JP6652244B2 - 口腔用組成物 - Google Patents
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Description
オオムギの種子の破砕物25gに精製水500mLを加え、95〜100℃で2時間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮し、凍結乾燥することでオオムギの熱水抽出物2.1gを得た。
オオムギの種子の破砕物25gに50(v/v)%エタノール500mLを加え、常温で5日間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮乾固してオオムギの50%エタノール抽出物を0.9g得た。
オオムギの種子の破砕物100gにエタノール1Lを加え、常温で7日間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮乾固して、オオムギのエタノール抽出物を3.1g得た。
ラフマの葉の乾燥物150gに精製水10Lを加え、95〜100℃で2時間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮し、凍結乾燥することでラフマの熱水抽出物11.5gを得た。
ラフマの葉の乾燥物100gに50(v/v)%エタノール3Lを加え、常温で5日間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮乾固して、ラフマの50%エタノール抽出物を5.5g得た。
ラフマの葉の乾燥物200gにエタノール1Lを加え、常温で7日間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮乾固して、ラフマのエタノール抽出物を8.3g得た。
ジュンサイの若葉の乾燥物2000gに精製水20Lを加え、95〜100℃で2時間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮し、凍結乾燥することでジュンサイの熱水抽出物を35.2g得た。
ジュンサイの若葉の乾燥物1000gに50(v/v)%エタノール8Lを加え、常温で5日間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮乾固して、ジュンサイの50%エタノール抽出物を15.7g得た。
ジュンサイの若葉の乾燥物200gにエタノール1Lを加え、常温で7日間抽出した。ろ液を減圧下で濃縮乾固してジュンサイのエタノール抽出物を2.7g得た。
処方 含有量(%)
1.リン酸水素カルシウム 22.0
2.ラウリル硫酸ナトリウム 1.5
3.トラネキサム酸 0.01
4.βグリチルレチン酸 0.2
5.イソプロピルメチルフェノール 0.1
6.塩化セチルピリジニウム 0.05
7.オオムギの熱水抽出物(製造例1) 0.001
8.ラフマの熱水抽出物(製造例4) 0.001
9.ジュンサイの熱水抽出物(製造例7) 0.001
10.グリセリン 20.0
11.カラギーナン 0.9
12.サッカリンナトリウム 0.001
13.香料 1.0
14.安息香酸ナトリウム 0.5
15.水にて全量を100とする
[製造方法]成分3〜15をよく混合した後、成分1〜2を加えて練和し、脱泡後チューブに充填して練歯磨きを得た。1回に1g、1日3回使用する。
処方例1において、オオムギの熱水抽出物、ラフマの熱水抽出物及びジュンサイの熱水抽出物を全て除き、水にて全量を100としたものを比較例とした。
処方 含有量(%)
1.エタノール 20.0
2.オオムギの50%エタノール抽出物(製造例2) 0.01
3.ラフマの50%エタノール抽出物(製造例5) 0.01
4.ジュンサイの50%エタノール抽出物(製造例8) 0.01
5.グリセリン 10.0
6.サッカリンナトリウム 0.1
7.香料 0.1
8.ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油(60E.O.) 1.5
9.パラオキシ安息香酸エチル 0.1
10.水にて全量を100とする
[製造方法]成分1に成分2〜4を溶解する(組成物A)。次いで成分10に成分5〜9を溶解する(組成物B)。組成物Aと組成物Bをよく混合し、洗口液を得た。1回に10mL、1日3回使用する。
処方 含有量(%)
1.オオムギのエタノール抽出物(製造例3) 0.0001
2.ラフマのエタノール抽出物(製造例6) 0.0001
3.ジュンサイのエタノール抽出物(製造例9) 0.0001
4.マルチトール 22.5
5.アラビアガム 1.5
6.クエン酸 4.0
7.キシリトール 全量が100となる様に加える
8.ショ糖脂肪酸エステル 1.0
9.粉末香料 0.1
[製造方法]成分1〜7を常温下で混合し、顆粒を成形する。得られた顆粒に成分8〜9を加えて打錠し、トローチを得た。1粒2g、1日9粒摂取する。
処方 含有量(%)
1.オオムギの熱水抽出物(製造例1) 0.0001
2.ラフマの熱水抽出物(製造例4) 0.0001
3.ジュンサイの熱水抽出物(製造例7) 0.0001
4.エタノール 15.0
5.グリセリン 10.0
6.クエン酸ナトリウム 0.2
7.安息香酸ナトリウム 0.2
8.ラウリル硫酸ナトリウム 0.2
9.サッカリン 0.05
10.l−メントール 0.05
11.水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜11を混合し、溶解してろ過した後、滅菌容器に充填して、容量6mLのマウススプレーを得た。1回の噴霧量は30mg、1日12回使用する。
処方 含有量(%)
1.オオムギの50%エタノール抽出物(製造例2) 0.005
2.ラフマの50%エタノール抽出物(製造例5) 0.005
3.ジュンサイの50%エタノール抽出物(製造例8) 0.005
4.エリスリトール 60.4
5.マルチトール 全量が100となる様に加える
6.クエン酸 5.0
7.ショ糖脂肪酸エステル 3.0
8.香料 0.1
[製造方法]成分1〜6を混合し、10%の水を結合剤として加え、流動層造粒する。成形した顆粒に成分7及び8を加えて混合し、打錠してタブレットを得た。1粒2g、1日6粒を口腔内で溶解させるように摂取する。
処方 含有量(%)
1.オオムギのエタノール抽出物(製造例3) 0.001
2.ラフマのエタノール抽出物(製造例6) 0.001
3.ジュンサイのエタノール抽出物(製造例9) 0.001
4.ガムベース 全量が100となる様に加える
5.キシリトール 10.0
6.スクラロース 0.01
7.アスパルテーム 0.01
8.香料 1.0
[製造方法]成分1〜8を混合し、混練し、成形してチューインガムを得た。1粒2.2g、1日9粒摂取する。
24wellプレートに、ヒト歯肉線維芽細胞(ScienCell社製)を播種し、製造例1〜9の抽出物を最終濃度が1μg/mLとなるように添加し、培養を行った。また、抽出物の組み合わせを検討するため、オオムギの熱水抽出物(製造例1)、ラフマの熱水抽出物(製造例4)及びジュンサイの熱水抽出物(製造例7)を等量混合し、混合物の最終濃度が1μg/mLとなるように添加する群を設けた。培養後、Cell Counting Kit(DOJIN社製)を用いて細胞生存活性を測定した。抽出物未添加の細胞生存活性をコントロールとし、コントロールを100とした場合の抽出物添加時の細胞生存活性を測定することにより、歯肉線維芽細胞における細胞増殖促進効果を評価した。陽性対象として、一般的に線維芽細胞の増殖促進因子として使用されるbasic Fibroblast Growth Factor(bFGF、Pepro Tech社製)10ng/mLを用い、比較対象とした。
24wellプレートに、ヒト歯肉線維芽細胞(ScienCell社製)を播種し、製造例1〜9の抽出物を最終濃度が1μg/mLとなるように添加し、培養を行った。また、抽出物の組み合わせを検討するため、オオムギの熱水抽出物(製造例1)、ラフマの熱水抽出物(製造例4)及びジュンサイの熱水抽出物(製造例7)を等量混合し、混合物の最終濃度が1μg/mLとなるように添加する群を設けた。培養後、細胞を回収し、結合組織における主要なコラーゲンであるI型コラーゲンと、主要なコラーゲン分解酵素であるMMP1について、遺伝子発現解析を行った。抽出物未添加時のI型コラーゲン及びMMP1の遺伝子発現量をコントロールとし、コントロールを100とした場合の抽出物添加時のI型コラーゲン及びMMP1遺伝子発現量を算出した。陽性対象として、basic Fibroblast Growth Factor(bFGF、Pepro Tech社製)10ng/mLを用い、比較対象とした。尚、遺伝子発現解析に使用したプライマーは次の通りである。
AGGACAAGAGGCATGTCTGGTT(配列番号1)
TTGCAGTGGTAGGTGATGTTCTG(配列番号2)
MMP1用プライマーセット
ATTCTACTGATATCGGGGCTTTGA(配列番号3)
ATGTCCTTGGGGTATCCGTGTAG(配列番号4)
GAPDH用のプライマーセット
TGCACCACCAACTGCTTAGC(配列番号5)
TCTTCTGGGTGGCAGTGATG(配列番号6)
軽度〜中等度歯周病(歯周ポケットの深さ2〜5mm)と診断された被験者50人を対象に、10人ずつ5群に分け、各群の被験者にそれぞれ処方例1〜4又は比較例の練歯磨きを使用させた。歯磨きは1日3回、毎食後に行った。以下の5つの項目について、試験開始前、試験開始1ヶ月後、試験開始3ヶ月後に、歯科医師による評価を行った。
1本の歯における歯周ポケットごとに6箇所(頬側近心、中央、遠心、舌側近心、中央、遠心)にプローブを差し込み(プロービング)、歯肉辺縁からポケット底までの距離を測定した。この測定を全ての歯について行い、プロービングデプスの平均値を被験者毎に算出した。試験開始前のプロービングデプスの各群の被験者の平均値を100%とし、1ヶ月後、3ヶ月後に同様の測定を行い、プロービングデプスの平均値の変化を調べ、結果を表3に示した。
1本の歯における歯周ポケットごとに6箇所(頬側近心、中央、遠心、舌側近心、中央、遠心)にプロービングを行い、セメント−エナメル境からポケット底までの距離を測定した。この測定を全ての歯について行い、アタッチメントレベルの平均値を被験者毎に算出した。試験開始前のアタッチメントレベルの各群の被験者の平均値を100%とし、1ヶ月後、3ヶ月後に同様の測定を行い、アタッチメントレベルの平均値の変化を調べ、結果を表4に示した。
プロービング時に出血箇所を記録しておき、出血箇所の合計数を被験者毎に算出した。試験開始前の出血箇所数の各群の被験者の平均値を100%とし、1ヶ月後、3ヶ月後に同様の測定を行い、プロービング時の出血箇所数の平均値の変化を調べ、結果を表5に示した。
歯周病により歯肉に炎症が起こると組織破壊が生じ、唾液中にTNFαが漏れ出てくる。このため、唾液中のTNFα濃度は、歯肉の炎症状態を反映すると考えられることから、歯周病改善の指標とした。被験者から試験開始前、試験開始1ヶ月後、試験開始3ヶ月後に、5分間に分泌される唾液を流涎法で回収した。唾液中のTNFα濃度は、Human TNFα Elisa Kit(R&D systems社製)を用いて測定した。試験開始前の唾液中TNFα濃度の各群の被験者の平均値を100%とし、1ヶ月後、3ヶ月後に同様の測定を行い、TNFα濃度の変化を調べ、結果を表6に示した。
歯科医師が歯肉の腫脹、発赤、色味について目視にて評価を行い、試験開始前と比較して、試験1ヶ月後と3ヶ月後の状態を総合的に判定した。目視判定は6段階のスコア(0:変化なし、1:わずかに改善、2:やや改善、3:改善、4:明らかに改善、5:顕著に改善)にて数値化し、各群の被験者の平均値を表7に示した。
0:変化なし
1:わずかに改善
2:やや改善
3:改善
4:明らかに改善
5:顕著に改善
Claims (6)
- オオムギ、ラフマ及びジュンサイを含有することを特徴とする口腔用組成物。
- オオムギ、ラフマ及びジュンサイを含有することを特徴とする歯周病予防改善剤。
- オオムギ、ラフマ及びジュンサイを含有することを特徴とする歯周組織再生剤。
- オオムギ、ラフマ及びジュンサイを含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
- オオムギ、ラフマ及びジュンサイを含有することを特徴とするコラーゲン分解抑制剤。
- オオムギ、ラフマ及びジュンサイを、請求項2〜5のいずれか一項記載の剤として含有する食品組成物。
以上
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