JP6249456B2 - 藍藻においてプラスチック原料を生産する方法 - Google Patents
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Description
(1)時計タンパク質遺伝子が過剰発現している藍藻。
(2)時計タンパク質遺伝子がkaiB遺伝子またはkaiC遺伝子である、(1)記載の藍藻。
(3)藍藻が、ポリヒドロキシアルカン酸生産能を有する、(1)または(2)記載の藍藻。
(4)藍藻が、phaAB遺伝子とphaEC遺伝子を有する、(1)〜(3)のいずれかに記載の藍藻。
(5)藍藻が、Synechocystis属に属する、(1)〜(4)のいずれかに記載の藍藻。
(6)有機酸の生産方法であって、時計タンパク質遺伝子が過剰発現している藍藻を培養すること、および有機酸を採取することを含む、前記方法。
(7)有機酸がポリヒドロキシアルカン酸であり、藍藻がポリヒドロキシアルカン酸生産能を有し、時計タンパク質遺伝子がkaiB遺伝子またはkaiC遺伝子である、(6)記載の方法。
(8)藍藻が、phaAB遺伝子とphaEC遺伝子を有する、(7)記載の方法。
(9)ポリヒドロキシアルカン酸が、ポリヒドロキシブタン酸である、(7)または(8)記載の方法。
(10)有機酸がコハク酸または乳酸であり、時計タンパク質遺伝子がkaiB遺伝子またはkaiC遺伝子である、(6)記載の方法。
(11)藍藻が、Synechocystis属に属する、(6)〜(10)のいずれかに記載の方法。
(12)培養を窒素欠乏条件で行う、(6)〜(11)のいずれかに記載の方法。
(13)藍藻において有機酸生産能を増強する方法であって、藍藻において時計タンパク質遺伝子を過剰発現させることを含む、前記方法。
(14)有機酸がポリヒドロキシアルカン酸であり、時計タンパク質遺伝子がkaiB遺伝子またはkaiC遺伝子であり、藍藻がphaAB遺伝子とphaEC遺伝子を有する、(13)記載の方法。
(15)ポリヒドロキシアルカン酸が、ポリヒドロキシブタン酸である、(14)記載の方法。
(16)有機酸がポリヒドロキシアルカン酸であり、時計タンパク質遺伝子がkaiB遺伝子またはkaiC遺伝子である、(13)記載の方法。
(17)藍藻が、Synechocystis属に属する、(13)〜(16)のいずれかに記載の方法。
(18)培養を窒素欠乏条件で行う、(13)〜(17)のいずれかに記載の方法。
単細胞性シアノバクテリア(単細胞性藍藻)、Synechocystis sp.PCC 6803(以下Synechocystis)細胞を用いて、7つの時計タンパク質遺伝子(kaiA、kaiB1、kaiB2、kaiB3、kaiC1、kaiC2、kaiC3)を過剰発現する株を構築した。Synechocystis sp.PCC 6803は、パスツール研究所(フランス)から入手可能である(http://www.pasteur.fr/ip/easysite/pasteur/en/research/collections/crbip/general-informations-concerning-the-collections/iv-the-open-collections/iv-iii-pasteur-culture-collection-of-cyanobacteria)。
実施例1で作製した各時計タンパク質過剰発現株(kaiAox、kaiB1ox、kaiB2ox、kaiB3ox、kaiC1ox、kaiC2ox、kaiC3ox)および野生株(GT)について、ポリヒドロキシブタン酸(PHB)の細胞内蓄積量を測定した。
実施例1で作製した各時計タンパク質過剰発現株(kaiAox、kaiB1ox、kaiB2ox、kaiB3ox、kaiC1ox、kaiC2ox、kaiC3ox)および野生株(GT)について、コハク酸、乳酸および酢酸の生産量を測定した。
野生株のコハク酸、乳酸、酢酸の生産量はそれぞれ培養液1Lあたり約20mg、275mg、16mgであった。コハク酸については、kaiB3またはkaiC3の過剰発現によって、培養液1Lあたりの生産量が、それぞれ25mg、30mgに増加することが分かった。乳酸については、kaiB1、kaiB2、またはkaiC1の過剰発現で、それぞれ546mg、447mg、408mgに増加した。また、酢酸は、培養液1Lあたりの生産量が、kaiB3の過剰発現でそれぞれ、21mgに増加した。
野生株のコハク酸、乳酸、酢酸の生産量はそれぞれ培養液1Lあたり約13mg、5mg以下、167mgであった。コハク酸については、kaiB3またはkaiC3の過剰発現によって、培養液1Lあたりの生産量が、それぞれ19mg、26mgに増加することが分かった。乳酸については、kaiB1、kaiB2、またはkaiC1の過剰発現で、それぞれ16mg、10mg、12mgに増加した。また、酢酸は、培養液1Lあたりの生産量が、kaiB3、kaiC3の過剰発現でそれぞれ、266mg、279mgに増加した。
Claims (9)
- ポリヒドロキシブタン酸、コハク酸、乳酸および酢酸からなる群より選択される有機酸の生産方法であって、kaiB遺伝子またはkaiC遺伝子である時計タンパク質遺伝子が過剰発現している藍藻を培養すること、および有機酸を採取することを含む、前記方法。
- 藍藻がポリヒドロキシアルカン酸生産能を有する、請求項1記載の方法。
- 藍藻が、phaAB遺伝子とphaEC遺伝子を有する、請求項2記載の方法。
- 藍藻が、Synechocystis属に属する、請求項1〜3のいずれかに記載の方法。
- 培養を窒素欠乏条件で行う、請求項1〜4のいずれかに記載の方法。
- 藍藻においてポリヒドロキシブタン酸、コハク酸、乳酸および酢酸からなる群より選択される有機酸生産能を増強する方法であって、藍藻においてkaiB遺伝子またはkaiC遺伝子である時計タンパク質遺伝子を過剰発現させることを含む、前記方法。
- 藍藻がphaAB遺伝子とphaEC遺伝子を有する、請求項6記載の方法。
- 藍藻が、Synechocystis属に属する、請求項6または7に記載の方法。
- 培養を窒素欠乏条件で行う、請求項6〜8のいずれかに記載の方法。
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