JP6003212B2 - Sample feeding device, flow cytometer, and sample tube determination method - Google Patents

Sample feeding device, flow cytometer, and sample tube determination method Download PDF

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  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)

Description

本技術は、サンプル送液装置、フローサイトメータ及びサンプルチューブ判定方法に関する。より詳しくは、サンプルチューブの自動認識等をする装置等に関する。   The present technology relates to a sample liquid feeding device, a flow cytometer, and a sample tube determination method. More specifically, the present invention relates to an apparatus for automatically recognizing a sample tube.

細胞などの微小粒子の特性を光学的、電気的あるいは磁気的に検出し、所定の特性を有する微小粒子のみを分別して回収する微小粒子測定装置(例えばフローサイトメータ)が知られている。   2. Description of the Related Art There is known a microparticle measuring apparatus (for example, a flow cytometer) that detects characteristics of microparticles such as cells optically, electrically, or magnetically, and sorts and collects only microparticles having predetermined characteristics.

この微小粒子測定装置では、より高精度な測定を可能にするために改良がなされてきている。例えば、特許文献1では、光学系で用いられる光軸補正を自動的に行い、測定を高精度にするという試みがなされている。   This fine particle measuring apparatus has been improved to enable measurement with higher accuracy. For example, in Patent Document 1, an attempt is made to automatically perform optical axis correction used in an optical system and to make measurement highly accurate.

特開2010−286292号公報JP 2010-286292 A

しかしながら、上述した高精度な測定を可能にするためには、光軸補正の他に、微小粒子を含有するサンプルの取扱いにも配慮する必要がある。例えば、サンプル送液装置(又は微小粒子測定装置の一部として構成されるサンプル送液装置)により微小粒子測定装置にサンプルを送液する際にサンプルの取扱いに配慮する必要がある。より具体的には、サンプルチューブ内のサンプルの残量が少ない状態で、サンプルを微小粒子測定装置に送液することは、微小粒子測定装置における測定精度の低下(サンプル内のコンタミ発生、測定装置の部品汚れ)等をもたらすため、防止する必要がある。しかしながら、サンプル送液装置において、サンプルの残量の確認は、従来はユーザの目視で行われていた。その確認作業は、ユーザに熟練した技術を要し、ユーザにとって非常に煩雑なものであった。   However, in order to enable the above-described high-accuracy measurement, it is necessary to consider handling of samples containing fine particles in addition to optical axis correction. For example, it is necessary to consider the handling of the sample when the sample is fed to the microparticle measuring device by the sample feeding device (or the sample feeding device configured as a part of the microparticle measuring device). More specifically, feeding the sample to the microparticle measurement device with a small amount of sample remaining in the sample tube may cause a decrease in measurement accuracy in the microparticle measurement device (contamination generation in the sample, measurement device). It is necessary to prevent this from occurring. However, in the sample feeding apparatus, the confirmation of the remaining amount of the sample has been conventionally performed visually by the user. The confirmation operation requires skill that is experienced by the user and is very complicated for the user.

そこで、本技術は、自動でサンプルを精度良く且つ簡便に送液することを可能にするサンプル送液装置、フローサイトメータ及びサンプルチューブ判定方法を提供することを主な目的とする。   Therefore, the main object of the present technology is to provide a sample liquid feeding device, a flow cytometer, and a sample tube determination method that can automatically and easily deliver a sample with high accuracy.

上記課題解決のため、本技術は、光を照射する光照射部と、前記光を検出する光検出部と、収容されたサンプルチューブの側面に照射される前記光を遮光する遮光部、及び前記光が通過可能な一対の光透過部を有するチューブホルダと、を備えるサンプル送液装置を提供する。
このサンプル送液装置では、チューブホルダに、収容されたサンプルチューブの側面に照射される前記光を遮光する遮光部が設けられることにより、光照射部が照射する光を遮光するため、チューブホルダが所定位置に設置されていることを把握することが可能になる。
また、このサンプル送液装置では、遮光部に対する光照射により前記チューブホルダを側面の周方向に回転する駆動部を更に備えることが好ましい。
また、このサンプル送液装置では、前記光検出部により検出される前記光の光量により前記サンプルチューブ内のサンプルの残量を判定する制御部を備えていることが好ましい。
また、このサンプル送液装置では、前記光の光路と一対の前記光透過部間の直線とが重なるように、前記駆動部が前記チューブホルダを回転させる角度が、前記チューブホルダが収容可能なサンプルチューブの形状に応じて異なることが好ましい。
また、このサンプル送液装置では、前記光路と前記直線とが重なるように、前記駆動部が前記チューブホルダを回転させる角度が、前記チューブホルダが収容可能なサンプルチューブの容積に応じて異なることが好ましい。
このサンプル送液装置では、光照射部から照射された光が光検出部に通過可能になるまでチューブホルダが回転され、回転した角度により、チューブホルダに収容されたサンプルチューブの形状(種類)を判定することが可能になる。そして、サンプルチューブの形状(種類)に応じて最適化された回転角度及びサンプル残量の基準値を用いてサンプル残量の判断を行うことにより、安定したサンプル送液を行うことができる。
また、サンプル送液装置では、前記駆動部に取り付けられた第1のマグネットと、該第1のマグネットとは離隔し且つ対向して設けられ、前記チューブホルダの底部に位置し、前記第1のマグネットの磁力作用により回転する第2のマグネットと、を更に備えることが好ましい。
このサンプル送液装置では、第2のマグネットの回転により発せられる駆動部の熱がサンプルに伝達されることなくサンプルチューブ内のサンプルの撹拌を行うことが可能になる。また、このサンプル送液装置は、サンプルを送液中に任意のタイミングで撹拌を行い、且つ熱によるサンプルの変質を最小限に抑えることが可能な機構を有する。
また、このサンプル送液装置が連結されたフローサイトメータを提供することも可能である。
In order to solve the above problems, the present technology provides a light irradiation unit that irradiates light, a light detection unit that detects the light, a light blocking unit that blocks the light irradiated to the side surface of the accommodated sample tube, and the There is provided a sample liquid feeding device comprising a tube holder having a pair of light transmission parts through which light can pass.
In this sample liquid delivery device, the tube holder is provided with a light-shielding portion that shields the light irradiated on the side surface of the accommodated sample tube, so that the light irradiated by the light-irradiation unit is shielded. It becomes possible to grasp that it is installed at a predetermined position.
In addition, it is preferable that the sample liquid feeding device further includes a drive unit that rotates the tube holder in the circumferential direction of the side surface by light irradiation on the light shielding unit.
In addition, it is preferable that the sample liquid feeding device includes a control unit that determines the remaining amount of the sample in the sample tube based on the amount of the light detected by the light detection unit.
Moreover, in this sample liquid feeding device, the angle at which the drive unit rotates the tube holder so that the optical path of the light and the straight line between the pair of light transmission units overlap each other is a sample that can be accommodated in the tube holder It is preferable that it differs depending on the shape of the tube.
Moreover, in this sample liquid delivery device, the angle at which the drive unit rotates the tube holder varies depending on the volume of the sample tube that can be accommodated by the tube holder so that the optical path and the straight line overlap. preferable.
In this sample liquid delivery device, the tube holder is rotated until the light irradiated from the light irradiation unit can pass through the light detection unit, and the shape (type) of the sample tube accommodated in the tube holder is determined by the rotated angle. It becomes possible to judge. Then, by determining the remaining amount of the sample using the rotation angle optimized according to the shape (type) of the sample tube and the reference value of the remaining amount of the sample, stable sample feeding can be performed.
Further, in the sample liquid feeding device, the first magnet attached to the driving unit and the first magnet are provided apart from and opposed to each other, located at the bottom of the tube holder, and It is preferable to further include a second magnet that rotates by the magnetic force action of the magnet.
In this sample liquid feeding device, it is possible to agitate the sample in the sample tube without the heat of the drive unit generated by the rotation of the second magnet being transmitted to the sample. Further, the sample liquid feeding device has a mechanism capable of stirring the sample at a given timing during liquid feeding and minimizing the quality change of the sample due to heat.
It is also possible to provide a flow cytometer to which this sample liquid feeding device is connected.

また、本技術では、光照射により、初期状態のチューブホルダの有無を判定し、光が通過するまで前記チューブホルダを回転し、光が通過する前記チューブホルダの回転角度を検出し、前記回転角度に応じて前記チューホルダに収容されたサンプルチューブ種を判定する手順を含むサンプル送液装置におけるサンプルチューブ判定方法も提供する。   Further, in the present technology, the presence or absence of an initial tube holder is determined by light irradiation, the tube holder is rotated until light passes, the rotation angle of the tube holder through which light passes is detected, and the rotation angle Accordingly, a sample tube determination method in a sample liquid feeding device including a procedure for determining a sample tube type accommodated in the chew holder according to the method is also provided.

