JP6829101B2 - Oral composition for prevention of upper respiratory tract infection or relief of upper respiratory tract infection symptoms - Google Patents
Oral composition for prevention of upper respiratory tract infection or relief of upper respiratory tract infection symptoms Download PDFInfo
- Publication number
- JP6829101B2 JP6829101B2 JP2017027879A JP2017027879A JP6829101B2 JP 6829101 B2 JP6829101 B2 JP 6829101B2 JP 2017027879 A JP2017027879 A JP 2017027879A JP 2017027879 A JP2017027879 A JP 2017027879A JP 6829101 B2 JP6829101 B2 JP 6829101B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hydroxycholecalciferol
- respiratory tract
- upper respiratory
- test
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 106
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 title claims description 86
- 206010046306 Upper respiratory tract infection Diseases 0.000 title claims description 85
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 title claims description 29
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 7
- JWUBBDSIWDLEOM-DTOXIADCSA-N calcidiol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C JWUBBDSIWDLEOM-DTOXIADCSA-N 0.000 claims description 147
- 235000021318 Calcifediol Nutrition 0.000 claims description 116
- JWUBBDSIWDLEOM-UHFFFAOYSA-N 25-Hydroxycholecalciferol Natural products C1CCC2(C)C(C(CCCC(C)(C)O)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C JWUBBDSIWDLEOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 114
- 239000003872 25-hydroxy-cholecalciferol Substances 0.000 claims description 113
- 208000020029 respiratory tract infectious disease Diseases 0.000 claims description 41
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 37
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 37
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 36
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 36
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 36
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 claims description 36
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 claims description 36
- -1 pentaglycerin lysinolate Chemical compound 0.000 claims description 33
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 claims description 31
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 claims description 28
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 27
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 claims description 27
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 claims description 26
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 26
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 claims description 23
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 claims description 23
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 claims description 18
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 17
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 17
- JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 1-hexadecanoyl-2-(9Z,12Z-octadecadienoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC JLPULHDHAOZNQI-ZTIMHPMXSA-N 0.000 claims description 15
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 claims description 15
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229940083466 soybean lecithin Drugs 0.000 claims description 15
- XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n,2-n-diethylpyrimidine-2,4-diamine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(N)=CC(Cl)=N1 XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- DEHSROIMLHSKQK-PDTZROCYSA-N OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O Chemical compound OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O DEHSROIMLHSKQK-PDTZROCYSA-N 0.000 claims description 13
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 claims description 13
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 10
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 7
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 claims description 7
- WBHHMMIMDMUBKC-QJWNTBNXSA-M ricinoleate Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C/CCCCCCCC([O-])=O WBHHMMIMDMUBKC-QJWNTBNXSA-M 0.000 claims description 6
- 229940066675 ricinoleate Drugs 0.000 claims description 6
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 99
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 99
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 49
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 46
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 46
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 42
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 28
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 28
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 24
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 23
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 22
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 22
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 22
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 22
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 22
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 21
- 235000005282 vitamin D3 Nutrition 0.000 description 20
- 239000011647 vitamin D3 Substances 0.000 description 20
- 229940021056 vitamin d3 Drugs 0.000 description 20
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 18
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 18
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 17
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 16
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 241000209094 Oryza Species 0.000 description 15
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 15
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 15
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 15
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 13
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 13
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 13
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 13
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 12
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 12
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 12
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 9
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 9
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 8
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 8
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 8
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 8
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 7
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 7
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 7
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 7
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 6
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 6
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 6
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 5
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 5
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 5
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 5
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 5
- JQWAHKMIYCERGA-UHFFFAOYSA-N (2-nonanoyloxy-3-octadeca-9,12-dienoyloxypropoxy)-[2-(trimethylazaniumyl)ethyl]phosphinate Chemical compound CCCCCCCCC(=O)OC(COP([O-])(=O)CC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC JQWAHKMIYCERGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 4
- 235000006694 eating habits Nutrition 0.000 description 4
- 238000013100 final test Methods 0.000 description 4
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 4
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 4
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000031891 intestinal absorption Effects 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 4
- 239000005544 vitamin D3 metabolite Substances 0.000 description 4
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 206010047626 Vitamin D Deficiency Diseases 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 235000005686 eating Nutrition 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 3
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 3
- WBHHMMIMDMUBKC-XLNAKTSKSA-N ricinelaidic acid Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C\CCCCCCCC(O)=O WBHHMMIMDMUBKC-XLNAKTSKSA-N 0.000 description 3
- 229960003656 ricinoleic acid Drugs 0.000 description 3
- FEUQNCSVHBHROZ-UHFFFAOYSA-N ricinoleic acid Natural products CCCCCCC(O[Si](C)(C)C)CC=CCCCCCCCC(=O)OC FEUQNCSVHBHROZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 3
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 3
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 3
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 3
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- JWUBBDSIWDLEOM-XHQRYOPUSA-N (3e)-3-[(2e)-2-[1-(6-hydroxy-6-methylheptan-2-yl)-7a-methyl-2,3,3a,5,6,7-hexahydro-1h-inden-4-ylidene]ethylidene]-4-methylidenecyclohexan-1-ol Chemical compound C1CCC2(C)C(C(CCCC(C)(C)O)C)CCC2\C1=C\C=C1/CC(O)CCC1=C JWUBBDSIWDLEOM-XHQRYOPUSA-N 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 241000711573 Coronaviridae Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 description 2
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 2
- 206010020707 Hyperparathyroidism primary Diseases 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000000913 Kidney Calculi Diseases 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 2
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 2
- 206010029148 Nephrolithiasis Diseases 0.000 description 2
- 206010068319 Oropharyngeal pain Diseases 0.000 description 2
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 2
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 description 2
- 201000000981 Primary Hyperparathyroidism Diseases 0.000 description 2
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 208000027207 Whipple disease Diseases 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 229940125681 anticonvulsant agent Drugs 0.000 description 2
- 239000001961 anticonvulsive agent Substances 0.000 description 2
- 239000000164 antipsychotic agent Substances 0.000 description 2
- 229940005529 antipsychotics Drugs 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 230000004097 bone metabolism Effects 0.000 description 2
- 229940069978 calcium supplement Drugs 0.000 description 2
- 230000009194 climbing Effects 0.000 description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 2
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 2
- 235000002535 fat free diet Nutrition 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 235000003084 food emulsifier Nutrition 0.000 description 2
- 238000011902 gastrointestinal surgery Methods 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000009532 heart rate measurement Methods 0.000 description 2
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 2
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 2
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 2
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 208000005368 osteomalacia Diseases 0.000 description 2
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 2
- 208000007442 rickets Diseases 0.000 description 2
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 2
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 2
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 229940005741 sunflower lecithin Drugs 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007916 tablet composition Substances 0.000 description 2
- 239000003451 thiazide diuretic agent Substances 0.000 description 2
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N (3-hexadecanoyloxy-2-hydroxypropyl) 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVZIYOYFVVSTGQ-RBWRNIRVSA-N (z)-octadec-9-enoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.OCC(O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O AVZIYOYFVVSTGQ-RBWRNIRVSA-N 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 1,25-dihydroxy vitamin D3 Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=CC=C1C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010000159 Abnormal loss of weight Diseases 0.000 description 1
- 208000021959 Abnormal metabolism Diseases 0.000 description 1
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010008469 Chest discomfort Diseases 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 1
- 101710139422 Eotaxin Proteins 0.000 description 1
- 238000000729 Fisher's exact test Methods 0.000 description 1
- 101710107035 Gamma-glutamyltranspeptidase Proteins 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 101710173228 Glutathione hydrolase proenzyme Proteins 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010024971 Lower respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028391 Musculoskeletal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 102100036893 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- 235000019774 Rice Bran oil Nutrition 0.000 description 1
- 208000007613 Shoulder Pain Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 206010043521 Throat irritation Diseases 0.000 description 1
- 238000008050 Total Bilirubin Reagent Methods 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N Vitamin D2 Natural products C1CCC2(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 235000004251 balanced diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 235000021152 breakfast Nutrition 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 229960004361 calcifediol Drugs 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229920003086 cellulose ether Polymers 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 230000000739 chaotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009535 clinical urine test Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000011557 critical solution Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000018823 dietary intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 229960002061 ergocalciferol Drugs 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 230000009246 food effect Effects 0.000 description 1
- 235000021471 food effect Nutrition 0.000 description 1
- 102000006640 gamma-Glutamyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000002933 immunoreactive insulin Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 1
- 208000024765 knee pain Diseases 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 230000006371 metabolic abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 235000020772 multivitamin supplement Nutrition 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 description 1
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 1
- 206010029410 night sweats Diseases 0.000 description 1
- 230000036565 night sweats Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- AHLBNYSZXLDEJQ-FWEHEUNISA-N orlistat Chemical compound CCCCCCCCCCC[C@H](OC(=O)[C@H](CC(C)C)NC=O)C[C@@H]1OC(=O)[C@H]1CCCCCC AHLBNYSZXLDEJQ-FWEHEUNISA-N 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007427 paired t-test Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001558 permutation test Methods 0.000 description 1
- 206010036067 polydipsia Diseases 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000008165 rice bran oil Substances 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 235000001892 vitamin D2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011653 vitamin D2 Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 229940002552 xenical Drugs 0.000 description 1
Images
Description
本発明は、上気道感染症予防又は上気道感染症状緩和用経口組成物に関する。 The present invention relates to an oral composition for preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections.
上気道は、鼻孔から喉頭（気管末端）までの範囲の器官をいう。かぜなどの症状を引き起こすウイルス類が鼻粘膜から咽頭粘膜に感染し、これらの部位にウイルスが増殖することによって、鼻水、くしゃみ、鼻づまり、喉の痛みなどの症状があらわれる場合を医学上、上気道感染症（かぜ症候群）としている。なお、上気道に感染したウイルスが気管から呼吸細気管支まで移行し、これらの部位で増殖することにより気管支炎の症状があらわれることを下気道感染症と呼ぶ。
通常の上気道感染症（かぜ症候群）であれば、体力があれば自然に治癒し、１週間程度で回復する。原因となる微生物としてはウイルスが大部分で、全体の８０〜９０％を占め、残りは一般細菌、マイコプラズマ、クラミジアなどである。ウイルスの中ではライノウイルス、コロナウイルスが多く、これに続くのがＲＳウイルス、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、アデノウイルスである。これらのウイルスには季節的流行の特徴があり、ライノウイルスは春と秋、コロナウイルス、ＲＳウイルス、インフルエンザウイルスは冬に多い傾向があるといわれている。上気道感染症の防御のためには、手洗い・うがいをすること、バランスのとれた食事を摂ること、十分な睡眠時間を取るなどの日常習慣の励行が推奨されている。
The upper respiratory tract is an organ that extends from the nostrils to the larynx (end of the trachea). Medically, the case where viruses that cause colds and other symptoms infect the pharyngeal mucosa from the nasal mucosa and the virus propagates to these sites causes symptoms such as nasal discharge, sneezing, stuffy nose, and sore throat. It is said to be an airway infection (cold syndrome). It is called lower respiratory tract infection that the virus that infects the upper respiratory tract transfers from the trachea to the respiratory bronchial bronchi and propagates in these sites, causing the symptoms of bronchitis.
If you have a normal upper respiratory tract infection (cold syndrome), it will heal spontaneously if you have physical strength, and will recover in about a week. Viruses account for the majority of the causative microorganisms, accounting for 80 to 90% of the total, and the rest are general bacteria, mycoplasma, chlamydia, and the like. Among the viruses, rhinovirus and coronavirus are the most common, followed by RS virus, influenza virus, parainfluenza virus, and adenovirus. These viruses are characterized by seasonal epidemics, and it is said that rhinovirus tends to be predominant in spring and autumn, and coronavirus, respiratory syncytial virus, and influenza virus tend to be predominant in winter. To prevent upper respiratory tract infections, it is recommended to practice daily habits such as washing hands and gargling, eating a balanced diet, and getting enough sleep.
また、いわゆるかぜ症候群に対する予防にビタミンＤの摂取が効果的であるといわれている。
ビタミンＤ（ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ）は、ビタミンの一種であり、脂溶性ビタミンに分類される。ビタミンＤはさらにビタミンＤ２（エルゴカルシフェロール、Ｅｒｇｏｃａｌｃｉｆｅｒｏｌ）とビタミンＤ３（コレカルシフェロール、Ｃｈｏｌｅｃａｌｃｉｆｅｒｏｌ）に分けられる。ビタミンＤ２は植物に、ビタミンＤ３は動物に多く含まれ、ヒトではビタミンＤ３が重要な働きを果たしている。ビタミンＤ欠乏は、日光への不十分な曝露、不十分な食事摂取、栄養成分吸収減退、異常代謝に関係している。また、ビタミンＤ欠乏は、くる病、骨軟化症、骨粗鬆症、高血圧症、心血管疾患、統合失調症、うつ病、神経系疾患、糖尿病、感染症、喘息、アレルギー、ガン、およびいくつかの自己免疫病に関わることが知られている。
In addition, it is said that the intake of vitamin D is effective for the prevention of so-called cold syndrome.
Vitamin D (vitamin D) is a type of vitamin and is classified as a fat-soluble vitamin. Vitamin D is further divided into Vitamin D 2 (Ergocalciferol) and Vitamin D 3 (Cholecalciferol). Vitamin D 2 is abundant in plants and vitamin D 3 is abundant in animals, and vitamin D 3 plays an important role in humans. Vitamin D deficiency is associated with inadequate exposure to sunlight, inadequate dietary intake, reduced absorption of nutrients, and abnormal metabolism. Vitamin D deficiency also includes rickets, osteomalacia, osteoporosis, hypertension, cardiovascular disease, schizophrenia, depression, nervous system disorders, diabetes, infections, asthma, allergies, cancer, and some autoimmune diseases. It is known to be involved in immune diseases.
ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）は、肝臓でＣ２５の位置でヒドロキシ化の代謝を受け、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（別名２５（ＯＨ）Ｄ３、カルシフェジオール）へと変化し肝細胞に貯えられ、必要なときにα−グロブリンと結合しリンパ液中に放出される。この代謝物を含めてビタミンＤ３として利用されている。
近年、このビタミンＤ３の代謝物である２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの作用が注目を集めている。例えば筋肉の発達促進（特許文献１）、高血糖の改善（特許文献２）、高血圧症の改善（特許文献３）、生殖能力の改善（特許文献４）、エオタキシンの増加に伴って発症するアレルギー疾患の改善（特許文献５）などが代表的な作用である。
また特許文献６には、ビタミンＤ３代謝物（２５（ＯＨ）Ｄ３）の２０位の誘導体が、強い炎症性呼吸器疾患や感染症を治療できることが記載されている。
Vitamin D 3 (cholecalciferol) undergoes hydroxylation metabolism at the C25 position in the liver, changes to 25-hydroxycholecalciferol (also known as 25 (OH) D 3 , calcifediol) and is stored in hepatocytes. It binds to α-globulin and is released into the lymph when needed. It is used as a vitamin D 3 including the metabolite.
Recently, the effect of this is a metabolite of vitamin D 3 25-hydroxy cholecalciferol has attracted attention. For example, promotion of muscle development (Patent Document 1), improvement of hyperglycemia (Patent Document 2), improvement of hypertension (Patent Document 3), improvement of fertility (Patent Document 4), allergy that develops with an increase in eotaxin. A typical action is improvement of a disease (Patent Document 5).
Further, Patent Document 6 describes that a derivative at
上記したようにビタミンＤ３は、肝臓によって２５−ヒドロキシビタミンＤ（２５（ＯＨ）Ｄ３）に代謝される。次に肝臓または腎臓内で１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに変換される。ビタミンＤ代謝物は、血漿中で担体タンパク質に結合され、身体全体に分布する。血清２５（ＯＨ）Ｄレベルは、ビタミンＤの体内貯蔵レベルを反映し、ビタミンＤ欠乏の臨床症状と相関するといわれている。しかしその有効性レベルを維持するための投与量をどのように定めるべきかについては、全く不明である。 As mentioned above, vitamin D 3 is metabolized by the liver to 25-hydroxyvitamin D (25 (OH) D 3 ). It is then converted to 1,25-dihydroxyvitamin D in the liver or kidney. Vitamin D metabolites are bound to carrier proteins in plasma and distributed throughout the body. Serum 25 (OH) D levels reflect the levels of vitamin D stored in the body and are said to correlate with the clinical manifestations of vitamin D deficiency. However, it is completely unclear how to determine the dosage to maintain that level of efficacy.
一方、上記した上気道感染症の原因の一つであるインフルエンザの流行と血液中の２５（ＯＨ）Ｄレベルに重要な関係があることが非特許文献１に紹介されている。ここではビタミンＤとして８００ＩＵ／日投与することで風邪の発症の季節性がなくなることが紹介されている。ところが、その後の臨床試験では、ビタミンＤに有意な上気道感染症予防効果が認められないという試験結果が得られたとの報告もあり、ビタミンＤの上気道感染症に対する有効性については混沌とした状態にあるといっても過言ではない。 On the other hand, Non-Patent Document 1 introduces that there is an important relationship between the influenza pandemic, which is one of the causes of upper respiratory tract infections, and the 25 (OH) D level in blood. Here, it is introduced that administration of 800 IU / day as vitamin D eliminates the seasonality of the onset of colds. However, in subsequent clinical trials, it was reported that vitamin D did not have a significant preventive effect on upper respiratory tract infections, and the effectiveness of vitamin D against upper respiratory tract infections was chaotic. It is no exaggeration to say that it is in a state.
また、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（２５（ＯＨ）Ｄ３）は、化学的に極めて不安定なことが知られている。特に酸化による影響が大きい。通常、空気中で酸化されてその活性を速やかに消失することが知られている。特許文献７には、ビタミンＤと油成分、ポリグリセリン脂肪酸エステル多価アルコールを含む安定なマイクロエマルジョンの技術が開示されている。特許文献８には、活性型ビタミンＤ類を塩基性高分子物質中に分散してなる安定化組成物が記載されている。
In addition, 25-hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) is known to be extremely chemically unstable. Especially, the influence of oxidation is large. It is usually known that it is oxidized in air and its activity is rapidly lost. Patent Document 7 discloses a technique for a stable microemulsion containing vitamin D, an oil component, and a polyglycerin fatty acid ester polyhydric alcohol.
本発明者は、ビタミンＤ３代謝物である２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの上気道感染症に対する効果を検証する過程で、ヒトにおける上気道感染症を予防又は緩和する有効な２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの血中有効濃度を明らかにし、さらにその効果を得るための有効投与量を明らかにした。またこの有効投与量は投与する製剤中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの安定性に依存していることに着目し、上気道感染症に対する予防又は緩和効果をより確実にするための組成を見いだし、本発明を完成させた。 The present inventor is vitamin D 3 metabolite 25-effects in the process of verifying for hydroxy cholecalciferol sheet on the Fellows Le respiratory tract infection, effective to prevent or alleviate upper respiratory tract infections in humans 25-hydroxycholecalciferol The effective concentration in blood was clarified, and the effective dose for obtaining the effect was clarified. In addition, focusing on the fact that this effective dose depends on the stability of 25-hydroxycholecalciferol in the formulation to be administered, we found a composition to further ensure the preventive or palliative effect on upper respiratory tract infections. The present invention has been completed.
すなわち、本発明は、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの上気道感染症予防又は緩和効果を与えるために、必要十分量の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが安定化された経口組成物を提供することを課題とする。 That is, it is an object of the present invention to provide an oral composition in which a necessary and sufficient amount of 25-hydroxycholecalciferol is stabilized in order to provide a preventive or alleviating effect on upper respiratory tract infection of 25-hydroxycholecalciferol. And.
本発明の主な構成は以下の通りである。
（１）２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを有効成分とする上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口組成物。
（２）２５−ヒドロキシコレカルシフェロール１０μｇ以上を１日一回摂取することができるように調製された２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの血中濃度が３０ｎｇ／ｍＬに満たないヒトのための（１）に記載の経口組成物。
（３）２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの長期間安定性を有する（１）又は（２）に記載の経口組成物。
（４）酵素分解大豆レシチン又はライスレシチンオイルから選ばれる１以上のレシチンを含有する、（１）〜（３）のいずれかに記載の経口組成物。
（５）縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、モノオレイン酸ペンタグリセリン、モノグリセリン脂肪酸及びモノラウリン酸ソルビタンから選ばれる１以上の界面活性剤を含有する、（１）〜（３）のいずれかに記載の経口組成物。
（６）ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びメチメセルロースから選択される１以上のセルロース誘導体を含有する、（１）〜（３）のいずれかに記載の経口組成物。
（７）酵素分解大豆レシチン又はライスレシチンオイルから選ばれる１以上のレシチンと、縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、モノオレイン酸ペンタグリセリン、モノグリセリン脂肪酸及びモノラウリン酸ソルビタンから選ばれる１以上の界面活性剤と、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びメチルセルロースから選択される１以上のセルロース誘導体を含有する、（１）〜（３）のいずれかに記載の経口組成物。
（８）１日用量として２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを１０〜３５μｇ含有する（１）〜（７）のいずれかに記載の経口組成物。
The main configuration of the present invention is as follows.
(1) An oral composition containing 25-hydroxycholecalciferol as an active ingredient for preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections.
(2) For humans whose blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol prepared so that 10 μg or more of 25-hydroxycholecalciferol can be ingested once a day is less than 30 ng / mL (1) The oral composition according to.
(3) The oral composition according to (1) or (2), which has long-term stability of 25-hydroxycholecalciferol.
(4) The oral composition according to any one of (1) to (3), which contains one or more lecithin selected from enzymatically decomposed soybean lecithin or rice lecithin oil.
(5) The oral composition according to any one of (1) to (3), which contains one or more surfactants selected from condensed pentaglycerin lysinolate, pentaglycerin monooleate, monoglycerin fatty acid and sorbitan monolaurate. Stuff.
(6) The oral composition according to any one of (1) to (3), which contains one or more cellulose derivatives selected from hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose and methimecellulose.
(7) One or more lecithin selected from enzymatically decomposed soy lecithin or rice lecithin oil, and one or more surfactants selected from condensed pentaglycerin lysinoreate, pentaglycerin monooleate, monoglycerin fatty acid and sorbitan monolaurate. The oral composition according to any one of (1) to (3), which contains one or more cellulose derivatives selected from hydroxypropylmethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose and methyl cellulose.
(8) The oral composition according to any one of (1) to (7), which contains 10 to 35 μg of 25-hydroxycholecalciferol as a daily dose.
本発明により、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを１日当たり１０μｇ投与することができる、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口組成物が提供される。この組成物は、日常的に摂取することで血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持することができる。
また、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口組成物であって、血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持するために組成物中に含有される２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（ビタミンＤ３代謝物）が安定化された経口用組成物を提供できる。
INDUSTRIAL APPLICABILITY The present invention provides an oral composition for preventing upper respiratory tract infection or alleviating symptoms of upper respiratory tract infection, which can administer 10 μg of 25-hydroxycholecalciferol per day. This composition can maintain the blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol at 30 to 50 ng / mL by ingesting it on a daily basis.
An oral composition for preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections, which is contained in the composition to maintain a blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol at 30 to 50 ng / mL. that 25-hydroxycholecalciferol (vitamin D 3 metabolites) can provide oral compositions stabilized.
本発明は、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを有効成分とする上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口組成物に係る発明である。
２５−ヒドロキシコレカルシフェロールは、２５（ＯＨ）Ｄ３とも表記される化合物であって、海外及びわが国においては飼料用添加物として市販されており、これを本発明に用いることができる。なお、本発明に用いられる２５−ヒドロキシコレカルシフェロールについて、本願明細書においてはビタミンＤ３代謝物、２５ＯＨＤ３、２５ＯＨＤと記載する場合がある。尚、２５ＯＨＤと記載しているものは、２５ＯＨＤ３に加えて２５ＯＨＤ２も含まれる場合がある（後述する臨床試験において血清25-hydroxyvitamin D濃度はRIA2抗体法にて測定した為、食事の内容により２５ＯＨＤ２が含まれるケースが想定できるが、本試験ではほとんど無視できるレベルと考えられる）。
The present invention relates to an oral composition containing 25-hydroxycholecalciferol as an active ingredient for preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections.
25-Hydroxycholecalciferol is a compound also referred to as 25 (OH) D 3 , which is commercially available as a feed additive overseas and in Japan, and can be used in the present invention. The 25-hydroxycholecalciferol used in the present invention may be described as vitamin D 3 metabolite, 25
ヒトにおいて、本発明でいうところの、上気道感染症予防又は上気道感染症状緩和効果を得るためには、日常的に血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの濃度を３０ｎｇ／ｍＬを超えるようにする必要がある。このためには日常、毎日２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを１０μｇ以上摂取できるような組成物を投与する必要がある。なお２５−ヒドロキシコレカルシフェロールやビタミンＤ類は、高用量を摂取すると有害作用をもたらす場合があるため、１日の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの摂取量又は投与量は、この量を大幅に超過しないようにし、３５μｇ以下とすることが好ましい。 In humans, in order to obtain the effect of preventing upper respiratory tract infection or alleviating symptoms of upper respiratory tract infection as referred to in the present invention, the concentration of 25-hydroxycholecalciferol in blood should be more than 30 ng / mL on a daily basis. There is a need to. For this purpose, it is necessary to administer a composition capable of ingesting 10 μg or more of 25-hydroxycholecalciferol on a daily basis. Since 25-hydroxycholecalciferol and vitamin Ds may have adverse effects when taken in high doses, the daily intake or dose of 25-hydroxycholecalciferol greatly exceeds this amount. It is preferable that the amount is 35 μg or less.
また、本願発明者らの研究によると、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの通常の錠剤は、調製直後から速やかにその含有量が減じていくことが確認された。これを防ぐためには、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを含む組成物もしくは製剤には、酵素分解大豆レシチン及びライスレシチンオイルから選ばれる１以上のレシチンを配合するか、縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、モノオレイン酸ペンタグリセリン、モノグリセリン脂肪酸およびモノラウリン酸ソルビタンから選ばれる１以上の界面活性剤を配合するか、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びメチルセルロースのいずれか１以上を配合するかしなければならない。あるはこれらの全てを配合しなければならない。かくすることで、調製した組成物中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが長期間安定化し、日常的に１日用量として、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール１０〜３５μｇを含む本発明組成物を経口で投与することによって、血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの濃度を、常時３０ｎｇ／ｍＬを超えて維持することができる。 In addition, according to the research by the inventors of the present application, it was confirmed that the content of a normal tablet of 25-hydroxycholecalciferol rapidly decreases immediately after preparation. To prevent this, the composition or formulation containing 25-hydroxycholecalciferol may contain one or more lecithins selected from enzymatically degraded soy lecithin and rice lecithin oil, or condensed pentaglycerin ricinoleate, monooleic acid. One or more surfactants selected from pentaglycerin, monoglycerin fatty acid and sorbitan monolaurate must be blended, or one or more of hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose and methylcellulose must be blended. Or all of these must be blended. By doing so, 25-hydroxycholecalciferol in the prepared composition is stabilized for a long period of time, and the composition of the present invention containing 10 to 35 μg of 25-hydroxycholecalciferol is orally administered as a daily dose on a daily basis. By doing so, the concentration of 25-hydroxycholecalciferol in the blood can be maintained to always exceed 30 ng / mL.
本発明で用いる大豆レシチンとは、大豆油を得る工程で、脱ガム工程によって得られる水和物であり、レシチンとその他リン脂質を含む。本発明においては食品や医薬品の乳化剤として利用可能な程度に脱色、精製されたものであれば使用可能である。
酵素分解大豆レシチンとは、リゾレシチンとも呼ばれ、大豆レシチンを酵素処理したものである。大豆レシチンと同様に食品や医薬品の乳化剤として利用可能な程度に脱色、精製されたものであれば使用可能である。
ライスレシチンオイルとは、米油精製工程において、大豆レシチンと同様に脱ガム工程によって得られる水和物であり、レシチンとその他リン脂質を含む。本発明においては食品や医薬品の乳化剤として利用可能な程度に脱色、精製されたものであれば使用可能である。
The soybean lecithin used in the present invention is a hydrate obtained by a degumming step in a step of obtaining soybean oil, and contains lecithin and other phospholipids. In the present invention, any product that has been decolorized and purified to the extent that it can be used as an emulsifier for foods and pharmaceuticals can be used.
Enzymatically decomposed soybean lecithin is also called lysolecithin, which is an enzyme-treated soybean lecithin. Similar to soybean lecithin, it can be used as long as it is decolorized and purified to the extent that it can be used as an emulsifier for foods and pharmaceuticals.
Rice bran oil is a hydrate obtained by a degumming step like soybean lecithin in a rice oil refining step, and contains lecithin and other phospholipids. In the present invention, any product that has been decolorized and purified to the extent that it can be used as an emulsifier for foods and pharmaceuticals can be used.
本発明の組成物を得るためには、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールをエタノールなどの溶媒に溶解させる。溶媒としては水又はエタノールが好ましい。この溶解液を酵素分解大豆レシチン、ライスレシチンオイルから選択される１以上のレシチン（以下「レシチン類」）と均質に混合し、混合終了後２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを含むレシチン類を乾燥させて溶媒を除去することで得ることができる。混合に当たっては、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが可能な限り小粒子として分散されるように混合する。必要に応じて高圧ホモジナイザーを用いることもできる。乾燥にあたっては、できるだけ低温で行うことが好ましく、真空凍結乾燥や減圧乾燥などの方法を採用することが好ましい。 To obtain the composition of the present invention, 25-hydroxycholecalciferol is dissolved in a solvent such as ethanol. Water or ethanol is preferable as the solvent. This solution is homogeneously mixed with one or more lecithins (hereinafter referred to as "lecithins") selected from enzymatically decomposed soybean lecithin and rice lecithin oil, and after the mixing is completed, the lecithins containing 25-hydroxycholecalciferol are dried. It can be obtained by removing the solvent. In mixing, 25-hydroxycholecalciferol is mixed so as to be dispersed as small particles as much as possible. A high pressure homogenizer can also be used if desired. The drying is preferably performed at a low temperature as much as possible, and it is preferable to adopt a method such as vacuum freeze-drying or vacuum drying.
レシチン類と２５−ヒドロキシコレカルシフェロールは、レシチン類１０００質量部当たり２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（２５（ＯＨ）Ｄ３）を０．１〜１０質量部の比率となるようにすることが好ましい。
かくして得られる組成物は、レシチン中に２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが分散した状態で安定化される。
この組成物は、そのまま経口投与することができる。また常法によって賦形剤を加えて錠剤やカプセル剤とすることができる。経口投与剤とする場合、１日の投与量が２５−ヒドロキシコレカルシフェロールとして１０〜３５μｇとなるように製剤化する。
なお、この組成物は、澱粉や糖を加えて粉末とし、散剤や顆粒剤とすることも可能である。
For lecithins and 25-hydroxycholecalciferol, it is preferable that the ratio of 25-hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) is 0.1 to 10 parts by mass per 1000 parts by mass of lecithins.
The composition thus obtained is stabilized with 25-hydroxycholecalciferol dispersed in lecithin.
This composition can be orally administered as it is. Further, an excipient can be added by a conventional method to obtain a tablet or a capsule. When it is orally administered, it is formulated so that the daily dose is 10 to 35 μg as 25-hydroxycholecalciferol.
In addition, this composition can be made into a powder by adding starch and sugar, and can be made into a powder or a granule.
本発明には界面活性剤としてグリセリン脂肪酸エステルを配合することができる。
本発明で用いるグリセリン脂肪酸エステルは、グリセリンの持つ３つのヒドロキシ基のうち１つないし２つに脂肪酸がエステル結合したもので、代表的な食品用乳化剤である。
本発明に使用するグリセリン脂肪酸エステルは、グリセリン重合度１〜５が好ましく、ＨＬＢが５以下を示すものを使用する。
Glycerin fatty acid ester can be blended as a surfactant in the present invention.
The glycerin fatty acid ester used in the present invention is a typical food emulsifier in which a fatty acid is ester-bonded to one or two of the three hydroxy groups of glycerin.
As the glycerin fatty acid ester used in the present invention, one having a glycerin polymerization degree of 1 to 5 is preferable and an HLB of 5 or less is used.
本発明には界面活性剤としてソルビタン脂肪酸エステルを配合することができる。
ソルビタン脂肪酸エステルは、ソルビタンと脂肪酸のエステルで、食品用乳化剤や化粧品・工業用界面活性剤として、単独または他の界面活性剤と配合して用いられる。
ソルビタンには水酸基が４つあり、それぞれに各種の脂肪酸がエステル結合するため、種類は多様である。本発明の目的にはモノラウリン酸ソルビタン（ソルビトール型）を示すものが適する。
A sorbitan fatty acid ester can be blended in the present invention as a surfactant.
The sorbitan fatty acid ester is an ester of sorbitan and a fatty acid, and is used alone or in combination with other surfactants as a food emulsifier or a cosmetic / industrial surfactant.
Sorbitan has four hydroxyl groups, and various fatty acids are ester-bonded to each, so there are various types. For the object of the present invention, those exhibiting sorbitan monolaurate (sorbitol type) are suitable.
本発明の組成物を得るためには、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールをエタノールなどの溶媒に溶解させる。溶媒としては水又はエタノールが好ましい。この溶解液をグリセリン脂肪酸エステル及び／又はソルビタン脂肪酸エステルと均質に混合し、混合終了後２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを含むグリセリン脂肪酸エステル及び／又はソルビタン脂肪酸エステルの溶液を乾燥させて溶媒を除去することで得ることができる。混合に当たっては、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが可能な限り小粒子として分散されるように混合する。必要に応じて高圧ホモジナイザーを用いることもできる。乾燥にあたっては、できるだけ低温で行うことが好ましく、真空凍結乾燥や減圧乾燥などの方法を採用することが好ましい。 To obtain the composition of the present invention, 25-hydroxycholecalciferol is dissolved in a solvent such as ethanol. Water or ethanol is preferable as the solvent. This solution is homogeneously mixed with the glycerin fatty acid ester and / or the sorbitan fatty acid ester, and after the mixing is completed, the solution of the glycerin fatty acid ester and / or the sorbitan fatty acid ester containing 25-hydroxycholecalciferol is dried to remove the solvent. Can be obtained at. In mixing, 25-hydroxycholecalciferol is mixed so as to be dispersed as small particles as much as possible. A high pressure homogenizer can also be used if desired. The drying is preferably performed at a low temperature as much as possible, and it is preferable to adopt a method such as vacuum freeze-drying or vacuum drying.
グリセリン脂肪酸エステル及び／又はソルビタン脂肪酸エステルと２５−ヒドロキシコレカルシフェロールは、グリセリン脂肪酸エステル及び／又はソルビタン脂肪酸エステル１０００質量部当たり、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを０．１〜１０質量部の比率となるようにすることが好ましい。
かくして得られる組成物は、グリセリン脂肪酸エステル及び／又はソルビタン脂肪酸エステル中に２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが分散した状態で安定化される。この組成物は、そのまま経口投与することができる。また常法によって賦形剤を加えて錠剤やカプセル剤とすることができる。経口投与剤とする場合、１日の投与量が２５−ヒドロキシコレカルシフェロールとして１０〜３５μｇとなるように製剤化する。
なお、この組成物は、澱粉や糖を加えて粉末とし、散剤や顆粒剤とすることも可能である。
Glycerin fatty acid ester and / or sorbitan fatty acid ester and 25-hydroxycholecalciferol have a ratio of 25-hydroxycholecalciferol to 0.1 to 10 parts by mass per 1000 parts by mass of glycerin fatty acid ester and / or sorbitan fatty acid ester. It is preferable to do so.
The composition thus obtained is stabilized with 25-hydroxycholecalciferol dispersed in the glycerin fatty acid ester and / or the sorbitan fatty acid ester. This composition can be orally administered as it is. Further, an excipient can be added by a conventional method to obtain a tablet or a capsule. When it is orally administered, it is formulated so that the daily dose is 10 to 35 μg as 25-hydroxycholecalciferol.
In addition, this composition can be made into a powder by adding starch and sugar, and can be made into a powder or a granule.
本発明で用いるヒドロキシプロピルメチルセルロース（以下「ＨＰＭＣ」）は、メチルセルロースにヒドロキシプロポキシル基を導入したセルロースエーテルであり、水溶性のセルロース誘導体である。本発明の目的に適したＨＰＭＣは、食品添加物用としても市販されている。このようなＨＰＭＣとしては、信越化学工業株式会社製のＨＰＭＣメトローズ ＳＥ０６、メトローズＳＥ５０、メトローズＮＥ１００、メトローズＳＦＥ４００、メトローズＮＥ４０００、メトローズＳＦＥ４０００を例示することができる。 Hydroxypropyl methylcellulose (hereinafter referred to as “HPMC”) used in the present invention is a cellulose ether obtained by introducing a hydroxypropoxyl group into methylcellulose, and is a water-soluble cellulose derivative. HPMCs suitable for the purposes of the present invention are also commercially available for food additives. Examples of such HPMC include HPMC Metros SE06, Metros SE50, Metros NE100, Metros SFE400, Metros NE4000, and Metros SFE4000 manufactured by Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.
