JP6481187B1 - Sample measurement method, multi-well plate lid, sample measurement kit, and sample measurement apparatus - Google Patents

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Abstract

【課題】簡易な構造の器具を利用することが可能で、かつ、接着依存性又は浮遊性の細胞などに適用することが可能な試料計測方法、マルチウエルプレートの蓋、試料計測キット、及び、試料計測装置を提供する。【解決手段】マルチウエルプレート１０を利用して液状の試料の状態を計測する方法であって、各ウエル１２に液状の試料Ｓが注入されたマルチウエルプレートを用意する工程と、マルチウエルプレートに蓋２０をする工程と、試料の状態を計測する工程と、を含む。蓋は、マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の凸部２２を有し、凸部は、蓋をマルチウエルプレートに取り付けたときに、その先端が各ウエルの底から離間しつつ試料に接触するように構成されている。試料の状態を計測する工程は、マルチウエルプレートの下側から、凸部の先端に設けられた蛍光体３０に励起光を照射するとともに、その蛍光を受光する工程を含む。【選択図】図５[PROBLEMS] To provide a sample measurement method, a multi-well plate lid, a sample measurement kit, and a sample measurement method capable of using an instrument having a simple structure and applicable to adhesion-dependent or floating cells. A sample measuring device is provided. A method of measuring the state of a liquid sample using a multi-well plate, the step of preparing a multi-well plate in which a liquid sample S is injected into each well 12; A step of covering the lid 20 and a step of measuring the state of the sample. The lid has a plurality of convex portions 22 corresponding to each well of the multi-well plate. When the lid is attached to the multi-well plate, the tip contacts the sample while being separated from the bottom of each well. Is configured to do. The step of measuring the state of the sample includes a step of irradiating the phosphor 30 provided at the tip of the convex portion with the excitation light from the lower side of the multi-well plate and receiving the fluorescence. [Selection] Figure 5

Description

本発明は試験槽内の試料の状態を計測する計測方法、計測に適したマルチウエルプレートの蓋、試料計測キット、試料計測装置に関するもので、更に詳しくは試験槽内における細胞の増殖、細菌などの微生物の活動等に由来する試料の状態変化を、蛍光測定法により計測する方法およびその方法に用いる装置に関するものである。  The present invention relates to a measurement method for measuring the state of a sample in a test tank, a multi-well plate lid suitable for measurement, a sample measurement kit, a sample measurement device, and more specifically, cell growth in a test tank, bacteria, etc. The present invention relates to a method for measuring a change in the state of a sample derived from the activity of a microorganism of the above by a fluorescence measurement method and an apparatus used for the method.

細胞や微生物の培養や毒性試験などの目的で、試験槽内の試料の状態を計測する技術が利用されており、その方式の一つに蛍光体を利用するものが知られている。
例えば特許文献１には、先端に蛍光物質が設けられたプローブを利用して酸素濃度を計測する技術が開示されている。また、特許文献２には、試験槽の底面に設けられた蛍光物質を利用して、試料の状態を計測する技術が開示されている。A technique for measuring the state of a sample in a test tank is used for the purpose of culturing cells and microorganisms, toxicity tests, and the like, and one that uses a phosphor is known.
For example, Patent Document 1 discloses a technique for measuring an oxygen concentration using a probe having a fluorescent material at the tip. Patent Document 2 discloses a technique for measuring the state of a sample by using a fluorescent material provided on the bottom surface of a test tank.

特開２００７−１９８７３５JP 2007-198735 A ＵＳ５３７１０１６US5371016

特許文献１の技術を利用する場合、プローブの先端で発生した蛍光をプローブの基端側で計測する必要がある。このことから、プローブにファイバーケーブルを通すなどの工夫が必要になり、器具の構造が複雑化するおそれがある。
特許文献２にあるように試験槽の底面に蛍光物質を設ける場合、試験槽の内面に組成の異なる領域が存在することになり、例えば接着依存性の細胞の成育に影響が出るおそれがあるとともに、下面からの観察が妨げられるおそれがある。When using the technique of Patent Document 1, it is necessary to measure the fluorescence generated at the tip of the probe on the base end side of the probe. For this reason, it is necessary to devise such as passing a fiber cable through the probe, and the structure of the instrument may be complicated.
When the fluorescent material is provided on the bottom surface of the test tank as described in Patent Document 2, there will be a region having a different composition on the inner surface of the test tank, which may affect the growth of adhesion-dependent cells, for example. , Observation from the lower surface may be hindered.

本発明の目的の一つは、簡易な構造の器具を利用することが可能で、かつ、接着依存性又は浮遊性の細胞などに適用することが可能な試料計測方法、マルチウエルプレートの蓋、試料計測キット、及び、試料計測装置を提供することにある。  One of the objects of the present invention is to provide a sample measurement method, a multi-well plate lid, which can use an instrument having a simple structure and can be applied to adhesion-dependent or floating cells, etc. The object is to provide a sample measurement kit and a sample measurement apparatus.

（１）本発明に係る試料計測方法は、
マルチウエルプレートを利用して液状の試料の状態を計測する方法であって、
各ウエルに液状の試料が注入されたマルチウエルプレートを用意する工程と、
前記マルチウエルプレートに蓋をする工程と、
前記試料の状態を計測する工程と、
を含み、
前記蓋は、前記マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の凸部を有し、
前記凸部は、前記蓋を前記マルチウエルプレートに取り付けたときに、その先端が前記各ウエルの底から離間しつつ前記試料に接触するように構成されており、
前記試料の状態を計測する工程は、前記マルチウエルプレートの下側から、前記凸部の先端に設けられた蛍光体に励起光を照射するとともに、その蛍光を受光する工程を含む。(1) A sample measurement method according to the present invention includes:
A method for measuring the state of a liquid sample using a multiwell plate,
Preparing a multi-well plate in which a liquid sample is injected into each well;
Capping the multi-well plate;
Measuring the state of the sample;
Including
The lid has a plurality of convex portions corresponding to each well of the multi-well plate,
The convex portion is configured such that when the lid is attached to the multi-well plate, the tip thereof is in contact with the sample while being separated from the bottom of each well,
The step of measuring the state of the sample includes a step of irradiating the phosphor provided at the tip of the convex portion with excitation light and receiving the fluorescence from the lower side of the multi-well plate.

これによると、単純な構造の機器を利用して、試料の状態を正確に計測することが可能な試料計測方法を提供することができる。  According to this, it is possible to provide a sample measurement method capable of accurately measuring the state of the sample using a device having a simple structure.

（２）この試料計測方法において、
前記試料の状態を計測する工程は、
照射された励起光に対する受光された蛍光の光量または時間遅れまたは減衰速度を測定することを含んでもよい。(2) In this sample measurement method,
The step of measuring the state of the sample includes
It may include measuring the amount or time delay or decay rate of the received fluorescence relative to the irradiated excitation light.

（３）この試料計測方法において、
前記凸部は、平板状の先端部と、前記先端部を支持する棒状の支持部とを有し、前記蛍光体は前記先端部に設けられていてもよい。(3) In this sample measurement method,
The convex portion may include a flat tip portion and a rod-like support portion that supports the tip portion, and the phosphor may be provided at the tip portion.

（４）この試料計測方法において、
前記マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の個別蓋をさらに有してもよい。(4) In this sample measurement method,
A plurality of individual lids corresponding to each well of the multi-well plate may be further provided.

（５）この試料計測方法において、
前記試料の状態を計測する工程は、前記個別蓋で前記ウエルの底部を気密にした状態で行ってもよい。(5) In this sample measurement method,
The step of measuring the state of the sample may be performed in a state where the bottom of the well is airtight with the individual lid.

（６）この試料計測方法において、
前記試料の状態を計測する工程は、前記試料の溶存酸素濃度、溶存二酸化炭素濃度、ｐＨ、濁度の少なくとも一つを計測することを含んでもよい。(6) In this sample measurement method,
The step of measuring the state of the sample may include measuring at least one of dissolved oxygen concentration, dissolved carbon dioxide concentration, pH, and turbidity of the sample.

（７）本発明に係るマルチウエルプレートの蓋は、
マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の凸部と、
前記凸部の先端に設けられた蛍光体と、
を有し、
前記凸部は、前記蓋を前記マルチウエルプレートに取り付けたときに、その先端が前記各ウエルの底から離間しつつ前記各ウエルに注入された試料に接触するように構成されており、
前記マルチウエルプレートの下側から、前記蛍光体に励起光が照射されるとともに、その蛍光が受光される。(7) The lid of the multi-well plate according to the present invention is
A plurality of convex portions corresponding to each well of the multi-well plate;
A phosphor provided at the tip of the convex part;
Have
The convex portion is configured such that when the lid is attached to the multi-well plate, the tip of the convex portion comes into contact with the sample injected into each well while being separated from the bottom of each well.
The phosphor is irradiated with excitation light from the lower side of the multi-well plate and the fluorescence is received.

これによると、構造が単純で、かつ、試料の状態を正確に計測することが可能なマルチウエルプレートの蓋を提供することができる。  According to this, it is possible to provide a multi-well plate lid having a simple structure and capable of accurately measuring the state of the sample.

（８）本発明に係る試料計測キットは、
上記に記載のマルチウエルプレートの蓋と、マルチウエルプレートと、を有する。(8) The sample measurement kit according to the present invention comprises:
The multi-well plate lid described above and a multi-well plate.

（９）本発明に係る試料計測装置は、
上記に記載の試料計測キットを含む。(9) The sample measuring apparatus according to the present invention is:
The sample measurement kit described above is included.

（１０）本発明に記載の試料計測方法は、
液状の試料が注入された試験槽を用意する工程と、
前記試験槽内に、前記試験槽の底から離間しつつ前記試料に接触する蛍光体を設ける工程と、
前記試料の状態を計測する工程と、
を含み、
前記試料の状態を計測する工程は、前記試験槽の下側から、前記蛍光体に励起光を照射するとともに、その蛍光を受光する工程を含む。(10) The sample measurement method according to the present invention includes:
Preparing a test tank filled with a liquid sample;
Providing a phosphor in contact with the sample while being separated from the bottom of the test tank in the test tank;
Measuring the state of the sample;
Including
The step of measuring the state of the sample includes a step of irradiating the phosphor with excitation light from the lower side of the test chamber and receiving the fluorescence.

これによると、単純な構造の機器を利用して、試料の状態を正確に計測することが可能な試料計測方法を提供することができる。  According to this, it is possible to provide a sample measurement method capable of accurately measuring the state of the sample using a device having a simple structure.

本実施の形態に係る試料計測キットについて説明するための図The figure for demonstrating the sample measurement kit which concerns on this Embodiment 本実施の形態に係る試料計測キットについて説明するための図The figure for demonstrating the sample measurement kit which concerns on this Embodiment 本実施の形態に係る試料計測装置について説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring device which concerns on this Embodiment 本実施の形態に係る試料計測方法について説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring method which concerns on this Embodiment 本実施の形態に係る試料計測方法について説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring method which concerns on this Embodiment 変形例に係る試料計測キットについて説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring kit which concerns on a modification 変形例に係る試料計測キットについて説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring kit which concerns on a modification 変形例に係る試料計測キットについて説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring kit which concerns on a modification 変形例に係る試料計測方法について説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring method which concerns on a modification 変形例に係る試料計測装置について説明するための図The figure for demonstrating the sample measuring device which concerns on a modification

以下、本発明を適用した実施の形態について説明する。ただし、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではない。すなわち、以下の実施の形態で説明するすべての構成が本発明にとって必須であるとは限らない。また、本発明は、以下の内容を自由に組み合わせたものを含む。  Embodiments to which the present invention is applied will be described below. However, the present invention is not limited to the following embodiments. That is, all the configurations described in the following embodiments are not necessarily essential to the present invention. Moreover, this invention includes what combined the following content freely.

（１）試料計測キット１の構成
はじめに、図１及び図２を参照して、本実施の形態に係る試料計測キット１について説明する。
試料計測キット１は、マルチウエルプレート１０を有する。マルチウエルプレート１０は、ウエルと呼ばれる複数の凹部（槽）が形成された部材であって、それぞれのウエルを独立した試験槽として利用可能に構成されている。本実施の形態では、マルチウエルプレート１０は、９６個のウエル１２が設けてある９６ウエルプレートと呼ばれるマルチウエルプレートである。ただし、本発明はこれに限られるものではなく、ウエル数が６・１２・２４・４８・３８４・１５３６などのマルチウエルプレート（マイクロウエルプレート）を適用することも可能である。本実施の形態では、図２に示すように、マルチウエルプレート１０のウエル１２の底は平らになっている。ただし本発明はこれに限られず、ウエルの底がＵ字やＶ字になったマルチウエルプレートを利用することも可能である。また、本実施の形態では、マルチウエルプレート１０は、隣り合うウエル１２が上端で接続されている。言い換えると、マルチウエルプレート１０は、上面に複数の凹部が形成された構造となっていて、ウエル１２の下端は独立している。ただしこれとは別に、マルチウエルプレートは、ウエルの下端が接続されていて、上端が独立した構成とすることも可能である（図示せず）。
本実施の形態では、マルチウエルプレート１０は、少なくとも底部が、光透過性の材料で構成されている。これにより、試料計測キット１は、マルチウエルプレート１０の下側からの励起光の照射と、蛍光の受光を行うことが可能になる（詳細は後述）。(1) Configuration of Sample Measurement Kit 1 First, the sample measurement kit 1 according to the present embodiment will be described with reference to FIGS. 1 and 2.
The sample measurement kit 1 has a multi-well plate 10. The multi-well plate 10 is a member in which a plurality of recesses (tanks) called wells are formed, and each well can be used as an independent test tank. In the present embodiment, the multi-well plate 10 is a multi-well plate called a 96-well plate in which 96 wells 12 are provided. However, the present invention is not limited to this, and it is also possible to apply a multiwell plate (microwell plate) having the number of wells of 6, 12, 24, 48, 384, 1536 or the like. In the present embodiment, as shown in FIG. 2, the bottom of the well 12 of the multi-well plate 10 is flat. However, the present invention is not limited to this, and it is also possible to use a multi-well plate in which the bottom of the well is U-shaped or V-shaped. In the present embodiment, adjacent wells 12 of multi-well plate 10 are connected at the upper end. In other words, the multi-well plate 10 has a structure in which a plurality of recesses are formed on the upper surface, and the lower end of the well 12 is independent. However, apart from this, the multi-well plate may be configured such that the lower ends of the wells are connected and the upper ends are independent (not shown).
In the present embodiment, at least the bottom of the multi-well plate 10 is made of a light transmissive material. Thereby, the sample measurement kit 1 can perform excitation light irradiation and fluorescence reception from the lower side of the multiwell plate 10 (details will be described later).

試料計測キット１は、蓋２０を有する。蓋２０は、マルチウエルプレート１０に取り付けられて、マルチウエルプレート１０の上面側（ウエル１２の開口側）を覆う部材である。本実施の形態では、蓋２０は、マルチウエルプレート１０の全体を覆うように構成されている。
蓋２０は、マルチウエルプレート１０の各ウエル１２に対応した複数の凸部２２を有する。図２に示すように、凸部２２は蓋２０の天板２４に設けられていて、蓋２０がマルチウエルプレート１０に取り付けられたときに、それぞれの凸部２２が、ウエル１２内に挿入されるように配置されている。なお、凸部２２は、蓋２０がマルチウエルプレート１０に取り付けられたときに、その先端２６が、ウエル１２の底から離間して（間隔をあけて）配置されるように、かつ、ウエル１２に注入された試料Ｓと接触するように構成されている。言い換えると、本実施の形態では、ウエル１２に注入される試料Ｓの量は、試料Ｓと先端２６とが接触するように調整される（図５参照）。
なお、蓋２０は、外形がマルチウエルプレート１０と（ほぼ）同じ形状になっており、それぞれの外周部が勘合して位置決めがなされる。The sample measurement kit 1 has a lid 20. The lid 20 is a member that is attached to the multiwell plate 10 and covers the upper surface side (opening side of the well 12) of the multiwell plate 10. In the present embodiment, the lid 20 is configured to cover the entire multi-well plate 10.
The lid 20 has a plurality of convex portions 22 corresponding to the wells 12 of the multi-well plate 10. As shown in FIG. 2, the convex portions 22 are provided on the top plate 24 of the lid 20, and when the lid 20 is attached to the multiwell plate 10, each convex portion 22 is inserted into the well 12. It is arranged so that. Note that the convex portion 22 is arranged such that when the lid 20 is attached to the multi-well plate 10, the tip 26 thereof is arranged away from the bottom of the well 12 (with a space), and the well 12. It is comprised so that it may contact with the sample S inject | poured into. In other words, in the present embodiment, the amount of the sample S injected into the well 12 is adjusted so that the sample S and the tip 26 are in contact (see FIG. 5).
The lid 20 has an outer shape (substantially) the same as that of the multi-well plate 10 and is positioned by fitting each outer peripheral portion.

本実施の形態では、図２に示すように、凸部の先端２６には蛍光体３０が設けられている。蛍光体３０の具体的な組成は特に限られるものではないが、液体中の溶存酸素、溶存二酸化炭素、ｐＨ、濁度などを計測するセンサとして利用可能ないずれかの物質を利用することができる。  In the present embodiment, as shown in FIG. 2, a phosphor 30 is provided at the tip 26 of the convex portion. Although the specific composition of the phosphor 30 is not particularly limited, any substance that can be used as a sensor for measuring dissolved oxygen, dissolved carbon dioxide, pH, turbidity, etc. in a liquid can be used. .

（２）試料計測装置
次に、図３（Ａ）及び図３（Ｂ）を参照して、本実施の形態に係る試料計測装置２について説明する。試料計測装置２は、上記した試料計測キット１を利用して、試料の状態を計測するための装置である。(2) Sample Measuring Device Next, the sample measuring device 2 according to the present embodiment will be described with reference to FIGS. 3 (A) and 3 (B). The sample measuring device 2 is a device for measuring the state of the sample using the sample measuring kit 1 described above.

試料計測装置２は、計測台５０を有する。計測台５０は、その上面に試料計測キット１を載せる、光透過性の部材である。計測台５０は、マルチウエルプレート１０の全面を支える構造であってもよいが、その一部を支える構造（例えば外周部のみを支える額縁状）とすることも可能である。計測台５０には図示しない位置決め機構が設けられていて、試料計測キット１は計測台５０の所定の位置に配置される。
試料計測装置２は、複数の受発光モジュール５２を有する。受発光モジュール５２は、凸部２２の先端に設けられた蛍光体３０に励起光を照射するとともに、その蛍光を受光する機構を備えている。本実施の形態では、図３（Ｂ）に示すように、受発光モジュール５２は、発光素子５４及び受光素子５６を有する。発光素子５４は、蛍光体３０に向けて励起光を照射する。蛍光体３０は、発光素子５４からの励起光を受けて励起し、基底状態に戻るときに蛍光（燐光を含む）を発生する。受光素子５６は、蛍光体３０で発生した蛍光を受光して電気信号に変換する。
本実施の形態では、試料計測装置２は複数の受発光モジュール５２を有し、それぞれの受発光モジュール５２が、マルチウエルプレート１０の各ウエル１２に対応するように設けられている。これにより、各ウエル１２の試料Ｓの状態を計測することが可能になる。
試料計測装置２は、制御部５８を有する。制御部５８は、発光素子５４を所定の周期で点滅させるとともに、受光素子５６で受光された蛍光を電気信号に変換し、処理部６０に伝達する。
処理部６０は、受発光モジュール５２（発光素子５４）からの励起光の発光情報、及び、制御部５８から伝達された電気信号に基づいて、試料Ｓの状態を導出するための種々の演算を行う。例えば蛍光体が溶存酸素濃度を検出するものである場合、溶存酸素によって蛍光の減衰が早まり、強度が弱くなるとともに励起光と蛍光の間の時間遅れが小さくなる。励起光と蛍光の時間遅れが小さくなれば、発光周期に対する受光周期の位相遅れが小さくなる。このことから、発光周期に対する受光周期の位相遅れに基づいて、試料Ｓの溶存酸素濃度を求めることが可能になる。なお、励起光と蛍光の時間的差異を求める方法としては位相遅れの値を計測する方法の他に、励起光の発光の後に蛍光が減衰する減衰速度を測定する方法などが知られており、いずれの方法であっても良い。また、本実施の形態では、試料計測装置２は、蛍光の強度をあわせて検出し、試料Ｓの状態の計測に利用するように構成することも可能である。あるいは、試料計測装置２は、画像認識処理を利用して試料Ｓの状態を計測するように構成することも可能である。The sample measuring device 2 has a measuring table 50. The measurement table 50 is a light transmissive member on which the sample measurement kit 1 is placed. The measurement table 50 may have a structure that supports the entire surface of the multiwell plate 10, but may have a structure that supports a part of the measurement table 50 (for example, a frame shape that supports only the outer peripheral portion). The measurement table 50 is provided with a positioning mechanism (not shown), and the sample measurement kit 1 is arranged at a predetermined position on the measurement table 50.
The sample measuring device 2 has a plurality of light emitting / receiving modules 52. The light emitting / receiving module 52 includes a mechanism for irradiating the fluorescent material 30 provided at the tip of the convex portion 22 with excitation light and receiving the fluorescence. In the present embodiment, as shown in FIG. 3B, the light receiving / emitting module 52 includes a light emitting element 54 and a light receiving element 56. The light emitting element 54 irradiates the phosphor 30 with excitation light. The phosphor 30 is excited by receiving the excitation light from the light emitting element 54 and generates fluorescence (including phosphorescence) when returning to the ground state. The light receiving element 56 receives the fluorescence generated by the phosphor 30 and converts it into an electrical signal.
In the present embodiment, the sample measuring device 2 includes a plurality of light emitting / receiving modules 52, and each light receiving / emitting module 52 is provided so as to correspond to each well 12 of the multiwell plate 10. Thereby, the state of the sample S in each well 12 can be measured.
The sample measuring device 2 has a control unit 58. The control unit 58 blinks the light emitting element 54 at a predetermined cycle, converts the fluorescence received by the light receiving element 56 into an electrical signal, and transmits the electrical signal to the processing unit 60.
The processing unit 60 performs various calculations for deriving the state of the sample S based on the light emission information of the excitation light from the light emitting / receiving module 52 (light emitting element 54) and the electrical signal transmitted from the control unit 58. Do. For example, when the phosphor detects the dissolved oxygen concentration, the decay of the fluorescence is accelerated by the dissolved oxygen, the intensity is weakened, and the time delay between the excitation light and the fluorescence is reduced. If the time delay between the excitation light and the fluorescence becomes small, the phase delay of the light reception period with respect to the light emission period becomes small. From this, it becomes possible to obtain the dissolved oxygen concentration of the sample S based on the phase delay of the light receiving period with respect to the light emitting period. In addition to the method of measuring the phase lag value as a method for obtaining the temporal difference between excitation light and fluorescence, a method of measuring the decay rate at which fluorescence decays after emission of excitation light is known, Either method may be used. In the present embodiment, the sample measuring device 2 can also be configured to detect the intensity of the fluorescence together and use it for measuring the state of the sample S. Alternatively, the sample measuring device 2 can be configured to measure the state of the sample S using image recognition processing.

（３）試料計測方法
本実施の形態に係る試料計測方法は、はじめに、マルチウエルプレート１０の各ウエル１２内で、接着依存性の細胞Ｃを培養する工程（ステップＳ１０）を含む。具体的には、図５（Ａ）に示すように、マルチウエルプレート１０の各ウエル１２に、細胞培養用に調整された培地Ｍを注入するとともに細胞を播種し、ＣＯ２インキュベーター内に静置する。これにより、図５（Ｂ）に示すように、マルチウエルプレート１０のウエル１２内（底面及び内側面）で、細胞Ｃを接着培養することができる。
次に、各ウエル１２に試薬Ｘを添加する（ステップＳ２０）。試薬は、図５（Ｃ）に示すように培地Ｍに添加してもよく、培地を取り除いた後や培地を交換した後に添加してもよい。これにより、各ウエルに液状の試料Ｓが注入されたマルチウエルプレートを用意することができる。なお、試薬Ｘは、すべてのウエル１２に同じものを添加してもよいが、ウエル１２毎に（ウエル１２群毎に）変えることも可能である。このとき、ウエル１２毎に、試薬の量（濃度）を変えることもできるし、ウエル１２毎に試薬の種類を変えることもできる。
本実施の形態に係る試料計測方法は、マルチウエルプレート１０に蓋２０をする工程（ステップＳ３０）を含む。本工程では、図５（Ｄ）に示すように、蓋２０に設けられた凸部２２の先端２６を、試料Ｓに接触させる。これにより、先端２６に設けられた蛍光体３０を試料Ｓに接触させることができる。
本実施の形態に係る試料計測方法は、試料Ｓの状態を計測する工程（ステップＳ４０）を含む。本工程では、図５（Ｅ）に示すように、マルチウエルプレート１０の下側から蛍光体３０に励起光を照射するとともに、マルチウエルプレート１０の下側から蛍光体３０の蛍光を受光し、所定の演算を行うことによって、試料Ｓの状態を計測する。(3) Sample Measurement Method The sample measurement method according to the present embodiment first includes a step of culturing adhesion-dependent cells C in each well 12 of the multi-well plate 10 (step S10). Specifically, as shown in FIG. 5A, the medium M adjusted for cell culture is injected into each well 12 of the multi-well plate 10 and the cells are seeded, and left in a CO 2 incubator. . As a result, as shown in FIG. 5B, the cells C can be adhered and cultured in the wells 12 (bottom surface and inner surface) of the multi-well plate 10.
Next, the reagent X is added to each well 12 (step S20). The reagent may be added to the medium M as shown in FIG. 5C, or may be added after removing the medium or after replacing the medium. Thereby, a multi-well plate in which the liquid sample S is injected into each well can be prepared. The same reagent X may be added to all the wells 12, but may be changed for each well 12 (for each group of wells 12). At this time, the amount (concentration) of the reagent can be changed for each well 12, and the type of the reagent can be changed for each well 12.
The sample measurement method according to the present embodiment includes a step of covering the multiwell plate 10 with a lid 20 (Step S30). In this step, the tip 26 of the convex portion 22 provided on the lid 20 is brought into contact with the sample S as shown in FIG. Thereby, the phosphor 30 provided at the tip 26 can be brought into contact with the sample S.
The sample measurement method according to the present embodiment includes a step (step S40) of measuring the state of the sample S. In this step, as shown in FIG. 5E, the phosphor 30 is irradiated with excitation light from the lower side of the multi-well plate 10, and the fluorescence of the phosphor 30 is received from the lower side of the multi-well plate 10. The state of the sample S is measured by performing a predetermined calculation.

試薬Ｘが、細胞Ｃに対して毒性を有する場合、細胞Ｃの活性が低下し、試料Ｓの溶存酸素の消費量が小さくなる。これに対して、試薬Ｘが細胞Ｃに対して毒性を有しない場合、細胞Ｃの活性は一定期間維持され、試料Ｓの溶存酸素が消費される。このことから、試料Ｓの溶存酸素の量を計測することによって、試薬Ｘの細胞Ｃに対する毒性の有無やその程度を検出することができる。  When the reagent X is toxic to the cell C, the activity of the cell C is reduced and the consumption of dissolved oxygen in the sample S is reduced. On the other hand, when the reagent X is not toxic to the cell C, the activity of the cell C is maintained for a certain period, and the dissolved oxygen of the sample S is consumed. From this, by measuring the amount of dissolved oxygen in the sample S, it is possible to detect whether or not the reagent X is toxic to the cells C and to what extent.

（４）作用効果
以下、本実施の形態が奏する作用効果について説明する。
本実施の形態では、試料Ｓの状態を計測するための蛍光体３０が、蓋２０の凸部２２の先端に設けられる。このことから、マルチウエルプレート１０のウエル１２に蛍光体を設ける必要がなくなるため、ウエル１２の内面の組成を均一にすることができ、接着依存性の細胞などを培養することが容易になるとともに、マルチウエルプレート１０の底面からの観察（顕微鏡観察など）が容易になる。また、本実施の形態では、蛍光体３０への励起光の照射と、蛍光の受光を、マルチウエルプレート１０の下側から（マルチウエルプレート１０の底面を介して）行う。これによると、簡易な構造の蓋２０を利用して、試料Ｓの状態を正確に計測することが可能になる。すなわち、この蓋２０を利用して蓋２０側から励起光の照射と蛍光の受光を行う場合、凸部２２内での光の反射や、近接する凸部２２を透過する光のクロストークが発生するおそれがあり、試料Ｓの状態を正確に計測することが難しくなる懸念がある。また、蓋２０（凸部２２）に光学素子や光ファイバーを設けるなどの工夫をすれば、試料Ｓの状態を正確に計測することが可能になるが、蓋２０の構造を簡素化することが難しくなる。これに対して蛍光体３０への励起光の照射と蛍光の受光をマルチウエルプレート１０の下側から行うことで、簡易な構造の蓋２０を利用して、試料Ｓの状態を正確に計測することが可能になる。
また、本実施の形態では、蓋２０に、各ウエル１２に対応した蛍光体３０（凸部２２）が備えられており、蓋２０を取り付けるだけの作業で、すべてのウエル１２内の試料Ｓの状態を計測することが可能になる。そのため、試料Ｓの状態を計測する工程を、効率よく実施することが可能になる。
なお、本実施の形態では、蛍光及び励起光は細胞Ｃを透過することになる。そのため、ウエル内で細胞が過密になる細胞などでは、計測に影響が出ることも懸念される。この場合には、細胞が過密にならない範囲で培養工程を終了させて計測工程を開始することで、試料Ｓの状態を精度よく計測することが可能になる。また、励起光及び蛍光に基づいて試料の状態を計測する方法には、蛍光の強度を利用する方法と、蛍光の位相差や消失時間に基づいて計測する方法とが存在する。本実施の形態では、蛍光の位相差や消失時間に基づいて試料の状態を計測する方法を適用することで、蛍光の強度変化の影響を受けにくくすることができ、細胞Ｃの培養が進んだ状態でも、試料Ｓの状態を正確に計測することが可能になる。(4) Operational Effects Hereinafter, the operational effects exhibited by the present embodiment will be described.
In the present embodiment, the phosphor 30 for measuring the state of the sample S is provided at the tip of the convex portion 22 of the lid 20. This eliminates the need to provide a phosphor in the well 12 of the multi-well plate 10, so that the composition of the inner surface of the well 12 can be made uniform, and it becomes easy to culture adhesion-dependent cells and the like. Observation from the bottom surface of the multiwell plate 10 (microscopic observation, etc.) becomes easy. In the present embodiment, the phosphor 30 is irradiated with excitation light and received with fluorescence from the lower side of the multi-well plate 10 (via the bottom surface of the multi-well plate 10). This makes it possible to accurately measure the state of the sample S using the lid 20 having a simple structure. That is, when the lid 20 is used to irradiate excitation light and receive fluorescence from the lid 20 side, reflection of light within the convex portion 22 and crosstalk of light transmitted through the adjacent convex portion 22 occur. There is a concern that it is difficult to accurately measure the state of the sample S. Further, if a device such as an optical element or an optical fiber is provided on the lid 20 (convex portion 22), the state of the sample S can be accurately measured, but it is difficult to simplify the structure of the lid 20. Become. On the other hand, by irradiating the phosphor 30 with excitation light and receiving fluorescence from the lower side of the multi-well plate 10, the state of the sample S is accurately measured using the lid 20 having a simple structure. It becomes possible.
Further, in the present embodiment, the lid 20 is provided with the phosphors 30 (convex portions 22) corresponding to the respective wells 12, and the samples S in all the wells 12 are simply attached to the lid 20. It becomes possible to measure the state. Therefore, the process of measuring the state of the sample S can be performed efficiently.
In the present embodiment, fluorescence and excitation light are transmitted through the cell C. For this reason, there is a concern that the measurement may be affected in cells in which the cells are congested in the well. In this case, it is possible to accurately measure the state of the sample S by ending the culturing process and starting the measuring process within a range where the cells do not become congested. In addition, as a method for measuring the state of a sample based on excitation light and fluorescence, there are a method using the intensity of fluorescence and a method measuring based on the phase difference and disappearance time of fluorescence. In the present embodiment, by applying a method for measuring the state of the sample based on the phase difference and disappearance time of the fluorescence, it can be made less susceptible to changes in the intensity of the fluorescence, and cell C culture has progressed. Even in the state, the state of the sample S can be accurately measured.

（５）変形例
以下、本発明を適用した実施の形態の変形例について説明する。
図６は、本発明を適用した実施の形態の第１の変形例について説明するための図である。
本変形例では、蓋６０は、凸部６２を有する。凸部６２は、平板状の先端部６４と、先端部６４を支持する棒状の支持体６６とを有する。言い換えると、凸部６２は、長さ方向に直交する断面において、先端部６４の断面積が、支持体６６の断面積よりも大きくなっている。これにより、蛍光体を設ける面積を大きくすることができるとともに、凸部６２が試料Ｓを排除する排除体積を小さくすることができる。そのため、試料Ｓの状態を正確に計測することが可能になるとともに、ウエル１２内での試料Ｓの液面のコントロールが容易になる。(5) Modifications Hereinafter, modifications of the embodiment to which the present invention is applied will be described.
FIG. 6 is a diagram for explaining a first modification of the embodiment to which the present invention is applied.
In the present modification, the lid 60 has a convex portion 62. The convex portion 62 includes a flat tip portion 64 and a rod-like support 66 that supports the tip portion 64. In other words, in the convex part 62, the cross-sectional area of the tip part 64 is larger than the cross-sectional area of the support body 66 in the cross section orthogonal to the length direction. As a result, it is possible to increase the area where the phosphor is provided, and to reduce the excluded volume where the convex portion 62 excludes the sample S. Therefore, the state of the sample S can be accurately measured, and the liquid level of the sample S in the well 12 can be easily controlled.

図７は、本発明を適用した実施の形態の第２の変形例について説明するための図である。
本変形例では、試料計測キットは、個別蓋７０を有する。本変形例では、個別蓋７０は、中心に貫通穴が形成された板状の部材である。個別蓋７０は、それぞれのウエル１２内に配置され、蓋２０の凸部２２が貫通穴を貫通する。なお、個別蓋７０は、試料Ｓよりも比重が軽くなるように構成されている。これにより、個別蓋７０は、試料Ｓの液面近傍に配置される。個別蓋７０が試料Ｓの液面近傍に配置されることにより、試料Ｓと気相との気液接触面積が小さくなることから、試料Ｓへの気体の溶け込みや、試料Ｓから気相への気体の放出を低減することができる。これにより、気相の影響を小さくして、試料Ｓの状態の変化を計測することができるため、例えば細胞Ｃの活性がより正確に反映された情報を計測することが可能になる。
なお、個別蓋７０は、ウエル１２の底部が気密になるように構成することも可能である。例えば個別蓋７０を、ウエル１２の内形と同じ形とすることで、ウエル１２の個別蓋７０よりも下側の領域を気密に維持することができる。これにより、気相の影響をより小さくすることが可能になる。
あるいは、試料計測キットは、図８に示すように、個別蓋７４を有する構成とすることも可能である。個別蓋７４は、蓋２０の凸部２２に固定されている。個別蓋７４は、試料Ｓの液面よりも上方に配置することも可能であり、試料Ｓと接触するように配置することも可能である。また、図８に示すように、本変形例では、ウエル１３が底に向かって径が小さくなるテーパー形状となっている。個別蓋７４の取り付け位置と大きさ、及び、ウエル１３の形状を調整することによって、ウエル１３内での個別蓋７４の位置を調整することができる。FIG. 7 is a diagram for explaining a second modification of the embodiment to which the present invention is applied.
In the present modification, the sample measurement kit has an individual lid 70. In this modification, the individual lid 70 is a plate-like member having a through hole formed in the center. The individual lid 70 is disposed in each well 12, and the convex portion 22 of the lid 20 passes through the through hole. The individual lid 70 is configured so that the specific gravity is lighter than that of the sample S. Thereby, the individual lid 70 is disposed in the vicinity of the liquid surface of the sample S. Since the individual lid 70 is disposed in the vicinity of the liquid surface of the sample S, the gas-liquid contact area between the sample S and the gas phase is reduced, so that the gas can be dissolved into the sample S or the sample S can be changed into the gas phase. Gas emission can be reduced. Thereby, since the influence of the gas phase can be reduced and a change in the state of the sample S can be measured, for example, information in which the activity of the cell C is reflected more accurately can be measured.
The individual lid 70 can also be configured such that the bottom of the well 12 is airtight. For example, by making the individual lid 70 the same shape as the inner shape of the well 12, the region below the individual lid 70 of the well 12 can be kept airtight. Thereby, the influence of the gas phase can be further reduced.
Alternatively, the sample measurement kit may be configured to have an individual lid 74 as shown in FIG. The individual lid 74 is fixed to the convex portion 22 of the lid 20. The individual lid 74 can be disposed above the liquid surface of the sample S, or can be disposed so as to be in contact with the sample S. Further, as shown in FIG. 8, in this modification, the well 13 has a tapered shape whose diameter decreases toward the bottom. By adjusting the attachment position and size of the individual lid 74 and the shape of the well 13, the position of the individual lid 74 in the well 13 can be adjusted.

図９は、本発明を適用した実施の形態の第３の変形例について説明するための図である。
本変形例では、培養と計測を同時に行う。言い換えると、本変形例では、試料Ｓの状態を計測しながら、ウエル１２内で、細胞や微生物などの培養を行う。そして、本変形例に係る試料計測方法は、培養によって経時的に変化する試料Ｓの状態を計測する。
本変形例に係る試料計測方法は、ウエル１２に、試料Ｓを注入する工程（ステップＳ５０）を含む。試料Ｓは、培養対象物（例えば微生物、動物細胞、植物細胞など）と、培地との混合液である。なお、計測の目的によっては、培養対象物に対する試薬を混合することも可能である。
本変形例に係る試料計測方法は、マルチウエルプレート１０に蓋２０をした状態で、試料Ｓを経時変化させる工程を含む（ステップＳ６０）。なお、本工程は、培養対象物に適した条件下で行われる。例えば本工程は、温調機能のついたＣＯ２インキュベーター内に所定期間静置することによって実現することができる。
本実施の形態に係る試料計測方法は、試料Ｓの状態を計測する工程（ステップＳ７０）を含む。本工程では、マルチウエルプレート１０の下側から蛍光体３０に励起光を照射するとともに、マルチウエルプレート１０の下側から蛍光体３０の蛍光を受光し、所定の演算を行うことによって、試料Ｓの状態を計測する。なお、本工程は、所定期間ごとに行ってもよく、連続的に行ってもよい。例えば、予め定められたタイミングでマルチウエルプレート１０を試料計測装置２の計測台５０に配置し、試料Ｓの状態を間欠的に計測することができる。あるいは、マルチウエルプレート１０を計測台５０に配置して経時変化させ、経時変化の様子を連続的に計測することも可能である。
なお、本工程では、試料Ｓの状態を計測する工程は、試料Ｓに含まれる特定成分の濃度を計測することによって実現することができる。具体的には、試料Ｓに含まれる溶存酸素濃度の情報として計測することも可能であるが、ｐＨや溶存二酸化炭素濃度として計測することも可能である。あるいは、試料Ｓの状態を、濁度情報として計測することも可能である。
この試料計測方法によると、ウエル１２ごとに、対象物の培養の成否を確認することができるため、培地や試薬の対象物への影響の有無を確認することが可能になる。
なお、本変形例では、試料Ｓの状態を計測する工程（ステップＳ７０）で、蛍光の消失時間に基づいて試料の状態を計測する方法を適用してもよいが、蛍光の強度に基づいて試料の状態を計測する方法を適用することも可能である。例えば対象物の培養が進んでウエル１２内で増殖が進めば、計測される蛍光の強度は小さくなる。そのため、蛍光の強度を利用することで、培養の進度を確認することが可能になる。FIG. 9 is a diagram for explaining a third modification of the embodiment to which the present invention is applied.
In this modification, culture and measurement are performed simultaneously. In other words, in this modification, cells, microorganisms, etc. are cultured in the well 12 while measuring the state of the sample S. And the sample measuring method which concerns on this modification measures the state of the sample S which changes with time by culture | cultivation.
The sample measurement method according to this modification includes a step of injecting the sample S into the well 12 (step S50). The sample S is a mixed solution of a culture object (for example, microorganisms, animal cells, plant cells, etc.) and a medium. Depending on the purpose of measurement, it is also possible to mix reagents for the culture object.
The sample measurement method according to the present modification includes a step of changing the sample S over time with the lid 20 on the multi-well plate 10 (step S60). In addition, this process is performed on the conditions suitable for a culture target. For example, this step can be realized by leaving it in a CO2 incubator with a temperature control function for a predetermined period.
The sample measurement method according to the present embodiment includes a step (step S70) of measuring the state of the sample S. In this step, the phosphor 30 is irradiated with excitation light from the lower side of the multi-well plate 10, and the fluorescence of the phosphor 30 is received from the lower side of the multi-well plate 10, and a predetermined calculation is performed. Measure the state. In addition, this process may be performed for every predetermined period and may be performed continuously. For example, the multi-well plate 10 can be arranged on the measuring table 50 of the sample measuring device 2 at a predetermined timing, and the state of the sample S can be measured intermittently. Alternatively, it is possible to place the multiwell plate 10 on the measurement table 50 and change it with time, and continuously measure the change with time.
In this step, the step of measuring the state of the sample S can be realized by measuring the concentration of the specific component contained in the sample S. Specifically, it can be measured as information on the dissolved oxygen concentration contained in the sample S, but it can also be measured as pH or dissolved carbon dioxide concentration. Alternatively, the state of the sample S can be measured as turbidity information.
According to this sample measurement method, the success or failure of the culture of the object can be confirmed for each well 12, so that it is possible to confirm whether or not the medium or reagent has an influence on the object.
In this modification, a method of measuring the state of the sample based on the disappearance time of the fluorescence may be applied in the step of measuring the state of the sample S (step S70). It is also possible to apply a method for measuring the state. For example, when the culture of the object progresses and the growth in the well 12 proceeds, the measured fluorescence intensity decreases. Therefore, the progress of culture can be confirmed by using the fluorescence intensity.

あるいは、その他の変形例として、蛍光体３０への励起光の照射と、蛍光の受光とを、光ファイバーを介して行うように構成することも可能である。すなわち、一端がマルチウエルプレート１０の各ウエル１２に対応する位置に配置され、他端が受発光手段に対向して設けられる光ファイバーを利用して、蛍光体３０への励起光の照射と、蛍光の受光とを行うことができる。
他端が受発光手段に対向して設けられる光ファイバーを利用して、蛍光体３０への励起光の照射と、蛍光の受光とを行うことができる。
あるいは、一つ又はウエル１２の数よりも少ない複数の受発光モジュール５２を用意して、これを走査させることにより、蛍光体３０への励起光の照射と、蛍光の受光を行うことも可能である。
あるいは、蛍光体３０への励起光の照射は、面発光デバイスを利用して実施してもよい。Alternatively, as another modification, it is possible to configure the phosphor 30 to be irradiated with excitation light and receive fluorescence through an optical fiber. That is, by using an optical fiber in which one end is disposed at a position corresponding to each well 12 of the multi-well plate 10 and the other end is opposed to the light receiving and emitting means, the phosphor 30 is irradiated with excitation light and fluorescent light. Can be received.
Using an optical fiber provided with the other end facing the light emitting / receiving means, the phosphor 30 can be irradiated with excitation light and received with fluorescence.
Alternatively, it is also possible to irradiate the phosphor 30 with excitation light and receive fluorescence by preparing one or a plurality of light receiving / emitting modules 52 smaller than the number of wells 12 and scanning them. is there.
Alternatively, the phosphor 30 may be irradiated with excitation light using a surface emitting device.

なお、受発光モジュール（計測台）は、図１０に示すように、光集積デバイス８０を有する構成とすることも可能である。光集積デバイス８０は、発光素子５４及び受光素子５６と、計測台との間に配置されるデバイスである。光集積デバイス８０は、光ファイバー８２と、光ファイバー８２の側面を覆う遮光筒８４とを有する。光集積デバイス８０は、光ファイバー８２の第１端部８６が発光素子５４及び受光素子５６と対向し、第２端部８８が試料計測キット１（蛍光体３０）と対向するように配置される。これによると、励起光の照射及び蛍光の受光は光ファイバー８２を通して行われることになり、励起光及び蛍光が拡散することなく集積されるため、検出感度を高めることが可能である。また、光ファイバー８２の側面を遮光筒８４で覆うことにより、さらに検出感度を高めることができる。さらに、本実施の形態によると、計測対象以外からの光（蛍光）が入り込むことを防止することができるため、より正確に試料の状態を計測することが可能になる。  Note that the light emitting / receiving module (measuring base) can also be configured to include an optical integrated device 80 as shown in FIG. The optical integrated device 80 is a device disposed between the light emitting element 54 and the light receiving element 56 and the measurement table. The optical integrated device 80 includes an optical fiber 82 and a light shielding tube 84 that covers the side surface of the optical fiber 82. The optical integrated device 80 is disposed such that the first end 86 of the optical fiber 82 faces the light emitting element 54 and the light receiving element 56 and the second end 88 faces the sample measurement kit 1 (phosphor 30). According to this, irradiation of excitation light and reception of fluorescence are performed through the optical fiber 82, and the excitation light and fluorescence are integrated without diffusing, so that the detection sensitivity can be increased. Further, by covering the side surface of the optical fiber 82 with the light shielding cylinder 84, the detection sensitivity can be further increased. Furthermore, according to the present embodiment, it is possible to prevent light (fluorescence) from other than the measurement target from entering, and thus it is possible to measure the state of the sample more accurately.

以上ここまで、本発明を、マルチウエルプレートに適用する実施形態について説明してきた。ただし本発明はこれに限られるものではなく、特に図示しないが、試験槽が１つのみのシステムにも利用することができる。  Up to this point, the embodiments in which the present invention is applied to multi-well plates have been described. However, the present invention is not limited to this, and although not particularly illustrated, the present invention can be used for a system having only one test tank.

１…試料計測キット、 ２…試料計測装置、 １０…マルチウエルプレート、 １２、１３…ウエル、 ２０…蓋、 ２２…凸部、 ２４…天板、 ２６…先端、 ３０…蛍光体、 ５０…計測台、 ５２…受発光モジュール、 ５４…発光素子、 ５６…受光素子、 ５８…制御部、 ６０…処理部、 ６２…凸部、 ６４…先端部、 ６６…支持体、 ７０…個別蓋、 ７４…個別蓋、 ８０…光集積デバイス、 ８２…光ファイバー、 ８４…遮光筒、 ８６…第１端部、 ８８…第２端部、 Ｃ…細胞、 Ｍ…培地、 Ｓ…試料、 Ｘ…試薬  DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Sample measuring kit, 2 ... Sample measuring device, 10 ... Multiwell plate, 12, 13 ... Well, 20 ... Lid, 22 ... Convex part, 24 ... Top plate, 26 ... Tip, 30 ... Phosphor, 50 ... Measurement Table 52. Light emitting and receiving module 54. Light emitting element 56. Light receiving element 58. Control part 60. Processing part 62. Projecting part 64 ... Tip part 66 ... Support body 70 ... Individual lid 74. Individual lid, 80 ... optical integrated device, 82 ... optical fiber, 84 ... light shielding tube, 86 ... first end, 88 ... second end, C ... cell, M ... medium, S ... sample, X ... reagent

Claims (10)

マルチウエルプレートを利用して液状の試料の状態を計測する方法であって、
各ウエルに液状の試料が注入されたマルチウエルプレートを用意する工程と、
前記マルチウエルプレートに蓋をする工程と、
前記試料の状態を計測する工程と、
を含み、
前記蓋は、前記マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の凸部を有し、
前記凸部は、前記蓋を前記マルチウエルプレートに取り付けたときに、その先端が前記各ウエルの底から離間しつつ前記試料に接触するように構成されており、
前記試料の状態を計測する工程は、前記マルチウエルプレートの下側から、前記凸部の先端に設けられた蛍光体に励起光を照射するとともに、その蛍光を受光する工程を含む試料計測方法。A method for measuring the state of a liquid sample using a multiwell plate,
Preparing a multi-well plate in which a liquid sample is injected into each well;
Capping the multi-well plate;
Measuring the state of the sample;
Including
The lid has a plurality of convex portions corresponding to each well of the multi-well plate,
The convex portion is configured such that when the lid is attached to the multi-well plate, the tip thereof is in contact with the sample while being separated from the bottom of each well,
The step of measuring the state of the sample includes a step of irradiating the phosphor provided at the tip of the convex portion with excitation light from the lower side of the multi-well plate and receiving the fluorescence. 請求項１に記載の試料計測方法において、
前記試料の状態を計測する工程は、
照射された励起光に対する受光された蛍光の光量または時間遅れまたは減衰速度を測定することを含む試料計測方法。The sample measurement method according to claim 1,
The step of measuring the state of the sample includes
A sample measurement method including measuring the amount of light or time delay or decay rate of fluorescence received with respect to irradiated excitation light. 請求項１又は請求項２に記載の試料計測方法において、
前記凸部は、平板状の先端部と、前記先端部を支持する棒状の支持部とを有し、前記蛍光体は前記先端部に設けられている試料計測方法。In the sample measurement method according to claim 1 or 2,
The convex portion includes a flat tip portion and a rod-like support portion that supports the tip portion, and the phosphor is provided at the tip portion. 請求項１から請求項３のいずれかに記載の試料計測方法において、
前記マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の個別蓋をさらに有する試料計測方法。In the sample measuring method according to any one of claims 1 to 3,
A sample measurement method further comprising a plurality of individual lids corresponding to each well of the multi-well plate. 請求項４に記載の試料計測方法において、
前記試料の状態を計測する工程は、前記個別蓋で前記ウエルの底部を気密にした状態で行う試料計測方法。The sample measurement method according to claim 4,
The step of measuring the state of the sample is a sample measurement method performed in a state where the bottom of the well is airtight with the individual lid. 請求項１から請求項５のいずれかに記載の試料計測方法において、
前記試料の状態を計測する工程は、前記試料の溶存酸素濃度、溶存二酸化炭素濃度、ｐＨ、濁度の少なくとも一つを計測することを含む試料計測方法。In the sample measuring method according to any one of claims 1 to 5,
The step of measuring the state of the sample is a sample measuring method including measuring at least one of dissolved oxygen concentration, dissolved carbon dioxide concentration, pH, and turbidity of the sample. マルチウエルプレートの蓋であって、
マルチウエルプレートの各ウエルに対応した複数の凸部と、
前記凸部の先端に設けられた蛍光体と、
を有し、
前記凸部は、前記蓋を前記マルチウエルプレートに取り付けたときに、その先端が前記各ウエルの底から離間しつつ前記各ウエルに注入された試料に接触するように構成されており、
前記マルチウエルプレートの下側から、前記蛍光体に励起光が照射されるとともに、その蛍光が受光されるマルチウエルプレートの蓋。A multi-well plate lid,
A plurality of convex portions corresponding to each well of the multi-well plate;
A phosphor provided at the tip of the convex part;
Have
The convex portion is configured such that when the lid is attached to the multi-well plate, the tip of the convex portion comes into contact with the sample injected into each well while being separated from the bottom of each well.
A lid of the multi-well plate that receives excitation light from the lower side of the multi-well plate and receives the fluorescence. 請求項７に記載の蓋と、マルチウエルプレートと、を有する試料計測キット。  A sample measurement kit comprising the lid according to claim 7 and a multiwell plate. 請求項８に記載の試料計測キットを含む試料計測装置。  A sample measuring device including the sample measuring kit according to claim 8. 液状の試料が注入された試験槽を用意する工程と、
前記試験槽内に、前記試験槽の底から離間しつつ前記試料に接触する蛍光体を設ける工程と、
前記試料の状態を計測する工程と、
を含み、
前記試料の状態を計測する工程は、前記試験槽の下側から、前記蛍光体に励起光を照射するとともに、その蛍光を受光する工程を含む試料計測方法。Preparing a test tank filled with a liquid sample;
Providing a phosphor in contact with the sample while being separated from the bottom of the test tank in the test tank;
Measuring the state of the sample;
Including
The step of measuring the state of the sample is a sample measuring method including a step of irradiating the phosphor with excitation light from the lower side of the test chamber and receiving the fluorescence.
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