JP6351814B1 - Topical skin preparation - Google Patents

Abstract

【課題】特定の植物抽出物を併用することにより、コラーゲン産生能が相乗的に向上し、高い老化防止効果を発揮する皮膚外用剤を提供することを課題とする。【解決手段】下記（Ａ）〜（Ｅ）を含有する皮膚外用剤を提供する。（Ａ）トウキ抽出物（Ｂ）ローマカミツレ抽出物（Ｃ）シャクヤク抽出物（Ｄ）チョウジ抽出物（Ｅ）シロバナルーピン抽出物またさらに、コラーゲン加水分解物及びその誘導体、並びにコラーゲンを構成するアミノ酸及びその誘導体から選択される１種又は２種以上を含有する皮膚外用剤を提供する。【選択図】 なしAn object of the present invention is to provide a skin preparation for external use that synergistically improves collagen production ability and exhibits a high anti-aging effect by using a specific plant extract together. An external preparation for skin containing the following (A) to (E) is provided. (A) Toki extract (B) Roman chamomile extract (C) Peonies extract (D) Clove extract (E) Shirobanarupin extract or collagen hydrolyzate and derivatives thereof, and amino acids constituting collagen Provided is a skin external preparation containing one or more selected from derivatives thereof. [Selection figure] None

Description

本発明は、トウキ抽出物、ローマカミツレ抽出物、シャクヤク抽出物、チョウジ抽出物、及びシロバナルーピン抽出物を含有する組成物に関する。   The present invention relates to a composition comprising a Toki extract, a Roman chamomile extract, a peony extract, a clove extract, and a Shirobanarupin extract.

トウキ抽出物とエーデルワイス抽出物、を含有する皮膚外用剤が、保湿効果、老化防止効果を有することが知られている（特許文献１）。
ローマカミツレ抽出物が、ＡＰＪ活性化作用を有し、痩身を目的とする美容学的方法にも用いられることが知られている（特許文献２）。
シャクヤク抽出物が、皮膚バリア機能を増強する作用を有することが知られている（特許文献３）。
チョウジ抽出物と、エーデルワイス抽出物、サクラソウ属植物抽出物、ヒカゲノカズラ属植物抽出物を含有する皮膚外用剤が、保湿効果、老化防止効果を有することが知られている（特許文献１、特許文献４、特許文献５）。
シロバナルーピンの種子からの抽出物を皮膚外用剤に配合することが知られている（特許文献６）。
また、植物抽出物を併用して皮膚外用剤に配合することも数多く検討されている。しかしながら、植物抽出物は単に併用すれば効果が相乗的に向上するものではなく、相加的に効果が向上するもの、効果を相殺するものなど、その併用による効果は、予測不可能な効果であり、より少量で、より高い効果の得られる植物抽出物の併用に関するニーズは非常に高い。 It is known that an external preparation for skin containing Toki extract and Edelweiss extract has a moisturizing effect and an anti-aging effect (Patent Document 1).
It is known that Roman chamomile extract has an APJ activating action and can be used in cosmetic methods aimed at slimming (Patent Document 2).
It is known that the peony extract has an action of enhancing the skin barrier function (Patent Document 3).
It is known that an external preparation for skin containing a clove extract, an edelweiss extract, a primrose plant extract, and a genus plant extract has a moisturizing effect and an anti-aging effect (Patent Documents 1 and 4) Patent Document 5).
It is known that an extract from the seeds of Shirobanarupin is added to a skin external preparation (Patent Document 6).
In addition, many attempts have been made to combine a plant extract with a topical skin preparation. However, plant extracts do not improve synergistically if they are used in combination, but the effects of the combined use, such as those that additively improve the effects and those that offset the effects, are unpredictable effects. Yes, there is a great need for the combined use of plant extracts that are more effective in smaller amounts.

特開２０１６−８１８７号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2006-8187 特開特開２０１３−２０９３３９号公報JP, 2013-209339, A 特開２００８−０３１０４９号公報JP 2008-031049 A 特開２０１６−８１８６号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2006-8186 特開２０１６−８１８５号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2006-8185 特開平１０−７５１８号公報Japanese Patent Laid-Open No. 10-7518

特定の植物を併用することにより、コラーゲン産生能が相乗的に向上し、高い老化防止効果を発揮する皮膚外用剤を提供することを課題とする。   It is an object of the present invention to provide an external preparation for skin that synergistically improves collagen production ability and exhibits a high anti-aging effect by using a specific plant in combination.

下記（Ａ）〜（Ｆ）を含有する皮膚外用剤。
（Ａ）トウキ抽出物
（Ｂ）ローマカミツレ抽出物
（Ｃ）シャクヤク抽出物
（Ｄ）チョウジ抽出物
（Ｅ）シロバナルーピン抽出物
（Ｆ）アセチルヒドロキシプロリンとグリシンとコラーゲン由来ジペプチドとコラーゲン由来トリペプチドと重量平均分子量３０万の水溶性コラーゲンとを含有するコラーゲン混合物
A skin external preparation containing the following (A) to ( F ).
(A) Toki extract (B) Roman chamomile extract (C) Peonies extract (D) Clove extract (E) Shirobanarupin extract (F) Acetyl hydroxyproline, glycine, collagen-derived dipeptide, collagen-derived tripeptide, Collagen mixture containing water-soluble collagen having a weight average molecular weight of 300,000

本発明の皮膚外用剤は、皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン産生作用が相乗的に向上し、高い老化防止効果を発揮する。   The external preparation for skin of the present invention synergistically improves collagen production in dermal fibroblasts and exhibits a high anti-aging effect.

以下本発明を実施するための形態を説明する。   Hereinafter, modes for carrying out the present invention will be described.

本発明の皮膚外用剤の一形態としては、トウキ抽出物、ローマカミツレ抽出物、シャクヤク抽出物、チョウジ抽出物、及びシロバナルーピン抽出物を必須成分として含有する。   As one form of the external preparation for skin of this invention, a Toki extract, a Roman chamomile extract, a peony extract, a clove extract, and a Shirobanarupin extract are contained as an essential component.

本発明の皮膚外用剤に配合するトウキ抽出物としては、トウキ属植物の抽出物で皮膚外用剤に配合し得るものであれば特に限定されないが、ホッカイトウキを用いることがその効果の点から最も好ましい。トウキの抽出部位は特に限定されず、全草、葉、茎、花、実、根から選択される１種又は２種以上の部位を用いることができ、好ましくは根を用いる。また本発明においては、トウキ属植物の中でも、ホッカイトウキを用いることが効果の点から最も好ましい。   The touki extract to be blended with the external preparation for skin of the present invention is not particularly limited as long as it is an extract of the plant of the genus Toki and can be blended with the external preparation for skin. preferable. The extraction site | part of a touki is not specifically limited, The 1 type (s) or 2 or more types site | part selected from the whole grass, a leaf, a stem, a flower, a fruit, and a root can be used, Preferably a root is used. In the present invention, among the plants belonging to the genus Toki, it is most preferable from the viewpoint of the effect to use Hockitouki.

本発明において使用する上記トウキ抽出物を調製する方法について以下に述べるが、これらの抽出溶媒及び抽出方法に限定されるものではない。抽出溶媒としては、水、エタノール、メタノール、イソプロパノール、イソブタノール、ｎ−ヘキサノール、メチルアミルアルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクチルアルコールなどのアルコール類、グリセリン、エチレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコール、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、トリエチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ヘキシレングリコール、ペンチレングリコール等の多価アルコール又はその誘導体、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、メチル−ｎ−プロピルケトンなどのケトン類、酢酸エチル、酢酸イソプロピルなどのエステル類、エチルエーテル、イソプロピルエーテル、ｎ−ブチルエーテル等のエーテル類などの極性溶媒から選択される１種又は２種以上の混合溶媒が好適に使用でき、また、リン酸緩衝生理食塩水を用いることができる。或いは、石油エーテル、ｎ−ヘキサン、ｎ−ペンタン、ｎ−ブタン、ｎ−オクタン、シクロヘキサン、スクワラン等の炭化水素類、四塩化炭素、クロロホルム、ジクロロメタン、トリクロロエチレン、ベンゼン、トルエンなどの低極性もしくは無極性溶媒から選択される１種又は２種以上の混合溶媒も好適に使用することもできる。さらには、水や二酸化炭素、エチレン、プロピレン、エタノール、メタノール、アンモニアなどの１種又は２種以上の超臨界流体や亜臨界流体も用いることもできる。   Although the method for preparing the above-mentioned Toki extract used in the present invention is described below, it is not limited to these extraction solvents and extraction methods. As an extraction solvent, water, ethanol, methanol, isopropanol, isobutanol, n-hexanol, methyl amyl alcohol, 2-ethylbutanol, n-octyl alcohol and other alcohols, glycerin, ethylene glycol, ethylene glycol monomethyl ether, ethylene glycol Polyethyl alcohol such as monoethyl ether, propylene glycol, propylene glycol monomethyl ether, propylene glycol monoethyl ether, triethylene glycol, 1,3-butylene glycol, hexylene glycol, pentylene glycol or derivatives thereof, acetone, methyl ethyl ketone, methyl Ketones such as isobutyl ketone and methyl-n-propyl ketone, esters such as ethyl acetate and isopropyl acetate, Chirueteru, isopropyl ether, one or more mixed solvents selected from polar solvents such as ethers such as n- butyl ether can be preferably used, also can be used in phosphate buffered saline. Or low polarity or nonpolarity such as petroleum ether, n-hexane, n-pentane, n-butane, n-octane, cyclohexane, squalane and other hydrocarbons, carbon tetrachloride, chloroform, dichloromethane, trichloroethylene, benzene, toluene One or two or more mixed solvents selected from solvents can also be suitably used. Furthermore, 1 type, or 2 or more types of supercritical fluids and subcritical fluids, such as water, a carbon dioxide, ethylene, propylene, ethanol, methanol, ammonia, can also be used.

抽出方法としては、常圧、若しくは加圧，減圧下で、室温、冷却又は加熱した状態で含浸させて抽出する方法、水蒸気蒸留などの蒸留法を用いて抽出する方法、トウキを圧搾して抽出物を得る圧搾法などが例示され、これらの方法を単独で、又は２種以上を組み合わせて抽出を行うこともできる。   As extraction methods, extraction is performed by impregnation under normal pressure or under pressure or reduced pressure at room temperature, in a cooled or heated state, a method of extraction using a distillation method such as steam distillation, or extraction by extraction of Toki. An example is a squeezing method for obtaining a product, and these methods can be used alone or in combination of two or more.

このようにして得られたトウキ抽出物は、抽出物をそのまま用いることもできるが、その効果を失わない範囲で、脱臭、脱色、濃縮などの精製操作を加えたり、さらにはカラムクロマトグラフィーなどを用いて分画物として用いてもよい。これらの抽出物や、その精製物、分画物は、これらから溶媒を除去することによって乾固物とすることもでき、さらに、アルコールなどの溶媒に可溶化した形態、或いは乳剤の形態で用いることができる。   The extract obtained as described above can be used as it is, but within the range where the effect is not lost, purification operations such as deodorization, decolorization and concentration are added, and further, column chromatography and the like are performed. May be used as a fraction. These extracts, purified products, and fractions thereof can be dried by removing the solvent from them, and further used in a form solubilized in a solvent such as alcohol or in the form of an emulsion. be able to.

本発明においては、ホッカイトウキの９５容量％エタノール水溶液抽出物を用いることが好ましい。   In the present invention, it is preferable to use a 95 vol% aqueous ethanol extract of beetle.

本発明の皮膚外用剤に配合するローマカミツレ抽出物としては、皮膚外用剤に配合し得るものであれば特に限定されない。ローマカミツレの抽出部位は特に限定されず、全草、葉、茎、花、実、根から選択される１種又は２種以上の部位を用いることができ、好ましくは花を用いる。抽出溶媒、抽出方法としては、上述のトウキの場合と同様である。好ましい抽出溶媒としては９５容量％エタノール水溶液を挙げることができる。   The Roman chamomile extract to be blended with the external preparation for skin of the present invention is not particularly limited as long as it can be blended with the external preparation for skin. The extraction site of Roman chamomile is not particularly limited, and one or more sites selected from whole grass, leaves, stems, flowers, fruits, and roots can be used, and flowers are preferably used. The extraction solvent and extraction method are the same as in the case of the above-mentioned Toki. As a preferable extraction solvent, a 95% by volume ethanol aqueous solution can be mentioned.

本発明の皮膚外用剤に配合するシャクヤク抽出物としては、皮膚外用剤に配合し得るものであれば特に限定されない。シャクヤクの抽出部位は特に限定されず全草、葉、茎、花、実、根から選択される１種又は２種以上の部位を用いることができ、好ましくは根を用いる。抽出溶媒、抽出方法としては、上述のトウキの場合と同様である。好ましい抽出溶媒としては５０容量％エタノール水溶液を挙げることができる。   The peony extract to be blended with the external preparation for skin of the present invention is not particularly limited as long as it can be blended with the external preparation for skin. The extraction site | part of a peony is not specifically limited, The 1 type (s) or 2 or more types site | part selected from the whole grass, a leaf, a stem, a flower, a fruit, and a root can be used, Preferably a root is used. The extraction solvent and extraction method are the same as in the case of the above-mentioned Toki. As a preferable extraction solvent, 50 volume% ethanol aqueous solution can be mentioned.

本発明の皮膚外用剤に配合するチョウジ抽出物としては、皮膚外用剤に配合し得るものであれば特に限定されない。チョウジの抽出部位は特に限定されず、全草、葉、茎、花、つぼみ、実、根から選択される１種又は２種以上の部位を用いることができ、好ましくはつぼみを用いる。抽出溶媒、抽出方法としては、上述のトウキの場合と同様である。好ましい抽出溶媒としては５０容量％エタノール水溶液を挙げることができる。   The clove extract to be blended with the external preparation for skin of the present invention is not particularly limited as long as it can be blended with the external preparation for skin. The extraction site of clove is not particularly limited, and one or more sites selected from whole grass, leaves, stems, flowers, buds, berries and roots can be used, and preferably buds are used. The extraction solvent and extraction method are the same as in the case of the above-mentioned Toki. As a preferable extraction solvent, 50 volume% ethanol aqueous solution can be mentioned.

本発明の皮膚外用剤においては、上記５種の植物抽出物を併用して用いる。植物抽出物の配合量はそれぞれ皮膚外用剤全量に対し、０．００１〜０．５質量％が好ましい。０．０１質量％未満の配合では老化防止効果が発揮されない場合がある。０．５質量％を超えて配合してもそれ以上の老化防止効果の向上が認められず非効率的である。   In the external preparation for skin of the present invention, the above five kinds of plant extracts are used in combination. The blending amount of the plant extract is preferably 0.001 to 0.5% by mass with respect to the total amount of the external preparation for skin. If it is less than 0.01% by mass, the anti-aging effect may not be exhibited. Even if it exceeds 0.5% by mass, no further improvement in anti-aging effect is observed, which is inefficient.

本発明の皮膚外用剤には、上記５種の植物抽出物に加えて、さらにコラーゲン加水分解物及びその誘導体、並びにコラーゲンを構成するアミノ酸及びその誘導体から選択される１種又は２種以上を併用して用いることにより、コラーゲン産生促進作用が相乗的に向上する。   In addition to the above five plant extracts, the topical skin preparation of the present invention is further used in combination with one or more selected from collagen hydrolyzate and derivatives thereof, and amino acids constituting collagen and derivatives thereof As a result, the collagen production promoting action is synergistically improved.

コラーゲン加水分解物を得るためのコラーゲンの起源としては、牛、豚、鳥などの獣の他、魚類、貝類、クラゲ類、海綿類などが挙げられ、安全性・安定性の問題、匂いの問題、生産性・経済性の観点から、海洋性の生物、特にティラピア、サメ、サケ、タイ類、スズキ等の魚類を起源とするコラーゲンが好ましい。コラーゲン加水分解物としては、上記したコラーゲンをアルカリ又は酸、或いは酵素の存在下で常法に従って加水分解して得られる加水分解物である。かかるコラーゲン加水分解物の分子量、重合度としては、特に限定されないが、上限は重量平均分子量として約４０万未満のものが好ましく、下限はジペプチドである。   Collagen sources for obtaining collagen hydrolysates include beasts such as cattle, pigs and birds, as well as fish, shellfish, jellyfish, and sponges. Safety / stability issues and odor issues From the viewpoint of productivity and economy, collagen derived from marine organisms, particularly fish such as tilapia, shark, salmon, Thailand, and sea bass is preferred. The collagen hydrolyzate is a hydrolyzate obtained by hydrolyzing the aforementioned collagen in the presence of an alkali, an acid, or an enzyme according to a conventional method. The molecular weight and degree of polymerization of the collagen hydrolyzate are not particularly limited, but the upper limit is preferably less than about 400,000 as the weight average molecular weight, and the lower limit is dipeptide.

また、コラーゲン誘導体としては、上記したコラーゲンのアテロ化物、アシル化物、サクシニル化物などが挙げられ、具体的には、アテロコラーゲン、アシル化コラーゲン、サクシニル化アテロコラーゲンなどを例示することができる。   Further, examples of the collagen derivative include the above-described collagen atelolation, acylation, succinylation, and the like, and specific examples include atelocollagen, acylation collagen, succinylation atelocollagen and the like.

コラーゲンを構成するアミノ酸としては、コラーゲンの主構成アミノ酸であるグリシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アラニンを例示することができる。またその誘導体としてアセチルヒドロキシプロリンを例示することができる。   Examples of amino acids constituting collagen include glycine, proline, hydroxyproline, and alanine, which are the main constituent amino acids of collagen. Moreover, acetylhydroxyproline can be illustrated as the derivative.

本発明において、コラーゲン加水分解物及びその誘導体、並びにコラーゲンを構成するアミノ酸及びその誘導体から選択される１種又は２種以上の配合量は、０．００１〜２質量％が好ましい。   In this invention, 0.001-2 mass% is preferable as the compounding quantity of 1 type, or 2 or more types selected from the collagen hydrolyzate and its derivative (s), the amino acid which comprises collagen, and its derivative (s).

本発明の皮膚外用剤は、上述の成分の他に、通常の化粧料、医薬部外品に用いられる任意成分を、本発明の効果を阻害しない程度に配合することができる。具体的には、油剤、界面活性剤、増粘剤、防腐剤、香料、保湿剤、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤等を挙げることができる。   The skin external preparation of this invention can mix | blend the arbitrary component used for normal cosmetics and a quasi-drug other than the above-mentioned component to such an extent that the effect of this invention is not inhibited. Specific examples include oil agents, surfactants, thickeners, preservatives, fragrances, moisturizers, antioxidants, anti-inflammatory agents, antibacterial agents, and the like.

本発明の皮膚外用剤の剤型は、特に限定されず、水系、油系、乳化型等いずれの剤型でもよい。   The dosage form of the external preparation for skin of the present invention is not particularly limited, and may be any dosage form such as aqueous, oily, emulsified.

本発明の皮膚外用剤は定法により調製することができる。   The external preparation for skin of the present invention can be prepared by a conventional method.

本発明の皮膚外用剤は、例えば、ローション剤、乳剤、軟膏の剤型で用いることができる。   The external preparation for skin of the present invention can be used, for example, in the form of a lotion, emulsion or ointment.

以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、これにより本発明の範囲が限定されるものではない。なお、配合量は特に断りのない限り質量％である。   EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be specifically described with reference to examples, but the scope of the present invention is not limited thereby. The blending amount is mass% unless otherwise specified.

まず、実施例等に用いる植物抽出物の調製方法を示す。   First, the preparation method of the plant extract used for an Example etc. is shown.

［ホッカイトウキ抽出物］
乾燥させたホッカイトウキの根を細切した。続いて１０重量倍量の９５容量％エタノール水溶液に２週間浸漬した。ろ過後ろ液を採取し、溶媒を留去したエキス末を得た。収率は０．５質量％であった。かかるエキス末を０．２５質量％の濃度となるよう９９容量％エタノール水溶液で希釈して、ホッカイトウキ抽出物とした。 [Hokiitouki extract]
The roots of dried beetle were shredded. Subsequently, it was immersed for 2 weeks in a 10 vol. The filtrate after filtration was collected to obtain an extract powder from which the solvent was distilled off. The yield was 0.5% by mass. This extract powder was diluted with a 99% by volume ethanol aqueous solution so as to have a concentration of 0.25% by mass to obtain a citrus extract.

［ローマカミツレ抽出物］
乾燥させたローマカミツレの花を、１０重量倍量の９５容量％エタノール水溶液に２４時間浸漬した。ろ過後ろ液を採取し、溶媒を留去したエキス末を得た。かかるエキス末を０．５質量％の濃度となるよう９９容量％エタノール水溶液で希釈して、ローマカミツレ抽出物とした。 [Roman chamomile extract]
The dried Roman chamomile flower was immersed in a 10 vol. The filtrate after filtration was collected to obtain an extract powder from which the solvent was distilled off. The extract powder was diluted with a 99% by volume ethanol aqueous solution to a concentration of 0.5% by mass to obtain a Roman chamomile extract.

［シャクヤク抽出物］
乾燥させたシャクヤク根を細切し、１０重量倍量の５０容量％エタノール水溶液に２週間浸漬した。ろ過後ろ液を採取し、溶媒を留去したエキス末を得た。かかるエキス末を５０質量％１，３ブチレングリコール水溶液に０．５質量％の濃度となるよう５０質量％１，３ブチレングリコール水溶液で希釈して、シャクヤク抽出物とした。 [Peonies extract]
The dried peony root was chopped and dipped in a 10% by weight 50% by volume ethanol aqueous solution for 2 weeks. The filtrate after filtration was collected to obtain an extract powder from which the solvent was distilled off. The extract powder was diluted with a 50% by mass 1,3-butylene glycol aqueous solution to a concentration of 0.5% by mass with a 50% by mass 1,3-butylene glycol aqueous solution to obtain a peony extract.

［チョウジ抽出物］
乾燥させたチョウジのつぼみを細切し、５０容量％エタノール水溶液に２週間浸漬した。ろ過後ろ液を採取し、チョウジ抽出物とした。チョウジ抽出物中のチョウジエキス純分は３．１６質量％であった。 [Clove extract]
The dried clove buds were chopped and immersed in a 50% by volume aqueous ethanol solution for 2 weeks. The filtrate after filtration was collected and used as a clove extract. The pure content of the clove extract in the clove extract was 3.16% by mass.

［シロバナルーピン抽出物］
シロバナルーピン抽出物としてＥＸＰＡＮＳＣＩＥＮＣＥ ＬＡＢＯＲＡＴＯＩＲＥＳ社製ＣＯＬＬＡＧＥＮＥＥＲを使用した。 [Shirobanalupin extract]
COLAGENEER manufactured by EXPANSCIENCE LABORATOIRES was used as the extract of Shirobanarupin.

［植物エキス混合物］
ホッカイトウキ抽出物２５質量部、ローマカミツレ抽出物１質量部、シャクヤク抽出物１００質量部、チョウジ抽出物５質量部、及びシロバナルーピン抽出物１０質量部を混合し、植物エキス混合物とした。 [Plant extract mixture]
25 parts by mass of the citrus extract, 1 part by mass of roman chamomile extract, 100 parts by mass of peony extract, 5 parts by mass of clove extract, and 10 parts by mass of Shirobanarupin extract were mixed to obtain a plant extract mixture.

［コラーゲン混合物］
アセチルヒドロキシプロリン１２５０質量部、グリシン２５質量部、コラーゲン由来ジペプチド１２５質量部、コラーゲン由来トリペプチド２５質量部、重量平均分子量３０万の水溶性コラーゲン０．１５質量部を混合し、精製水で全量が２６００質量部となるよう混合し、コラーゲン混合物とした。 [Collagen mixture]
1250 parts by mass of acetylhydroxyproline, 25 parts by mass of glycine, 125 parts by mass of collagen-derived dipeptide, 25 parts by mass of collagen-derived tripeptide, 0.15 parts by mass of water-soluble collagen having a weight average molecular weight of 300,000 are mixed, and the total amount is obtained with purified water. The mixture was mixed to 2600 parts by mass to obtain a collagen mixture.

［コラーゲン産生促進作用］
ヒト新生児由来皮膚線維芽細胞を５×10⁵個/ウェルとなるように6ウェルプレートに播種し、０．５％のＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地にて一晩培養した。植物エキス混合物、コラーゲン混合物、またはその両方を表２に示す量添加した培地に交換し、３７℃、５％ CO₂インキュベーター内で24時間培養した。採取した細胞から、市販のＲＮＡ抽出キット(Ｑｕｉｃｋ Ｇｅｎｅ ＲＮＡ Ｃｕｌｔｕｒｅｄ Ｃｅｌｌ ＨＣ Ｋｉｔ Ｓ)を使用してＲＮＡを抽出し、cDNA合成後に下記のプライマーを使用してサイバーグリーン法によるリアルタイムPCRにより遺伝子発現を確認した。なお内部標準としてＧＡＰＤＨを使用した。プライマー情報を表１に、測定結果を表２に示す。測定結果は、植物エキす混合物及びコラーゲン混合物を添加しなかった場合の遺伝子発現量を１とした場合の相対値で示した。 [Collagen production promoting effect]
Human newborn-derived dermal fibroblasts were seeded in a 6-well plate at 5 × 10 ⁵ cells / well and cultured overnight in DMEM medium containing 0.5% FBS. The plant extract mixture, the collagen mixture, or both were replaced with medium supplemented in the amounts shown in Table 2, and cultured in a 37 ° C., 5% CO ₂ incubator for 24 hours. RNA was extracted from the collected cells using a commercially available RNA extraction kit (Quick Gene RNA Cultured Cell HC Kit S), and after cDNA synthesis, gene expression was confirmed by real-time PCR using the cyber green method using the following primers: did. GAPDH was used as an internal standard. Primer information is shown in Table 1, and measurement results are shown in Table 2. The measurement results are shown as relative values when the gene expression level when the plant extract mixture and collagen mixture are not added is 1.

表２に示した通り、植物エキス混合物、コラーゲン混合物をそれぞれ添加することにより、コラーゲン産生遺伝子の発現量が有意に増加した。このことにより植物エキス混合物は高いコラーゲン産生促進効果を発揮することが示された。また植物エキス混合物とコラーゲン混合物を併用して用いることにより、単独添加の場合と比較して、それぞれ２分の１量しか添加していないにもかかわらず、コラーゲン産生遺伝子の発現量が有意に向上しており、植物エキス混合物とコラーゲン混合物を併用して用いることにより、コラーゲン産生促進効果が相乗的に向上していることが示された。   As shown in Table 2, the expression level of the collagen producing gene was significantly increased by adding the plant extract mixture and the collagen mixture, respectively. This showed that the plant extract mixture exerts a high collagen production promoting effect. In addition, the combined use of a plant extract mixture and a collagen mixture significantly improves the expression level of collagen-producing genes, even though only one-half of each is added compared to the case of single addition. It has been shown that the collagen production promoting effect is synergistically improved by using the plant extract mixture and the collagen mixture in combination.

［実施例３］乳液
（１）スクワラン １０．０（質量％）
（２）メチルフェニルポリシロキサン ４．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン １．０
（７）グリセリン ４．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）カルボキシビニルポリマー ０．１５
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）アルギニン（１質量％水溶液） ２０．０
（１２）植物エキス混合物 ０．５
（１３）コラーゲン混合物 ０．５
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。冷却後４０℃にて、（１１）〜（１３）を順次加え、均一に混合する。 [Example 3] Emulsion (1) Squalane 10.0 (mass%)
(2) Methylphenylpolysiloxane 4.0
(3) Hydrogenated palm kernel oil 0.5
(4) Hydrogenated soybean phospholipid 0.1
(5) Polyoxyethylene monostearate
Sorbitan (20E.O.) 1.3
(6) Sorbitan monostearate 1.0
(7) Glycerin 4.0
(8) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(9) Carboxyvinyl polymer 0.15
(10) Purified water 100 (11) Arginine (1% by weight aqueous solution) 20.0
(12) Plant extract mixture 0.5
(13) Collagen mixture 0.5
Production method: The oil phase components (1) to (6) are heated and dissolved at 80 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are dissolved by heating at 80 ° C. The oil phase component is added to this while stirring and uniformly emulsified with a homogenizer. After cooling, (11) to (13) are sequentially added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例４］化粧水
（１）エタノール １５．０（質量％）
（２）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 ０．３
（３）香料 ０．１
（４）精製水 １００とする残部
（５）クエン酸 ０．０２
（６）クエン酸ナトリウム ０．１
（７）グリセリン １．０
（８）ヒドロキシエチルセルロース ０．１
（９）植物エキス混合物 ０．１
（１０）コラーゲン混合物 ０．４
製法：（１）に（２）および（３）を溶解する。さらに（４）〜（１０）を順次添加した後、十分に攪拌し、均一に混合する。 [Example 4] Lotion (1) Ethanol 15.0 (mass%)
(2) Polyoxyethylene (40E.O.) hydrogenated castor oil 0.3
(3) Fragrance 0.1
(4) Purified water 100 (5) Citric acid 0.02
(6) Sodium citrate 0.1
(7) Glycerin 1.0
(8) Hydroxyethyl cellulose 0.1
(9) Plant extract mixture 0.1
(10) Collagen mixture 0.4
Production method: (2) and (3) are dissolved in (1). Further, after sequentially adding (4) to (10), the mixture is sufficiently stirred and mixed uniformly.

［実施例５］クリーム
（１）スクワラン １０．０（質量％）
（２）ステアリン酸 ２．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）セタノール ３．６
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（７）グリセリン １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）アルギニン（２０質量％水溶液） １５．０
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）カルボキシビニルポリマー（１質量％水溶液） １５．０
（１２）植物エキス混合物 ０．４
（１３）コラーゲン混合物 ０．１
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。（１１）を添加して攪拌後、冷却し４０℃にて（１２）、（１３）を加え、均一に混合する。 [Example 5] Cream (1) Squalane 10.0 (mass%)
(2) Stearic acid 2.0
(3) Hydrogenated palm kernel oil 0.5
(4) Hydrogenated soybean phospholipid 0.1
(5) Cetanol 3.6
(6) Lipophilic glyceryl monostearate 2.0
(7) Glycerin 10.0
(8) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(9) Arginine (20 mass% aqueous solution) 15.0
(10) Remainder 100 (11) Carboxyvinyl polymer (1% by weight aqueous solution) 15.0
(12) Plant extract mixture 0.4
(13) Collagen mixture 0.1
Production method: The oil phase components (1) to (6) are heated and dissolved at 80 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are dissolved by heating at 80 ° C. The oil phase component is added to this while stirring and uniformly emulsified with a homogenizer. After (11) is added and stirred, it is cooled and (12) and (13) are added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例６］美容液
（１）精製水 １００とする残部（質量％）
（２）グリセリン １０．０
（３）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（４）カルボキシビニルポリマー（１質量％水溶液） １７．５
（５）アルギン酸ナトリウム（１質量％水溶液） １５．０
（６）モノラウリン酸ポリグリセリル １．０
（７）マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリル ３．０
（８）Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸
ジ（フィトステリル−２−オクチルドデシル） ２．０
（９）硬化パーム油 ２．０
（１０）スクワラン（オリーブ由来） １．０
（１１）ベヘニルアルコール ０．７５
（１２）ミツロウ １．０
（１３）ホホバ油 １．０
（１４）１，３−ブチレングリコール １０．０
（１５）Ｌ−アルギニン（１０質量％水溶液） ２．０
（１６）植物エキス混合物 ０．４
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。冷却後５０℃にて（１５）を、４０℃にて（１６）を加え、均一に混合する。 [Example 6] Cosmetic liquid (1) The balance (mass%) of purified water 100
(2) Glycerin 10.0
(3) Sucrose fatty acid ester 1.3
(4) Carboxyvinyl polymer (1% by weight aqueous solution) 17.5
(5) Sodium alginate (1% by weight aqueous solution) 15.0
(6) Polyglyceryl monolaurate 1.0
(7) Macadamia nut oil fatty acid phytosteryl 3.0
(8) N-lauroyl-L-glutamic acid di (phytosteryl-2-octyldodecyl) 2.0
(9) Hardened palm oil 2.0
(10) Squalane (derived from olive) 1.0
(11) Behenyl alcohol 0.75
(12) Beeswax 1.0
(13) Jojoba oil 1.0
(14) 1,3-butylene glycol 10.0
(15) L-arginine (10% by mass aqueous solution) 2.0
(16) Plant extract mixture 0.4
Production method: The aqueous phase components (1) to (6) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C. On the other hand, the oil phase components (7) to (14) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C. Next, the oil phase component is added to the aqueous phase component and preliminary emulsification is performed, followed by uniform emulsification with a homomixer. After cooling, add (15) at 50 ° C. and (16) at 40 ° C. and mix uniformly.

［実施例７］水性ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー ０．５（質量％）
（２）精製水 １００とする残部
（３）水酸化ナトリウム（１０質量％水溶液） ０．５
（４）グリセリン １０．０
（５）１，３−ブチレングリコール １０．０
（６）エタノール １０．０
（７）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（８）香料 ０．１
（９）コラーゲン混合物 ０．５
（１０）ポリオキシエチレン（６０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 １．０
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後、（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（１０）を加え、均一に攪拌混合する。 [Example 7] Aqueous gel (1) Carboxyvinyl polymer 0.5 (mass%)
(2) The balance made into purified water 100 (3) Sodium hydroxide (10 mass% aqueous solution) 0.5
(4) Glycerin 10.0
(5) 1,3-butylene glycol 10.0
(6) Ethanol 10.0
(7) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(8) Fragrance 0.1
(9) Collagen mixture 0.5
(10) Polyoxyethylene (60E.O.) hydrogenated castor oil 1.0
Manufacturing method: (1) is added to (2), and after stirring uniformly, (3) is added. After stirring uniformly, (5) previously dissolved in (4) is added. After stirring uniformly, (6) to (10) previously mixed are added and stirred and mixed uniformly.

Claims (1)

下記（Ａ）〜（Ｆ）を含有する皮膚外用剤。
（Ａ）トウキ抽出物
（Ｂ）ローマカミツレ抽出物
（Ｃ）シャクヤク抽出物
（Ｄ）チョウジ抽出物
（Ｅ）シロバナルーピン抽出物
（Ｆ）アセチルヒドロキシプロリンとグリシンとコラーゲン由来ジペプチドとコラーゲン由来トリペプチドと重量平均分子量３０万の水溶性コラーゲンとを含有するコラーゲン混合物 A skin external preparation containing the following (A) to ( F ).
(A) Toki extract (B) Roman chamomile extract (C) Peonies extract (D) Clove extract (E) Shirobanarupin extract (F) Acetyl hydroxyproline, glycine, collagen-derived dipeptide, collagen-derived tripeptide, Collagen mixture containing water-soluble collagen having a weight average molecular weight of 300,000