JP6588535B2 - 短鎖ペプチド固定化担体の製造方法および短鎖ペプチド固定化担体 - Google Patents
短鎖ペプチド固定化担体の製造方法および短鎖ペプチド固定化担体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6588535B2 JP6588535B2 JP2017512265A JP2017512265A JP6588535B2 JP 6588535 B2 JP6588535 B2 JP 6588535B2 JP 2017512265 A JP2017512265 A JP 2017512265A JP 2017512265 A JP2017512265 A JP 2017512265A JP 6588535 B2 JP6588535 B2 JP 6588535B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- short
- group
- amino acid
- immobilized
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 23
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 163
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 68
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 62
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 55
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 50
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 35
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 22
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 20
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 13
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 12
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims description 9
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 claims description 7
- 125000003055 glycidyl group Chemical group C(C1CO1)* 0.000 claims description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 claims description 3
- 150000001336 alkenes Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000000664 diazo group Chemical group [N-]=[N+]=[*] 0.000 claims description 2
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims description 2
- HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N methanediyl Chemical group [CH2] HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 113
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 90
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 75
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 57
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 44
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 44
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 34
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 26
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 26
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical group OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 21
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 description 19
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 14
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 14
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 13
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 13
- WADSJYLPJPTMLN-UHFFFAOYSA-N 3-(cycloundecen-1-yl)-1,2-diazacycloundec-2-ene Chemical compound C1CCCCCCCCC=C1C1=NNCCCCCCCC1 WADSJYLPJPTMLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 11
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 10
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 10
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 10
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 8
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 8
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 8
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 8
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 8
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 7
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- -1 Dpr) Chemical class 0.000 description 3
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical compound OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 3
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 3
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 3
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NMDDZEVVQDPECF-LURJTMIESA-N (2s)-2,7-diaminoheptanoic acid Chemical group NCCCCC[C@H](N)C(O)=O NMDDZEVVQDPECF-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol Chemical compound FC(F)(F)C(O)C(F)(F)F BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NFDXQGNDWIPXQL-UHFFFAOYSA-N 1-cyclooctyldiazocane Chemical compound C1CCCCCCC1N1NCCCCCC1 NFDXQGNDWIPXQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 2,2-diaminobutanoic acid Chemical group CCC(N)(N)C(O)=O BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QDFXRVAOBHEBGJ-UHFFFAOYSA-N 3-(cyclononen-1-yl)-4,5,6,7,8,9-hexahydro-1h-diazonine Chemical compound C1CCCCCCC=C1C1=NNCCCCCC1 QDFXRVAOBHEBGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N D-Asparagine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-RFZPGFLSSA-N D-Isoleucine Chemical compound CC[C@@H](C)[C@@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-RFZPGFLSSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N D-Proline Chemical compound OC(=O)[C@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N D-Serine Chemical compound OC[C@@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UWTATZPHSA-N 0.000 description 2
- 229930195711 D-Serine Natural products 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 2
- 229930028154 D-arginine Natural products 0.000 description 2
- 229930182846 D-asparagine Natural products 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 2
- 229930182847 D-glutamic acid Natural products 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-GSVOUGTGSA-N D-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 2
- 229930195715 D-glutamine Natural products 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N D-histidine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- 229930195721 D-histidine Natural products 0.000 description 2
- 229930182845 D-isoleucine Natural products 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N D-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 2
- 229930182818 D-methionine Natural products 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 description 2
- 229930182820 D-proline Natural products 0.000 description 2
- 229930182827 D-tryptophan Natural products 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 2
- 229930195709 D-tyrosine Natural products 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N D-valine Chemical compound CC(C)[C@@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 2
- 229930182831 D-valine Natural products 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUQLUIFNNFIIKC-YFKPBYRVSA-N L-2-aminopimelic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCC(O)=O JUQLUIFNNFIIKC-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- PQNASZJZHFPQLE-UHFFFAOYSA-N N(6)-methyllysine Chemical compound CNCCCCC(N)C(O)=O PQNASZJZHFPQLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- VEVRNHHLCPGNDU-MUGJNUQGSA-O desmosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC[N+]1=CC(CC[C@H](N)C(O)=O)=C(CCC[C@H](N)C(O)=O)C(CC[C@H](N)C(O)=O)=C1 VEVRNHHLCPGNDU-MUGJNUQGSA-O 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000012973 diazabicyclooctane Substances 0.000 description 2
- 229960001760 dimethyl sulfoxide Drugs 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 239000010408 film Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 229940099472 immunoglobulin a Drugs 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- RGXCTRIQQODGIZ-UHFFFAOYSA-O isodesmosine Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC[N+]1=CC(CCC(N)C(O)=O)=CC(CCC(N)C(O)=O)=C1CCCC(N)C(O)=O RGXCTRIQQODGIZ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BJBUEDPLEOHJGE-UHFFFAOYSA-N (2R,3S)-3-Hydroxy-2-pyrolidinecarboxylic acid Natural products OC1CCNC1C(O)=O BJBUEDPLEOHJGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZFOMKMMPBOQKMC-AEJSXWLSSA-N (2r)-2-amino-6-[[(2s,3s)-3-methyl-3,4-dihydro-2h-pyrrole-2-carbonyl]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@H]1CC=N[C@@H]1C(=O)NCCCC[C@@H](N)C(O)=O ZFOMKMMPBOQKMC-AEJSXWLSSA-N 0.000 description 1
- VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]propanoyl]amino]prop-2-enoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- XABCFXXGZPWJQP-BYPYZUCNSA-N (S)-3-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C[C@@H](N)CCC(O)=O XABCFXXGZPWJQP-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JHTPBGFVWWSHDL-UHFFFAOYSA-N 1,4-dichloro-2-isothiocyanatobenzene Chemical compound ClC1=CC=C(Cl)C(N=C=S)=C1 JHTPBGFVWWSHDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 2,4-diaminobutyric acid Chemical compound NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 2,6-diaminopimelic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXBGSDVWAMZHDD-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-1h-imidazole Chemical compound CC1=NC=CN1 LXBGSDVWAMZHDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XABCFXXGZPWJQP-UHFFFAOYSA-N 3-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)CC(N)CCC(O)=O XABCFXXGZPWJQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCHPKSFMDHPSNR-UHFFFAOYSA-N 3-aminoisobutyric acid Chemical compound NCC(C)C(O)=O QCHPKSFMDHPSNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UWTATZPHSA-N D-Cysteine Chemical compound SC[C@@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N D-Selenocysteine Natural products [Se]C[C@@H](N)C(O)=O FDKWRPBBCBCIGA-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N D-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 229930182819 D-leucine Natural products 0.000 description 1
- ZKZBPNGNEQAJSX-UWTATZPHSA-N D-selenocysteine Chemical compound [SeH]C[C@@H](N)C(O)=O ZKZBPNGNEQAJSX-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N D-threonine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N Hydroxylysine Natural products NCC(O)CC(N)CC(O)=O LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- ZFOMKMMPBOQKMC-KXUCPTDWSA-N L-pyrrolysine Chemical compound C[C@@H]1CC=N[C@H]1C(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O ZFOMKMMPBOQKMC-KXUCPTDWSA-N 0.000 description 1
- ZKZBPNGNEQAJSX-REOHCLBHSA-N L-selenocysteine Chemical compound [SeH]C[C@H](N)C(O)=O ZKZBPNGNEQAJSX-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229930182853 L-selenocysteine Natural products 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLTDJTHDQAWBAV-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylaniline Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=C1 JLTDJTHDQAWBAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 1
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 1
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000191761 Sida cordifolia Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010976 amide bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- BJBUEDPLEOHJGE-IUYQGCFVSA-N cis-3-hydroxy-D-proline zwitterion Chemical compound O[C@H]1CCN[C@H]1C(O)=O BJBUEDPLEOHJGE-IUYQGCFVSA-N 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N hydroxy-L-lysine Natural products NCCCCC(NO)C(O)=O QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- XLSZMDLNRCVEIJ-UHFFFAOYSA-N methylimidazole Natural products CC1=CNC=N1 XLSZMDLNRCVEIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
- C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
- C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
- C07K17/06—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier attached to the carrier via a bridging agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
- C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
- C07K17/10—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier the carrier being a carbohydrate
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
(1)アルコール溶媒およびアルコール溶媒中にて二次構造が誘起され、かつ、複数の固定化官能基を有する短鎖ペプチドを含むアルコール溶液を準備する工程と、
固定化官能基と反応する反応性基を有するスペーサーが結合された担体とアルコール溶液とを接触させて、短鎖ペプチドをスペーサーに固定化する工程と
を備える、短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(2)短鎖ペプチドが34残基以下である、上記(1)に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(3)短鎖ペプチドとスペーサーとが共有結合を介して固定化される、上記(1)または(2)に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(4)スペーサーの分子量が10000以下である、上記(1)〜(3)のいずれか1つに記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(5)固定化官能基がチオール基およびアミノ基からなる群から選択される少なくとも1種である、上記(1)〜(4)のいずれか1つに記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(6)固定化官能基が短鎖ペプチドの少なくとも一方の末端に位置する、上記(1)〜(5)のいずれか1つに記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(7)短鎖ペプチドが、固定化官能基を有するアミノ酸残基が複数含まれ、かつ、固定化官能基を有するアミノ酸残基の間に固定化官能基を有しないアミノ酸残基を少なくとも1つ含む部分構造を有する、上記(1)〜(5)のいずれか1つに記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
(8)担体と、担体上に結合されたスペーサーと、スペーサー上に配置され、かつ、二次構造が保持されている短鎖ペプチドとを有する短鎖ペプチド固定化担体。
(9)担体とスペーサーとが共有結合によって結合されている、上記(8)に記載の短鎖ペプチド固定化担体。
本発明の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法は、アルコール溶媒およびアルコール溶媒中にて二次構造が誘起され、かつ、複数の固定化官能基を有する短鎖ペプチドを含むアルコール溶液を準備する工程(以下「工程A」という。)と、固定化官能基と反応する反応性基を有するスペーサーが結合された担体とアルコール溶液とを接触させて、短鎖ペプチドをスペーサーに固定化する工程(以下「工程B」という。)とを備えることを特徴とする。
まず、本発明において用いられる用語について説明する。
(1)短鎖ペプチドの定義
「短鎖ペプチド」とは、アミノ酸残基数が約50残基以下であるペプチドをいう。ただし、複数のドメインが結合した融合ペプチドにあっては、アミノ酸残基の総数が約50残基以下である融合ペプチドをいう。
本発明において用いる短鎖ペプチド(以下「本発明の短鎖ペプチド」という場合がある。)は、アルコール溶媒中で二次構造が誘起され、かつ、複数の固定化官能基を有する。
抗原性の観点から、本発明の短鎖ペプチドの分子量は、アミノ酸残基の分子量の合計で、好ましくは5000以下であり、より好ましくは3500以下であり、さらに好ましくは3000以下である。また、二次構造を誘起する観点から、本発明の短鎖ペプチドの分子量は、アミノ酸残基の分子量の合計で、好ましくは500以上であり、より好ましくは600以上であり、さらに好ましくは800以上である。さらに、抗原性を発現せず、二次構造を誘起する観点から、本発明の短鎖ペプチドの分子量は、好ましくは500〜5000であり、より好ましくは600〜3500であり、さらに好ましくは800〜3000である。
本発明の短鎖ペプチドの固定化官能基としては、例えば、アミノ基(アミド結合形成)、カルボキシル基、水酸基、およびチオール基などが挙げられる。ここで、反応性とは、本発明の短鎖ペプチドの固定化官能基とスペーサーが持つ官能基とが反応して共有結合を形成する性質をいう。上記共有結合は、特に限定されないが、安定な結合を形成するものが好ましい。上記共有結合としては、例えば、ジスルフィド結合、ペプチド結合(アミド結合)、ホスホジエステル結合、グリコシド結合、ジアゾ結合、チオエーテル結合、オレフィン結合、エポキシ結合、およびクリックケミストリーの反応の結果得られる結合等が挙げられる。これらの共有結合の中でも、結合安定性の観点から、ペプチド結合、チオエーテル結合、オレフィン結合、およびクリックケミストリーの反応の結果得られる結合から選択されるものが好ましい。
本発明の短鎖ペプチドの固定化官能基としては、例えば、チオール基、アミノ基、カルボキシ基、ヒドロキシ基、リン酸エステル基、エポキシ基、グリシジル基、アジド基、およびアルキニル基等が挙げられる。本発明の短鎖ペプチドの固定化官能基としては、チオール基およびアミノ基からなる群から選択される少なくとも1種が好ましい。
なお、本発明の短鎖ペプチドの固定化官能基の種類は、1種類であってもよいし、2種類以上を組み合わせてもよい。
固定化官能基を有するアミノ酸残基の間に、固定化官能基を有しないアミノ酸残基を少なくとも1つ含む部分構造を有する短鎖ペプチドの非限定的な一例としては、固定化官能基を有するアミノ酸残基としてリシン残基(K)を採用し、固定化官能基を有しないアミノ酸残基を少なくとも1つ含む部分構造として配列番号1で示されるペプチド「EQQNAFY」を採用した、「KEQQNAFYKEQQNAFYK」を挙げることができる。ここで、固定化官能基は、リシン残基の側鎖のεアミノ基およびN末端のアミノ基である。
ここで、抗体結合性とは、抗体または抗体誘導体と、ある親和性をもって結合する性質をいう。抗体または抗体誘導体との結合は、抗原抗体反応による結合が好ましく、結合する部位としては、抗体または抗体誘導体の定常領域(Fc領域、CL領域、CH領域)が好ましい。
なお、ドメインおよびスペーサーについては後述する。
(a)2つのアミノ酸配列のアラインメントを行う
一致(マッチ)は+1、不一致(ミスマッチ)は−1、ギャップは−1のスコアを与え、アラインメント・スコアが最大となるようにアラインメントを行う。
(b)配列相同性を計算する
得られたアラインメントに基づいて、次式により配列相同性を計算する。
配列相同性[%]=(一致ポジション数/全ポジション数)×100[%]
全ポジション数はアラインメントの長さであり、一致ポジション数はアミノ酸の種類が一致するポジションの数である。
ここで、アミノ酸残基の種類が一致するか否かの判断は、そのアミノ酸残基の元になるアミノ酸の側鎖(アミノ酸側鎖)の構造が同一であるか否かによるものとする。なお、エナンチオマーの関係にあるアミノ酸の側鎖の構造は同一ではない。
(c)配列相同性の計算例
例えば、次のアミノ酸配列を考える。
配列A EQQNAFY
配列B KEQQSAFY
これを、上記した条件の下でアラインメントすると、次のようになる。ここで、配列A、B間でアミノ酸(残基)の種類が一致する箇所には、見やすくするため、ホモロジー・ストリング「|」を付けている。また、「−」はギャップである。
配列A −EQQNAFY
||| |||
配列B KEQQSAFY
このアラインメントのスコアは、一致(+1)×6+不一致(−1)×1+ギャップ(−1)×1=4である。
この例では、全ポジション数は8であり、一致ポジション数は6であるから、上記式に従って算出した配列相同性は、6/8×100=75.0%である。
配列番号2で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILH)と85%以上の配列相同性を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号4で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILHL)、配列番号11で示されるアミノ酸配列(EQQSAFYEILH)などが挙げられる。
配列番号3で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILHL)と85%以上の配列相同性を有するアミノ酸配列としては、例えは、配列番号2で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILH)などが挙げられる。
配列番号4で示されるアミノ酸配列(EGQNAFY)と85%以上の配列相同性を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号1で示されるアミノ酸配列(EQQNAFY)、配列番号7で示されるアミノ酸配列(EQNAFY)、配列番号10で示されるアミノ酸配列(EQQSAFY)などが挙げられる。
配列番号5で示されるアミノ酸配列(EGQNAFYEILH)と85%以上の配列相同性を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号3で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILH)、配列番号11で示されるアミノ酸配列(EQQSAFYEILH)などが挙げられる。
配列番号6で示されるアミノ酸配列(EGQNAFYEILHL)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号3で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILHL)などが挙げられる。
配列番号7で示されるアミノ酸配列(EQNAFY)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号1で示されるアミノ酸配列(EQQNAFY)、配列番号4で示されるアミノ酸配列(EGQNAFY)などが挙げられる。
配列番号8で示されるアミノ酸配列(EQNAFYEILH)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号2で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILH)、配列番号5で示されるアミノ酸配列(EGQNAFYEILH)、配列番号9で示されるアミノ酸配列(EQNAFYEILHL)などが挙げられる。
配列番号9で示されるアミノ酸配列(EQNAFYEILHL)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号3で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILHL)、配列番号6で示されるアミノ酸配列(EGQNAFYEILHL)、配列番号8で示されるアミノ酸配列(EQNAFYEILH)などが挙げられる。
配列番号10で示されるアミノ酸配列(EQQSAFY)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号1で示されるアミノ酸配列(EQQNAFY)、配列番号13で示されるアミノ酸配列(DQQSAFY)などが挙げられる。
配列番号11で示されるアミノ酸配列(EQQSAFYEILH)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号2で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILH)、配列番号12で示されるアミノ酸配列(EQQSAFYEILHL)、配列番号14で示されるアミノ酸配列(DQQSAFYEILH)などが挙げられる。
配列番号12で示されるアミノ酸配列(EQQSAFYEILHL)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号3で示されるアミノ酸配列(EQQNAFYEILHL)、配列番号11で示されるアミノ酸配列(EQQSAFYEILH)、配列番号15で示されるアミノ酸配列(DQQSAFYEILHL)などが挙げられる。
配列番号13で示されるアミノ酸配列(DQQSAFY)と配列相同性85%以上を有するアミノ酸配列としては、例えば、配列番号10で示されるアミノ酸配列(EQQSAFY)などが挙げられる。
3.1)アミノ酸残基
「アミノ酸残基」の用語は、IUPAC(International Union of Pure and Applied Chemistry;国際純正・応用化学連合)ゴールド・ブックの定義に従う。すなわち、2個以上のアミノ酸が分子間でペプチド結合することによってペプチドを形成した時の、アミノ酸分子がペプチド結合の際に脱水された残りの部分をアミノ酸残基という。したがって、ペプチド鎖を構成するユニットはアミノ酸残基である。また、ペプチド鎖では、C末端のアミノ酸残基をC端残基といい、N末端のアミノ酸残基をN端残基という。アミノ酸残基はその由来するアミノ酸の種類が同じであれば同じ種類のアミノ酸残基として取り扱う。
「アミノ酸」とは、特に断らない限り、分子中にアミノ基(−NH2)またはイミノ基とカルボキシル基とを有する有機化合物であって、2個以上がペプチド結合することによってペプチドを形成しうるものをいう。
「天然アミノ酸」とは、天然でmRNA(messenger RNA;伝令RNA;RNA=ribonucleotide)上にコード化されているアミノ酸をいう。天然アミノ酸とは、具体的には、グリシン(Gly)、L−アラニン(Ala)、L−アルギニン(Arg)、L−アスパラギン(Asn)、L−アスパラギン酸(Asp)、L−システイン(Cys)、L−グルタミン(Gln)、L−グルタミン酸(Glu)、L−ヒスチジン(His)、L−イソロイシン(Ile)、L−ロイシン(Leu)、L−リシン(Lys)、L−メチオニン(Met)、L−フェニルアラニン(Phe)、L−プロリン(Pro)、L−セリン(Ser)、L−トレオニン(Thr)、L−トリプトファン(Trp)、L−チロシン(Tyr)、L−バリン(Val)、L−ピロリシン(Pyl)およびL−セレノシステイン(Sec)の22種類のアミノ酸をいう。
なお、これらのアミノ酸(グリシンを除く。)のエナンチオマーは、天然アミノ酸には含まれない。
「非天然アミノ酸」とは、天然ではmRNA(messenger RNA;伝令RNA;RNA=ribonucleotide)上にコード化されていないアミノ酸をいう。非天然アミノ酸は、特に限定されないが、例えば、D−アラニン(D-Ala)、D−アルギニン(D-Arg)、D−アスパラギン(D-Asn)、D−アスパラギン酸(D-Asp)、D−システイン(D-Cys)、D−グルタミン(D-Gln)、D−グルタミン酸(D-Glu)、D−ヒスチジン(D-His)、D−イソロイシン(D-Ile)、D−ロイシン(D-Leu)、D−リシン(D-Lys)、D−メチオニン(D-Met)、D−フェニルアラニン(D-Phe)、D−プロリン(D-Pro)、D−セリン(D-Ser)、D−トレオニン(D-Thr)、D−トリプトファン(D-Trp)、D−チロシン(D-Tyr)、D−バリン(D-Val)、D−ピロリシン(D-Pyl)およびD−セレノシステイン(D-Sec)等の、天然アミノ酸(グリシンを除く。)のエナンチオマー;2−アミノアジピン酸(Aad)、2−アミノ酪酸(Abu)、2−アミノヘプタン酸(Ahe)、2−アミノイソ酪酸(Aib)、2−アミノピメリン酸(Apm)、2,4−ジアミノ酪酸(Dbu)、2,2’−ジアミノピメリン酸(Dpm)、2,3−ジアミノプロピオン酸(Dpr)、アローヒドロキシリシン(aHyl)、アローイソロイシン(aIle)、ノルバリン(Nva)、ノルロイシン(Nle)、オルニチン(Orn)、デスモシン(Des)、イソデスモシン(Ide)等の非天然α−アミノ酸;6−N−メチルリシン(MeLys)、3−ヒドロキシプロリン(3Hyp)、4−ヒドロキシプロリン(4Hyp)、β−アラニン(bAla)、3−アミノイソ酪酸(bAib)、3−アミノアジピン酸(bAad)、4−アミノ酪酸(4Abu)、6−アミノカプロン酸(Acp)などが挙げられる。
なお、各非天然アミノ酸の名称の後の括弧内の記号は、それぞれの非天然アミノ酸を示す略号の一例である。
4.1)ペプチド
「ペプチド」の用語は、IUPAC(International Union of Pure and Applied Chemistry;国際純正・応用化学連合)ゴールド・ブックの定義に従う。すなわち、2個以上のアミノ酸が分子間でペプチド結合することによって得られるアミド化合物である。
「融合ペプチド」とは、なんらかの物理化学的または生物化学的な機能を有するペプチド(「ドメイン」に該当する)が2個以上、直接、またはリンカーを介して、連結することにより構成されている高分子化合物をいう。
上記リンカーは、上記ドメイン間を連結することができるものであれば特に限定されない。上記リンカーとしては、例えば、ペプチド鎖からなるペプチドリンカー、ポリエチレングリコール鎖からなるPEG(polyethylene glycol;ポリエチレングリコール)リンカー、ジスルフィド結合(SS結合)、チオエーテル結合、オレフィン結合、クリックケミストリーの反応の結果得られる結合、およびこれらのうち2つ以上の組合せ等が挙げられる。
「ドメイン」とは、タンパク質(融合タンパク質を含む。)またはペプチド(融合ペプチドを含む。)の、なんらかの物理化学的または生物化学的な機能(以下、単に「機能」という場合がある。)を発現しうる、1個以上、好ましくは2個以上、より好ましくは3個以上、さらに好ましくは4個以上、かつ、数百個以下のアミノ酸残基によって構成される部分または領域をいう。
ドメインは、その機能によって、例えば、抗体結合ドメイン、およびスペーサー結合ドメインなどに分けることができる。
抗体結合ドメインは、抗体結合性を有するペプチドから構成されるドメインである。
抗体結合性は、上述した通りである。
スペーサー結合ドメインは、抗体結合ドメイン以外の部分であって、スペーサーに結合する固定化官能基を有するアミノ酸残基を含むドメインである。
スペーサー結合ドメインとしては、ドメインあたり、固定化官能基を少なくとも側鎖に1個以上有するアミノ酸残基を1個以上、好ましくは2個以上、より好ましくは3個以上、さらに好ましくは3個以上、いっそう好ましくは4個以上、含むものが好ましい。ここで、固定化官能基を有するアミノ酸残基としては、リシン残基(K)、オルニチン残基、ジアミノ酪酸残基、ジアミノプロピオン酸残基、およびホモリシン残基等の側鎖にアミノ基を持つアミノ酸残基、システイン残基(C)、およびホモシステイン残基等の側鎖にチオール基を持つアミノ酸残基、セリン(S)、トレオニン(T)、およびチロシン(Y)等の側鎖にヒドロキシ基を持つアミノ酸残基、などが挙げられる。これらの固定化官能基のいずれかと、スペーサーの官能基とのカップリング反応により、リガンドである短鎖ペプチドがスペーサーと結合する。スペーサーの官能基がカルボキシル基である場合は、カルボキシル基と反応性を有するアミノ基を持つリシン残基(K)、オルニチン残基、ジアミノ酪酸残基、ホモリシン残基、またはジアミノプロピオン酸残基が好ましく、リシン残基(K)が経済性の観点から特に好ましい。
また、本発明の短鎖ペプチドは、複数のスペーサー結合ドメインを含んでいてもよい。
「リンカー」とは、融合ペプチドにおいて、ドメインの相互間を連結する分子鎖または結合である。
上記分子鎖としては、例えば、アミノ酸またはペプチドからなるペプチドリンカー、エチレングリコールまたはポリエチレングリコールからなるPEG(polyethylene glycol;ポリエチレングリコール)リンカー等が挙げられる。リンカーは2種類以上を組み合わせて用いてもよく、例えば、ペプチドおよびPEGをともに含んでいてもよい。
また、上記結合としては、例えば、ジスルフィド結合(SS結合)、チオエーテル結合、オレフィン結合、クリックケミストリーの反応の結果得られる結合等が挙げられる。
また、上記PEGリンカーを構成するエチレングリコール単位の数は、1個以上であれば特に限定されないが、好ましくは1〜24個、より好ましくは1〜12個、さらに好ましくは4〜8個である。
ここで、上記リンカーに含むことができるアミノ酸残基の種類は、特に制限されないが、例えば、IgG抗体との相互作用が少ないGly、AlaおよびSer等が挙げられる。また、上記リンカーは、固定化官能基を有するアミノ酸残基を含んでいてもよい。
本発明において用いるアルコール溶媒(単に「本発明のアルコール溶媒」という場合がある。)はアルコールを含む溶媒であれば特に限定されない。
上記アルコールとしては、例えば、メタノール、エタノール、2−プロパノール(IPA,イソプロピルアルコール)、tert−ブチルアルコール(tert−BuOH)、2,2,2−トリフルオロエタノール(TFE,トリフルオロエタノール)、および1,1,1,3,3,3-−ヘキサフルオロ−2−プロパノール(HFIP,ヘキサフルオロイソプロピルアルコール)などが挙げられる。
ペプチド溶解性の観点から、上記アルコールは、メタノール、エタノール、およびIPAからなる群から選択される少なくとも1種であることが好ましい。
また、上記アルコールは、1種類を単独で、または2種類以上を組み合わせて使用することができる。
なお、短鎖ペプチドに二次構造を誘起させる際のアルコール溶媒と、短鎖ペプチドを担体に固定化する際のアルコール溶媒とは、同種のアルコール溶媒であってもよいし、異種のアルコール溶媒であってもよい。例えば、メタノール中に短時間浸漬して短鎖ペプチドに二次構造を誘起させ、担体に吸着させ、イソプロピルアルコール中に長時間浸漬して短鎖ペプチドをスペーサーに結合させてもよい。
本発明のアルコール溶媒中のアルコール以外の溶媒は二次構造形成を阻害しない溶媒ならば、特に限定されない。上記アルコール以外の溶媒としては、ペプチド溶解性の観点から、好ましくは純水および緩衝液から選択される少なくとも1種であり、より好ましくは純水である。上記緩衝液としては、例えば、HEPES(4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸))緩衝液、Tris(トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン)緩衝液、およびリン酸緩衝液等が挙げられる。
「リガンド」は、特定の物質と、ある親和性をもって、結合する分子をいう。このような分子は、タンパク質、ペプチド、または低分子量化合物等であり得る。
「抗体結合性リガンド」は、抗体結合性を有するリガンド、すなわち、抗体または抗体誘導体と、ある親和性をもって結合するリガンドをいう。抗体結合性リガンドは、抗体または抗体誘導体と、特異的な分子間の親和力が働く抗原抗体反応によって結合するものが好ましい。抗体または抗体誘導体の抗体結合性リガンドが結合する部位としては、定常領域(Fc領域、CL領域(軽鎖の定常領域)またはCH領域(重鎖の定常領域))が好ましい。
「スペーサー」とは、担体とリガンドとの間に介在する化合物である。
本発明において用いるスペーサー(以下、単に「本発明のスペーサー」という場合がある。)は、本発明の短鎖ペプチドが有する固定化官能基と反応する反応性基を有するものであり、本発明の短鎖ペプチドとの間で共有結合を形成する官能基を有することが好ましい。
上記官能基としては、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、ジアゾ基、クロロアセチル基、オレフィン基、グリシジル基、カルベン基、水酸基、およびホルミル基等が挙げられる。結合安定性の観点から、上記官能基としては、チオール基、アミノ基、カルボキシル基、クロロアセチル基およびグリシジル基からなる群から選択される少なくとも1種が好ましく、カルボキシル基およびグリシジル基からなる群から選択される少なくとも1種がさらに好ましい。
本発明のスペーサーとしては、多官能カルボン酸が好ましく、ポリアクリル酸が殊に好ましい。ポリアクリル酸の末端にはアミノ基等の官能基が付加されていてもよい。
また、本発明のスペーサーの分子量は、質量平均分子量で、好ましくは300以上であり、より好ましくは500以上であり、さらに好ましくは900以上であり、いっそう好ましくは1500以上である。さらに、本発明のスペーサーの分子量は、質量平均分子量で、好ましくは300〜10000の範囲内であり、より好ましくは900〜9000の範囲内であり、さらに好ましくは900〜5000の範囲内であり、いっそう好ましくは1500〜3000の範囲内である。
本発明のスペーサーの分子量が小さすぎると、短鎖ペプチドとの結合点が少なくなり、短鎖ペプチドの二次構造を保持することが困難になる。また、本発明のスペーサーの分子量が大き過ぎると、担体に本発明のスペーサーを多量に結合することが困難になる。
担体は、リガンドを担持する基材である。
本発明において用いる担体としては、水不溶性担体が好ましい。
水不溶性担体としては、例えば、結晶性セルロース、架橋セルロース、架橋アガロース、架橋デキストラン、架橋プルラン等の多糖類、アクリレート系重合体、スチレン系重合体などの有機担体、ガラスビーズ、シリカゲルなどの無機担体、ならびにこれらの組合せによって得られる、有機−有機、および有機−無機等の複合担体などが挙げられる。
水不溶性担体としては、アルカリ耐性の観点から、多糖類またはアクリレート系重合体がより好ましく、アガロースまたはセルロース等の多糖類がさらに好ましい。
水不溶性担体として用いることができる市販品としては、例えば、多孔質セルロースゲルであるセルファイン(Cellufine) GCL2000(JNC社製)セルファインMAX(Cellfine MAX) CMJNC社製)、アリルデキストランとメチレンビスアクリルアミドとを共有結合で架橋したセファクリル(Sephacryl) S−1000 SF(GEヘルスケア社製)、アクリレート系の担体であるトヨパール(TOYOPEARL)(東ソー社製)、トヨパール(TOYOPEARL) AF−Carboxy−650 (東ソー社製)、トヨパール(TOYOPEARL) GigaCap CM−650 (東ソー社製)、アガロース系の架橋担体であるセファロース(Sepharose) CL4B(GEヘルスケア社製)、エポキシ基で活性化されたポリメタクリルアミドであるオイパーギット(Eupergit) C250L(シグマアルドリッチ社製)、およびカルボキシルメチルデキストランを金膜表面にコートしたセンサーチップCM5(GEヘルスケア社製)などが挙げられる。ただし、本発明における水不溶性担体は、これらの担体または活性化担体にのみ限定されるものではない。また、本発明に用いる水不溶性担体は、本吸着材料の使用目的および方法からみて、表面積が大きいことが好ましく、適当な大きさの細孔を多数有する多孔質であることが好ましい。担体の形態としては、特に限定されるものではないが、ビーズ状、繊維状、膜状、中空糸状など、いずれも可能であり、任意の形態を選ぶことができる。
工程Aおよび工程Bの手順について説明する。
工程Aにおいて、上述した短鎖ペプチドを含むアルコール溶液を準備する手順は特に制限されず、例えば、所定の短鎖ペプチドをアルコール溶液に添加して、所定時間静置する方法などが挙げられる。
アルコール溶液中における短鎖ペプチドの濃度は特に制限されず、使用される短鎖ペプチドの種類によって異なってよいが、アルコール溶液全質量に対して、好ましくは0.0000001〜5質量%であり、より好ましくは0.00001〜1質量%であり、さらに好ましくは0.001〜1質量%である。
また、上記アルコール溶液のpHは、特に限定されないが、pH4〜12の範囲内とすることが好ましい。
また、上記アルコール溶液を調製する際の温度は、特に制限されないが、2〜50℃で実施することが好ましい。
工程Bにおいて、上述したスペーサーが結合された担体と、上記アルコール溶液とを接触させる方法は特に制限されず、例えば、アルコール溶液中に上記スペーサーが結合された担体を添加する方法が挙げられる。
なお、スペーサーが結合された担体とアルコール溶液とを接触させる際には、必要に応じて、短鎖ペプチド中の固定化官能基とスペーサー中の反応性基との反応を促進させる化合物を存在させてもよい。例えば、固定化官能基と反応性基との反応が脱水縮合反応である場合、上記化合物としてはいわゆる脱水縮合剤(例えば、(1−エチル―3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド))などを使用することが好ましい。このような脱水縮合剤を使用する際には、先に脱水縮合剤とスペーサーが結合された担体とを接触させた後、アルコール溶液と接触させてもよい。また、例えば、ジスルフィド結合の場合には過酸化水素やヨウ素のような酸化剤を使用することが好ましい。また、例えば、グリコシド結合の場合には、酸を存在させることが好ましい。短鎖ペプチド中の固定化官能基とスペーサー中の反応性基との反応は、アミノカップリング反応によりアミノ基とカルボキシル基との間でアミド結合を形成するものが好ましい。さらに、必要に応じて、ジアザビシクロウンデセン(DBU)、ジアザビシクロオクタン(DABCO)、ジアザビシクロノネン(DBN)、メチルイミダゾール、ジメチルアニリン、トリエチルアミンおよびピリジンからなる群から選択される少なくとも1種の塩基を添加してもよい。
担体に固定化する短鎖ペプチドの密度は特に限定されないが、0.1mmol〜1000mmol/充填剤1Lが好ましく、0.1mmol〜500mmol/充填剤1Lがより好ましく、1mmol〜100mmol/充填剤1Lがさらに好ましい。この範囲内であると、短鎖ペプチドの使用量と抗体精製性能のバランスがよく、より低コストで、効率よく抗体を精製することができる。
本発明の製造方法により、担体と、担体上に結合されたスペーサーと、スペーサー上に配置され、かつ、二次構造が保持されている短鎖ペプチドとを有する短鎖ペプチド固定化担体を製造することができる。
短鎖ペプチドとして抗体結合性を有する短鎖ペプチドを用いると、本発明の短鎖ペプチド固定化担体は、抗体結合性に優れたアフィニティクロマトグラフィー用担体として利用することができる。また、本発明の短鎖ペプチド固定化担体は、抗原性およびコストの点で、プロテインAに比べて有利なアフィニティクロマトグラフィー用担体である。
全自動ペプチド合成装置(PSSM−8、島津製作所社製)を用いて、表3に示す短鎖ペプチドを合成した。
(1)スペーサーの固定
市販のCM5センサーチップ(カルボキシメチルデキストラン導入タイプ、GEヘルスケア社製)に、0.47MのEDC(1−エチル―3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド、和光純薬工業(株)製)および0.35MのNHS(N-hydroxysuccinimide;N−ヒドロキシコハク酸イミド,和光純薬工業(株)製)を含むDMSO(Dimethysulfoxide;ジメチルスルホキシド,和光純薬工業(株)製)溶液50μLを添加し、室温にて1時間活性化した。
DMSOにて洗浄した後、アミノ基末端ポリアクリル酸(質量平均分子量(Mw):3120)(以下「ポリアクリル酸1」という場合がある。)を、DMSO(ジメチルスルホキシド)/DBU(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene;ジアザビシクロウンデセン)(85:15vol%)溶液に溶解して、50mM溶液を調整し、その溶液をセンサーチップに20μL添加し、2時間室温にて反応させた。
その後、DMSOにて洗浄後、エタノールアミン溶液によってブロッキング処理を施して、スペーサー固定化担体(以下「担体A」という場合がある。)を得た。
表面プラズモン共鳴装置(Biacore3000,GEヘルスケア社製)に、「(1)スペーサーの固定」で得られた担体Aをセットし、SPR(Surface Plasmon Resonance;表面プラズモン共鳴)用HEPES緩衝液(10mM HEPES(4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸))−HCl(塩酸)、150mM NaCl(塩化ナトリウム)、pH7.4)を10μL/minの流速で安定させ、0.2MのEDC(1−エチル―3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド)と0.04MのNHS(N−ヒドロキシコハク酸イミド)混合水溶液を70μL添加した。その後、メタノール(固定化溶媒に該当する。)にて4μMに希釈した短鎖ペプチド1の試料液10μLを担体試料に供給し、その後、エタノールアミン溶液によってブロッキング処理を施し、水酸化ナトリウム水溶液にて洗浄して、固定化を行った。同様の手順で、担体AにHEPES緩衝液にて4μMに希釈した短鎖ペプチド1の試料液を用いて、別流路に固定した。得られた固定化担体を、以下「固定化担体A」という。
「(2)リガンドの固定」で製造した固体化担体Aに、10〜3000nMのヒトIgG抗体を10分間添加し、HEPES緩衝液中での25℃での解離を測定し、結合反応曲線から抗体の結合速度Kon[nM/s]および解離速度Koff[1/s]を算出し、さらに、メタノールとHEPES緩衝液それぞれにて固定化した際の短鎖ペプチド1とヒトIgG抗体の結合反応における解離定数Kd[nM]を算出した。HEPES緩衝液にて固定化した際の解離定数Kd[nM]に対する、メタノールにて固定化した際の解離定数Kd[nM]を抗体結合性改善率とし、以下の抗体結合性改善率の評価基準に基づいて評価し、その結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に示す。
解離定数(Kd)の改善率が10倍超・・・・・・・・・・A
解離定数(Kd)の改善率が3倍超、10倍以下・・・・・B
解離定数(Kd)の改善率が2倍超、3倍以下・・・・・・C
解離定数(Kd)の改善率が1倍超、2倍以下・・・・・・D
解離定数(Kd)の改善率が1倍以下・・・・・・・・・・E
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド2を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Bを得た。
(2)固定化担体Bを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド3を用いた点、およびスペーサーとして、ポリアクリル酸1(アミノ基末端ポリ(アクリル酸)、Mw:3120)DMSO/DBU(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene;ジアザビシクロウンデセン)(85:15vol%)溶液に代えてポリアクリル酸2(アミノ基末端ポリ(アクリル酸)、Mw:1350)DMSO/DBU(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene;ジアザビシクロウンデセン)(94:6vol%)溶液を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Cを得た。
(2)固定化担体Cを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド3を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Dを得た。
(2)固定化担体Dを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド3を用いた点、およびスペーサーとして、ポリアクリル酸1(アミノ基末端ポリ(アクリル酸)、Mw:3120)DMSO/DBU(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene;ジアザビシクロウンデセン)(85:15vol%)溶液に代えてポリアクリル酸3(アミノ基末端ポリ(アクリル酸)、Mw:8400)DMSO/DBU(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene;ジアザビシクロウンデセン)(68:32vol%)溶液を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Eを得た。
(2)固定化担体Eを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド3を用いた点、およびリガンドを固定する際の固定化溶媒として、メタノール(MeOH)に代えてイソプロピルアルコール(IPA)を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Fを得た。
(2)固定化担体Fを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド3を用いた点、およびリガンドを固定する際の固定化溶媒として、メタノール(MeOH)に代えてエタノール(EtOH)を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Gを得た。
(2)固定化担体Gを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド4を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Hを得た。
(2)固定化担体Hを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド5を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Iを得た。
(2)固定化担体Iを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド6を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Jを得た。
(2)固定化担体Jを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド7を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Kを得た。
(2)固定化担体Kを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド8を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Lを得た。
(2)固定化担体Lを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)リガンドを固定する際の固定化溶媒として、メタノール(MeOH)に代えてHEPES(4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸)を用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Mを得た。さらに、スペーサーの固定操作を行わず、CM5センサーチップを用いた点、およびメタノールに代えてHEPESを用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体M2を得た。
(2)固定化担体Mおよび固定化担体M2を用いて、固定化担体Mの固定化担体M2に対する抗体結合性改善率を評価し、また、固定化担体Mを用いて、実施例1と同様にして二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)スペーサーの固定操作を行わず、CM5センサーチップを用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Nを得た。
(2)固定化担体Nを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
(1)短鎖ペプチド1に代えて短鎖ペプチド3を用いた点、およびスペーサーの固定操作を行わず、CM5センサーチップを用いた点を除いて、実施例1と同様にして固定化担体Oを得た。
(2)固定化担体Oを用いて、実施例1と同様にして抗体結合性改善率を評価し、さらに、二次構造含有率を算出した。抗体結合性改善率の評価結果を表5の「抗体結合性改善率」の欄に、算出した二次構造含有率を表5の「二次構造含有率」の欄に、それぞれ示す。
また、表5中、固定化溶媒の欄のMeOHはメタノールを、EtOHはエタノールを、IPAはイソプロピルアルコールを、HEPESは4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジンエタンスルホン酸を、それぞれ表す。
また、表5中、ポリアクリル酸1はアミノ基末端ポリ(アクリル酸)(Mw:3120)を、ポリアクリル酸2はアミノ基末端ポリ(アクリル酸)(Mw:1350)を、ポリアクリル酸3はアミノ基末端ポリ(アクリル酸)(Mw:8400)を、それぞれ表す。
一方、比較例1〜3の固定化担体は、抗体結合性改善率の評価が低く、抗体結合性が実施例1〜12に比べて劣っていた。これは、アルコール溶媒中で誘起した二次構造を保ったまま、短鎖ペプチドを担体に固定化することができなかったためであると考えられる。
Claims (8)
- アルコール溶媒および前記アルコール溶媒中にて二次構造が誘起され、かつ、複数の固定化官能基を有する短鎖ペプチドを含むアルコール溶液を準備する工程と、
前記固定化官能基と反応する反応性基を有するスペーサーが結合された担体と前記アルコール溶液とを接触させて、前記短鎖ペプチドを前記スペーサーに固定化する工程と
を備え、
前記短鎖ペプチドのアミノ酸配列が配列番号1〜46のいずれか1つで表され、
前記スペーサーが質量平均分子量300〜10000のポリアクリル酸である、短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。 - 前記反応性基がチオール基、アミノ基、カルボキシル基、ジアゾ基、クロロアセチル基、オレフィン基、グリシジル基、カルベン基、水酸基、およびホルミル基からなる群から選択される少なくとも1種である、請求項1に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
- 前記短鎖ペプチドと前記スペーサーとが共有結合を介して固定化される、請求項1または2に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
- 前記固定化官能基がチオール基およびアミノ基からなる群から選択される少なくとも1種である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
- 前記固定化官能基が前記短鎖ペプチドの少なくとも一方の末端に位置する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
- 前記短鎖ペプチドが、前記固定化官能基を有するアミノ酸残基が複数含まれ、かつ、前記固定化官能基を有するアミノ酸残基の間に固定化官能基を有しないアミノ酸残基を少なくとも1つ含む部分構造を有する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の短鎖ペプチド固定化担体の製造方法。
- 担体と、前記担体上に結合されたスペーサーと、前記スペーサー上に配置され、かつ、二次構造が保持されている短鎖ペプチドとを有し、
前記スペーサーが質量平均分子量300〜10000のポリアクリル酸であり、
前記短鎖ペプチドのアミノ酸配列が配列番号1〜46のいずれか1つで表される、短鎖ペプチド固定化担体。 - 前記担体と前記スペーサーとが共有結合によって結合されている、請求項7に記載の短鎖ペプチド固定化担体。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015081768 | 2015-04-13 | ||
JP2015081768 | 2015-04-13 | ||
JP2015173944 | 2015-09-03 | ||
JP2015173944 | 2015-09-03 | ||
PCT/JP2016/060907 WO2016167143A1 (ja) | 2015-04-13 | 2016-04-01 | 短鎖ペプチド固定化担体の製造方法および短鎖ペプチド固定化担体 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2016167143A1 JPWO2016167143A1 (ja) | 2018-01-18 |
JP6588535B2 true JP6588535B2 (ja) | 2019-10-09 |
Family
ID=57126558
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017512265A Expired - Fee Related JP6588535B2 (ja) | 2015-04-13 | 2016-04-01 | 短鎖ペプチド固定化担体の製造方法および短鎖ペプチド固定化担体 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10927188B2 (ja) |
EP (2) | EP3578571A1 (ja) |
JP (1) | JP6588535B2 (ja) |
KR (1) | KR20170121746A (ja) |
CN (1) | CN107531799B (ja) |
BR (1) | BR112017022095A2 (ja) |
CA (1) | CA2982430A1 (ja) |
RU (1) | RU2017134828A (ja) |
SG (1) | SG11201708170VA (ja) |
WO (1) | WO2016167143A1 (ja) |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5932483A (en) * | 1990-10-16 | 1999-08-03 | Northwestern University | Synthetic peptide and its uses |
US5817527A (en) * | 1995-11-06 | 1998-10-06 | Chiron Diagnostics Corporation | Conjugation of ligand to immobilized protein in organic solvent |
US6420518B1 (en) * | 1997-04-04 | 2002-07-16 | Genetech, Inc. | Insulin-like growth factor agonist molecules |
EP1137669B1 (en) * | 1998-10-16 | 2006-09-20 | GE Healthcare Bio-Sciences AB | Storage-stable composition comprising squaric acid activated carrier usable for immobilisation of compounds containing amine groups |
WO2001098458A2 (en) * | 2000-06-19 | 2001-12-27 | Zyomyx, Inc. | Methods for immobilizing polypeptides |
DE10065787C1 (de) * | 2000-12-22 | 2002-07-18 | Poly An Ges Zur Herstellung Vo | Verfahren zur Immobilisierung von Biomolekülen, funktionalisiertes Trägermaterial und seine Verwendung |
WO2002066984A2 (en) * | 2001-02-16 | 2002-08-29 | Pepscan Systems B.V. | Arrays for determining binding of biomolecules |
KR20100052499A (ko) * | 2007-08-01 | 2010-05-19 | 에디컨인코포레이티드 | 콜라겐-관련 펩티드 및 이의 용도 |
EP2058335B1 (en) * | 2007-11-07 | 2020-06-24 | Leukocare Ag | Biocompatible three dimensional matrix for the immobilization of biological substances |
JP5311456B2 (ja) | 2008-06-19 | 2013-10-09 | 国立大学法人 名古屋工業大学 | 二次元微細薄膜の作製方法 |
JP2010122071A (ja) * | 2008-11-19 | 2010-06-03 | Okayama Univ | 物質を固定化した物質固定化担体および物質固定化担体を作製する方法 |
WO2011103668A1 (en) * | 2010-02-26 | 2011-09-01 | The Governors Of The University Of Alberta | Cancer specific peptides and arrays for screening same |
WO2011116028A1 (en) * | 2010-03-15 | 2011-09-22 | Anderson Forschung Group, Inc. | Improved mass spectrometric assays for peptides |
US20130052209A1 (en) | 2010-04-23 | 2013-02-28 | Purdue Research Foundation | Protein drug formulations and packages |
JP5769124B2 (ja) * | 2010-06-30 | 2015-08-26 | 株式会社 京都モノテック | 固定化タンパク質および固定化タンパク質作製用活性化担体 |
US9346892B2 (en) * | 2011-03-18 | 2016-05-24 | Roche Nimble Gen, Inc. | Methods for synthesis of an oligopeptide microarray |
US20140079753A1 (en) * | 2011-05-18 | 2014-03-20 | Affinergy, Llc | Bmp binding peptides |
SG10201604554WA (en) | 2011-06-08 | 2016-07-28 | Emd Millipore Corp | Chromatography matrices including novel staphylococcus aureus protein a based ligands |
CN102671637B (zh) * | 2012-05-16 | 2013-10-30 | 华南理工大学 | 以pamam为间隔臂的仿生物特异性免疫吸附材料及其制备方法与应用 |
RU2515197C1 (ru) | 2012-10-22 | 2014-05-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Национальный исследовательский Томский политехнический университет" | Способ иммобилизации биомолекул на поверхности магнитоуправляемых наночастиц железа покрытых углеродной оболочкой |
JP2014149199A (ja) * | 2013-01-31 | 2014-08-21 | Aisin Seiki Co Ltd | ペプチドプローブ及び当該ペプチドプローブを利用した被検物質の測定方法 |
JP6544808B2 (ja) * | 2013-07-10 | 2019-07-17 | ジーイー・ヘルスケア・バイオプロセス・アールアンドディ・アクチボラグ | 突然変異免疫グロブリン結合ポリペプチド |
JP6464089B2 (ja) * | 2013-09-06 | 2019-02-06 | 株式会社カネカ | アフィニティー分離マトリックス用分離能強化リガンド |
ITRM20130557A1 (it) * | 2013-10-11 | 2015-04-12 | Angelo Fiadone | Kit per il salto della corda. |
SG11201702539UA (en) * | 2014-09-29 | 2017-04-27 | Fujifilm Corp | Antibody-binding polypeptide, antibody-binding fusion polypeptide, and adsorption material |
-
2016
- 2016-04-01 KR KR1020177029097A patent/KR20170121746A/ko active IP Right Grant
- 2016-04-01 WO PCT/JP2016/060907 patent/WO2016167143A1/ja active Application Filing
- 2016-04-01 CA CA2982430A patent/CA2982430A1/en not_active Abandoned
- 2016-04-01 EP EP19187299.3A patent/EP3578571A1/en not_active Withdrawn
- 2016-04-01 BR BR112017022095-4A patent/BR112017022095A2/ja not_active Application Discontinuation
- 2016-04-01 CN CN201680021604.1A patent/CN107531799B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2016-04-01 SG SG11201708170VA patent/SG11201708170VA/en unknown
- 2016-04-01 JP JP2017512265A patent/JP6588535B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2016-04-01 EP EP16779934.5A patent/EP3284757B1/en active Active
- 2016-04-01 RU RU2017134828A patent/RU2017134828A/ru not_active Application Discontinuation
-
2017
- 2017-10-12 US US15/782,121 patent/US10927188B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP3284757B1 (en) | 2020-11-11 |
CN107531799A (zh) | 2018-01-02 |
JPWO2016167143A1 (ja) | 2018-01-18 |
US20180037669A1 (en) | 2018-02-08 |
CN107531799B (zh) | 2021-11-26 |
BR112017022095A2 (ja) | 2018-07-03 |
SG11201708170VA (en) | 2017-11-29 |
RU2017134828A3 (ja) | 2019-04-04 |
WO2016167143A1 (ja) | 2016-10-20 |
US10927188B2 (en) | 2021-02-23 |
KR20170121746A (ko) | 2017-11-02 |
EP3284757A4 (en) | 2018-02-21 |
RU2017134828A (ru) | 2019-04-04 |
EP3578571A1 (en) | 2019-12-11 |
EP3284757A1 (en) | 2018-02-21 |
CA2982430A1 (en) | 2016-10-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110267969B (zh) | 含有IgG结合肽的固相载体以及IgG的分离方法 | |
US11066446B2 (en) | Cyclic peptide, affinity chromatography support, labeled antibody, antibody drug conjugate, and pharmaceutical preparation | |
JP6328781B2 (ja) | 抗体結合性ポリペプチド、抗体結合性融合ポリペプチドおよび吸着材料 | |
JP7117741B2 (ja) | IgG結合性ペプチドを含む固相担体及びIgGの分離方法 | |
US10703778B2 (en) | Cyclic peptide, affinity chromatography support, labeled antibody, antibody drug conjugate, and pharmaceutical preparation | |
JP6588535B2 (ja) | 短鎖ペプチド固定化担体の製造方法および短鎖ペプチド固定化担体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170920 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180821 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181012 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190319 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190416 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190910 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190912 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6588535 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |