JP6215196B2 - 有害生物耐性植物 - Google Patents
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Description
用語「核酸分子」(または「核酸配列」)は、1本鎖もしくは2本鎖の形のDNAまたはRNA分子、特に本発明によるタンパク質をコードするDNAのことをいう。「単離核酸配列」は、それが単離された自然の環境にもはやない核酸配列、例えば細菌宿主細胞または植物の核もしくは色素体ゲノムにおける核酸配列のことをいう。
タンパク質および核酸配列
本発明の7-エピジンギベレンシンターゼタンパク質は、GenBank登録ACJ38409.1のタンパク質と全長にわたって91%の配列同一性を有し(777アミノ酸のうち710が同一)、前記タンパク質は、ソラヌム・ハブロカイテスのサンタレンおよびベルガモテンシンターゼと表示される。前記タンパク質は、(+)-アルファ-サンタレン、(-)-エンド-アルファ-ベルガモテンおよび(+)-エンド-ベータ-ベルガモテンを生成することが知られている(Sallaudら、Plant Cell、21(1)巻、301〜317頁、2009およびUS 2010-0138954)。
a)配列番号2と少なくとも96.5%の核酸同一性(または上で示すようにより高いパーセンテージ配列同一性)を有する核酸配列を得るかまたは同定するステップと、
b)a)の核酸配列を用いて、発現および/またはサイレンシングベクターを作製するステップと、
c)1または複数のb)のベクターを用いて植物または植物細胞(複数可)、好ましくは前記核酸が得られた植物種のものを形質転換するステップと、
d)形質転換された植物/植物組織の有害生物耐性の能力を分析して、植物体における遺伝子機能を決定もしくは検証し、かつ/または害虫耐性が増強されたトランスジェニック植物を作製するステップと、
e)場合によって、トランスジェニック植物の有害生物耐性を増強するこれらの対立遺伝子またはオルソログをさらなる使用のために選択するステップと
を含む。
本発明の一実施形態では、上で記載するような7-エピジンギベレンシンターゼタンパク質(バリアントまたは断片を含む)をコードする核酸配列を用いて、キメラ遺伝子、ならびに宿主細胞へのキメラ遺伝子の移入および細胞のような宿主細胞、組織、器官もしくは形質転換細胞(複数可)から導かれる生物における7-エピジンギベレンシンターゼタンパク質(複数可)の生成のためのキメラ遺伝子を含むベクターを作製する。有利な実施形態では、7-エピジンギベレンシンターゼの生成は、7-エピジンギベレンの生成のために用いる。植物細胞における7-エピジンギベレンシンターゼタンパク質(またはタンパク質断片もしくはバリアント)の生成のためのベクターは、本明細書において「発現ベクター」という。
a)前記宿主細胞に、本明細書で記載するzFPSをコードする第1核酸配列と、本発明の7-エピジンギベレンシンターゼをコードする第2核酸配列とを導入するステップと、
b)形質転換された細胞を、前記第1核酸配列および前記第2核酸配列の発現に適した条件で培養するステップと、
c)場合によって、前記細胞および/または培養培地が含有するzFPPおよび/または7-エピジンギベレンを回収するステップと
を含む方法にも関する。
以下の部分では、増強された害虫耐性表現型を有するトランスジェニック植物細胞、植物、植物種子などおよびその任意の誘導体/子孫を作製するための、本発明による7-エピジンギベレンシンターゼをコードする核酸配列の使用について記載する。
配列番号1:ソラヌム・ハブロカイテス色素体ジンギベレンシンターゼタンパク質のアミノ酸配列。
7-エピジンギベレンの生成を決定するための大腸菌発現アッセイ
全長遺伝子(配列番号4 配列番号2の5'を含む(配列番号4-配列番号2))を、pGEX-KG発現ベクターにクローニングした(GuanおよびDixon 1991)。構築物でC41(DE3)大腸菌細胞を形質転換した(Dumon-Seignovertら、2004)。対照として、空のpGEX-KGベクターで形質転換した。培養物を、0.5〜0.6のOD600まで37℃にて成長させ、30分間4℃にした。タンパク質発現を、1mMのイソプロピルβ-D-1-チオガラクトピラノシド(IPTG)を用いて誘導した。16℃にて16時間のインキュベーションの後に、細胞を遠心分離により採集した。上清を除去し、ペレットを、リゾチーム(1mg mL-1)およびプロテイナーゼ阻害剤を加えたアッセイ緩衝液(25mM HEPES、pH7.2、10mM MgCl2、10%(v/v)グリセロール)に再懸濁し、氷上で30分間インキュベートした後に音波破砕した。可溶化液を遠心分離し、上清を-80℃にて貯蔵した。活性アッセイを、500μLの50mM HEPES、pH7.2、100mM KCl、7.5mM MgCl2、20μM MgCl2、5%(v/v)グリセロール、5mM DTT中で、50μLタンパク質および基質として2mMシス-FPP(2Z-6Z-ファルネシル2リン酸)を用いて行った。酵素生成物を、固相マイクロ抽出ファイバー(SPME)を用いてGC-MSにより分析した。標準物質を用い、かつイオンスペクトル、保持時間およびKovats指数を比較して、テルペン生成物を同定した(図1および図2を参照されたい)。
様々な遺伝子/タンパク質により生成されたジンギベレンのエナンチオマーの決定
活性アッセイを、20mLのガラスバイアル中で、全量で500μLの50mM HEPES、pH7.2、100mM KCl、7.5mM MgCl2、20μM MgCl2、5%(v/v)グリセロール、5mM DTT中で、50μLのタンパク質および基質として2mMシス-FPP(2Z-6Z-ファルネシル2リン酸)、トランス-FPP(E-E-ファルネシル2リン酸)、GPP(ゲラニル2リン酸)、NDP(ネリル2リン酸)またはGGPP(ゲラニルゲラニル2リン酸)のいずれかを用いて行った(Echelon Biosciences Incorporated、Salt Lake City、USA)。バイアルをテフロン(登録商標)で裏打ちしたクリンプキャップで直ちに閉じ、穏やかな振とうの下で1時間、30℃にてインキュベートした。
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&N5=SEARCH_CONCAT_PNO|BRAND_KEY&N4=66023AST|SUPELCO&N25=0&QS=ON&F=SPEC
から得ることができる。
シクロデキストリン被覆カラムでのエナンチオ選択性ガスクロマトグラフィーにより、我々のGC-MS分析により以前は分離できなかったエス・ハブロカイテスおよびショウガにおける異なるジンギベレン立体異性体の同定が可能になった。NMRにより、エス・ハブロカイテスPI127826は7-エピジンギベレンを生成し、ショウガ油はアルファ-ジンギベレンを含有することが決定された(Bleekerら、2011)。エス・ハブロカイテスおよびショウガ油からの抽出物を陽性対照として用いて、ObZIS(スイートレモンバジルジンギベレンシンターゼ;Iijimaら、2004)およびShZISにより合成されたジンギベレンのエナンチオマー状態を研究した。分析(液体およびSPMEの両方)は、酵素が異なる立体異性体を合成することを示した。ShZISは、7-エピジンギベレンの生成を担い(エス・ハブロカイテスで見出されるエナンチオマーと同様に)、ObZISは真のアルファ-ジンギベレンシンターゼである(図3A、図3B)。
ヘキサン中の試料の液体注入。エス・ハブロカイテスの葉の洗浄物:7-エピジンギベレンについての標準物質(RT:844)。ショウガ油:アルファ-ジンギベレン(RT:851)およびS-クルクメン(RT:829)についての標準物質。葉の洗浄物とショウガ油との混合:S-クルクメン(RT:829)、7エピジンギベレン(RT:844)およびアルファ-ジンギベレン(RT:851)。zFPPとインキュベートした、pGEX:ZIS2で形質転換した大腸菌C41(DE3)のヘキサン重層物:7-エピジンギベレン(RT:844)。この実験は、キラルカラムでの7-エピジンギベレンとアルファ-ジンギベレン(NMRを用いてBleekerら、2011において以前に同定された)との分離を示し、異種発現された7-エピジンギベレンシンターゼ(ShZIS)が、PI127826における7-エピジンギベレンの原因であることを証明する。この実験は、F2植物が7-エピジンギベレンを生成することも示す。
SPME:7-エピジンギベレン(RT:850)およびR-クルクメン(RT:841)についての標準物質としてのエス・ハブロカイテス葉材料。アルファ-ジンギベレン(RT:856)およびS-クルクメン(RT:835)についての標準物質としてのショウガ油。異種発現させ、E-E-FPPを与えられたスイートレモンバジルObZIS(Iijima、R. Davidovich-Rikanati、E. Fridman、D.R. Gang、E. Bar、E. LewinsohnおよびE. Pichersky (2004) The Biochemical and Molecular Basis for the Divergent Patterns in the Biosynthesis of Terpenes and Phenylpropenes in the Peltate Glands of Three Cultivars of Basil. Plant Physiology 136; 3724〜3736頁)は、アルファ-ジンギベレン(RT:856)を作製した。異種発現させ、Z-Z-FPPを与えられたPI127826 ShZISは、7-エピジンギベレン(RT:850)を作製した。ObZISとShZISとの混合物は、両方のピークを示した。この実験は、ShZISが、既知の植物ジンギベレンシンターゼObZISとは異なるジンギベレン立体異性体を作製することを示す。
トランスジェニックエス・リコペルシカム植物の発達
トマト子葉外殖形質転換実験
トマト(エス・リコペルシカム)系統C32を、アグロバクテリウム・ツメファシエンス(GV3101)を用いる形質転換のために用いた。トマト形質転換プロトコールは、Koornneefら(1986)(Tomato Biotechnology、Donald NevinsおよびRichard Jones編、Alan Liss Inc.、New York、USA、169〜178頁中のKoornneef、Maarten、Jongsma、Maarten、Weide、Rob、Zabel、PimおよびHille、Jacques. (1986); Transformation of tomato.)およびKoornneefら(1987)(Koornneef, M.、Hanhart, C. J.およびMartinelli, L. (1987); A genetic analysis of cell culture traits in tomato. Theor.Appl.Genet. 74:633〜641頁)に記載されている。毛状突起特異的ターゲティングを、それぞれエス・ハブロカイテスおよびエス・リコペルシカムからのMKS1(メチルケトンシンターゼ1;Fridmanら、2005(Fridman E、Wang J、Iijima Y、Froehlich JE、Gang DR、Ohlrogge J、Pichersky E (2005). Metabolic, genomic, and biochemical analyses of glandular trichomes from the wild tomato species Lycopersicon hirsutum identify a key enzyme in the biosynthesis of methylketones. Plant Cell 17: 1252〜1267頁))およびMTS1(モノテルペンシンターゼ1;WO2009082208)を用いて確実にした。同時形質転換のために、pMKS1:zFPSおよびpMTS1:ShZISを有するバイナリーベクターを保持するアグロバクテリウムを希釈し、培養物を1:1の比率で混合する。記載されたプロトコールの残りは変更しなかった。トマトの苗条が出現したときに、それらを採集し、1mg L-1
IBA、200mg L-1セフォタキシム、200mg L-1バンコマイシンおよび100mg L-1カナマイシンを含有するMS20固形培地に根付かせた。
Bleekerら(2009)は、以前に、7-エピジンギベレンがエス・ハブロカイテスPI127826により生成されることを示した。7-エピジンギベレンの生成を担う、ShZISと呼ばれる遺伝子が、エス・ハブロカイテスPI127826から単離された。トランスジェニック植物は、エス・リコペルシカムC32のアグロバクテリウム媒介形質転換により生成された。エス・リコペルシカム(C32)対照植物またはMKS1:zFPSのみで形質転換された植物において7-エピジンギベレンは形成されなかったが、7-エピジンギベレンは、トランスジェニックエス・リコペルシカム植物(ゲノムにzFPSおよびShZISが挿入されている)に存在した(図4)。
7-エピジンギベレンシンターゼをコードするヌクレオチド配列の発現が害虫耐性に与える影響
バイオアッセイ方法論:
エス・リコペルシカムとエス・ハブロカイテスとの間の種間交雑を行い、F2系統をUniversity of Amsterdamの温室に移した。F2植物を、7-エピジンギベレンの生成について試験した。7-エピジンギベレン生成F2系統、エス・リコペルシカムC32(マネーメーカー)およびエス・ハブロカイテス(PI127826)の挿穂を作製した。ともに初期の交雑の親系統。
遺伝子型PI127826およびC32ならびに各F2の2つの挿穂に、4つのクリップケージを装着した(それぞれのクリップケージは、Almeria(Spain)で最初に収集され、実験室条件下でキュウリにて連続的に飼養された20匹の成虫ビー・タバシ(生物型Q)を含有した)(Bleekerら、2009-Plant Physiol.を参照されたい)。5日後に、死滅した昆虫の総数およびパーセンテージならびに卵の総数(葉の背軸側および向軸側を組み合わせて)を決定した。
F2植物およびエス・ハブロカイテス(PI127826)の挿穂は、同様の量の7-エピジンギベレンを示した。7-エピジンギベレンは、エス・リコペルシカムC32において検出できなかった(図5)。
CPB、すなわちレプチノタルサ・デセムリネアタ(甲虫目(Coleoptera))の幼虫を、ジャガイモ(栽培変種ビンチェ(Bintje))で飼養した。非選択アッセイを24時間行った。CPB幼虫(新生)に、エス・リコペルシカム(C32)とエス・ハブロカイテス(PI127826)との間の種間交雑から生じたF2植物の葉ディスク(直径1.2cm)を摂食させた。
7-エピジンギベレンレベルを、上記の方法を用いて測定した。F2植物40は、高濃度の7-エピジンギベレンを示すが、F2植物45は、わずかなレベルの7-エピジンギベレンだけを生成する(検出限界の濃度;図7A)。
トリアロイロデス・バポラリオラム(半翅目)を、トマト(エス・リコペルシカム)で飼養した。選択アッセイを24時間行った。成虫を、エス・リコペルシカム(C32)とエス・ハブロカイテス(PI127826)との間の種間交雑から生じた2つのF2植物を含むケージに放した。その後、成虫定着嗜好性を、以下のF2植物の葉(植物あたり10枚の葉)について決定した。F2植物40は、高レベルの7-エピジンギベレン(エス・ハブロカイテスと同様)を示したが、F2植物45は、わずかなレベルの7-エピジンギベレンだけを生成した(図7A)。
オンシツコナジラミの嗜好性は、2つの遺伝子型について異なった(図8)。高7-エピジンギベレン生成植物(F2-40)と比較して、2倍多いオンシツコナジラミ成虫が、低7-エピジンギベレン生成植物(F2-45)に定着した。
マクロシファム・ユーフォビエ(半翅目)を、トマト(エス・リコペルシカム)で飼養した。非選択アッセイを48時間行った。1匹の成虫アブラムシを、エス・リコペルシカム(C32)とエス・ハブロカイテス(PI127826)との間の種間交雑から生じた2つのF2植物のいずれかに設置したクリップケージ中に入れた。その後、アブラムシの性能(生存および子孫の数)を、以下のF2植物について決定した(植物あたり3つのクリップケージ;遺伝子型あたり6つの植物)。F2植物40は、高レベルの7-エピジンギベレン(エス・ハブロカイテスと同様)を示すが、F2植物45は、わずかなレベルの7-エピジンギベレンだけを生成した(図7A)。
アブラムシの性能は、2つの遺伝子型について異なった(図9)。高7-エピジンギベレン生成植物(F2-40)と比較して、アブラムシの性能は、生存および生じた子孫の数の点で、低7-エピジンギベレン生成植物(F2-45)において良好であった。
ツタ・アブソリュータ(鱗翅目)を、トマト(エス・リコペルシカム)で飼養した。非選択アッセイを7日間行った。エス・リコペルシカム(C32)植物およびエス・リコペルシカム(C32)とエス・ハブロカイテス(PI127826)との間の種間交雑から生じたF2植物において、5匹の成虫に卵を産卵させた。7日後に、ツタ・アブソリュータの産卵(産みつけられた卵の数)を、植物遺伝子型あたり6枚の葉の背軸側および向軸側で決定した。F2植物は、アッセイの後に7-エピジンギベレン含量について特徴決定され、ツタ・アブソリュータの産卵(産みつけられた卵の数)を、7-エピジンギベレンの含量と相関させた。
ツタ・アブソリュータの雌による産卵は、7-エピジンギベレンを生成するF2植物において著しく低減した(図10a)。図10bは、ツタ・アブソリュータ産卵について試験したF2植物における7-エピジンギベレンの濃度を示す。産卵は、7-エピジンギベレン含量と負に相関した(図10Aと図10Bとの組み合わせ)。
ハダニは、昆虫と同様に節足動物に属するが、異なる綱の生物である。7-エピジンギベレンの効果を、2つのハダニ種、すなわちテトラニクス・ウルティカおよびティー・エバンシについて試験した。両方の種の節足動物を、コモンガーデンビーンで飼養した。4日間の非選択アッセイを、ティー・ウルティカおよびティー・エバンシの同調集団を用いて行った。ダニを、感受性の対照植物(エス・リコペルシカム)、耐性エス・ハブロカイテスPI127826植物の葉ディスクおよび7-エピジンギベレン生成トランスジェニックエス・リコペルシカム植物(系統2)に置いた。その後、ダニの生存および繁殖能力(卵/ダニの数)を評価した。トランスジェニック植物を上記のようにして作製した。短く述べると、植物を2つの構築物で同時形質転換して、エス・リコペルシカム(pMKS1:zFPSおよびpMTS1:ShZIS)の腺状毛状突起において7-エピジンギベレンを生成した。この実験において、1つのトランスジェニック系統(系統2)を用いた。
ダニの繁殖能力は、トランスジェニックエス・リコペルシカム植物における7-エピ-ジンギベレンの生成により低減された。エス・リコペルシカムと比較すると、7-エピ-ジンギベレンを生成したトランスジェニック植物では、ダニ(両方の種)の生存が低減した。さらに、図11Aおよび図11Cは、ティー・ウルティカおよびティー・エバンシの両方についてそれぞれ81%および54%の低減というダニの繁殖能力(卵/ダニ)の強い低減を示す。
様々な植物における7-エピ-ジンギベレン生成
アラビドプシス・タリアナ、ニコチアナ・タバカム、ククミス・メロ(Cucumis melo)、ラクツカ・サティバ(Lactuca sativa)、グリシン・マックスおよびゴシピウム・ヒルスタムを、ShzFPS(さらなるzFPP前駆体)およびShZIS(7-エピジンギベレンシンターゼをコードする)で同時形質転換する。同時形質転換した植物の葉における7-エピ-ジンギベレン生成を、同じ種の模擬形質転換植物における7-エピ-ジンギベレン生成と比較する。アラビドプシス・タリアナ、ニコチアナ・タバカム、ククミス・メロ、ラクツカ・サティバ、グリシン・マックスおよびゴシピウム・ヒルスタムは、7-エピ-ジンギベレンを生成できる。
Claims (26)
- 配列番号1のアミノ酸配列または全長にわたって配列番号1のアミノ酸配列と少なくとも92%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む単離タンパク質であって、7-エピジンギベレンシンターゼ活性を有する、単離タンパク質。
- ターゲティングペプチドが先行する、請求項1に記載のタンパク質。
- 配列番号3のアミノ酸配列を含む色素体ターゲティングペプチドが先行する、請求項1に記載のタンパク質。
- 配列番号3のアミノ酸配列が先行する配列番号1のアミノ酸配列を含む、請求項1または3に記載のタンパク質。
- a)配列番号2の核酸配列、
b)配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードする核酸配列、
c)請求項1から4のいずれか一項に記載のタンパク質をコードする核酸配列、
d)(a)または(b)の核酸配列と少なくとも97%同一であり、7-エピジンギベレンシンターゼをコードする核酸配列、および
e)少なくとも1個から25個までのアミノ酸が置換、欠失、挿入または付加された配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチドであって、前記ポリペプチドは7-エピジンギベレンシンターゼ活性を有する、ポリペプチドをコードする核酸配列
を含む群から選択される核酸配列を含む、単離、合成または組換え核酸分子。 - 配列番号2のヌクレオチド配列を有する、請求項5に記載の単離核酸分子。
- 請求項5または6に記載の核酸分子に作動可能に連結したプロモーターを含むキメラ遺伝子。
- 請求項7に記載のキメラ遺伝子を含むベクター。
- 請求項8に記載のベクターを含む宿主細胞。
- 7-エピジンギベレンおよび/またはR-クルクメンを調製するための方法であって、
a)宿主細胞を、請求項5もしくは6に記載の核酸分子、請求項7に記載のキメラ遺伝子または請求項8に記載のベクターで形質転換するステップと、
b)前記宿主細胞を、7-エピジンギベレンの生成を可能とする条件下で培養するステップと、
c)場合によって、ステップb)において生成された7-エピジンギベレンを単離するステップと、
d)場合によって、前記7-エピジンギベレンを脱水素化してR-クルクメンを生成するステップと
を含む、方法。 - 宿主細胞においてzFPPから7-エピジンギベレンを生成するための方法であって、
a)前記宿主細胞に、配列番号6に示すアミノ酸配列を含み、Z,Z-ファルネシル2リン酸シンターゼ活性を有するzFPSをコードする核酸配列、または、全長にわたって配列番号6のアミノ酸配列と少なくとも90%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列であって、かつ、Z,Z-ファルネシル2リン酸シンターゼ活性を有するタンパク質をコードする核酸配列を含む第1核酸分子と、請求項5または6に記載の第2核酸分子とを導入するステップと、
b)形質転換された細胞を、前記第1核酸配列および前記第2核酸配列の発現に適した条件で培養するステップと、
c)場合によって、前記細胞および/または培養培地が含有するzFPPおよび/または7-エピジンギベレンを回収するステップと
を含む、方法。 - 請求項5または6に記載の核酸分子を含むトランスジェニック植物、トランスジェニック植物細胞、トランスジェニック種子またはトランスジェニック実。
- 請求項5または6に記載の核酸分子を含むソラヌム・リコペルシカム植物、ソラヌム・リコペルシカム植物細胞、ソラヌム・リコペルシカム種子またはソラヌム・リコペルシカム実。
- 配列番号6のアミノ酸配列または配列番号6のアミノ酸配列と少なくとも90%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする核酸分子をさらに含み、前記タンパク質がZ,Z-ファルネシル2リン酸シンターゼ活性を有する、請求項13に記載のソラヌム・リコペルシカム植物、ソラヌム・リコペルシカム植物細胞、ソラヌム・リコペルシカム種子またはソラヌム・リコペルシカム実。
- 野生型ソラヌム・リコペルシカム植物と比較して害虫耐性が増強された、請求項13または14に記載のソラヌム・リコペルシカム植物、ソラヌム・リコペルシカム植物細胞、ソラヌム・リコペルシカム種子またはソラヌム・リコペルシカム実。
- 野生型ソラヌム・リコペルシカム植物と比較して7-エピジンギベレン生成が増強された、請求項13から15のいずれか一項に記載のソラヌム・リコペルシカム植物、ソラヌム・リコペルシカム植物細胞、ソラヌム・リコペルシカム種子またはソラヌム・リコペルシカム実。
- 非トランスジェニック対照植物と比較して害虫耐性が増強されたトランスジェニック植物を生成するための方法であって、
(a)植物または植物細胞を、植物細胞において活性なプロモーターに作動可能に連結した、請求項5または6に記載の核酸分子で形質転換するステップと、
(b)植物を再生するステップと
を含む、方法。 - 前記核酸分子が、前記植物のゲノムに組み込まれている、請求項17に記載の方法。
- (c)再生された植物または自家受粉もしくは交雑によりそれから得られた植物を、1または複数の害虫に対する耐性についてスクリーニングし、前記害虫の1または複数に対する耐性が増強された植物を同定するステップ
をさらに含む、請求項17または18に記載の方法。 - 前記プロモーターが、害虫誘導性プロモーターである、請求項17から19のいずれか一項に記載の方法。
- 植物が、ナス科に属する、請求項17から20のいずれか一項に記載の方法。
- 植物が、ソラヌム属のものである、請求項21に記載の方法。
- 植物または植物細胞を、植物細胞において活性なプロモーターに作動可能に連結した、配列番号6のアミノ酸配列または配列番号6のアミノ酸配列と少なくとも90%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質をコードする核酸分子で形質転換するステップであって、前記タンパク質がZ,Z-ファルネシル2リン酸シンターゼ活性を有するステップ
をさらに含む、請求項17から22のいずれか一項に記載の方法。 - 害虫耐性植物を作製するための、配列番号1のアミノ酸配列または全長にわたって配列番号1のアミノ酸配列と少なくとも92%のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列であって、かつ、7-エピジンギベレンシンターゼ活性を有するアミノ酸配列をコードする核酸分子の使用。
- 前記植物が、ソラヌム・リコペルシカム植物である、請求項24に記載の使用。
- 前記植物が、野生型ソラヌム・リコペルシカム植物と比較して7-エピジンギベレン生成が増強されたものである、請求項25に記載の使用。
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