本技術において「サンプル」としては、主に微小粒子を含むサンプルが挙げられる。
「微小粒子」には、細胞や微生物、リポソームなどの生体関連微小粒子、あるいはラテックス粒子やゲル粒子、工業用粒子などの合成粒子などが広く含まれるものとする。
生体関連微小粒子には、各種細胞を構成する染色体、リポソーム、ミトコンドリア、オルガネラ(細胞小器官)などが含まれる。細胞には、動物細胞(血球系細胞など)および植物細胞が含まれる。微生物には、大腸菌などの細菌類、タバコモザイクウイルスなどのウイルス類、イースト菌などの菌類などが含まれる。さらに、生体関連微小粒子には、核酸やタンパク質、これらの複合体などの生体関連高分子も包含され得るものとする。また、工業用粒子は、例えば有機もしくは無機高分子材料、金属などであってもよい。有機高分子材料には、ポリスチレン、スチレン・ジビニルベンゼン、ポリメチルメタクリレートなどが含まれる。無機高分子材料には、ガラス、シリカ、磁性体材料などが含まれる。金属には、金コロイド、アルミなどが含まれる。これら微小粒子の形状は、一般には球形であるのが普通であるが、非球形であってもよく、また大きさや質量なども特に限定されない。
本技術において「駆動部」としては、モータ及びギアより構成されるもの等が挙げられる。
In the present technology, examples of the “sample” include a sample mainly containing fine particles.
“Microparticles” widely include living body-related microparticles such as cells, microorganisms, and liposomes, or synthetic particles such as latex particles, gel particles, and industrial particles.
Biologically relevant microparticles include chromosomes, liposomes, mitochondria, organelles (organelles) that constitute various cells. Cells include animal cells (such as blood cells) and plant cells. Microorganisms include bacteria such as Escherichia coli, viruses such as tobacco mosaic virus, and fungi such as yeast. Furthermore, biologically relevant microparticles may include biologically relevant polymers such as nucleic acids, proteins, and complexes thereof. The industrial particles may be, for example, an organic or inorganic polymer material, a metal, or the like. Organic polymer materials include polystyrene, styrene / divinylbenzene, polymethyl methacrylate, and the like. Inorganic polymer materials include glass, silica, magnetic materials, and the like. Metals include gold colloid, aluminum and the like. The shape of these fine particles is generally spherical, but may be non-spherical, and the size and mass are not particularly limited.
In the present technology, examples of the “drive unit” include a motor and a gear.

本技術により、サンプルを精度良く且つ簡便に送液することができる。   With this technique, the sample can be fed accurately and easily.

本技術に係るサンプル送液装置1の全体構成を説明する模式図である。It is a mimetic diagram explaining the whole composition of sample liquid feeding device 1 concerning this art. 本技術に係るサンプル送液装置1を構成する撹拌ユニット2の構成を説明する模式図である。It is a schematic diagram explaining the structure of the stirring unit 2 which comprises the sample liquid feeding apparatus 1 which concerns on this technique. 本技術に係るサンプル送液装置1を構成するチューブホルダ21の構成を説明する断面模式図である。It is a cross-sectional schematic diagram explaining the structure of the tube holder 21 which comprises the sample liquid feeding apparatus 1 which concerns on this technique. 本技術に係るサンプル送液方法を説明するフローチャートである。It is a flowchart explaining the sample liquid feeding method which concerns on this technique. 本技術に係るサンプル送液方法のうちチューブホルダ検出ステップ及びサンプルチューブ判定ステップを説明するフローチャートである。It is a flowchart explaining a tube holder detection step and a sample tube determination step among the sample liquid feeding methods concerning this technique. 本技術に係るサンプル送液装置1を構成するチューブホルダ21が加圧送液部5内まで上昇した状態を説明する模式図である。It is a schematic diagram explaining the state where the tube holder 21 which comprises the sample liquid feeding apparatus 1 which concerns on this technique rose to the inside of the pressurized liquid feeding part 5. FIG. 本技術に係るサンプル送液装置1を構成する光照射部41によりレーザLが照射された状態を説明する模式図である。It is a schematic diagram explaining the state where the laser L was irradiated by the light irradiation part 41 which comprises the sample liquid feeding apparatus 1 which concerns on this technique. 本技術に係るサンプル送液装置1を構成するチューブホルダ21がレーザLを通過させる状態を説明する断面模式図である。It is a cross-sectional schematic diagram explaining the state which the tube holder 21 which comprises the sample liquid feeding apparatus 1 which concerns on this technique passes the laser L. FIG. 本技術に係るサンプル送液装置1を構成するチューブホルダ21がレーザLを通過させる状態を説明する断面模式図である。It is a cross-sectional schematic diagram explaining the state which the tube holder 21 which comprises the sample liquid feeding apparatus 1 which concerns on this technique passes the laser L. FIG.

以下、本技術を実施するための好適な形態について図面を参照しながら説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本技術の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。説明は以下の順序で行う。

1.本技術に係るサンプル送液装置1の装置構成
(1−1)撹拌ユニット
(1−2)エアシリンダ
(1−3)液面検出センサとチューブホルダ
(1−4)加圧送液部
(1−5)サンプルライン
(1−6)制御部等
2.本技術に係るサンプル送液方法
(2−1)ホルダ上昇ステップS
(2−2)チューブホルダ検出ステップS
(2−3)サンプルチューブ判定ステップS
(2−4)サンプル撹拌ステップS
(2−5)サンプル送液ステップS
(2−6)液面モニタリングステップS
(2−7)警告ステップS
Hereinafter, preferred embodiments for carrying out the present technology will be described with reference to the drawings. In addition, embodiment described below shows an example of typical embodiment of this technique, and, thereby, the scope of this technique is not interpreted narrowly. The description will be made in the following order.

1. Device configuration (1-1) Stirring unit (1-2) Air cylinder (1-3) Liquid level detection sensor and tube holder (1-4) Pressurized liquid feeding unit (1- 5) Sample line (1-6) control unit 2. Sample feeding method according to the present technology (2-1) Holder raising step S 1
(2-2) Tube holder detection step S 2
(2-3) a sample tube determination step S 3
(2-4) sample stirring step S 4
(2-5) sample feeding step S 5
(2-6) Liquid level monitoring step S 6
(2-7) warning step S 7

1.本技術に係るサンプル送液装置1の装置構成
図1は、サンプルローディングモジュールとして構成された本技術に係るサンプル送液装置1の構成を説明する模式図である。
1. Device Configuration of Sample Delivery Device 1 According to the Present Technology FIG. 1 is a schematic diagram illustrating the configuration of the sample delivery device 1 according to the present technology configured as a sample loading module.

(1−1)撹拌ユニット
図1中符号2は、設置されたサンプルチューブ22内のサンプルを撹拌する撹拌ユニット2を示す。撹拌ユニット2は、サンプルチューブ22を収容するチューブホルダ21と、チューブホルダ21を設置する設置台23とを含む。
(1-1) Stirring Unit Reference numeral 2 in FIG. 1 indicates the stirring unit 2 that stirs the sample in the installed sample tube 22. The stirring unit 2 includes a tube holder 21 that houses the sample tube 22 and an installation base 23 on which the tube holder 21 is installed.

図2に、撹拌ユニット2のより詳細な構成を示す。図2(a)は、図1のP−P断面図であり、図2(b)は、図2(a)の部分拡大図である。   FIG. 2 shows a more detailed configuration of the stirring unit 2. 2A is a sectional view taken along the line PP in FIG. 1, and FIG. 2B is a partially enlarged view of FIG. 2A.

撹拌ユニット2は、チューブホルダ21及び設置台23の他に、チューブホルダ21を回転させるモータ24を含む。撹拌ユニット2は、モータ24に取り付けられたギア27と、ギア27のZ軸方向に垂直な方向の回転により連動して回転するギア28とを含む。また、撹拌ユニット2は、ギア28に取り付けられ、且つギア28の回転により連動して回転する第1のマグネット25を含む。更に、撹拌ユニット2は、チューブホルダ21の底部側(図2(a)中、Z軸負方向側)であって、圧力遮断壁29に対し第1のマグネット25の反対側に設けられ、第1のマグネット25の回転により、磁力が伝達され回転する第2のマグネット26を含む(図2(a)、(b)参照)。   The stirring unit 2 includes a motor 24 that rotates the tube holder 21 in addition to the tube holder 21 and the installation table 23. The stirring unit 2 includes a gear 27 attached to the motor 24 and a gear 28 that rotates in conjunction with the rotation of the gear 27 in a direction perpendicular to the Z-axis direction. The stirring unit 2 includes a first magnet 25 that is attached to the gear 28 and rotates in conjunction with the rotation of the gear 28. Further, the agitation unit 2 is provided on the bottom side of the tube holder 21 (Z-axis negative direction side in FIG. 2A) and on the opposite side of the first magnet 25 with respect to the pressure blocking wall 29. The first magnet 25 includes a second magnet 26 that rotates when the magnetic force is transmitted (see FIGS. 2A and 2B).

チューブホルダ21は、サンプルチューブ22を収容する。なお、チューブホルダ21の形状等については、後述する液面検出センサ4の各構成(光照射部41、光検出部42等)の機能において、その構成が特徴を有するため、詳細な構成については以下で液面検出センサ4と共に述べる。   The tube holder 21 accommodates the sample tube 22. In addition, about the shape of the tube holder 21, since the structure has the characteristics in the function of each structure (light irradiation part 41, light detection part 42, etc.) of the liquid level detection sensor 4 mentioned later, about detailed structure, This will be described below together with the liquid level detection sensor 4.

サンプルチューブ22としては、サンプルを収容することが可能であれば特に限定されないが、例えば、エッペンドルフチューブ、コニカルチューブ等とすることが好ましい。また、サンプルチューブ22は、光透過性を有するように透明であることが好ましい。   The sample tube 22 is not particularly limited as long as it can accommodate a sample. For example, an Eppendorf tube, a conical tube, or the like is preferable. Moreover, it is preferable that the sample tube 22 is transparent so as to have optical transparency.

モータ24としては、例えば、ステッピングモータ等の回転デバイスが挙げられる。モータ24の駆動条件としては、例えば、1000rpm程度まで回転させることができ、ユーザが任意に設定することができる。なお、サンプル送液装置1では、サンプルチューブ22が偏芯回転方式で回転する。ここでいう、偏芯回転方式とは、チューブホルダの21の回転中心部と、チューブホルダ21内のサンプルチューブ22を保持する部分を偏芯させて回転する方式を指す。より具体的には、偏芯回転方式とは、図2(b)に示すように、第1のマグネット25及び第2のマグネット26の中心軸Xに対して、サンプルチューブ22の中心軸Yが離れた状態でサンプルチューブ22が回転する方式を指す。サンプル送液装置1では、上記方式を採用することにより、サンプルの撹拌がより効率よく行われる。   Examples of the motor 24 include a rotating device such as a stepping motor. As a driving condition of the motor 24, for example, the motor 24 can be rotated up to about 1000 rpm, and can be arbitrarily set by the user. In the sample liquid feeding device 1, the sample tube 22 rotates by an eccentric rotation method. As used herein, the eccentric rotation method refers to a method in which the rotation center portion of the tube holder 21 and the portion holding the sample tube 22 in the tube holder 21 are eccentric and rotated. More specifically, as shown in FIG. 2B, the eccentric rotation method is such that the central axis Y of the sample tube 22 is relative to the central axis X of the first magnet 25 and the second magnet 26. This refers to a method in which the sample tube 22 rotates in a separated state. In the sample liquid feeding apparatus 1, the sample is stirred more efficiently by adopting the above method.

撹拌ユニット2では、モータ24に取り付けられた第1のマグネット25と、第2のマグネット26と、チューブホルダ21とが、サンプルチューブ22の深さ方向(Z方向)に順に配置される。そして、第2のマグネット26は、第1のマグネット25と離隔して設けられている。このように、サンプル送液装置1では、モータ24及び第1のマグネット25が、第2のマグネット26と離隔して配置されているため、モータ24により発せられる熱がサンプル中の細胞等にダメージを与えることを防止できる。   In the stirring unit 2, the first magnet 25 attached to the motor 24, the second magnet 26, and the tube holder 21 are sequentially arranged in the depth direction (Z direction) of the sample tube 22. The second magnet 26 is provided separately from the first magnet 25. As described above, in the sample feeding device 1, since the motor 24 and the first magnet 25 are arranged apart from the second magnet 26, the heat generated by the motor 24 damages cells or the like in the sample. Can be prevented.

また、サンプル送液装置1では、後述する加圧送液部5の加圧シェル52及び気密保持用Oリング53により加圧容器内部の気密性を保持することが可能である。更に、サンプル送液装置1では、加圧容器内部に撹拌用モータ等の電気デバイスが存在せず、電力供給等に用いる電気的配線を加圧容器外部に引き回す必要がないため、サンプルの気密性を容易に確保することができ、モータ24の配線等の製造性の自由度を向上させることもできる。   Further, in the sample liquid feeding device 1, the airtightness inside the pressurized container can be maintained by a pressure shell 52 and an airtight holding O-ring 53 of the pressure liquid feeding unit 5 described later. Furthermore, in the sample feeding apparatus 1, since there is no electric device such as a stirring motor inside the pressurized container, and there is no need to route electrical wiring used for power supply etc. outside the pressurized container, the airtightness of the sample Can be easily secured, and the degree of freedom in manufacturability of the wiring of the motor 24 can be improved.

更に、サンプルチューブ22周辺を滅菌洗浄する際にも、サンプル送液装置1では、モータ24がサンプルチューブ22等とは離隔して設計されているため、モータ24が破損したり、漏電事故を起こしたりするといった問題を回避することができる。   Further, when the periphery of the sample tube 22 is sterilized, the motor 24 is designed to be separated from the sample tube 22 and the like in the sample liquid feeding device 1, so that the motor 24 is damaged or an electric leakage accident occurs. Can be avoided.

更に、撹拌ユニット2では、サンプル送液装置1から微小粒子測定装置100への加圧送液操作の際にサンプルを撹拌することが可能である。そのため、サンプル送液装置1では、サンプル中の微小粒子を沈殿させたり、又は凝集させたりせずに、サンプルの濃度及び分散状態を一定に保ったまま、連接された微小粒子測定装置100に連続的に加圧送液することが可能になる。   Furthermore, in the stirring unit 2, it is possible to stir the sample during the pressure liquid feeding operation from the sample liquid feeding device 1 to the fine particle measuring device 100. Therefore, in the sample liquid feeding apparatus 1, the microparticles in the sample are not precipitated or agglomerated, and are continuously connected to the connected microparticle measurement apparatus 100 while keeping the concentration and dispersion state of the sample constant. Thus, it is possible to supply liquid under pressure.

このように、サンプル送液装置1では、サンプルを精度良く且つ簡便に撹拌することができる。   Thus, in the sample liquid feeding device 1, the sample can be stirred accurately and easily.

なお、上述したモータ24は、サンプルの撹拌のみならず、サンプルチューブ22の種類の判定のためにチューブホルダ21を回転させるためにも用いられる。   The motor 24 described above is used not only for stirring the sample but also for rotating the tube holder 21 for determining the type of the sample tube 22.

(1−2)エアシリンダ
図1中符号3は、サンプルチューブ22が加圧送液部5内に設置されるように撹拌ユニット2を上昇(図1中、矢印Aの方向(Z軸正方向))させるエアシリンダを示す。エアシリンダ3は、撹拌ユニット2を加圧して気密を保持する加圧シリンダ31と、エアシリンダ3を昇降させる昇降シリンダ32とを含む。撹拌ユニット2に含まれるチューブホルダ21を加圧送液部5内まで上昇させることで、サンプルチューブ22内のサンプルを微小粒子測定装置100等に送液させることが可能になる。
(1-2) Air Cylinder Reference numeral 3 in FIG. 1 raises the stirring unit 2 so that the sample tube 22 is installed in the pressurized liquid feeding section 5 (in FIG. 1, the direction of arrow A (Z-axis positive direction)). ) Indicates the air cylinder. The air cylinder 3 includes a pressurizing cylinder 31 that pressurizes the agitation unit 2 to maintain airtightness, and an elevating cylinder 32 that raises and lowers the air cylinder 3. By raising the tube holder 21 included in the stirring unit 2 to the inside of the pressurized liquid feeding unit 5, the sample in the sample tube 22 can be fed to the microparticle measuring device 100 or the like.

(1−3)液面検出センサとチューブホルダ
図1中符号4は、光を照射する光照射部41と、光照射部41が照射した光を検出する光検出部42とを含む液面検出センサを示す。
(1-3) Liquid Level Detection Sensor and Tube Holder Reference numeral 4 in FIG. 1 denotes a liquid level detection including a light irradiation unit 41 that irradiates light and a light detection unit 42 that detects light irradiated by the light irradiation unit 41. Indicates a sensor.

本技術では、サンプルに含まれる水による光の吸収に基づく光の減衰を光検出部42は検出しているため、光照射部41が照射する光としては、長波長(例えば、900〜1500nm)の光が好ましい。また、光としては、特に限定されるものではないが、好ましくはレーザやLED光等が用いられる。以下では、光照射部41が照射する光としてレーザを例に挙げて説明する。   In the present technology, since the light detection unit 42 detects light attenuation based on absorption of light by water contained in the sample, the light irradiated by the light irradiation unit 41 has a long wavelength (for example, 900 to 1500 nm). Are preferred. Further, the light is not particularly limited, but a laser, LED light or the like is preferably used. Below, a laser is mentioned as an example and demonstrated as the light which the light irradiation part 41 irradiates.

光照射部41は、例えば、レーザ光源と、レーザを集光・照射する集光レンズ、ダイクロイックミラー、バンドパスフィルター等とによって構成される。   The light irradiation unit 41 includes, for example, a laser light source, a condensing lens that collects and irradiates the laser, a dichroic mirror, a bandpass filter, and the like.

光検出部42は、例えば、フォトトランジスター、PMT(photo multiplier tube)や、CCDやCMOS素子等のエリア撮像素子等によって構成される。   The light detection unit 42 includes, for example, a phototransistor, a PMT (photo multiplier tube), an area imaging device such as a CCD or a CMOS device, or the like.

光照射部41及び光検出部42は、加圧送液部5に対し対称な位置に設置される。そして、エアシリンダ3により上昇され、加圧送液部5内に収容されたチューブホルダ21は、光照射部41及び光検出部42の間に設置され、光照射部41が照射するレーザの光路上に位置する。   The light irradiation unit 41 and the light detection unit 42 are installed at positions symmetrical to the pressurized liquid feeding unit 5. The tube holder 21 raised by the air cylinder 3 and accommodated in the pressurized liquid feeding unit 5 is installed between the light irradiation unit 41 and the light detection unit 42 and is on the optical path of the laser irradiated by the light irradiation unit 41. Located in.

光照射部41及び光検出部42は、サンプルチューブ22の容積に応じて予め設定されている警告すべき量(基準値として設定されている量)に対応して、上下(図1中、Z軸正方向及び同負方向)移動し、レーザの高さ位置を調整することで、サンプルの液面検出が可能になるように構成される。   The light irradiation unit 41 and the light detection unit 42 correspond to the amount to be warned in advance (the amount set as the reference value) according to the volume of the sample tube 22 (in FIG. 1, Z The liquid level of the sample can be detected by moving in the positive and negative directions) and adjusting the height position of the laser.

ここで、図3を参照しながらチューブホルダ21のXY平面における断面形状について説明しつつ、液面検出センサ4の構成及びその機能についてより詳細に説明する。図3(a)〜(d)は、順に、0.5mlサンプルチューブ22、1.5mlサンプルチューブ22、5.0mlサンプルチューブ22、15.0mlサンプルチューブ22を収容するチューブホルダ21の断面模式図を示す。図3(a)〜(d)では、チューブホルダ21が加圧送液部5内に収容された際に、モータ24が初期状態にあるために、チューブホルダ21が回転されていない配置状態を示す。   Here, the configuration and function of the liquid level detection sensor 4 will be described in more detail while explaining the cross-sectional shape of the tube holder 21 in the XY plane with reference to FIG. 3A to 3D are schematic cross-sectional views of a tube holder 21 that houses a 0.5 ml sample tube 22, a 1.5 ml sample tube 22, a 5.0 ml sample tube 22, and a 15.0 ml sample tube 22 in order. Indicates. 3A to 3D show an arrangement state in which the tube holder 21 is not rotated because the motor 24 is in the initial state when the tube holder 21 is accommodated in the pressurized liquid feeding unit 5. .

なお、ここでいう初期状態とは、チューブホルダ21を光照射部41と光検出部42との間に設置した直後におけるモータ24の予め設定された状態を指す。より具体的には、モータ24が回転しておらず、回転原点に位置している状態を指す。   The initial state here refers to a preset state of the motor 24 immediately after the tube holder 21 is installed between the light irradiation unit 41 and the light detection unit 42. More specifically, it refers to a state where the motor 24 is not rotating and is located at the rotation origin.

また、図3中、光路とは、光照射部41が照射するレーザの光路のことを指す。   Further, in FIG. 3, the optical path refers to the optical path of the laser irradiated by the light irradiation unit 41.

図3(a)〜(d)に示すように、チューブホルダ21は、光照射部41が照射するレーザを遮光する遮光部211と、レーザを通過させる一対の光透過部212とにより構成される。   As shown in FIGS. 3A to 3D, the tube holder 21 includes a light shielding unit 211 that shields the laser irradiated by the light irradiation unit 41 and a pair of light transmission units 212 that allow the laser to pass therethrough. .

遮光部211は、チューブホルダ21の側面部分を覆うようにして構成される。遮光部211は、レーザを遮ることが可能であればどのような材質等で形成されていてもよい。遮光部211がレーザを遮り、光検出部42がレーザを検出しないことにより、サンプル送液装置1では、加圧送液部5内にチューブホルダ21が存在していることを自動で判定することができる。   The light shielding portion 211 is configured to cover the side surface portion of the tube holder 21. The light shielding portion 211 may be formed of any material as long as it can shield the laser. Since the light shielding unit 211 blocks the laser and the light detection unit 42 does not detect the laser, the sample liquid feeding device 1 can automatically determine that the tube holder 21 is present in the pressurized liquid feeding unit 5. it can.

光透過部212は、チューブホルダ21の側面部分に2ヶ所設けられる。一対の光透過部212は、図3(a)〜(d)に示すように、チューブホルダ21の断面形状の中心に対して、点対称な位置に設けられていることが好ましい。   Two light transmitting portions 212 are provided on the side surface portion of the tube holder 21. As shown in FIGS. 3A to 3D, the pair of light transmission portions 212 is preferably provided at point-symmetrical positions with respect to the center of the cross-sectional shape of the tube holder 21.

光透過部212は、例えば、チューブホルダ21の側面部分である遮光部211に、穴を開けられ、切欠き部として形成される。また、光透過部212は、光が透過可能なように透明な材質で構成されていてもよい。レーザが遮光部211により遮光されていた場合、チューブホルダ21が回転し、一対の光透過部212が光路上に位置することで、レーザは、チューブホルダ21を通過することができる。   For example, the light transmission part 212 is formed as a notch by making a hole in the light shielding part 211 which is a side part of the tube holder 21. Moreover, the light transmission part 212 may be comprised with the transparent material so that light can permeate | transmit. When the laser is shielded by the light shielding part 211, the tube holder 21 rotates, and the pair of light transmission parts 212 are positioned on the optical path, so that the laser can pass through the tube holder 21.

また、図3(a)〜(d)に示す夫々のチューブホルダ21では、設置台23に設置され、モータ24が初期状態である場合において、一対の光透過部212間で形成される直線と光路とが成す角度が異なるように構成される。具体的には、本技術の一例として、0.5mlサンプルチューブ22(図3(a)参照)、1.5mlサンプルチューブ22(図3(b)参照)、5.0mlサンプルチューブ22(図3(c)参照)、15.0mlサンプルチューブ22(図3(d)参照)を収容するチューブホルダ21では、夫々、上記角度が順に30度、60度、90度、120度である。   Further, in each tube holder 21 shown in FIGS. 3A to 3D, a straight line formed between the pair of light transmission portions 212 when installed on the installation base 23 and the motor 24 is in the initial state. The angle formed by the optical path is different. Specifically, as an example of the present technology, a 0.5 ml sample tube 22 (see FIG. 3A), a 1.5 ml sample tube 22 (see FIG. 3B), and a 5.0 ml sample tube 22 (see FIG. 3). (See (c)) In the tube holder 21 that accommodates the 15.0 ml sample tube 22 (see FIG. 3D), the angles are 30 degrees, 60 degrees, 90 degrees, and 120 degrees, respectively.

サンプル送液装置1では、初期状態のモータ24がチューブホルダ21を回転させることにより一対の光透過部212からレーザを通過させることを可能にする。そのため、チューブホルダ21が収容するサンプルチューブ22の容積に応じて、一対の光透過部212をレーザが通過可能になるまでの回転角度が異なる。   In the sample liquid feeding device 1, the motor 24 in the initial state rotates the tube holder 21 to allow the laser to pass through the pair of light transmission parts 212. Therefore, the rotation angle until the laser can pass through the pair of light transmission parts 212 differs depending on the volume of the sample tube 22 accommodated in the tube holder 21.

具体的には、0.5mlサンプルチューブ22用のチューブホルダ21を用いる場合には、上記回転角度が30度になる(図3(a)参照)。1.5mlサンプルチューブ22用のチューブホルダ21を用いる場合には、上記回転角度が60度になる(図3(b)参照)。5.0mlサンプルチューブ22用のチューブホルダ21を用いる場合には、上記回転角度が90度になる(図3(c)参照)、15.0mlサンプルチューブ22用のチューブホルダ21を用いる場合には、上記回転角度が120度になる(図3(d)参照)。   Specifically, when the tube holder 21 for the 0.5 ml sample tube 22 is used, the rotation angle is 30 degrees (see FIG. 3A). When the tube holder 21 for the 1.5 ml sample tube 22 is used, the rotation angle is 60 degrees (see FIG. 3B). When the tube holder 21 for the 5.0 ml sample tube 22 is used, the rotation angle is 90 degrees (see FIG. 3C), and when the tube holder 21 for the 15.0 ml sample tube 22 is used. The rotation angle becomes 120 degrees (see FIG. 3D).

このように、サンプル送液装置1では、収容するサンプルチューブ22の容積によりチューブホルダ21の上記回転角度が異なるため、回転角度によりサンプルチューブ22の容積を自動で判定することができる。   Thus, in the sample liquid feeding device 1, since the rotation angle of the tube holder 21 differs depending on the volume of the sample tube 22 to be accommodated, the volume of the sample tube 22 can be automatically determined based on the rotation angle.

また、光透過部212を通過するレーザは、サンプル内の液体(主に水)により吸収されることで光量が減衰する。一方、サンプル内の液体が微小粒子測定装置に送液されることにより基準値を下回った場合には、上記レーザの光量は減衰されない。そのため、光検出部42によりレーザの光量が減衰していないことを検出することによって、サンプルの残量が基準値を下回ったことを判定することができる。   Further, the amount of light that is attenuated by the laser that passes through the light transmitting portion 212 is absorbed by the liquid (mainly water) in the sample. On the other hand, when the liquid in the sample falls below the reference value by being sent to the fine particle measuring apparatus, the light quantity of the laser is not attenuated. Therefore, it is possible to determine that the remaining amount of the sample has fallen below the reference value by detecting that the light amount of the laser is not attenuated by the light detection unit 42.

サンプル送液のサンプルチューブ22の容量及び形状等に応じてサンプルを送液することができるサンプル残量は異なるため、この基準値については、チューブ種ごとに異なった値を設定する必要がある。これに対し、サンプル送液装置1では、モータ24がチューブホルダ21の回転機能を有し、チューブ種ごとにホルダ形状が異なる。そして、サンプル送液装置1では、光を透過可能にするチューブホルダ21の回転角度に応じてチューブ種を自動的に判定し、チューブ種ごとの最適な基準値を自動的に選択することで、高精度にサンプル残量の検知を行うことができる。   Since the remaining amount of the sample to which the sample can be fed differs according to the capacity and shape of the sample tube 22 for sample feeding, it is necessary to set a different value for each tube type for this reference value. On the other hand, in the sample liquid feeding device 1, the motor 24 has a function of rotating the tube holder 21, and the holder shape is different for each tube type. And in the sample liquid feeding device 1, by automatically determining the tube type according to the rotation angle of the tube holder 21 that allows light to pass through, and automatically selecting the optimum reference value for each tube type, The remaining amount of sample can be detected with high accuracy.

