JP5959995B2 - 皮膚のしわ形成防止・改善剤 - Google Patents
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Description
内容積5Lの抽出槽に霊芝(赤霊芝)の粉砕物1kgを仕込み、これに超臨界二酸化炭素(圧力25MPa、温度60℃、二酸化炭素供給量15m3)を約4.5時間供給し、抽出槽に接続した分離槽(温度40℃、圧力4MPa)に導いて炭酸ガスと抽出物を分離し、抽出物を10.1g得た。
製造例1において赤霊芝を黒霊芝に変え、製造例1と同様に処理して抽出物を11.0g得た。
製造例1で使用したものと同じ赤霊芝の粉砕物20gに蒸留水1Lを加えて、100℃で1時間抽出し、得られた抽出液を濾過し、その濾液を凍結乾燥して赤霊芝の熱水抽出物を1.4g得た。
製造例2で使用したものと同じ黒霊芝の粉砕物20gに蒸留水1Lを加えて、100℃で1時間抽出し、得られた抽出液を濾過し、その濾液を凍結乾燥して黒霊芝の熱水抽出物を1.6g得た。
成分 配合量(重量%)
1.赤霊芝の超臨界抽出物(製造例1) 0.1
2.スクワラン 5.5
3.オリーブ油 3.0
4.ステアリン酸 2.0
5.ミツロウ 2.0
6.ミリスチン酸オクチルドデシル 3.5
7.ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 3.0
8.ベヘニルアルコール 1.5
9.モノステアリン酸グリセリン 2.5
10.香料 0.1
11.1,3−ブチレングリコール 8.5
12.パラオキシ安息香酸メチル 0.25
13.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜9を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分11〜13を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分10を加え、更に30℃まで冷却してクリームを得た。
処方例1において、赤霊芝の超臨界抽出物を黒霊芝の超臨界抽出物(製造例2)に置き換えたものをクリーム2とした。
処方例1において、赤霊芝の超臨界抽出物をスクワランに置き換えたものを従来のクリームとした。
成分 配合量(重量%)
1.赤霊芝の超臨界抽出物(製造例1) 0.05
2.黒霊芝の超臨界抽出物(製造例2) 0.05
3.スクワラン 5.5
4.オリーブ油 3.0
5.ステアリン酸 2.0
6.ミツロウ 2.0
7.ミリスチン酸オクチルドデシル 3.5
8.ポリオキシエチレンセチルエーテル(20E.O.) 3.0
9.ベヘニルアルコール 1.5
10.モノステアリン酸グリセリン 2.5
11.香料 0.1
12.1,3−ブチレングリコール 8.5
13.パラオキシ安息香酸メチル 0.25
14.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜10を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分12〜14を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分11を加え、更に30℃まで冷却してクリームを得た。
成分 配合量(重量%)
1.赤霊芝の超臨界抽出物(製造例1) 0.01
2.黒霊芝の超臨界抽出物(製造例2) 0.01
3.ポリオキシエチレンセチルエーテル(30E.O.) 2.0
4.モノステアリン酸グリセリン 10.0
5.流動パラフィン 5.0
6.セタノール 6.0
7.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
8.プロピレングリコール 10.0
9.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜6を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とした。成分7〜9を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とした。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら30℃まで冷却して軟膏を得た。
成分 配合量(重量%)
1.赤霊芝の超臨界抽出物(製造例1) 1.0
2.エタノール 5.0
3.パラオキシ安息香酸メチル 0.1
4.ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油(60E.O.) 0.1
5.1,3−ブチレングリコール 5.0
6.グリセリン 5.0
7.キサンタンガム 0.1
8.カルボキシビニルポリマー 0.2
9.水酸化カリウム 0.2
10.精製水にて全量を100とする
[製造方法]成分1〜4と、成分5〜10をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。
正常ヒト真皮線維芽細胞(NB1RGB)を60mmディッシュに播種し、コンフルエントになるまで培養した。その後、最終濃度が0.1及び1μg/mlになるように赤霊芝の超臨界抽出物(製造例1)又は黒霊芝の超臨界抽出物(製造例2)を加え、24時間培養した。比較用の試料は、赤霊芝の熱水抽出物(比較製造例1)及び黒霊芝の熱水抽出物(比較製造例2)を用いた。培地を除き、細胞をPBSで2回洗浄した後、UVB領域の紫外線30mJ/cm2(東芝FL−20S・Eランプ)を照射した。通常の培地に戻し、さらに24時間培養後、TRIzol Reagent(インビトロジェン)にて細胞から総RNAを抽出し、SuperScript III Platinum Two−Step qRT−PCR Kit with SYBR Green(インビトロジェン)を用い、RT−PCR法にてタイプIコラーゲン mRNA発現量の測定を行った。PCR反応は、95℃にて2分間初期変性を行った後、95℃:15秒、60℃:31秒を1サイクルとして40サイクル行った。内部標準としては、β−アクチンを用いた。タイプIコラーゲン mRNA発現量は、β−アクチン mRNA発現量に対する割合として求めた。なお、タイプIコラーゲン及びβ−アクチン mRNA発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。
AGGACAAGAGGCATGTCTGGTT(配列番号1)
TTGCAGTGGTAGGTGATGTTCTG(配列番号2)
β−アクチン用のプライマーセット
CACTCTTCCAGCCTTCCTTCC(配列番号3)
GTGTTGGCGTACAGGTCTTTG(配列番号4)
処方例1〜3及び比較例1のクリームを調製し、顔面に真皮性しわ(小じわではない)を有する女性被験者(40−50代)を対象に1ヶ月間の使用試験を実施した。処方例1〜3又は比較例1のクリームをそれぞれ10名の被験者の頬部に朝晩1日2回使用させた。試験終了後のしわの改善度を、以下に示す判定基準にて視覚評価することにより、「しわに対する改善効果」を判定した。
(判定基準)
有効 :真皮性しわ(小じわではない)がかなり目立たなくなった
やや有効:真皮性しわ(小じわではない)が以前より目立たなくなった
効果なし:変化なし
Claims (2)
- 温度範囲15〜150℃、圧力範囲1〜80MPaの状態にある二酸化炭素により抽出された抽出物である、赤霊芝抽出物及び黒霊芝抽出物を含有することを特徴とする皮膚のしわ形成防止・改善剤。
- 皮膚のしわが、紫外線照射に起因するしわである請求項1記載のしわ形成防止・改善剤。
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