JP6671407B2 - 試料支持体用の保持装置および試料支持体を導入するかつ導出する方法 - Google Patents
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Description
凍結固定は、電子顕微鏡において頻繁に使用される試料準備法である。この方法では、水を含有する試料が、極めて迅速に−150℃よりも低い温度へと凍結される(凍結固定)。つまり、試料は、氷晶の生成を回避するために極めて急速に冷却される。凍結固定は、構造生物学的な調査に特に適していることが分かった。調査されるべき対象物、たとえば細胞、酵素、ウイルスまたは脂質層が、これにより薄いガラス化された氷層に包埋される。凍結固定の大きな利点は、生物学的な構造をその自然な状態で保持できることにある。とりわけ、生物学的な過程を、任意の時点で凍結固定により停止し、このガラス化された状態で、たとえばクライオ電子顕微鏡で、または相応の試料冷却を伴う光学顕微鏡でも検査することができる。この場合、クライオ光学顕微鏡は、とりわけ試料における関心領域を見つけ出すのに用いられる。この領域は、予め把握され、続いてクライオ電子顕微鏡においてより詳しく観察される。これに適した光学顕微鏡は、たとえば国際公開第2016/016000号において公知である。
本発明によれば、独立請求項の特徴を有する、試料支持体用の保持装置および試料支持体を導入するまたは導出する方法が提案される。好適な態様は、従属請求項および以下の記述の対象である。
Claims (15)
- クライオ顕微鏡に使用される、試料支持体(200)用の保持装置(100)において、
少なくとも1つの試料支持体収容部(155)を有する本体(110)であって、該試料支持体収容部(155)は、少なくとも1つの試料支持体載置面(150)を有し、該試料支持体載置面(150)上に少なくとも1つの試料支持体(200)が載置可能である、本体(110)と、
少なくとも1つの第1の試料支持体保持手段(121)と、
前記試料支持体(200)に力を加えて前記試料支持体(200)を前記第1の試料支持体保持手段(121)に押し付けるように調整されている、少なくとも1つの第2の試料支持体保持手段(131)と、
を備え、
少なくとも1つの前記第1の試料支持体保持手段(121)は、少なくとも1つの第1の切欠き(125)を有し、該第1の切欠き(125)に、前記試料支持体(200)が部分的に導入可能である、保持装置(100)。 - クライオ顕微鏡に使用される、試料支持体(200)用の保持装置(100)において、
少なくとも1つの試料支持体収容部(155)を有する本体(110)であって、該試料支持体収容部(155)は、少なくとも1つの試料支持体載置面(150)を有し、該試料支持体載置面(150)上に少なくとも1つの試料支持体(200)が載置可能である、本体(110)と、
少なくとも1つの第1の試料支持体保持手段(121)と、
前記試料支持体(200)に力を加えて前記試料支持体(200)を前記第1の試料支持体保持手段(121)に押し付けるように調整されている、少なくとも1つの第2の試料支持体保持手段(131)と、
を備え、
前記本体(110)に、少なくとも1つの第2の切欠き(141)が設けられており、該第2の切欠き(141)は、把持工具(300)を用いて、前記試料支持体載置面(150)に載置可能な試料支持体(200)を把持することが可能に構成されており、
少なくとも1つの前記第1の試料支持体保持手段(121)は、少なくとも2つの部分(121a,121b)を有し、該部分(121a,121b)は、前記第2の切欠き(141)の側方で前記本体(110)に形成されている、保持装置(100)。 - 前記第1の試料支持体保持手段(121)は、前記試料支持体収容部の内壁(122)の少なくとも一部により形成されている、請求項1または2記載の保持装置(100)。
- 少なくとも1つの前記第1の試料支持体保持手段(121)は、少なくとも1つの突出部(123)を有し、該突出部(123)の内面は、少なくとも部分的に試料支持体当接面(122a)として用いられる、請求項1から3までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 少なくとも1つの前記第2の試料支持体保持手段(131)は、ばねを有する、請求項1から4までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 前記保持装置(100)は、前記試料支持体載置面(150)に対して垂直の方向に、載置されている試料支持体(200)へ向けて、最大で該試料支持体(200)の厚さ(d)に相当する寸法だけ延在するように構成されている、請求項1から5までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 少なくとも1つの前記試料支持体収容部(155)は、前記試料支持体(200)が前記試料支持体載置面(150)に載置されるとき、該試料支持体(200)が該試料支持体載置面(150)に向いた側の面の少なくとも10%で載置されるように、構成されている、かつ/または少なくとも1つの前記試料支持体収容部(155)は、前記試料支持体(200)のフレーム(210)が前記試料支持体載置面(150)に載置されるとき、該フレーム(210)が該試料支持体載置面(150)に向いた側の面の少なくとも20%で載置されるように、構成されている、請求項1から6までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 少なくとも1つの前記第2の試料支持体保持手段(131)は、前記試料支持体(200)を位置決めするとき、少なくとも1つの前記第1の試料支持体保持手段(121)から離れる方向に押し付けられるように、調整されている、請求項1から7までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 環状の試料支持体(200)を用いて使用するように構成されている、請求項1から8までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 少なくとも2つの試料支持体収容部(155)を備える、請求項1から9までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 前記保持装置(100)の最大の寸法は、50mmより小さい、請求項1から10までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 前記保持装置(100)を動かすためのマニピュレータ(430)用の収容部(160)が設けられている、請求項1から11までのいずれか1項記載の保持装置(100)。
- 操作容器(400)と請求項12記載の保持装置(100)とを備えるアッセンブリであって、
前記操作容器(400)は、前記保持装置(100)をその中に固定することができるように構成されており、
マニピュレータ(430)が設けられており、該マニピュレータ(430)に前記保持装置(100)を取り付けることが可能であり、前記マニピュレータ(430)を用いて前記保持装置(100)が移動可能である、アッセンブリ。 - 請求項1から12までのいずれか1項記載の保持装置(100)内へ試料支持体(200)を導入する方法であって、
前記試料支持体(200)を、把持工具(300)を用いて把持し、前記第2の試料支持体保持手段(131)に押し付け、これにより該第2の試料支持体保持手段(131)は、前記第1の試料支持体保持手段(121)から離れる方向に押し付けられ、
続いて前記試料支持体(200)を、試料支持体載置面(150)に載置し、前記第1の試料支持体保持手段(121)に当接するまで移動させる、方法。 - 請求項1から12までのいずれか1項記載の保持装置(100)から試料支持体(200)を導出する方法であって、
前記試料支持体(200)を、把持工具(300)を用いて、前記第2の試料支持体保持手段(131)に押し付けながら前記第1の試料支持体保持手段(121)から離れる方向に動かし、
続いて前記試料支持体(200)を、前記試料支持体載置面(150)から離れる方向に持ち上げて、前記保持装置(100)から導出する、方法。
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