このように、サンプル送液装置1では、収容したサンプルチューブ内のサンプル残量を検知することができる。   Thus, the sample liquid feeding device 1 can detect the remaining amount of sample in the accommodated sample tube.

(1−4)加圧送液部
図1中符号5は、Z軸正方向に上昇したチューブホルダ21を収容し、サンプルチューブ22内のサンプルを加圧しノズル51から送液させる加圧送液部を示す。
(1-4) Pressurized liquid feeding part Reference numeral 5 in FIG. 1 denotes a pressurized liquid feeding part that accommodates the tube holder 21 that has been lifted in the positive direction of the Z axis, pressurizes the sample in the sample tube 22, and feeds it from the nozzle 51. Show.

また、加圧送液部5は、内部の気密性を保持しつつ、サンプルチューブ22に覆い被さり、サンプルの送液を可能にする加圧シェル52と、加圧シェル52の内壁に沿って、設置台23のZ軸正方向側への突出部位に接触するように形成され、加圧送液部5内の気密性を確保する気密保持用Oリング53とを含む(図1、2(a)、(b)参照)。加圧送液部5の加圧は、サンプルチューブ22内のサンプルを外部に送液可能であれば、特に限定されない。また、ノズル51は、サンプルを吸引するものであり、更にサンプルを撹拌する際には、撹拌棒として機能し、サンプルの撹拌効率を向上させることができる。   In addition, the pressurized liquid feeding section 5 is installed along the inner wall of the pressurized shell 52 and the pressurized shell 52 that covers the sample tube 22 while maintaining the internal airtightness and enables the liquid feeding of the sample. Including an airtight holding O-ring 53 that is formed so as to be in contact with a projecting portion of the base 23 in the positive direction of the Z-axis and that ensures airtightness in the pressurized liquid feeding section 5 (FIGS. 1, 2 (a), (See (b)). The pressurization of the pressurized liquid feeding unit 5 is not particularly limited as long as the sample in the sample tube 22 can be fed to the outside. The nozzle 51 sucks the sample. When the sample is further stirred, the nozzle 51 functions as a stirring bar and can improve the stirring efficiency of the sample.

(1−5)サンプルライン
図1中符号6は、上記加圧送液部5で加圧送液されたサンプルチューブ22内のサンプルを通流させるサンプルライン6を示す。サンプルライン6に通流されたサンプルは、連結された微小粒子測定装置(フローサイトメータ)100に送液される。サンプルライン6としては、特に限定されるものではないが、例えば、シリコーンチューブから構成される。
(1-5) Sample Line Reference numeral 6 in FIG. 1 represents the sample line 6 through which the sample in the sample tube 22 pressurized and fed by the pressurized fluid feeding unit 5 flows. The sample passed through the sample line 6 is sent to a connected microparticle measuring device (flow cytometer) 100. Although it does not specifically limit as the sample line 6, For example, it is comprised from a silicone tube.

(1−6)制御部等
サンプル送液装置1は、上述の構成に加え、液面検出センサ4による特性判定のためのデータ解析部を備える。また、サンプル送液装置1は、モータ24によるサンプルチューブの回転、撹拌ユニット2の昇降、光照射部41によるレーザLの照射のオン/オフ、及び加圧送液部5内での加圧/減圧等の本技術に係る制御を行うための制御部等も備える。
(1-6) Control Unit etc. In addition to the above-described configuration, the sample liquid feeding device 1 includes a data analysis unit for characteristic determination by the liquid level detection sensor 4. In addition, the sample liquid feeding apparatus 1 rotates the sample tube by the motor 24, moves the stirring unit 2 up and down, turns on / off the irradiation of the laser L by the light irradiation unit 41, and pressurizes / depressurizes the pressurized liquid feeding unit 5. And a control unit for performing control according to the present technology.

制御部は、CPU、メモリ(記憶部)及びハードディスク等を備える汎用のコンピュータによって構成でき、ハードディスク内にはOSと次に説明する各ステップを実行するプログラムなどが格納されている。   The control unit can be configured by a general-purpose computer including a CPU, a memory (storage unit), a hard disk, and the like. The hard disk stores an OS and a program for executing each step described below.

また、サンプル送液装置1では、データ解析部により送液されたサンプルチューブ22内のサンプルの残量が所定の基準値まで減少した場合、ユーザに警告する出力部を設けることが可能である。出力部としては、ランプ、メッセージ等の表示、又は音声出力等、多様の方法を採用することが可能である。   Further, in the sample liquid feeding device 1, it is possible to provide an output unit that warns the user when the remaining amount of the sample in the sample tube 22 fed by the data analysis unit has decreased to a predetermined reference value. As the output unit, various methods such as display of lamps, messages, etc., or voice output can be adopted.

なお、本技術においては、サンプル送液装置1は、連結された微小粒子分取装置(フローサイトメータ)100にサンプルを送液する装置として説明しているが、サンプル送液装置1は微小粒子分取装置100の一部として構成されていてもよい。   In the present technology, the sample liquid feeding device 1 is described as a device that feeds a sample to a connected fine particle sorting device (flow cytometer) 100, but the sample liquid feeding device 1 is a fine particle. It may be configured as a part of the sorting device 100.

2.本技術に係るサンプル送液方法
(2−1)ホルダ上昇ステップS
以下、図4〜図9を参照しながら本技術に係るサンプル送液方法について説明する。図4及び図5は、制御部により制御されており、サンプルチューブ22に含まれるサンプルを送液するためのサンプル送液方法を説明するフローチャートである。また、図6〜図9は、本技術に係るサンプル送液方法を実行しているサンプル送液装置1の状態を示す模式図である。サンプル送液方法は、「ホルダ上昇ステップS」、「チューブホルダ検出ステップS」、「サンプルチューブ判定ステップS」、「サンプル撹拌ステップS」、「サンプル送液ステップS」、「液面モニタリングステップS」、「警告ステップS」の手順を含む。以下、各手順について説明する。
2. Sample feeding method according to the present technology (2-1) Holder raising step S 2
Hereinafter, the sample liquid feeding method according to the present technology will be described with reference to FIGS. 4 and 5 are flowcharts for explaining a sample liquid feeding method that is controlled by the control unit and for feeding the sample contained in the sample tube 22. FIG. Moreover, FIGS. 6-9 is a schematic diagram which shows the state of the sample liquid feeding apparatus 1 which is performing the sample liquid feeding method which concerns on this technique. Sample feeding methods are “holder raising step S 1 ”, “tube holder detection step S 2 ”, “sample tube determination step S 3 ”, “sample stirring step S 4 ”, “sample feeding step S 5 ”, “ This includes the procedures of the liquid level monitoring step S 6 ”and“ warning step S 7 ”. Hereinafter, each procedure will be described.

本ステップでは、エアシリンダ3が撹拌ユニット2を上昇させる(図4参照)。図6に、エアシリンダ3がチューブホルダ21を上昇させた状態を示す。   In this step, the air cylinder 3 raises the stirring unit 2 (see FIG. 4). FIG. 6 shows a state where the air cylinder 3 raises the tube holder 21.

このように、チューブホルダ21が加圧送液部5内に収容されることで、サンプルライン6を介して、サンプルチューブ22内のサンプルを微小粒子測定装置100等に送液することができる。   As described above, the tube holder 21 is accommodated in the pressurized liquid feeding unit 5, whereby the sample in the sample tube 22 can be fed to the microparticle measuring device 100 or the like via the sample line 6.

(2−2)チューブホルダ検出ステップS
チューブホルダ検出ステップSでは、加圧送液部5内まで上昇した撹拌ユニット2にチューブホルダ21が設置されているか否か判定される(図4参照)。ここで、図5を参照しながら本ステップで行われる手順について詳細に説明する。図5は、本技術に係るサンプル送液方法のうちチューブホルダ検出ステップS及び後述するサンプルチューブ判定ステップSをより具体的に説明するフローチャートである。
(2-2) Tube holder detection step S 2
In tube holder detection step S 2, the tube holder 21 is determined whether it is installed in the agitation unit 2 increased to pressurized pumping fluid portions within 5 (see FIG. 4). Here, the procedure performed in this step will be described in detail with reference to FIG. Figure 5 is a flowchart illustrating a sample tube determination step S 3 of tube holder detection step S 2 and later of the sample liquid feeding method according to the present disclosure more specifically.

まず、ステップS21では、モータ24が初期状態に位置合わせされる。より具体的には、図3を参照しながら上述したように、チューブホルダ21が回転していない状態に調整される。すなわち、光路上に遮光部211が位置するように調整される。 First, in step S 21, the motor 24 is aligned to the initial state. More specifically, as described above with reference to FIG. 3, the tube holder 21 is adjusted so as not to rotate. In other words, adjustment is made so that the light shielding portion 211 is positioned on the optical path.

次いで、ステップS22では、光照射部41によりレーザLが、光検出部42に向けて光路上に照射される(図5参照)。図7に、光照射部41によりレーザLが照射されている状態を示す。 Then, in step S 22, the laser L by the light irradiation unit 41 is irradiated on the optical path toward the light detecting unit 42 (see FIG. 5). FIG. 7 shows a state where the laser L is irradiated by the light irradiation unit 41.

次いで、ステップS23では、制御部により、光検出部42がレーザLを検出可能であるか否かが判定される(図5参照)。この場合、チューブホルダ21が加圧送液部5内に収容されていないと、レーザLは、チューブホルダ21により遮光されず、光検出部42により検出される。これにより、ステップS24では、制御部は、加圧送液部5内にチューブホルダ21が収容されていないと判定し、ユーザに警告をする。 Then, in step S 23, the control unit, whether the light detection unit 42 can detect the laser L is determined (see FIG. 5). In this case, if the tube holder 21 is not accommodated in the pressurized liquid feeding unit 5, the laser L is not shielded by the tube holder 21 but is detected by the light detection unit 42. Thus, in step S 24, the control unit determines that the tube holder 21 is not received in the pressurized pumping fluid unit 5, a warning to the user.

一方、チューブホルダ21が加圧送液部5内に収容されていると、レーザLは、チューブホルダ21の遮光部211により遮光される。これにより、制御部は、加圧送液部5内にチューブホルダが存在していると判定する(ステップS25)。このように、チューブホルダ検出ステップSでは、チューブホルダ21が加圧送液部5内に収容されているか否かを自動で判定することができる。そのため、サンプル送液装置1では、ユーザ自身によるサンプルチューブの有無の確認が不要であり、精度良く且つ簡便にサンプルを送液することができる。 On the other hand, when the tube holder 21 is accommodated in the pressurized liquid feeding part 5, the laser L is shielded by the light shielding part 211 of the tube holder 21. Thus, the control unit determines that the tube holder to the pressurized pumping liquid section 5 is present (step S 25). Thus, it is possible to determine the tube holder detection step S 2, whether the tube holder 21 is accommodated in the pressurized pumping fluid section 5 automatically. Therefore, in the sample liquid feeding apparatus 1, it is not necessary for the user to check the presence or absence of the sample tube, and the sample can be fed accurately and easily.

(2−3)サンプルチューブ判定ステップS
サンプルチューブ判定ステップSでは、チューブホルダ21に収容されたサンプルチューブ22の容積を判定する(図4参照)。ここで、再び図5を参照しながら本ステップで行われる手順について詳細に説明する。
(2-3) a sample tube determination step S 3
Sample tubes determination step S 3, determines the volume of the sample tube 22 housed in the tube holder 21 (see FIG. 4). Here, the procedure performed in this step will be described in detail with reference to FIG. 5 again.

ステップS31では、モータ24がチューブホルダ21を回転させる。そして、ステップS32では、光検出部42によりレーザLが検出可能であるか否かを制御部は判定する。光検出部42によりレーザが検出されるまで、モータ24はチューブホルダ21を回転させる。このとき、ステップS33では、モータ24がチューブホルダ21を回転させた角度により、制御部はチューブホルダ21に収容されたサンプルチューブ22の容積を判定することができる(図5参照)。 In step S 31, the motor 24 rotates the tube holder 21. In step S 32 , the control unit determines whether or not the laser L can be detected by the light detection unit 42. The motor 24 rotates the tube holder 21 until the laser is detected by the light detection unit 42. In this case, in step S 33, the angle at which the motor 24 rotates the tube holder 21, the control unit can determine the volume of the sample tube 22 housed in the tube holder 21 (see FIG. 5).

ここで、ステップS31、ステップS32、及びステップS33における工程について、図8を参照しながらより詳細に説明する。図8には、チューブホルダ21がレーザLを通過させる状態を説明するチューブホルダ21の断面模式図を示す。図8では、特に、0.5mlサンプルチューブ用のチューブホルダ21をサンプル送液装置1に用いた場合を例に示す。 Here, the steps in step S 31 , step S 32 , and step S 33 will be described in more detail with reference to FIG. In FIG. 8, the cross-sectional schematic diagram of the tube holder 21 explaining the state which the tube holder 21 lets the laser L pass is shown. In FIG. 8, the case where the tube holder 21 for 0.5 ml sample tubes is used for the sample liquid feeding apparatus 1 is shown as an example.

図8(a)では、チューブホルダ21が回転していない状態(モータ24が初期状態)を示す。光照射部41によりレーザLが照射されると、レーザLは、遮光部211により遮光される。すなわち、図8(a)に示す状態では、光検出部42は、レーザLを検出しない。次に、モータ24は、遮光部211により遮光されたレーザLが、一対の光透過部212から通過可能になるまで、サンプルチューブ22を回転させる(ステップS31。図8中、矢印R参照)。より具体的には、図8に示す例では、(a)に示すように、一対の光透過部212間の直線と前記レーザLの光軸とが30度の角度を成している。そして、図8(b)に示すように、モータ24は、チューブホルダ21を30度回転させる。 FIG. 8A shows a state where the tube holder 21 is not rotating (the motor 24 is in an initial state). When the laser L is irradiated by the light irradiation unit 41, the laser L is shielded by the light shielding unit 211. That is, in the state shown in FIG. 8A, the light detection unit 42 does not detect the laser L. Next, the motor 24 rotates the sample tube 22 until the laser L shielded by the light shielding part 211 can pass from the pair of light transmission parts 212 (step S 31 , see arrow R in FIG. 8). . More specifically, in the example shown in FIG. 8, as shown in (a), the straight line between the pair of light transmission parts 212 and the optical axis of the laser L form an angle of 30 degrees. Then, as shown in FIG. 8B, the motor 24 rotates the tube holder 21 by 30 degrees.

これにより、光検出部42は、レーザLを検出する(ステップS32)。従って、チューブホルダ21が30度回転したため、制御部は、チューブホルダ21には0.5mlサンプルチューブ22が収容されていると自動で判定することができる。すなわち、ユーザ自身によるサンプルチューブ22の種類の確認をせずに、サンプル送液装置1では精度良く且つ簡便にサンプルを送液することができる。 Thereby, the light detection part 42 detects the laser L (step S32 ). Therefore, since the tube holder 21 is rotated 30 degrees, the control unit can automatically determine that the 0.5 ml sample tube 22 is accommodated in the tube holder 21. That is, the sample can be fed accurately and easily in the sample solution feeding apparatus 1 without confirming the type of the sample tube 22 by the user himself / herself.

また、他の例として、図9では、サンプルチューブ22として5.0mlサンプルチューブ用のチューブホルダ21をサンプル送液装置1で用いた場合を例に示す。   As another example, FIG. 9 shows a case where a tube holder 21 for a 5.0 ml sample tube is used as the sample tube 22 in the sample liquid feeding device 1.

図9に示す例でも、図8に示した例と同様に、まず、光照射部41によりレーザLが照射されると、レーザLは遮光部211により遮光される。そのため、光検出部42は、レーザLを検出しない。このとき、一対の光透過部212間の直線と前記レーザLの光軸とが90度の角度を成している。そして、図9(b)に示すように、モータ24は、チューブホルダ21を90度回転させる。   Also in the example illustrated in FIG. 9, as in the example illustrated in FIG. 8, when the laser L is first irradiated by the light irradiation unit 41, the laser L is blocked by the light blocking unit 211. Therefore, the light detection unit 42 does not detect the laser L. At this time, the straight line between the pair of light transmitting portions 212 and the optical axis of the laser L form an angle of 90 degrees. Then, as shown in FIG. 9B, the motor 24 rotates the tube holder 21 by 90 degrees.

これにより、光検出部42は、レーザLを検出する(ステップS32)。従って、チューブホルダ21が90度回転したため、制御部は、チューブホルダ21には5.0mlサンプルチューブ22が収容されていると自動で判定することができる。すなわち、ユーザ自身によるサンプルチューブ22の種類の確認をせずに、サンプル送液装置1では精度良く且つ簡便にサンプルを送液することができる。 Thereby, the light detection part 42 detects the laser L (step S32 ). Therefore, since the tube holder 21 is rotated 90 degrees, the control unit can automatically determine that the 5.0 ml sample tube 22 is accommodated in the tube holder 21. That is, the sample can be fed accurately and easily in the sample solution feeding apparatus 1 without confirming the type of the sample tube 22 by the user himself / herself.

このように、図8及び図9を参照しながら説明した例で示したように、ステップS33では、チューブホルダ21に収容されるサンプルチューブ22の容積を自動で判定することができる(図5参照)。 Thus, as shown in the example described with reference to FIGS. 8 and 9, in step S33 , the volume of the sample tube 22 accommodated in the tube holder 21 can be automatically determined (FIG. 5). reference).

なお、本技術では、サンプルチューブ22の容積を判定する場合を例に説明しているが、かかる例に限定されず、多様な形状を有するサンプルチューブ22の種類を判定するようにサンプル送液装置1が構成されていてもよい。この場合、遮光部211により遮光されたレーザLが一対の光透過部212を通過可能になるまでチューブホルダ21を回転すべき角度が、サンプルチューブ22の形状ごとに異なっており、形状ごとの上記回転すべき角度が記憶部に予め格納されている。   In the present technology, the case where the volume of the sample tube 22 is determined has been described as an example. However, the present invention is not limited to this example, and the sample liquid feeding device is not limited to such an example, and may determine the type of the sample tube 22 having various shapes. 1 may be configured. In this case, the angle at which the tube holder 21 should be rotated until the laser L shielded by the light shielding part 211 can pass through the pair of light transmission parts 212 differs depending on the shape of the sample tube 22. The angle to be rotated is stored in advance in the storage unit.

(2−4)サンプル撹拌ステップS
次に、撹拌ステップSでは、サンプルチューブ22内のサンプルが撹拌される(図4参照)。具体的には、まず、図2(b)に示すように、撹拌ユニット2において、モータ24が駆動することにより、ギア27が回転する。そして、ギア27が回転することにより、ギア28が連動して回転し、その回転に伴い第1のマグネット25が回転する。また、第1のマグネット25が磁力伝播方式により外部から動力を伝えることで、第1のマグネット25に対向して設けられている第2のマグネット26が駆動し回転する。そして、第2のマグネット26の回転により、第2のマグネット26の上方(図2(a)中、Z軸正方向)に位置するチューブホルダ21が回転する。
(2-4) sample stirring step S 4
Next, in stirred step S 4, samples of the sample tube 22 is agitated (see FIG. 4). Specifically, first, as shown in FIG. 2B, the gear 27 is rotated by driving the motor 24 in the stirring unit 2. Then, when the gear 27 rotates, the gear 28 rotates in conjunction with it, and the first magnet 25 rotates along with the rotation. In addition, when the first magnet 25 transmits power from the outside by a magnetic force propagation method, the second magnet 26 provided facing the first magnet 25 is driven and rotated. Then, the tube holder 21 positioned above the second magnet 26 (in the positive Z-axis direction in FIG. 2A) is rotated by the rotation of the second magnet 26.

撹拌ステップSでは、第2のマグネット26及びサンプルチューブ22と離隔して配置されたモータ24が、サンプルチューブ22内のサンプルを撹拌するため、モータ24で発生した熱がサンプルに伝達されることを防止できる(図2(b)、矢印R参照)。 In stirring step S 4, the second magnet 26 and the sample tube 22 motor 24 which is spaced apart from the can, for stirring the sample in the sample tube 22, the heat generated by the motor 24 is transmitted to the sample Can be prevented (see FIG. 2B, arrow R).

また、撹拌ステップSでサンプルを撹拌するため、サンプル中に浮遊している微小粒子の沈殿や濃度分布の偏在を防止することができる。そして、局所的な微小粒子の濃度上昇を防止することもできるため、微小粒子や細胞等の凝集、相互の固着を防止することもできる。このように、撹拌ステップSでは、サンプルの濃度分布及び分散状態を一定に保ったまま、サンプルを安定に微小粒子測定装置100に連続的に加圧送液することが可能になる。これにより、サンプルを送液された微小粒子測定装置100では、微小粒子や細胞等の情報を高精度に分析すること等ができる。 Also, for stirring the sample at a stirring step S 4, the uneven distribution of precipitation or concentration distribution of fine particles suspended in the sample can be prevented. In addition, since it is possible to prevent a local increase in the concentration of microparticles, it is possible to prevent aggregation of microparticles and cells and mutual sticking. Thus, in agitation step S 4, while maintaining a concentration distribution and dispersion state of the sample constant, the sample stably and it is possible to continuously pressurized pumped into fine particle measuring apparatus 100 solution. Thereby, in the microparticle measuring apparatus 100 to which the sample has been fed, information on microparticles, cells, and the like can be analyzed with high accuracy.

なお、本技術では、上昇ステップSを経てから撹拌ステップSが実行される例を説明しているが、かかる例に限られず、撹拌ステップSを経てから上昇ステップSが実行されてもよい。 In the present technology, increase it step S 1 stirred step S 4 from through is described as an example to be executed, not limited to this example, is performed raised step S 1 from the through stirring step S 4 Also good.

また、撹拌ステップSは、後述するサンプル送液ステップSと同時に実行することも可能である。これにより、濃度分布及び分散状態がより均一に保たれたサンプルを微小粒子測定装置100に加圧送液することができる。 Further, stirring step S 4 is also possible to run simultaneously with the sample liquid feed step S 5 will be described later. Thereby, the sample in which the concentration distribution and the dispersion state are kept more uniform can be pressure-fed to the microparticle measuring apparatus 100.

(2−5)サンプル送液ステップS
次に、サンプル送液ステップSでは、サンプルの微小粒子測定装置(フローサイトメータ)100等への送液が開始される(図4参照)。加圧送液部5内でチューブホルダ21が加圧シリンダ31により加圧され、気密性が保持された状態で、サンプルはサンプルライン6から微小粒子測定装置100等へ送液される。
(2-5) sample feeding step S 5
Next, in the sample liquid feed step S 5, a sample of the fine particle measuring apparatus (flow cytometer) liquid feed to the 100 or the like is started (see FIG. 4). In the state where the tube holder 21 is pressurized by the pressure cylinder 31 in the pressurized liquid feeding section 5 and the airtightness is maintained, the sample is fed from the sample line 6 to the microparticle measuring apparatus 100 and the like.

(2−6)液面モニタリングステップS
液面モニタリングステップSでは、送液が開始されたサンプルのサンプルチューブ22内の残量について、制御部がモニタリングをする。上記モニタリングについては、まず、サンプルチューブ22の容積又は形状に応じて設定された基準値により、光照射部41のレーザLの高さが調整される。そして、外部に送液されることで徐々に下がっていくサンプルの液面がレーザLにより検出されるか否かが判定される。
(2-6) Liquid level monitoring step S 6
In the liquid level monitoring step S 6, the remaining amount of the liquid delivery in the sample tube 22 of the sample is started, the control unit is monitoring. Regarding the monitoring, first, the height of the laser L of the light irradiation unit 41 is adjusted by a reference value set according to the volume or shape of the sample tube 22. Then, it is determined whether or not the liquid level of the sample that is gradually lowered by liquid feeding is detected by the laser L.

(2−7)警告ステップS
警告ステップSでは、サンプルの液面がレーザLにより検出されると、ユーザに警告がなされる。これにより、ユーザは、サンプルチューブ22内のサンプルの残量が少なくなってきていることを把握することができる。
(2-7) warning step S 7
In warning step S 7, the liquid level of the sample is detected by a laser L, a warning to the user is made. Thereby, the user can grasp that the remaining amount of the sample in the sample tube 22 is decreasing.

更に、図4には示していないが、サンプルチューブ22から吸引されるサンプルが、予め設定された最小吸引量まで下がった場合には、制御部はサンプルの吸引(送液)を中止することができる。   Further, although not shown in FIG. 4, when the sample sucked from the sample tube 22 falls to a preset minimum suction amount, the control unit may stop the suction (liquid feeding) of the sample. it can.

以上説明したように、本技術に係るサンプル送液装置1では、サンプルチューブの有無、サンプルチューブの種類、及びサンプル残量についてユーザが目視監視を行う必要がなくなる。そして、サンプル送液装置1では、サンプル残量等の確認を自動で行い、サンプルチューブ22内にサンプルが入っていない状態又はサンプルが最小吸引量より少ない状態で微小粒子測定装置100等への送液操作がなされることを防止することができる。これにより、例えば、サンプルチューブ内にサンプルが入っていない状態又はサンプルが最小吸引量より少ない状態で送液がなされた場合に、微小粒子測定装置100におけるチップからスプレー状にサンプルが射出され、装置100内のレンズ汚れ等をもたらすことを防止できる。以上より、サンプル送液装置1では、サンプルを精度良く且つ簡便に送液することができる。   As described above, in the sample liquid feeding device 1 according to the present technology, the user does not need to perform visual monitoring on the presence / absence of the sample tube, the type of the sample tube, and the remaining amount of the sample. Then, the sample liquid feeding device 1 automatically checks the remaining amount of the sample and the like, and sends the sample to the microparticle measuring device 100 in a state where no sample is contained in the sample tube 22 or the sample is smaller than the minimum suction amount. It is possible to prevent the liquid operation from being performed. Thereby, for example, when the liquid is fed in a state where no sample is contained in the sample tube or in a state where the sample is smaller than the minimum suction amount, the sample is ejected in a spray form from the chip in the microparticle measuring device 100. It is possible to prevent lens contamination in the 100. As described above, in the sample liquid feeding device 1, the sample can be fed accurately and easily.

本技術に係るサンプル送液装置は以下のような構成をとることもできる。
(1)光を照射する光照射部と、前記光を検出する光検出部と、収容されたサンプルチューブの側面に照射される前記光を遮光する遮光部、及び前記光が通過可能な一対の光透過部を有するチューブホルダと、を備えるサンプル送液装置。
(2)前記遮光部に対する光照射により前記チューブホルダを側面の周方向に回転する駆動部を更に備える前記(1)記載のサンプル送液装置。
(3)前記光検出部により検出される前記光の光量により前記サンプルチューブ内のサンプルの残量を判定する制御部を備える、前記(1)又は(2)記載のサンプル送液装置。
(4)前記光の光路と一対の前記光透過部間の直線とが重なるように、前記駆動部が前記チューブホルダを回転させる角度が、前記チューブホルダが収容可能なサンプルチューブの形状に応じて異なる前記(2)又は(3)の何れか一つに記載のサンプル送液装置。
(5)前記光路と前記直線とが重なるように、前記駆動部が前記チューブホルダを回転させる角度が、前記チューブホルダが収容可能なサンプルチューブの容積に応じて異なる前記()〜(4)の何れか一つに記載のサンプル送液装置。
(6)前記駆動部に取り付けられた第1のマグネットと、該第1のマグネットとは離隔し且つ対向して設けられ、前記チューブホルダの底部に位置し、前記第1のマグネットの磁力作用により回転する第2のマグネットと、を更に備える前記()〜(5)の何れか一つに記載のサンプル送液装置。
(7)前記(1)〜(6)の何れか一つに記載のサンプル送液装置が連接されたフローサイトメータ。
(8)光照射により、チューブホルダの有無を判定し、光が通過するまで前記チューブホルダを回転し、光が通過する前記チューブホルダの回転角度を検出し、前記回転角度に応じて前記チューホルダに収容されたサンプルチューブの形状を判定する手順を含む、サンプル送液装置におけるサンプルチューブ判定方法。
The sample liquid feeding device according to the present technology can also have the following configuration.
(1) A light irradiation unit that irradiates light, a light detection unit that detects the light, a light blocking unit that blocks the light irradiated to the side surface of the accommodated sample tube, and a pair of light that can pass therethrough And a tube holder having a light transmission part.
(2) The sample liquid feeding device according to (1), further including a drive unit that rotates the tube holder in a circumferential direction of a side surface by light irradiation on the light shielding unit.
(3) The sample liquid feeding device according to (1) or (2), further including a control unit that determines the remaining amount of the sample in the sample tube based on the amount of the light detected by the light detection unit.
(4) The angle at which the drive unit rotates the tube holder so that the optical path of the light and the straight line between the pair of light transmission units overlap depends on the shape of the sample tube that the tube holder can accommodate. The sample feeding apparatus according to any one of (2) and (3) , which is different.
(5) the way the optical path and the straight line are overlapped, the angle of the drive unit rotates the tube holder is different depending on the volume of the tube holder can accommodate sample tubes of (2) to (4) The sample liquid feeding device according to any one of the above.
(6) The first magnet attached to the drive unit and the first magnet are spaced apart and opposed to each other, located at the bottom of the tube holder, and by the magnetic force action of the first magnet The sample liquid feeding device according to any one of ( 2 ) to (5), further including a rotating second magnet.
(7) A flow cytometer to which the sample liquid feeding device according to any one of (1) to (6) is connected.
(8) The presence or absence of the tube holder is determined by light irradiation, the tube holder is rotated until light passes, the rotation angle of the tube holder through which light passes is detected, and the tube holder is detected according to the rotation angle The sample tube determination method in a sample liquid feeding apparatus including the procedure which determines the shape of the sample tube accommodated in.

1 サンプル送液装置
2 撹拌ユニット
3 エアシリンダ
4 液面検出センサ
5 加圧送液部
6 サンプルライン
21 チューブホルダ
22 サンプルチューブ
23 設置台
24 モータ
25 マグネット
26 マグネット
27、28 ギア
29 圧力遮断壁
31 加圧シリンダ
32 昇降シリンダ
41 光照射部
42 光検出部
51 ノズル
52 加圧シェル
53 気密保持用Oリング
100 微小粒子測定装置
211 遮光部
212 光透過部
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Sample liquid feeding apparatus 2 Stirring unit 3 Air cylinder 4 Liquid level detection sensor 5 Pressurized liquid feeding part 6 Sample line 21 Tube holder 22 Sample tube 23 Installation stand 24 Motor 25 Magnet 26 Magnet 27, 28 Gear 29 Pressure cutoff wall 31 Pressurization Cylinder 32 Elevating cylinder 41 Light irradiation part 42 Light detection part 51 Nozzle 52 Pressure shell 53 O-ring 100 for airtightness maintenance Fine particle measuring device 211 Light shielding part 212 Light transmission part

Claims (6)

光を照射する光照射部と、
前記光を検出する光検出部と、
収容されたサンプルチューブの側面に照射される前記光を遮光する遮光部及び前記光が通過可能な一対の光透過部を有し、前記サンプルチューブの容積に応じて設定され、周方向に沿った回転により前記光が一対の光透過部を通過可能になるまでの回転角度を有するチューブホルダと、
前記チューブホルダが設置される設置台と、
前記遮光部に対して照射された光が前記一対の光透過部で形成される直線を透過するまで前記チューブホルダを側面の周方向に回転する駆動部と、
前記チューブホルダが前記設置台に設置されて前記駆動部が回転原点に位置している状態における前記一対の光透過部間で形成される直線と前記光の光路とが成す角度、及び前記駆動部が前記チューブホルダを回転させて前記一対の光透過部を光が通過可能になるまでの前記回転角度に基づいて、前記サンプルチューブの容積を判定する制御部と、
前記サンプルチューブ内のサンプルを吸引する送液部と、を備えるサンプル送液装置。
A light irradiation unit for irradiating light;
A light detector for detecting the light;
Shielding portion and the light shields the light irradiated on the side surface of the housing sample tubes have a pair of light transmitting part can pass, is set in accordance with the volume of the sample tube, along the circumferential direction A tube holder having a rotation angle until the light can pass through the pair of light transmission portions by rotation ;
An installation table on which the tube holder is installed;
A drive unit that rotates the tube holder in the circumferential direction of the side surface until the light irradiated to the light shielding unit passes through a straight line formed by the pair of light transmission units;
An angle formed by a straight line formed between the pair of light transmission parts and the light path of the light in a state where the tube holder is installed on the installation base and the driving unit is located at the rotation origin; and the driving unit A controller that determines the volume of the sample tube based on the rotation angle until the tube holder is rotated and light can pass through the pair of light transmission parts;
A sample liquid feeding device comprising: a liquid feeding unit that sucks a sample in the sample tube.
前記制御部は、前記光検出部により検出される前記光の光量により前記サンプルチューブ内のサンプルの残量を判定する、請求項1記載のサンプル送液装置。 The sample liquid feeding device according to claim 1, wherein the control unit determines the remaining amount of the sample in the sample tube based on the amount of the light detected by the light detection unit. 前記チューブホルダは、前記サンプルチューブの形状に応じて設定され、周方向に沿った回転により前記光が一対の光透過部を通過可能になるまでの回転角度を有し、
前記制御部は、前記チューブホルダが前記設置台に設置されて前記駆動部が回転原点に位置している状態における前記一対の光透過部間で形成される直線と前記光の光路とが成す角度、及び前記駆動部が前記チューブホルダを回転させて前記一対の光透過部を光が通過可能になるまでの前記回転角度に基づいて、前記サンプルチューブの形状を判定する、請求項1又は2に記載のサンプル送液装置。
The tube holder is set according to the shape of the sample tube, and has a rotation angle until the light can pass through a pair of light transmission parts by rotation along the circumferential direction,
The control unit includes an angle formed by a straight line formed between the pair of light transmission units and the optical path of the light in a state where the tube holder is installed on the installation table and the driving unit is located at a rotation origin. The shape of the sample tube is determined based on the rotation angle until the drive unit rotates the tube holder and light can pass through the pair of light transmission units. The sample liquid feeder described.
前記駆動部に取り付けられた第1のマグネットと、
該第1のマグネットとは離隔し且つ対向して設けられ、前記チューブホルダの底部に位置し、前記第1のマグネットの磁力作用により回転する第2のマグネットと、を更に備える請求項1〜3のいずれか一項に記載のサンプル送液装置。
A first magnet attached to the drive unit;
A second magnet provided at a distance from and opposed to the first magnet, positioned at the bottom of the tube holder, and rotated by the magnetic force action of the first magnet. The sample liquid feeder as described in any one of these.
請求項1〜4のいずれか一項に記載のサンプル送液装置が連結されたフローサイトメータ。 The flow cytometer with which the sample liquid feeding apparatus as described in any one of Claims 1-4 was connected. 収容されたサンプルチューブの側面に照射される前記光を遮光する遮光部及び前記光が通過可能な一対の光透過部を有し、前記サンプルチューブの容積に応じて設定され、周方向に沿った回転により前記光が一対の光透過部を通過可能になるまでの回転角度を有するチューブホルダを設置台に設置するステップと、
前記チューブホルダの遮光部に対して光を照射し、当該チューブホルダを検出する検出ステップと、
前記検出ステップ後に、前記光透過部を前記光が通過するまで前記チューブホルダを回転させ、当該チューブホルダの前記回転角度を検出する回転角度検出ステップと、
前記回転角度に基づいて、前記チューブホルダに収容されるサンプルチューブの容積を判定する判定ステップと、
前記サンプルチューブ内のサンプルを吸引する送液ステップと、
を含む、サンプル送液装置におけるサンプルチューブ判定方法。
Shielding portion and the light shields the light irradiated on the side surface of the housing sample tubes have a pair of light transmitting part can pass, is set in accordance with the volume of the sample tube, along the circumferential direction Installing a tube holder having a rotation angle until the light can pass through the pair of light transmission portions by rotation on the installation table;
A detection step of irradiating light to the light-shielding portion of the tube holder and detecting the tube holder;
After the detection step, by rotating the tube holder to the light transmitting portion to the light passes, the rotation angle detecting step of detecting the rotation angle of the tube holder,
A determination step of determining the volume of the sample tube accommodated in the tube holder based on the rotation angle;
A liquid feeding step for aspirating the sample in the sample tube;
A sample tube determination method in a sample liquid delivery device.
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