JP6195840B2 - 複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法及び分析キット - Google Patents
複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法及び分析キット Download PDFInfo
- Publication number
- JP6195840B2 JP6195840B2 JP2014543273A JP2014543273A JP6195840B2 JP 6195840 B2 JP6195840 B2 JP 6195840B2 JP 2014543273 A JP2014543273 A JP 2014543273A JP 2014543273 A JP2014543273 A JP 2014543273A JP 6195840 B2 JP6195840 B2 JP 6195840B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- container
- substances
- light
- target substances
- types
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54306—Solid-phase reaction mechanisms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/76—Chemiluminescence; Bioluminescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N2021/7793—Sensor comprising plural indicators
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/575—Hormones
- G01N2333/59—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Description
(1)単一の容器内に収容された、複数種の目的物質を捕獲するための物質がそれぞれ固定された複数の担体が発光し、この発光を容器外部から測定することで、複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法であって、光学フィルターを介して担体からの発光を測定することにより、所望の担体からの発光を選択的に受光する前記方法。
(2)光学フィルターが容器表面に設置されるか、あるいは容器自体が光学フィルターとなる(1)記載の方法。
(3)容器自体が光学フィルターとなる(1)又は(2)記載の方法。
(4)測定対象の発光の波長帯における光線透過率が70%以下である光学フィルターを用いる(1)〜(3)のいずれかに記載の方法。
(5)担体が球状である(1)〜(4)のいずれかに記載の方法。
(6)担体が1次元的又は2次元的に配置している(1)〜(5)のいずれかに記載の方法。
(7)発光が化学発光又は蛍光であり、発光の波長帯が340-900nmの範囲内にある(1)〜(6)のいずれかに記載の方法。
(8)単一の容器内に収容された、複数種の目的物質を捕獲するための物質がそれぞれ固定された複数の担体が発光し、この発光を容器外部から測定することで、複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析キットであって、複数種の目的物質を捕獲するための物質がそれぞれ固定された複数の担体と、所望の担体からの発光を選択的に受光するための光学フィルターとを含む前記分析キット。
(9)容器自体が光学フィルターである(8)記載の分析キット。
(10)発光が化学発光又は蛍光であり、発光の波長帯が340-900nmの範囲内にある(8)又は(9)に記載の分析キット。
本明細書は、本願の優先権の基礎である日本国特許出願、特願2012‐232488の明細書および/または図面に記載される内容を包含する。
ヘイズ値は、透明性の度合いを表す値であり、JIS K7136では、全光線透過率に対する拡散透過率の比として定義されている。
本明細書において、「所望の担体からの発光を選択的に受光する」とは、例えば、BISTにおけるキャピラリー壁を伝搬する光や、受光面の法線に対して斜めから入射する光を垂直光に比して選択的に遮光するなど、複数の担体間の光学的交差を抑制することの他、バックグラウンド光の効果を低減することも含む。
光学フィルターは、容器とは別に用意してもよいし、容器自体を光学フィルターとしてもよい。容器とは別に光学フィルターを用意する場合には、光学フィルターは容器表面に設置するとよく、例えば、容器壁面形状に沿って、容器壁面に密着させた状態で設置するとよい。
担体、光学フィルター、容器、発光については上述した。
1.要旨
全長50mm程度のキャピラリーによるTSH検出において、6濃度水準の黒色顔料により着色されたキャピラリーを用いて、TSH(抗原濃度0.5及び25uIU/mL)の検出を行った。結果、キャピラリー着色の効果は、信号光強度の高い、TSH抗原濃度25uIU/mLで顕著に現れ、ピークの縦横比((ピークの高さ)/(1/3,000幅))は、無着色時に比べ最大1.8倍程度となった。キャピラリーの着色は信号光の局在化に有効で、BISTの多項目化に対して有用な技術であることが確認された。
2.実験方法
2−1 キャピラリーの着色及び透過率の測定
住友ダウ株式会社製ポリカーボネートペレット(カリバー)を、サニーカラー株式会社製着色剤(ドライカラー Y-4-6033スモーク)によって5水準の濃度で着色(厚さ1mm、426nmに於ける透過率で約7.7%、19%、28%、62%、70%)した着色ペレットを調整した。
次いで、これらの着色ペレットを、厚さ1mmx3mm四方の板材に加工し、透過率測定用のテストピースを作製した。
このテストピースの透過率を、株式会社日立ハイテクノロジーズ社製分光光度計(U-3000)により、波長340-1000nmの領域で測定した。
2−2 TSH測定用BISTの作製
2−2−1 抗体固層ビーズの作製
2−2−1-1 プローブビーズ30個を1ml の1×PBSにてサンプルチューブ内で数回転倒混和し洗浄した。これを2回繰り返した後、液を良く取り去り、1×PBS, 20ug/ml ・TSH; TSH183を300ul(10ul/ビーズ)添加し、4℃でO/N(19h)静置し、抗体を固層した。
