JP6180436B2 - キトサン由来組成物 - Google Patents
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Description
本PCT国際特許出願は、米国仮特許出願第61/588,783号(発明の名称「Chitosan−Derived Biomaterials and Applications Thereof」、2012年1月20日出願)に基づく優先権を主張するものであり、この仮出願の全内容が参照により全体として組み込まれる。
本発明は、全体的に、新生物、例えば悪性の肺、胸、前立腺、皮膚、甲状腺および腎臓の新生物、他の種類の悪性新生物、ならびに他の医学的障害を処置するための方法に関連して使用されるキトサン由来組成物を含む治療用組成物に関する。
[0007]一実施形態によれば、本発明は、全体的に、新生物および他の医学的障害を処置するための方法に関連して使用されるキトサン由来組成物を含む治療製剤に関する。本発明のさらなる態様および/または利点は、一部は、以下の詳細な説明に記載されており、一部は本発明の実施によって知得することができる。
[0008]本発明の上記および/または他の態様および利点は、添付の図面を参照することにより明らかであり、以下の実施形態の詳細な説明から容易に認識されるであろう。
[0012]本発明は、全体的に、新生物および他の医学的障害を処置するための方法に関連して使用されるキトサン由来組成物を含む治療製剤に関する。本明細書で引用される全ての参照文献は参照により全体として組み込まれることが理解されるべきである。
[0014]糖化キトサンは、キトサンの遊離アミノ基を糖化(つまり、非酵素的にグリコシル化)し、次いで還元により安定化した生成物である。糖化により、有利な溶解特性および粘度特性がキトサンに付与され、これによりレーザーアシスト免疫療法および誘導体の他の用途に関連する誘導体の使用が容易になる。キトサンの糖化により、キトサンがより親水性になり、糖化されない場合より多くの水が、このポリマーに吸収および保持される。
[0029]従来法で製造されたキトサン製品は、水溶液に分散、懸濁または溶解したとき、GMP基準に従って製造することが非常に難しく、投与および他の用途においていくつかの不都合な点がある。
[0032]糖化キトサン(GC)の製剤(例えば、溶液または懸濁液)の注射性能が、GCの粘度および流動特性に非自明的に依存していることが驚くべきことにおよび予想外に発見された。そしてこれらの特性は、GCの分子量、キトサンにとっての親キチンの重合度、親キチンの脱アセチル化の程度、およびキトサンの糖化の程度に大きく依存する。これらの後半の特性は、GCのポリマー鎖のもつれ度、ならびにGC分子に存在する置換基(つまりアセチルおよび糖)の数および性質によって引き起こされた分子内水素結合の程度により決定され、これらの両方が調製される溶液の粘度および他の流動特性に大きく寄与する。
[0039]また驚くべきことに本発明の粘弾性改善糖化キトサン調製物を使用することにより、滅菌濾過が予想外に改善されることが見出された。米国特許第5,747,475号(「キトサン由来バイオマテリアル」)に述べられているように、従来の糖化キトサン調製物は0.22μmの滅菌濾過器を通す滅菌濾過が非常に困難であることが示されており、商業的なcGMP製造には適したものでない。対照的に、本発明の粘弾性改善糖化キトサンは、予想外の流動特性を有することが見出され、滅菌濾過、cGMP製造およびヒトにおける使用に非常に適したものであることが示された。
[0041]化学分野におけるいくつもの適切な技術を使用して、糖化キトサン製剤の粘度を確実におよび正確に測定することができる。
[0045]分子量以外にも、溶液、特にポリマー溶液の粘度に影響を与える多数の因子がある。糖化キトサン(GC)の場合には、GC溶液の注射性能は、溶液中のGCの粘度および流動特性に大きく依存している。これらの特性は、GCの分子量、キトサンにとっての親キチンの重合度、親キチンの脱アセチル化の程度、およびキトサンの糖化の程度に大きく依存している。これらの後半の特性は、GCのポリマー鎖のもつれ度ならびにGC分子に存在する置換基(つまりアセチルと糖類)の数および性質によって引き起こされた分子内水素結合の程度により決定され、これらの両方が、調製される溶液の粘度に大きく寄与する。
(i)糖化キトサンの分子量;
(ii)キトサンにとっての親キチンの重合度;
(iii)親キチンの脱アセチル化度;および
(iv)キトサンの糖化度。
[0047]化学分野で知られているいくつもの適切な技術を使用して、糖化キトサンの分子量(MW)を確実におよび正確に測定することができる。
[0051]キトサンにとっての親キチンの重合度(DP)は、化学分野で知られているいくつもの適切な方法または技術に従って、確実におよび正確に測定することができる。
[0053]別の生理化学的特性は、親キチンの脱アセチル化度である。化学分野で知られている任意の数の適切な技術を使用して、親キチンの脱アセチル化度を確実におよび正確に測定することができる。
[0055]化学分野で知られている任意の数の適切な技術を使用して、キトサンの糖化度を確実におよび正確に測定することができる。
[0062]本発明のさらに他の実施形態は、糖化キトサン製剤を調製するための方法に関する。糖化キトサンは、好ましくは、キトサンと単糖類および/またはオリゴ糖類とを、好ましくは酸性化剤の存在下で、糖のカルボニル基とキトサンの第一級アミノ基との間のシッフ塩基の形成(本明細書ではアミノ基の糖化とも称する)を達成させて、少なくとも一定のキトサンポリマーの糖化率(%)(例えば、2%以上)が達成される程度に十分な時間、反応させることによって得られる。好ましくは、続けてシッフ塩基および転位誘導体(Amadori生成物)をそれぞれ第二級アミンまたはアルコールへ還元して安定化する。NMRによる追跡を用いて、キトサンポリマーへの単糖類および/またはオリゴ糖類の結合を確認することができ、残存する遊離アミノ基の化学的測定(例えば、ニンヒドリン反応)を用いて、糖化度を評価することができる。
[0066]本明細書に記述されるように、キトサン(部分的脱アセチル化キチン)は、キチンの誘導体(β1→4グリコシド結合によって連結されたN−アセチルグルコサミン単位から構成される直鎖状ホモポリマー)である。キトサン由来組成物は、部分的に脱アセチル化したキチンのホモポリマーを含み、この部分的に脱アセチル化したキチンのホモポリマーは、そうでなければ遊離している多数のアミノ基が還元された単糖類またはオリゴ糖類のカルボニル基に結合して、イミン結合(シッフ塩基)または関連生成物(Amadori転位)を生成し、1分子の水を放出する。
(i)非脱アセチル化グルコサミンモノマーの割合が、約1%〜約30%であり;
(ii)重合度(脱アセチル化、非脱アセチル化、糖化および非糖化グルコサミン単位の様々な組み合わせの重合度)が、約xn=300〜約xn=8000、最も好ましくは約xn=1500であり、および/または
(iii)脱アセチル化された重合グルコサミンの遊離アミノ基の糖化度(%)が約0.1%〜約30%である、
組み合わせを包含する。
[0071]本発明に従って使用することができる様々な種類の薬学的に許容され得る製剤または調製物の例としては、例えば、溶液、懸濁液、および粘弾性糖化キトサン調製物の注射用の他の種類の液体もしくは半液体製剤が挙げられる。例えば、薬学的に許容され得る製剤または調製物は、実質的に水性の製剤中に分散、懸濁または溶解した糖化キトサンを含むことができる。用語「実質的に水性」を使用するとき、製剤または調製物が、特定の実施形態において、一定の割合で1以上の非水性成分と、1以上の薬学的に許容され得る賦形剤を含み得ると理解されるべきである。
[00117]粘弾性糖化キトサン(GC)調製物を含む本発明の調製物および製剤は、例えば免疫アジュバントとして、腫瘍免疫療法において使用することができる。
[00126]本発明によれば、注射可能な材料として使用可能な適切な粘度を有する糖化キトサン(GC)調製物を、さらなる用途、例えば、光線力学的がん療法(PDT)および腫瘍免疫療法で使用することが望ましい。
[00129]本発明によれば、がんの処置に使用するための注射可能な材料として適切な粘度を有する糖化キトサン(GC)調製物を利用することが望ましい。これは、任意の適切な様式で、例えば、光熱的または光線力学的がん療法(PDT)と腫瘍免疫療法との組み合わせなどの用法の組み合わせにおいて、達成され得る。用語「がん」は、本明細書で使用するとき、多数の様々な種類の悪性新生物のいずれかを含むことを意図する一般的な用語である。悪性新生物のほとんどは周囲組織に浸潤し、いくつかの部位に転移し得、試みられた除去の後で再発し、十分に処置しない限り、患者の死を引き起こす可能性がある。新生物とは、本明細書で使用するとき、通常より急速に細胞増殖によって成長する異常な組織を指す。その増殖を開始させた刺激が消えた後であっても、増殖は続く。新生物は、構造的組織および正常組織の機能的協調が部分的または完全に欠如しており、良性または悪性のいずれかの場合があるが、通常、顕著な塊を形成している。
[00133]本発明のキトサン由来組成物、特に粘弾性糖化キトサン調製物は、新生物および他の医学的障害の処置に有効である。糖化キトサンの単独あるいは他の薬との組み合わせのさらなる用途としては、がんおよび後天性免疫不全症候群を含むがこれらに限定されない免疫不全の患者の処置における免疫賦活剤としての使用が挙げられる。
・処置された原発性腫瘍の除去
・処置されない転移の除去
・長期免疫および生存の誘導
・腫瘍再誘発に対する抵抗性の生成
・治療用量でのヒトでの使用において無毒で安全。
糖化キトサン(GC)の例示的な調製方法
糖化キトサンは、キトサンポリマーの所定の糖化度(%)が達成される所定の程度まで糖のカルボニル基とキトサンの第一級アミノ基とのシッフ塩基の形成(本明細書ではアミノ基の糖化とも称する)がなされるのに十分な時間、キトサンを単糖類および/またはオリゴ糖類と、好ましくは酸性化剤の存在下で、反応させることによって得られる。続けて、シッフ塩基とその転位誘導体(Amadori生成物)の還元により、安定化が行なわれる。NMRによる追跡を用いて、キトサンポリマーへの単糖類および/またはオリゴ糖類の結合を確認することができ、残存する遊離アミノ基の化学的測定(例えば、ニンヒドリン反応)を用いて、糖化度が評価される。
濾過滅菌法
米国特許第5,747,475号に記載されるような、従来の1500kDaのガラクトキトサンは、合成は比較的簡単であるが、例えば0.22ミクロンのフィルターを用いた滅菌はフィルターの完全性を損なわずに行うことはできないので、従来の糖化キトサンはGMP製造およびヒトでの使用に適さない。対照的に、本明細書に記載の新しい粘弾性糖化キトサンは、予期しなかった有利な生理化学的特性によりGMP製造および濾過滅菌法に関して顕著な利点を有する。例えば、250,000Da(250kDa)の分子量(M.W.)において、0.22ミクロンのフィルターを用いる滅菌濾過は、濾過中に材料を損失することなく100ml/分の流量であり、高度に実現可能である。
糖化キトサン(GC)の粘度
GC調製物の分子量をより高くすると、より高い粘度(Cpで測定)が示される。
GCのkDa Cp
100 0.914
250 7.68
500 20.79
1500 84.7
下記のグラフは、100kDa〜1,500kDaの範囲の分子量を有するGCサンプルにおける粘度(単位Cp、y軸)対分子量(単位kDa、x軸)を示す。この実験において、溶液中のGCの濃度は、分子量が増加するにつれて低下し、0.6%(100kDa)〜0.11%(1,500kDa)の範囲であった。
サイズkDa 試料中のGCパーセント
100 0.6
250 0.3
500 0.14
1500 0.11
製造上の改善
この例示的研究では、糖化キトサンの製造における全体的な収率を向上させるために必要に応じて実験条件を調整し得ることが分かった。予想外にも、GCの製造がpH条件を制御して糖化度(%)を制御することにより改善され得ることが分かった。これは具体的には水素化ホウ素ナトリウム(NaBH4)の半減期がpHに比例しており、低いpHではNaBH4の半減期が非常に短く、高いpHでのみNaBH4がやや安定になるためであることが分かった。このように、NaBH4は、低いpHでのシッフ塩基およびAmidori生成物の還元による糖化キトサンの安定化には有効でないと判断された。例えば、pHが5未満(pH<5)に維持した時、NaBH4の半減期は非常に短いため、シッフ塩基およびAmadori生成物の還元があまり効率的ではなく、したがってGCの糖化度(%)が低下した。
ヒト臨床試験でのレーザーアシスト免疫療法(LIT)処置
調査者で実施した乳がんの臨床試験を、進行した乳がんを有する10人の患者(5人は病期IV、5人は病期III)で行った。ほとんどの患者は、従来の療法に少ししかまたは全く反応せず、粘弾性糖化キトサンを免疫アジュバントとして使用した少なくとも1つのレーザーアシスト免疫療法(LIT)による処置を受けた。2人の患者が、試験と関連のない理由により早期に試験から外れ、評価可能な対象は8人であった。治験の前に、独立した調査者によりIRBと政府の承認を得た。生検および医用画像(CTスキャンなど)を使用して原発性病変と転移を評価した。
糖化キトサンを伴うレーザーアシスト免疫療法は、マウスのB16メラノーマ腫瘍に対する抗腫瘍免疫を示す
雌のC57BC/6マウス(8週齢、12匹のマウス/群)に、B16−F1メラノーマ腫瘍(106生存腫瘍細胞)を背中へ皮下接種した。腫瘍は移植後約7日で処置サイズ(直径7〜8mm)に達した。試験には5つの処置群(12匹の雌マウス/群)、つまり、未処置対照群、レーザーアシスト免疫処置対照群、ならびに0.2mLの1%糖化キトサンをレーザー処置の24時間前、直後もしくは24時間後に腫瘍周囲に注入したレーザーアシスト免疫処置群を含めた。805nmのダイオードレーザーを、パラメータ設定2W、10分間持続で、レーザー照射に使用した。レーザーは、処置部位の末端にある拡散レンズを備えた光ファイバーを通して方向づけ、レーザーチップは皮膚から4mmの距離に維持した。
805nmのレーザーおよび糖化キトサンを使用する転移性乳腺モデルでの組織内レーザーアシスト免疫療法
最適な組織内レーザー用量と最適な糖化キトサン用量を決定するための試験を行った。雌のヴィスター・フュルト・ラット(5〜6週齢、100〜125g)に、DMBA−4の移植可能な転移性乳腺腫瘍(105生存腫瘍細胞)を背中へ皮下注射した。DMBA−4腫瘍は、元々は化学的に誘導したものであり、転移性が高く、免疫原性が低い。腫瘍はリンパ管に沿って転移し、遠位部位に複数の転移を迅速に形成し、全てのラットを腫瘍移植後、30〜40日で死亡させる。原発性腫瘍が0.2〜0.5cm3になった時、腫瘍を覆う毛を切り取り、麻酔をかけた動物(2%イソフルラン)にレーザーアシスト免疫療法を行なった。805nmダイオードレーザーを使用して標的腫瘍に近赤外線を送達した。連続的なレーザー出力を鋭敏な(active)円筒状チップを備えた光ファイバーを介して送達した。鋭敏なチップを保護する透明なプラスチック製の覆いを備えた1.0cmの鋭敏なチップを使用した。鋭敏なファイバーチップの挿入のために、ニードルガイドまたは穿刺支援挿入方法のいずれかを使用した。ファイバーの腫瘍内位置を805nmのレーザーからの赤外光を捕捉できるデジタルカメラによって確認した。ラットを毎日観察し、少なくとも100日間、週に2度、腫瘍を観察した。処置が成功したことの基準は、腫瘍移植後100日間生存することとした。最適な組織内レーザー用量は、対照(9匹のラット、処置なし)、組織内レーザー出力1、1.5、2、2.5および3W/cm2を10分間(14匹のラット/群)、ならびに組織内レーザー出力2W/cm2を30分間(14匹のラット/群)における効果を評価することによって決定した。10分で3W、30分で2Wにおけるラットは、他の群より高い平均生存率を有するようであった。最適な糖化キトサン用量は、組織内レーザーアシスト免疫療法を2.5Wで20分間行い、続けて0.1、0.2、0.4および0.6mLの1%糖化キトサンを投与した後の生存率を評価することによって決定した。処置を受けなかったラットの群もコントロールとして含めた。最良の生存率は42%であり、0.2mLの糖化キトサン投与の後で観察された(下記図を参照)。
レーザーアシスト免疫療法を使用したラットでのDMBA−4転移性乳腺腫瘍に対して誘導された抗腫瘍免疫
雌のヴィスター・フュルト・ラット(6〜7週齢、110〜130g)に、DMBA−4の移植可能転移性乳腺腫瘍(105生存腫瘍細胞)を鼠蹊領域へ接種した。原発性腫瘍は、全体的に接種後7〜10日後に現れ、3週間以内でほぼ1〜5gとなった。腫瘍は、リンパ管を介して鼠蹊および腋窩リンパ節へ転移した。処置は、原発性腫瘍が0.2〜0.5cm3となったとき(一般に接種後10〜15日)、開始した。ラットに、0.25%のインドシアニングリーンと1%の糖化キトサン溶液(0.20mL)を、腫瘍の中心に直接注射して投与し、その後、照射を行った。805nmダイオードレーザーを、パラメータ設定2W、10分間持続で、レーザー照射に使用した。レーザーは、光ファイバーによって処置部位に向けた。照射に続いて、動物を個別に収容し、観察結果および腫瘍測定結果を週に2度記録した。成功裡に処置されたラット(治癒したラット)を、1匹のラット当たり105〜107生存腫瘍細胞の腫瘍用量レベルで、同じ腫瘍細胞で繰り返し再負荷し、動物を腫瘍発生について4ヶ月観察した。レーザーアシスト免疫療法によって処置した32匹のラットのうち、8匹のラットは成功裡に処置され、接種後120日を超えて腫瘍はなかった。全ての治癒したラットでは、処置後も転移は発生し続け、その後、徐々に低減し、最後はさらなる処置なしで消失した。7匹の成功裡に処置されたラットに、1注射あたり105〜107の生存腫瘍細胞の範囲の用量レベルで、3回まで再負荷した。これらの動物のいずれにおいても、原発性または転移性腫瘍の再発はなく、動物は、120日を超えて生存し、一方で、処置していない対照ラットでは原発性および転移性腫瘍が発生し、平均生存期間は30日であった。
キトサン由来免疫アジュバントによるレーザーがん処置の増強
レーザーアシスト免疫療法処置中の免疫アジュバントの効果をラットで4つの異なる免疫アジュバントを使用して評価した。雌のヴィスター・フュルト・ラット(6〜8週齢、150〜200g)に、DMBA−4の移植可能な転移性乳腺腫瘍(105生存腫瘍細胞)を鼠蹊の脂肪肉趾へ皮下接種し、その7〜10日後に処置を行った。原発性腫瘍は一般に5〜7日で触知できるようになり、遠位の鼠蹊および腋窩の転移は接種後15〜20日で現れた。原発性腫瘍が0.2〜0.5cm3に達したとき、レーザーアシスト免疫療法処置を開始した。レーザー療法は、全体的に10日目に実施した。免疫アジュバントには、1%の糖化キトサン水溶液(0.2mL用量、2つの実験でn=48のラット)、50%の完全フロイントアジュバント(0.2mL用量;n=33のラット)、50%の不完全フロイントアジュバント(0.2mL用量;n=30のラット)およびコリネバクテリウム・パルブム(C.parvum)(35μg/ラット用量;n=32のラット)を含めた。免疫アジュバントを0.25%のインドシアニングリーンと混合し、腫瘍の中心に直接注射し、2時間後、805nmのダイオードレーザーで照射した。動物には照射に先立って麻酔をかけ、原発性腫瘍に重なる毛は切り取った。レーザーパラメータは、2Wで10分間、3mm直径レーザー療法部位とし、1cm径の腫瘍について96J/cm2のフルエンスとなった。動物は個別に収容し、毎日観察し、腫瘍負荷の測定値は1週間に2回、収集した。
キトサン由来免疫アジュバントによる光線力学的療法の増強
糖化キトサンと組み合わせた直接腫瘍破壊のための方法としての光線力学的療法を評価するために、フォトフリンおよびメソ置換されたテトラ(メタヒドロキシフェニル)クロリン(mTHPC)に基づいた光線力学的療法と糖化キトサン注入との組み合わせを、それぞれEMT6乳腺肉腫およびLine1肺腺癌マウスモデルにおいて、試験した。各モデルにおいて、BALB/cマウスに、106の生存腫瘍細胞を、低部背側領域へ皮下接種した。腫瘍は7日後に処置サイズ(7〜8mm)であった。
GC=糖化キトサン
mTHPC=メソ置換されたテトラ(メタヒドロキシフェニル)クロリン
PDT=光線力学的療法
これらの試験結果は、光療法の効率を増大させるために活発な免疫学的刺激が必要であることを示す。
ラットの転移性腫瘍の処置におけるレーザーアシスト免疫療法の異なる構成要素の影響
レーザーアシスト免疫療法システムの3つの構成要素の様々な組み合わせを、転移性***腫瘍および前立腺腫瘍をそれぞれ担持する雌および雄のラットを使用して、この試験で評価した。レーザーアシスト免疫療法システムは、最大出力25Wの近赤外線レーザーによるダイオードレーザーと、レーザー吸収色素であるインドシアニングリーンと、免疫アジュバントである糖化キトサンとから構成される。原発性腫瘍が0.2〜0.5cm3になったとき、腫瘍担持ラットで処置を開始した。0.2mLのGCおよび/またはICG溶液を、全ての群で原発性腫瘍の中心に注射した。レーザー処置を受けるラットは、照射の2時間前に注射を行い、動物には麻酔をかけ、腫瘍を覆う毛は切り取った。レーザーの設定は2W、10分間であり、レーザー・ファイバーチップは上を覆う皮膚から4mmの距離に維持し、レーザーエネルギーは光ファイバーによって処置部位に向けた。動物は処置後、個別に収容した。生存試験においては、***腫瘍または前立腺腫瘍を担持するラットを毎日観察し、各腫瘍の三次元を毎週測定した。雌のヴィスター・フュルト・ラット(5〜6週齢、100〜125g)にDMBA−4の移植可能な転移性乳腺腫瘍(105生存腫瘍細胞)を各ラットの一方の鼠蹊の脂肪肉趾へ皮下接種した。原発性腫瘍は、接種後、7〜10日で発生した。リンパ管に沿ったおよび遠隔部位への転移性腫瘍は、通常、ほぼ2週間で触知できるようになった。処置なしの場合は、腫瘍担持ラットは、平均生存期間が35日間であった。転移性***腫瘍担持ラットの8つの群を、下記表に詳述されるように異なる構成要素のレーザーアシスト免疫療法システムで処置した。生存率ならびに原発性および転移性腫瘍プロフィールを、個々の構成要素および構成要素の様々な組み合わせについて決定した。さらに、雌のラットの3つの群(n=16/群)を、0.5、1.0および2.0%の糖化キトサンで処置し、免疫アジュバントの濃度のラット生存に対する影響を評価した。
GC=1.0%糖化キトサン。
ICG=0.25%インドシアニングリーン。
レーザーアシスト免疫療法によって誘導される抗腫瘍免疫およびその養子免疫移植
レーザーアシスト免疫療法によって誘導される抗腫瘍免疫のメカニズムを調べるために、免疫脾臓細胞を使用する養子免疫移植を行った。雌ヴィスター・フュルト・ラットに、DMBA−4移植可能転移性乳腺腫瘍(105生存腫瘍細胞)を、各ラットの一方の鼠蹊の脂肪パッドへ皮下接種し、7〜10日後、レーザーアシスト免疫療法処置を行った。処置なしでは、腫瘍担持ラットは、平均しておよそ30日間、生存した。レーザー処置ラットでは、レーザーで処置する前に、0.25%インドシアニングリーンと1%糖化キトサンとの両方を含有する0.2mLの溶液を原発性腫瘍に直接投与した。照射には、805nmのレーザーを2Wで10分間使用した。誘導された免疫の保護能力は、生存腫瘍細胞を増加接種用量で繰り返し負荷した、成功裡に処置された腫瘍担持ラットのいくつかの群で評価した。さらに、レーザーアシスト免疫療法後の腫瘍の負荷に対する抵抗性および腫瘍成長阻害を、未処置ラットで評価した。
A群=腫瘍対照ラットの結果。
B群=未処置の腫瘍担持ラット由来の脾臓細胞を混合した腫瘍細胞を注入したラットの結果。
C群=レーザーアシスト免疫療法で成功裡に処置されたラット由来の脾臓細胞を混合した腫瘍細胞を注射したラットの結果。
D群=未処置ラット由来の脾臓細胞を使用した結果。
注記:2つの別個の実験から収集したデータを組み合わせ、一緒にプロットした。
レーザーアシスト免疫療法と低用量化学療法との組み合わせ
1つの典型的な臨床試験において、2人の乳がん患者に、シクロホスファミドを、毎週(inCVAX処置後に)、用量150〜200mg/m2で投与した。患者は、初期にはこの処置によく応答し、腫瘍は収縮し、有害な作用は最小であった。数か月後、反応が鈍くなったため、腫瘍医が低用量化学療法を、パクリタキセルを75mg/m2で毎週投与するレジメンに切り替えたところ、再び、反応が非常に良好となり、腫瘍が縮小した。新たな転移は発生しなかった。患者は低用量の化学療法を受け続けた。3番目の患者は、低用量の化学療法後に手術可能となり、***切除術を行なったので、外科手術との組み合わせも選択肢の一つであった。
Claims (15)
- 滅菌濾過された糖化キトサンポリマーおよび実質的に水性の溶液から本質的になる新生物を処置するための粘弾性糖化キトサン製剤であって、糖化キトサンポリマーは、約50,000ダルトン〜約1,500,000ダルトンの分子量を有し、さらにキトサンポリマーの脱アセチル化されたアミノ基の糖化度は、約10分の1パーセント〜約30パーセントの範囲であり、さらに実質的に水性の溶液は、対象への容易な注射性能および投与に適した粘度を有する、製剤。
- 粘弾性糖化キトサンの分子量がおよそ250,000ダルトンであり、粘弾性糖化キトサンの親キチンの脱アセチル化度が約80パーセントであり、キトサンの脱アセチル化されたアミノ基の糖化度が約5パーセントである、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 糖化キトサンポリマーが、そうでなければ脱アセチル化されているアミノ基のうち約2パーセントが糖化されている、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 実質的に水性の溶液が、約5〜約7のpHを有する、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 水溶液に懸濁された約1重量%の糖化キトサンポリマーを含み、前記水溶液が約25℃での測定において約1〜約100センチストークスの粘度を有する、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 水溶液に懸濁された約1重量%の糖化キトサンポリマー含み、前記水溶液が約1重量%の糖化キトサンを有し、糖化キトサンポリマーは、脱アセチル化されたアミノ基のうち約10分の1パーセント〜約30パーセントが糖化されており、さらに水溶液が約1センチストークス〜およそ100センチストークスの粘度を有する、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 水溶液に懸濁された約1重量%の糖化キトサンポリマーを含み、糖化キトサンポリマーは、その脱アセチル化されたアミノ基のうち約5%が糖化されており、さらに水溶液は、製剤を対象に注射および投与するのに適した粘度を有する、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 免疫アジュバントを含む、タンデム型の光物理的、熱的および免疫学的処置のための新生物の前処置に使用するための組成物であって、免疫アジュバントが請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤を含む、組成物。
- 免疫アジュバントを含む、タンデム型の光物理的および免疫学的処置のための新生物の前処置に使用するための組成物であって、免疫アジュバントが、請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤を含み、さらに免疫アジュバントが腫瘍特異的抗原にコンジュゲートしている、組成物。
- 請求項1に記載の粘弾性糖化キトサン製剤を含む免疫アジュバント。
- 滅菌濾過された糖化キトサンポリマーおよび実質的に水性の溶液から本質的になる新生物を処置するための粘弾性糖化キトサン製剤であって、糖化キトサンポリマーは、約50,000ダルトン〜約1,500,000ダルトンの分子量を有し、粘弾性糖化キトサンの親キチンの脱アセチル化度は約80%であり、さらにキトサンポリマーの脱アセチル化されたアミノ基の糖化度は、10分の1パーセント〜12.5パーセントの範囲であり、さらに実質的に水性の溶液は、対象への容易な注射性能および投与に適した粘度を有する、前記製剤。
- 実質的に水性の溶液が、約5〜約7のpHを有する溶液を含む、請求項11に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 水溶液に懸濁された約1重量%の糖化キトサンポリマーを含み、前記水溶液は製剤を対象に注射および投与するのに適した粘度を有し、前記粘度は25℃での測定において約1〜約100センチストークスである、請求項11に記載の粘弾性糖化キトサン製剤。
- 請求項11に記載の粘弾性糖化キトサン製剤を含む免疫アジュバント。
- 請求項14に記載の免疫アジュバントを含む、タンデム型の光物理的、熱的および免疫学的処置のための新生物の前処置に使用するための組成物であって、前記免疫アジュバントは単独であるかまたは腫瘍特異的抗原にコンジュゲートしている、前記組成物。
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