本発明で用いるヒドロキシプロピルセルロース（以下「ＨＰＣ」）は、セルロースの水酸基を酸化プロピレンでエーテル化することで得られ、多数のヒドロキシプロピル基（−ＯＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３）を持つ。１グルコースあたりの置換された水酸基の平均数は置換度（ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ，ＤＳ）として表され、これは最大３である。しかしヒドロキシプロピル基にも水酸基が含まれるため、反応途中にここもエーテル化される。そのため、１グルコースあたりのヒドロキシプロピル基の数であるモル置換度（ｍｏｌｅｓ ｏｆ ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｉｏｎ，ＭＳ）は３より大きくなる。
セルロースは結晶性が高いため、ＨＰＣを水溶性とするにはＭＳを４以上にする必要がある。また疎水基と親水基を持つため、下限臨界溶液温度（ＬＣＳＴ）は約４５℃で、これ以上の温度では不溶性となる。本発明においては水溶性であることが好ましい。
ＨＰＣは、食品添加物として広く利用されており、その安全性も熟知されている。ＨＰＣの分子量は、食品添加物として市販されているものとしては、質量平均分子量４００００〜９１００００の範囲であるが、必要に応じて分子量の範囲を選択できる。本発明にあっては分子量の小さいものが好ましく、特に好ましくは、質量平均分子量が４００００〜１４００００ものである。なおＨＰＣの分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ法）で容易に測定可能である。
食品添加物として市販されているＨＰＣとしては、例えば日本曹達株式会社のセルニーＳＳＬ（分子量４００００）、セルニーＳＬ（分子量１０００００）、セルニーＬ（分子量１４００００）、セルニーＭ（分子量６２００００）、セルニーＨ（分子量９１００００）を例示することができる。
メチルセルロース（以下「ＭＣ」）は、例えば信越化学工業株式会社製のメトローズＭＣＥ−４００を例示することができる。
The hydroxypropyl cellulose (hereinafter referred to as “HPC”) used in the present invention is obtained by etherifying the hydroxyl group of cellulose with propylene oxide, and has a large number of hydroxypropyl groups (-OCH 2 CH (OH) CH 3 ). The average number of substituted hydroxyl groups per glucose is expressed as the degree of substitution (DS), which is a maximum of 3. However, since the hydroxypropyl group also contains a hydroxyl group, it is also etherified during the reaction. Therefore, the degree of molar substitution (MS), which is the number of hydroxypropyl groups per glucose, is larger than 3.
Since cellulose has high crystallinity, it is necessary to set MS to 4 or more in order to make HPC water-soluble. Further, since it has a hydrophobic group and a hydrophilic group, the lower limit critical solution temperature (LCST) is about 45 ° C., and it becomes insoluble at a temperature higher than this. In the present invention, it is preferably water-soluble.
HPC is widely used as a food additive, and its safety is well known. The molecular weight of HPC is in the range of mass average molecular weight of 40,000 to 910000 as a food additive commercially available, but the range of molecular weight can be selected as needed. In the present invention, those having a small molecular weight are preferable, and those having a mass average molecular weight of 40,000 to 140,000 are particularly preferable. The molecular weight of HPC can be easily measured by gel permeation chromatography (GPC method).
HPCs commercially available as food additives include, for example, Selny SL (molecular weight 40,000), Selney SL (molecular weight 100,000), Selney L (molecular weight 140000), Selney M (molecular weight 620000), and Selney H (molecular weight 620000) of Nippon Soda Co., Ltd. 910000) can be exemplified.
As the methyl cellulose (hereinafter, “MC”), for example, Metrose MCE-400 manufactured by Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. can be exemplified.
本発明の組成物を得るためには、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールをエタノールなどの溶媒に溶解させる。溶媒としては水又はエタノールが好ましい。この溶解液をＨＰＭＣ、ＨＰＣ又はＭＣと均質に混合し、混合終了後２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを含むＨＰＭＣ、ＨＰＣ又はＭＣの溶液を乾燥させて溶媒を除去することで得ることができる。混合に当たっては、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが可能な限り小粒子として分散されるように混合する。必要に応じて高圧ホモジナイザーを用いることもできる。乾燥にあたっては、できるだけ低温で行うことが好ましく、真空凍結乾燥や減圧乾燥などの方法を採用することが好ましい。 To obtain the composition of the present invention, 25-hydroxycholecalciferol is dissolved in a solvent such as ethanol. Water or ethanol is preferable as the solvent. This solution can be obtained by homogeneously mixing with HPMC, HPC or MC, and after completion of mixing, the solution of HPMC, HPC or MC containing 25-hydroxycholecalciferol is dried to remove the solvent. In mixing, 25-hydroxycholecalciferol is mixed so as to be dispersed as small particles as much as possible. A high pressure homogenizer can also be used if desired. The drying is preferably performed at a low temperature as much as possible, and it is preferable to adopt a method such as vacuum freeze-drying or vacuum drying.
ＨＰＭＣ、ＨＰＣ又はＭＣと２５−ヒドロキシコレカルシフェロールは、ＨＰＭＣ、ＨＰＣ又はＭＣ１０００質量部当たり２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを０．１〜１０質量部の比率となるようにすることが好ましい。
かくして得られる組成物は、ＨＰＭＣ、ＨＰＣ又はＭＣの形成するマトリックス構造中に２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが分散した状態で安定化される。
この組成物は、そのまま経口投与することができる。また常法によって賦形剤を加えて錠剤やカプセル剤とすることができる。経口投与剤とする場合、１日の投与量が２５−ヒドロキシコレカルシフェロールとして１０〜３５μｇとなるように製剤化する。
なお、この組成物は、澱粉や糖を加えて粉末とし、散剤や顆粒剤とすることも可能である。
HPMC, HPC or MC and 25-hydroxycholecalciferol are preferably such that 25-hydroxycholecalciferol is in a ratio of 0.1 to 10 parts by mass per 1000 parts by mass of HPMC, HPC or MC.
The composition thus obtained is stabilized with 25-hydroxycholecalciferol dispersed in the matrix structure formed by HPMC, HPC or MC.
This composition can be orally administered as it is. Further, an excipient can be added by a conventional method to obtain a tablet or a capsule. When it is orally administered, it is formulated so that the daily dose is 10 to 35 μg as 25-hydroxycholecalciferol.
In addition, this composition can be made into a powder by adding starch and sugar, and can be made into a powder or a granule.
以下に、試験例並びに実施例を示し本発明の作用効果について具体的に説明する。
＜臨床試験（１）＞
本発明の組成物の投与がヒト血液中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度に及ぼす影響について試験例を示し説明する。
１．女性の血中２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度に与える影響試験
１）試験対象
被験者選択基準及び除外基準は下記の通りである。
選択基準
１． 健常な閉経後の日本人女性
２． 年齢５０歳以上７０歳未満
３． 血中２５（ＯＨ）Ｄ濃度３０ｎｇ／ｍＬ以下
４． 臨床化学検査、血液学的検査をもとに健康であると判断された者
５． ＢＭＩ１８．５〜２４．９ｋｇ／ｍ２
６． 本人の自由意思に基づく文書による同意が得られる者
Hereinafter, test examples and examples will be shown and the effects of the present invention will be specifically described.
<Clinical trial (1)>
The effect of administration of the composition of the present invention on the concentration of 25-hydroxycholecalciferol in human blood will be described by showing a test example.
1. 1. Effect test on female blood 25-hydroxycholecalciferol concentration 1) Test subjects The subject selection criteria and exclusion criteria are as follows.
Selection criteria 1. Healthy postmenopausal
6. A person who can obtain written consent based on the person's free will
除外基準
１． 喫煙者
２． 日光に過度に曝露する行動の予定
３． 血清カルシウムが１０．２ｍｇ／ｄＬ以上
４． 空腹時血糖値が１００ｍｇ／ｄＬ以上
５． 過去６ヵ月以内のホルモン補充療法
６． 試験期間中のマルチビタミン以外のサプリメントの使用（試験開始前に摂取を中止し試験が終わるまで摂取しない者は除く）
７． 過去３ヵ月以内のビタミンＤサプリメントの使用
８． 過去３ヵ月以内に６００ｍｇ／日以上のカルシウムサプリメントの使用
９． 安静時血圧が１４５／９５ｍｍＨｇ以上
１０．高血圧の治療
１１．精神疾患の罹患歴、試験内容の理解が難しい状態
１２．高強度の運動を継続的に行う者
１３．試験食品の吸収に影響する状態：腸管吸収障害、スプルー（小腸の吸収障害を伴う症候群）、大腸炎、消化器手術、Ｍ．Ｗｈｉｐｐｌｅ病（全身性細菌感染症による吸収不良症候群）
１４．高カルシウム血症の保因リスクとなる疾患：多臓器肉芽腫性疾患、結核、リンパ腫、原発性副甲状腺機能亢進症
１５．腎臓結石
１６．クレアチニンクリアランスが３０ｍＬ／ｍｉｎ以下（重篤な腎不全）
１７．乳製品に対する過敏症またはアレルギー
１８．薬物の使用：抗凝固薬、ステロイド薬、副甲状腺ホルモン、チアジド系利尿薬、抗痙攣薬、抗精神病薬、統合失調症治療薬、脂肪の吸収に影響を及ぼす薬
１９．骨代謝に影響を及ぼす可能性のある薬物の過去１年間における使用
２０．脂肪を含まない食事を摂っている、その他の極端な食習慣
２１．減量プログラムの実践、食事が医師の管理下にある
２２．急性または重篤な疾病の兆候：意図していない減量、寝汗、癌の治療など
２３．過去１年以内の骨折または過去３ヵ月以内の転倒
２４．アルコール消費量：≦１４０ｇ／週
２５．試験責任医師または試験分担医師が試験対象として不適合と判断した者
Exclusion criteria 1. smoker
2. 2. Scheduled actions to be overexposed to
7. Use of vitamin D supplements within the last 3
13. Conditions that affect the absorption of test foods: Intestinal absorption disorders, sprue (syndrome with small intestinal absorption disorders), colitis, gastrointestinal surgery, M. Whipple's disease (malabsorption syndrome due to systemic bacterial infection)
14. Diseases that are a carrier risk of hypercalcemia: multi-organ granulomatous disease, tuberculosis, lymphoma, primary hyperparathyroidism 15. Kidney stones 16. Creatinin clearance less than 30 mL / min (severe renal failure)
17. Hypersensitivity or allergies to dairy products 18. Drug use: anticoagulants, steroids, parathyroid hormones, thiazide diuretics, anticonvulsants, antipsychotics, schizophrenia treatments, drugs that affect fat absorption 19. Use of drugs that may affect bone metabolism over the
２）試験対象品
次の錠剤を試験品とした。
２５−ヒドロキシコレカルシフェロール １０μｇ含有製剤
ビタミンＤ３ １０μｇ含有製剤
プラセボ製剤 ２５−ヒドロキシコレカルシフェロールをセルロースで置換
2) Products to be tested The following tablets were used as test products.
25-
３）試験プロトコール
無作為化二重盲検並行群間比較試験とした。摂取方法および摂取期間は、１日１回朝食後に１１２日間（１６週間）摂取する。
スクリーニング検査および摂取１６週後検査日には、体重測定、血圧、脈拍測定、臨床検査、食物摂取頻度調査（ＢＤＨＱ（株式会社ジェンダーメディカルリサーチ））を実施した。
臨床検査は、血液検査として２５−ヒドロキシコレカルシフェロール、１α，２５（ＯＨ）２ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ、ｓｅｒｕｍ Ｃａ、ｉｎｔａｃｔ ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ、ＨｂＡ１ｃ（ＮＧＳＰ）、血清２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度はＲＩＡ２抗体法にて測定した。
3) Study protocol A randomized, double-blind, parallel-group comparative study. The ingestion method and ingestion period are 112 days (16 weeks) after breakfast once a day.
Screening test and 16 weeks after intake On the test day, body weight measurement, blood pressure, pulse measurement, clinical test, and food intake frequency survey (BDHQ (Gender Medical Research Co., Ltd.)) were carried out.
The clinical test is 25-hydroxycholecalciferol, 1α, 25 (OH) 2 vitamin D, serum Ca, intact parathyroid hormone, HbA1c (NGSP), and serum 25-hydroxycholecalciferol concentration by RIA2 antibody method. It was measured.
４）被験食品の摂取状況と安全性
１日１回の摂取の順守状況は最終検査時に残存被験食品数を算定して判定した。有害事象の出現状況は日誌および最終検査時に実施した問診により監視した。
4) Ingestion status and safety of test foods The compliance status of once-daily intake was determined by calculating the number of remaining test foods at the final inspection. The occurrence of adverse events was monitored by a diary and interviews conducted at the time of the final examination.
５）指導事項
被験者には、試験期間中、下記の指導事項の尊守を求めた。
・長期旅行や激しい運動（登山、マラソン等）、太陽光に強度に曝露する行動を控える
・過剰な飲酒は避ける
・生活習慣を変更しない
・新しいサプリメント・医薬品の摂取開始は原則禁止（体調不良時の頓服薬の服用は可）
・他のヒト試験への参加や献血は禁止
5) Guidance items The subjects were asked to respect the following guidance items during the test period.
・ Refrain from long-term travel, strenuous exercise (mountain climbing, marathon, etc.), and behavior that is exposed to intense sunlight. ・ Avoid excessive drinking. ・ Do not change your lifestyle. ・ In principle, start taking new supplements and medicines (when you are not feeling well). It is possible to take the medicine
・ Participation in other human trials and blood donation are prohibited
６）統計解析
試験実施計画書に適合した解析対象集団（被験食品の摂取期間中の摂取率が８０％未満であった者、指導事項を守れなかった者、摂取後検査を受けなかった者を除外）を解析した。各群内の摂取前後の比較について対応のあるｔ検定を行い、有意水準は両側５％とした。統計解析ソフトはＥｘｃｅｌ統計ｖｅｒ．７（エスミ社）を使用した。
6) Statistical analysis The group to be analyzed that conformed to the test implementation plan (those who had an intake rate of less than 80% during the intake period of the test food, those who did not follow the guidance, and those who did not undergo the post-intake test. Exclusion) was analyzed. A paired t-test was performed for comparison before and after ingestion within each group, and the significance level was set to 5% on both sides. Statistical analysis software is Excel Statistics ver. 7 (Esumi) was used.
２．結果
１）被験者
スクリーニング試験には１１２名が参加し、そのうち被験者の選択基準に適合し除外基準に該当しない８２名の被験者をランダム化した。ランダム化後、摂取開始前に３例が同意を撤回した。試験食品の摂取を開始した被験者はプラセボ群２７例、ビタミンＤ３群２６例、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群２６例であった。うち、７例が個人的な理由により同意を撤回（プラセボ群：摂取後検査日の都合が悪いため１例、ビタミンＤ３群：膝・肩の痛みがあるため１例、歯科治療を開始するため１例、摂取後検査日の都合が悪いため１例、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群：胃炎のため１例、家族の看病のため１例、アトピー性皮膚炎の治療を開始するため１例）し、１例が試験責任医師の判断により中止（ビタミンＤ３群：風邪等の症状が続き内服治療をおこなったため）となり、計７０例が試験を完遂した。完遂した被験者のうち試験計画書に適合しないと判断された被験者４例（プラセボ群：指導事項からの逸脱（高強度の運動を継続的におこなったため）１例、ビタミンＤ３群：試験食品の摂取率が８０％未満１例、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群：試験食品の摂取率が８０％未満２例）を除いた６６名を試験実施計画書に適合した解析対象集団とした。試験実施計画書に適合した解析対象集団の背景を表１に示した。
2. 2. Results 1) Subjects In the screening test, 112 subjects participated, and 82 subjects who met the selection criteria of the subjects and did not meet the exclusion criteria were randomized. After randomization, 3 patients withdrew their consent before the start of ingestion. The subjects who started taking the test food were 27 patients in the placebo group, 26 patients in the vitamin D 3 group, and 26 patients in the 25-hydroxycholecalciferol group. Of these, 7 withdrew their consent for personal reasons (placebo group: 1 case due to inconvenient post-ingestion examination day, vitamin D group 3 : 1 case due to knee / shoulder pain, start dental treatment 1 case due to inconvenient post-ingestion test date, 25-hydroxycholecalciferol group: 1 case due to gastric inflammation, 1 case due to family care, 1 case to start treatment for atopic dermatitis ), One patient was discontinued at the discretion of the investigator (vitamin D group 3 : because symptoms such as cold continued and oral treatment was performed), and a total of 70 patients completed the study. Of the completed subjects, 4 subjects were judged to be incompatible with the study plan (placebo group: 1 deviant from the guidance (because of continuous high-intensity exercise), vitamin D group 3 : test food 66 subjects were included in the analysis target group conforming to the test protocol, excluding 1 case with an intake rate of less than 80% and 25-hydroxycholecalciferol group: 2 cases with an intake rate of less than 80% of the test food. Table 1 shows the background of the analysis target population that conformed to the test protocol.
２）血液検査
血中２５（ＯＨ）Ｄ濃度はビタミンＤ３群、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群でベースライン検査に比べて最終検査時で有意に上昇した。一方プラセボ群では有意に低下した（図１参照）。その他の血液項目の結果について、表２に示した。血中１，２５（ＯＨ）２ＤはビタミンＤ３群、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で、ベースライン検査に比べて最終検査時で有意に上昇した。ｃａｌｃｉｕｍ濃度は３群ともベースライン検査に比べて最終検査時で有意に上昇したが、ビタミンＤ３群、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群においては、血中ｃａｌｃｉｕｍ濃度が基準値（１０．２ｍｇ／ｄＬ）を超えた被験者は認められなかった。プラセボ群では１例で１０．０ｍｇ／ｄＬから１０．５ｍｇ／ｄＬへ変動した。副甲状腺ホルモンは３群とも有意な変動は認められなかった。ＨｂＡ１ｃはビタミンＤ３群のみ有意に上昇したが、基準値内（４．６−６．２％）での変動であった。
2) Blood test Blood 25 (OH) D concentration was significantly higher in the vitamin D 3 group and 25-hydroxycholecalciferol group at the final test than in the baseline test. On the other hand, it decreased significantly in the placebo group (see FIG. 1). The results of other blood items are shown in Table 2. Blood 1,25 (OH) 2 D is vitamin D 3 group, with 25-hydroxycholecalciferol group, increased significantly by the time the final inspection as compared with the baseline examination. Calcium concentration was significantly higher at the final test compared to the baseline test in all three groups, but in the vitamin D 3 group and 25-hydroxycholecalciferol group, the blood calcium concentration was the standard value (10.2 mg / dL). ) Was not observed. In the placebo group, one case varied from 10.0 mg / dL to 10.5 mg / dL. No significant change was observed in parathyroid hormone in all three groups. HbA1c was increased significantly only vitamin D 3 group but was variation within the reference value (4.6-6.2%).
３）ＢＭＩ、血圧
３群ともＢＭＩに有意な変動はなかった。拡張期血圧は３群ともベースライン検査に比べて最終検査時で有意に上昇した。拡張期血圧は３群とも有意な変動は認められなかった。
3) BMI and blood pressure There were no significant changes in BMI in all three groups. Diastolic blood pressure was significantly higher at the final test than at baseline in all three groups. Diastolic blood pressure did not change significantly in all three groups.
４）食事調査、活動量
２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群でのみ、タンパク質、ビタミンＤの摂取量がベースライン検査に比べて最終検査時で有意に低下した。その他の項目に有意な変動は認められなかった。
4) Dietary survey, activity amount Only in the 25-hydroxycholecalciferol group, the intake of protein and vitamin D was significantly lower at the final test than in the baseline test. No significant changes were found in other items.
５）安全性
被験食品摂取に関連する有害事象の報告はなかった。
5) Safety There were no reports of adverse events related to the intake of the test food.
３．評価・考察
閉経後の女性おいて、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの１０μｇ／日摂取により有意に血中２５（ＯＨ）Ｄ濃度が上昇し、血中２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度が３０ｎｇ／ｍＬに達することが確認できた。
以上の試験から、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールをヒトに連日１０μｇ／日投与することで、血中２５（ＯＨ）Ｄ濃度を３０ｎｇ／ｍＬを超えて維持できることが明らかとなった。
3. 3. Evaluation / Discussion In postmenopausal women, ingestion of 10 μg / day of 25-hydroxycholecalciferol significantly increased the blood 25 (OH) D concentration, and the blood 25-hydroxycholecalciferol concentration reached 30 ng / mL. I was able to confirm that it would be reached.
From the above tests, it was clarified that the blood 25 (OH) D concentration can be maintained above 30 ng / mL by daily administration of 25-hydroxycholecalciferol to humans at 10 μg / day.
＜臨床試験（２）＞
以下に２５−ヒドロキシコレカルシフェロールをヒトに投与し、上気道感染症の予防又は緩和を達成できることを確認した試験例を示して説明する。
１．２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取による上気道感染症への影響確認試験
１）試験対象者
予め同意を取得した被験者候補４２８例に、スクリーニング検査として、疾病歴や飲酒習慣、食習慣などの背景調査、体調確認、計測、臨床検査を実施し、選択条件に合致し、除外基準に合致しない２５２例を選択した。
被験者の選択は、同意能力を有しており、Ｉ：同意取得時の年齢が４５歳以上７４歳以下の健常日本人、ＩＩ：血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が３０ｎｇ／ｍＬ以下、ＩＩＩ：ＢＭＩが１８．５ｋｇ／ｍ２以上２４．９ｋｇ／ｍ２以下に該当する者であり、以下の除外条件に該当しない者を選択した。
Ｉ ：喫煙者
ＩＩ ：重篤な疾患（例：肝疾患、腎疾患、感染症、癌）に罹患している者
ＩＩＩ ：試験結果に影響を与える疾患（例：高カルシウム血症）に罹患している者
ＩＶ ：試験期間中に日光に過度に曝露する行動（例：農作業、リゾート旅行）予定がある者
Ｖ ：空腹時血糖値が１１０ｍｇ／ｄＬ以上の者
ＶＩ ：過去６ヵ月以内にホルモン補充療法を受けた者
ＶＩＩ ：試験期間中のマルチビタミン以外のサプリメントの使用者、ただし試験開始前に摂取を中止し試験が終わるまで摂取しない者は除く
ＶＩＩＩ ：過去３ヵ月以内のビタミンＤサプリメントの使用
ＩＸ ：過去３ヵ月以内に６００ｍｇ／日以上のカルシウムサプリメントの使用
Ｘ ：高血圧：安静時血圧が１４５／９５ｍｍＨｇ以上
ＸＩ ：高血圧の治療
ＸＩＩ ：精神疾患の罹患歴、試験内容の理解が難しい状態
ＸＩＩＩ ：高強度の運動を継続的に行う者（高強度の運動を週３回以上行う者）
ＸＩＶ ：試験食品の吸収に影響する状態：腸管吸収障害、スプルー（小腸の吸収障害を伴う症候群）、大腸炎、消化器手術、Ｍ．Ｗｈｉｐｐｌｅ病（全身性細菌感染症による吸収不良症候群）
ＸＶ ：高カルシウム血症の保因リスクとなる疾患：多臓器肉芽腫性疾患（サルコイドーシス）、結核、リンパ腫、原発性副甲状腺機能亢進症）
ＸＶＩ ：腎臓結石
ＸＶＩＩ ：クレアチニンクリアランスが３０ｍＬ／ｍｉｎ以下（重篤な腎不全）
ＸＶＩＩＩ：乳製品に対する過敏症またはアレルギー
ＸＩＸ ：薬物の使用：抗凝固薬、ステロイド薬、副甲状腺ホルモン、チアジド系利尿薬、抗痙攣薬、抗精神病薬、統合失調症治療薬、脂肪の吸収に影響を及ぼす薬（ゼニカル、アライなどの末梢性肥満改善薬、脂肪吸収阻害薬）
ＸＸ ：骨代謝に影響を及ぼす可能性のある薬物（ビスホスホネート、ホルモン補充療法薬、エストロゲン受容体調節因子、カルシトニン）の過去１年間における使用
ＸＸＩ ：脂肪を含まない食事をとっている、その他の極端な食習慣
ＸＸＩＩ ：減量プログラムの実践、食事が医師の管理下にある
ＸＸＩＩＩ：急性または重篤な疾病の兆候：意図していない減量、寝汗、癌の治療など
ＸＸＩＶ ：アルコール消費量：≦１４０ｇ／週
ＸＸＶ ：試験責任医師または試験分担医師が試験対象として不適合と判断した者
<Clinical trial (2)>
The following is a description of a test example in which 25-hydroxycholecalciferol was administered to humans and confirmed to be able to achieve prevention or alleviation of upper respiratory tract infections.
1.25-Hydroxycholecalciferol intake confirmation test for upper respiratory tract infection 1) Test subjects 428 candidate subjects who obtained consent in advance were screened as a background of disease history, drinking habits, eating habits, etc. A survey, physical condition confirmation, measurement, and clinical examination were carried out, and 252 patients who met the selection conditions and did not meet the exclusion criteria were selected.
The subjects were selected as having the ability to consent, I: healthy Japanese aged 45 to 74 years at the time of obtaining consent, II: serum 25 (OH) D concentration of 30 ng / mL or less, III: BMI. There is a person corresponding to 18.5 kg / m 2 or more 24.9 kg / m 2 or less, were selected who do not fall under the following exclusion criteria.
I: Smoker II: Those who have serious diseases (eg liver disease, kidney disease, infectious disease, cancer) III: Those who have diseases that affect the test results (eg hypercalcemia) IV: Excessive exposure to sunlight during the study period (eg farming, resort trips) V: Fasting blood glucose level of 110 mg / dL or higher VI: Hormone supplementation within the last 6 months Those who received therapy VII: Users of non-multivitamin supplements during the study period, except those who stopped taking it before the start of the study and did not take it until the end of the study VIII: Use of vitamin D supplements within the past 3 months IX: Use of calcium supplements of 600 mg / day or more within the past 3 months X: High blood pressure: Resting blood pressure of 145/95 mmHg or more XI: Treatment of high blood pressure XII: History of mental illness, difficult to understand test contents XIII: Those who continuously perform high-intensity exercise (those who perform high-intensity exercise three or more times a week)
XIV: Conditions affecting the absorption of test foods: Intestinal absorption disorders, sprue (syndrome with small intestinal absorption disorders), colitis, gastrointestinal surgery, M.D. Whipple's disease (malabsorption syndrome due to systemic bacterial infection)
XV: Diseases that are a carrier risk of hypercalcemia: Multi-organ granulomatous disease (sarcoidosis), tuberculosis, lymphoma, primary hyperparathyroidism)
XVI: Kidney stones XVII: Creatinine clearance of 30 mL / min or less (severe renal failure)
XVIII: Hypersensitivity or allergies to dairy products XIX: Drug use: Anticoagulants, steroids, parathyroid hormones, thiazide diuretics, anticonvulsants, antipsychotics, schizophrenia medications, affecting fat absorption (Peripheral obesity improving drugs such as Xenical and Arai, fat absorption inhibitors)
XX: Use of drugs that may affect bone metabolism (bisphosphonates, hormone replacement therapies, estrogen receptor regulators, calcitonin) over the past year XXI: Eating a fat-free diet, other extremes Eating habits XXII: Practice of weight loss program, diet is under the supervision of a doctor XXIII: Signs of acute or serious illness: Unintended weight loss, sleeping sweat, treatment of cancer, etc. XXIV: Alcohol consumption: ≤140 g / Weekly XXV: Those who are judged by the investigator or the investigator to be non-conforming for the examination
２）試験対象品
被験食品には２５−ヒドロキシコレカルシフェロール１０μｇを含有するハードカプセル製剤とした。プラセボは２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを結晶セルロースに置きかえ、色調などが被験食品と区別がつかないように作製した。２５−ヒドロキシコレカルシフェロールはＤＳＭ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｌｔｄ．より入手した。
2) Product to be tested The test food was a hard capsule preparation containing 10 μg of 25-hydroxycholecalciferol. The placebo was prepared by replacing 25-hydroxycholecalciferol with crystalline cellulose so that the color tone and the like were indistinguishable from the test food. 25-Hydroxycholecalciferol is available from DSM Nutritional Products, Ltd. Obtained from.
３）上気道感染症の診断と評価の基準
上気道感染症の発症、身体重症度およびｑｕａｌｉｔｙ−ｏｆ−ｌｉｆｅ（ＱＯＬ）の評価には日本語版Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｕｐｐｅｒ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｕｒｖｅｙ−２１（ＷＵＲＳＳ−２１）を使用した。ＷＵＲＳＳ−２１は２１個の質問からなり、最初の質問（０−７のリッカート尺度：０＝症状なし、１＝ほんの少し具合が悪い、３＝少し具合が悪い、５＝中程度に具合が悪い、７＝ひどく具合が悪い）は試験期間中毎日回答させ、発症の有無および罹患期間の判定に使用した。
２番目から１１番目の１０個の質問は、上気道感染症の１０の身体症状（鼻水、鼻づまり、くしゃみ、咽頭痛、のどのいがらっぽさ、咳、のどかれ、鼻づまりによる頭部および顔面の圧迫感・重さ、痰がたまる、またそれによる胸部の圧迫感・疲労）に関する質問で、０−７のリッカート尺度（０＝なし、１＝とても軽い、３＝軽い、５＝中程度、７＝重度）を回答させ、合計値を身体重症度スコアとした。
１２番目から２０番目の９個の質問は、ＱＯＬに関する事象（物事を明確に考えられる、熟睡する、楽に呼吸できる、歩く、階段を上る、運動する、日常生活を行える、家の外で仕事ができる、家の中で仕事ができる、他人と交流ができる、自分の生活を楽しめる）についての質問で、０−７のリッカート尺度（０＝なし、１＝とても軽い、３＝軽い、５＝中程度、７＝重度）を回答させ、合計スコアをＱＯＬスコアとした。
上気道感染症の発症日は、最初の質問に２日連続で０を選択した後に、１−７を選択した日とし、消失日は、発症後２日連続で０を選択した時の２日前（最後に１−７を選択した日）とした。本試験における上気道感染症のイベントは、罹患期間（発症日から消失日の期間）が２日以上で、かつ罹患期間中の身体重症度スコアの最高値が１０を超えるものとした。罹患期間、身体重症度スコアおよびＱＯＬスコアは試験期間中の最高値を評価対象とした。
3) Criteria for diagnosis and evaluation of upper respiratory tract infection The Japanese version of Wisconsin Upper Respiratory Symptom Service-21 (WURSS-21) is used to evaluate the onset, physical severity, and quality of life (QOL) of upper respiratory tract infection. It was used. WURSS-21 consists of 21 questions, the first question (0-7 Likert scale: 0 = no symptoms, 1 = slightly sick, 3 = slightly sick, 5 = moderately sick. , 7 = terribly ill) was asked daily during the test period and used to determine the presence or absence of onset and the duration of illness.
The 10 questions from the 2nd to the 11th are the 10 physical symptoms of upper respiratory tract infection (snot, stuffy nose, sneezing, sore throat, throat irritation, cough, throat, stuffy nose) And questions about facial tightness / weight, sputum buildup, and chest tightness / fatigue caused by it, 0-7 lickart scale (0 = none, 1 = very light, 3 = light, 5 = medium) Degree, 7 = severe) was answered, and the total value was used as the physical severity score.
The nine questions from the 12th to the 20th are questions related to quality of life (thinking things clearly, sleeping soundly, breathing comfortably, walking, climbing stairs, exercising, doing daily activities, working outside the house. Ask questions about what you can do, work at home, interact with others, and enjoy your life) on a 0-7 Likert scale (0 = none, 1 = very light, 3 = light, 5 = medium) Degree, 7 = severe) was answered, and the total score was taken as the QOL score.
The onset date of upper respiratory tract infection is the day when 0 is selected for the first question for 2 consecutive days and then 1-7, and the disappearance date is 2 days before when 0 is selected for 2 consecutive days after the onset. (The day when 1-7 was last selected). For events of upper respiratory tract infection in this study, the duration of illness (the period from the date of onset to the date of disappearance) was 2 days or more, and the maximum physical severity score during the morbidity period was more than 10. The highest morbidity, physical severity score, and quality of life score during the study period were evaluated.
４）試験プロトコール
試験は無作為化二重盲検プラセボ対照並行群間比較試験とした。すなわち、試験に関与しない担当者が乱数を用いて割付表を作成し、無作為に被験者を２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群とプラセボ群の２群に分け、それぞれを摂取させた。盲検化の対象は、試験に関与する者すべてであり、割付の開鍵は解析対象者の固定後に行った。
試験期間中は、ＷＵＲＳＳ−２１への記入と日誌に自覚症状および医薬品や健康食品の摂取など指導内容の逸脱の有無について記録させた。なお、本試験の試験食品摂取期間は冬季（１月）から春季（５月）までであった。
スクリーニング検査および摂取１６週後検査日には、体重測定、血圧、脈拍測定、臨床検査、食物摂取頻度調査（ＦＦＱｇ ｖｅｒ．４．０（建帛社））を実施した。
臨床検査は、血液検査として２５（ＯＨ）Ｄ、１α，２５（ＯＨ）２ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ、ｓｅｒｕｍ Ｃａ、ｉｎｔａｃｔ ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ、 ｗｈｉｔｅ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ、ｒｅｄ ｂｌｏｏｄ ｃｅｌｌ、ｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ、ｈｅｍａｔｏｃｒｉｔ、ｐｌａｔｅｌｅ、ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ、ｔｏｔａｌ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ、ＨＤＬ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ、ＬＤＬ−ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ、ｂｌｏｏｄ ｇｌｕｃｏｓｅ、ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ ｉｎｓｕｌｉｎ、ＨｂＡ１Ｃ、ｇａｍｍａ−ｇｌｕｔａｍｙｌ ｔｒａｎｓ ｐｅｐｔｉｄａｓｅ、ａｓｐａｒｔａｔｅ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ、ａｌａｎｉｎｅ ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ、ｔｏｔａｌ ｂｉｌｉｒｕｂｉｎ、ｔｏｔａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ、ａｌｂｕｍｉｎ、ａｌｂｕｍｉｎ／ｇｌｏｂｕｌｉｎ ｒａｔｉｏ、ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ、ｌａｃｔａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ、ｃｒｅａｔｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈｏｋｉｎａｓｅ、ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ、ｕｒｉｃ ａｃｉｄ、ｂｌｏｏｄ ｕｒｅａ ｎｉｔｒｏｇｅｎ、ｓｏｄｉｕｍ、ｐｏｔａｓｓｉｕｍ、ｃｈｌｏｒｉｄｅ、ｍａｇｎｅｓｉｕｍ、ｓｅｒｕｍ ｉｒｏｎ、ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ ｉｒｏｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ、尿検査はｕｒｉｎｅ ｓｕｇａｒ、ｕｒｉｎｅ ｏｃｃｕｌｔ ｂｌｏｏｄ、ｕｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ、ｕｒｉｎａｒｙ ｃａｌｃｉｕｍ、ｕｒｉｎｅ ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅを測定した。血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度はＲＩＡ２抗体法にて測定した。
4) Test protocol The study was a randomized, double-blind, placebo-controlled, parallel-group comparative study. That is, the person in charge who was not involved in the test prepared an allocation table using random numbers, and the subjects were randomly divided into two groups, a 25-hydroxycholecalciferol group and a placebo group, and each group was ingested. The subjects of the blinding were all those involved in the study, and the key allocation was performed after the subjects to be analyzed were fixed.
During the test period, the entries in WURSS-21 and the diary were made to record the subjective symptoms and the presence or absence of deviations in the guidance content such as intake of medicines and health foods. The test food intake period of this test was from winter (January) to spring (May).
Screening test and 16 weeks after intake On the test day, body weight measurement, blood pressure, pulse measurement, clinical test, and food intake frequency survey (FFQg ver. 4.0 (Kenjosha)) were carried out.
The clinical tests include 25 (OH) D, 1α, 25 (OH) 2 vitalin D, serum Ca, intact creatinine homone, white blood cell, red blood cell, hemoglobin, creatinine, hematoriteri, as blood tests. -cholesterol, LDL-cholesterol, blood glucose, immunoreactive insulin, HbA1C, gamma-glutamyl trans peptidase, aspartate transaminase, alanine transaminase, total bilirubin, total protein, albumin, albumin / globulin ratio, alkaline phosphatase, lactate dehydrogenase, creatine phosphokinase, creatinine , Uric acid, blood creatinine, sodium, potassium, chloride, magnesium, serum iron, unsaturated irron binding capacity, urine test is ureine creatinine, ureinine, ureinine The serum 25 (OH) D concentration was measured by the RIA2 antibody method.
５）症状観察
（ア）主要評価項目
摂取期間１６週間中の上気道感染症の発症率とした。上気道感染症の発症率は各群の上気道発症を発症した被験者数を各群の被験者数で除して算出した。
5) Symptom observation (a) Primary endpoint The incidence of upper respiratory tract infection during the 16-week intake period was used. The incidence of upper respiratory tract infection was calculated by dividing the number of subjects who developed upper respiratory tract infection in each group by the number of subjects in each group.
（イ）副次評価項目
身体重症度スコア、ＱＯＬスコア、罹患期間、４週間ごとの新規上気道感染症発症率とした。身体重症度スコア、ＱＯＬスコアおよび罹患期間は、上気道感染症を発症した被験者を評価対象とした。
(B) Secondary endpoints: Physical severity score, QOL score, duration of illness, and incidence of new upper respiratory tract infections every 4 weeks. The physical severity score, quality of life score, and duration of illness were evaluated by subjects who developed upper respiratory tract infections.
６）サブグループ解析
骨軟化症やくる病などのリスクが高まるのは欠乏状態とされる血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が２０ｎｇ／ｍＬ以下であり、血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が２０ｎｇ／ｍＬ超３０ｎｇ／ｍＬ以下では転倒などのリスクが高まる不足状態であるとしている。血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度低下が上気道感染症の発症率を増加させるという報告から、摂取前検査時の血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が不足状態の被験者および欠乏状態の被験者でそれぞれ、上気道感染症の発症率、身体重症度スコア、ＱＯＬスコア、罹患期間、４週間ごとの新規上気道感染症発症率を評価した。
6) Subgroup analysis The risk of osteomalacia and rickets is increased when the serum 25 (OH) D concentration is 20 ng / mL or less and the serum 25 (OH) D concentration is more than 20 ng / mL. It is said that if the concentration is 30 ng / mL or less, the risk of falling or the like increases. From reports that lower serum 25 (OH) D levels increase the incidence of upper respiratory tract infections, upper respiratory tract subjects with deficient and deficient serum 25 (OH) D levels at the time of pre-intake testing, respectively. The incidence of infection, physical severity score, QOL score, duration of illness, and incidence of new upper respiratory tract infections every 4 weeks were evaluated.
７）探索的な有効性解析
探索的な有効性解析として、身体重症度スコアの合計値、ＱＯＬスコアの合計値を評価した。合計値は、摂取期間中の上気道感染症発症時のスコアをすべて合計して算出した。
7) Exploratory effectiveness analysis As an exploratory effectiveness analysis, the total value of the physical severity score and the total value of the QOL score were evaluated. The total value was calculated by summing all the scores at the onset of upper respiratory tract infection during the intake period.
８）安全性評価
安全性の評価は、臨床検査値の変動、被検者からの自覚症状の訴え、医師による有害事象についての慣例的な診察を基に評価した。
8) Safety evaluation The safety evaluation was evaluated based on fluctuations in clinical laboratory test values, complaints of subjective symptoms from subjects, and customary medical examinations by doctors regarding adverse events.
９）解析対象者
有効性解析対象は、試験実施計画書に適合した解析対象集団（ＰＰＳ）とした。ＰＰＳは、所定の試験スケジュールを完遂した被験者である最大の解析対象集団（Ｆｕｌｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｅｔ；ＦＡＳ）の内、Ｉ：試験食品の摂取率が８０％を下回った者、ＩＩ：試験結果の信頼性を損なう行為（日誌記録の欠損や指導事項の不遵守など）が顕著に見られる者、ＩＩＩ：割付後に除外基準に該当していたことが明らかになった者、ＩＶ：試験食品摂取開始日から上気道感染症を発症していた者、Ｖ：除外することが適当であると試験責任医師が判断した者、を除外した集団とした。
安全性の評価の内、有害事象についてはＦＡＳを評価対象とした。臨床検査値などの評価はＰＰＳを評価対象とした。
9) Efficacy of analysis target The analysis target was the analysis target population (PPS) that conformed to the test protocol. PPS is a group of subjects who have completed a predetermined test schedule and is the largest group to be analyzed (Full analysis set; FAS). I: The intake rate of the test food is less than 80%, II: Reliability of the test results. Those who have noticeably observed acts that impair (such as loss of diary records or non-compliance with guidance items), III: Those who have been found to meet the exclusion criteria after allocation, IV: From the start date of test food intake Those who had developed upper respiratory tract infection, V: those who were judged by the investigator to be excluded, were excluded.
Of the safety evaluations, FAS was evaluated for adverse events. PPS was evaluated for evaluation of clinical laboratory test values.
１０）統計解析
被験者の年齢、ＢＭＩ、血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度、血清１α，２５（ＯＨ）２ ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ濃度、インタクトＰＴＨ、血清カルシウム、尿中カルシウム、クレアチニンクリアランスはＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ ｔｅｓｔ、性別はＦｉｓｈｅｒ’ｓ ｅｘａｃｔ ｔｅｓｔでプラセボ群と２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の比較を行った。
主要評価項目の摂取期間１６週間中の上気道感染症の発症率および副次評価項目の４週ごとの新規上気道感染症の発症率は、Ｆｉｓｈｅｒ’ｓ ｅｘａｃｔ ｔｅｓｔで評価した。その他の副次評価項目の評価は、上気道感染症の罹患期間にはＧｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ Ｗｉｌｃｏｘｏｎ ｔｅｓｔ、身体重症度スコアおよびＱＯＬスコアはＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ ｔｅｓｔを適用した。なお、上気道感染症の罹患期間の中央値はカプラン−マイヤー法を用いて求めた。
検定の有意水準は両側５％とし、両側１０％を有意傾向とした。全ての解析はＪＭＰ（登録商標）１２（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）を使用した。
10) Statistical analysis
Subject's age, BMI, serum 25 (OH) D concentration, serum 1α, 25 (OH) 2 vitamin D concentration, intact PTH, serum calcium, urinary calcium, creatinine clearance is Student's test, gender is Fisher's In the exact test, the placebo group and the 25-hydroxycholecalciferol group were compared.
The incidence of upper respiratory tract infections during the 16-week intake period of the primary endpoint and the incidence of new upper respiratory tract infections every 4 weeks as the secondary endpoint were evaluated by Fisher's exact test. As for the evaluation of other secondary endpoints, the Generized Wilcoxon test was applied to the duration of upper respiratory tract infection, and the Student's t-test was applied to the physical severity score and QOL score. The median duration of upper respiratory tract infection was determined using the Kaplan-Meier method.
The significance level of the test was 5% on both sides, and 10% on both sides was considered a significant tendency. All analyzes used JMP® 12 (SAS Institute).
２．試験結果
１）被験者の背景
同意を取得した被験者候補４２８例に対し、スクリーニング検査を実施し、２５２例の被験者を選択した。この２５２例を２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群とプラセボ群にそれぞれ１２６例ずつ無作為に割付けた。このうち、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の１例とプラセボ群の１例の計２例が、試験食品摂取前に同意の撤回をして、脱落した。この結果、２５０例が試験食品摂取を開始した。試験食品摂取中に２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の１例、プラセボ群の２例が個人の理由で最終検査に来院できないことを理由に同意の撤回をして脱落し、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の１２４例、プラセボ群の１２３例が所定の試験スケジュールを完遂した。試験スケジュールを完遂した２４７例の内、制限事項の不遵守により２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の１例とプラセボ群の１例、食事調査などの回答状況から有効性の評価項目の信頼性の疑いがあったプラセボ群の１例、試験食品摂取開始日に上気道感染症を発症していた２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の１３例、プラセボ群の１５例、試験食品摂取前より高血圧症の治療を開始し、除外基準に該当したことが明らかとなったプラセボ群の１例がＰＰＳより除外された。よって、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の１１０例、プラセボ群の１０５例がＰＰＳとなった。試験食品の摂取率は２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で９９．８％、プラセボ群で９９．４％であった。安全性の評価対象は試験食品を摂取した２５０例の内、安全性の評価ができると判断された２４８例（２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群１２５例、プラセボ群１２３例）となった。
本試験のＰＰＳの被験者背景情報を表３に示す。
2. 2. Test results 1) Background of the subject
A screening test was performed on 428 candidate subjects who obtained consent, and 252 subjects were selected. These 252 patients were randomly assigned to receive 126 patients each in the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group. Of these, a total of two patients, one in the 25-hydroxycholecalciferol group and one in the placebo group, withdrew their consent before ingesting the test food and dropped out. As a result, 250 patients started taking the test food. During the intake of the test food, one patient in the 25-hydroxycholecalciferol group and two patients in the placebo group withdrew their consent because they could not come to the final examination due to individual reasons, and 25-hydroxycholecalciferol was dropped. 124 patients in the group and 123 patients in the placebo group completed the prescribed study schedule. Of the 247 patients who completed the study schedule, 1 patient in the 25-hydroxycholecalciferol group and 1 patient in the placebo group due to non-compliance with the restrictions, and the response status of the dietary survey, etc., suggested the reliability of the efficacy endpoint. 1 patient in the placebo group, 13 patients in the 25-hydroxycholecalciferol group who had developed upper respiratory tract infection on the day of the start of test food intake, 15 patients in the placebo group, treatment of hypertension before ingestion of the test food Was started, and one patient in the placebo group who was found to meet the exclusion criteria was excluded from PPS. Therefore, 110 cases in the 25-hydroxycholecalciferol group and 105 cases in the placebo group became PPS. The intake rate of the test food was 99.8% in the 25-hydroxycholecalciferol group and 99.4% in the placebo group. Of the 250 patients who ingested the test food, 248 patients (125 patients in the 25-hydroxycholecalciferol group and 123 patients in the placebo group) were judged to be able to evaluate the safety.
Table 3 shows the background information of the PPS subjects in this study.
性別を除き、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群とプラセボ群との間に有意差が認められる項目はなかった。なお、血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度に関して、欠乏状態（２０ ｎｇ／ｍＬ以下）と判断される者は２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で６１例、プラセボ群で６０例、不足状態（２０ｎｇ／ｍＬ超３０ｎｇ／ｍＬ以下）と判断される者は２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で４９例、プラセボ群で４５例であった。
ＦＦＱｇによる食事調査の結果を表４に示す。
Except for gender, there were no significant differences between the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group. Regarding the serum 25 (OH) D concentration, 61 patients in the 25-hydroxycholecalciferol group, 60 patients in the placebo group, and deficient patients (more than 20 ng / mL) were judged to be deficient (20 ng / mL or less). The number of patients judged to be (30 ng / mL or less) was 49 in the 25-hydroxycholecalciferol group and 45 in the placebo group.
Table 4 shows the results of the dietary survey by FFQg.
２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群およびプラセボ群で試験食品摂取前から摂取１６週後時点で有意に変動した項目はなく、群間で有意な差を示す項目もなく、本試験期間中での食習慣の大きな変動はなかったものと推測された。 In the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group, there were no items that changed significantly from before the test food intake to 16 weeks after the intake, and there were no items that showed a significant difference between the groups, and the eating habits during this test period. It was speculated that there was no significant change in.
３．有効性評価
１）主要評価項目
本試験で摂取期間中に上気道感染症を発症した被験者は２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で４１例、プラセボ群では４３例であった。なお、摂取期間中の上気道感染症の総イベント数は２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で５２件、プラセボ群では６６件であった。
主要評価項目である摂取期間１６週間中の上気道感染症の発症率は、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群で３７．３％、プラセボ群で４１．０％であった（表５参照）。
3. 3. Efficacy evaluation 1) Primary endpoint In this study, 41 subjects in the 25-hydroxycholecalciferol group and 43 in the placebo group developed upper respiratory tract infections during the intake period. The total number of events of upper respiratory tract infection during the intake period was 52 in the 25-hydroxycholecalciferol group and 66 in the placebo group.
The incidence of upper respiratory tract infections during the 16-week intake period, which is the primary endpoint, was 37.3% in the 25-hydroxycholecalciferol group and 41.0% in the placebo group (see Table 5).
２）副次評価項目
身体重症度スコアは、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群が２６．７±１１．６であったのに対し、プラセボ群で３１．２±１６．３であり、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群が低値ではあった。ＱＯＬスコアについては、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群が２７．６±１７．２であったのに対し、プラセボ群で３１．３±１９．３であり、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群が低値であった。
上気道感染症の罹患期間については、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群（中央値：１０日間）はプラセボ群（中央値：１３日間）と比較して、低値であった（表５参照）。
２５（ＯＨ）Ｄの活性化（ヒドロキシル化）は主として腎臓が担っていることから、腎機能マーカーであるクレアチニンクリアランスと性別を調整因子として、罹患期間についてさらに解析を行ったところ、食品効果が有意（ｐ＝０．０４６）であり、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取による上気道感染症の罹患期間短縮効果が示された。
４週ごとの新規上気道感染症発症率については、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群およびプラセボ群ともに季節が進むにつれて、発症率が低下していた。また発症率の低下は、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群がプラセボ群と比較して早く低下しており、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取による影響と判断した（表６参照）。
2) Secondary endpoint The physical severity score was 26.7 ± 11.6 in the 25-hydroxycholecalciferol group, whereas it was 31.2 ± 16.3 in the placebo group, 25-hydroxy. The cholecalciferol group had low levels. The QOL score was 27.6 ± 17.2 in the 25-hydroxycholecalciferol group, while it was 31.3 ± 19.3 in the placebo group, which was lower in the 25-hydroxycholecalciferol group. Met.
Regarding the duration of upper respiratory tract infection, the 25-hydroxycholecalciferol group (median: 10 days) was lower than the placebo group (median: 13 days) (see Table 5).
Since the activation (hydroxylation) of 25 (OH) D is mainly carried out by the kidney, further analysis of the morbidity period using creatinine clearance, which is a renal function marker, and sex as regulators shows that the food effect is significant. (P = 0.046), and the effect of shortening the morbidity period of upper respiratory tract infection by ingestion of 25-hydroxycholecalciferol was shown.
Regarding the incidence of new upper respiratory tract infections every 4 weeks, the incidence decreased as the season progressed in both the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group. In addition, the decrease in the incidence rate was faster in the 25-hydroxycholecalciferol group than in the placebo group, and it was judged that the effect was due to the intake of 25-hydroxycholecalciferol (see Table 6).
３）サブグループ解析
スクリーニング時の血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が２０ｎｇ／ｍＬ以下の２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層および２０ｎｇ／ｍＬ超３０ｎｇ／ｍＬ以下の２５（ＯＨ）Ｄ不足層の上気道感染症の発症率、身体重症度スコア、ＱＯＬスコア、罹患期間、４週ごとの新規上気道感染症発症率を表７および表８に示す。
3) Subgroup analysis Upper respiratory tract infections in the 25 (OH) D deficient layer with a serum 25 (OH) D concentration of 20 ng / mL or less and the 25 (OH) D deficient layer with a serum 25 (OH) D concentration of more than 20 ng / mL and 30 ng / mL or less at the time of screening. The incidence rate, physical severity score, quality of life score, duration of illness, and incidence of new upper respiratory tract infections every 4 weeks are shown in Tables 7 and 8.
上気道感染症の発症率については、血清２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層および不足層のいずれにおいても、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取による発症率への影響について、プラセボ群との有意差はなかった。しかしながら、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群において、２５（ＯＨ）Ｄ不足層は欠乏層と比較して、上気道感染症の発症率が低く、高い血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が上気道感染症の発症予防に有効であった。
４週ごとの新規上気道感染症イベントの発症率については、血清２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層および不足層のいずれにおいても、試験期間が経過するにつれて、発症率の低下が認められた。しかしながら、いずれの層でも２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群とプラセボ群に有意な差は認められなかった。上気道感染症の発症率の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群とプラセボ群の差に着目すると、２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層では、摂取開始９−１２週後が最大（２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群：８．２％、プラセボ群：１８．３％）であった。一方で、２５（ＯＨ）Ｄ不足層では、摂取開始後５−８週後に２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群とプラセボ群の差が最大（２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群：１０．２％、プラセボ群：２２．２％、ｐ＝０．１５９）であり、２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層と比較して、２５（ＯＨ）Ｄ不足層の方が２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取群の上気道感染症の発症率の低下は早かった。
身体重症度スコアおよびＱＯＬスコアについては、２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層では、ＱＯＬスコアがプラセボ群と比較して低値であった。一方で、２５（ＯＨ）Ｄ不足層は、身体重症度スコアがプラセボ群と比較して低値であった。
Regarding the incidence of upper respiratory tract infections, there was no significant difference from the placebo group in the effect of 25-hydroxycholecalciferol intake on the incidence in both the serum 25 (OH) D deficient layer and the deficient layer. .. However, in the 25-hydroxycholecalciferol group, the 25 (OH) D deficient layer has a lower incidence of upper respiratory tract infection than the deficient layer, and a high serum 25 (OH) D concentration is associated with upper respiratory tract infection. It was effective in preventing the onset.
Regarding the incidence of new upper respiratory tract infection events every 4 weeks, a decrease in the incidence was observed in both the serum 25 (OH) D deficient layer and the deficient layer as the test period elapsed. However, no significant difference was observed between the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group in any of the layers. Focusing on the difference in the incidence of upper respiratory tract infections between the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group, in the 25 (OH) D-deficient group, the maximum was 9-12 weeks after the start of intake (25-hydroxycholecalciferol group). : 8.2%, placebo group: 18.3%). On the other hand, in the 25 (OH) D deficient layer, the difference between the 25-hydroxycholecalciferol group and the placebo group was the largest 5-8 weeks after the start of ingestion (25-hydroxycholecalciferol group: 10.2%, placebo group). : 22.2%, p = 0.159), and the upper respiratory tract infection in the 25-hydroxycholecalciferol intake group was higher in the 25 (OH) D deficient layer than in the 25 (OH) D deficient layer. The incidence of calciferol declined quickly.
Regarding the physical severity score and the QOL score, the QOL score was lower in the 25 (OH) D deficient layer than in the placebo group. On the other hand, the 25 (OH) D deficient layer had a lower physical severity score than the placebo group.
４）有効性
被験食品摂取期間中の上気道感染症の身体重症度と上気道感染症によるＱＯＬの低下を、罹患期間などとあわせて総合的に判断するために、試験食品摂取期間中の身体重症度スコアとＱＯＬスコアの合計値をそれぞれ算出した。その結果を表９に示す。
4) Efficacy In order to comprehensively judge the physical severity of upper respiratory tract infection during the test food intake period and the decrease in QOL due to the upper respiratory tract infection, including the morbidity period, the body during the test food intake period. The total value of the severity score and the QOL score was calculated respectively. The results are shown in Table 9.
身体重症度スコアの合計値は、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群はプラセボ群と比較して有意に低値（ｐ＝０．０４９６）であった。ＱＯＬスコアの合計値では、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群はプラセボ群と比較して有意に低値（ｐ＝０．０１９）であった。これらの結果から、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取が上気道感染症罹患時の身体重症度の緩和やＱＯＬを改善したことが明らかとなった。 The total physical severity score was significantly lower in the 25-hydroxycholecalciferol group than in the placebo group (p = 0.0496). In the total QOL score, the 25-hydroxycholecalciferol group was significantly lower (p = 0.019) than the placebo group. From these results, it was clarified that ingestion of 25-hydroxycholecalciferol alleviated the physical severity and improved the quality of life in the case of upper respiratory tract infection.
５）２５（ＯＨ）Ｄ血中濃度
試験開始前、試験食品摂取期間中の血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度は、株式会社エスアールエルに依頼しＲＩＡ２抗体法にて測定した。
結果を表１０に示す。
5) 25 (OH) D blood concentration Before the start of the test, the serum 25 (OH) D concentration during the test food intake period was measured by the RIA2 antibody method at the request of SRL Co., Ltd.
The results are shown in Table 10.
２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取群の１６週経過後の血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度は、２５（ＯＨ）Ｄ欠乏層で初期値１５．４±２．７ｎｇ／ｍＬから４１．９±１１．６ｎｇ／ｍＬと約２．７倍上昇した。また、２５（ＯＨ）Ｄ不足層で初期値２４．９±３．１ｎｇ／ｍＬから４９．６±１３．６ｎｇ／ｍＬと約１．９９倍上昇した。このことから２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの血中濃度が３０ｎｇ／ｍＬに満たないヒトが１日１０μｇ摂取し続けると、３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持できることが分かった。 The serum 25 (OH) D concentration after 16 weeks in the 25-hydroxycholecalciferol intake group was 15.4 ± 2.7 ng / mL to 41.9 ± 11.6 ng in the 25 (OH) D deficient layer. It increased about 2.7 times to / mL. In the 25 (OH) D deficient layer, the initial value was 24.9 ± 3.1 ng / mL, which increased about 1.99 times from 49.6 ± 13.6 ng / mL. From this, it was found that the blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol can be maintained at 30 to 50 ng / mL by continuously ingesting 10 μg per day for humans having a blood concentration of less than 30 ng / mL.
６）安全性
いくつかの項目で、有意な変動が見られた項目があったが、いずれも臨床的意義のない変動であると試験責任医師は判断した。また、期間中に高カルシウム血症を発症した被験者はいなかった。
有害事象は、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール群の７３例に２５６件、プラセボ群の７４例に３３９件発生した。発生した有害事象については感冒、腹痛などの症状で、いずれも軽度であり、試験期間中に症状が消失した。すべての有害事象に関して、試験責任医師は試験食品との関連性を否定した。有害事象の発現率は群間で差は認められなかった。
以上の結果より、本試験条件下における２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの安全性に問題は無かった。
6) Safety There were some items that showed significant fluctuations, but the investigator judged that the fluctuations had no clinical significance. In addition, no subject developed hypercalcemia during the period.
Adverse events occurred in 256 patients in the 25-hydroxycholecalciferol group and 339 patients in 74 patients in the placebo group. The adverse events that occurred were symptoms such as the common cold and abdominal pain, all of which were mild, and the symptoms disappeared during the study period. For all adverse events, the investigator denied any association with the study food. There was no difference in the incidence of adverse events between the groups.
From the above results, there was no problem in the safety of 25-hydroxycholecalciferol under the conditions of this test.
４．総合評価
２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取によって血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が上昇していると考えられる摂取開始から９−１２週間後に、上気道感染症の発症率でプラセボ群との差が大きかった。これは、血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度を高くすることで上気道感染症を予防できたものと評価した。血清２５（ＯＨ）Ｄ濃度が欠乏（２０ｎｇ／ｍＬ以下）している被験者層と比較して血中２５（ＯＨ）Ｄ濃度が不足（２０ｎｇ／ｍＬ超３０ｎｇ／ｍＬ以下）している被験者層でより早く発症率の低下がみられた。
すなわち血清中の２５（ＯＨ）Ｄが３０ｎｇ／ｍＬ以下のヒトに本発明の組成物を投与することで上気道感染症を低下させる。
また、上気道感染症の罹患期間を、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取によって短縮することが確認された（軽減できた）。さらに、２５−ヒドロキシコレカルシフェロール摂取によって上気道感染症罹患時の身体重症度およびＱＯＬを改善したことから、上気道感染症の緩和効果を本発明の組成物が有することが確認できた。
4. Comprehensive evaluation 9-12 weeks after the start of ingestion, which is thought to have increased serum 25 (OH) D concentration due to ingestion of 25-hydroxycholecalciferol, the incidence of upper respiratory tract infection was significantly different from that of the placebo group. .. It was evaluated that the upper respiratory tract infection could be prevented by increasing the serum 25 (OH) D concentration. In the subject layer in which the blood 25 (OH) D concentration is insufficient (more than 20 ng / mL and 30 ng / mL or less) as compared with the subject layer in which the serum 25 (OH) D concentration is deficient (20 ng / mL or less). There was an earlier decrease in incidence.
That is, administration of the composition of the present invention to a human having 25 (OH) D in serum of 30 ng / mL or less reduces upper respiratory tract infection.
In addition, it was confirmed that the duration of upper respiratory tract infection was shortened (reduced) by ingestion of 25-hydroxycholecalciferol. Furthermore, ingestion of 25-hydroxycholecalciferol improved the physical severity and QOL of upper respiratory tract infections, confirming that the composition of the present invention has an alleviating effect on upper respiratory tract infections.
次に、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを含有する組成物の安定性について試験例を示し説明する。これは、上気道感染症の予防又は上気道感染症状緩和効果をより確実にすることを目的とした取り組みである。すなわち血中２５（ＯＨ）Ｄ濃度を長期にわたり高く維持させる為には、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの有効投与量を確実に投与できる組成物（製剤）である必要があり、そのためには組成物（製剤）中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの安定性の確保が非常に重要なことに基づく。組成物（製剤）中に含有される２５−ヒドロキシコレカルシフェロールが安定化されることで、長期保存に耐えうる市場に流通させてもよい製品となる。
尚、参考情報として、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）も試験した。以下の説明中で２５−ヒドロキシコレカルシフェロールとコレカルシフェロールを区別しないときはビタミンＤ３類と表記している。
Next, a test example will be shown and described regarding the stability of the composition containing 25-hydroxycholecalciferol. This is an effort aimed at preventing upper respiratory tract infections or ensuring the effect of alleviating upper respiratory tract infection symptoms. That is, in order to maintain a high blood 25 (OH) D concentration for a long period of time, it is necessary to have a composition (preparation) capable of reliably administering an effective dose of 25-hydroxycholecalciferol, and for that purpose, the composition. It is based on the very importance of ensuring the stability of 25-hydroxycholecalciferol in (formulation). By stabilizing the 25-hydroxycholecalciferol contained in the composition (formulation), it becomes a product that may be distributed on the market that can withstand long-term storage.
Incidentally, as reference information, vitamin D 3 (cholecalciferol) was also tested. When not distinguishing 25-hydroxycholecalciferol and cholecalciferol in the following description are denoted with the vitamin D 3 compounds.
＜２５−ヒドロキシコレカルシフェロール組成物の安定性試験＞
以下に試験例を示し、本発明を説明する。
１．レシチン類によるビタミンＤ３類の安定性試験
（１）ビタミンＤ３類
下記の表１１に示すビタミンＤ３類を用いて試験をおこなった。
<Stability test of 25-hydroxycholecalciferol composition>
The present invention will be described below with reference to test examples.
1. 1. Stability test of vitamin D 3 with lecithin (1) Vitamin D 3 A test was conducted using vitamin D 3 shown in Table 11 below.
（２）レシチン類
市販の下記の表１２に示すレシチン類を試験に用いた。
(2) Lecithins Commercially available lecithins shown in Table 12 below were used in the test.
（３）試験方法
・試料の調製
１）コレカルシフェロールの調製
ビタミンＤ３１７５μｇを無水エタノール１７５０ｍｇに溶解させ溶液とした。この溶液１．７５ｇをバイアル瓶に予め秤量してあった各レシチン類１ｇに加え、ボルテックスミキサーを用いて３分間撹拌混合した。その後、エタノールを減圧乾燥して除去し試験用の組成物を得た。
(3) Test method / preparation of sample 1) Preparation of choleciferol 175 μg of vitamin D 3 was dissolved in 1750 mg of absolute ethanol to prepare a solution. 1.75 g of this solution was added to 1 g of each lecithin previously weighed in a vial, and the mixture was stirred and mixed for 3 minutes using a vortex mixer. Then, ethanol was dried under reduced pressure and removed to obtain a composition for testing.
２）２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの調製
（２５（ＯＨ）Ｄ３）１０．２０５ｍｇを無水エタノール５００ｇに溶解させ溶液とした。この溶液２．５ｇをバイアル瓶に予め秤量してあった各レシチン類１ｇに加え、ボルテックスミキサーを用いて３分間撹拌混合した。その後、エタノールを減圧乾燥し試験組成物を得た。
2) Preparation of 25-hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) 10.205 mg was dissolved in 500 g of absolute ethanol to prepare a solution. 2.5 g of this solution was added to 1 g of each lecithin that had been weighed in advance in a vial, and the mixture was stirred and mixed for 3 minutes using a vortex mixer. Then, ethanol was dried under reduced pressure to obtain a test composition.
３）安定性試験
上記試験組成物を６０℃の恒温槽で２週間保存し、ビタミンＤ３類の残存率を測定した。
・コレカルシフェロールの分析方法
１．コレカルシフェロール含有試験組成物約０．０１ｇを精密に量り、２０ｍＬ程度の容器に入れ、１０ｍＬのホールピペットにてエタノールを加え撹拌し、５分間超音波にかけ撹拌後約１ｍＬをエッペンチューブに採取し、１５０００ｒｐｍで５分遠心する。上清を試料溶液とする。
２．コレカルシフェロール標準品を１ｍｇ／ｍＬとなるようエタノールにて調整後、０．１、０．５、１．０、５．０、１０．０μｇ／ｍＬとなるようエタノール溶液にて適宜、希釈し、標準溶液とする。
試料溶液及び標準溶液それぞれ１０μＬを以下の条件の高速液体クロマトグラフィーに注入し、コレカルシフェロールのピーク面積を求める。標準溶液のコレカルシフェロールのピーク面積から検量線（ｙ＝ｂｘ＋ａ：ａ＝切片、ｂ＝傾き）を求め、下記に示した計算法に従って試料のコレカルシフェロールの含量を求める。
３．測定条件
検出器 ：紫外吸光光度計（測定波長２６５ｎｍ）
カラム ：内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレス管に粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲルを充填したもの（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ−１８ ＵＧ−１２０ 資生堂社製）
カラム温度：４０℃
移動相 ：アセトニトリル
流速 ：１ｍＬ／分
４．計算法
含有量（μｇ／ｇ）＝（試料溶液のコレカルシフェロール面積−切片）／傾き×定容量／試料採取量×純度
3) Stability Test The test compositions were stored for 2 weeks in a thermostatic bath at 60 ° C., it was measured residual ratio of vitamin D 3 compounds.
・ Analysis method of cholecalciferol 1. Precisely weigh about 0.01 g of the test composition containing choleciferol, put it in a container of about 20 mL, add ethanol with a 10 mL volumetric pipette, stir, apply ultrasonic waves for 5 minutes, and collect about 1 mL in an Eppen tube. , Centrifuge at 15000 rpm for 5 minutes. The supernatant is used as a sample solution.
2. 2. After adjusting the standard cholecalciferol with ethanol to 1 mg / mL, dilute it appropriately with an ethanol solution to 0.1, 0.5, 1.0, 5.0, 10.0 μg / mL. , Standard solution.
10 μL of each of the sample solution and the standard solution is injected into high performance liquid chromatography under the following conditions to determine the peak area of choleciferol. The calibration curve (y = bx + a: a = intercept, b = slope) is obtained from the peak area of choleciferol in the standard solution, and the content of choleciferol in the sample is determined according to the calculation method shown below.
3. 3. Measurement conditions Detector: Ultraviolet absorptiometer (measurement wavelength 265 nm)
Column: A stainless steel tube having an inner diameter of 4.6 mm and a length of 250 mm filled with octadecylated silica gel having a particle size of 5 μm (Capcellpak C-18 UG-120 manufactured by Shiseido Co., Ltd.)
Column temperature: 40 ° C
Mobile phase: Acetonitrile Flow rate: 1 mL / min 4. Calculation method Content (μg / g) = (Cholecalciferol area of sample solution-intercept) / slope x constant volume / sampling amount x purity
・２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの分析方法
１．２５−ヒドロキシコレカルシフェロール(２５（ＯＨ）Ｄ３)含有試験組成物約０．１ｇを２０ｍＬ程度の容器に精密に量り、１０ｍＬのホールピペットにてエタノールを加え撹拌し、１０分間超音波にかけ撹拌後約１ｍＬをエッペンチューブに移し、１５０００ｒｐｍで５分遠心する。上清を試料溶液とする。
２．２５（ＯＨ）Ｄ３標準品を１ｍｇ／ｍＬとなるようエタノールにて調整後、０．１、０．２、０．５、１．０、２．０μｇ／ｍＬとなるようエタノール溶液にて適宜希釈し、標準溶液とする。試料溶液及び標準溶液それぞれ１０μＬを以下の条件の高速液体クロマトグラフィーに注入し、２５（ＯＨ）Ｄ３のピーク面積を求め標準溶液の２５（ＯＨ）Ｄ３のピーク面積から検量線（ｙ＝ｂｘ＋ａ：ａ＝切片、ｂ＝傾き）を求め、下記に示した計算法に従って試料の２５（ＯＨ）Ｄ３含量を求める。
３．測定条件
検出器 ：紫外吸光光度計（測定波長２６５ｎｍ）
カラム ：内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレス管に粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲルを充填したもの（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ−１８ ＵＧ−１２０ 資生堂社製）
カラム温度：４０℃
移動相 ：８０％アセトニトリル水溶液
流速 ：１ｍＬ／分
４．計算法
２５（ＯＨ）Ｄ３含量（μｇ／ｇ）＝（試料溶液の２５（ＯＨ）Ｄ３面積−切片）／傾き×定容量／試料採取量×純度
-Analytical method of 25-hydroxycholecalciferol 1.25-Hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) -containing test composition Weigh precisely about 0.1 g in a container of about 20 mL and use a 10 mL volumetric pipette. Add ethanol, stir, sonicate for 10 minutes, stir, transfer about 1 mL to an Eppen tube, and centrifuge at 15,000 rpm for 5 minutes. The supernatant is used as a sample solution.
2.25 (OH) D 3 standard product is adjusted with ethanol to 1 mg / mL, and then added to an ethanol solution to 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg / mL. Dilute appropriately to make a standard solution. Each sample solution and standard solution was injected 10μL high performance liquid chromatography under the following conditions, 25 (OH) 25 (OH ) calibration curve from the peak area of D 3 standard solutions The peak area of D 3 (y = bx + a : a = the intercept, b = slope), and obtains a 25 (OH) D 3 content of the samples according to the calculation method shown below.
3. 3. Measurement conditions Detector: Ultraviolet absorptiometer (measurement wavelength 265 nm)
Column: A stainless steel tube having an inner diameter of 4.6 mm and a length of 250 mm filled with octadecylated silica gel having a particle size of 5 μm (Capcellpak C-18 UG-120 manufactured by Shiseido Co., Ltd.)
Column temperature: 40 ° C
Mobile phase: 80% aqueous acetonitrile solution Flow rate: 1 mL / min 4. Calculation method 25 (OH) D 3 content (μg / g) = (25 (OH) D 3 area of sample solution-intercept) / slope x constant volume / sampling amount x purity
（４）結果
各試料の安定性試験結果を表１３及び図２に示す。なお結果は、保存期間経過後の残存率で表している。
(4) Results The stability test results of each sample are shown in Table 13 and FIG. The results are expressed as the residual rate after the storage period has elapsed.
コレカルシフェロールは大豆レシチン、卵黄レシチン、酵素分解卵黄レシチン、ヒマワリレシチン、ライスオイルレシチンにより安定化し、酵素分解大豆レシチンでは安定化しなかった。一方２５−ヒドロキシコレカルシフェロールは、コレカルシフェロールとは異なり、酵素分解大豆レシチンで最も安定化され、次いでライスオイルレシチンで安定化した。また２５−ヒドロキシコレカルシフェロールは、大豆レシチンや卵黄レシチン、酵素分解卵黄レシチン及びヒマワリレシチンでは安定化しなかった。 Cholecalciferol was stabilized by soybean lecithin, egg yolk lecithin, enzymatically decomposed egg yolk lecithin, sunflower lecithin, and rice oil lecithin, but not by enzymatically decomposed soybean lecithin. On the other hand, 25-hydroxycholecalciferol, unlike cholecalciferol, was most stabilized with enzymatically degraded soybean lecithin, followed by rice oil lecithin. In addition, 25-hydroxycholecalciferol was not stabilized by soybean lecithin, egg yolk lecithin, enzymatically decomposed egg yolk lecithin and sunflower lecithin.
＜グリセリン脂肪酸エステル及び／又はソルビタン脂肪酸エステルによるビタミンＤ３類の安定性試験＞
（１）ビタミンＤ３類
下記の表１４に示すビタミンＤ３類を用いて試験をおこなった。
<Stability test of vitamin D 3 compounds by glycerin fatty acid esters and / or sorbitan fatty acid ester>
(1) Vitamin D class 3 The test was conducted using the vitamin D class 3 shown in Table 14 below.
（２）グリセリン脂肪酸エステル及びソルビタン脂肪酸エステル
グリセリン脂肪酸エステル及びソルビタン脂肪酸エステルとして下記の表１５に示す化合物を試験に用いた。
(2) Glycerin fatty acid ester and sorbitan fatty acid ester The compounds shown in Table 15 below were used as the glycerin fatty acid ester and sorbitan fatty acid ester in the test.
（３）試験方法
・試料の調製
１）コレカルシフェロールの調製
ビタミンＤ３１７５μｇを無水エタノール１７５０ｍｇに溶解させ溶液とした。この溶液１．７５ｇをバイアル瓶に予め秤量してあった各グリセリン脂肪酸エステル又はソルビタン脂肪酸エステル１ｇに加え、ボルテックスミキサーを用いて３分間撹拌混合した。その後、エタノールを減圧乾燥して除去し試験用の組成物を得た。
(3) Test method / preparation of sample 1) Preparation of choleciferol 175 μg of vitamin D 3 was dissolved in 1750 mg of absolute ethanol to prepare a solution. 1.75 g of this solution was added to 1 g of each glycerin fatty acid ester or sorbitan fatty acid ester previously weighed in a vial, and the mixture was stirred and mixed for 3 minutes using a vortex mixer. Then, ethanol was dried under reduced pressure and removed to obtain a composition for testing.
２）２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの調製
２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（２５（ＯＨ）Ｄ３）１０．２０５ｍｇを無水エタノール５００ｇに溶解させ溶液とした。この溶液２．５ｇをバイアル瓶に予め秤量してあった各グリセリン脂肪酸エステル又はソルビタン脂肪酸エステル１ｇに加え、ボルテックスミキサーを用いて３分間撹拌混合した。その後、エタノールを減圧乾燥し試験組成物を得た。
2) Preparation of 25-Hydroxycholecalciferol 10.205 mg of 25-hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) was dissolved in 500 g of absolute ethanol to prepare a solution. 2.5 g of this solution was added to 1 g of each glycerin fatty acid ester or sorbitan fatty acid ester previously weighed in a vial, and the mixture was stirred and mixed for 3 minutes using a vortex mixer. Then, ethanol was dried under reduced pressure to obtain a test composition.
３）安定性試験
上記試験組成物を６０℃の恒温槽で２週間保存し、ビタミンＤ３類の残存率を測定した。
・コレカルシフェロールの分析方法
１．コレカルシフェロール含有組成物約０．０１ｇを精密に量り、２０ｍＬ程度の容器に入れ、１０ｍＬのホールピペットにてエタノールを加え撹拌し、５分間超音波にかけ撹拌後約１ｍＬをエッペンチューブに採取し、１５０００ｒｐｍで５分遠心する。上清を試料溶液とする。
２．コレカルシフェロール標準品を１ｍｇ／ｍＬとなるようエタノールにて調整する。ついで、０．１、０．５、１．０、５．０、１０．０μｇ／ｍＬとなるようエタノール溶液にて適宜、希釈し、標準溶液とする。
試料溶液及び標準溶液それぞれ１０μＬを以下の条件の高速液体クロマトグラフィーに注入し、コレカルシフェロールのピーク面積を求め、標準溶液のコレカルシフェロールのピーク面積から検量線（ｙ＝ｂｘ＋ａ：ａ＝切片、ｂ＝傾き）を求め、下記に示した計算法に従って試料のコレカルシフェロールの含量を求める。
３．測定条件
検出器 ：紫外吸光光度計（測定波長２６５ｎｍ）
カラム ：内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレス管に粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲルを充填したもの（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ−１８ ＵＧ−１２０ 資生堂社製）
カラム温度：４０℃
移動相 ：アセトニトリル
流速 ：１ｍＬ／分
４．計算法
含有量（μｇ／ｇ）＝（試料溶液のコレカルシフェロール面積−切片）／傾き×定容量／試料採取量×純度
3) Stability Test The test compositions were stored for 2 weeks in a thermostatic bath at 60 ° C., it was measured residual ratio of vitamin D 3 compounds.
・ Analysis method of cholecalciferol 1. Precisely weigh about 0.01 g of the choleciferol-containing composition, put it in a container of about 20 mL, add ethanol with a 10 mL volumetric pipette, stir, sonicate for 5 minutes, stir, and collect about 1 mL in an Eppen tube. Centrifuge at 15000 rpm for 5 minutes. The supernatant is used as a sample solution.
2. 2. Adjust the standard cholecalciferol with ethanol to 1 mg / mL. Then, it is appropriately diluted with an ethanol solution so as to be 0.1, 0.5, 1.0, 5.0, 10.0 μg / mL to prepare a standard solution.
10 μL of each of the sample solution and the standard solution was injected into high performance liquid chromatography under the following conditions to determine the peak area of cholecalciferol, and the calibration curve (y = bx + a: a = section, from the peak area of cholecalciferol in the standard solution, b = slope) is determined, and the content of cholecalciferol in the sample is determined according to the calculation method shown below.
3. 3. Measurement conditions Detector: Ultraviolet absorptiometer (measurement wavelength 265 nm)
Column: A stainless steel tube having an inner diameter of 4.6 mm and a length of 250 mm filled with octadecylated silica gel having a particle size of 5 μm (Capcellpak C-18 UG-120 manufactured by Shiseido Co., Ltd.)
Column temperature: 40 ° C
Mobile phase: Acetonitrile Flow rate: 1 mL / min 4. Calculation method Content (μg / g) = (Cholecalciferol area of sample solution-intercept) / slope x constant volume / sampling amount x purity
・２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの分析方法
１．２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（２５（ＯＨ）Ｄ３）含有組成物約０．１ｇを２０ｍＬ程度の容器に精密に量り、１０ｍＬのホールピペットにてエタノールを加え撹拌し、１０分間超音波にかけ撹拌後約１ｍＬをエッペンチューブに移し、１５０００ｒｐｍで５分遠心する。上清を試料溶液とする。
２．２５（ＯＨ）Ｄ３標準品を１ｍｇ／ｍＬとなるようエタノールにて調整後、０．１、０．２、０．５、１．０、２．０μｇ／ｍＬとなるようエタノール溶液にて適宜希釈し、標準溶液とする。試料溶液及び標準溶液それぞれ１０μＬを以下の条件の高速液体クロマトグラフィーに注入し、２５（ＯＨ）Ｄ３のピーク面積を求め標準溶液の２５（ＯＨ）Ｄ３ピーク面積から検量線（ｙ＝ｂｘ＋ａ：ａ＝切片、ｂ＝傾き）を求め、下記に示した計算法に従って試料の２５（ＯＨ）Ｄ３含量を求める。
３．測定条件
検出器 ：紫外吸光光度計（測定波長 ２６５ｎｍ）
カラム ：内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレス管に粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲルを充填したもの（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ−１８ ＵＧ−１２０ 資生堂社製）
カラム温度：４０℃
移動相 ：８０％アセトニトリル水溶液
流速 ：１ｍＬ／分
４．計算法
２５（ＯＨ）Ｄ３含量（μｇ／ｇ）＝（試料溶液の２５（ＯＨ）Ｄ３面積−切片）／傾き×定容量／試料採取量×純度
-Analytical method of 25-hydroxycholecalciferol 1.25-Hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) -containing composition Weighs approximately 0.1 g precisely into a container of about 20 mL and ethanol with a 10 mL volumetric pipette. Add and stir, sonicate for 10 minutes, stir, transfer about 1 mL to an Eppen tube, and centrifuge at 15000 rpm for 5 minutes. The supernatant is used as a sample solution.
2.25 (OH) D 3 standard product is adjusted with ethanol to 1 mg / mL, and then added to an ethanol solution to 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 μg / mL. Dilute appropriately to make a standard solution. Each sample solution and standard solution was injected 10μL high performance liquid chromatography under the following conditions, 25 (OH) 25 (OH )
3. 3. Measurement conditions Detector: Ultraviolet absorptiometer (measurement wavelength 265 nm)
Column: A stainless steel tube having an inner diameter of 4.6 mm and a length of 250 mm filled with octadecylated silica gel having a particle size of 5 μm (Capcellpak C-18 UG-120 manufactured by Shiseido Co., Ltd.)
Column temperature: 40 ° C
Mobile phase: 80% aqueous acetonitrile solution Flow rate: 1 mL / min 4. Calculation method 25 (OH) D 3 content (μg / g) = (25 (OH) D 3 area of sample solution-intercept) / slope x constant volume / sampling amount x purity
（４）結果
各試料の安定性試験結果を表１６及び図３に示す。なお結果は、保存期間経過後の残存率で表している。
(4) Results The stability test results of each sample are shown in Table 16 and FIG. The results are expressed as the residual rate after the storage period has elapsed.
２５（ＯＨ）Ｄ３は、縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン（サンソフトＮｏ.８１８Ｒ）で最も安定化し、次いでモノオレイン酸ペンタグリセリン（サンソフトＡ−１７１Ｅ）、モノグリセライド（エマルジーＭＨ）、モノラウリン酸ソルビタン（Ｌ−３００）により安定化した。しかし、デカオレイン酸デカグリセリン（サンソフトＱ−１７１０Ｓ）、ペンタオレイン酸デカグリセリン（リョートーポリグリエステルＯ−５０Ｄ）には安定化効果が確認できなかった。一方、コレカルシフェロールは、モノラウリン酸ソルビタンで最も安定化し、他はほぼ同様な結果であった。 25 (OH) D 3 is most stabilized in condensed ricinoleic acid pentaglycerol (Sunsoft Nanba818R), then monooleate pentaglycerol (Sunsoft A-171E), monoglyceride (EMALGEE MH), sorbitan monolaurate (L -300) stabilized. However, no stabilizing effect could be confirmed for decaglycerin decaoleate (Sunsoft Q-1710S) and decaglycerin pentaoleate (Ryoto polyglycerate O-50D). On the other hand, choleciferol was the most stable with sorbitan monolaurate, and the other results were almost the same.
＜水溶性セルロース誘導体によるビタミンＤ３類の安定性試験＞
（１）ビタミンＤ３類
下記の表１７に示すビタミンＤ３類を用いて試験をおこなった。
<Stability test of vitamin D 3 compounds according to the water-soluble cellulose derivative>
(1) Vitamin D class 3 The test was conducted using the vitamin D class 3 shown in Table 17 below.
（２）セルロース及びセルロース誘導体
水溶性セルロース誘導体として下記の表１８に示す化合物を試験に用いた。
(2) Cellulose and Cellulose Derivatives The compounds shown in Table 18 below were used in the test as water-soluble cellulose derivatives.
（３）試験方法
・試料の調製
１）コレカルシフェロールの調製
コレカルシフェロール結晶１７５μｇを無水エタノール１７５０ｍｇに溶解させ溶液とした。この溶液１．７５ｇをバイアル瓶に予め秤量してあった各結晶セルロース及びセルロース誘導体１ｇに加え、ボルテックスミキサーを用いて３分間撹拌混合した。その後、エタノールを減圧乾燥して除去し、試験用の組成物を得た。
(3) Test Method / Preparation of Sample 1) Preparation of Cholecalciferol 175 μg of choleciferol crystals were dissolved in 1750 mg of absolute ethanol to prepare a solution. 1.75 g of this solution was added to 1 g of each crystalline cellulose and cellulose derivative previously weighed in a vial, and the mixture was stirred and mixed for 3 minutes using a vortex mixer. Then, ethanol was dried under reduced pressure and removed to obtain a composition for testing.
２）２５（ＯＨ）Ｄ３の調製
（２５（ＯＨ）Ｄ３）１０．２０５ｍｇを無水エタノール５００ｇに溶解させ溶液とした。この溶液２．５ｇをバイアル瓶に予め秤量してあった各結晶セルロース及びセルロース誘導体１ｇに加え、ボルテックスミキサーを用いて３分間撹拌混合した。その後、エタノールを減圧乾燥し試験組成物を得た。
2) was 25 (OH) Preparation of D 3 (25 (OH) D 3) 10.205mg was dissolved in absolute ethanol 500g solution. 2.5 g of this solution was added to 1 g of each crystalline cellulose and cellulose derivative previously weighed in a vial, and the mixture was stirred and mixed for 3 minutes using a vortex mixer. Then, ethanol was dried under reduced pressure to obtain a test composition.
３）安定性試験
上記試験組成物を６０℃の恒温槽で２週間保存し、ビタミンＤ３類の残存率を測定した。
・コレカルシフェロールの分析方法
１．コレカルシフェロール含有試験組成物約０．０１ｇを精密に量り、２０ｍＬ程度の容器に入れ、１０ｍＬのホールピペットにてエタノールを加え撹拌し、５分間超音波にかけ撹拌後約１ｍＬをエッペンチューブに採取し、１５０００ｒｐｍで５分遠心する。上清を試料溶液とする。
２．コレカルシフェロール標準品を１ｍｇ／ｍＬとなるようエタノールにて調整後、０．１、０．５、１．０、５．０、１０．０μｇ／ｍＬとなるようエタノール溶液にて適宜、希釈し、標準溶液とする。
試料溶液及び標準溶液それぞれ１０μＬを以下の条件の高速液体クロマトグラフィーに注入し、コレカルシフェロールのピーク面積を求め、標準溶液のコレカルシフェロールのピーク面積から検量線（ｙ＝ｂｘ＋ａ：ａ＝切片、ｂ＝傾き）を求め、下記に示した計算法に従って試料のコレカルシフェロールの含量を求める。
３．測定条件
検出器 ：紫外吸光光度計（測定波長２６５ｎｍ）
カラム ：内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレス管に粒径５μｍのオクタデル化シリカゲルを充填したもの（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ−１８ ＵＧ−１２０ 資生堂社製）
カラム温度：４０℃
移動相 ：アセトニトリル
流速 ：１ｍＬ／分
４．計算法
含有量（μｇ／ｇ）＝（試料溶液のコレカルシフェロール面積−切片）／傾き×定容量／試料採取量×純度
3) Stability Test The test compositions were stored for 2 weeks in a thermostatic bath at 60 ° C., it was measured residual ratio of vitamin D 3 compounds.
・ Analysis method of cholecalciferol 1. Precisely weigh about 0.01 g of the test composition containing choleciferol, put it in a container of about 20 mL, add ethanol with a 10 mL volumetric pipette, stir, apply ultrasonic waves for 5 minutes, and collect about 1 mL in an Eppen tube. , Centrifuge at 15000 rpm for 5 minutes. The supernatant is used as a sample solution.
2. 2. After adjusting the standard cholecalciferol with ethanol to 1 mg / mL, dilute it appropriately with an ethanol solution to 0.1, 0.5, 1.0, 5.0, 10.0 μg / mL. , Standard solution.
10 μL of each of the sample solution and the standard solution was injected into high performance liquid chromatography under the following conditions to determine the peak area of cholecalciferol, and the calibration curve (y = bx + a: a = section, from the peak area of cholecalciferol in the standard solution, b = slope) is determined, and the content of cholecalciferol in the sample is determined according to the calculation method shown below.
3. 3. Measurement conditions Detector: Ultraviolet absorptiometer (measurement wavelength 265 nm)
Column: A stainless steel tube with an inner diameter of 4.6 mm and a length of 250 mm filled with octadelized silica gel having a particle size of 5 μm (Capcellpak C-18 UG-120 manufactured by Shiseido).
Column temperature: 40 ° C
Mobile phase: Acetonitrile Flow rate: 1 mL / min 4. Calculation method Content (μg / g) = (Cholecalciferol area of sample solution-intercept) / slope x constant volume / sampling amount x purity
・２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの分析方法
１．２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（２５（ＯＨ）Ｄ３）含有試験組成物約０．１ｇを２０ｍＬ程度の容器に精密に量り、１０ｍＬのホールピペットにてエタノールを加え撹拌し、１０分間超音波にかけ撹拌後約１ｍＬをエッペンチューブに移し、１５０００ｒｐｍで５分遠心する。上清を試料溶液とする。
２．２５（ＯＨ）Ｄ３標準品を１ｍｇ／ｍＬとなるようエタノールにて調整後、０．１、０．２、０．５、１．０、２．０μｇ／ｍＬとなるようエタノール溶液にて適宜希釈し、標準溶液とする。試料溶液及び標準溶液それぞれ１０μＬを以下の条件の高速液体クロマトグラフィーに注入し、２５（ＯＨ）Ｄ３のピーク面積を求め標準溶液の２５（ＯＨ）Ｄ３のピーク面積から検量線（ｙ＝ｂｘ＋ａ：ａ＝切片、ｂ＝傾き）を求め、下記に示した計算法に従って試料の２５（ＯＨ）Ｄ３含量を求める。
３．測定条件
検出器 ：紫外吸光光度計（測定波長２６５ｎｍ）
カラム ：内径４．６ｍｍ、長さ２５０ｍｍのステンレス管に粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲルを充填したもの（Ｃａｐｃｅｌｌｐａｋ Ｃ−１８ ＵＧ−１２０ 資生堂社製）
カラム温度：４０℃
移動相 ：８０％アセトニトリル水溶液
流速 ：１ｍＬ／分
４．計算法
２５（ＯＨ）Ｄ３含量（μｇ／ｇ）＝（試料溶液の２５（ＯＨ）Ｄ３面積−切片）／傾き×定容量／試料採取量×純度
-Analytical method of 25-hydroxycholecalciferol 1.25-Hydroxycholecalciferol (25 (OH) D 3 ) -containing test composition Weigh accurately about 0.1 g in a container of about 20 mL and use a 10 mL volumetric pipette. Add ethanol, stir, sonicate for 10 minutes, stir, transfer about 1 mL to an Eppen tube, and centrifuge at 15,000 rpm for 5 minutes. The supernatant is used as a sample solution.
The 2.25 (OH) D 3 standard adjusted with ethanol to a 1 mg / mL, in an ethanol solution so as to be 0.1,0.2,0.5,1.0,2.0μg / mL Dilute appropriately to make a standard solution. Each sample solution and standard solution was injected 10μL high performance liquid chromatography under the following conditions, 25 (OH) 25 (OH ) calibration curve from the peak area of D 3 standard solutions The peak area of D 3 (y = bx + a : A = section, b = slope), and the 25 (OH) D 3 content of the sample is determined according to the calculation method shown below.
3. 3. Measurement conditions Detector: Ultraviolet absorptiometer (measurement wavelength 265 nm)
Column: A stainless steel tube having an inner diameter of 4.6 mm and a length of 250 mm filled with octadecylated silica gel having a particle size of 5 μm (Capcellpak C-18 UG-120 manufactured by Shiseido Co., Ltd.)
Column temperature: 40 ° C
Mobile phase: 80% aqueous acetonitrile solution Flow rate: 1 mL / min 4. Calculation method 25 (OH) D 3 content (μg / g) = (25 (OH) D 3 area of sample solution-intercept) / slope x constant volume / sampling amount x purity
（４）結果
各試料の安定性試験結果を表１９及び図４に示す。なお結果は、保存期間経過後の残存率で表している。
(4) Results The stability test results of each sample are shown in Table 19 and FIG. The results are expressed as the residual rate after the storage period has elapsed.
２５（ＯＨ）Ｄ３は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びメチルセルロースによって安定化することが確認できた。一方、コレカルシフェロールはヒドロキシプロピルセルロースで最も安定化し、メチルセルロースでは安定化しなかった。また結晶セルロースは、ビタミンＤ３類の安定化には寄与しなかった。 It was confirmed that 25 (OH) D 3 was stabilized by hydroxypropylmethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose and methyl cellulose. On the other hand, choleciferol was most stabilized with hydroxypropyl cellulose, but not with methyl cellulose. The crystalline cellulose did not contribute to the stabilization of vitamin D 3 compounds.
前述の結果を踏まえ、以下に、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを有効成分とした安定な上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口組成物の実処方例を示す。
１．２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物の調製（前述した安定性試験で調製したものと同一組成。これを基本処方（ａ、ｂ）に配合して製剤化する）
[２５（ＯＨ）Ｄ３]
１．０２０５ｇを無水エタノール５０ｋｇに溶解させ溶液とした。この溶液２５０ｇを量りとり、下記に示す成分Ａ〜Ｉのいずれか１００ｇを加え、撹拌混合した後、乾燥して２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物約１００ｇを得た。
尚、以下の説明中、２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物とするために添加した成分がＡの場合、得られた２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物のことを「２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物Ａ」とあらわす。
成分Ａ；酵素分解大豆レシチン（理研ビタミン(株)製、レシマールＥＬ）
成分Ｂ；ライスレシチンオイル（築野食品工業(株)製、ライスレシチン）
成分Ｃ；モノラウリン酸ソルビタン（理研ビタミン(株)製、Ｌ−３００）
成分Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン（太陽化学(株)製、サンソフトＮｏ．８１８Ｒ）
成分Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン（太陽化学(株)製、サンソフトＡ−１７１Ｅ）
成分Ｆ；モノグリセライド（理研ビタミン(株)製、エマルジーＭＨ）
成分Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース（信越化学工業(株)製、メトローズＮＥ−４０００）
成分Ｈ；ヒドロキシプロピルセルロース（日本曹達(株)製、セルニーＳＳＬ）
成分Ｉ；メチルセルロース（信越化学工業(株)製、ＭＣＥ−４００）
Based on the above results, an actual formulation example of an oral composition containing 25-hydroxycholecalciferol as an active ingredient for stable prevention of upper respiratory tract infection or alleviation of upper respiratory tract infection symptoms is shown below.
Preparation of 1.25 (OH) D 3 -containing composition (same composition as that prepared in the stability test described above. This is blended with the basic formulation (a, b) to formulate)
[25 (OH) D 3 ]
1.0205 g was dissolved in 50 kg of absolute ethanol to prepare a solution. The solution 250g of were weighed, added either 100g of component A~I shown below, followed by stirring and mixing, and dried to give 25 (OH) D 3 containing composition of about 100g.
In the following description, when the component added to prepare the 25 (OH) D 3 containing composition is A, the obtained 25 (OH) D 3 containing composition is referred to as “25 (OH) D 3”. Represented as "containing composition A".
Ingredient A: Enzymatically decomposed soybean lecithin (manufactured by Riken Vitamin Co., Ltd., Recimal EL)
Ingredient B: Rice lecithin oil (manufactured by Tsukino Food Industry Co., Ltd., rice lecithin)
Ingredient C: Sorbitan monolaurate (manufactured by Riken Vitamin Co., Ltd., L-300)
Component D; Condensed pentaglycerin ricinoleate (manufactured by Taiyo Kagaku Co., Ltd., Sunsoft No. 818R)
Ingredient E; pentaglycerin monooleate (manufactured by Taiyo Kagaku Co., Ltd., Sunsoft A-171E)
Ingredient F; Monoglyceride (manufactured by Riken Vitamin Co., Ltd., Emulgie MH)
Ingredient G; Hydroxypropyl Methyl Cellulose (manufactured by Shin-Etsu Chemical Co., Ltd., Metrose NE-4000)
Ingredient H: Hydroxypropyl cellulose (manufactured by Nippon Soda Co., Ltd., Selney SSL)
Ingredient I; Methyl cellulose (manufactured by Shin-Etsu Chemical Co., Ltd., MCE-400)
２．錠剤の実処方例
錠剤の基本処方ａに、２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン、Ｆ；モノグリセライド、Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｉ；メチルセルロースのいずれか）を５７．１５質量％加えて粉体を調製した。得られた粉体を、直径７ｍｍ平型隅角杵を使用し、１錠当たりの重量を１００ｍｇに設定して打錠を行った。
[基本処方ａ] 質量％
１．２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉのいずれか） ５７．１５
２．結晶セルロース ４２．３５
３．ステアリン酸マグネシウム ０．５
2. 2. Example of actual tablet formulation In the basic tablet formulation a, a composition containing 25 (OH) D 3 (D; condensed pentaglycerin lysinoleate, E; pentaglycerin monooleate, F; monoglyceride, G; hydroxypropyl methylcellulose, I; (Any of methylcellulose) was added in an amount of 57.15% by mass to prepare a powder. The obtained powder was tableted using a flat angle punch with a diameter of 7 mm and the weight per tablet was set to 100 mg.
[Basic prescription a] Mass%
1.25 (OH) D 3 containing composition (any of D, E, F, G, I) 57.15
2. 2. Crystalline cellulose 42.35
3. 3. Magnesium stearate 0.5
２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン、Ｆ；モノグリセライド、Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｉ；メチルセルロース）のいずれかを含む本錠剤１錠は、２５（ＯＨ）Ｄ３を約１０μｇ含有する。そして本錠剤中の２５（ＯＨ）Ｄ３は１年経過後も８０％以上を維持した。２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの血中濃度が３０ｎｇ／ｍＬに満たないヒトが本発明の錠剤を１日に１〜２錠摂取することで、血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持することができ、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和作用を発揮し非常に有用であった。 One tablet containing any of the 25 (OH) D 3- containing composition (D; pentaglycerin ricinoleate, E; pentaglycerin monooleate, F; monoglyceride, G; hydroxypropylmethylcellulose, I; methylcellulose) , 25 (OH) D 3 is contained in an amount of about 10 μg. The 25 (OH) D 3 in this tablet was maintained at 80% or more even after 1 year. A human having a blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol of less than 30 ng / mL can take 1 to 2 tablets of the present invention daily to increase the blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol to 30 to 50 ng. It was able to be maintained at / mL, and was very useful because it exerted an effect of preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections.
３．ハードカプセルの実処方例
ハードカプセル充填用粉体の基本処方ｂに、２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ａ；酵素分解大豆レシチン、Ｂ；ライスレシチンオイル、Ｃ；モノラウリン酸ソルビタン、Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン、Ｆ；モノグリセライド、Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｈ；ヒドロキシプロピルセルロース、Ｉ；メチルセルロースのいずれか）を５７．１５質量％加えて粉体を調製した。得られた粉体を、３号カプセルを使用して、１カプセル当たり１００ｍｇの粉体を充填した。
[基本処方ｂ] 質量％
１．２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉのいずれか） ５７．１５
２．乳糖 ２０
３．結晶セルロース ２２．３５
４．ステアリン酸マグネシウム ０．５
3. 3. Example of actual formulation of hard capsules A composition containing 25 (OH) D 3 (A; enzymatically decomposed soy lecithin, B; rice lecithin oil, C; sorbitan monolaurate, D; condensed ricinoleic acid) in the basic formulation b of powder for filling hard capsules. Pentaglycerin, E; pentaglycerin monooleate, F; monoglyceride, G; hydroxypropylmethylcellulose, H; hydroxypropylcellulose, I; any of methylcellulose) was added in an amount of 57.15% by mass to prepare a powder. The obtained powder was filled with 100 mg of powder per capsule using No. 3 capsule.
[Basic prescription b] Mass%
1.25 (OH) D 3 containing composition (any of A, B, C, D, E, F, G, H, I) 57.15
2. 2.
3. 3. Crystalline cellulose 22.35
4. Magnesium stearate 0.5
２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ａ；酵素分解大豆レシチン、Ｂ；ライスレシチンオイル、Ｃ；モノラウリン酸ソルビタン、Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン、Ｆ；モノグリセライド、Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｈ；ヒドロキシプロピルセルロース、Ｉ；メチルセルロース）のいずれかを含む本ハードカプセル１錠は、２５（ＯＨ）Ｄ３を約１０μｇ含有する。そして本ハードカプセル中の２５（ＯＨ）Ｄ３は１年経過後も８０％以上を維持した。２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの血中濃度が３０ｎｇ／ｍＬに満たないヒトが本発明のハードカプセルを１日に１〜２錠摂取することで、血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持することができ、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和作用を発揮し非常に有用であった。 25 (OH) D 3 Containing Composition (A; Enzymatically Degraded Soy Lecithin, B; Rice Lecithin Oil, C; Sorbitane Monolaurate, D; Condensed Pentaglycerin Lysinoleate, E; Pentaglycerin Monooleate, F; Monoglyceride, G ; hydroxypropylmethylcellulose, H; hydroxypropylcellulose, I; methylcellulose) present hard capsules 1 tablet containing either is about 10μg containing 25 (OH) D 3. And 25 (OH) D 3 in this hard capsule maintained 80% or more even after 1 year. A human having a blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol of less than 30 ng / mL can take 1 to 2 tablets of the hard capsule of the present invention daily to increase the blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol to 30 to 50 ng. It was able to be maintained at / mL, and was very useful because it exerted an effect of preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections.
４．軟カプセルの実処方例
まず軟カプセルを調製し、次に前記した基本処方ｂに２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ａ；酵素分解大豆レシチン、Ｂ；ライスレシチンオイル、Ｃ；モノラウリン酸ソルビタン、Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン、Ｆ；モノグリセライド、Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｈ；ヒドロキシプロピルセルロース、Ｉ；メチルセルロースのいずれか）を５７．１５質量％加えた粉体を調製し、１軟カプセル当たり１００ｍｇとなるように充填した。
（軟カプセル処方） 質量％
１．ゼラチン ７３．５
２．グリセリン １４．５
３．Ｄ−ソルビトール（７０％） １２
4. Preparing an actual Formulation Example First soft capsule of soft capsules, the next was the basic formulation b 25 (OH) D 3 containing composition (A; enzymatic degradation soybean lecithin, B; rice lecithin oil, C; sorbitan monolaurate, D; Pentaglycerin condensed ricinoleate, E; Pentaglycerin monooleate, F; Monoglyceride, G; Hydroxypropylmethylcellulose, H; Hydroxypropylcellulose, I; Any of methylcellulose) was added in an amount of 57.15% by mass. It was prepared and filled to 100 mg per soft capsule.
(Soft capsule prescription) Mass%
1. 1. Gelatin 73.5
2. 2. Glycerin 14.5
3. 3. D-sorbitol (70%) 12
２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（Ａ；酵素分解大豆レシチン、Ｂ；ライスレシチンオイル、Ｃ；モノラウリン酸ソルビタン、Ｄ；縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、Ｅ；モノオレイン酸ペンタグリセリン、Ｆ；モノグリセライド、Ｇ；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｈ；ヒドロキシプロピルセルロース、Ｉ；メチルセルロース）のいずれかを含む本ソフトカプセル１錠は、２５（ＯＨ）Ｄ３を約１０μｇ含有する。そして本ソフトカプセル中の２５（ＯＨ）Ｄ３は１年経過後も８０％以上を維持した。２５−ヒドロキシコレカルシフェロールの血中濃度が３０ｎｇ／ｍＬに満たないヒトが本発明のソフトカプセルを１日に１〜２錠摂取することで、血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持することができ、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和作用を発揮し非常に有用であった。 25 (OH) D 3 Containing Composition (A; Enzymatically Degraded Soy Lecithin, B; Rice Lecithin Oil, C; Sorbitane Monolaurate, D; Condensed Pentaglycerin Lysinoleate, E; Pentaglycerin Monooleate, F; Monoglyceride, G ; hydroxypropylmethylcellulose, H; hydroxypropylcellulose, I; methylcellulose) present soft capsule 1 tablet containing either is about 10μg containing 25 (OH) D 3. And 25 (OH) D 3 in this soft capsule maintained 80% or more even after 1 year. A human having a blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol of less than 30 ng / mL can increase the blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol by 30 to 50 ng by ingesting 1 to 2 tablets of the soft capsule of the present invention per day. It was able to be maintained at / mL, and was very useful because it exerted an effect of preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections.
一方、２５（ＯＨ）Ｄ３の安定化処理を施していないハードカプセル製剤[２５（ＯＨ）Ｄ３含有組成物（添加成分；結晶セルロース）をハードカプセル充填用粉体の基本処方ｂに５７．１５質量％加えて粉体を調製し、得られた粉体を、３号カプセルを使用して１カプセル当たり１００ｍｇの粉体を充填したもの]は、アルミ袋に３０粒入れてシリカゲルを１グラム同梱し２５℃６０％ＲＴで保管したときの１年後の２５（ＯＨ）Ｄ３含有量は初期値（１００）から７３％にまで低下しており、安定な製剤として市場供給できないものであった。 On the other hand, 25 (OH) hard capsule preparation not subjected to stabilizing treatment of D 3 [25 (OH) D 3 containing composition; 57.15 mass (additive component crystalline cellulose) to the basic formulation b hard capsule filling powder % To prepare powder, and the obtained powder is filled with 100 mg of powder per capsule using No. 3 capsules], put 30 grains in an aluminum bag and include 1 g of silica gel. The 25 (OH) D 3 content after 1 year when stored at 25 ° C. and 60% RT decreased from the initial value (100) to 73%, and could not be supplied to the market as a stable preparation. ..
以上示したとおり、本発明により、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを１日当たり１０μｇ投与することができる、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口組成物が提供できた。この組成物は、日常的に摂取することで血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持することができた。
また、２５−ヒドロキシコレカルシフェロールを、酵素分解大豆レシチン又はライスレシチンオイルから選ばれる１以上のレシチン、縮合リシノレイン酸ペンタグリセリン、モノオレイン酸ペンタグリセリン、モノグリセリン脂肪酸及びモノラウリン酸ソルビタンから選ばれる１以上の界面活性剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース及びメチルセルロースから選択される１以上のセルロース誘導体、のいずれか或いは複数を組み合わせて調製することで２５−ヒドロキシコレカルシフェロール安定化組成物とすることができ、そのまま散剤や顆粒剤にしたり、これを含有する錠剤、ソフトカプセル製剤、ハードカプセル製剤にしたりすることができた。これらの製剤は、血中の２５−ヒドロキシコレカルシフェロール濃度を３０〜５０ｎｇ／ｍＬに維持するために組成物中に含有される２５−ヒドロキシコレカルシフェロール（ビタミンＤ３代謝物）が室温保管１年後でも８０％を下回らないように安定化された、上気道感染症の予防または上気道感染症状緩和用の経口用組成物として提供できた。
As shown above, according to the present invention, it is possible to provide an oral composition for preventing upper respiratory tract infection or alleviating upper respiratory tract infection symptoms, which can administer 10 μg of 25-hydroxycholecalciferol per day. This composition was able to maintain a blood concentration of 25-hydroxycholecalciferol at 30-50 ng / mL by daily ingestion.
In addition, 25-hydroxycholecalciferol is added to one or more lecithin selected from enzymatically decomposed soy lecithin or rice lecithin oil, one or more selected from condensed pentaglycerin ricinoleate, pentaglycerin monooleate, monoglycerin fatty acid and sorbitan monolaurate. A 25-hydroxycholecalciferol stabilizing composition can be prepared by preparing any or a combination of one or more of the surfactants, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose and one or more cellulose derivatives selected from methylcellulose. It was possible to make powders and granules as they were, or to make tablets, soft capsules, and hard capsules containing them. These preparations are contained in the composition in order to maintain the 25-hydroxycholecalciferol levels in the blood to 30~50ng / mL 25- hydroxycholecalciferol (vitamin D 3 metabolite) is stored at room temperature 1 It could be provided as an oral composition for preventing upper respiratory tract infections or alleviating symptoms of upper respiratory tract infections, which was stabilized so as not to fall below 80% even after years.
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2017027879A JP6829101B2 (en) | 2017-02-17 | 2017-02-17 | Oral composition for prevention of upper respiratory tract infection or relief of upper respiratory tract infection symptoms |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2017027879A JP6829101B2 (en) | 2017-02-17 | 2017-02-17 | Oral composition for prevention of upper respiratory tract infection or relief of upper respiratory tract infection symptoms |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2018131423A JP2018131423A (en) | 2018-08-23 |
| JP6829101B2 true JP6829101B2 (en) | 2021-02-10 |
Family
ID=63249199
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2017027879A Active JP6829101B2 (en) | 2017-02-17 | 2017-02-17 | Oral composition for prevention of upper respiratory tract infection or relief of upper respiratory tract infection symptoms |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP6829101B2 (en) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0640921A (en) * | 1992-01-10 | 1994-02-15 | Teijin Ltd | Activated-form vitamin d3 composition |
| HUE029572T2 (en) * | 2006-02-03 | 2017-03-28 | Opko Renal Llc | Treating vitamin d insufficiency and deficiency with 25-hydroxyvitamin d2 and 25-hydroxyvitamin d3 |
| JP5313343B2 (en) * | 2009-05-22 | 2013-10-09 | 持田製薬株式会社 | Self-emulsifying composition of ω3 fatty acid |
| JP2015122984A (en) * | 2013-12-26 | 2015-07-06 | 花王株式会社 | Pet food |
-
2017
- 2017-02-17 JP JP2017027879A patent/JP6829101B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2018131423A (en) | 2018-08-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10357501B2 (en) | Treating conditions associated with increased eotaxin with 25-hydroxyvitamin D3 | |
| JP5563296B2 (en) | Methods for treating and preventing secondary hyperparathyroidism | |
| JPH07501343A (en) | Oral 1α-hydroxy previtamin D | |
| EA019832B1 (en) | Composition and method for binding acetaldehyde in stomach | |
| EP1938814A1 (en) | Pharmaceutical for protection of motor nerve in patient with amyotrophic lateral sclerosis | |
| EA015171B1 (en) | Treatment of chronic kidney disease (ckd) subjects using lanthanum compounds | |
| JP6829101B2 (en) | Oral composition for prevention of upper respiratory tract infection or relief of upper respiratory tract infection symptoms | |
| US9814736B2 (en) | Use of 2-methylene-19-nor-(20S)-1α,25-dihydroxyvitamin D3 and calcimimetics to treat secondary hyperparathyroidism | |
| Chitra | Diagnosis, screening and treatment of osteoporosis–a review | |
| US11590148B2 (en) | Use of calcifediol in bariatric surgery patients | |
| RU2796676C1 (en) | Water-soluble tablets of colecalciferol and method for their production | |
| US10105375B2 (en) | Combination of low dose 2-methylene-19-nor-(20S)1α, 25-dihydroxyvitamin D3 and calcimimetics to treat secondary hyperparathyroidism | |
| WO2022124961A1 (en) | A composition comprising a vitamin d and acetylsalicylic acid. | |
| Shimada et al. | Prolonged steroid therapy effectively treats long COVID-19 pneumonia | |
| JP6641626B2 (en) | Antacid pharmaceutical composition | |
| WO2021019185A1 (en) | Compositions comprising a mixture of vitamins and minerals in the form of a combination of a gastro-soluble oral form and a gastro-resistant oral form, and use thereof | |
| WO2019225653A1 (en) | Gip elevation inhibitor | |
| RU2561583C2 (en) | Pharmaceutical composition for treating and/or preventing obesity related disorders, and method of treating and/or preventing obesity related disorders | |
| EP4326279A1 (en) | Universal dosage regime of 25-hydroxy vitamin d3 | |
| WO2022129004A1 (en) | Coated statin tablet comprising vitamin e acetate powder | |
| TW202203936A (en) | Activating endogenous antimicrobials to treat sars-cov-2 infection | |
| TW201733572A (en) | Nutraceutical combination for prevention and treatment of type 2 diabetes | |
| Abd El Mejid et al. | Effect of Calcium, Vitamin D and Chia Seeds on Rats Suffering from Osteoporosis | |
| CN109152805A (en) | For treating and preventing the composition of rheumatoid arthritis | |
| JP2007131643A (en) | Medicament for suppressing/mitigating symptom of allergic disease |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190925 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200818 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20201012 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201012 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210105 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20210121 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6829101 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |