JP6330278B2 - Culture vessel - Google Patents
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Description
本発明は、マイクロウェルを備えた培養容器に関する。より詳細には、マイクロウェルの構造に対応する情報表示を視覚または触覚により認識可能に設けた培養容器に関する。 The present invention relates to a culture vessel provided with a microwell. More specifically, the present invention relates to a culture vessel provided with information display corresponding to the structure of a microwell so that it can be recognized visually or by touch.
ライフサイエンス分野の研究開発において、複数のマイクロウェルを備えた培養容器内で培養した細胞を顕微鏡で観察し画像を取得することが行われている。そのような培養容器を用いて培養する細胞の一例としては、体外受精または顕微授精における受精卵が挙げられる。卵子の大きさは、哺乳類の種類にもよるが約０．１ｍｍと非常に小さく、従ってそれを培養するマイクロウェルも非常に小さいため、肉眼でマイクロウェルの配列や形状などの構造を確認するのは非常に困難である。 In the research and development in the life science field, cells cultured in a culture vessel having a plurality of microwells are observed with a microscope to acquire an image. An example of cells cultured using such a culture vessel is a fertilized egg in in vitro fertilization or microinsemination. The size of the ovum is very small, about 0.1 mm, although it depends on the type of mammal. Therefore, the microwell in which it is cultured is also very small. Is very difficult.
特許文献１には、被培養物を生きたまま顕微鏡観察するのに用いる培養容器が記載されており、被培養物を付着させるための板状ガラス部に、その被培養物の所定部位の位置の特定を可能にするため複数本の緯線と経線とからなるグリッド座標を設けることが記載されている。しかし、そのようなグリッド座標は微細であり、その状態を肉眼で確認するのは困難である。また、グリッド上に被培養物が乗るため、場合によってはグリッドが被培養物に隠されて読み取れないことが考えられる。
特許文献２には、細胞培養用ディッシュであって、基部とカバーとからなり、基部の壁部分には数字からなる第１標識が付され、一方カバー上には第２標識が付され、それら標識により円形座標を形成し、培養用ディッシュ上の位置の特定を可能としたものが記載されている。しかしそのような標識は単に培養用ディッシュにおいて培養部位を区別するためのグリッド情報を与えるものであり、肉眼で確認するのが困難な微細構造の情報を提供するものではない。
受精卵などの細胞の培養では、目的によって異なる配置、あるいは異なる形状や性状を有するマイクロウェルを備えた培養容器を使い分ける場合があるが、マイクロウェルのような微細な構造は肉眼では確認できず、培養容器の選択に手間がかかる。また、培養容器は従来機器との適合性を考慮して円形である場合が多いため、マイクロウェルの構造が確認しにくいことも関係して、使用時に意図されている正しい方向が即座には判別しにくい。マイクロウェルの状態や正しい向きを直感的に判断することができる培養容器を提供することができれば、利用者の利便性が向上すると考えられる。 In culturing cells such as fertilized eggs, there are cases where different arrangements or culture containers with microwells having different shapes and properties are used depending on the purpose, but the fine structure like microwells cannot be confirmed with the naked eye, It takes time to select a culture vessel. In addition, because culture vessels are often round in consideration of compatibility with conventional equipment, the correct orientation intended for use is immediately discriminated because the microwell structure is difficult to confirm. Hard to do. If a culture vessel capable of intuitively determining the state and correct orientation of the microwell can be provided, it is considered that convenience for the user is improved.
本発明者らは、マイクロウェルが設けられている培養容器の底部において、マイクロウェルを有する細胞培養領域は全体に対して小さいのに対し、培養容器の取り扱い性向上を目的として培養容器を一定以上の大きさとすることにより必然的に生じるそれ以外の領域が全体に対して大きな割合を占めることに着目し、そこを利用してマイクロウェルの情報を直感的に理解することができる表示を付すことに想到した。本発明の要旨は以下のとおりである。 In the bottom of a culture vessel provided with microwells, the present inventors have a small number of cell culture regions having microwells, whereas the culture vessels are more than a certain size for the purpose of improving the handling of culture vessels. Pay attention to the fact that other areas that inevitably occur due to the size of occupy a large proportion of the whole, and attach a display that can intuitively understand microwell information using that area I came up with it. The gist of the present invention is as follows.
（１）底部と側壁とを有し、培養する細胞を入れるマイクロウェルを前記底部に備えた培養容器であって、前記底部は、マイクロウェルを有する細胞培養領域と、前記細胞培養領域外の領域とに画定されており、前記細胞培養領域外の領域にマイクロウェルの数、配置、形状、大きさ、向きおよび表面加工から選択されるマイクロウェル情報の表示が、使用者が直接視覚または触覚により認識可能な形態で付されている、前記培養容器。
（２）前記マイクロウェル情報の表示が、前記細胞培養領域内のマイクロウェルを相似拡大したマイクロウェルの模型の形態である、（１）に記載の培養容器。
（３）前記マイクロウェル情報の表示が培養容器の製造時に一体成型されたものである、（１）または（２）に記載の培養容器。
（４）向きの情報である前記マイクロウェル情報の表示が、使用者が直接触れることで認識可能な形状で側壁に設けられている、（１）〜（３）のいずれかに記載の培養容器。
(1) A culture container having a bottom and a side wall, the bottom having a microwell for storing cells to be cultured, wherein the bottom includes a cell culture region having a microwell and a region outside the cell culture region The display of the microwell information selected from the number, arrangement, shape, size, orientation and surface processing of the microwell in the region outside the cell culture region is directly or visually detected by the user. The culture vessel attached in a recognizable form.
(2) The culture container according to (1), wherein the display of the microwell information is in the form of a microwell model obtained by enlarging the microwell in the cell culture region.
(3) The culture container according to (1) or (2), wherein the display of the microwell information is integrally formed when the culture container is manufactured.
(4) The culture container according to any one of (1) to (3), wherein the display of the microwell information, which is orientation information, is provided on the side wall in a shape that can be recognized by direct contact with the user. .
本発明の培養容器は、マイクロウェルの数、配置、形状、大きさ、向きおよび表面加工から選択されるマイクロウェル情報の表示が、使用者が直感的に把握できるような態様で表示されているため、多数の培養容器の中から目的のものをすぐに選び出すことができ、利便性が高い。 The culture container of the present invention is displayed in such a manner that the user can intuitively understand the display of microwell information selected from the number, arrangement, shape, size, orientation, and surface processing of the microwells. Therefore, the target one can be quickly selected from a large number of culture vessels, which is highly convenient.
図１および２は、マイクロウェル情報の表示を付していない状態の従来の培養容器の構成例を示す図である。培養容器１は、底部２と側壁３とを有し、底部２に細胞を収容するための複数のマイクロウェル４が配置されている。マイクロウェル４が配置されている細胞培養領域は、内壁５により、底部２のその他の領域から画定されている。図２に示したように、内壁５は一定の高さを有し、細胞培養領域に液体を貯留することができるようになっている。なお、本明細書において「マイクロウェル」とは、開口部の開口幅（開口部の外縁が円形である場合はその直径）が、０．０５〜１．０ｍｍであり、好ましくは０．１５ｍｍ以上、より好ましくは０．２５ｍｍ以上、さらに好ましくは０．２８ｍｍ以上であり、好ましくは０．５ｍｍ未満、さらに好ましくは０．３４ｍｍ未満であるウェルを意味する。培養容器の上面視における各マイクロウェルの開口部の面積は、０．１９７ｍｍ２以下、さらに好ましくは０．０９１ｍｍ２以下であり、好ましくは０．０１７ｍｍ２以上、より好ましくは０．０４９ｍｍ２以上、さらに好ましくは０．０６１ｍｍ２以上である。このようなサイズのマイクロウェルは、特に受精卵などの細胞である被観察物を個別に収容するのに適している。マイクロウェルのサイズは微小であり、肉眼ではその状態を把握するのが難しい。
1 and 2 are diagrams showing a configuration example of a conventional culture vessel in a state where the display of microwell information is not attached. The
図３は、本発明の培養容器の一実施態様を示す図である。図１に示した従来の培養容器と比べると、マイクロウェル模型３１、向き表示３２、および側壁凹部３３を有する点で相違する。また、図４は本発明の培養容器の他の実施態様を示す図である。図１に示した従来の培養容器と比べると、マイクロウェル模型４１、向き表示４２、およびマイクロウェルサイズ表示４３を有する点で相違する。
FIG. 3 is a view showing an embodiment of the culture container of the present invention. Compared with the conventional culture vessel shown in FIG. 1, it is different in that it has a
本発明の培養容器は、底部の細胞培養領域外に、マイクロウェルの数、配置、形状、大きさ、向きおよび表面加工から選択されるマイクロウェルの情報が、使用者が直接視覚または触覚により認識可能な形態、すなわち使用者が拡大鏡などを用いずに肉眼で認識できるか、または使用者が手で触れて認識できる形態で付されていることを特徴とする。そのようなマイクロウェル情報の表示の態様としては、マイクロウェルの数、配置、形状、大きさ、向きおよび表面加工から選択されるいずれか一つを示す、文字もしくは図形、または培養容器の底部や側壁などに設けた凹部または凸部、あるいはマイクロウェルの形態をそのまま拡大したマイクロウェルの模型が挙げられる。最も好ましい態様としては、マイクロウェルの模型の形態、特に実際のマイクロウェルをそのまま相似拡大したマイクロウェル模型の形態が挙げられる。 In the culture container of the present invention, the information of the microwell selected from the number, arrangement, shape, size, orientation and surface processing of the microwell is recognized directly or visually by the user outside the cell culture region at the bottom. It is characterized in that it can be recognized by the naked eye without using a magnifying glass or the like, or can be touched and recognized by the user. As a display mode of such microwell information, characters or figures indicating any one selected from the number, arrangement, shape, size, orientation, and surface processing of the microwell, or the bottom of the culture vessel, Examples include a concave or convex portion provided on a side wall or the like, or a microwell model in which the shape of the microwell is enlarged as it is. The most preferred embodiment includes a microwell model, particularly a microwell model in which an actual microwell is enlarged as it is.
マイクロウェルの模型は、使用者が肉眼で容易に視認可能であるよう、実際のマイクロウェルの３倍以上、特に５倍以上、とりわけ１０倍以上の大きさに拡大したサイズを有することが好ましい。より具体的には、実際のマイクロウェル１個に対応するマイクロウェルの模型の大きさは、開口部の開口幅（開口部の外縁が円形である場合はその直径）が、好ましくは０．４５ｍｍ以上、より好ましくは１ｍｍ以上、さらに好ましくは２．５ｍｍ以上であり、培養容器の上面視におけるマイクロウェルの模型の開口部の面積は、０．１６ｍｍ２以上、より好ましくは０．８ｍｍ２以上、さらに好ましくは５ｍｍ２以上である。 It is preferable that the microwell model has a size expanded to 3 times or more, particularly 5 times or more, particularly 10 times or more of the actual microwell so that the user can easily see with the naked eye. More specifically, the size of the microwell model corresponding to one actual microwell is such that the opening width of the opening (or the diameter when the outer edge of the opening is circular) is preferably 0.45 mm. More preferably, the area of the opening of the microwell model in the top view of the culture vessel is 0.16 mm 2 or more, more preferably 0.8 mm 2 or more. More preferably, it is 5 mm 2 or more.
図３の実施態様の場合、マイクロウェル模型３１は、内壁１５により画定される細胞培養領域の図３における上部であって該領域の外に設けられている。８個のマイクロウェルの配列の中央には、マイクロウェルではない記号（図中ハート型で表されるもの）が付されているが、マイクロウェル模型３１ではその記号も含めて模型化している。このように、マイクロウェル模型は、マイクロウェルの近傍に付された個々のマイクロウェルを識別したりマイクロウェル配列の向きを判別したりするための図形や標識なども含めて、実際のマイクロウェルを相似拡大したものであることが好ましい。ただし「相似拡大」の概念には、完全に実際のマイクロウェルの構造を再現したもののみならず、実際のマイクロウェルの構造と実質的に同一であると判断可能な範囲であれば、一部構成（表面加工など）を省略したり変更したりしたものも含まれる。すなわち、ここでいう「相似拡大」は、実際のマイクロウェルと同様に凹部で形成した態様のみならず、培養容器を上面視した際に輪郭形状が相似拡大図形となっているが必ずしも凹部は形成されていない態様も含む概念である。
In the embodiment of FIG. 3, the
図４の実施態様の場合、マイクロウェル模型４１は、内壁１５により画定される細胞培養領域の図４における右部であって該領域の外に設けられている。この実施態様では、８個のマイクロウェルのうち４個については、マイクロウェル１４の表面が微細凹凸を有するように加工されており、マイクロウェル模型４１においても、個々のマイクロウェルに対応する模型においてその加工の有無が目視により確認可能となっている。このように、マイクロウェルに表面加工が施されている場合には、マイクロウェルの模型にもその表面加工の存在が認識できるように表示が付されていることが好ましい。マイクロウェルの模型における表面加工の有無の表示は、実際のマイクロウェルと全く同じ加工を施すことにより行ってもよく、あるいは表面加工が施されていることが判別できるよう、他とは異なる色を付したり、凹凸を付けたり、文字や図形による表示を付したりしてもよい。
In the embodiment of FIG. 4, the microwell model 41 is provided on the right side in FIG. 4 of the cell culture region defined by the
マイクロウェル情報の表示は、文字または図形によって付されていてもよい。その具体的態様としては、マイクロウェルの配列の上下方向を示す矢印（図３の３２）、マイクロウェルの配列の下側を意味する線（図４の４２）、マイクロウェルのサイズを示す文字（図４の４３）などが挙げられる。この他にも、マイクロウェルの個数や配列の列数を数字や図形で表してもよい。 The display of the microwell information may be attached by characters or figures. Specifically, the arrow indicating the up and down direction of the microwell array (32 in FIG. 3), a line indicating the lower side of the microwell array (42 in FIG. 4), and a character ( 43) of FIG. In addition, the number of microwells and the number of columns in the array may be represented by numbers or figures.
また、マイクロウェル情報の表示は、とりわけ向きの情報の場合、図３の３３で示されるように、培養容器の側壁に設けられた凹部または凸部など使用者が直接触れることで認識可能な側壁の形状で示すこともできる。培養容器の側壁は使用者が容器を持つ際に触れる場所であるため、向きを凹部または凸部などで示すことにより、より直感的に正しい向きを判別することが可能となる。 In addition, the display of microwell information, particularly in the case of orientation information, as shown by 33 in FIG. 3, a side wall that can be recognized by direct contact with the user, such as a concave portion or a convex portion provided on the side wall of the culture vessel. It can also be shown in the shape of Since the side wall of the culture container is a place where the user touches when holding the container, the correct orientation can be determined more intuitively by indicating the direction with a concave portion or a convex portion.
マイクロウェル情報の表示は、印刷やレーザーマーキングなどにより付してもよいが、培養容器の作製と同時に、培養容器と一体成型することが好ましい。マイクロウェルの模型であるマイクロウェル情報の表示を培養容器と一体成型とする場合、該マイクロウェルの模型は、実際のマイクロウェルと同様に凹部を形成するように設けることができる。そのようにして付された情報表示は、培養容器と同じ材質からなる。培養容器の作製と同時に情報表示も付されるようにすることで、製造コストの低減が図れる。また、そのようにして付された情報表示は、容易には消失せず、長期の細胞培養時の頻回な培養操作や消毒用エタノールでの清拭の際にも耐えることができる。 The microwell information may be displayed by printing, laser marking, or the like, but it is preferable that the microwell information is integrally formed with the culture container simultaneously with the production of the culture container. When the display of microwell information, which is a model of a microwell, is formed integrally with the culture vessel, the model of the microwell can be provided so as to form a recess in the same manner as an actual microwell. The information display so attached is made of the same material as the culture vessel. By displaying information at the same time as the production of the culture vessel, the manufacturing cost can be reduced. In addition, the information display attached in such a manner does not easily disappear and can withstand frequent culturing operations during long-term cell culture and wiping with disinfecting ethanol.
マイクロウェルは、壁面と開口部を有する凹部を形成し、培養容器の底部に直接窪みとして設けられた凹部でもよいし、底部から突出した部材により形成される凹部でもよい。したがって、上面視における各マイクロウェルの開口部の面積は、換言すれば、マイクロウェルの開口部の外縁が形成する図形の面積である。マイクロウェルの開口部の外縁が形成する図形は特に制限されず、三角形および四角形等の多角形の形状でもよく、円（円形、略円形、楕円形および略楕円形を含む）の形状でもよいが、好ましくは円形である。 The microwell forms a recess having a wall surface and an opening, and may be a recess provided directly as a recess in the bottom of the culture vessel, or may be a recess formed by a member protruding from the bottom. Accordingly, the area of the opening of each microwell in a top view is, in other words, the area of the figure formed by the outer edge of the opening of the microwell. The figure formed by the outer edge of the opening of the microwell is not particularly limited, and may be a polygonal shape such as a triangle and a quadrangle, or a circle (including a circle, a substantially circle, an ellipse, and a substantially ellipse). , Preferably circular.
本発明の培養容器の底部には、マイクロウェルが、好ましくは４個以上、さらに好ましくは８個以上、例えば１０個以上で、好ましくは５０個以下、より好ましくは３０個以下の個数で配置されている。本発明の培養容器は受精卵等の細胞を各マイクロウェルに１個ずつ配置して、複数の細胞を同時に培養する用途に適している。受精卵等の細胞を同一系内に複数近接して配置した状態で培養することにより、良好なパラクライン効果やオートクライン効果を期待することができる。 The number of microwells is preferably 4 or more, more preferably 8 or more, for example 10 or more, preferably 50 or less, more preferably 30 or less, at the bottom of the culture container of the present invention. ing. The culture container of the present invention is suitable for the purpose of culturing a plurality of cells at the same time by placing one cell such as a fertilized egg in each microwell. By culturing cells such as fertilized eggs in the state where a plurality of cells are arranged close to each other in the same system, a good paracrine effect and autocrine effect can be expected.
本発明の培養容器は、底部と側壁とを有し、底部と側壁とから形成される空間に液体を収容可能である。底部の形状は特に制限されず、三角形および四角形等の多角形の形状でもよく、円（円形、略円形、楕円形および略楕円形を含む）の形状でもよく、側壁は底部の外縁を囲うように形成される。本発明の培養容器において、通常、底部と反対側は開口しており、開口部の形状は好ましくは底部の形状と同一である。好ましくは、開口部が円形で、開口幅が、好ましくは３０〜６０ｍｍ、特に３５ｍｍのものが用いられる。これは従来の細胞培養に用いられているシャーレと同等のサイズであり、汎用のシャーレと同様に簡便に作製できること、および既存の培養装置等に適合しやすいことから、上記のようなサイズのものが好ましい。なお、本発明の培養容器は、通常のシャーレと同様に蓋を有していてもよい。 The culture container of the present invention has a bottom part and a side wall, and can store a liquid in a space formed by the bottom part and the side wall. The shape of the bottom is not particularly limited, and may be a polygonal shape such as a triangle or a quadrangle, or may be a circle (including a circle, a substantially circle, an ellipse, or a substantially ellipse), and the side wall surrounds the outer edge of the bottom. Formed. In the culture container of the present invention, the side opposite to the bottom is usually open, and the shape of the opening is preferably the same as the shape of the bottom. Preferably, those having a circular opening and an opening width of preferably 30 to 60 mm, particularly 35 mm are used. This is the same size as a petri dish used for conventional cell culture, and it can be easily produced in the same way as a general-purpose petri dish, and it is easy to adapt to existing culture devices. Is preferred. In addition, the culture container of this invention may have a lid | cover similarly to a normal petri dish.
本発明の培養容器の材質は、特に制限されない。具体的には、金属、ガラス、およびシリコン等の無機材料、プラスチック（例えば、ポリスチレン樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂）で代表される有機材料を挙げることができる。本発明の培養容器は、当業者に公知の方法で製造することができる。例えば、プラスチック材料からなる培養容器を製造する場合には、慣用の成形法、例えば射出成形により製造することができる。 The material of the culture container of the present invention is not particularly limited. Specifically, inorganic materials such as metal, glass, and silicon, plastics (for example, polystyrene resin, polyethylene resin, polypropylene resin, ABS resin, nylon, acrylic resin, fluororesin, polycarbonate resin, polyurethane resin, methylpentene resin, And organic materials represented by phenol resin, melamine resin, epoxy resin, and vinyl chloride resin). The culture container of the present invention can be produced by a method known to those skilled in the art. For example, when a culture container made of a plastic material is manufactured, it can be manufactured by a conventional molding method such as injection molding.
本発明の培養容器は、培養細胞の非特異的接着を防止し、また培養液のドロップが表面張力によって偏ることを防止する観点から、プラズマ処理などの表面親水化処理することが好ましい。製造後の容器に付着している菌数（バイオバーデン数）が１００ｃｆｕ／容器以下であることが好ましい。また、さらにγ線滅菌などの滅菌処理を施されていることがより好ましい。 The culture vessel of the present invention is preferably subjected to surface hydrophilization treatment such as plasma treatment from the viewpoint of preventing non-specific adhesion of cultured cells and preventing the culture medium drop from being biased by surface tension. The number of bacteria (bioburden number) adhering to the container after production is preferably 100 cfu / container or less. Further, it is more preferable that sterilization treatment such as γ-ray sterilization is performed.
本発明の培養容器は、受精卵の発育を促進するような表面処理または表面コートがなされていてもよい。特に、受精卵の発育を促進するために、他の器官の細胞（例えば、子宮内膜細胞や卵管上皮細胞）と共培養をする場合、これらの細胞をあらかじめ培養容器に接着させる必要がある。このような場合に、培養容器の表面に細胞接着性の材料をコートすると有利である。 The culture container of the present invention may be surface-treated or surface-coated so as to promote the development of fertilized eggs. In particular, in order to promote the development of a fertilized egg, when co-culturing with cells of other organs (for example, endometrial cells or fallopian tube epithelial cells), it is necessary to adhere these cells to a culture vessel in advance. . In such a case, it is advantageous to coat the surface of the culture vessel with a cell adhesive material.
培養対象となる細胞は、特に制限されないが、例えば、受精卵、卵細胞、ＥＳ細胞（胚性幹細胞）およびｉＰＳ細胞（人工多能性幹細胞）が挙げられる。卵細胞は、未受精の卵細胞をさし、未成熟卵母細胞および成熟卵母細胞が含まれる。受精卵は、受精後、卵割により２細胞期、４細胞期、８細胞期と細胞数が増えていき、桑実胚を経て、胚盤胞へと発生する。受精卵には、２細胞胚、４細胞胚および８細胞胚などの初期胚、桑実胚、胚盤胞（初期胚盤胞、拡張胚盤胞および脱出胚盤胞を含む）が含まれる。胚盤胞は、胎盤を形成する潜在能力がある外部細胞と胚を形成する潜在能力がある内部細胞塊からなる胚を意味する。ＥＳ細胞は胚盤胞の内部細胞塊から得られる未分化な多能性または全能性細胞をさす。ｉＰＳ細胞は、体細胞（主に線維芽細胞）へ数種類の遺伝子（転写因子）を導入することにより、ＥＳ細胞に似た分化万能性を持たせた細胞をさす。すなわち、本発明において細胞には、受精卵や胚盤胞のように複数の細胞の集合体も包含される。 The cells to be cultured are not particularly limited, and examples include fertilized eggs, egg cells, ES cells (embryonic stem cells), and iPS cells (artificial pluripotent stem cells). An egg cell refers to an unfertilized egg cell, and includes an immature oocyte and a mature oocyte. After fertilization, the fertilized egg increases in number of cells from the 2 cell stage, the 4 cell stage, and the 8 cell stage by cleavage, and develops into a blastocyst through a morula. Fertilized eggs include early embryos such as 2-cell embryos, 4-cell embryos and 8-cell embryos, morulas, blastocysts (including early blastocysts, expanded blastocysts and escaped blastocysts). A blastocyst means an embryo composed of external cells with the potential to form the placenta and internal cell masses with the potential to form embryos. ES cells refer to undifferentiated pluripotent or totipotent cells obtained from the inner cell mass of a blastocyst. An iPS cell refers to a cell having a pluripotency similar to that of an ES cell by introducing several types of genes (transcription factors) into somatic cells (mainly fibroblasts). That is, in the present invention, the cell includes an aggregate of a plurality of cells such as a fertilized egg and a blastocyst.
本発明の培養容器は、好ましくは哺乳動物および鳥類の細胞、特に哺乳動物の細胞の培養に好適である。哺乳動物は、温血脊椎動物をさし、例えば、ヒトおよびサルなどの霊長類、マウス、ラットおよびウサギなどの齧歯類、イヌおよびネコなどの愛玩動物、ならびにウシ、ウマおよびブタなどの家畜が挙げられる。本発明の培養容器は、ヒトの受精卵の培養に特に好適である。 The culture vessel of the present invention is preferably suitable for culturing mammalian and avian cells, particularly mammalian cells. Mammals refer to warm-blooded vertebrates, eg, primates such as humans and monkeys, rodents such as mice, rats and rabbits, pets such as dogs and cats, and livestock such as cattle, horses and pigs. Is mentioned. The culture container of the present invention is particularly suitable for culturing human fertilized eggs.
例えば受精卵を培養する場合には、通常、培養後に、子宮への移植に適した良質な受精卵であるか否かが判別される。判別は画像解析装置により自動で行ってもよいし、顕微鏡等により目視により手動で行ってもよい。培養細胞の自動判別においては、顕微鏡により取得された培養容器内の細胞の画像をＣＣＤカメラ等の検出装置によって撮像し、得られた画像を輪郭抽出処理に付し、画像中の細胞に該当する部分を抽出し、抽出された細胞の画像を画像解析装置で解析することによりその質を判別することができる。画像の輪郭抽出処理については、例えば、特開２００６−３３７１１０号に記載された処理を利用できる。 For example, when a fertilized egg is cultured, it is usually determined whether the fertilized egg is of a good quality suitable for transplantation into the uterus after the culture. The determination may be performed automatically by an image analysis apparatus, or may be performed manually by visual observation using a microscope or the like. In automatic discrimination of cultured cells, an image of the cells in the culture vessel obtained by a microscope is picked up by a detection device such as a CCD camera, the obtained image is subjected to contour extraction processing, and corresponds to the cells in the image The quality can be determined by extracting the portion and analyzing the extracted cell image with an image analysis apparatus. As the image contour extraction processing, for example, the processing described in JP-A-2006-337110 can be used.
１：培養容器
２：底部
３：側壁
４：マイクロウェル
５：内壁
１１：培養容器
１２：底部
１３：側壁
１４：マイクロウェル
１５：内壁
３１：マイクロウェル模型
３２：向き表示
３３：側壁凹部
４１：マイクロウェル模型
４２：向き表示
４３：マイクロウェルのサイズ表示
1: Culture container 2: Bottom part 3: Side wall 4: Microwell 5: Inner wall 11: Culture container 12: Bottom part 13: Side wall 14: Microwell 15: Inner wall 31: Microwell model 32: Orientation display 33: Side wall recess 41: Micro Well model 42: orientation display 43: microwell size display
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