに好ましくは15~50 merである。なお、プローブにはPCR産物を用いることもでき、そのプローブの塩基長は、50~5,000bp、好ましくは50~2,000bp、さらに好ましくは100~1,000bpである。
本発明に係る薬剤の心毒性の評価方法は、試験化合物の存在又は非存在下で、哺乳動物細胞内における、上記18種類の遺伝子から選択される1以上の遺伝子の発現レベルを測定する工程を含む。より具体的には、本工程の一実施形態として、以下の工程を含むことができる。
(a)哺乳動物細胞を試験化合物と接触させる工程、
(b)上記工程(a)で試験化合物と接触させた細胞及び試験化合物と接触させなかった対照細胞からRNAを抽出する工程、及び
(c)抽出されたRNAを用いて、上記選択された遺伝子の発現レベルを決定する工程、である。
以下、(a)~(c)の各工程について詳細に説明する。
使用した薬剤と試薬
アンブリセンタン、アムロジピン、ビソプロロール、カンデサルタン、リナグリプチン、ナフトピジル、プラスグレル、スマトリプタンは、セレックケミカルズ社(Selleck Chemicals, Houston, TX, USA)から、クロニジン、グリブリド、リシノプリル、ニコランジル、プロパフェノンは和光純薬工業株式会社から、エホニジピン、ミベフラジル、テルフェナジン、テロジリンはシグマ社から、アリスキレン、ワーファリンはLKT Laboratories社から、アステミゾール、ベプリジルはTocris Bioscience社から、アミオダロン、アトルバスタチンはToronto Research Chemicals社から、シサプリドはAbcam社から、ケトチフェンは東京化成工業株式会社からそれぞれ購入した。すべての薬剤はジメチルスルフォキシド(DMSO):メタノール(7:3)の混合液で溶解し、-80℃の冷凍庫で凍結保存した。細胞培養のためのゲンタマイシンとゼラチン(Type A, Cell Culture Tested)は、それぞれ和光純薬工業株式会社とシグマ社から購入した。
iCell Cardiomyocytesは、Cellular dynamics international社から購入し、添付のプロトコールに従い培養を行った。6ウェルプレートに5×105個/ウェルになるように細胞を播種し、細胞に添付されている播種用培地を用いて、37℃、7%CO2インキュベーターで培養した。播種48時間後に、ゲンタマイシン (50μg/mL)を含む維持培地に培地交換した。維持培地は、1日おきに培地交換を行い、播種後6日間培養を行った。薬剤処理のために、使用直前に薬剤を維持培地に添加し、その培地を用いて培地交換を行った。薬剤処理時間は24時間とした。また、薬剤無処理のコントロールとしてDMSO/メタノールの混合液を最終濃度で0.1%になるように処理した。
14400種類のヒトゲノムの転写産物に対する80塩基の合成ポリヌクレオチドを合成し、カスタムアレイを作製した(MicroDiagnostic, Tokyo, Japan )。薬剤処理又は非処理の細胞からの全RNA抽出は、株式会社ニッポンジーン製のアイソジェン(ISOGEN)を用いて行った。全RNAは、Super Script II(インビトロジェン社製)を用い、各サンプルについてはシアニン-5-dUTP(パーキンエルマー社製)で標識し、22種類のヒト細胞株から抽出した全RNAを等量混合して調製したヒト共通参照RNAについてはシアニン-3-dUTP(パーキンエルマー社製)で標識した。ハイブリダイゼーションは、Labeling and Hybridization kit (MicroDiagnostic社製)を用いて行った。マイクロアレイからのシグナルは、GenePix 4000B scanner (Molecular Devices社製)を用いて測定した。
QT延長に伴う催不整脈活性の評価システムを構築するため、循環器系、アレルギー系並びに泌尿器及び肛門系の経口薬を含む、8種類の催不整脈薬(表2)及び17種類の非催不整脈薬(表3)を選択した。この8種類の催不整脈薬の中には、QT延長による心室頻拍(TdP)を誘導することが原因で撤退した5種類の薬剤を含む (the Japan Pharmaceutical References; Fermini and Fossa, 2003)。
また、上記18種類の遺伝子の中から、任意に選択した10個の遺伝子の発現レベルのヒートマップ及びスコアを図2に示す。図2に示したように、催不整脈薬の中で最もスコアが低かった10μMのシサプリド処理における10個の遺伝子発現レベルは、薬剤無処理(溶媒のみ)の場合と比べて有意に増加しており、10個の遺伝子を用いた場合でも薬剤の心毒性の有無を評価できることが分かった。
さらに単一の遺伝子を用いた場合の発現レベルとして、(1) CYP51A1 (NM_000786)、(2) DHCR7 (NM_001360)及び(3) FDPS (NM_002004)のそれぞれの遺伝子についてのヒートマップ及びスコアを図3に示す。これらの遺伝子単独では、スコアが小さく識別力は弱いものの、薬剤無処理又は溶媒無処理の場合と比べて遺伝子発現レベルが増加していることが分かる。
Claims (14)
- 以下の18種類の遺伝子:
(1) cytochrome P450, family 51, subfamily A, polypeptide 1 (CYP51A1)
(2) 7-dehydrocholesterol reductase (DHCR7)
(3) farnesyl diphosphate synthase (FDPS)
(4) squalene epoxidase (SQLE)
(5) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase (HMGCR)
(6) lipin 1 (LPIN1)
(7) farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1 (FDFT1)
(8) fatty acid synthase (FASN)
(9) transmembrane protein 97 (TMEM97)
(10) hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase 7 (HSD17B7)
(11) StAR-related lipid transfer (START) domain containing 4 (STARD4)
(12) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase 1 (soluble) (HMGCS1)
(13) methylsterol monooxygenase 1 (MSMO1)
(14) isopentenyl-diphosphate delta isomerase 1 (IDI1)
(15) acetyl-CoA acetyltransferase 2 (ACAT2)
(16) 24-dehydrocholesterol reductase (DHCR24)
(17) insulin induced gene 1 (INSIG1)及び
(18) stearoyl-CoA desaturase (delta-9-desaturase) (SCD)
から選択される1以上の遺伝子の哺乳動物由来の心筋細胞内での発現レベルに基づいて、薬剤の催不整脈作用を評価するための試薬又はキットであって、前記選択された各遺伝子の塩基配列からなるヌクレオチド又はその一部配列を含むヌクレオチドを含むことを特徴とする、催不整脈作用を評価するための試薬又はキット。 - 前記選択された遺伝子が、(1)、(3)、(4)及び(12)~(16)の何れか1つ以上を含む請求項1に記載の催不整脈作用を評価するための試薬又はキット。
- 前記選択された遺伝子が、(2)、(5)~(11)、(17)及び(18)の組み合わせからなる請求項1に記載の催不整脈作用を評価するための試薬又はキット。
- 前記各遺伝子の塩基配列の一部配列を含むヌクレオチドが、PCR用の一対のプライマーである請求項1~3何れか一項に記載の催不整脈作用を評価するための試薬又はキット。
- 前記各遺伝子の塩基配列の一部配列を含むヌクレオチドが、DNAマイクロアレイ用のプローブである請求項1~3何れか一項に記載の催不整脈作用を評価するための試薬又はキット。
- 前記各遺伝子の塩基配列の一部配列を含むヌクレオチドが、RNAシークエンス用のプライマーである請求項1~3何れか一項に記載の催不整脈作用を評価するための試薬又はキット。
- 請求項1に記載された18種類の遺伝子の塩基配列からなるヌクレオチド又はその一部配列を含むヌクレオチドを含む、催不整脈作用を評価するためのDNAマイクロアレイ。
- 試験化合物の存在又は非存在下で、哺乳動物由来の心筋細胞内における以下の18種類の遺伝子:
(1) cytochrome P450, family 51, subfamily A, polypeptide 1 (CYP51A1)
(2) 7-dehydrocholesterol reductase (DHCR7)
(3) farnesyl diphosphate synthase (FDPS)
(4) squalene epoxidase (SQLE)
(5) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase (HMGCR)
(6) lipin 1 (LPIN1)
(7) farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1 (FDFT1)
(8) fatty acid synthase (FASN)
(9) transmembrane protein 97 (TMEM97)
(10) hydroxysteroid (17-beta) dehydrogenase 7 (HSD17B7)
(11) StAR-related lipid transfer (START) domain containing 4 (STARD4)
(12) 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase 1 (soluble) (HMGCS1)
(13) methylsterol monooxygenase 1 (MSMO1)
(14) isopentenyl-diphosphate delta isomerase 1 (IDI1)
(15) acetyl-CoA acetyltransferase 2 (ACAT2)
(16) 24-dehydrocholesterol reductase (DHCR24)
(17) insulin induced gene 1 (INSIG1)及び
(18) stearoyl-CoA desaturase (delta-9-desaturase) (SCD)
から選択される1以上の遺伝子の発現レベルをin vitroにおいて測定する工程と、
前記試験化合物の存在下における選択された遺伝子の発現レベルが、前記試験化合物の非存在下における発現レベルと比較して有意に増加している場合に、前記試験化合物が催不整脈作用を有すると推定する工程を含むことを特徴とする、前記試験化合物の催不整脈作用の評価方法。 - 前記選択された遺伝子が、(1)、(3)、(4)及び(12)~(16)の何れか1つ以上を含む請求項8に記載の催不整脈作用の評価方法。
- 前記選択された遺伝子が、(2)、(5)~(11)、(17)及び(18)の組み合わせからなる請求項8に記載の催不整脈作用の評価方法。
- 前記哺乳動物由来の心筋細胞が、ヒト、ラット又はマウス由来の細胞である請求項8~10何れか一項に記載の催不整脈作用の評価方法。
- 前記哺乳動物由来の心筋細胞が、iPS細胞又はES細胞由来の心筋細胞である請求項8~11何れか一項に記載の催不整脈作用の評価方法。
- 前記選択された各遺伝子について、試験化合物非存在下での発現レベルに対して、試験化合物の最高血中濃度の100倍以下の濃度における試験化合物存在下での発現レベルの比率(倍率変化)を計算し、その比率の総和が所定の値以上であるときに、前記試験化合物が催不整脈作用を有すると判定する請求項8~12何れか一項に記載の催不整脈作用の評価方法。
- 請求項8に記載の18種類の遺伝子を選択したとき、前記所定の値が15である請求項13に記載の催不整脈作用の評価方法。
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JP2009533017A (ja) | 2006-02-27 | 2009-09-17 | ターゲッティド・モレキュラー・ダイアグナスティクス・エルエルシー | 細胞脂肪を減少させるため、心毒性を予測するため、チロシンキナーゼ阻害剤による処置による組成物および方法 |
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Family Cites Families (1)
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