JP5853626B2

JP5853626B2 - Negative pressure adsorption head for transferring functional film and method of transferring functional film using the same

Info

Publication number: JP5853626B2
Application number: JP2011251882A
Authority: JP
Inventors: 正敏黒田; 清水　雄二; 雄二清水; 政彦長谷
Original assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Current assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Priority date: 2011-11-17
Filing date: 2011-11-17
Publication date: 2016-02-09
Anticipated expiration: 2031-11-17
Also published as: JP2013106527A

Description

本発明は、機能性フィルムを細胞培養容器へ移送するための負圧吸着ヘッドと、その負圧吸着ヘッドを用いた機能性フィルムの移送方法に関する。 The present invention relates to a negative pressure adsorption head for transferring a functional film to a cell culture container, and a method for transferring a functional film using the negative pressure adsorption head.

表面に細胞培養される親水性ポリマー（温度応答性ポリマー)の層を被覆した細胞培養支持体（シャーレなどの細胞培養容器）が特許文献１に記載されている。この細胞培養支持体を用いることにより、温度を変化させるだけで培養・増殖後の細胞を破壊することなく細胞支持体から容易に剥離して回収することができる。しかし、特許文献１に記載のように、シャーレなどの細胞培養容器に、別個にバッチ処理により表面処理をして機能性化合物層を設けることは、多くの手間を必要としており、作業性の観点からはなお改善する余地がある。 Patent Document 1 discloses a cell culture support (a cell culture container such as a petri dish) having a surface coated with a layer of a hydrophilic polymer (temperature-responsive polymer) to be cultured. By using this cell culture support, it can be easily detached from the cell support and recovered without destroying the cultured / proliferated cells simply by changing the temperature. However, as described in Patent Document 1, it is necessary to perform surface treatment separately by batch treatment on a cell culture container such as a petri dish to provide a functional compound layer. There is still room for improvement.

また、プレプリントされていて剥離機により剥離発行されるシール類を所望の製品に貼り付けるためのシール貼り付け装置において、シールを負圧吸引する吸引部の吸引面を断面弧状を呈する弾性的部材で形成し、該弾性的部材をその中央から対象物品に押し付けることで、最初にシールの中央部を圧着し、その後、さらに押圧することで弾性的部材を次第に撓ませながらシールの全体の面を貼り付けるようにすることで、貼り付けられたシールと物品との間に気泡が入らないようにしたシールの貼り付け装置が特許文献２に記載されている。 In addition, in a sticking device for sticking preprinted seals that are peeled off and issued by a peeling machine to a desired product, an elastic member that exhibits a cross-section arc shape of a suction surface of a suction portion that sucks negative pressure on the seal By pressing the elastic member against the target article from its center, the center portion of the seal is first crimped, and then further pressing the entire surface of the seal while gradually bending the elastic member Patent Document 2 describes a seal sticking device that prevents bubbles from entering between a sticked sticker and an article by sticking.

特開平２−２１１８６５号公報JP-A-2-21865 特開２００９−１５４９０４号公報JP 2009-154904 A

特許文献１に記載される細胞培養支持体の持つバッチ処理による不都合を解消する手法として、機能性化合物層の多数個を帯状の剥離フィルム上に配列した原反を予め作っておき、ラベリングの手法を使って、原反から機能性化合物層を連続的に剥離させるとともに、各剥離した機能性化合物層を、従来からシート材などの搬送手段として用いられている負圧吸着ヘッドを用いて、細胞培養容器まで移送した後、負圧を開放して、機能性化合物層を細胞培養容器の底部に配置する手法が考えられる。 As a technique for solving the inconvenience due to the batch processing of the cell culture support described in Patent Document 1, a raw material in which a large number of functional compound layers are arranged on a strip-shaped release film is prepared in advance, and a labeling technique is used. The functional compound layer is continuously peeled from the raw fabric using the negative pressure adsorption head that has been conventionally used as a conveying means for sheet materials, etc. After transferring to a culture container, the method of releasing a negative pressure and arrange | positioning a functional compound layer in the bottom part of a cell culture container can be considered.

一方、細胞培養容器の底面に機能性フィルムを配置して細胞の培養・増殖を行う場合、細胞培養容器の底面と機能性フィルムの裏面との間に気泡が存在しない状態で、両者が密着していることが求められる。気泡が存在していると細胞培養時の顕微鏡観察像に移りこんでしまう可能性があるため、気泡なく密着していることが望ましい。 On the other hand, when a functional film is placed on the bottom surface of a cell culture container to culture and proliferate cells, both are in close contact with each other with no air bubbles between the bottom surface of the cell culture container and the back surface of the functional film. Is required. If bubbles are present, they may be transferred to a microscopic observation image at the time of cell culture.

本発明者らは従来からシール類の貼付に用いられている負圧吸着ヘッドを用い、負圧吸着ヘッドの吸着面に機能性フィルムを吸着した状態で細胞培養容器の上まで移送し、そこで負圧の開放と排気を行って機能性フィルムを細胞培養容器の底面に落下させる処理を多く行っているが、多くの場合、落下した機能性フィルムと細胞培養容器の底面との間に気泡が存在してしまうのを避けることができなかった。気泡が存在する場合、高温高圧水蒸気によるオートクレーブ処理を行って気泡を除去することが必要であり、余分な作業が必要となることに加え、機能性フィルムの種類によっては、特に親水性ポリマーを備えた機能性フィルムの場合には、オートクレーブ処理により機能性フィルムを損傷する恐れもある。 The present inventors have used a negative pressure adsorption head that has been conventionally used for sticking stickers, transferred the functional film onto the adsorption surface of the negative pressure adsorption head, and transferred it to the cell culture container where it is negative. Many treatments are performed to release the functional film on the bottom of the cell culture container by releasing the pressure and exhausting, but in many cases there are bubbles between the dropped functional film and the bottom of the cell culture container. I couldn't avoid it. When bubbles are present, it is necessary to remove the bubbles by autoclaving with high-temperature and high-pressure steam. In addition to the extra work required, some types of functional films are equipped with a hydrophilic polymer. In the case of a functional film, the functional film may be damaged by autoclaving.

また、特許文献２に記載の方法、すなわち、吸着面を断面弧状を呈する弾性的部材で形成して、物品へのシールの貼り付けを、シールを弾性部材とともに物品に押し付ける方法を、機能性フィルムを細胞培養容器へ移し替える手法に採用すると、押し付け時の圧力によって機能性フィルムの機能性化合物が形成された面を損傷する恐れがあるので、圧着による手法を採用することは好ましくない。 In addition, a method described in Patent Document 2, that is, a method in which an adsorption surface is formed of an elastic member having an arcuate cross section and a seal is attached to an article, and the seal is pressed against the article together with the elastic member, is a functional film. If it is adopted as a method for transferring to a cell culture container, there is a risk of damaging the surface on which the functional compound of the functional film is formed due to the pressure during pressing, so it is not preferable to adopt the method by pressure bonding.

本発明は上記の事情に鑑みてなされたものであり、機能性フィルムを負圧吸着ヘッドを用いて初期位置から細胞培養容器へ移送するときに、機能性フィルムと細胞培養容器の底面との間に気泡が存在しない状態で、機能性フィルムを細胞培養容器の底面に落下させることを可能とした負圧吸着ヘッドを提供することを課題とする。 The present invention has been made in view of the above circumstances, and when the functional film is transferred from the initial position to the cell culture container using a negative pressure adsorption head, the functional film is placed between the functional film and the bottom surface of the cell culture container. It is an object of the present invention to provide a negative pressure adsorption head capable of dropping a functional film onto the bottom surface of a cell culture container in the absence of bubbles.

本発明者らは、上記の課題を解決すべく多くの実験を行うことにより、図１２（ａ）に示すような複数の負圧吸着孔２を有する平面状の吸着面を備えた負圧吸着ヘッド１を用い、機能性フィルム３を吸着した状態で、負圧吸着ヘッド１の吸着面と細胞培養容器４の底面５とを平行な姿勢として負圧を開放すると、機能性フィルム３は、図１２（ｂ）に示すように、細胞培養容器４の底面５とほぼ平行な姿勢を保った状態で容器底面５に向けて落下することとなり、空気の逃げ道が制限されることから、図１２（ｃ）に示すように、両者の間に気泡６が残ってしまうことを知見した。 The present inventors have conducted a number of experiments to solve the above-described problems, and thereby have a negative pressure adsorption having a planar adsorption surface having a plurality of negative pressure adsorption holes 2 as shown in FIG. When the functional film 3 is adsorbed using the head 1 and the negative pressure is released with the adsorption surface of the negative pressure adsorption head 1 and the bottom surface 5 of the cell culture vessel 4 being parallel, the functional film 3 becomes a figure. As shown in FIG. 12 (b), since it falls toward the bottom surface 5 of the cell culture vessel 4 while maintaining a posture substantially parallel to the bottom surface 5 of the cell culture vessel 4, the air escape path is limited. As shown in c), it was found that bubbles 6 remained between the two.

本発明は、上記の知見に基づくものであり、本発明による負圧吸着ヘッドは、機能性フィルムを複数の負圧吸着孔を備えた吸着面に負圧吸着して細胞培養容器へ移送した後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器へ落下させるのに用いる負圧吸着ヘッドであって、前記吸着面は、機能性フィルムの落下方向に傾斜した傾斜面を有することを特徴とする。 The present invention is based on the above-described knowledge, and the negative pressure adsorption head according to the present invention is a method in which a functional film is negatively adsorbed on an adsorption surface having a plurality of negative pressure adsorption holes and transferred to a cell culture vessel. A negative pressure adsorption head used for releasing the negative pressure and dropping the functional film onto the cell culture vessel, wherein the adsorption surface has an inclined surface inclined in the falling direction of the functional film, To do.

本発明による負圧吸着ヘッドを用いて機能性フィルムを初期位置から細胞培養容器へ移送するときの、前記初期位置での機能性フィルムの吸着動作は、従来知られている負圧吸着ヘッドにおけると同様に行われる。そして、細胞培養容器上で負圧を開放することで、機能性フィルムは負圧吸着ヘッドの吸着面から自重で落下していくが、吸着面が傾斜面であることから、落下開始時での機能性フィルムの姿勢は、吸着面の傾斜面に応じた傾斜した姿勢となっている。そのために、落下する機能性フィルムは、その最も下位に位置する部分が他の部分と比較してより早く細胞培養容器の底面に着地するようになり、その後、機能性フィルムの全体は時間差をもって細胞培養容器の底面に次第に着地していく。その過程で、機能性フィルムの裏面と細胞培養容器の底面との間に存在する空気は、順次連続して外側に向けて排出されるので、間に気泡がない状態で機能性フィルムの全体を細胞培養容器の底面に配置させることができる。また、機能性フィルムが負圧吸着ヘッドから細胞培養容器の底面へ移動するときに、機能性フィルムには、押圧力のような外的な力が作用することはないので、機能性フィルムの機能性化合物が形成された面に損傷が生じることもない。 When the functional film is transferred from the initial position to the cell culture vessel using the negative pressure adsorption head according to the present invention, the functional film is adsorbed at the initial position in a conventionally known negative pressure adsorption head. The same is done. And by releasing the negative pressure on the cell culture container, the functional film will fall by its own weight from the adsorption surface of the negative pressure adsorption head, but since the adsorption surface is an inclined surface, The posture of the functional film is an inclined posture corresponding to the inclined surface of the adsorption surface. For this reason, the falling functional film comes to land on the bottom of the cell culture container earlier than the other parts, and then the entire functional film has a time difference. Gradually land on the bottom of the culture vessel. In the process, the air existing between the back surface of the functional film and the bottom surface of the cell culture container is sequentially discharged toward the outside, so that the entire functional film is removed without any air bubbles. It can arrange | position to the bottom face of a cell culture container. In addition, when the functional film moves from the negative pressure adsorption head to the bottom surface of the cell culture vessel, external force such as pressing force does not act on the functional film. The surface on which the active compound is formed is not damaged.

本発明において、負圧吸着ヘッドの吸着面の平面視での形状は、特に限定されないが、好ましくは、細胞培養容器に移送する機能性フィルムの外郭形状と一致した形状とされる。円形の機能性フィルムの場合には、平面視で円形の吸着面を持つ負圧吸着ヘッドが用いられ、矩形の機能性フィルムの場合には、平面視で矩形の吸着面を持つ負圧吸着ヘッドが用いられる。 In the present invention, the shape of the suction surface of the negative pressure suction head in plan view is not particularly limited, but is preferably a shape that matches the outer shape of the functional film transferred to the cell culture container. In the case of a circular functional film, a negative pressure suction head having a circular suction surface in plan view is used. In the case of a rectangular functional film, a negative pressure suction head having a rectangular suction surface in plan view. Is used.

平面視の形状如何を問わず、本発明による負圧吸着ヘッドにおいて、前記吸着面は、１つの前記傾斜面で形成される形態でもよく、傾斜方向が逆方向である対向する２つの前記傾斜面で形成される形態でもよい。２つの傾斜面を備える場合、下端部での斜面同士の接合部は、鋭角でなく、湾曲した接合部とすることは好ましく、それにより、負圧吸引した姿勢で斜面同士の接合部が機能性フィルムに損傷を与えるのを回避できる。なお、１つの前記傾斜面を有する形態では、負圧吸着ヘッドから落下する機能性フィルムは、単に斜めに傾斜した姿勢で落下することとなり、２つの傾斜面を備える場合には、機能性フィルムは、断面Ｕ字状またはＶ字状に下方に屈曲した姿勢で落下することとなる。 Regardless of the shape in plan view, in the negative pressure adsorption head according to the present invention, the adsorption surface may be formed by one inclined surface, and the two inclined surfaces facing each other whose inclination directions are opposite to each other. The form formed by may be sufficient. When two inclined surfaces are provided, it is preferable that the joint portion between the inclined surfaces at the lower end portion is not an acute angle but a curved joint portion, so that the joint portion between the inclined surfaces is functional in a negative pressure suction posture. It is possible to avoid damaging the film. In the form having one inclined surface, the functional film falling from the negative pressure adsorption head simply falls in an obliquely inclined posture, and when the two inclined surfaces are provided, the functional film is Then, it falls in a posture bent downward in a U-shaped or V-shaped cross section.

また、上記したいずれの形態の負圧吸着ヘッドにおいても、前記傾斜面は全体が平面状あってもよく、全部または一部は断面弧状をなしていてもよい。後者の態様では、落下する機能性フィルムの全部または一部に湾曲した姿勢を与えることができるので、機能性フィルムの裏面と細胞培養容器の底面との間に存在する空気をより確実に外側に向けて排出できるようになる。 In any of the above-described negative pressure suction heads, the inclined surface may be entirely flat or all or part of it may have a cross-sectional arc shape. In the latter aspect, a curved posture can be given to all or a part of the falling functional film, so that the air existing between the back surface of the functional film and the bottom surface of the cell culture container can be more reliably outward. It becomes possible to discharge towards.

本発明は、また、上記したいずれかの負圧吸着ヘッドを用いて機能性フィルムを吸着し、該機能性フィルムを細胞培養容器上へ移送した後、負圧を開放して前記機能性フィルムを前記細胞培養容器へ落下させ、前記機能性フィルムを前記細胞培養容器に配置することを特徴とする細胞培養容器の製造方法をも開示する。 The present invention also adsorbs the functional film using any of the negative pressure adsorption heads described above, transfers the functional film onto the cell culture container, and then releases the negative pressure to release the functional film. Also disclosed is a method for producing a cell culture container, wherein the functional film is dropped into the cell culture container and the functional film is disposed in the cell culture container.

本発明による負圧吸着ヘッドを用いることにより、機能性フィルムの裏面と細胞培養容器の底面との間に気泡の発生を抑えた状態で、機能性フィルムを細胞培養容器の底面に配置することが可能となる。 By using the negative pressure adsorption head according to the present invention, it is possible to dispose the functional film on the bottom surface of the cell culture container while suppressing the generation of bubbles between the back surface of the functional film and the bottom surface of the cell culture container. It becomes possible.

本発明による負圧吸着ヘッドによって移送される機能性フィルムの一例を説明する模式図。The schematic diagram explaining an example of the functional film conveyed by the negative pressure adsorption head by this invention. 多数個の機能性フィルムを帯状の剥離フィルムに仮接着した原反を説明する模式図。The schematic diagram explaining the original fabric which temporarily bonded many functional films to the strip | belt-shaped peeling film. 本発明による負圧吸着ヘッドを備えた細胞培養容器の製造装置の一例を説明する模式図。The schematic diagram explaining an example of the manufacturing apparatus of the cell culture container provided with the negative pressure adsorption head by this invention. 機能性フィルムを配置した細胞培養容器の例であるフラスコ型細胞培養容器を示す図。The figure which shows the flask type cell culture container which is an example of the cell culture container which has arrange | positioned the functional film. 図４に示すフラスコ型細胞培養容器の製造手順を示す図。The figure which shows the manufacture procedure of the flask type cell culture container shown in FIG. 本発明による負圧吸着ヘッドの一例を説明する図。The figure explaining an example of the negative pressure adsorption head by this invention. 図６に示す負圧吸着ヘッドを用いた場合での機能性フィルムの落下状態を説明する図。The figure explaining the fall state of a functional film at the time of using the negative pressure adsorption head shown in FIG. 本発明による負圧吸着ヘッドの他の例を説明する図。The figure explaining the other example of the negative pressure suction head by this invention. 本発明による負圧吸着ヘッドのさらに他の例を説明する図。The figure explaining the further another example of the negative pressure suction head by this invention. 図９に示す負圧吸着ヘッドを用いた場合での機能性フィルムの落下状態を説明する図。The figure explaining the fall state of a functional film at the time of using the negative pressure adsorption head shown in FIG. フラスコ型細胞培養容器の他の製造方法を説明する図。The figure explaining other manufacturing methods of a flask type cell culture container. 従来の負圧吸着ヘッドを用いる場合での枚様シートの落下状態を説明する図。The figure explaining the fall state of the sheet | seat sheet in the case of using the conventional negative pressure adsorption head.

以下、本発明を実施の形態に基づき説明する。図１は、本発明による負圧吸着ヘッドによって移送される機能性フィルムの一例を模式的に示す断面図である。なお、本発明において、対象となる機能性フィルムは、可撓性を有しており、かつ表面に細胞培養に適した所望の機能が付与された、粘着剤層を備えたフィルムであることが好ましい。より好ましい実施形態では、図１に示す機能性フィルム１０のように、フィルム基材層１１の一方の面に機能性化合物層１２が積層され、他方の面に粘着剤層１３が積層されている。なお、図１において、１４は後記する帯状をなす剥離フィルムである。 Hereinafter, the present invention will be described based on embodiments. FIG. 1 is a cross-sectional view schematically showing an example of a functional film transported by a negative pressure adsorption head according to the present invention. In the present invention, the target functional film is a film having a pressure-sensitive adhesive layer that is flexible and has a surface provided with a desired function suitable for cell culture. preferable. In a more preferred embodiment, like the functional film 10 shown in FIG. 1, the functional compound layer 12 is laminated on one surface of the film substrate layer 11, and the pressure-sensitive adhesive layer 13 is laminated on the other surface. . In addition, in FIG. 1, 14 is a peeling film which makes the strip | belt shape mentioned later.

＜フィルム基材層１１＞
限定されないが、フィルム基材層１１は、一方の表面に前記機能性化合物層１２を形成することが可能な材料を含むものであればよく、材料の種類は特に限定されない。典型的には、フィルム基材層１１の材料として、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ（トリアセチルセルロース）、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、中密度ポリエチレン（ＭＤＰＥ）、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、アクリル等が挙げられる。 <Film base material layer 11>
Although not limited, the film base material layer 11 should just contain the material which can form the said functional compound layer 12 in one surface, and the kind of material is not specifically limited. Typically, as a material for the film base layer 11, polyethylene terephthalate (PET), polystyrene (PS), polycarbonate (PC), TAC (triacetyl cellulose), polyimide (PI), nylon (Ny), low density polyethylene (LDPE), medium density polyethylene (MDPE), vinyl chloride, vinylidene chloride, polyphenylene sulfide, polyether sulfone, polyethylene naphthalate, polypropylene, acrylic and the like.

フィルム基材層１１の、機能性化合物層１２が形成される側の表面は、易接着処理された表面とすることができる。「易接着処理」とは、例えば、ポリエステル、アクリル酸エステル、ポリウレタン、ポリエチレンイミン、シランカップリング剤、ペルフルオロオクタンスルホン酸（ＰＦＯＳ）等の易接着剤による処理を指す。 The surface of the film base material layer 11 on the side on which the functional compound layer 12 is formed can be a surface subjected to easy adhesion treatment. “Easy adhesion treatment” refers to treatment with an easy adhesive such as polyester, acrylic ester, polyurethane, polyethyleneimine, silane coupling agent, perfluorooctane sulfonic acid (PFOS), and the like.

フィルム基材層１１の厚さ（フィルム基材層１１が基材の層に加えて易接着層を備える場合は、易接着層を含むフィルム基材層の全体の厚さを指す）は、特に制限は無いが可撓性を付与する厚さであることが好ましく、例えば５μｍ〜４００μｍ、好ましくは５０μｍ〜２５０μｍである。 The thickness of the film base material layer 11 (when the film base material layer 11 includes an easy adhesion layer in addition to the base material layer, it refers to the entire thickness of the film base material layer including the easy adhesion layer) is particularly Although there is no restriction | limiting, It is preferable that it is the thickness which provides flexibility, for example, is 5 micrometers-400 micrometers, Preferably it is 50 micrometers-250 micrometers.

＜機能性化合物層１２＞
機能性化合物層１２を構成する機能性化合物としては、有機化合物または無機化合物が挙げられ、より好ましくは、所定の刺激によって細胞接着性から細胞非接着性へと変化することが可能な表面を有する刺激応答性ポリマーや、１つ以上のエチレングリコール単位（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）からなるエチレングリコール鎖等の親水性化合物が挙げられる。 <Functional compound layer 12>
The functional compound constituting the functional compound layer 12 includes an organic compound or an inorganic compound, and more preferably has a surface that can be changed from cell adhesiveness to cell nonadhesiveness by a predetermined stimulus. Examples thereof include hydrophilic compounds such as a stimulus-responsive polymer and an ethylene glycol chain composed of one or more ethylene glycol units (CH ₂ —CH ₂ —O).

機能性化合物層の膜厚は、例えば、０．５ｎｍ〜３００ｎｍの範囲内とするのがよく、なかでも１ｎｍ〜１００ｎｍの範囲内であることが好ましい。 The film thickness of the functional compound layer is, for example, preferably in the range of 0.5 nm to 300 nm, and more preferably in the range of 1 nm to 100 nm.

以下「刺激応答性ポリマー層」および「親水性化合物層」の好適な実施形態について説明する。 Hereinafter, preferred embodiments of the “stimulus responsive polymer layer” and the “hydrophilic compound layer” will be described.

＜刺激応答性ポリマー層＞
機能性有機化合物層は、刺激応答性ポリマー層であることが特に好ましい。刺激応答性ポリマー層とは、所定の刺激によって表面の細胞の接着度合いが変化するポリマーを含む層である。刺激応答性ポリマーとしては、温度応答性ポリマー、ｐＨ応答性ポリマー、イオン応答性ポリマー、光応答性ポリマーなどを挙げることができる。なかでも温度応答性ポリマーが、刺激の付与が容易であることから好ましい。 <Stimulus responsive polymer layer>
The functional organic compound layer is particularly preferably a stimulus-responsive polymer layer. The stimulus-responsive polymer layer is a layer containing a polymer in which the degree of cell adhesion on the surface is changed by a predetermined stimulus. Examples of the stimulus responsive polymer include a temperature responsive polymer, a pH responsive polymer, an ion responsive polymer, and a photoresponsive polymer. Among these, a temperature-responsive polymer is preferable because it is easy to give a stimulus.

温度応答性ポリマーとして、例えば、細胞を培養する温度では細胞接着性を示し、作製した細胞シートの剥離する時の温度では細胞非接着性を示すものを用いるとよい。例えば、温度応答性ポリマーは、臨界溶解温度未満の温度では周囲の水に対する親和性が向上し、ポリマーが水を取り込んで膨潤して表面に細胞を接着しにくくする性質（細胞非接着性）を示し、同温度以上の温度ではポリマーから水が脱離することでポリマーが収縮して表面に細胞を接着しやすくする性質（細胞接着性）を示すものを用いるとよい。このような臨界溶解温度は、下限臨界溶解温度と呼ばれる。下限臨界溶解温度Ｔが０℃〜８０℃、さらに好ましくは０℃〜５０℃である温度応答性ポリマーを用いるとよい。Ｔが０℃〜８０℃であると、細胞を安定的に培養できるからである。 As the temperature-responsive polymer, for example, a polymer that exhibits cell adhesion at a temperature at which cells are cultured and exhibits cell non-adhesion at a temperature at which the produced cell sheet is peeled may be used. For example, a temperature-responsive polymer has improved affinity to surrounding water at temperatures below the critical dissolution temperature, and the polymer takes up water and swells to make it difficult for cells to adhere to the surface (cell non-adhesiveness). It is preferable to use a material exhibiting a property (cell adhesiveness) that makes the polymer shrink and easily adheres cells to the surface when water is desorbed from the polymer at a temperature equal to or higher than the same temperature. Such a critical solution temperature is called a lower critical solution temperature. A temperature-responsive polymer having a lower critical solution temperature T of 0 ° C. to 80 ° C., more preferably 0 ° C. to 50 ° C. may be used. This is because the cells can be stably cultured when T is 0 ° C to 80 ° C.

好適な温度応答性ポリマーとしては、アクリル系ポリマーまたはメタクリル系ポリマーが挙げられる。具体的に好適な温度応答性ポリマーとしては、例えばポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド(Ｔ＝３２℃)、ポリ−Ｎ−ｎ−プロピルアクリルアミド(Ｔ＝２１℃)、ポリ−Ｎ−ｎ−プロピルメタクリルアミド(Ｔ＝３２℃)、ポリ−Ｎ−エトキシエチルアクリルアミド(Ｔ＝約３５℃)、ポリ−Ｎ−テトラヒドロフルフリルアクリルアミド(Ｔ＝約２８℃)、ポリ−Ｎ−テトラヒドロフルフリルメタクリルアミド（Ｔ＝約３５℃）、およびポリ−Ｎ、Ｎ−ジエチルアクリルアミド(Ｔ＝３２℃)等が挙げられる。 Suitable temperature-responsive polymers include acrylic polymers or methacrylic polymers. Specific examples of suitable temperature-responsive polymers include poly-N-isopropylacrylamide (T = 32 ° C.), poly-Nn-propyl acrylamide (T = 21 ° C.), and poly-Nn-propyl methacrylamide. (T = 32 ° C.), poly-N-ethoxyethyl acrylamide (T = about 35 ° C.), poly-N-tetrahydrofurfuryl acrylamide (T = about 28 ° C.), poly-N-tetrahydrofurfuryl methacrylamide (T = About 35 ° C.), and poly-N, N-diethylacrylamide (T = 32 ° C.).

ｐＨ応答性ポリマーおよびイオン応答性ポリマーは作製しようとする細胞シートに適したものを適宜選択することができる。 As the pH responsive polymer and the ion responsive polymer, those suitable for the cell sheet to be prepared can be appropriately selected.

刺激応答性ポリマー層は、重合して目的の刺激応答性ポリマーを形成するモノマーと、該モノマーを溶解しうる有機溶媒と含む塗布用組成物を調製し、これを慣用の塗布方法に従って、フィルム基材の表面に塗布して塗膜を形成し、次に、該塗膜に放射線照射等の適当な手段により塗膜中のモノマーを重合してポリマーを形成するとともに、フィルム基材の表面とポリマーとの間にグラフト化反応を生じさせることにより形成することができる。 The stimulus-responsive polymer layer is prepared by preparing a coating composition containing a monomer that is polymerized to form a target stimulus-responsive polymer and an organic solvent that can dissolve the monomer. The film is coated on the surface of the material to form a coating film, and then the monomer in the coating film is polymerized by an appropriate means such as radiation irradiation to form a polymer. And a grafting reaction between them.

＜親水性化合物層＞
機能性有機化合物層の他の実施形態として、１つ以上のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖（複数のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖は、「ポリエチレングリコール鎖」ということができる）等の親水性化合物の層が挙げられる。 <Hydrophilic compound layer>
As another embodiment of the functional organic compound layer, hydrophilicity such as an ethylene glycol chain composed of one or more ethylene glycol units (an ethylene glycol chain composed of a plurality of ethylene glycol units can be referred to as a “polyethylene glycol chain”). A layer of a functional compound.

エチレングリコール鎖の末端は水酸基により封鎖された形態であってもよいし、エチレングリコール鎖の末端に生体関連物質等の他の物質が共有結合により連結された形態であってもよい。 The terminal of the ethylene glycol chain may be in a form blocked with a hydroxyl group, or the terminal of the ethylene glycol chain may be in a form in which another substance such as a biological substance is linked by a covalent bond.

末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層は、細胞が接着し難い親水性の表面を提供することができる。 A layer containing an ethylene glycol chain whose end is blocked with a hydroxyl group can provide a hydrophilic surface to which cells are difficult to adhere.

エチレングリコール鎖の末端に共有結合されうる生体関連物質としては、抗原、抗体、DNA、RNA、ペプチド、ホルモン、酵素、サイトカイン、糖鎖、脂質、補酵素、酵素阻害剤、細胞、その他の機能を有するタンパク質が含まれる。更に、このような生体関連物質と親和性を有する低分子化合物、および高分子化合物も生体関連物質の範囲に含まれる。 Bio-related substances that can be covalently bonded to the end of ethylene glycol chain include antigens, antibodies, DNA, RNA, peptides, hormones, enzymes, cytokines, sugar chains, lipids, coenzymes, enzyme inhibitors, cells, and other functions. The protein which has is included. Furthermore, the low molecular weight compound which has affinity with such a biological substance, and a high molecular compound are also contained in the range of a biological substance.

エチレングリコール鎖等の親水性化合物の層を、樹脂製のフィルム基材層の表面に固定化するためには、予め、フィルム基材層の表面に、物理的に吸着可能であって、エチレングリコール鎖の末端の水酸基と反応して共有結合を形成可能な官能基を側鎖に含むポリシロキサンを含むプライマー層を設ける。ポリシロキサンの側鎖上の官能基としては、グリシジル基またはエポキシ基が好ましい。プライマー層は、フィルム基材層の表面に、所望の側鎖を有するシラノール化合物を適用し、該表面上で縮合重合してポリシロキサンに変換することにより形成することができる。 In order to immobilize a hydrophilic compound layer such as an ethylene glycol chain on the surface of a resin film base layer, it can be physically adsorbed on the surface of the film base layer in advance. A primer layer containing a polysiloxane containing a functional group in a side chain that can form a covalent bond by reacting with a hydroxyl group at the end of the chain is provided. The functional group on the side chain of the polysiloxane is preferably a glycidyl group or an epoxy group. The primer layer can be formed by applying a silanol compound having a desired side chain to the surface of the film substrate layer, and performing condensation polymerization on the surface to convert it into polysiloxane.

次いで、プライマー層の官能基と、エチレングリコールまたはエチレングリコール単位が２以上繰り返されたポリエチレングリコールの水酸基とを反応させて共有結合を形成し、エチレングリコール鎖を固定化する。このとき、触媒量の濃硫酸を含むエチレングリコールまたはポリエチレングリコールをプライマー層に接触させる。
末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層はこのようにして形成される。 Next, the functional group of the primer layer and the hydroxyl group of polyethylene glycol in which two or more ethylene glycol or ethylene glycol units are repeated are reacted to form a covalent bond, thereby immobilizing the ethylene glycol chain. At this time, ethylene glycol or polyethylene glycol containing a catalytic amount of concentrated sulfuric acid is brought into contact with the primer layer.
A layer containing ethylene glycol chains whose ends are blocked with hydroxyl groups is formed in this way.

更に、必要に応じて、エチレングリコール鎖の一端に、他の物質との共有結合を形成することが可能な、少なくとも１つの官能基を直接的または間接的に連結させる。官能基の導入方法は特に限定されない。 Furthermore, if necessary, at least one functional group capable of forming a covalent bond with another substance is directly or indirectly linked to one end of the ethylene glycol chain. The method for introducing the functional group is not particularly limited.

＜粘着剤層１３＞
粘着剤層１３を構成する粘着剤としてはポリエステル樹脂、アクリル酸エステル樹脂、ポリウレタン樹脂、ポリエチレンイミン樹脂、シランカップリング剤、ペルフルオロオクタンスルホン酸（ＰＦＯＳ）等を挙げることができ、なかでもアクリル酸エステル樹脂、ポリウレタン樹脂等を好ましく用いることができる。 <Adhesive layer 13>
Examples of the pressure-sensitive adhesive constituting the pressure-sensitive adhesive layer 13 include polyester resin, acrylic ester resin, polyurethane resin, polyethyleneimine resin, silane coupling agent, and perfluorooctane sulfonic acid (PFOS). Among them, acrylic ester Resins, polyurethane resins and the like can be preferably used.

粘着剤層の厚さは特に限定されないが、１０μｍ〜３００μｍであることが好ましく、２０μｍ〜２００μｍであることがより好ましい。 Although the thickness of an adhesive layer is not specifically limited, It is preferable that they are 10 micrometers-300 micrometers, and it is more preferable that they are 20 micrometers-200 micrometers.

図１に示す層構造の機能性フィルム１０は、任意の方法で作ることができるが、本実施の形態では、次のようにして作られる。すなわち、帯状をなす剥離フィルム１４の全面に前記粘着剤層１３を塗布し、その上に、同じ幅であるやはり帯状のフィルム基材層１１と機能性フィルム１０を積層する。それにより、図に示すように、剥離フィルム１４と粘着剤層１３とフィルム基材層１１と機能性フィルム１０の層の４層構造からなる、長尺物２０（図２参照）が形成される。なお、剥離フィルム１４には、必要な強度や柔軟性を有する限り特に限定されないが、例えば、ポリエチレンテレフタレート等の樹脂からなるフィルムまたはそれらの発泡フィルムに、シリコーン系剥離剤等の剥離剤で剥離処理したものを挙げることができる。 The functional film 10 having the layer structure shown in FIG. 1 can be produced by an arbitrary method. In the present embodiment, the functional film 10 is produced as follows. That is, the pressure-sensitive adhesive layer 13 is applied to the entire surface of the strip-shaped release film 14, and the strip-shaped film base material layer 11 and the functional film 10 having the same width are laminated thereon. Thereby, as shown in the figure, a long object 20 (see FIG. 2) is formed, which is composed of a four-layer structure of the release film 14, the pressure-sensitive adhesive layer 13, the film base material layer 11, and the functional film 10. . The release film 14 is not particularly limited as long as it has the required strength and flexibility. For example, a release treatment such as a silicone release agent is applied to a film made of a resin such as polyethylene terephthalate or a foamed film thereof. Can be mentioned.

長尺物２０の前記剥離フィルム１４とは反対の面から、得ようとする機能性フィルム１０の外郭形状を持つ型枠（不図示）を、剥離フィルム１４の表面にまで達するように押下する。それにより、機能性フィルム１０とフィルム基材層１１と粘着剤層１３には、機能性フィルム１０の外郭形状をなす切り込み線２１が形成される。その型押し作業を所定の間隔をおいて連続的に長尺物２０に対して行うことにより、図２に示すような、複数個の切り込み線２１の入った長尺物２０が得られる。前記長尺物２０は、機能性フィルム１０側が内側となるようにしてロール状に巻き込まれて原反２２（図３参照）とされ、保管される。 A form (not shown) having an outer shape of the functional film 10 to be obtained is pushed down from the surface opposite to the release film 14 of the long object 20 so as to reach the surface of the release film 14. Thereby, in the functional film 10, the film base material layer 11, and the pressure-sensitive adhesive layer 13, a cut line 21 that forms an outer shape of the functional film 10 is formed. By performing the stamping operation on the long object 20 continuously at a predetermined interval, a long object 20 having a plurality of cut lines 21 as shown in FIG. 2 is obtained. The long object 20 is wound into a roll so that the functional film 10 side is on the inside, and is made into a raw fabric 22 (see FIG. 3) and stored.

なお、機能性フィルム１０の平面視での形状に制限はなく任意の形状を取ることができ、それに応じた型枠が用いられる。図２に示した例では、後に説明する図４に示すような先狭まり状とされた細胞培養容器（フラスコ型細胞培養容器）５０Ａの底面５１Ａに配置することを予定する機能性フィルム１０を得ようとするものであり、切り込み線２１は、細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａの内周輪郭の形状とほぼ同じ形状とされている。 In addition, there is no restriction | limiting in the shape in planar view of the functional film 10, It can take arbitrary shapes, and the formwork according to it can be used. In the example shown in FIG. 2, the functional film 10 which is scheduled to be placed on the bottom surface 51A of a cell culture vessel (flask type cell culture vessel) 50A having a tapered shape as shown in FIG. 4 to be described later is obtained. The cut line 21 has a shape substantially the same as the shape of the inner peripheral contour of the bottom surface 51A of the cell culture vessel 50A.

図３は、前記原反２２から機能性フィルム１０を分離し、分離後の機能性フィルム１０を細胞培養容器５０の底面５１に移し替える装置の一例を示している。図示の移し替え装置３０は、従来知られた３次元ロボットアーム（不図示）に取り付けられたエアーシリンダ３１を備え、該エアーシリンダ３１の下方先端に、図６、図８、図９に例を示すような本発明による負圧吸着ヘッド４０が着脱可能に装着されている。エアーシリンダ３１は、３次元ロボットアームの制御装置（不図示）により、面方向であるＸ−Ｙ軸方向および垂直方向であるＺ軸方向に移動可能とされている。 FIG. 3 shows an example of an apparatus for separating the functional film 10 from the original fabric 22 and transferring the separated functional film 10 to the bottom surface 51 of the cell culture vessel 50. The transfer device 30 shown in the figure includes an air cylinder 31 attached to a conventionally known three-dimensional robot arm (not shown), and an example is shown in FIGS. 6, 8, and 9 at the lower end of the air cylinder 31. A negative pressure suction head 40 according to the present invention as shown is detachably mounted. The air cylinder 31 can be moved in the XY axis direction which is a surface direction and the Z axis direction which is a vertical direction by a control device (not shown) of a three-dimensional robot arm.

エアーシリンダ３１の近傍には、水平方向またはわずかに下方に傾斜した方向に延在する案内台３２が位置しており、前記原反２２から巻き出される長尺物２０は、ガイドロール３３・・によって案内されることで、前記案内台３２の上面に沿って移動し、先端でＵターンした後、巻き取りロール３４によって巻き取られる。長尺物２０が案内台３２の先端でＵターンするときに、前記切り込み線２１によって区画された内側の領域は剥離フィルム１４から剥離し、案内台３２の上面の延長線方向に送り出される。すなわち、機能性フィルム１０とフィルム基材層１１と粘着剤層１３の３層構造からなる機能性フィルム１０が、粘着剤層１３側を下面側とした姿勢で連続的に剥離フィルム１４から剥離し、水平方向またはわずかに下方に傾斜した方向に送り出される。 In the vicinity of the air cylinder 31, a guide base 32 extending in the horizontal direction or in a slightly inclined direction is located, and the long object 20 unwound from the raw fabric 22 is provided with a guide roll 33. Is moved along the upper surface of the guide table 32, made a U-turn at the tip, and then taken up by the take-up roll 34. When the long object 20 makes a U-turn at the tip of the guide base 32, the inner region defined by the cut line 21 is peeled off from the release film 14 and sent out in the direction of the extended line on the upper surface of the guide base 32. That is, the functional film 10 having a three-layer structure of the functional film 10, the film base layer 11, and the pressure-sensitive adhesive layer 13 is continuously peeled from the release film 14 with the pressure-sensitive adhesive layer 13 side as the lower surface side. , Sent out in a horizontal direction or a slightly inclined downward direction.

移し替え装置３０は、さらに、細胞培養容器５０を水平姿勢に載置した状態で間欠的に移動と停止を繰り返すことのできる搬送コンベア３５を備えている。また、好ましくは、前記案内台３２の先端近傍であって送り出される機能性フィルム１０の下方位置には、機能性フィルム１０の横幅にほぼ等しい横幅を持つエアノズル３７が空気噴出方向を斜め上方に向けた姿勢で取り付けられる。エアノズル３７からの空気噴出を下方から受けることにより、剥離フィルム１４から剥離して送り出される機能性フィルム１０は、その後もほぼ水平な姿勢を維持することができる。 The transfer device 30 further includes a transport conveyor 35 that can intermittently move and stop while the cell culture vessel 50 is placed in a horizontal posture. Preferably, an air nozzle 37 having a lateral width substantially equal to the lateral width of the functional film 10 is directed obliquely upward in the vicinity of the front end of the guide table 32 and below the functional film 10 to be delivered. It can be installed in a different posture. By receiving the air jet from the air nozzle 37 from below, the functional film 10 peeled from the release film 14 and sent out can maintain a substantially horizontal posture thereafter.

前記負圧吸着ヘッド４０について説明する。図６、図８、図９は、３つの形態の負圧吸着ヘッド４０ａ、４０ｂ、４０ｃの断面図（各図の（ａ））と下方から見た平面図（各図の（ｂ））である。限定されないが、図示の形態の負圧吸着ヘッド４０ａ、４０ｂ、４０ｃは、図４に示したフラスコ型の容器５０Ａを製造するのに好適に用いられるものなので、まず、フラスコ型の容器５０Ａについて説明する。 The negative pressure suction head 40 will be described. 6, 8, and 9 are cross-sectional views (a) of the three forms of negative pressure suction heads 40 a, 40 b, and 40 c and a plan view (b) of each view from below. is there. Although not limited, the negative pressure adsorption heads 40a, 40b, and 40c in the illustrated form are preferably used for manufacturing the flask-type container 50A shown in FIG. To do.

フラスコ型細胞培養容器５０Ａは、図４（ａ）に記すように、容器部１００と蓋１１０を備える。容器部１００は、底面５１Ａと、底面５１Ａの周縁に立設された側壁部１０２と、側壁部１０２の上端部に接合された、底面５１Ａに対向配置される天面部１０３とを少なくとも備える。底面５１Ａは矩形状の平板の一方端側が狭くなった形状であり、該狭くされた先端に対応する前記側壁部１０２の部分には通孔１０４が穿設されている。そして、通孔１０４の周縁から容器部外側に延びる首部１０５を備え、そこに蓋１１０が着脱可能に装着される。容器部１００と蓋１１０とを組み合わせることによりフラスコ型の細胞培養容器５０Ａが形成される。 As shown in FIG. 4A, the flask-type cell culture container 50A includes a container part 100 and a lid 110. The container unit 100 includes at least a bottom surface 51A, a side wall portion 102 erected on the periphery of the bottom surface 51A, and a top surface portion 103 that is joined to the upper end portion of the side wall portion 102 and is opposed to the bottom surface 51A. The bottom surface 51A has a shape in which one end side of a rectangular flat plate is narrowed, and a through hole 104 is formed in the side wall portion 102 corresponding to the narrowed tip. And the neck part 105 extended to the container part outer side from the periphery of the through-hole 104 is provided, and the lid | cover 110 is mounted | worn detachably there. By combining the container part 100 and the lid 110, a flask-type cell culture container 50A is formed.

図４（ｂ）は、図４（ａ）のｂ−ｂ線に沿う断面を示し、図４（ｃ）はｃ−ｃ線に沿う断面を示す。容器部１００の、底面５１Ａ、側壁部１０２および天面部１０３に包囲される内部空間には、細胞および培地を収容するための内室１３０が形成されている。内室１３０に面する底面５１Ａの一部分には、前記した機能性フィルム１０が固定される。 4B shows a cross section taken along the line bb in FIG. 4A, and FIG. 4C shows a cross section taken along the line cc. In the internal space surrounded by the bottom surface 51 </ b> A, the side wall portion 102, and the top surface portion 103 of the container portion 100, an inner chamber 130 for containing cells and a culture medium is formed. The functional film 10 described above is fixed to a part of the bottom surface 51 </ b> A facing the inner chamber 130.

図示のフラスコ型細胞培養容器５０Ａのように、機能性フィルム１０が固定される面が開放されておらず閉鎖された容器内に位置している場合には、図５に示すように、機能性フィルム１０を固定することが可能な形状の部材（底面５１Ａと側壁部１０２とからなる部材２０１）に機能性フィルム１０を固定し、フィルム固定後の前記部材を他の部材（天面部１０３）を固定することで、目的とする細胞培養容器とすることができる。 When the surface on which the functional film 10 is fixed is not opened but is located in a closed container like the illustrated flask-type cell culture container 50A, as shown in FIG. The functional film 10 is fixed to a member having a shape capable of fixing the film 10 (the member 201 including the bottom surface 51A and the side wall portion 102), and the member after fixing the film is replaced with another member (the top surface portion 103). By fixing, it can be set as the target cell culture container.

図６に示す負圧吸着ヘッド４０ａは、円筒形のエアーシリンダ３１の下端部にねじ係合される円筒状部分４１と、該円筒状部分４１の下端側に一体成形された山形をなす吸着面部４２とからなる。該山形をなす吸着面部４２は、図６（ｂ）のａ−ａ線に沿う断面図である図６（ａ）に示すように、円柱体をその直径位置を稜線部として等しい角度で左右に切り落として形成される形状であり、互いに逆方向に傾斜する、平面状である右下がり傾斜面４２ａと、やはり平面状である左下がり傾斜面４２ｂとで構成される。２つの傾斜面４２ａ、４２ｂの接合部４３は水平方向の直線状であり、面取り加工をすることでラウンド形状とされている。 A negative pressure suction head 40a shown in FIG. 6 includes a cylindrical portion 41 that is screw-engaged with a lower end portion of a cylindrical air cylinder 31, and a suction surface portion that forms a mountain shape integrally formed with the lower end side of the cylindrical portion 41. 42. As shown in FIG. 6 (a), which is a cross-sectional view taken along the line aa in FIG. 6 (b), the suction surface portion 42 forming the chevron shape is left and right at equal angles with the diameter position of the cylindrical body as a ridge line portion. It is a shape formed by cutting off, and is composed of a planar right-falling inclined surface 42a that is inclined in the opposite direction to each other, and a left-declining inclined surface 42b that is also planar. The joint 43 of the two inclined surfaces 42a and 42b is a straight line in the horizontal direction, and is rounded by chamfering.

図６（ｂ）に示すように、２つの傾斜面４２ａ、４２ｂには、図２に示した機能性フィルム１０の形状に一致する領域に、多数の負圧吸着孔４４が形成されている。より詳細には、２つの傾斜面４２ａ、４２ｂを平面に展開した状態で、前記接合部４３に前記機能性フィルム１０の短手方向の横幅の中心線Ｌａ（図２参照）が位置するようにして機能性フィルム１０を配置したときに、当該機能性フィルム１０で覆われる領域Ｓ内に多数の負圧吸着孔４４が形成されている。図示の例では、前記接合部４３の領域にも多数の負圧吸着孔４４が形成されている。負圧吸着ヘッド４０ａは、前記山形をなす吸着面部４２の裏面側に空気室４５を形成しており、該空気室４５は前記エアーシリンダ３１の空気路３６と接続している。そして、前記空気路３６は適宜の図示しない空気吸引手段に接続している。 As shown in FIG. 6B, a large number of negative pressure adsorbing holes 44 are formed in the two inclined surfaces 42a and 42b in a region corresponding to the shape of the functional film 10 shown in FIG. More specifically, the center line La (see FIG. 2) of the lateral width of the functional film 10 in the short direction of the functional film 10 is positioned at the joint 43 in a state where the two inclined surfaces 42a and 42b are developed in a plane. When the functional film 10 is disposed, a number of negative pressure adsorption holes 44 are formed in the region S covered with the functional film 10. In the illustrated example, a large number of negative pressure adsorption holes 44 are also formed in the region of the joint portion 43. The negative pressure suction head 40 a has an air chamber 45 formed on the back side of the chevron suction surface portion 42, and the air chamber 45 is connected to the air passage 36 of the air cylinder 31. The air passage 36 is connected to appropriate air suction means (not shown).

ロボットアームの制御装置は、送り出されてくる機能性フィルム１０を負圧吸着ヘッド４０ａによって負圧吸着することのできる位置に、前記エアーシリンダ３１を位置させる。その際に、制御装置は、機能性フィルム１０の送り出し方向と負圧吸着ヘッド４０ａの前記２つの傾斜面４２ａ、４２ｂの接合部４３の延出方向が一致し、かつ前記した機能性フィルム１０の短手方向の横幅の中心線Ｌａの位置が前記接合部４３の位置に一致する位置に、エアーシリンダ３１を位置させる。 The robot arm control device positions the air cylinder 31 at a position where the negative pressure suction head 40a can suck the functional film 10 being sent out. At that time, the control device matches the feeding direction of the functional film 10 with the extending direction of the joint portion 43 of the two inclined surfaces 42a and 42b of the negative pressure suction head 40a, and the functional film 10 The air cylinder 31 is positioned at a position where the position of the lateral center line La in the short direction coincides with the position of the joint portion 43.

送り出されてくる機能性フィルム１０が負圧吸着ヘッド４０ａの直下に達したときに、吸引手段によって空気室４５内の空気を吸引する。それにより、山形をなす吸着面部４２における前記負圧吸着孔４４が形成された領域には負圧が発生し、その領域に機能性フィルム１０は負圧吸引される。 When the delivered functional film 10 reaches just below the negative pressure adsorption head 40a, the air in the air chamber 45 is sucked by the suction means. As a result, a negative pressure is generated in a region where the negative pressure suction hole 44 is formed in the suction surface portion 42 having a mountain shape, and the functional film 10 is sucked into the negative pressure in the region.

その状態で制御装置はロボットアームを操作して、エアーシリンダ３１を前記搬送コンベア３５で搬送されてくる細胞培養容器５０の直上位置に移動させ、負圧吸着ヘッド４０ａに吸着されている機能性フィルム１０の向きを細胞胞培養容器５０の向きに一致させる。移動後、細胞培養容器５０の底面５１と、山形をなす吸着面部４２に負圧吸着された機能性フィルム１０の最下端部との距離、すなわち前記２つの傾斜面４２ａ、４２ｂの接合部４３に対応する部分での機能性フィルム１０の距離が０．１ｍｍ〜１０ｍｍ程度となるまでエアーシリンダ３１を下降させ、下降位置で、負圧を開放する。場合によっては、排気手段を操作して空気室４５内に所定圧の空気を送り込む。上記距離に設定することで、機能性フィルムの配置の位置精度を維持することができる。この空気は吸着面部４２に形成した各負圧吸着孔４４から吐出（排気）され、自重に加えて空気の吐出圧によって、機能性フィルム１０は細胞培養容器５０の底面５１に向けて落下する。これにより、機能性フィルム１０の機能性化合物層１２を機械的に押圧することなく、機能性フィルム１０を細胞培養容器５０の底面５１に配置することができる。 In this state, the control device operates the robot arm to move the air cylinder 31 to a position directly above the cell culture vessel 50 conveyed by the conveyance conveyor 35, and the functional film adsorbed by the negative pressure adsorption head 40a. The direction of 10 is matched with the direction of the cell vesicle culture vessel 50. After the movement, the distance between the bottom surface 51 of the cell culture vessel 50 and the lowermost end portion of the functional film 10 adsorbed by the negative pressure on the adsorption surface portion 42 having a mountain shape, that is, at the joint portion 43 of the two inclined surfaces 42a and 42b. The air cylinder 31 is lowered until the distance of the functional film 10 at the corresponding portion is about 0.1 mm to 10 mm, and the negative pressure is released at the lowered position. In some cases, air of a predetermined pressure is sent into the air chamber 45 by operating the exhaust means. By setting the distance, the positional accuracy of the functional film can be maintained. This air is discharged (exhaust) from each negative pressure adsorption hole 44 formed in the adsorption surface portion 42, and the functional film 10 falls toward the bottom surface 51 of the cell culture container 50 by the discharge pressure of air in addition to its own weight. Thereby, the functional film 10 can be arrange | positioned on the bottom face 51 of the cell culture container 50, without pressing the functional compound layer 12 of the functional film 10 mechanically.

そのときの落下の状態が図５および図７に示される。なお、図５において、１０ａで示される領域は、機能性フィルム１０が負圧吸着ヘッド４０ａの山形をなす吸着面部４２に吸着されていたときに、当該機能性フィルム１０が前記２つの傾斜面４２ａ、４２ｂの接合部４３に当接していた領域である。また、図７は図５のｘ−ｘ線に沿う方向の断面図である。機能性フィルム１０は、負圧吸着ヘッド４０ａの山形をなす吸着面部４２に負圧吸着した状態から負圧が解放されて落下するので、図７（ａ）に示すように、落下するときの機能性フィルム１０の姿勢は、短手方向の幅方向中央部１０ａが最も下位に位置する下に凸の湾曲した姿勢となっている。その姿勢を維持した状態でさらに落下していき、図７（ｂ）に示すように、機能性フィルム１０の最も下位に位置する中央部１０ａが最初に細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに接触する。その後、左右の領域が中央部１０ａから側縁領域に向かうようにして、順次、細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに接触していく。そのために、細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａと機能性フィルム１０の裏面の間に存在している空気は、機能性フィルム１０の前記挙動にしたがって順次外側に排気されていくこととなり、結果として、間に空気溜まりが生じるのを回避できる。図７（ｃ）は機能性フィルム１０の裏面、すなわち粘着剤層１３側の全面が細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに接触した状態を示しており、気泡が存在しない状態で、機能性フィルム１０は粘着剤層１３を介して細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに固定される。 The state of the drop at that time is shown in FIGS. In FIG. 5, an area indicated by 10 a indicates that when the functional film 10 is adsorbed by the adsorption surface portion 42 that forms the mountain shape of the negative pressure adsorption head 40 a, the functional film 10 is separated from the two inclined surfaces 42 a. , 42b is a region in contact with the joint 43. FIG. 7 is a cross-sectional view taken along the line xx of FIG. Since the negative pressure is released from the state where the negative pressure is adsorbed on the suction surface portion 42 that forms the mountain shape of the negative pressure suction head 40a and the functional film 10 falls, as shown in FIG. The posture of the conductive film 10 is a downwardly convex posture in which the widthwise central portion 10a in the short side direction is positioned at the lowest position. Further falling with the posture maintained, as shown in FIG. 7 (b), the lowermost central portion 10a of the functional film 10 first contacts the bottom surface 51A of the cell culture vessel 50A. Thereafter, the left and right regions are sequentially brought into contact with the bottom surface 51A of the cell culture vessel 50A so that the left and right regions are directed from the central portion 10a toward the side edge region. Therefore, the air existing between the bottom surface 51A of the cell culture vessel 50A and the back surface of the functional film 10 is sequentially exhausted to the outside according to the behavior of the functional film 10, and as a result, It is possible to avoid the accumulation of air. FIG.7 (c) has shown the state which the back surface of the functional film 10, ie, the whole surface by the side of the adhesive layer 13, contacted the bottom face 51A of the cell culture container 50A, and the functional film 10 is in the state where there is no bubble. It is fixed to the bottom surface 51A of the cell culture vessel 50A through the adhesive layer 13.

図示しないが、前記傾斜面４２ａ、４２ｂの双方またはいずれか一方を平面ではなく湾曲面としてもよい。そして、２つの傾斜面４２ａ、４２ｂが連続した１つの湾曲面を形成するようにしてもよい。さらに、前記接合部４３は、上記した例のように山形をなす吸着面部４２の幅方向の中央部に位置していなくてもよく、左右のいずれから偏位していてもよい。後者の場合、２つの傾斜面４２ａ、４２ｂの傾斜角度が等しい場合には、各傾斜面の横幅は異なってくるが、傾斜角度を調整することで同じ横幅とすることもできる。前者の場合であっても、２つの傾斜面４２ａ、４２ｂの傾斜角度が異なるように成形してもよい。 Although not shown, both or one of the inclined surfaces 42a and 42b may be a curved surface instead of a flat surface. And you may make it form one curved surface which two inclined surfaces 42a and 42b followed. Furthermore, the said joint part 43 does not need to be located in the center part of the width direction of the adsorption | suction surface part 42 which makes a mountain shape like the above-mentioned example, and may deviate from either right and left. In the latter case, when the inclination angles of the two inclined surfaces 42a and 42b are equal, the horizontal widths of the inclined surfaces differ, but the same horizontal width can be obtained by adjusting the inclination angle. Even in the former case, the two inclined surfaces 42a and 42b may be formed so as to have different inclination angles.

図８は、負圧吸着ヘッドの他の形態を示している。この負圧吸着ヘッド４０ｂは、山形をなす吸着面部４２に形成される前記した機能性フィルム１０で覆われる領域Ｓの向きが異なっている点で、図６に示した負圧吸着ヘッド４０ａと相違している。すなわち、負圧吸着ヘッド４０ｂでは、前記接合部４３の位置に、機能性フィルム１０の長手方向の横幅のほぼ中心線Ｌｂ（図２参照）の位置が来るようにして、多数の負圧吸着孔４４が傾斜面４２ａ、４２ｂに形成されている。この負圧吸着ヘッド４０ｂを用いる場合には、機能性フィルム１０は、負圧吸着ヘッド４０ａの場合と９０度回転した姿勢で、前記領域Ｓの面に吸着される。上記の点を除き、他の構成部材およびその奏する作用効果は負圧吸着ヘッド４０ａと同じであるので、同じ符号を付して説明は省略する。 FIG. 8 shows another form of the negative pressure suction head. This negative pressure suction head 40b is different from the negative pressure suction head 40a shown in FIG. 6 in that the direction of the region S covered with the functional film 10 formed on the suction surface portion 42 having a mountain shape is different. doing. That is, in the negative pressure adsorbing head 40b, a large number of negative pressure adsorbing holes are arranged such that the position of the bonding portion 43 is substantially the center line Lb (see FIG. 2) of the lateral width in the longitudinal direction of the functional film 10. 44 is formed on the inclined surfaces 42a and 42b. When the negative pressure suction head 40b is used, the functional film 10 is sucked onto the surface of the region S in a posture rotated by 90 degrees as compared with the case of the negative pressure suction head 40a. Except for the above points, the other constituent members and the operational effects thereof are the same as those of the negative pressure suction head 40a.

図９は、負圧吸着ヘッドの他の形態を示している。この負圧吸着ヘッド４０ｃは、吸着面部４２が、山形ではなく、１つの平坦な斜面で形成されている点で、負圧吸着ヘッド４０ａ、４０ｂと相違している。すなわち、負圧吸着ヘッド４０ｃの吸着面４２は、円柱体をその中心軸線に傾斜する平面で切断したときの切断面の形状であり、該切断面内に所要の領域に多数の負圧吸着孔４４が形成されることで、前記機能性フィルム１０で覆われる領域Ｓが形成されている。図示の例では、吸着面部４２である１つの平坦な斜面における上方の領域に、機能性フィルム１０の先狭まり状とされた領域が吸着され、下方側の領域に矩形状の領域が吸着されるように、前記多数の負圧吸着孔４４が形成されている。上記の点を除き、他の構成部材およびその奏する作用効果は負圧吸着ヘッド４０ａと同じであるので、同じ符号を付して説明は省略する。 FIG. 9 shows another form of the negative pressure suction head. The negative pressure suction head 40c is different from the negative pressure suction heads 40a and 40b in that the suction surface portion 42 is formed not by a mountain shape but by one flat slope. That is, the suction surface 42 of the negative pressure suction head 40c has a shape of a cut surface when the cylindrical body is cut along a plane inclined with respect to its central axis, and a number of negative pressure suction holes are formed in a required region in the cut surface. By forming 44, the region S covered with the functional film 10 is formed. In the illustrated example, the tapered area of the functional film 10 is adsorbed to the upper area of one flat slope that is the adsorption surface portion 42, and the rectangular area is adsorbed to the lower area. As described above, a large number of the negative pressure adsorption holes 44 are formed. Except for the above points, the other constituent members and the operational effects thereof are the same as those of the negative pressure suction head 40a.

負圧吸着ヘッド４０ｃによって負圧吸着された機能性フィルム１０が細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに落下するときの状態が図１０に示される。図に示されるように、機能性フィルム１０の一方の端部側が最初に細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに接触し、その後、残りの領域が、順次、細胞培養容器５０Ａの底面５１Ａに接触していくようになる。 FIG. 10 shows a state where the functional film 10 that has been negatively adsorbed by the negative pressure adsorbing head 40c falls onto the bottom surface 51A of the cell culture vessel 50A. As shown in the figure, one end side of the functional film 10 first comes into contact with the bottom surface 51A of the cell culture container 50A, and then the remaining regions sequentially contact the bottom surface 51A of the cell culture container 50A. Will come.

なお、前記したように、負圧吸着ヘッド４０における吸着面部４２の形状は、上記した形状に限らず、機能性フィルム１０を移送する細胞培養容器５０の底面５１の形状に依存して定められる。また、多数の負圧吸着孔４４で形成される前記機能性フィルム１０で覆われる領域Ｓの形状も、上記した形状に限らず、吸着する機能性フィルム１０の形状に合わせ、適宜設定される。また、図示のものでは、負圧吸着ヘッドの吸着面部４２を円筒体をベースとしてその端面に形成するようにしたが、前記機能性フィルム１０で覆われる領域Ｓの形状がそのまま吸着面部４２であってもよい。 As described above, the shape of the suction surface portion 42 in the negative pressure suction head 40 is not limited to the shape described above, but is determined depending on the shape of the bottom surface 51 of the cell culture container 50 that transfers the functional film 10. Further, the shape of the region S covered with the functional film 10 formed by the large number of negative pressure adsorption holes 44 is not limited to the above-described shape, and is appropriately set according to the shape of the functional film 10 to be adsorbed. In the illustrated example, the suction surface portion 42 of the negative pressure suction head is formed on the end surface of the cylindrical body as a base. However, the shape of the region S covered with the functional film 10 is the suction surface portion 42 as it is. May be.

また、フラスコ型細胞培養容器５０Ａは、図１１に示すようにして製造することもできる。すなわち、底面５１Ａに対応する第１部材３０１と、首部１０５を備えた側壁部１０２に対応する第２部材３０２と、天面部１０３に対応する第３部材３０３とを接合することにより容器部１００を形成する。この態様では、前記第１部材３０１の、底面５１Ａの内側面に対応する部分に、前記した手法により機能性フィルム１０が固定される。 Further, the flask-type cell culture vessel 50A can be manufactured as shown in FIG. That is, the container part 100 is joined by joining the first member 301 corresponding to the bottom face 51 </ b> A, the second member 302 corresponding to the side wall part 102 including the neck part 105, and the third member 303 corresponding to the top face part 103. Form. In this aspect, the functional film 10 is fixed to the portion of the first member 301 corresponding to the inner surface of the bottom surface 51A by the method described above.

本発明において、各細胞培養容器を構成する材料は特に限定されず、細胞培養において一般的に用いられる材料を用いることができる。例えば、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリエチレンテレフタレート樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂等の樹脂材料、表面親水化処理を施した上記の少なくとも１種を含む樹脂材料、およびガラスや石英等の無機材料であることができるが、好ましくは樹脂材料である。樹脂材料としては、ポリスチレン樹脂又はポリエチレンテレフタレート樹脂であることが好ましい。 In the present invention, the material constituting each cell culture vessel is not particularly limited, and materials generally used in cell culture can be used. For example, polystyrene resin, polyester resin, polyethylene resin, polyethylene terephthalate resin, polypropylene resin, ABS resin, nylon, acrylic resin, fluorine resin, polycarbonate resin, polyurethane resin, methylpentene resin, phenol resin, melamine resin, epoxy resin, vinyl chloride A resin material such as a resin, a resin material containing at least one of the above-described surface hydrophilized treatment, and an inorganic material such as glass or quartz are preferable, but a resin material is preferable. The resin material is preferably a polystyrene resin or a polyethylene terephthalate resin.

１０…機能性フィルム、
１１…フィルム基材層、
１２…機能性化合物層、
１３…粘着剤層、
１４…帯状をなす剥離フィルム、
２０…４層構造からなる長尺物、
２１…機能性フィルムの外郭形状をなす切り込み線、
２２…ロール状の原反、
３０…移し替え装置、
３１…エアーシリンダ、
３２…案内台、
３３…ガイドロール、
３４…巻き取りロール、
３５…細胞培養容器の搬送コンベア、
３６…空気路、
４０（４０ａ、４０ｂ、４０ｃ）…負圧吸着ヘッド、
４１…円筒状部分、
４２…吸着面部、
４２ａ…右下がり傾斜面、
４２ｂ…左下がり傾斜面、
４３…２つの傾斜面の接合部、
４４…負圧吸着孔、
４５…空気室、
５０、５０Ａ…細胞培養容器、
５１、５１Ａ…細胞培養容器の底面、
Ｌａ…機能性フィルムの短手方向の横幅の中心線、
Ｌｂ…機能性フィルムの長手方向の横幅の中心線、
Ｓ…機能性フィルムで覆われる領域。 10 ... functional film,
11 ... film base material layer,
12 ... Functional compound layer,
13 ... adhesive layer,
14 ... stripping release film,
20 ... long object composed of four layers,
21 ... a score line forming the outer shape of the functional film,
22 ... roll-shaped original fabric,
30 ... Transfer device,
31 ... Air cylinder,
32 ... Information desk,
33 ... Guide roll,
34 ... take-up roll,
35 ... Conveyor for cell culture container,
36 ... Airway,
40 (40a, 40b, 40c) ... negative pressure adsorption head,
41 ... cylindrical part,
42 ... adsorption surface part,
42a ... a downwardly inclined surface,
42b ... a sloping surface that is inclined to the left,
43 ... Joint of two inclined surfaces,
44 ... negative pressure adsorption hole,
45 ... Air chamber,
50, 50A ... cell culture vessel,
51, 51A ... bottom of cell culture vessel,
La: The center line of the lateral width of the functional film in the short direction,
Lb: center line of the width in the longitudinal direction of the functional film,
S: Area covered with functional film.

Claims

機能性フィルムを複数の負圧吸着孔を備えた吸着面に負圧吸着して細胞培養容器へ移送した後、負圧を開放して機能性フィルムを細胞培養容器へ落下させるのに用いる負圧吸着ヘッドであって、
前記吸着面は中心軸線を備えた筒体の下端部に位置し、かつ、前記吸着面は前記筒体の中心軸線に対して傾斜した傾斜面を有することを特徴とする負圧吸着ヘッド。 Negative pressure used to release the negative pressure to drop the functional film onto the cell culture container after negative pressure adsorption to the adsorption surface with multiple negative pressure adsorption holes and transfer to the cell culture container A suction head,
2. The negative pressure suction head according to claim 1 , wherein the suction surface is located at a lower end portion of a cylindrical body having a central axis, and the suction surface has an inclined surface inclined with respect to the central axis of the cylindrical body .

前記吸着面は１つの前記傾斜面で形成されていることを特徴とする請求項１に記載の負圧吸着ヘッド。 The negative pressure suction head according to claim 1, wherein the suction surface is formed by one inclined surface.

前記吸着面は傾斜方向が逆方向である対向する２つの前記傾斜面で形成されていることを特徴とする請求項１に記載の負圧吸着ヘッド。 The negative pressure adsorption head according to claim 1, wherein the adsorption surface is formed by two opposed inclined surfaces whose inclination directions are opposite directions.

前記傾斜面は全部または一部が断面弧状とされていることを特徴とする請求項１ないし３のいずれか一項に記載の負圧吸着ヘッド。 4. The negative pressure suction head according to claim 1, wherein all or part of the inclined surface has an arcuate cross section. 5.

請求項１ないし４のいずれか一項に記載の負圧吸着ヘッドを用いて機能性フィルムを吸着し、該機能性フィルムを細胞培養容器上へ移送した後、負圧を開放して前記機能性フィルムを前記細胞培養容器へ落下させ、前記機能性フィルムを前記細胞培養容器に配置することを特徴とする細胞培養容器の製造方法。 A functional film is adsorbed by using the negative pressure adsorption head according to any one of claims 1 to 4, and the functional film is transferred onto a cell culture container, and then the negative pressure is released to release the functional film. A method for producing a cell culture container, comprising dropping a film into the cell culture container and placing the functional film in the cell culture container.