JP6641177B2 - Microscope system, microscope system control method and program - Google Patents
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Description
本発明は、顕微鏡システム、顕微鏡システムの制御方法およびプログラムに関する。 The present invention relates to a microscope system, a microscope system control method, and a program.
近年、光学顕微鏡は、病理学的診断の為に、組織切片の病変部の微細な観察を実現する手段として病理医によって利用されている。光学顕微鏡には、低倍率から高倍率の複数の対物レンズを装着し、観察光路上に対物レンズを切換えるレボルバが備えられている。拡大率の異なる各対物レンズは作動距離(ワーキングディスタンス:WD)も異なり、対物レンズを切り換える度に、Z方向にステージを移動させて、切り替えられた対物レンズと観察対象との焦点を合わせる操作が必要となる。 2. Description of the Related Art In recent years, optical microscopes have been used by pathologists as means for realizing fine observation of lesions in tissue sections for pathological diagnosis. The optical microscope is equipped with a plurality of low-magnification to high-magnification objective lenses, and is provided with a revolver for switching the objective lenses on the observation optical path. Each objective lens having a different magnification has a different working distance (working distance: WD). Each time the objective lens is switched, the operation of moving the stage in the Z direction to focus the switched objective lens and the observation target is performed. Required.
特許文献1、2においては、対物レンズと標本との接触を防止して、標本を保護するために、対物レンズを切り換える際にステージと対物レンズとの間隔を対物レンズの作動距離以上にステージを離れる方向に退避させる技術について記載されている。
In
焦点を合わせるための基準マークの光軸方向の高さと、観察対象およびカバーガラスが載せられたスライドガラスの光軸方向の高さは必ずしも同一でない。このため、対物レンズの焦点を基準マークに合わせた後に、スライドガラス上の観察対象を観察する場合、対物レンズの焦点が合わなくなり、観察画像にぼけが発生し得る。このような場合、スライドガラス上の観察対象の領域で、再度、焦点を合わせる操作が必要となり操作性が損なわれる。 The height of the reference mark for focusing in the optical axis direction is not necessarily the same as the height of the slide glass on which the observation target and the cover glass are placed in the optical axis direction. For this reason, when observing the observation target on the slide glass after the focus of the objective lens is adjusted to the reference mark, the focus of the objective lens becomes out of focus, and the observed image may be blurred. In such a case, it is necessary to perform an operation of focusing again on the region to be observed on the slide glass, and the operability is impaired.
特許文献1、2では、接触を防止するためステージを退避する位置に制御する技術について記載されているが、作動距離以上にステージを退避させた後、焦点を再度合わせる操作が必要となるため操作性が損なわれる。特許文献1、2においては、対物レンズが切り換えられたり、対物レンズの焦点を合わせた後に観察領域にステージを移動させた場合であっても、観察光路上に配置されている対物レンズの焦点が合うようにステージの位置制御を行うことは考慮されていない。
上記課題に鑑み、本発明は、観察光路上に配置されている対物レンズの焦点が合うようにステージの位置制御を行うことが可能な顕微鏡システムを提供する。 In view of the above problems, the present invention provides a microscope system capable of controlling the position of a stage such that an objective lens arranged on an observation optical path is focused.
上記の目的を達成するための本発明の一つの態様による顕微鏡システムは、
複数の対物レンズのうちいずれか一つの対物レンズを切り換えて観察光路上に配置するレボルバを備えた顕微鏡本体と、
前記顕微鏡本体に装着され、互いに交差するX軸方向およびY軸方向およびZ軸方向に移動可能に構成され、観察対象のスライドガラスおよび前記スライドガラス上に載置されたカバーガラスが載置されるステージであって、前記X軸方向およびY軸方向を含む面内に、前記面内における前記ステージの位置管理用のスケールと前記面内における前記X軸方向および前記Y軸方向の位置合わせの基準として使用する基準マークとを有するステージと、
前記スケールを読み取るセンサと、
前記センサによる前記スケールの読み取り結果により、前記ステージの前記X軸方向および前記Y軸方向を含む二次元の位置情報を検知する位置検知手段と、
前記複数の対物レンズの焦点を前記基準マークに合わせたときの前記Z軸方向における前記ステージの作動位置情報を取得する位置取得手段と、
前記Z軸方向における前記スライドガラスの対物レンズ側表面から前記カバーガラスの対物レンズ側表面までの距離情報を取得する距離取得手段と、
前記二次元の位置情報に基づいて、前記X軸方向および前記Y軸方向における前記ステージの位置制御を行い、前記作動位置情報および前記距離情報に基づいて前記Z軸方向における前記ステージの位置制御を行う制御手段と、を備えることを特徴とする。
A microscope system according to one aspect of the present invention to achieve the above object,
A microscope body having a revolver that switches any one of the objective lenses and arranges it on the observation optical path,
The slide glass to be observed and the cover glass placed on the slide glass are mounted on the microscope main body and configured to be movable in the X-axis direction, the Y-axis direction, and the Z-axis direction that intersect with each other. a stage, in a plane including the X-axis direction and the Y-axis direction, the X-axis direction and the Y-axis direction of the reference alignment in the plane and the scale for the position control of the stage in the plane A stage having a fiducial mark used as
A sensor for reading the scale,
Position detection means for detecting two-dimensional position information including the X-axis direction and the Y-axis direction of the stage based on a result of reading the scale by the sensor ;
Position acquisition means for acquiring operation position information of the stage in the Z-axis direction when the plurality of objective lenses are focused on the reference mark;
A distance obtaining means for obtaining distance information from the objective lens side surface of the slide glass before Symbol Z-axis direction to the objective lens side surface of the cover glass,
On the basis of the two-dimensional position information, performs position control of the stage in the X-axis direction and the Y-axis direction, the position control of the stage in the Z-axis direction based on the operation position information and the distance information And control means for performing the following.
本発明によれば、観察光路上に配置されている対物レンズの焦点が合うようにステージの位置制御を行うことが可能になる。 According to the present invention, it is possible to control the position of the stage so that the objective lens arranged on the observation optical path is focused.
以下、図面を参照して、本発明の実施形態を例示的に詳しく説明する。ただし、この実施形態に記載されている構成要素はあくまで例示であり、本発明の技術的範囲は、特許請求の範囲によって確定されるのであって、以下の個別の実施形態によって限定されるわけではない。 Hereinafter, embodiments of the present invention will be illustratively described in detail with reference to the drawings. However, the components described in this embodiment are merely examples, and the technical scope of the present invention is determined by the claims, and is not limited by the following individual embodiments. Absent.
本発明の顕微鏡システムは、観察が可能なXYスケールの第3のマークによって焦点を合わせたZ位置を記録するZ位置記録手段と、非観察物に応じてZ軸方向の任意の距離を入力し移行させるシフト手段の情報と、XYスケールのXY座標情報に基づいてZ軸方向の位置を制御する。 The microscope system of the present invention inputs a Z position recording unit that records a Z position focused by a third mark on an XY scale that can be observed, and an arbitrary distance in the Z axis direction according to a non-observed object. The position in the Z-axis direction is controlled based on the information of the shifting means to be shifted and the XY coordinate information of the XY scale.
[位置管理顕微鏡システムの構成]
図1は本実施形態による位置管理顕微鏡システム(以下、顕微鏡システム10)の基本構成を示す図である。顕微鏡システム10は、顕微鏡本体101、ステージ装置50(XYZステージ)、カメラ装着用のアダプタ部300、デジタルカメラ400、制御ユニット500を備える。制御ユニット500は、コントローラ520と表示部530を有する。
[Configuration of position management microscope system]
FIG. 1 is a diagram showing a basic configuration of a position management microscope system (hereinafter, microscope system 10) according to the present embodiment. The
顕微鏡本体101を構成する鏡基121は、顕微鏡の各種構造物を取り付けるための堅牢な本体フレームである。接眼鏡基122は鏡基121に固定され、接眼鏡筒123(本例では双眼)を接続する。接眼鏡筒123には接眼レンズ200が設けられている。光源ボックス124は、透過観察用の光源(たとえば、ハロゲンランプまたはLEDなど)を収納し、鏡基121に取り付けられる。Z摘み125は、基台130をZ軸方向(上下方向:鉛直方向)へ移動させるための摘みである。
The
基台130には、位置管理機能を提供するステージ装置50が載置される。基台130は、Z摘み125の回転に応じて基台130をZ方向に移動する基台移動機構131により鏡基121に装着されている。126は対物レンズであり、光学倍率に応じた複数種類の対物レンズが存在する。電動レボルバ127は、複数種類の対物レンズ3を取り付けられる構造を有し、電動レボルバ127を回転させることにより、観察光路上に所望の対物レンズを顕微鏡による観察のために選択することが出来る。顕微鏡本体101は、複数の対物レンズのうちいずれか一つの対物レンズを切り換えて観察光路上に配置する電動レボルバ127を備える。
The
ステージ装置50は、X方向、Y方向およびZ方向に移動可能なXYZステージを有する。ステージ装置50は、たとえばUSBインタフェースケーブル112によりコントローラ520(制御装置)と接続され、コントローラ520からの移動指示に応じてステージ位置をXYZ方向に移動し、そのステージ位置をコントローラ520に通知する。また、X摘み201、Y摘み202により手動操作によりステージ位置を移動することができる。アダプタ部300は、接眼鏡基122に鏡基マウント128を介してデジタルカメラ400を装着するための装着部として機能する、カメラ装着用のアダプタである。
The
デジタルカメラ400は、アダプタ部300及び鏡基マウント128により、接眼鏡基122と所定の位置関係を保って、着脱可能に顕微鏡本体101に取り付けられる。デジタルカメラ400は、顕微鏡本体101により得られる顕微鏡画像を撮像する。デジタルカメラ400は、エビデンス記録を目的とするもので、例えば、USBインタフェースケーブル111を介してコントローラ520に接続され、コントローラ520からの指示により顕微鏡下の観察像を撮影する。撮影された観察像は、コントローラ520の制御下で表示部530(表示部)に表示される。
The
デジタルカメラ400の撮像機能は、イメージセンサの出力をリアルタイムでモニタに表示するライブビューを行うためのライブ画像撮像機能と、静止画撮像機能を含む。ライブ画像撮像機能は静止画撮像機能よりも低解像度である。また、ライブ画像撮像機能および静止画撮像機能は、撮影された画像(動画、静止画)を所定のインタフェース(本実施形態ではUSBインタフェース)を介して外部装置へ送信することが可能となっている。
The imaging function of the
ステージ装置50のXYステージは、Xステージ55およびYステージ54により構成される二次元の移動機構として機能する。本実施形態では、Yステージ54上にXステージ55が配置された構成を例示的に説明しているが、本発明の趣旨はこの例に限定されるものではなく、この逆の配置順でXYステージを構成してもよい。
The XY stage of the
図2は顕微鏡本体101の概略構成および顕微鏡本体101を制御する制御ユニット500の構成を示す図である。顕微鏡システム10において、顕微鏡本体101の全体構成は図1に示したとりであり、顕微鏡本体101は、ステージ装置50(XYZステージ)、接眼レンズ200、カメラ装着用のアダプタ部300、デジタルカメラ400を有する。制御ユニット500の各制御部(507〜510)における処理はプログラムを実行することにより、後述する各種処理を実行することが可能である。顕微鏡制御部510は表示部530の表示制御を行う表示制御部としても機能する。
FIG. 2 is a diagram illustrating a schematic configuration of the microscope
(顕微鏡光路の説明)
図2に示す撮像光学系の光路600には、アダプタ部300とデジタルカメラ400の装着により、デジタルカメラ400内に配設されたイメージセンサ(不図示)の撮像面に観察像が形成され、デジタルカメラ400による顕微鏡画像の撮像が可能となる。光路をプリズム等で変更することで接眼レンズ200により観察可能となる。
(Explanation of microscope optical path)
In the
(レボルバの説明)
顕微鏡本体101には電動レボルバ127が設けられている。電動レボルバ127には、低倍率から高倍率の複数の対物レンズ3(3a、3b、3c、3d・・・)が装着される。電動レボルバ127は光路600に対して回転自在に設けられ、電動レボルバ127の回転により、対物レンズ3を観察対象の上方に配置することが可能である。
(Explanation of revolver)
The microscope
電動レボルバ127は、例えば、回転式スイングレボルバ等を用いて構成することが可能である。電動レボルバ127の内部には電動レボルバ127の回転位置を検知できるロータリーエンコーダ等で構成されたレボルバ位置検知部501が設けられている。レボルバ制御部507はレボルバ位置検知部501からの情報に基づいて、電動レボルバ127の回転位置、回転方向の情報、観察光路上(光路600)に配置されている対物レンズを識別することが可能である。
The
レボルバ制御部507は、レボルバ位置検知部501の検知結果に基づいて、レボルバドライバ502を介して電動レボルバ127のモータ(不図示)を駆動して、電動レボルバ127の回転駆動を制御する。電動レボルバ127の回転駆動よって、複数の対物レンズのうちいずれか一つの対物レンズが選択的に光路上に切換えられる。接眼レンズ200により選択した対物レンズの倍率で観察対象を観察することができる。
The
(対物レンズの説明)
電動レボルバ127に装着される、複数の対物レンズ3(3a、3b、3c、3d・・・)の作動距離(ワーキングディスタンス:WD)は異なる。各対物レンズの作動距離(WD)に応じたZ方向の焦点位置に合わせるようにステージ装置50のZステージ57の位置が制御される。
(Description of objective lens)
The working distances (working distances: WD) of the plurality of objective lenses 3 (3a, 3b, 3c, 3d...) Mounted on the
顕微鏡制御部510は、レボルバ制御部507、XYステージ制御部508、Zステージ制御部509およびZ位置記録部511の動作を全体的に管理する。顕微鏡制御部510の制御の下に、XYステージ制御部508、Zステージ制御部509は、ステージ装置50のXY平面内の位置制御およびZ方向(光軸方向)の位置制御を行う。また、顕微鏡制御部510の制御の下に、レボルバ制御部507は電動レボルバ127を回転させて、対物レンズ3を観察対象の上方に配置する。
The
XYステージ制御部508の制御によりXステージ55、Yステージ54が移動し、レボルバ制御部507の制御により電動レボルバ127が回転して、後述する図3のXYスケール8のXYクロスハッチマーク8a面の上方に対物レンズが配置される。Zステージ制御部509はZステージ57を制御して、対物レンズの焦点を図3のXYスケール8のXYクロスハッチマーク8a面に合わせる。このときのZステージ57のZ軸方向の位置情報が、Z位置記録部511に記録される。各対物レンズに関するZ軸方向の位置情報がZ位置記録部511に記録される。
The
焦点合わせについては、デジタルカメラ400を用いた画像処理の結果より、顕微鏡制御部510は最適な焦点位置(Z軸方向の位置)を決定することが可能である。本実施形態では顕微鏡の誤差を低減する目的でデジタル画像処理の結果を用いるが、正確な対物レンズの作動距離(WD)、その他のレンズ特性の情報が明らかな場合、顕微鏡制御部510は、操作入力部515を介して対物レンズの作動距離(WD)やレンズ特性の情報を外部装置(システム、データベース)から取得することも可能である。
Regarding focusing, the
図4は、Z位置記録部511が記録している、レボルバ位置(R1〜R6)と各レボルバ位置に装着されている各対物レンズ(3a〜3f)の倍率、作動距離(WD)、Z軸方向の位置を対応付けたルックアップテーブルである。レボルバ位置R1〜R6に対して、対物レンズ3a〜3fの作動距離(WD)と、測定されたZ軸方向の位置情報Za〜Zfが対応付けられている。
FIG. 4 shows the revolver positions (R1 to R6) recorded by the Z
例えば、レボルバ位置R1に装着されている対物レンズ3aの拡大率は100倍であり、作動距離(WD)は、例えば、0.17mmである。対物レンズ3aの焦点がXYクロスハッチマーク8a面に合うように、Zステージ制御部509はZステージ57の位置制御を行う。位置制御に基づくZ軸方向の位置情報(作動位置情報)がZaとしてZ位置記録部511へ記録される。
For example, the magnification of the
この対物レンズ3aが選択的に光路600上に切換えられた場合、顕微鏡制御部510は、Z位置記録部511からZ軸方向の位置情報(作動位置情報:Za)を取得して、Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510が取得したZ軸方向の位置情報(作動位置情報:Za)に基づいて、Zステージ57の位置制御を行う。Zステージ制御部509は、顕微鏡本体の観察に使用される対物レンズが切り換わると、切換後の対物レンズに対応付けて記憶されているZ軸方向の位置情報(作動位置情報:Za)をルックアップテーブルから取得する。Zステージ制御部509は、顕微鏡本体の観察に使用される対物レンズが切り換わると、切り換わるたびに位置制御を行うことが可能である。
When the
(XYZステージの説明)
顕微鏡本体101の中央部にはステージ装置50(XYZステージ)が搭載されている。Yステージ54、およびXステージ55は、対物レンズの光軸に対して交差(直交)する方向に移動でき、Zステージ57は光軸方向へ電動駆動により移動できる。対物レンズの光軸に対して交差(直交)する平面において、Xステージ55は平面内の第1の方向(X方向)に移動可能であり、Yステージ54は、第1の方向に対して面内方向において交差する第2の方向(Y方向)に移動可能に構成されている。Zステージ57は、第1の方向(X方向)および第2の方向(Y方向)に交差する第3の方向(Z方向:顕微鏡光軸方向)に移動可能である。
(Explanation of XYZ stage)
A stage device 50 (XYZ stage) is mounted at the center of the microscope
図3(a)は、ステージ装置50(XYZステージ)の構成例を示す図であり、Yステージ54はXステージ55上に配置されている。Yステージ54は、Xステージ55上において矢印Y方向に移動可能に支持され、並進移動することができる。Xステージ55はXYベース56上に配置されている。Xステージ55は、XYベース56上において矢印X方向に移動可能に支持され、並進移動することができる。XYベース56は、Zステージ57上において矢印Z方向に移動可能に支持されていて、光路600方向へ移動することができる。Zステージ57は顕微鏡本体101に対して移動可能に支持されている。ステージ装置50(XYZステージ)は、顕微鏡本体に装着され、互いに交差するX軸方向およびY軸方向およびZ軸方向に移動可能に構成され、観察対象のスライドガラスが載置されるステージであって、X軸方向およびY軸方向の面内に面内の位置管理用のスケール(XYスケール8スケール)と面内の軸合せの基準として使用するXYクロスハッチマーク8a(基準マーク)とを有する。
FIG. 3A is a diagram illustrating a configuration example of a stage device 50 (XYZ stage), in which a
XYステージ制御部508は、XYステージ位置検知部503の検知結果に基づいて、XYステージドライバ504を介して、Xステージ55およびYステージ54の各モータ(不図示)を駆動して、Xステージ55およびYステージ54の並進移動を制御する。尚、実施形態では、電動駆動によりXステージ55およびYステージ54を駆動する構成を説明したが、例えば、X摘み201、Y摘み202(図1)により手動操作によりステージ位置を移動することも可能である。
The XY
位置管理用のスケール(XYスケール8)の材質は熱膨張係数が極めて小さい材質、たとえば、合成石英が使用され、Yステージ54上に構成されている。
As a material of the position management scale (XY scale 8), a material having an extremely small coefficient of thermal expansion, for example, synthetic quartz is used, and is configured on the
XYスケール8には上面にX方向とY方向の二次元の長さを測定する目盛8b、8cが設けられている。目盛8bは、Y方向移動時の位置管理に使われるY方向の位置情報を計測するためのY方向のスケール(目盛)である。目盛8cは、X方向移動時の位置管理に使われるX方向の位置情報を計測するためのX方向のスケール(目盛)である。
The
X方向の目盛8cを読み取るX方向センサ(不図示)、およびY方向の目盛8bを読み取るY方向センサ(不図示)が、顕微鏡本体101に配置されている。X方向センサおよびY方向センサによる目盛の読み取り結果に基づいて、XYステージ位置検知部503は、Xステージ55およびYステージ54における二次元の位置を検知する。XYステージ位置検知部503の検知結果は、XYステージ制御部508に入力される。XYステージ制御部508は、XYステージ位置検知部503の検知結果に基づいて、XYステージドライバ504を介して、Xステージ55およびYステージ54の並進移動を位置制御する。
An X direction sensor (not shown) for reading the
Zステージ57においては、一次元の長さを測定するZ方向のスケール(目盛)が設けられている。Z方向のスケール(目盛)は、Z方向移動時の位置管理に使われるZ方向の位置情報を計測するためのスケール(目盛)である。Z方向のスケール(目盛)は、位置管理用のスケール(XYスケール8)の材質と同様に、熱膨張係数が極めて小さい材質、たとえば、合成石英が使用され、Zステージ57上に構成されている。
The
また、Z方向の目盛を読み取るZ方向センサ(不図示)が顕微鏡本体101に配置されている。Z方向センサによる目盛の読み取り結果に基づいて、Zステージ位置検知部505は、Zステージ57における一次元の位置を検知する。Zステージ位置検知部505の検知結果は、Zステージ制御部509に入力される。Zステージ制御部509は、Zステージ位置検知部505の検知結果に基づいて、Zステージドライバ506を介して、Zステージ57のモータ(不図示)を駆動して、Zステージ57の鉛直方向の移動を位置制御する。
Further, a Z-direction sensor (not shown) for reading a scale in the Z-direction is arranged on the microscope
(XYスケールクロスハッチの説明)
XYスケール8には、目盛8b、8cと同一平面には、X方向スケールとY方向スケールとが交差するように形成されたXYクロスハッチマーク8a(基準マーク)が極めて高精度に形成されている。XYクロスハッチマーク8a(基準マーク)は、X軸方向およびY軸方向の軸合せの基準として使用される。
(Description of XY scale cross hatch)
On the
Yステージ54上のXYクロスハッチマーク8a(基準マーク)は、Xステージ55またはYステージ54の移動により光路600(光軸)に位置合わせされ、Zステージ57の移動により光路600(光軸)上を移動することが可能である。スライドガラス9上の被観察物11と同様にXYクロスハッチマーク8aを観察することができる。スライドガラス9およびXYクロスハッチマーク8aが観察対象領域に入るようにしている。すなわち、スライドガラス9のみならずXYクロスハッチマーク8aも、撮像部であるデジタルカメラ400により撮影可能に配置されている。
The
XYクロスハッチマーク8aは、Xステージ55およびYステージ54の位置の初期化において、X方向およびY方向の軸合せの基準座標(ステージ基準位置)を得るために使用され、位置ズレや、異なるデジタル顕微鏡間のステージの特性の影響を受けない、普遍的な位置管理を可能としている。
The
スライドガラス上には被観察物11が配置され、被観察物上にカバーガラス12が配置されている。スライドガラス9は、ステージ基準位置となるXYクロスハッチマーク8aに対してYステージ54上に、高い位置精度で載せることができる。
An
(クロスハッチ領域の説明)
図3(b)は、Yステージ54を対物レンズ側から見た拡大概略図である。図中のX方向可動範囲とY方向可動範囲は、ステージ装置50を構成するXステージ55およびYステージ54が光路600上を移動できる範囲を示している。この範囲はデジタルカメラ400で画像の撮影および接眼レンズ200により観察可能な範囲である。図中のC1はXYクロスハッチマーク8a(基準マーク)が配置されているクロスハッチマーク領域(第1領域)であり、G1はスライドガラス9が配置されているスライドガラス領域(第2領域)である。XYステージ制御部508は、XYステージ位置検知部503から入力される、Xステージ55およびYステージ54における二次元の位置情報に基づいて、スライドガラス領域G1およびクロスハッチマーク領域C1のうち、どちらの領域が光路600上に位置しているかを判定することが可能である。
(Explanation of cross hatch area)
FIG. 3B is an enlarged schematic view of the
図5は、Zステージの位置制御を説明する図であり、光路600を軸にした対物レンズ3とXYクロスハッチマーク8aとスライドガラス9の近傍を示す拡大断面図である。図5(a)は、クロスハッチマーク領域C1で観察している状態を示しており、図5(b)は、スライドガラス領域G1で観察している状態を示している。Yステージ54上のXYクロスハッチマーク8aの近傍には、平面部54bおよび斜面部54cが形成されている。XYクロスハッチマーク8a近傍におけるYステージ54の構造をコンパクトにすることにより、対物レンズ3とステージ装置50の下方に配置されているコンデンサレンズ(不図示)との間の限られた空間内にステージ装置50をコンパクトに配置することが可能になる。また、Yステージ54の構造をコンパクトにすることにより、電動レボルバ127により対物レンズ3が切替えられる際に、対物レンズの先端とYステージ54の上面とが干渉しないようにすることができる。
FIG. 5 is a diagram for explaining position control of the Z stage, and is an enlarged cross-sectional view showing the vicinity of the
図5(a)は、クロスハッチマーク領域C1において電動レボルバ127によって対物レンズ3aが選択的に光路600上に切換えられた状態を示している。図4に示すルックアップテーブルに記録されている対物レンズ3aの作動距離(WD)は、例えば、0.17mmであり、Z軸方向の位置情報はZaである。
FIG. 5A shows a state in which the
レボルバ制御部507はレボルバ位置検知部501からの情報に基づいて、切り換えられた対物レンズを識別する。レボルバ制御部507は切り換えられた対物レンズの識別結果を、顕微鏡制御部510に入力する。顕微鏡制御部510は、レボルバ制御部507の識別結果に基づいて、Z軸方向の位置情報(Za)をZ位置記録部511から取得する。顕微鏡制御部510は、取得したZ軸方向の位置情報(Za)を、Zステージ制御部509に入力する。Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510を介して、Z軸方向の位置情報(Za)を取得する。Zステージ制御部509は、取得したZ軸方向の位置情報(Za)に基づいて、Zステージ57の位置制御を行う。Z位置記録部511で記録されているZ軸方向の位置情報(Za)に基づいて、Zステージ57の位置制御を行うことにより、対物レンズを切換えてもジャスト焦点の状態を維持することができる。
The
一方、スライドガラス9の厚さは約1mmであり、スライドガラス9の面はXYクロスハッチマーク8aの面と同一のZ軸方向の位置(Za)に合うようにYステージ54の載置部54aに載せられている。また、スライドガラス9上の被観察物11の厚さは約3μmであり、カバーガラス12の厚さは、約15μmである。カバーガラス12の上面の位置Hは、XYクロスハッチマーク8aに対して、被観察物11の厚さ(t1)とカバーガラス12の厚さ(t2)の分だけ高くなる(図5(a)のh1=t1+t2)。スライドガラス領域G1において、スライドガラス9上の被観察物11をジャスト焦点で観察する場合、作動距離(WD)にh1の移行距離(距離情報)を加える必要がある。
On the other hand, the thickness of the
オペレータは、あらかじめ、被観察物11およびカバーガラス12の厚さのばらつきを見込んだ任意の距離情報(厚さ量)を設定部512から設定し、距離記録部514に記録する。距離記録部514に記録された距離情報(厚さ量)は、スライドガラス領域G1におけるZステージ57の位置制御に使用される。
The operator sets in advance any distance information (thickness amount) in consideration of variations in the thicknesses of the
図5(b)は、スライドガラス領域G1において電動レボルバ127によって対物レンズ3aが選択的に光路600上に切換えられた状態を示している。図4に示すルックアップテーブルに記録されている対物レンズ3aの作動距離(WD)は、例えば、0.17mmであり、Z軸方向の位置情報はZaである。また、距離記録部514に記録されている距離情報(厚さ量)はh1である。
FIG. 5B shows a state in which the
レボルバ制御部507はレボルバ位置検知部501からの情報に基づいて、切り換えられた対物レンズを識別する。レボルバ制御部507は対物レンズの識別結果を、顕微鏡制御部510に入力する。顕微鏡制御部510は、レボルバ制御部507の識別結果に基づいて、Z軸方向の位置情報(Za)をZ位置記録部511から取得する。
The
Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510を介して、Z軸方向の位置情報(Za)を取得し、距離記録部514から距離情報(厚さ量)h1を取得する。Zステージ制御部509は、取得したZ軸方向の位置情報(Za)および距離情報(厚さ量)h1に基づいて、Zステージ57の位置制御を行う。
The Z
図5(b)において、紙面の下向きを+、紙面の上向きを−とすると、Zステージ制御部509は、Zステージ57のZ軸方向の位置がZa+h1となるように位置制御を行う。Zステージ制御部509の位置制御により、スライドガラス9の上面から対物レンズ3aの先端までの距離が作動距離(例えば、WD=0.17mm)となるようZステージ57の位置が制御される。この場合、Zステージ制御部509は、Z軸方向の位置(Za)に対して距離情報(厚さ量)h1の分だけZステージ57を降下させる(+Z方向にZステージ57を移動させる)。このように、Z軸方向の位置情報(Za)および距離情報(厚さ量)h1に基づいて、Z軸方向の位置制御を行うことにより、スライドガラス領域G1において、対物レンズを切換えてもカバーガラス12の上面に対物レンズ3aの焦点をシフトさせることができる。
In FIG. 5B, assuming that the downward direction of the paper is + and the upward direction of the paper is-, the Z
対物レンズ3aの切換え動作後のステージ装置50(XYスZテージ)の位置情報は、顕微鏡制御部510に入力されており、顕微鏡制御部510は、スライドガラス領域G1に光路600(光軸)が位置するか、クロスハッチマーク領域C1に光路600(光軸)が位置するかを判定することができる。
The position information of the stage device 50 (XY stage) after the switching operation of the
Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510の判定結果を用いて、対物レンズの切替えに応じて実行するZ軸方向の位置制御で使用する情報を決定する。
The Z
すなわち、クロスハッチマーク領域C1において、対物レンズが切替えられる場合、上述のように、Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510を介してZ位置記録部511からZ軸方向の位置情報(Za)を取得して、Zステージ57の位置制御を行う。
That is, when the objective lens is switched in the cross hatch mark area C <b> 1, as described above, the Z
また、クロスハッチマーク領域C1において焦点が合った状態でステージを移動させて、スライドガラス領域G1において、スライドガラスの観察を行う場合、Zステージ制御部509は、更に、距離記録部514から距離情報(厚さ量)h1を取得して、Z軸方向の位置情報(Za)および距離情報(厚さ量)h1に基づいて、Zステージ57の位置制御を行う。
When the stage is moved while being in focus in the cross hatch mark area C1 and the slide glass is observed in the slide glass area G1, the Z
スライドガラス領域G1において、対物レンズが切替えられる場合、Zステージ制御部509は、Z位置記録部511からZ軸方向の位置情報(Za)を取得する。更に、Zステージ制御部509は、距離記録部514から距離情報(厚さ量)h1を取得して、Z軸方向の位置情報(Za)および距離情報(厚さ量)h1に基づいて、Zステージ57の位置制御を行う。
When the objective lens is switched in the slide glass area G1, the Z
また、スライドガラス領域G1において焦点が合った状態でステージを移動させて、クロスハッチマーク領域C1において、前記基準マークの観察を行う場合、Zステージ制御部509は、Z軸方向の位置情報(Za)に基づいてZステージ57の位置制御を行う。この場合、Zステージ制御部509は、スライドガラス領域G1におけるZ軸方向の位置(Za+h1)を基準として、距離情報(厚さ量)h1だけZステージ57を上昇させて、Z軸方向の位置をZaに制御する。このような位置制御により、スライドガラス領域G1およびクロスハッチマーク領域C1において、ステージを移動させて、対物レンズを切替えても、対物レンズの焦点を合わせることができる。ステージ装置50(XYZステージ)を移動させてもWDを一定に保つようにZ軸方向の位置を制御するので対物レンズの目標とする物体面の焦点がずれること無く、ジャスト焦点を維持することが可能となる。
When the stage is moved in a state where the slide glass area G1 is in focus and the reference mark is observed in the cross hatch mark area C1, the Z
図6は、顕微鏡システムが実行する処理の流れを示す図である。ステップS1で、顕微鏡制御部510は操作入力部515から対物レンズの切換えを指示する指示信号の入力を受け付ける。顕微鏡制御部510は入力された指示信号に基づいて切り換えるレボルバ位置を指定する。レボルバ制御部507は、顕微鏡制御部510で指定されたレボルバ位置に基づいて、レボルバドライバ502を介して電動レボルバ127のモータ(不図示)を駆動して、電動レボルバ127の回転駆動を制御する。
FIG. 6 is a diagram showing a flow of processing executed by the microscope system. In step S1, the
ステップS2で、XYステージ位置検知部503は、X方向センサによるX方向の目盛8cの読み取り結果、およびY方向センサによるY方向の目盛8bの読み取り結果に基づいて、Xステージ55およびYステージ54における二次元の位置情報(XY位置情報)を取得する。
In step S2, the XY stage
ステップS3で、XYステージ制御部508は、XYステージ位置検知部503から入力される、Xステージ55およびYステージ54における二次元の位置情報(XY位置情報)に基づいて、スライドガラス領域G1およびクロスハッチマーク領域C1のうち、どちらの領域が光路600上に位置しているかを判定する。
In step S3, the XY
ステップS3の判定で、クロスハッチマーク領域C1に光路600が位置していれば(S3−Yes)、処理はステップS4に進められる。ステップS4で、クロスハッチマーク領域C1において、光路上に切り換える対物レンズについて、Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510を介してZ位置記録部511からZ軸方向の位置情報(Za)を取得する。そして、ステップS5で、Zステージ制御部509は、取得したZ軸方向の位置情報(Za)に基づいて、Zステージ57の位置を制御して、Z軸方向の位置決めを完了する(S6)。
If it is determined in step S3 that the
一方、ステップS3の判定で、クロスハッチマーク領域C1に光路600が位置していない場合(S3−No)、すなわち、スライドガラス領域G1に光路600が位置している場合、処理はステップS7に進められる。
On the other hand, if it is determined in step S3 that the
ステップS7で、スライドガラス領域G1において、光路上に切り換える対物レンズについて、Zステージ制御部509は、顕微鏡制御部510を介してZ位置記録部511からZ軸方向の位置情報(Za)を取得する。
In step S7, the Z
また、ステップS8で、Zステージ制御部509は、距離記録部514から距離情報(厚さ量)h1を取得する。
In step S8, the Z
ステップS9で、Zステージ制御部509は、Z軸方向の位置情報(Za)と距離情報(厚さ量)h1との加算情報を取得する。そして、ステップS10で、Zステージ制御部509は、取得したZ軸方向の位置情報(Za)および距離情報(厚さ量)h1の加算情報に基づいて、Zステージ57の位置を制御して、Z軸方向の位置決めを完了する(S6)。本実施形態ではZ軸方向の位置制御をステージ装置50(XYZステージ)により行っているが、この構成例に限定されず、電動レボルバ127を支持する鏡基121にZ方向の移動機構を設け、Z軸方向の位置情報(Za)、またはZ軸方向の位置情報(Za)および距離情報(厚さ量)h1の加算情報に基づいて、対物レンズ3のZ方向の位置を制御することも可能である。
In step S9, the Z
本実施形態の顕微鏡システムによれば、観察光路上に配置されている対物レンズの焦点が合うようにステージの位置制御を行うことが可能になる。 According to the microscope system of the present embodiment, the position of the stage can be controlled so that the objective lens arranged on the observation optical path is focused.
本実施形態の顕微鏡システムによれば、クロスハッチの領域から観察領域にXYステージを移動して観察しても対物レンズの焦点がずれること無く、ジャスト焦点を維持することが可能である。 According to the microscope system of the present embodiment, even when the XY stage is moved from the cross hatch area to the observation area for observation, the focus of the objective lens can be maintained without shifting the focus.
また、複数の対物レンズの切換えを行っても、それぞれの対物レンズの作動距離(WD)を一定に保ち、ジャスト焦点を維持することが可能である。 Further, even when a plurality of objective lenses are switched, it is possible to keep the working distance (WD) of each objective lens constant and maintain the just focus.
対物レンズの焦点位置は、顕微鏡システムのZ軸方向の基準となる安定した精度の高いXYクロスハッチマークに対して測定され、測定されたZ軸方向の焦点位置は、Z位置記録部によって記録することができる。電動レボルバによって選択的に光路上に切換えられる対物レンズについて、焦点位置は、各対物レンズの焦点位置に対応した作動距離情報に基づいて、高い精度で再現することができる。また、スライドガラスに対するZ軸方向の距離情報(スライドガラスに載せられた非観察物およびカバーガラスの厚み量)をZ軸方向におけるステージの位置制御に反映することができる。 The focal position of the objective lens is measured with respect to a stable and high-precision XY crosshatch mark which is a reference in the Z-axis direction of the microscope system, and the measured focal position in the Z-axis direction is recorded by a Z-position recording unit. be able to. Regarding the objective lens selectively switched on the optical path by the electric revolver, the focal position can be reproduced with high accuracy based on the working distance information corresponding to the focal position of each objective lens. Further, the distance information in the Z-axis direction with respect to the slide glass (the thickness of the non-observed object and the cover glass placed on the slide glass) can be reflected in the position control of the stage in the Z-axis direction.
以上の構成により、クロスハッチマークにおいて対物レンズの焦点が合った状態でステージを移動させて、スライドガラス領域においてスライドガラスの観察を行う場合、Zステージ制御部は、作動位置情報および距離情報に基づいて、ステージの位置制御を行うことができる。 With the above configuration, when the stage is moved in a state where the objective lens is in focus at the cross hatch mark and the slide glass is observed in the slide glass area, the Z stage control unit performs the operation based on the operating position information and the distance information. Thus, the position of the stage can be controlled.
また、スライドガラス領域において対物レンズの焦点が合った状態でステージを移動させて、クロスハッチマークにおいてXYクロスハッチマーク(基準マーク)の観察を行う場合、Zステージ制御部は、作動位置情報に基づいて、ステージの位置制御を行うことが可能である。 When the stage is moved in a state where the objective lens is in focus in the slide glass area and the XY cross hatch mark (reference mark) is observed in the cross hatch mark, the Z stage control unit uses the operating position information to perform the observation. Thus, the position of the stage can be controlled.
対物レンズの作動距離が一定となるように、Z方向の位置を制御することが可能となるため、焦点合わせの操作性が向上する。また、作動距離の短い対物レンズを切り換える際でも、対物レンズの先端と観察対象(カバーガラス)との干渉を防止することが可能になる。 Since the position in the Z direction can be controlled so that the working distance of the objective lens becomes constant, the operability of focusing is improved. Further, even when the objective lens having a short working distance is switched, it is possible to prevent interference between the tip of the objective lens and the observation target (cover glass).
(その他の実施形態)
本発明は、上述の実施形態の1以上の機能を実現するプログラムを、ネットワーク又は記憶媒体を介してシステム又は装置に供給し、そのシステム又は装置のコンピュータにおける1つ以上のプロセッサーがプログラムを読出し実行する処理でも実現可能である。また、1以上の機能を実現する回路(例えば、ASIC)によっても実現可能である。
(Other embodiments)
The present invention supplies a program for realizing one or more functions of the above-described embodiments to a system or an apparatus via a network or a storage medium, and one or more processors in a computer of the system or the apparatus read and execute the program. This processing can be realized. Further, it can also be realized by a circuit (for example, an ASIC) that realizes one or more functions.
3:対物レンズ、8:XYスケール、127:電動レボルバ、
50:ステージ装置、54:Yステージ、55:Xステージ、
56:XYベース、57:Zステージ、 501:レボルバ位置検知部、
503:XYステージ位置検知部、505:Zステージ位置検知部、
507:レボルバ制御部、508:XYステージ制御部、
509:Zステージ制御部、510:顕微鏡制御部、511:Z位置記録部
3: Objective lens, 8: XY scale, 127: electric revolver,
50: Stage device, 54: Y stage, 55: X stage,
56: XY base, 57: Z stage, 501: Revolver position detector,
503: XY stage position detector, 505: Z stage position detector,
507: Revolver control unit, 508: XY stage control unit,
509: Z stage control unit, 510: microscope control unit, 511: Z position recording unit
Claims (23)
前記顕微鏡本体に装着され、互いに交差するX軸方向およびY軸方向およびZ軸方向に移動可能に構成され、観察対象のスライドガラスおよび前記スライドガラス上に載置されたカバーガラスが載置されるステージであって、前記X軸方向およびY軸方向を含む面内に、前記面内における前記ステージの位置管理用のスケールと前記面内における前記X軸方向および前記Y軸方向の位置合わせの基準として使用する基準マークとを有するステージと、
前記スケールを読み取るセンサと、
前記センサによる前記スケールの読み取り結果により、前記ステージの前記X軸方向および前記Y軸方向を含む二次元の位置情報を検知する位置検知手段と、
前記複数の対物レンズの焦点を前記基準マークに合わせたときの前記Z軸方向における前記ステージの作動位置情報を取得する位置取得手段と、
前記Z軸方向における前記スライドガラスの対物レンズ側表面から前記カバーガラスの対物レンズ側表面までの距離情報を取得する距離取得手段と、
前記二次元の位置情報に基づいて、前記X軸方向および前記Y軸方向における前記ステージの位置制御を行い、前記作動位置情報および前記距離情報に基づいて前記Z軸方向における前記ステージの位置制御を行う制御手段と、
を備えることを特徴とする顕微鏡システム。 A microscope body having a revolver that switches any one of the objective lenses and arranges it on the observation optical path,
A slide glass to be observed and a cover glass placed on the slide glass are mounted on the microscope main body and configured to be movable in the X-axis direction, the Y-axis direction, and the Z-axis direction crossing each other. a stage, in a plane including the X-axis direction and the Y-axis direction, the X-axis direction and the Y-axis direction of the reference alignment in the plane and the scale for the position control of the stage in the plane A stage having a fiducial mark used as
A sensor for reading the scale,
Position detection means for detecting two-dimensional position information including the X-axis direction and the Y-axis direction of the stage based on a result of reading the scale by the sensor ;
Position acquisition means for acquiring operation position information of the stage in the Z-axis direction when the plurality of objective lenses are focused on the reference mark;
A distance obtaining means for obtaining distance information from the objective lens side surface of the slide glass before Symbol Z-axis direction to the objective lens side surface of the cover glass,
On the basis of the two-dimensional position information, performs position control of the stage in the X-axis direction and the Y-axis direction, the position control of the stage in the Z-axis direction based on the operation position information and the distance information Control means for performing
A microscope system comprising:
前記検知の結果に基づいて、前記レボルバの回転駆動を制御して、前記複数の対物レンズのうちいずれか一つの対物レンズを選択的に前記光路上に切換えるレボルバ制御手段と、
を更に備えることを特徴とする請求項1乃至5のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 Rotational position of the revolver, information on the direction of rotation, revolver position detecting means for detecting the objective lens disposed on the optical path,
Based on the result of the detection, controlling the rotation drive of the revolver, revolver control means for selectively switching any one of the plurality of objective lenses on the optical path,
The microscope system according to any one of claims 1 to 5, further comprising:
前記スケールの目盛りを読み取るZ軸センサと、
前記Z軸センサによるスケールの読み取り結果により、前記Z軸方向における前記ステージの位置情報を検知するステージ位置検知手段を更に備え、
前記制御手段は、前記ステージ位置検知手段の検知結果に基づいて、前記ステージの位置制御を行うことを特徴とする請求項1乃至6のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 The stage has a scale for managing the position of the stage in the Z-axis direction ,
A Z-axis sensor for reading the scale of the scale;
A stage position detection unit configured to detect position information of the stage in the Z-axis direction based on a result of reading the scale by the Z-axis sensor ;
The microscope system according to claim 1, wherein the control unit performs position control of the stage based on a detection result of the stage position detection unit.
前記顕微鏡本体に装着され、互いに交差するX軸方向およびY軸方向およびZ軸方向に移動可能に構成され、観察対象のスライドガラスおよび前記スライドガラス上に載置されたカバーガラスが載置されるステージであって、前記X軸方向およびY軸方向を含む面内に、前記面内における前記ステージの位置管理用のスケールと前記面内における前記X軸方向および前記Y軸方向の位置合わせの基準として使用する基準マークとを有するステージと、
前記スケールを読み取るセンサと、
前記センサによる前記スケールの読み取り結果により、前記ステージの前記X軸方向および前記Y軸方向を含む二次元の位置情報を検知する位置検知手段と、
前記複数の対物レンズの焦点を前記基準マークに合わせたときの前記Z軸方向における前記ステージの作動位置情報を取得する位置取得手段と、
前記Z軸方向における前記スライドガラスの対物レンズ側表面から前記カバーガラスの対物レンズ側表面までの距離情報を取得する距離取得手段と、を備えた顕微鏡システムを制御するコントローラによる顕微鏡システムの制御方法であって、
前記二次元の位置情報に基づいて、前記X軸方向および前記Y軸方向における前記ステージの位置制御を行い、前記作動位置情報および前記距離情報に基づいて前記Z軸方向における前記ステージの位置制御を行う制御工程を有することを特徴とする顕微鏡システムの制御方法。 A microscope body having a revolver that switches any one of the objective lenses and arranges it on the observation optical path,
The slide glass to be observed and the cover glass placed on the slide glass are mounted on the microscope main body and configured to be movable in the X-axis direction, the Y-axis direction, and the Z-axis direction that intersect with each other. a stage, in a plane including the X-axis direction and the Y-axis direction, the X-axis direction and the Y-axis direction of the reference alignment in the plane and the scale for the position control of the stage in the plane A stage having a fiducial mark used as
A sensor for reading the scale,
Position detection means for detecting two-dimensional position information including the X-axis direction and the Y-axis direction of the stage based on a result of reading the scale by the sensor ;
Position acquisition means for acquiring operation position information of the stage in the Z-axis direction when the plurality of objective lenses are focused on the reference mark;
In the control method of a microscope system according to a controller for controlling the microscope system and a distance obtaining means for obtaining distance information from the objective lens side surface of the slide glass in the Z axis direction to the objective lens side surface of the cover glass So,
On the basis of the two-dimensional position information, performs position control of the stage in the X-axis direction and the Y-axis direction, the position control of the stage in the Z-axis direction based on the operation position information and the distance information A control method for a microscope system, comprising a control step of performing the control.
前記顕微鏡本体に装着され、互いに交差するX軸方向およびY軸方向を含む面内に観察対象のスライドガラスおよび前記スライドガラス上に載置されたカバーガラスが載置され、前記X軸方向および前記Y軸方向と互いに交差するZ軸方向に移動可能に構成されるステージであって、前記複数の対物レンズの焦点を合わせて前記Z軸方向における位置合わせの基準として使用する基準マークを有するステージと、 The slide glass to be observed and the cover glass placed on the slide glass are placed in a plane including the X-axis direction and the Y-axis direction that intersect with each other, and are mounted on the microscope main body. A stage configured to be movable in a Z-axis direction intersecting with the Y-axis direction, the stage having a reference mark used as a reference for alignment in the Z-axis direction by focusing the plurality of objective lenses. ,
前記複数の対物レンズの焦点を前記基準マークに合わせたときの前記Z軸方向における前記ステージの作動位置情報を取得する取得手段と、 Acquiring means for acquiring operating position information of the stage in the Z-axis direction when the plurality of objective lenses are focused on the reference mark;
前記Z軸方向における前記スライドガラスの対物レンズ側表面から前記カバーガラスの対物レンズ側表面までの距離情報を取得する距離取得手段と、 Distance acquiring means for acquiring distance information from the objective lens side surface of the slide glass to the objective lens side surface of the cover glass in the Z-axis direction;
前記作動位置情報および前記距離情報に基づいて前記Z軸方向における前記ステージの位置制御を行う制御手段と、 Control means for controlling the position of the stage in the Z-axis direction based on the operating position information and the distance information;
を備えることを特徴とする顕微鏡システム。 A microscope system comprising:
前記検知の結果に基づいて、前記レボルバの回転駆動を制御して、前記複数の対物レンズのうちいずれか一つの対物レンズを選択的に前記光路上に切換えるレボルバ制御手段と、 Based on the result of the detection, controlling the rotation drive of the revolver, revolver control means for selectively switching any one of the plurality of objective lenses on the optical path,
を更に備えることを特徴とする請求項19に記載の顕微鏡システム。 20. The microscope system according to claim 19, further comprising:
前記スケールの目盛りを読み取るZ軸センサと、 A Z-axis sensor that reads a scale of the scale;
前記Z軸センサによるスケールの読み取り結果により、前記Z軸方向における前記ステージの位置情報を検知するステージ位置検知手段と、を更に備え、 Stage position detection means for detecting position information of the stage in the Z-axis direction based on a result of reading the scale by the Z-axis sensor,
前記制御手段は、前記ステージ位置検知手段の検知結果に基づいて、前記ステージの位置制御を行うことを特徴とする請求項19または20に記載の顕微鏡システム。 21. The microscope system according to claim 19, wherein the control unit controls the position of the stage based on a detection result of the stage position detection unit.
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