2−2−1-2 抗体固層後、1ml の1×PBS, 0.05% Tween20にてサンプルチューブ内で数回転倒混和し洗浄した。これを2回繰り返した後、液を良く取り去り、1×PBS, 0.1% Tween20, 1%(w/w)Block Aceを300ul(10ul/ビーズ)添加し、RTで3h静置し、ブロッキングした。
2−2−1-3 ブロッキング後、1ml の1×PBS, 0.05% Tween20にてサンプルチューブ内で数回転倒混和し洗浄した。これを2回繰り返した後、液を良く取り去り、1×PBS を満たした。
2−2−2 遮光ビーズの作製
2−2−2-1 SiCビーズを6.88g(約4000個)量り取り、15mlの1×PBSにてチューブ内で数回転倒混和し洗浄した。これを2回繰り返した後、液を良く取り去り、1×PBS, 0.1% Tween20, 1%(w/w)Block Aceを15ml添加し、RTで1hローテーターにてゆるやかに攪拌し、ブロッキングした。
2−2−2-2 ブロッキング後、15ml の1×PBS, 0.05% Tween20にてチューブ内で数回転倒混和し洗浄した。これを2回繰り返した後、液を良く取り去り、1×PBS を満たす。使用しない分は4℃保存した。
2−2−3 BISTの作製
TSHプローブビーズ1個と遮光ビーズ49個を図1のように充填した。
2−2−4 TSHの検出
2−2−4-1 下表のようにGC seriesカートリッジ(プレシジョン・システム・サイエンス株式会社製に試薬を添加し、SX-12GC(プレシジョン・システム・サイエンス株式会社製)にセットした。SX-12GCコンボラック(プレシジョン・システム・サイエンス株式会社製)のHole-2にSheath DN-100(プレシジョン・システム・サイエンス株式会社製)とともにBISTをセットし、約110分で反応が終了した。
2−2−4-2 反応が終了した後、well 1の溶液をキャピラリー内に満たし測定まで保存した。測定直前にキャピラリー内の溶液を抜き去った後、検出試薬(ECL western detection reagents, GEヘルスケアジャパン株式会社)を80ul吸引した。その後、PMT(Photomultipulator)及び走査式光ファイバー検出プローブを有するプレシジョン・システム・サイエンス株式会社製LuBEAにて測定した。
Binding Buffer: (PBS)
TSH:Human TSH(ヒト甲状腺刺激ホルモン(ヒト血清由来))
Biotin標識抗体:(抗ヒトTSH抗体をビオチン標識したもの)
Streptavidin-HRP: (Thermo scientific社製)
抗原濃度0.5及び25uIU/mLのTSHをBISTにより測定した時の走査プロファイル(生データ)を図2-1、2-2に、キャピラリー材料の吸光度とピーク値の関係を図2-3に示す。発光のピーク値はキャピラリー素材の吸光度の増加(透過率の低下)とともに、ほぼ直線的に減少した。
これに対し、抗原濃度25uIU/mLのデータをピーク値で規格化したデータを図3-1に、キャピラリー材料の吸光度とピーク幅、の関係を図3-2に示す。ピーク幅はAbs=0 から 0.5の領域で急減に減少し、それ以上の吸光度領域では、大きな変化は見られなかった。
図3-3には、キャピラリー材料の吸光度と、ピーク値とピーク幅の比(P/W比)の関係をプロットしたグラフを示す。P/W比はAbs= 0 から0.2の領域で急激に増加し、0.2から0.8の領域で極大に達し、この時のP/W比は1.7-1.8程度であった。さらに吸光度が高くなる領域では、P/W比は再度減少するという結果になった。
4.考察
図3-3の結果から、BISTにおける信号光の局在化(P/W比の最大化)という課題において、キャピラリー材料の着色(信号光の遮蔽)は有効な手段であり、適度な着色によってP/W比を2倍弱まで増大させられる可能性が示された。本結果は、信号光分布の原因の一つが、キャピラリー壁を伝搬する光であることを示しており、材料の着色によりこの信号光のキャピラリー伝搬成分を選択的に低減させると考えられる。
本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。
Claims (7)
- 単一の容器内に収容された、複数種の目的物質を捕獲するための物質がそれぞれ固定された複数の担体が発光し、この発光を容器外部から測定することで、複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法であって、前記容器を着色することで、測定される発光を局在化させる前記方法。
- 測定される発光の波長帯における光線透過率が70%以下である着色容器を用いる請求項1記載の方法。
- 担体が球状である請求項1又は2に記載の方法。
- 担体が1次元的又は2次元的に配置している請求項1〜3のいずれかに記載の方法。
- 発光が化学発光又は蛍光であり、発光の波長帯が340-900nmの範囲内にある請求項1〜4のいずれかに記載の方法。
- 単一の容器内に収容された、複数種の目的物質を捕獲するための物質がそれぞれ固定された複数の担体が発光し、この発光を容器外部から測定することで、複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析キットであって、複数種の目的物質を捕獲するための物質がそれぞれ固定された複数の担体と、測定される発光を局在化させるように着色された容器とを含む前記分析キット。
- 発光が化学発光又は蛍光であり、発光の波長帯が340-900nmの範囲内にある請求項6記載の分析キット。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2012232488 | 2012-10-22 | ||
JP2012232488 | 2012-10-22 | ||
PCT/JP2013/078406 WO2014065221A1 (ja) | 2012-10-22 | 2013-10-21 | 複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法及び分析キット |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2014065221A1 JPWO2014065221A1 (ja) | 2016-09-08 |
JP6195840B2 true JP6195840B2 (ja) | 2017-09-13 |
Family
ID=50544601
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014543273A Active JP6195840B2 (ja) | 2012-10-22 | 2013-10-21 | 複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法及び分析キット |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10288606B2 (ja) |
EP (1) | EP2910930A4 (ja) |
JP (1) | JP6195840B2 (ja) |
KR (1) | KR20150074057A (ja) |
CN (1) | CN104737002A (ja) |
WO (1) | WO2014065221A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE112018007705T5 (de) | 2018-06-08 | 2021-03-25 | Lanzhou Mingde Pharmaceutical Co., Ltd. | Magnetisches Perlen-Nukleinsäure Aptamer-Multitargetmolekül-Simultan-Nachweisverfahren und Kit |
CN115656150B (zh) * | 2022-09-26 | 2023-09-08 | 苏州浦隆生物有限公司 | 一种用于检测生物分子的装置及方法 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5770459A (en) * | 1980-10-22 | 1982-04-30 | Toshiba Corp | Cell cassette |
US5861124A (en) * | 1993-07-15 | 1999-01-19 | Hamamatsu Photonics Kk | Method and apparatus for detecting denaturation of nucleic acid |
JP3115501B2 (ja) | 1994-06-15 | 2000-12-11 | プレシジョン・システム・サイエンス株式会社 | 分注機を利用した磁性体の脱着制御方法及びこの方法によって処理される各種装置 |
WO1996029602A1 (fr) | 1995-03-20 | 1996-09-26 | Precision System Science Co., Ltd. | Procede et dispositif pour le traitement de liquides a l'aide d'un distributeur |
WO1997044671A1 (en) | 1996-05-20 | 1997-11-27 | Precision System Science Co., Ltd. | Method and apparatus for controlling magnetic particles by pipetting machine |
WO2000061198A1 (en) | 1999-04-12 | 2000-10-19 | Hitachi Chemical Co., Ltd. | Method of producing probe arrays for biological materials using fine particles |
JP4233686B2 (ja) | 1999-06-11 | 2009-03-04 | 日水製薬株式会社 | イムノクロマトグラフィー装置のハウジング |
EP1406576B2 (en) | 2001-07-18 | 2011-06-29 | Unilever PLC | Hair and/or scalp treatment compositions |
KR101071430B1 (ko) * | 2002-08-27 | 2011-10-10 | 킴벌리-클라크 월드와이드, 인크. | 시분해 형광을 이용한 막 기반 분석법 |
JP4436261B2 (ja) | 2005-02-01 | 2010-03-24 | ユニバーサル・バイオ・リサーチ株式会社 | 解析処理方法及び装置 |
US20110189714A1 (en) * | 2010-02-03 | 2011-08-04 | Ayliffe Harold E | Microfluidic cell sorter and method |
JP5092308B2 (ja) | 2006-08-07 | 2012-12-05 | 日立化成工業株式会社 | 化学発光分析方法および分析装置 |
CN101558304B (zh) * | 2006-11-22 | 2015-08-05 | 科隆迪亚戈有限公司 | 使用可压缩微流体装置以光学方式检测液体样品中的多个分析物的方法 |
CA2647953A1 (en) * | 2008-12-29 | 2010-06-29 | Sqi Diagnostics Systems Inc. | Multiplex analyte detection |
CN102460170B (zh) * | 2009-04-20 | 2014-11-05 | 环球生物研究株式会社 | 生物相关物质测定用管及定量*** |
JP2011075491A (ja) | 2009-10-01 | 2011-04-14 | Panasonic Corp | 光量測定装置 |
EP2507620B1 (en) * | 2009-11-30 | 2017-03-22 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Optical bead assay reader |
JP2012233888A (ja) | 2011-04-21 | 2012-11-29 | Universal Bio Research Co Ltd | 複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法 |
AU2012245528B2 (en) * | 2011-04-22 | 2015-01-29 | 3M Innovative Properties Company | Luminescence detection method |
-
2013
- 2013-10-21 US US14/437,450 patent/US10288606B2/en active Active
- 2013-10-21 KR KR1020157012755A patent/KR20150074057A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-10-21 EP EP13849432.3A patent/EP2910930A4/en not_active Withdrawn
- 2013-10-21 WO PCT/JP2013/078406 patent/WO2014065221A1/ja active Application Filing
- 2013-10-21 CN CN201380054754.9A patent/CN104737002A/zh active Pending
- 2013-10-21 JP JP2014543273A patent/JP6195840B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2014065221A1 (ja) | 2014-05-01 |
US10288606B2 (en) | 2019-05-14 |
JPWO2014065221A1 (ja) | 2016-09-08 |
EP2910930A4 (en) | 2016-06-15 |
US20150276728A1 (en) | 2015-10-01 |
EP2910930A1 (en) | 2015-08-26 |
CN104737002A (zh) | 2015-06-24 |
KR20150074057A (ko) | 2015-07-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103837675B (zh) | 多组分同时定量分析的均相发光免疫分析方法及其所使用的试剂盒 | |
Li et al. | Multiplexed chemiluminescence determination of three acute myocardial infarction biomarkers based on microfluidic paper-based immunodevice dual amplified by multifunctionalized gold nanoparticles | |
US10379119B2 (en) | Synthetic thread based lateral flow immunoassay | |
CN103308489A (zh) | 利用时间分辨上转换发光技术的侧向流动免疫测定法 | |
CA2945043C (en) | Utilisation de particules absorbantes pour ameliorer la detection du signal dans un procede d'analyse | |
CN104246501B (zh) | 生物化验样品分析器 | |
CN1866012A (zh) | 一种定量、快速的免疫检测方法及其专用装置 | |
Yin et al. | A microfluidic chip-based MRS immunosensor for biomarker detection via enzyme-mediated nanoparticle assembly | |
JP2007024498A (ja) | 免疫分析方法及びバイオチップ | |
WO2010086942A1 (ja) | 自動分析装置 | |
JP6195840B2 (ja) | 複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法及び分析キット | |
CN114923886A (zh) | 一种基于光栅与磁阵列式的单分子荧光检测方法 | |
US10564156B2 (en) | Use of a colorant in order to improve signal detection in an analysis method | |
EP2803998B1 (en) | Method for evaluating system for quantifying cell of interest in blood | |
CN1034617A (zh) | 鉴定生化物种之方法及装置 | |
JP2008203172A (ja) | 表面プラズモン増強蛍光検出方法 | |
JP2012233888A (ja) | 複数種の目的物質を同時に検出又は定量するための分析方法 | |
WO2013013214A1 (en) | Method for detecting microorganisms | |
CN113758886B (zh) | 一种基于乳胶微球浓度变化的多目标物同时检测方法 | |
CN212459331U (zh) | 时间分辨流式荧光检测分析装置 | |
CN102565381A (zh) | 导电微粒子介导电化学发光信号的免疫检测方法 | |
TWM557263U (zh) | 膠體金酵素反應器 | |
CN111239029A (zh) | 时间分辨流式荧光检测分析装置及其使用方法 | |
JP2010181323A (ja) | 表面プラズモンを利用したアッセイ法 | |
Kourentzi et al. | Flotation Immunoassay: Masking the signal from Free Reporters in sandwich Immunoassays |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160725 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170523 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170719 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170801 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170816 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6195840 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |