JP5845210B2 - 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 - Google Patents
組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5845210B2 JP5845210B2 JP2013124755A JP2013124755A JP5845210B2 JP 5845210 B2 JP5845210 B2 JP 5845210B2 JP 2013124755 A JP2013124755 A JP 2013124755A JP 2013124755 A JP2013124755 A JP 2013124755A JP 5845210 B2 JP5845210 B2 JP 5845210B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gene
- amino acid
- xylose
- seq
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/90—Isomerases (5.)
- C12N9/92—Glucose isomerase (5.3.1.5; 5.3.1.9; 5.3.1.18)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
- C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
- C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
- C12P7/08—Ethanol, i.e. non-beverage produced as by-product or from waste or cellulosic material substrate
- C12P7/10—Ethanol, i.e. non-beverage produced as by-product or from waste or cellulosic material substrate substrate containing cellulosic material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P2203/00—Fermentation products obtained from optionally pretreated or hydrolyzed cellulosic or lignocellulosic material as the carbon source
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
- C12Y101/01—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
- C12Y101/01086—Ketol-acid reductoisomerase (1.1.1.86)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y503/00—Intramolecular oxidoreductases (5.3)
- C12Y503/01—Intramolecular oxidoreductases (5.3) interconverting aldoses and ketoses (5.3.1)
- C12Y503/01005—Xylose isomerase (5.3.1.5)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
(2) 内在するアセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼの活性を低下させたことを特徴とする(1)記載の組換え酵母。
(3) アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする、内在遺伝子の発現量を低下させたことを特徴とする(1)記載の組換え酵母。
(4) 上記内在遺伝子を破壊したことを特徴とする(3)記載の組換え酵母。
(5) 上記内在遺伝子をヘテロで破壊したことを特徴とする(4)記載の組換え酵母。
(6) NAD+依存性を低下させNADP+依存性を高めた変異型アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする遺伝子を導入したことを特徴とする(1)記載の組換え酵母。
(7) 上記アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする内在遺伝子は、以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードする遺伝子であることを特徴とする(3)記載の組換え酵母。
(a)配列番号2に示すアミノ酸配列を有するタンパク質
(b)配列番号2に示すアミノ酸配列に対して70%以上の同一性を有するアミノ酸配列を有し、2−アセト乳酸及びNAD+をそれぞれ2,3−ジヒドロキシイソ吉草酸及びNADHに変換する酵素活性を有するタンパク質
(8) 上記変異型アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする遺伝子は、以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードする遺伝子であることを特徴とする(6)記載の組換え酵母。
(a)配列番号4又は6に示すアミノ酸配列を有するタンパク質
(b)配列番号4又は6に示すアミノ酸配列に対して70%以上の同一性を有するアミノ酸配列を有し、2−アセト乳酸及びNADP+をそれぞれ2,3−ジヒドロキシイソ吉草酸及びNADPHに変換する酵素活性を有するタンパク質
(9)上記キシロースイソメラーゼ遺伝子は、以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードする遺伝子であることを特徴とする(1)記載の組換え酵母。
(a)配列番号8に示すアミノ酸配列を有するタンパク質
(b)配列番号8に示すアミノ酸配列に対して70%以上の同一性を有するアミノ酸配列を有し、キシロースをキシルロースにする酵素活性を有するタンパク質
(10) 上記(1)乃至(9)いずれかに記載の組換え酵母を、キシロースを含有する培地にて培養してエタノール発酵を行う工程を有するエタノールの製造方法。
本発明に係る組換え酵母は、キシロースイソメラーゼ遺伝子を導入し、且つ、アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼの酵素反応に起因するNADH(還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド)の生産量を低下させたものである。
本発明に係る組換え酵母は、宿主となる酵母にキシロースイソメラーゼ遺伝子を導入するとともに、アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼの酵素反応に起因するNADHの生産量を低下させるように改変することで作製することができる。宿主となる酵母は、特に限定されないが、キシロース代謝能を有しない酵母でも良いし、キシロース代謝能を本来的に有する酵母でもよい。宿主として用いることができる酵母としては、特に限定するものではないがCandida Shehatae、Pichia stipitis、Pachysolen tannophilus、Saccharomyces cerevisiae及びSchizosaccaromyces pombeなどの酵母が挙げられ、特にSaccharomyces cerevisiaeが好ましい。なかでもキシロース代謝能を本来的に有する酵母としては、特に限定されないが、Pichia stipitis、Candida tropicalis及びCandida prapsilosis等を挙げることができる。
本発明に係る組換え酵母を使用してエタノールを製造する際には、少なくともキシロースを含有する培地にてエタノール発酵培養を行う。すなわち、エタノール発酵を行う培地とは、炭素源として少なくともキシロースを含有することとなる。なお、培地には、予めグルコース等の他の炭素源が含まれていても良い。
本実施例では、キシロースイソメラーゼ遺伝子を導入することでキシロース資化能を獲得した組換え酵母に対して、アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼの酵素反応に起因するNADHの生産量を低下させるように改変した組換え酵母を作製し、この組換え酵母のキシロース資化能及びエタノール生産能を評価した。なお、本実施例で作製した組換え酵母は、キシルロキナーゼ遺伝子を導入することでキシロースの代謝活性を向上させている。
(1)XI遺伝子及びXKS1遺伝子導入、GRE3遺伝子破壊用ベクター
GRE3遺伝子座にGRE3遺伝子を破壊しながらヤマトシロアリ(Reticulitermes speratus)腸内原生生物由来のキシロースイソメラーゼ遺伝子と酵母由来のキシルロキナーゼ遺伝子を酵母に導入可能なベクター、pUC-GRE3U-P_TDH1-XI-T_CYC1-P_TDH3-XKS1-T_HIS3-LoxP-G418-LoxP-GRE3Dを作製した(図2)。
大腸菌E. coli由来のNADP依存型アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼ遺伝子の酵母導入用ベクター、pUC-ADH2part-T_CYC1-P_TDH3-M_DLD2-ilvC変異型-T_ACT1-TRP1-3U_ADH2を作製した(図3)。このベクターには、5’側にSaccharomyces cerevisiae BY4742株のTDH3プロモーターとDLD2遺伝子のミトコンドリアへ輸送する輸送シグナルペプチドと推定される部分の配列(5’側末端から135塩基、M_DLD2)、3’側にACT1ターミネーターが付加された、E. coli K12株由来のアセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼであるilvC(genebank:948286)をNADP依存型に変異した遺伝子、酵母ゲノム上への相同組換え領域として、ADH2遺伝子の3’側末端より上流約450bpの領域の遺伝子配列(ADH2part)、及び3’側末端より下流の約700bpの領域のDNA配列(ADH2D)、ADH2のターミネーターとしてCYC1ターミネーター、並びにマーカーとして、TRP1遺伝子を含む遺伝子配列(TRP1 marker)が含まれるように構築した。本実施例では、NADP依存型ilvC遺伝子として、R68D変異、K69L変異、K75V変異及びR76D変異を有するアミノ酸配列をコードする遺伝子(Arch. Biochem. Biophys. 338, 83-89 (1997))であって、酵母のコドン使用頻度に合わせてコドンを変換した塩基配列を有する遺伝子を使用した。本実施例では、NADP依存型ilvC遺伝子を全合成した。また、本実施例では、異なるNADP依存型ilvC遺伝子として、A71S変異、R76D変異、S78D変異、Q110V変異、D146G変異及びG185R変異を有するアミノ酸配列をコードする遺伝子(United States Patent 8097440)であって、酵母のコドン使用頻度に合わせてコドンを変換した塩基配列を有する遺伝子を使用した。本実施例では、このNADP依存型ilvC遺伝子についても全合成した。
ILV5遺伝子の破壊用ベクター、pUC-ILV5U-TRP1-ILV5Dを作製した(図4)。このベクターには、酵母ゲノム上への相同組換えおよびアセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼ遺伝子(ILV5)遺伝子を破壊するための領域として、ILV5遺伝子の上流約850bpのDNA配列(ILV5U)、ILV5遺伝子の下流約800bpのDNA配列(ILV5D)、並びにマーカーとして、TRP1遺伝子を含む遺伝子配列(TRP1 marker)が含まれるように構築した。
マーカー遺伝子のみ導入するコントロールベクター、pUC-ADH2part-T_CYC1-TRP1-ADH2Dを作製した(図5)。このベクターには、酵母ゲノム上への相同組換え領域として、ADH2遺伝子の3’側末端より上流約450bpの領域の遺伝子配列(ADH2part)、及び3’側末端より下流の約700bpの領域のDNA配列(ADH2D)、ADH2のターミネーターとしてCYC1ターミネーター、並びにマーカーとして、TRP1遺伝子を含む遺伝子配列(TRP1marker)が含まれるように構築した。
2倍体酵母でトリプトファン要求性であるSaccharomyces cerevisiae OC2-T株(Saitoh, S.ら、J. Ferment. Bioeng. 1996年、81巻、98-103)を宿主とした。酵母の形質転換はFrozen-EZ Yeast Transformation II(ZYMO RESEARCH)を用い、添付のプロトコルに従って行った。
次に、上述のように得られたUz999株、Uz1000株、Uz1089株及びUz1034株からそれぞれ発酵能力が高い2株を選び、フラスコ発酵試験を以下のように実施した。まず、グルコース濃度20g/LのYPD液体培地(イーストエキストラクト 10g/L、ペプトン 20g/L、グルコース20g/L)を20ml分注した100ml容バッフル付きフラスコに供試株を植菌し、30℃、120rpmで24時間培養を行った。集菌後、D5X65YPAc3培地(グルコース5g/L、キシロース65g/L、イーストエキストラクト10g/L、ペプトン20g/L、酢酸3g/L)を10ml分注した20ml容フラスコに植菌し(菌濃度0.3g乾燥菌体/L)、振盪培養(80rpm、振幅35mm、30℃)にて発酵試験を行った。なお、フラスコにつける栓は、内径1.5mmニードルを通したゴム製で、ニードルの先に逆止弁を取り付けることでフラスコが嫌気的に保たれるようにした。
カラム:AminexHPX-87H
移動相:0.01N H2SO4
流量:0.6ml/min
温度:30℃
検出器:示差屈折率検出器 RID-10A
発酵試験の結果を表2に示す。
Claims (6)
- キシロースイソメラーゼ遺伝子を導入した組換え酵母において、アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする内在遺伝子をヘテロで破壊した組換え酵母。
- 上記アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする内在遺伝子は、以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードする遺伝子であることを特徴とする請求項1記載の組換え酵母。
(a)配列番号2に示すアミノ酸配列を有するタンパク質
(b)配列番号2に示すアミノ酸配列に対して90%以上の同一性を有するアミノ酸配列を有し、2−アセト乳酸及びNAD+をそれぞれ2,3−ジヒドロキシイソ吉草酸及びNADHに変換する酵素活性を有するタンパク質 - キシロースイソメラーゼ遺伝子を導入した組換え酵母において、NAD+依存性を低下させNADP+依存性を高めた変異型アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする遺伝子を導入した組換え酵母。
- 上記変異型アセトヒドロキシ酸レダクトイソメラーゼをコードする遺伝子は、以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードする遺伝子であることを特徴とする請求項3記載の組換え酵母。
(a)配列番号4又は6に示すアミノ酸配列を有するタンパク質
(b)配列番号4又は6に示すアミノ酸配列に対して90%以上の同一性を有するアミノ酸配列を有し、2−アセト乳酸及びNADP+をそれぞれ2,3−ジヒドロキシイソ吉草酸及びNADPHに変換する酵素活性を有するタンパク質 - 上記キシロースイソメラーゼ遺伝子は、以下の(a)又は(b)のタンパク質をコードする遺伝子であることを特徴とする請求項1又は3記載の組換え酵母。
(a)配列番号8に示すアミノ酸配列を有するタンパク質
(b)配列番号8に示すアミノ酸配列に対して90%以上の同一性を有するアミノ酸配列を有し、キシロースをキシルロースにする酵素活性を有するタンパク質 - 請求項1乃至5いずれか一項記載の組換え酵母を、キシロースを含有する培地にて培養してエタノール発酵を行う工程を有するエタノールの製造方法。
Priority Applications (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013124755A JP5845210B2 (ja) | 2013-06-13 | 2013-06-13 | 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 |
CA2912037A CA2912037C (en) | 2013-06-13 | 2014-06-09 | Recombinant yeast and method for producing ethanol using the same |
PCT/JP2014/003069 WO2014199623A1 (en) | 2013-06-13 | 2014-06-09 | Recombinant yeast and method for producing ethanol using the same |
CN201480009030.7A CN105008527B (zh) | 2013-06-13 | 2014-06-09 | 重组酵母和用其生产乙醇的方法 |
BR112015023146-2A BR112015023146B1 (pt) | 2013-06-13 | 2014-06-09 | Levedura recombinante e método para produzir etanol com uso da mesma |
MYPI2015702818A MY169263A (en) | 2013-06-13 | 2014-06-09 | Recombinant yeast and method for producing ethanol using the same |
US14/772,637 US10017788B2 (en) | 2013-06-13 | 2014-06-09 | Recombinant yeast and method for producing ethanol using the same |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013124755A JP5845210B2 (ja) | 2013-06-13 | 2013-06-13 | 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015000007A JP2015000007A (ja) | 2015-01-05 |
JP5845210B2 true JP5845210B2 (ja) | 2016-01-20 |
Family
ID=51059504
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013124755A Active JP5845210B2 (ja) | 2013-06-13 | 2013-06-13 | 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10017788B2 (ja) |
JP (1) | JP5845210B2 (ja) |
CN (1) | CN105008527B (ja) |
BR (1) | BR112015023146B1 (ja) |
CA (1) | CA2912037C (ja) |
MY (1) | MY169263A (ja) |
WO (1) | WO2014199623A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP6879111B2 (ja) * | 2017-08-02 | 2021-06-02 | トヨタ自動車株式会社 | 組換え酵母及びこれを用いたエタノールの製造方法 |
CN111154743B (zh) * | 2020-04-01 | 2021-01-05 | 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院 | 突变型纤维素酶及其在玉米青贮中的应用 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100448996C (zh) | 2002-01-23 | 2009-01-07 | 皇家奈达尔科股份有限公司 | 戊糖的发酵 |
SE0200857D0 (sv) | 2002-03-19 | 2002-03-19 | Forskarpatent I Syd Ab | Metabolic engineering for improved xylose utilisation of saccharomyces cerevisiae |
JP2009034036A (ja) | 2007-08-01 | 2009-02-19 | Toyota Motor Corp | 形質転換用酵母、形質転換方法及び物質生産方法 |
ES2575413T3 (es) * | 2007-12-20 | 2016-06-28 | Butamax (Tm) Advanced Biofuels Llc | Cetol-ácido reductoisomerasa que utiliza NADH |
US20100143997A1 (en) | 2008-10-31 | 2010-06-10 | Thomas Buelter | Engineered microorganisms capable of producing target compounds under anaerobic conditions |
JP5608999B2 (ja) | 2009-04-08 | 2014-10-22 | 株式会社豊田中央研究所 | キシロースを利用して有用物質を生産する方法 |
EP2446043A4 (en) * | 2009-06-22 | 2013-02-13 | Gevo Inc | YEAST ORGANISMS FOR THE MANUFACTURE OF ISOBUTANOL |
CA2785276C (en) * | 2009-12-22 | 2019-04-23 | Kabushiki Kaisha Toyota Chuo Kenkyusho | Xylose isomerase and use thereof |
US20140295512A1 (en) * | 2011-06-16 | 2014-10-02 | California Institute Of Technology | Ketol-Acid Reductoisomerases With Improved Performance Properties |
-
2013
- 2013-06-13 JP JP2013124755A patent/JP5845210B2/ja active Active
-
2014
- 2014-06-09 MY MYPI2015702818A patent/MY169263A/en unknown
- 2014-06-09 WO PCT/JP2014/003069 patent/WO2014199623A1/en active Application Filing
- 2014-06-09 BR BR112015023146-2A patent/BR112015023146B1/pt active IP Right Grant
- 2014-06-09 US US14/772,637 patent/US10017788B2/en active Active
- 2014-06-09 CN CN201480009030.7A patent/CN105008527B/zh active Active
- 2014-06-09 CA CA2912037A patent/CA2912037C/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105008527B (zh) | 2018-06-01 |
WO2014199623A1 (en) | 2014-12-18 |
BR112015023146B1 (pt) | 2022-11-29 |
JP2015000007A (ja) | 2015-01-05 |
US10017788B2 (en) | 2018-07-10 |
CA2912037A1 (en) | 2014-12-18 |
CN105008527A (zh) | 2015-10-28 |
CA2912037C (en) | 2018-05-15 |
MY169263A (en) | 2019-03-20 |
BR112015023146A2 (pt) | 2017-11-21 |
US20160122784A1 (en) | 2016-05-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6087854B2 (ja) | 組換え酵母を用いたエタノールの製造方法 | |
JP2010239925A (ja) | キシロースを利用して有用物質を生産する方法 | |
JP5817836B2 (ja) | 組換え酵母を用いたエタノールの製造方法 | |
JP5590140B2 (ja) | 組換え酵母を用いたエタノールの製造方法 | |
JP5845210B2 (ja) | 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 | |
US10745684B2 (en) | Recombinant yeast and a method for producing ethanol using the same | |
JP6447583B2 (ja) | 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 | |
WO2020032233A1 (ja) | 組換え酵母、及びそれを用いたエタノールの製造方法 | |
WO2014021163A1 (ja) | 組換え酵母を用いたエタノールの製造方法 | |
CA3020447A1 (en) | Recombinant yeast and method for producing ethanol using the same | |
JP7078900B2 (ja) | 形質転換酵母及びこれを用いたエタノールの製造方法 | |
WO2020138020A1 (ja) | 組換え酵母及びこれを用いたエタノールの製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150707 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150907 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20151104 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20151120 |
|
R151 | Written notification of patent or utility model registration |
Ref document number: 5845210 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R151 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |