JP6401307B2 - 細胞培養基板と、その製造方法及び用途 - Google Patents
細胞培養基板と、その製造方法及び用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6401307B2 JP6401307B2 JP2016572448A JP2016572448A JP6401307B2 JP 6401307 B2 JP6401307 B2 JP 6401307B2 JP 2016572448 A JP2016572448 A JP 2016572448A JP 2016572448 A JP2016572448 A JP 2016572448A JP 6401307 B2 JP6401307 B2 JP 6401307B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell culture
- cells
- monomer
- alkyl
- cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0068—General culture methods using substrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/02—Membranes; Filters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F30/00—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and containing phosphorus, selenium, tellurium or a metal
- C08F30/04—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and containing phosphorus, selenium, tellurium or a metal containing a metal
- C08F30/08—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and containing phosphorus, selenium, tellurium or a metal containing a metal containing silicon
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09D—COATING COMPOSITIONS, e.g. PAINTS, VARNISHES OR LACQUERS; FILLING PASTES; CHEMICAL PAINT OR INK REMOVERS; INKS; CORRECTING FLUIDS; WOODSTAINS; PASTES OR SOLIDS FOR COLOURING OR PRINTING; USE OF MATERIALS THEREFOR
- C09D143/00—Coating compositions based on homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and containing boron, silicon, phosphorus, selenium, tellurium, or a metal; Coating compositions based on derivatives of such polymers
- C09D143/04—Homopolymers or copolymers of monomers containing silicon
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0062—General methods for three-dimensional culture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0693—Tumour cells; Cancer cells
- C12N5/0695—Stem cells; Progenitor cells; Precursor cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/30—Synthetic polymers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
(i)本発明は、シクロシロキサン化合物が形成した重合体を含む細胞培養基板と、その製造方法、及び前記細胞培養基板を用いて細胞スフェロイド形態の細胞集合体または誘導万能幹細胞を製造する方法を提供する。
(ii)本発明の細胞培養基板上で細胞を培養することによって、容易に細胞スフェロイド形態の細胞集合体を形成させ、さらに前記細胞培養基板は、誘導万能幹細胞の製造のための細胞培養プラットフォームとして活用可能である。
Aは、
R1は、互いに独立して水素またはC2−10アルケニルであり(但し、R1のうち少なくとも2箇所は、C2−10アルケニルである);
R2は、互いに独立して水素、C1−10アルキル、C2−10アルケニル、ハロ、金属元素、C5−14ヘテロシクロ、C3−10シクロアルキル、またはC3−10シクロアルケニルである。
実施例1.重合体薄膜が表面コーティングされた細胞培養基板の製造
図1に示すように、化学気相蒸着反応器(iCVD、Daeki Hi−Tech Co.,Ltd)の単量体タンクに単量体であるV4D4(2,4,6,8−テトラメチル−2,4,6,8−テトラビニルシクロテトラシロキサン、Sigma−Aldrich)を入れ、70℃に加熱した。TBPO(tert−butyl peroxide、Sigma−Aldrich)を開始剤として、それを開始剤タンクに入れて常温で保持した。ポリスチレン細胞培養プレートを基板として蒸着を進行した。V4D4蒸着時に、V4D4単量体とTBPOとを1:1の比率(流量基準、単位:sccm)で化学気相蒸着反応器内に流しながら、反応器内のフィラメントの温度を200℃、反応器内の基板温度を40℃、反応器内のチャンバの圧力を200mbarに保持しながら、40分蒸着を行って、約200nm厚さのpV4D4(poly−V4D4)が蒸着された細胞培養基板を製造した。
重合体薄膜を蒸着した後、接触角の測定装備(Phoenix series,S.E.O.Co.Ltd)を用いて、各測定ごとに8μl蒸溜水の水泡を基板の表面に落とし、基板の表面接触角を測定した。
実施例1で製造した重合体薄膜が蒸着された細胞培養基板(皿)で細胞を培養した後、細胞スフェロイドの形成の有無を確認した。使った細胞は、図3に示したヒト由来の癌細胞、幹細胞、体細胞、及びラット由来の体細胞と癌細胞である。癌細胞の培養は、最小培地(CCMM)に10%(v/v)のウシ胎児血清(fetal bovine serum、Thermo)及び5%の1%(w/v)ペニシリン/ストレプトマイシン(penicilline streptomycin、Gibco)を添加した組成の培地を使って実施し、NIH3T3のような体細胞とhMSC(Human Mesenchymal stem cells)とhADSC(Human adipose−derived stem cells)のような幹細胞の培養は、下記の表1(ヒト幹細胞)及び表2(ラット幹細胞)に示した組成の培地(Gibco)を使って実施した。培養は、24時間実施した。
実施例1で製造した重合体薄膜が蒸着された細胞培養基板(皿)から得られた細胞スフェロイドを免疫蛍光染色法を通じて染色した。免疫蛍光染色法のために、細胞スフェロイドを0.1%ゼラチン(Gelatin)でコーティングされたカバーガラス(Cover glass)に移して一日間培養した。細胞を室温で10分間4%パラホルムアルデヒド(paraformaldehyde)を用いて固定させた。DPBS(Dulbecco`s Phosphate Buffered Saline)を用いて3回洗浄した後に、15分間室温で0.1%トリトン X−100(Triton X−100)に細胞透過させ、再びDPBSを用いて3回洗浄した。1次抗体の非特異的反応を防ぐために10分間1%BSA(Bovine serum albumin)を処理した。細胞をDPBS/0.1%BSAで希釈させたテネイシン(Tenascin)に付着する1次抗体(CHEMICON)を使って4℃で12時間反応した。洗浄後、細胞を1時間室温でDPBSに希釈させたFITC(Fluorescein isothiocyanate)が付着された2次抗体(SantaCruz)を使って反応した。洗浄した後、細胞をDPBSに2μg/mlで希釈させたHoechst 33342(Invitrogen)に5分間対比染色した。カバーガラスは、マウンティングミディアム(Mounting medium)を用いてスライドガラス(Slide glass)上に固定してニコン共焦点顕微鏡(Nikon confocal microscope)で分析した。使われた抗体を、表3に示した。
実施例1で製造した重合体薄膜が蒸着された細胞培養基板(皿)から得られた細胞スフェロイドを対象にして遺伝子分析を実施した。全体RNA(Ribonucleic acid)は、Hybrid−RTMキット(GeneAll)を使って形成された細胞スフェロイドから抽出した。cDNA合成は、AccuPower RocketScript RT−PCR premixキット(Bioneer)を使って行った。重合酵素連鎖反応(RT−PCR)を、次の条件によってThermal Cyclers PCR機械(Bio−Rad)を使って行った。42℃で60分間cDNA合成を、次いで95℃で5分間あらかじめ変性過程(pre−denaturation)を、再び95℃で30秒間変性(denaturaton)を、55℃で30秒間熱処理過程(annealing)を、72℃で10秒間延長過程(extension)を終えて変性過程への繰り返しを35周期(cycles)実施し、72℃で5分間最後延長した。使ったプライマーを、表4に示した。
実施例1で製造した重合体薄膜が蒸着された細胞培養基板(皿)から得られた細胞スフェロイドをタンパク質レベルで分析した。形成された細胞スフェロイドをタンパク質分解酵素抑制剤混合物(Thermo scientific)が含まれたRIPA緩衝液で溶解し、氷で15分間培養した後、4℃で10分間20,000gで遠心分離した。上澄み液を分離してBradford assayキット(Bio−Rad)を使ってタンパク質濃度を測定した。分離されたタンパク質をSDS PAGEに分画し、4℃で電気移動装置を用いてPVDF(Polyvinylidene fluoride)メンブレイン(Millipore)でタンパク質を移動させた。膜を室温で30分間0.1%トウイーン−20(Tween−20)と5%脱脂乳(Skim milk)とが含まれたPBSで反応させ、4℃で12時間5%脱脂乳が含まれたPBSに希釈された1次抗体(mouse anti−beta catenin、rabbit anti−survivin)を反応させた。0.1%トウイーン−20が含まれたPBSで3回洗浄した後、膜をHRP(Horseradish peroxidase)が付着された2次抗体(anti−mouse、anti−rabbit)で室温で1時間反応した。前記バンドをECL(Enhanced chemiluminescence、Thermo scientific)溶液で視覚化した。バンドをChemiDocTM MP System(Bio−Rad)を使ってタンパク質密度を分析し、ローディング対照群(GAPDH)バンドで標準化した。使われた抗体を、前記表3に示した。
Nanogが発現されれば、緑色蛍光タンパク質(Green fluorescence protein;GFP)が同時に発現されるように遺伝子変形された雌ラット(STOCK Tg(Nanog−GFP,Puro)1Yam(No.RBRC02290)、RIKEN BRC)で、妊娠後、16日目の胚芽状態のラットを採取して体細胞(Mouse embryonic fibroblast)を培養した。実施例1から製作された重合体薄膜が蒸着された細胞培養基板(皿)で7日間培養する間に、培養液を1回交換した。細胞培養液の場合、表2に示した培養成分が含まれたラット幹細胞の培養液を使った。培養7日目に形成された細胞スフェロイドは、共焦点顕微鏡で観察するために、固定液(4% paraformaldehyde)を使って固定し、該固定された細胞スフェロイドを共焦点顕微鏡(Zeiss confocal microscope)で観察した。
実施例1のように、化学気相蒸着反応器(iCVD、Daeki Hi−Tech Co.,Ltd)の単量体タンクに単量体である表5のシクロシロキサン(Sigma−Aldrich)を入れ、70℃に加熱した。TBPO(Sigma−Aldrich)を開始剤として、それを開始剤タンクに入れて常温で保持した。ポリスチレン細胞培養プレートを基板として蒸着を進行した。蒸着時に、単量体とTBPOとを1:1の比率(流量基準、単位:sccm)で化学気相蒸着反応器内に流しながら、反応器内のフィラメントの温度を200℃、反応器内の基板温度を40℃、反応器内のチャンバの圧力を200mbarに保持しながら、40分蒸着を行って、約200nm厚さのシクロシロキサン重合体が蒸着された細胞培養基板を製造した。
化学気相蒸着反応器(iCVD、Daeki Hi−Tech Co.,Ltd)の単量体タンクに第1単量体であるV4D4(Sigma−Aldrich)と表6から選択された第2単量体とを入れ、それぞれ加熱した。この際、加熱温度は、次の通りであった。V4D4:70℃、(1)番単量体:70℃、(2)番単量体:40℃、(3)番単量体:35℃、(4)番単量体:加熱しない(常温)、(5)番単量体:50℃、(6)番単量体:80℃、(7)番単量体:40℃、(8)番単量体:50℃、(9)番単量体:加熱しない(常温)、(10)番単量体:40℃、(11)番単量体:50℃、(12)番単量体:50℃。TBPO(Sigma−Aldrich)を開始剤として、それを開始剤タンクに入れて常温で保持した。ポリスチレン細胞培養プレートを基板として蒸着を進行した。V4D4と第2単量体の共重合体薄膜蒸着時に、V4D4単量体、第2単量体、そして、TBPOを9:1:9の比率(流量基準、単位:sccm)で反応器内に流しながら、反応器内のフィラメントの温度を200℃、反応器内の基板温度を40℃、反応器内のチャンバの圧力を250mbarに保持しながら、40分蒸着を行って、約200nm厚さの共重合体が蒸着された細胞培養プレートを得た。
Claims (10)
- シクロシロキサン化合物が形成した重合体を含む細胞培養基板であって、
前記シクロシロキサン化合物は、下記の化学式1で表され、
Aは、
R 1 は、互いに独立して水素またはC 2−10 アルケニルであり;
R 2 は、互いに独立して水素、C 1−10 アルキル、C 2−10 アルケニル、ハロ、金属元素、C 5−14 ヘテロシクロ、C 3−10 シクロアルキル、またはC 3−10 シクロアルケニルであり、
前記シクロシロキサンは、R 1 位置にn+1個またはn+2個のC 2−10 アルケニルを有する細胞培養基板。 - 前記シクロシロキサン化合物は、2,4,6,8−テトラ(C 1−10 )アルキル−2,4,6,8−テトラ(C 2−10 )アルケニルシクロテトラシロキサン、1,3,5−トリ(C 1−10 )アルキル−1,3,5−トリ(C 2−10 )アルケニルシクロトリシロキサン、1,3,5,7−テトラ(C 1−10 )アルキル−1,3,5,7−テトラ(C 2−10 )アルケニルシクロテトラシロキサン、1,3,5,7,9−ペンタ(C 1−10 )アルキル−1,3,5,7,9−ペンタ(C 2−10 )アルケニルシクロペンタシロキサン、1,3,5−トリ(C 1−10 )アルキル−1,3,5−トリ(C 2−10 )アルケニルシクロトリシロキサン、1,3,5,7−テトラ(C 1−10 )アルキル−1,3,5,7−テトラ(C 2−10 )アルケニルシクロテトラシロキサン、1,3,5,7,9−ペンタ(C 1−10 )アルキル−1,3,5,7,9−ペンタ(C 2−10 )アルケニルシクロペンタシロキサン、1,3,5−トリ(C 1−10 )アルキル−1,3,5−トリ(C 2−10 )アルケニルシクロトリシロキサン、1,3,5,7−テトラ(C 1−10 )アルキル−1,3,5,7−テトラ(C 2−10 )アルケニルシクロテトラシロキサン、1,3,5,7,9−ペンタ(C 1−10 )アルキル−1,3,5,7,9−ペンタ(C 2−10 )アルケニルシクロペンタシロキサン、ヘキサ(C 2−10 )アルケニルシクロトリシロキサン、オクタ(C 2−10 )アルケニルシクロテトラシロキサン、デカ(C 2−10 )アルケニルシクロペンタシロキサン、及びこれらの組合せで構成された群から選択されることを特徴とする請求項1に記載の細胞培養基板。
- 前記シクロシロキサン化合物が形成した重合体は、前記シクロシロキサン化合物である第1単量体と、これと重合することができる第2単量体と、が形成した共重合体であることを特徴とする請求項1に記載の細胞培養基板。
- 前記第2単量体は、第1単量体と異なるシクロシロキサン化合物であることを特徴とする請求項3に記載の細胞培養基板。
- 前記第2単量体は、第1単量体との重合のための炭素二重結合を有する化合物であることを特徴とする請求項3に記載の細胞培養基板。
- 前記第2単量体は、ビニル基を有するシロキサン、メタクリレート系単量体、アクリレート系単量体、芳香族ビニル系単量体、アクリルアミド系単量体、無水マレイン酸、ビニル基を有するシラザンまたはシクロシラザン、ビニル基を有するC 3−10 シクロアルカン、ビニルピロリドン、2−(メタクリロイルオキシ)アセト酢酸エチル、1−(3−アミノプロピル)イミダゾール、ビニルイミダゾール、ビニルピリジン、ビニル基を有するシラン、及びこれらの組合せで構成された群から選択されることを特徴とする請求項5に記載の細胞培養基板。
- 前記細胞培養基板は、細胞スフェロイド形態の細胞集合体の製造用であることを特徴とする請求項1に記載の細胞培養基板。
- 請求項1から7のいずれかに記載の細胞培養基板上で細胞を培養する段階を含む細胞スフェロイド形態の細胞集合体の製造方法。
- 前記細胞は、体細胞、生殖細胞、癌細胞または幹細胞であることを特徴とする請求項8に記載の製造方法。
- 請求項1に記載の化学式1で表されるシクロシロキサン化合物を単量体として含む重合体薄膜を蒸着を通じて基板上に形成させる段階を含む請求項1から9のいずれかに記載の細胞培養基板の製造方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR20140069970 | 2014-06-10 | ||
KR10-2014-0069970 | 2014-06-10 | ||
PCT/KR2014/007113 WO2015190644A1 (ko) | 2014-06-10 | 2014-08-01 | 세포배양 기판, 이의 제조방법 및 용도 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017517267A JP2017517267A (ja) | 2017-06-29 |
JP6401307B2 true JP6401307B2 (ja) | 2018-10-10 |
Family
ID=54833718
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016572448A Expired - Fee Related JP6401307B2 (ja) | 2014-06-10 | 2014-08-01 | 細胞培養基板と、その製造方法及び用途 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20170130195A1 (ja) |
JP (1) | JP6401307B2 (ja) |
KR (1) | KR20150142564A (ja) |
WO (1) | WO2015190644A1 (ja) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102150108B1 (ko) * | 2016-07-05 | 2020-08-31 | 한국과학기술원 | 세포시트 제작방법 및 응용을 위한 고분자 박막 배양플레이트 제작방법 및 용도 |
JP2018201403A (ja) * | 2017-06-02 | 2018-12-27 | 日本ゼオン株式会社 | 幹細胞の培養方法 |
WO2019151625A1 (ko) * | 2018-01-31 | 2019-08-08 | 한국과학기술원 | 암줄기세포 스페로이드 제조방법 |
KR102123550B1 (ko) * | 2018-01-31 | 2020-06-16 | 한국과학기술원 | 암줄기세포 스페로이드 제조방법 |
EP3813853A4 (en) * | 2018-06-29 | 2022-04-06 | Platelet Biogenesis, Inc. | DELIVERY COMPOSITIONS AND METHODS OF USE |
KR102221458B1 (ko) * | 2018-12-26 | 2021-03-03 | 주식회사 넥스트앤바이오 | 하이드로젤을 사용하지 않는 유도만능줄기세포 제조방법 |
KR102218683B1 (ko) * | 2019-07-18 | 2021-02-22 | 한국과학기술원 | 실록산 중합체 기반 암줄기세포 제조 방법 |
KR20220103653A (ko) * | 2021-01-15 | 2022-07-22 | 한국과학기술원 | 줄기세포 스페로이드 제조용 기판 및 이를 이용한 줄기세포 스페로이드 제조방법 |
CN114774354B (zh) * | 2022-05-23 | 2024-03-01 | 中山大学附属第三医院 | 一种细胞球的制备方法及应用 |
Family Cites Families (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5196498A (en) * | 1991-09-24 | 1993-03-23 | Hercules Incorporated | Organosilicon polymers |
US5298589A (en) * | 1992-07-16 | 1994-03-29 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Highly functionalized polycyclosiloxanes and their polymerization into thermally reversible living rubbers |
US6214937B1 (en) * | 1999-03-26 | 2001-04-10 | The University Of Akron | Star-block polymers having multiple polyisobutylene-containing diblock copolymer arms radiating from a siloxane core and method for the synthesis thereof |
AU2002356567A1 (en) * | 2001-10-16 | 2003-04-28 | The University Of Akron | Poly(cyclosiloxane) composition and synthesis |
US8344170B2 (en) * | 2002-08-16 | 2013-01-01 | The University Of Akron | Poly (cyclosiloxane) composition and method of synthesis thereof |
AU2003282988A1 (en) * | 2002-10-21 | 2004-05-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Pecvd of organosilicate thin films |
TWI282124B (en) * | 2002-11-28 | 2007-06-01 | Tosoh Corp | Insulating film material containing an organic silane compound, its production method and semiconductor device |
US7462678B2 (en) * | 2003-09-25 | 2008-12-09 | Jsr Corporation | Film forming composition, process for producing film forming composition, insulating film forming material, process for forming film, and silica-based film |
WO2006083339A1 (en) * | 2005-02-01 | 2006-08-10 | Dow Corning Corporation | Curable coating compositions |
JP4828171B2 (ja) * | 2005-07-08 | 2011-11-30 | 株式会社メニコン | 環状シロキサン化合物を重合して得られる眼科用レンズ、細胞または臓器の培養基材、生体物容器、透明ゲルおよびその製造方法 |
JP2008289362A (ja) * | 2005-09-01 | 2008-12-04 | Univ Of Tokyo | マイクロパターニング培養基板、マイクロパターニング培養構築物及びこれらの作成方法 |
US8048977B2 (en) * | 2006-04-28 | 2011-11-01 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Organosilicon polymers |
JP5248033B2 (ja) * | 2007-04-23 | 2013-07-31 | 株式会社Adeka | ケイ素含有化合物、硬化性組成物及び硬化物 |
JP5155244B2 (ja) * | 2009-04-21 | 2013-03-06 | 株式会社Adeka | 細胞培養基板 |
US9458536B2 (en) * | 2009-07-02 | 2016-10-04 | Sio2 Medical Products, Inc. | PECVD coating methods for capped syringes, cartridges and other articles |
KR101129090B1 (ko) * | 2009-09-01 | 2012-04-13 | 성균관대학교산학협력단 | 패턴화된 세포 배양용 기판의 제조방법, 패턴화된 세포 배양용 기판, 세포의 패턴화된 배양 방법, 및 패턴화된 세포칩 |
EP2617807B1 (en) * | 2010-09-14 | 2020-10-21 | Agc Techno Glass Co., Ltd. | Culture substrate |
JP5877081B2 (ja) * | 2011-02-08 | 2016-03-02 | 株式会社カネカ | 多面体構造ポリシロキサン変性体、該変性体を含有する組成物、該組成物を用いてなる封止剤、および光学デバイス |
JP2012249547A (ja) * | 2011-05-31 | 2012-12-20 | Oji Holdings Corp | 細胞培養用基材及びその製造方法 |
WO2013052181A2 (en) * | 2011-06-17 | 2013-04-11 | Ndsu Research Foundation | Functionalized silicones with polyalkylene oxide side chains |
KR101355001B1 (ko) | 2011-10-21 | 2014-01-27 | 아주대학교산학협력단 | 미세구조의 세포배양 기판 |
JP6011230B2 (ja) * | 2011-10-25 | 2016-10-19 | セントラル硝子株式会社 | シロキサン系組成物およびその硬化物ならびにその用途 |
US20130280442A1 (en) * | 2012-04-03 | 2013-10-24 | Gvd Corporation | Adhesion Promotion of Vapor Deposited Films |
KR101401601B1 (ko) * | 2012-08-17 | 2014-06-02 | 한국과학기술원 | iCVD 공정을 이용한 절연막 형성 방법 |
-
2014
- 2014-08-01 WO PCT/KR2014/007113 patent/WO2015190644A1/ko active Application Filing
- 2014-08-01 JP JP2016572448A patent/JP6401307B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-08-01 KR KR1020140099059A patent/KR20150142564A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-08-01 US US15/318,134 patent/US20170130195A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20170130195A1 (en) | 2017-05-11 |
KR20150142564A (ko) | 2015-12-22 |
WO2015190644A1 (ko) | 2015-12-17 |
JP2017517267A (ja) | 2017-06-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6401307B2 (ja) | 細胞培養基板と、その製造方法及び用途 | |
Wang et al. | Robust differentiation of human pluripotent stem cells into endothelial cells via temporal modulation of ETV2 with modified mRNA | |
Fonoudi et al. | A universal and robust integrated platform for the scalable production of human cardiomyocytes from pluripotent stem cells | |
Wang et al. | Cardiac induction of embryonic stem cells by a small molecule inhibitor of Wnt/β-catenin signaling | |
Dahlmann et al. | The use of agarose microwells for scalable embryoid body formation and cardiac differentiation of human and murine pluripotent stem cells | |
Mummery et al. | Differentiation of human embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells to cardiomyocytes: a methods overview | |
Dick et al. | Evaluating the utility of cardiomyocytes from human pluripotent stem cells for drug screening | |
Ban et al. | Current strategies and challenges for purification of cardiomyocytes derived from human pluripotent stem cells | |
JP7097814B2 (ja) | ヒト心室前駆細胞の生着のための遺伝子マーカー | |
Yang et al. | FKBP4 is regulated by HOXA10 during decidualization and in endometriosis | |
Martinez-Fernandez et al. | c-MYC-independent nuclear reprogramming favors cardiogenic potential of induced pluripotent stem cells | |
Marinho et al. | Xeno-free production of human embryonic stem cells in stirred microcarrier systems using a novel animal/human-component-free medium | |
WO2005090557A1 (ja) | 多能性幹細胞の増殖方法 | |
JP2014082956A (ja) | 細胞培養基材、およびそれを用いた細胞培養方法並びに多能性幹細胞の分化誘導方法 | |
Ginsberg et al. | Direct conversion of human amniotic cells into endothelial cells without transitioning through a pluripotent state | |
US20150079626A1 (en) | Method of obtaining a cell population containing cancer stem cells | |
JP6858757B2 (ja) | 心臓内膜由来成体幹細胞から製造された誘導多能性幹細胞の心血管系細胞への分化方法およびその用途 | |
Li et al. | Generation of mesenchymal stem cells from human embryonic stem cells in a complete serum-free condition | |
KR102123550B1 (ko) | 암줄기세포 스페로이드 제조방법 | |
JP2013126405A (ja) | 細胞培養基材、およびそれを用いた細胞培養方法並びに多能性幹細胞の分化誘導方法 | |
Huang et al. | Isolation and Functional Characterization of Pluripotent Stem Cell–Derived Cardiac Progenitor Cells | |
WO2005108557A1 (ja) | 前駆間葉系幹細胞 | |
Lin et al. | Differentiating human pluripotent stem cells into vascular smooth muscle cells in three dimensional thermoreversible hydrogels | |
Diecke et al. | Second generation codon optimized minicircle (CoMiC) for nonviral reprogramming of human adult fibroblasts | |
JP6478464B2 (ja) | 多能性幹細胞から脳血管内皮細胞を製造する方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170217 |
|
A80 | Written request to apply exceptions to lack of novelty of invention |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A801 Effective date: 20170217 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A80 Effective date: 20170220 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180123 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180423 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180821 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180906 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6401307 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |