JP5717128B2 - Chromosomal dominant polycystic kidney determination method and prophylactic / therapeutic drug screening method - Google Patents
Chromosomal dominant polycystic kidney determination method and prophylactic / therapeutic drug screening method Download PDFInfo
- Publication number
- JP5717128B2 JP5717128B2 JP2010261665A JP2010261665A JP5717128B2 JP 5717128 B2 JP5717128 B2 JP 5717128B2 JP 2010261665 A JP2010261665 A JP 2010261665A JP 2010261665 A JP2010261665 A JP 2010261665A JP 5717128 B2 JP5717128 B2 JP 5717128B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- substance
- polycystic kidney
- dominant polycystic
- acid
- blood sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
本発明は、染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を用いた染色体優性多発性嚢胞腎の判定方法や、かかる染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を用いた染色体優性多発性嚢胞腎の予防・治療薬のスクリーニング方法に関する。 The present invention relates to a method for determining chromosome dominant polycystic kidney disease using a chromosome dominant polycystic kidney marker substance, and a preventive / therapeutic agent for chromosome dominant polycystic kidney disease using such a chromosome dominant polycystic kidney marker substance The present invention relates to a screening method.
腎不全患者等の腎疾患を有する患者、特に腎透析を受ける患者の数は年々増加の一途を辿っており、現在２０万人の患者が維持透析療法を行っており、さらに毎年３万人以上が新たに透析導入に至っている。透析療法には、一人あたり年間約５００万円の費用がかかるため、２０万人に対して約１兆円の医療費が恒常的に必要となっている。また、近年、慢性腎臓病（Chronic Kidney Disease：ＣＫＤ）という疾患概念が提唱され、その予防・治療の重要性に対する認識が高まりを見せている。ＣＫＤはCommon Diseaseであり、糸球体濾過量（ＧＦＲ）６０未満の対象者が１９２６万人にも上ることから、ＣＫＤ対策が急務の課題となっている。以上のような状況下において、腎不全やＣＫＤ等の腎疾患の症状の予防法や、そのような症状を緩和し、透析導入を遅らせる治療法が開発されれば、患者のＱＯＬ（クオリティオブライフ）に資するだけでなく、医療費の大幅な削減が可能となり社会に大きく貢献することができる。 The number of patients with renal diseases such as renal failure, especially those undergoing renal dialysis, has been increasing year by year, and 200,000 patients are currently undergoing maintenance dialysis, and more than 30,000 each year. Has newly introduced dialysis. Since dialysis therapy costs about 5 million yen per person per year, medical expenses of about 1 trillion yen are constantly required for 200,000 people. In recent years, the concept of chronic kidney disease (CKD) has been proposed, and recognition of the importance of its prevention and treatment is increasing. Since CKD is a common disease and the number of subjects with glomerular filtration rate (GFR) less than 60 is as high as 1,926,000, countermeasures against CKD are an urgent issue. Under these circumstances, if a preventive method for symptoms of renal diseases such as renal failure and CKD, or a treatment that alleviates such symptoms and delays the introduction of dialysis, the patient's QOL (Quality of Life) will be developed. ) As well as a significant contribution to society.
腎不全に罹患すると、健常の場合では腎臓より***される様々な物質が体内に蓄積する。これらの物質は、腎不全の病態を診断するマーカー物質として利用されることもある。例えば、尿中に***されるアルブミン等の腎疾患マーカータンパク質の増加を指標として腎疾患の検出・診断する方法等が一般的に用いられている。この他の方法として、例えば、腎疾患患者の血液中でヒトリポカリン型プロスタグランジンＤ合成酵素の濃度が上昇することを利用した腎疾患の検出方法（特許文献１参照）や、腎不全等の患者の血液中や尿中でＥＮＤＯ１８０受容体ポリペプチドの濃度が上昇することを利用した腎症の診断方法（特許文献２参照）が知られている。また、本発明者らは、キャピラリー電気泳動質量分析計（capillary electrophoresis mass spectrometry：ＣＥ−ＭＳ）を用いて腎機能低下時に蓄積し毒性を示す新規代謝性物質を網羅的に解析し、該物質を腎疾患マーカー物質として用いた腎疾患の判定方法を提唱している（特許文献３参照）。 When suffering from renal failure, various substances excreted from the kidney in normal cases accumulate in the body. These substances may be used as marker substances for diagnosing the pathology of renal failure. For example, a method for detecting and diagnosing renal disease using as an index the increase in renal disease marker protein such as albumin excreted in urine is generally used. As other methods, for example, a renal disease detection method (see Patent Document 1) using an increase in the concentration of human lipocalin-type prostaglandin D synthase in the blood of a renal disease patient, renal failure, and the like. A method for diagnosing nephropathy using an increase in the concentration of the ENDO180 receptor polypeptide in the blood or urine of a patient is known (see Patent Document 2). In addition, the present inventors comprehensively analyzed new metabolic substances that accumulate and show toxicity at the time of renal function decline using a capillary electrophoresis mass spectrometer (CE-MS). A method for determining renal disease used as a renal disease marker substance has been proposed (see Patent Document 3).
染色体優性多発性嚢胞腎（autosomal dominant polycystic kidney disease：ＡＤＰＫＤ）はＣＫＤの一つであり、日本でも２０００〜４０００人に１人罹患するといわれている腎疾患であり、発症すると両側の腎臓に嚢胞が多発する。進行すると腎不全を発症するほか、多くの症例で高血圧を伴うといった他の腎不全とは異なる症状も現れる。原因としては、細胞外マトリクスからの（増殖・分化・輸送の）シグナルの細胞内への伝達に関与する「ポリシスチン蛋白」をコードするＰＫＤ１遺伝子（頻度８５％）、ＰＫＤ２（頻度１５％）の遺伝子異常があることが分かっているが、未知の原因遺伝子があることも知られている。 Autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) is one of the CKD, and it is said to affect 1 in 2000 to 4000 people in Japan. It occurs frequently. In addition to developing renal failure as it progresses, in many cases there are symptoms that are different from other renal failure, such as with hypertension. Causes are PKD1 gene (frequency 85%) and PKD2 (frequency 15%) genes encoding "polycystin protein" involved in intracellular transmission of signals (proliferation / differentiation / transport) from the extracellular matrix. It is known that there is an abnormality, but it is also known that there is an unknown causative gene.
本疾患の診断には超音波断層像またはＣＴで両側の腎臓に多数の嚢胞が存在することを確認することが必要であり、早期判定は不可能である。受診の原因になった自覚症状としては、肉眼的血尿（３１％）、側腹部・背部痛（３０％）、家族に多発性嚢胞腎患者がいるから（１１％）、易疲労感（９％）、腹部腫瘤（８％）、発熱（７％）、浮腫（６％）、頭痛（５％）、嘔気（５％）、腹部膨満（４％）等がある。また、遺伝子解析による診断も可能であるが、ＰＫＤ１及びＰＫＤ２以外にも原因遺伝子があることから、確実な診断方法ではない。さらに、本疾患に対する抜本的な治療法や予防法は存在せず、現在は高血圧の治療、血液透析などの対症療法が採られるのみである。 Diagnosis of this disease requires confirmation of the presence of numerous cysts in the kidneys on both sides by ultrasonic tomography or CT, and early determination is impossible. The subjective symptoms that led to the visit include gross hematuria (31%), flank and back pain (30%), family members with polycystic kidney disease (11%), and fatigue (9%) ), Abdominal mass (8%), fever (7%), edema (6%), headache (5%), nausea (5%), abdominal distension (4%). Moreover, although diagnosis by gene analysis is possible, since there are causative genes other than PKD1 and PKD2, it is not a reliable diagnosis method. Furthermore, there is no drastic treatment or prevention for this disease, and currently only symptomatic treatment such as hypertension treatment and hemodialysis is employed.
染色体優性多発性嚢胞腎は、日本でも２０００〜４０００人に１人罹患するといわれている腎疾患であるにもかかわらず、早期に判定する方法、及び抜本的な治療法や予防法が存在しない。本発明の課題は、染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を用いた染色体優性多発性嚢胞腎の判定方法や、抜本的な治療法及び予防法に用いることのできる薬剤をスクリーニングするための方法を提供することにある。 Despite the fact that chromosomal dominant polycystic kidney disease is a kidney disease that is said to affect one in 2000 to 4000 people in Japan, there is no method for early determination and no radical treatment or prevention method. An object of the present invention is to provide a method for screening for a chromosomal dominant polycystic kidney disease using a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance and a method for screening a drug that can be used for drastic treatment and prevention. There is to do.
本発明者らは、野生型ラット、５／６腎摘腎不全モデルラット、染色体優性多発性嚢胞腎モデルラット（Ｈａｎ：ＳＰＲＤ Ｃｙ／＋ラット）の血清中に含まれる６９種類の陽イオンと５９種類の陰イオンを網羅的に同時測定し、５／６腎摘腎不全及び染色体優性多発性嚢胞腎のモデルラットにおいて蓄積又は減少するカチオン性及びアニオン性物質を見いだした。一方、本発明者らはすでに、ヒト腎不全において蓄積するカチオン性及びアニオン性物質を同定している（Hypertens Res in press）。その結果本発明者らは、予想に反してヒト及びラットの腎不全においては蓄積又は減少せずに、染色体優性多発性嚢胞腎モデルラットでのみ特異的な挙動を示す物質が存在することを見い出し、本発明を完成するに至った。 The present inventors have obtained 69 types of cations and 59 contained in the serum of wild-type rats, 5/6 nephrectomy nephrectomy model rats, and chromosome dominant polycystic kidney model rats (Han: SPRD Cy / + rats). By comprehensively measuring the types of anions, we found cationic and anionic substances that accumulate or decrease in model rats with 5/6 nephrectomy nephrectomy and chromosomal dominant polycystic kidney disease. On the other hand, the present inventors have already identified cationic and anionic substances that accumulate in human renal failure (Hypertens Res in press). As a result, the present inventors have found that there exists a substance that exhibits a specific behavior only in a chromosomal dominant polycystic kidney model rat, which does not accumulate or decrease in human and rat renal failure. The present invention has been completed.
すなわち、本発明は（１）被検血液試料中に存在する、以下の蓄積カチオン性物質、減少カチオン性物質、蓄積アニオン性物質、及び減少アニオン性物質からなる群から選ばれる１種又は２種以上の染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程を有することを特徴とする染色体優性多発性嚢胞腎の判定のためのデータを提供する方法に関する。
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸
That is, the present invention is (1) one or two kinds selected from the group consisting of the following accumulated cationic substances, reduced cationic substances, accumulated anionic substances, and reduced anionic substances present in a test blood sample: The present invention relates to a method for providing data for determination of chromosomal dominant polycystic kidney disease, comprising the step of detecting or quantifying the above-described chromosome dominant polycystic kidney marker substance.
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3- Phenylpropionic acid (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid
また、本発明は、（２）被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果を、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果と比較する工程をさらに有することを特徴とする上記（１）に記載の染色体優性多発性嚢胞腎の判定のためのデータを提供する方法に関する。
In addition, the present invention provides (2) a detection result or quantitative result of a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in a test blood sample and a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in a normal control blood sample. It relates to a method of providing data for determining the autosomal dominant polycystic kidney disease according to (1), characterized by further having a higher Engineering you compare the detection results or quantitative results.
さらに、本発明は、（３）検出又は定量した染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質が、以下の蓄積カチオン性物質及び蓄積アニオン性物質からなる群から選択される場合は、被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度が、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度よりも高いときに、被検血液試料の提供者が染色体優性多発性嚢胞腎であることを示すことを特徴とする上記（２）記載の染色体優性多発性嚢胞腎の判定のためのデータを提供する方法に関する。
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
Furthermore, the present invention provides (3) when the detected or quantified chromosome dominant polycystic kidney marker substance is selected from the group consisting of the following accumulated cationic substance and accumulated anionic substance: When the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present is higher than the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample, the donor of the test blood sample is chromosomal dominant multiple The present invention relates to a method for providing data for determination of chromosomal dominant polycystic kidney as described in the above item (2), characterized in that it is a cystic kidney.
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenaceturic acid, 3-phenylpropionic acid
また、本発明は、（４）検出又は定量した染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質が、以下の減少カチオン性物質及び減少アニオン性物質からなる群から選択される場合は、被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度が正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度よりも低いときに、被検血液試料の提供者が染色体優性多発性嚢胞腎であることを示すことを特徴とする上記（２）記載の染色体優性多発性嚢胞腎の判定のためのデータを提供する方法に関する。
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸
In addition, the present invention provides (4) when the detected or quantified chromosome dominant polycystic kidney marker substance is selected from the group consisting of the following reduced cationic substance and reduced anionic substance: When the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present is lower than the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample, the donor of the test blood sample is the chromosome dominant polycystic cyst characterized in that indicating the kidney it relates to a method for providing data for the determination of autosomal dominant polycystic kidney disease (2) above, wherein.
(Decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid
また、本発明は、（５）以下の工程Ａ〜Ｄを有することを特徴とする染色体優性多発性嚢胞腎予防・治療剤のスクリーニング方法に関する。
染色体優性多発性嚢胞腎非ヒト動物に被検物質を投与する工程Ａ；
該非ヒト動物から血液試料を採取する工程Ｂ；
該血液試料中に存在する、以下の蓄積カチオン性物質、減少カチオン性物質、蓄積アニオン性物質、及び減少アニオン性物質からなる群から選ばれる１種又は２種以上の染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程Ｃ；
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸；
血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果を正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果と比較する工程Ｄ；
The present invention also relates to ( 5 ) a screening method for a preventive / therapeutic agent for chromosomal dominant polycystic kidney disease, comprising the following steps AD.
Administering a test substance to a chromosome dominant polycystic kidney non-human animal, step A;
Collecting a blood sample from the non-human animal B;
One or more chromosomal dominant polycystic kidney markers selected from the group consisting of the following accumulated cationic substances, reduced cationic substances, accumulated anionic substances, and reduced anionic substances present in the blood sample Detecting or quantifying the substance C;
(Storage cationic substance): 5 - methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, et Kutoi emissions <br/> (reduced cationic substance): 2- Deokishishichiji emissions (storage anionic material): A Rantoeto, o - hydroxy acid, off Enasetsuru acid, 3-phenylpropionic acid (reduced anionic material): decanoic acid, arsenate Dorokishidekan acid;
Detection result or detection result or quantification results as engineering you compared to D of autosomal dominant polycystic kidney marker substance present in normal control blood sample quantitative results of autosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the blood sample ;
さらに、本発明は、（６）染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカーとして使用するための５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン、２−デオキシシチジン、アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、デカン酸、ヒドロキシデカン酸から選ばれる１種又は２種以上の化合物に関する。 Furthermore, the present invention relates to (6 ) 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine, 2-deoxycytidine, allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetur for use as a marker for determination of chromosomal dominant polycystic kidney disease The present invention relates to one or more compounds selected from acids, 3-phenylpropionic acid, decanoic acid, and hydroxydecanoic acid.
本発明の染色体優性多発性嚢胞腎の判定方法によると、従来は確実な判定方法として超音波断層像またはＣＴで両側の腎臓に多数の嚢胞が存在することを確認することが必要であったのに対し、染色体優性多発性嚢胞腎マーカーの検出により染色体優性多発性嚢胞腎の判定が可能になり、早期判定が可能になる。また、本発明の染色体優性多発性嚢胞腎予防・治療剤のスクリーニング方法によると、これまでに着目されていなかった新たな染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質に着目して新規な染色体優性多発性嚢胞腎予防・治療剤を効率よくスクリーニングすることが可能となる。 According to the method for determining chromosomal dominant polycystic kidneys of the present invention, it was conventionally necessary to confirm that there are a large number of cysts on both kidneys by ultrasonic tomography or CT as a reliable determination method. On the other hand, detection of a chromosome dominant polycystic kidney marker enables determination of a chromosome dominant polycystic kidney and early determination. In addition, according to the screening method for a chromosomal dominant polycystic kidney preventive / therapeutic agent of the present invention, a novel chromosomal dominant polycystic cyst focusing on a new chromosomal dominant polycystic kidney marker substance that has not been focused on so far It becomes possible to efficiently screen for renal preventive / therapeutic agents.
本発明の染色体優性多発性嚢胞腎の判定方法としては、被検血液試料中に存在する以下の１種又は２種以上の染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程を有する方法であれば特に制限されず、本発明の判定方法の態様には、医師による診断行為を除く判定方法の他、被検血液試料中に存在する以下の１種又は２種以上の染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程を有することを特徴とする染色体優性多発性嚢胞腎判定のためのデータを収集する方法や、収集したデータをデータベース化する方法が含まれる。
（蓄積カチオン性物質）：γ−グアニジノブチル酸、クレアチニン、アントラニル酸、３−メチルヒスチジン、アラントイン、トリメチルアミン−Ｎ−オキシド、ピペコリン酸、５−メチル−２−デオキシシチジン、ホモアルギニン、トリメチルリジン、α−アミノアジピン酸、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、シトルリン、エクトイン、メチオニンスルホキシド、グリシン、非対称性ジメチルアルギニン（ＡＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン、グアニジノコハク酸
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン、カルニチン
（蓄積アニオン性物質）：馬尿酸、アランエート、クエン酸、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、シス−アコニット酸、イソクエン酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、３−インドキシル硫酸、トランス−アコニット酸、イセチオネート、パントテン酸、ピメリン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、２−オキソグルタル酸、オクタン酸、オキソイソペンタン酸、メチル−２−オキソペンタン酸、ヒドロキシデカン酸
The method for determining chromosomal dominant polycystic kidney of the present invention is a method comprising a step of detecting or quantifying one or more of the following chromosomal dominant polycystic kidney marker substances present in a test blood sample. The determination method of the present invention is not particularly limited as long as it includes one or more of the following chromosome dominant multiple cysts present in a test blood sample, in addition to a determination method that excludes a diagnostic action by a doctor. It includes a method of collecting data for determination of chromosomal dominant polycystic kidneys, and a method of creating a database of the collected data, including a step of detecting or quantifying a renal marker substance.
(Accumulating cationic substance): γ-guanidinobutyric acid, creatinine, anthranilic acid, 3-methylhistidine, allantoin, trimethylamine-N-oxide, pipecolic acid, 5-methyl-2-deoxycytidine, homoarginine, trimethyllysine, α Amino adipic acid, hydroxyproline, glucosamine, citrulline, ectoine, methionine sulfoxide, glycine, asymmetric dimethylarginine (ADMA), N, N-dimethylglycine, guanidino succinic acid (decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine, carnitine (Accumulating anionic substances): hippuric acid, alanate, citric acid, o-hydroxybenzoic acid, cis-aconitic acid, isocitric acid, phenacetic acid, 3-phenylpropionic acid, 3-indoxyl sulfate, trans -Aconitic acid, isethionate, pantothenic acid, pimelic acid (decreasing anionic substance): decanoic acid, 2-oxoglutaric acid, octanoic acid, oxoisopentanoic acid, methyl-2-oxopentanoic acid, hydroxydecanoic acid
本発明における染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質とは、上記の蓄積カチオン性物質、減少カチオン性物質、蓄積アニオン性物質、及び減少アニオン性物質からなる、染色体優性多発性嚢胞腎モデルラット（Ｈａｎ：ＳＰＲＤ Ｃｙ／＋ラット）において、野生型ラットと比較して有意に蓄積又は減少する物質であり、これらの物質は、Ｃｙ／＋ラットで蓄積するカチオン性物質、Ｃｙ／＋ラットで減少するカチオン性物質、Ｃｙ／＋ラットで蓄積するアニオン性物質、及びＣｙ／＋ラットで減少するアニオン性物質ということもできる。 The chromosome dominant polycystic kidney marker substance in the present invention is a chromosomal dominant polycystic kidney model rat (Han: consisting of the above-mentioned accumulated cationic substance, reduced cationic substance, accumulated anionic substance, and reduced anionic substance. (SPRD Cy / + rats) are substances that accumulate or decrease significantly compared to wild-type rats, and these substances are cationic substances that accumulate in Cy / + rats, cationic substances that decrease in Cy / + rats. Substances, anionic substances that accumulate in Cy / + rats, and anionic substances that decrease in Cy / + rats.
さらに、本発明における染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質としては、染色体優性多発性嚢胞腎以外の腎不全患者では蓄積又は減少しない、染色体優性多発性嚢胞腎において特異的な挙動を示す染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質であることが望ましく、具体的には以下の蓄積カチオン性物質、減少カチオン性物質、蓄積アニオン性物質、及び減少アニオン性物質を例示することができる。
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸
Furthermore, as the chromosome dominant polycystic kidney marker substance in the present invention, chromosome dominant multiple cystic kidneys exhibiting specific behavior in chromosome dominant polycystic kidneys that do not accumulate or decrease in patients with renal failure other than chromosome dominant polycystic kidneys. A cystic kidney marker substance is desirable. Specifically, the following accumulated cationic substance, reduced cationic substance, accumulated anionic substance, and reduced anionic substance can be exemplified.
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3- Phenylpropionic acid (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid
上記染色体優性多発性嚢胞腎において特異的な挙動を示す染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を用いることによって、腎不全に至る前に染色体優性多発性嚢胞腎の早期判定が可能になる。 By using a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance that exhibits a specific behavior in the above-described chromosomal dominant polycystic kidney, early determination of chromosomal dominant polycystic kidney can be made before renal failure occurs.
本発明の判定方法は、被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果を、正常対照血液（非腎不全者由来の血液）試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果と比較することにより、被検血液試料の提供者が染色体優性多発性嚢胞腎であるかどうか、又は、該提供者の染色体優性多発性嚢胞腎の症状の程度を評価する工程をさらに有してもよい。また、本発明の判定方法の態様には、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程を有し、染色体優性多発性嚢胞腎判定のためのデータを収集する方法や、収集したデータをデータベース化する方法を含んでいてもよい。さらに、前記被検血液試料及び正常被検体から採取した血液試料から構築したデータベース同士を比較する工程を、被検血液試料の提供者が染色体優性多発性嚢胞腎であるかどうか、又は、該提供者の染色体優性多発性嚢胞腎の症状の程度を評価するために用いてもよい。 According to the determination method of the present invention, the detection result or quantification result of a chromosome dominant polycystic kidney marker substance present in a test blood sample is converted into a chromosome dominant existing in a normal control blood (blood derived from a non-renal failure patient) sample. By comparing with the detection result or quantitative result of the polycystic kidney marker substance, whether the donor of the test blood sample is chromosomal dominant polycystic kidney, or the chromosomal dominant polycystic kidney of the donor You may further have the process of evaluating the grade of a symptom. In addition, the embodiment of the determination method of the present invention includes a step of detecting or quantifying a chromosome dominant polycystic kidney marker substance present in a normal control blood sample, and data for determining a chromosome dominant polycystic kidney disease is obtained. The method of collecting and the method of making the collected data into a database may be included. Further, the step of comparing databases constructed from the blood sample collected from the test blood sample and the normal sample, whether or not the donor of the test blood sample is chromosomal dominant polycystic kidney or the provision It may be used to assess the degree of symptoms of a person's chromosomal dominant polycystic kidney disease.
本発明の判定方法においては、検出又は定量した染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質が、上記蓄積カチオン性物質及び蓄積アニオン性物質からなる群から選択される場合は、被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度が、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度よりも高いときに、被検血液試料の提供者が染色体優性多発性嚢胞腎であると評価し、又は、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度に対する被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度の高さの程度を、該提供者の染色体優性多発性嚢胞腎の症状の重さの程度であると評価することができる。上記蓄積カチオン性物質及び蓄積アニオン性物質からなる群から選択される染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程は、かかる判定のためにデータを収集する方法や、収集したデータをデータベース化する方法を含んでいてもよい。 In the determination method of the present invention, when the detected or quantified chromosome dominant polycystic kidney marker substance is selected from the group consisting of the accumulated cationic substance and the accumulated anionic substance, it is present in the test blood sample. When the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance is higher than the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample, the donor of the test blood sample gives the chromosome dominant polycystic kidney disease Or the degree of the high concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the test blood sample relative to the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample Can be assessed as the severity of the symptom of the donor's chromosomal dominant polycystic kidney disease. The step of detecting or quantifying a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance selected from the group consisting of the accumulated cationic substance and the accumulated anionic substance includes a method of collecting data for such determination, and a database of the collected data. It may include a method of converting.
本発明の判定方法においては、検出又は定量した染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質が、上記減少カチオン性物質及び減少アニオン性物質からなる群から選択される場合は、被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度が、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度よりも低いときに、被検血液試料の提供者が染色体優性多発性嚢胞腎であると評価し、又は、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度に対する被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度の低さの程度を、該提供者の染色体優性多発性嚢胞腎の症状の重さの程度であると評価することができる。上記減少カチオン性物質及び減少アニオン性物質からなる群から選択される染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程は、かかる判定のためにデータを収集する方法や、収集したデータをデータベース化する方法を含んでいてもよい。 In the determination method of the present invention, when the detected or quantified chromosome dominant polycystic kidney marker substance is selected from the group consisting of the reduced cationic substance and the reduced anionic substance, it is present in the test blood sample. When the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance is lower than the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample, the donor of the test blood sample is chromosomal dominant polycystic kidney disease Or the extent of the low concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the test blood sample relative to the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample Can be assessed as the severity of the symptom of the donor's chromosomal dominant polycystic kidney disease. The step of detecting or quantifying a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance selected from the group consisting of the reduced cationic substance and the reduced anionic substance includes a method of collecting data for such determination, and a database of the collected data. It may include a method of converting.
上記判定のための被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質及び正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の比較方法は、公知のデータ比較処理方法であれば特に制限されないが、例えば、被検血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質濃度を、正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質濃度より設定した基準値と比較することによって、被検血液試料の提供者が腎疾患であるかどうかを判定することができる。ここで、「基準値」とは、陽性又は陰性を判定するための値をいう。この基準値は、例えば、染色体優性多発性嚢胞腎において蓄積する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の場合は、「染色体優性多発性嚢胞腎において蓄積する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の、正常対照血液試料中における濃度の平均値＋α×標準偏差（ＳＤ）」という数式において、αとして、０．５、１、２又は５を用いることによって設定することができ、染色体優性多発性嚢胞腎において減少する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の場合は、「染色体優性多発性嚢胞腎において減少する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の、正常対照血液試料中における濃度の平均値−α×標準偏差（ＳＤ）」という数式において、αとして、０．５、１、２又は５を用いることによって設定することができる。なお、濃度の分布が正規分布である集団では、いずれの数式においても、αとして２を用いることが多い。 The method for comparing the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the test blood sample for the determination and the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample is a known data comparison processing method. Although there is no particular limitation, for example, the reference value obtained by setting the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the test blood sample from the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample It is possible to determine whether or not the donor of the test blood sample has renal disease. Here, the “reference value” refers to a value for determining positive or negative. For example, in the case of a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance that accumulates in the chromosomal dominant polycystic kidney, this reference value is “normal control of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance that accumulates in the chromosomal dominant polycystic kidney. In the formula “average value of concentration in blood sample + α × standard deviation (SD)”, α can be set by using 0.5, 1, 2, or 5 and decreased in chromosome dominant polycystic kidney In the case of a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance, “the average value of the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance decreased in the chromosomal dominant polycystic kidney kidney in the normal control blood sample−α × standard deviation (SD ) "Can be set by using 0.5, 1, 2, or 5 as α. In a group in which the distribution of density is a normal distribution, 2 is often used as α in any mathematical expression.
上記の被検血液試料としては、被検者（被検血液試料の提供者）の血液に由来する試料である限り特に制限されず、血液試料そのものであってもよいし、その血液試料から得られた血清試料や血漿試料であってもよいが、検出や定量のより高い精度を得る観点から、血漿試料を好適に例示することができる。 The test blood sample is not particularly limited as long as it is a sample derived from the blood of the subject (provider of the test blood sample), and may be the blood sample itself or obtained from the blood sample. The obtained serum sample or plasma sample may be used, but from the viewpoint of obtaining higher accuracy of detection and quantification, the plasma sample can be preferably exemplified.
上記の本件腎疾患マーカー物質の検出又は定量方法としては、本件腎疾患マーカー物質を検出又は定量し得る限り、物理化学的方法であっても生物学的方法であってもよいが、検出感度の点で物理化学的方法を好適に例示することができ、中でも、液体クロマトグラフ質量分析計（ＬＣ／ＭＳ）、ガスクロマトグラフ質量分析計（ＧＣ／ＭＳ）やキャピラリー電気泳動質量分析計（ＣＥ−ＭＳ）等の質量分析計（ＭＳ）を用いた方法をより好適に例示することができ、少量のサンプルから数百種類以上の物質を同時測定できることから、ＣＥ−ＭＳを用いた方法を特に好適に例示することができる。 As a method for detecting or quantifying the above-mentioned renal disease marker substance, as long as the present renal disease marker substance can be detected or quantified, it may be a physicochemical method or a biological method. The physicochemical method can be preferably exemplified in terms of points, and among them, a liquid chromatograph mass spectrometer (LC / MS), a gas chromatograph mass spectrometer (GC / MS), and a capillary electrophoresis mass spectrometer (CE-MS). ) And the like using a mass spectrometer (MS) can be illustrated more suitably, and several hundreds or more kinds of substances can be simultaneously measured from a small amount of sample. Therefore, a method using CE-MS is particularly preferable. It can be illustrated.
本発明の染色体優性多発性嚢胞腎予防・治療剤のスクリーニング方法としては、染色体優性多発性嚢胞腎非ヒト動物非ヒト動物に被検物質を投与する工程Ａ；該非ヒト動物から血液試料を採取する工程Ｂ；該血液試料中に存在する、染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質（γ−グアニジノブチル酸、クレアチニン、アントラニル酸、３−メチルヒスチジン、アラントイン、トリメチルアミン−Ｎ−オキシド、ピペコリン酸、５−メチル−２−デオキシシチジン、ホモアルギニン、トリメチルリジン、α−アミノアジピン酸、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、シトルリン、エクトイン、メチオニンスルホキシド、グリシン、非対称性ジメチルアルギニン（ＡＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン、グアニジノコハク酸、２−デオキシシチジン、カルニチン、馬尿酸、アラントエート、クエン酸、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、シス−アコニット酸、イソクエン酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、３−インドキシル硫酸、トランス−アコニット酸、イセチオネート、パントテン酸、ピメリン酸、デカン酸、２−オキソグルタル酸、オクタン酸、オキソイソペンタン酸、メチル−２−オキソペンタン酸、ヒドロキシデカン酸）から選ばれる１種又は２種以上の染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程Ｃ；血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果を正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果と比較することにより、前記非ヒト動物の染色体優性多発性嚢胞腎の程度を評価する工程Ｄ；を有している限り特に制限されないが、さらに、染色体優性多発性嚢胞腎において蓄積する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度が、被検物質投与前より低下した場合、又は、染色体優性多発性嚢胞腎において蓄積する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の濃度が、被検物質投与前より上昇した場合に、前記被検物質を腎疾患の予防・治療剤と評価する工程を有してもよい。 A screening method for a preventive / therapeutic agent for chromosomal dominant polycystic kidney of the present invention includes the step A of administering a test substance to a non-human animal having chromosomal dominant polycystic kidney disease; a blood sample is collected from the nonhuman animal Step B: Chromosomal dominant polycystic kidney marker substance (γ-guanidinobutyric acid, creatinine, anthranilic acid, 3-methylhistidine, allantoin, trimethylamine-N-oxide, pipecolic acid, 5-methyl present in the blood sample 2-deoxycytidine, homoarginine, trimethyllysine, α-aminoadipic acid, hydroxyproline, glucosamine, citrulline, ectoine, methionine sulfoxide, glycine, asymmetric dimethylarginine (ADMA), N, N-dimethylglycine, guanidinosuccinic acid 2-deoxycytidine , Carnitine, hippuric acid, allantoate, citric acid, o-hydroxybenzoic acid, cis-aconitic acid, isocitric acid, phenacetic acid, 3-phenylpropionic acid, 3-indoxyl sulfuric acid, trans-aconitic acid, isethionate, pantothenic acid, Detection of one or more chromosomal dominant polycystic kidney marker substances selected from pimelic acid, decanoic acid, 2-oxoglutaric acid, octanoic acid, oxoisopentanoic acid, methyl-2-oxopentanoic acid, hydroxydecanoic acid) Or quantifying step C; the detection result or quantification result of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the blood sample and the detection result or quantification result of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample; By comparing the chromosome dominant polycystic kidneys of the non-human animal In the case where the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance accumulated in the chromosomal dominant polycystic kidney is lower than that before administration of the test substance Or, when the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance accumulated in the chromosomal dominant polycystic kidney increases from before administration of the test substance, the test substance is evaluated as a prophylactic / therapeutic agent for renal disease You may have a process.
上記非ヒト動物としては、非ヒト哺乳動物を好適に例示することができ、具体的にはマウス、ラット、ハムスター、モルモット、サル、ウシ、ブタ、ウマ、ウサギ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、イヌ等が挙げられる。また、染色体優性多発性嚢胞腎モデル生物であってもよく、Ｃｙ／＋ラットを好適に例示することができる。 Non-human mammals can be preferably exemplified as the non-human animals. Specifically, mice, rats, hamsters, guinea pigs, monkeys, cows, pigs, horses, rabbits, sheep, goats, cats, dogs, etc. Is mentioned. Moreover, it may be a chromosome dominant polycystic kidney model organism, and a Cy / + rat can be preferably exemplified.
また本発明は、γ−グアニジノブチル酸、クレアチニン、アントラニル酸、３−メチルヒスチジン、アラントイン、トリメチルアミン−Ｎ−オキシド、ピペコリン酸、５−メチル−２−デオキシシチジン、ホモアルギニン、トリメチルリジン、α−アミノアジピン酸、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、シトルリン、エクトイン、メチオニンスルホキシド、グリシン、非対称性ジメチルアルギニン（ＡＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン、グアニジノコハク酸、２−デオキシシチジン、カルニチン、馬尿酸、アラントエート、クエン酸、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、シス−アコニット酸、イソクエン酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、３−インドキシル硫酸、トランス−アコニット酸、イセチオネート、パントテン酸、ピメリン酸、デカン酸、２−オキソグルタル酸、オクタン酸、オキソイソペンタン酸、メチル−２−オキソペンタン酸、ヒドロキシデカン酸から選ばれる１種又は２種以上の化合物を染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカーとして使用する方法や、染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカーとして使用するための、すなわち、染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカー用のγ−グアニジノブチル酸、クレアチニン、アントラニル酸、３−メチルヒスチジン、アラントイン、トリメチルアミン−Ｎ−オキシド、ピペコリン酸、５−メチル−２−デオキシシチジン、ホモアルギニン、トリメチルリジン、α−アミノアジピン酸、ヒドロキシプロリン、グルコサミン、シトルリン、エクトイン、メチオニンスルホキシド、グリシン、非対称性ジメチルアルギニン（ＡＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン、グアニジノコハク酸、２−デオキシシチジン、カルニチン、馬尿酸、アラントエート、クエン酸、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、シス−アコニット酸、イソクエン酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、３−インドキシル硫酸、トランス−アコニット酸、イセチオネート、パントテン酸、ピメリン酸、デカン酸、２−オキソグルタル酸、オクタン酸、オキソイソペンタン酸、メチル−２−オキソペンタン酸、ヒドロキシデカン酸から選ばれる１種又は２種以上の化合物に関する。 The present invention also includes γ-guanidinobutyric acid, creatinine, anthranilic acid, 3-methylhistidine, allantoin, trimethylamine-N-oxide, pipecolic acid, 5-methyl-2-deoxycytidine, homoarginine, trimethyllysine, α-amino. Adipic acid, hydroxyproline, glucosamine, citrulline, ectoine, methionine sulfoxide, glycine, asymmetric dimethylarginine (ADMA), N, N-dimethylglycine, guanidinosuccinic acid, 2-deoxycytidine, carnitine, hippuric acid, allantoate, citric acid O-hydroxybenzoic acid, cis-aconitic acid, isocitric acid, phenacetic acid, 3-phenylpropionic acid, 3-indoxyl sulfate, trans-aconitic acid, isethionate, pantothenic acid, pimelic acid Marker for determination of chromosomal dominant polycystic kidney disease using one or more compounds selected from acid, decanoic acid, 2-oxoglutaric acid, octanoic acid, oxoisopentanoic acid, methyl-2-oxopentanoic acid and hydroxydecanoic acid Γ-guanidinobutyric acid, creatinine, anthranilic acid, 3-methylhistidine for use as a determination marker for chromosome dominant polycystic kidneys, that is, for use as a determination marker for chromosome dominant polycystic kidneys, Allantoin, trimethylamine-N-oxide, pipecolic acid, 5-methyl-2-deoxycytidine, homoarginine, trimethyllysine, α-aminoadipic acid, hydroxyproline, glucosamine, citrulline, ectoine, methionine sulfoxide, glycine, asymmetric dimethylarginine (ADMA), N, N-dimethylglycine, guanidinosuccinic acid, 2-deoxycytidine, carnitine, hippuric acid, allantoate, citric acid, o-hydroxybenzoic acid, cis-aconitic acid, isocitric acid, phenacetic acid, 3-phenylpropi On acid, 3-indoxyl sulfate, trans-aconitic acid, isethionate, pantothenic acid, pimelic acid, decanoic acid, 2-oxoglutaric acid, octanoic acid, oxoisopentanoic acid, methyl-2-oxopentanoic acid, hydroxydecanoic acid Or one or more compounds.
本発明はまた、５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン、２−デオキシシチジン、アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、デカン酸、ヒドロキシデカン酸から選ばれる１種又は２種以上の化合物を染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカーとして使用する方法や、染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカーとして使用するための、すなわち、染色体優性多発性嚢胞腎の判定マーカー用の５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン、２−デオキシシチジン、アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸、デカン酸、ヒドロキシデカン酸から選ばれる１種又は２種以上の化合物に関する。 The present invention also provides 1 selected from 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine, 2-deoxycytidine, allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3-phenylpropionic acid, decanoic acid and hydroxydecanoic acid. A method of using a species or two or more compounds as a determination marker for chromosomal dominant polycystic kidney, or for using as a determination marker for chromosomal dominant polycystic kidney, that is, for determination marker of chromosomal dominant polycystic kidney 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine, 2-deoxycytidine, allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3-phenylpropionic acid, decanoic acid, hydroxydecanoic acid It relates to the above compounds.
染色体優性多発性嚢胞腎モデルラットの病態
１４週齢の野生型ラット（＋／＋ラット、ｎ＝５）、及び、藤田保健衛生大学から入手した１４週齢の染色体優性多発性嚢胞腎モデルラット（Ｈａｎ：ＳＰＲＤ Ｃｙ／＋ラット、ｎ＝５）の体重、腎重量、尿素窒素、血圧を測定した。結果を表１に示す。
Pathology of Chromosomal Dominant Polycystic Kidney Model Rat 14-week-old wild type rat (+ / + rat, n = 5) and 14-week-old chromosome-dominant polycystic kidney model rat obtained from Fujita Health University ( The body weight, kidney weight, urea nitrogen and blood pressure of Han: SPRD Cy / + rat, n = 5) were measured. The results are shown in Table 1.
Ｃｙ／＋ラットでは、野生型ラットと比較して腎重量が増加し、腎不全の進行及び血圧上昇が認められた。さらに、Ｃｙ／＋ラットでは腎上皮が異常増殖し、尿細管が拡張して嚢胞を形成していた（図１）。 In Cy / + rats, kidney weight increased, renal failure progressed and blood pressure increased compared to wild type rats. Furthermore, in Cy / + rats, the renal epithelium proliferated abnormally, and the tubules expanded to form cysts (FIG. 1).
染色体優性多発性嚢胞腎において蓄積する物質の同定
１４週齢の野生型ラット（ｎ＝５）及び染色体優性多発性嚢胞腎モデルラット（Ｈａｎ：ＳＰＲＤ Ｃｙ／＋ラット、ｎ＝５）から血漿サンプルを採取し、内標準物質を調整したメタノール溶液を添加して撹拌し、さらにクロロホルムを加えて撹拌し、４６００ｇで５分間遠心分離した後、上清を限外ろ過フィルター（分画分子量５０００）にとり、４℃、９１００ｇで２時間遠心分離した後、ろ液を遠心濃縮してＣＥ−ＴＯＦＭＳにて測定を行った。その際、６９種類の陽イオンと５９種類の陰イオンを網羅的に同時測定し、Ｃｙ／＋ラットにおいて野生型ラットと比較して有意に（Ｐ＜０．０５）蓄積する物質を同定した（表２）。
Identification of substances accumulated in chromosome-dominant polycystic kidneys Plasma samples from 14-week-old wild type rats (n = 5) and chromosome-dominant polycystic kidney model rats (Han: SPRD Cy / + rats, n = 5) The sample was collected and stirred after adding a methanol solution prepared with an internal standard substance. Further, chloroform was added and stirred. After centrifugation at 4600 g for 5 minutes, the supernatant was taken in an ultrafiltration filter (molecular weight cut off 5000). After centrifuging at 4 ° C. and 9100 g for 2 hours, the filtrate was concentrated by centrifugation and measured by CE-TOFMS. At that time, 69 types of cations and 59 types of anions were comprehensively measured simultaneously, and substances that significantly (P <0.05) accumulated in Cy / + rats compared to wild-type rats were identified ( Table 2).
同定された染色体優性多発性嚢胞腎において蓄積する物質のうち、ヒト腎不全患者（Hypertens Res in press）又は５／６腎摘腎不全モデルラットにおいても同様に挙動する物質、及び、染色体優性多発性嚢胞腎において特異的に蓄積又は減少する物質を同定した。結果を図２及び表２に示す。 Among the substances accumulated in chromosomal dominant polycystic kidneys that have been identified, substances that behave in the same manner in human renal failure patients (Hypertens Res in press) or 5/6 nephrectomy renal failure models rats, and chromosomal dominant multiples Substances that specifically accumulate or decrease in cystic kidneys were identified. The results are shown in FIG.
以上の結果から、以下の蓄積カチオン性物質、減少カチオン性物質、蓄積アニオン性物質、及び減少アニオン性物質が、染色体優性多発性嚢胞腎以外の腎不全患者では蓄積又は減少しない、染色体優性多発性嚢胞腎において特異的な挙動を示す染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質であることが見い出された。
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸
Based on the above results, the following accumulated cationic substances, reduced cationic substances, accumulated anionic substances, and reduced anionic substances do not accumulate or decrease in patients with renal failure other than chromosomal dominant polycystic kidney disease. It was found to be a chromosomal dominant polycystic kidney marker substance that exhibits specific behavior in cystic kidneys.
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3- Phenylpropionic acid (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid
本発明は、従来は確実な判定方法及び予防・治療剤が存在していなかった染色体優性多発性嚢胞腎に関して、早期判定や、予防・治療剤の効率よいスクリーニングに好適に利用することができる。 The present invention can be suitably used for early determination and efficient screening of preventive / therapeutic agents for chromosomal dominant polycystic kidneys, for which there has been no reliable determination method and preventive / therapeutic agent.
Claims (6)
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸 One or more chromosomal dominant polycystic kidneys selected from the group consisting of the following accumulated cationic substance, reduced cationic substance, accumulated anionic substance, and reduced anionic substance present in the test blood sample: A method for providing data for determination of chromosomal dominant polycystic kidney, comprising a step of detecting or quantifying a marker substance.
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3- Phenylpropionic acid (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸 When the detected or quantified chromosome dominant polycystic kidney marker substance is selected from the group consisting of the following accumulated cationic substance and accumulated anionic substance, the chromosome dominant polycystic kidney marker present in the test blood sample Indicates that the donor of the test blood sample is chromosomal dominant polycystic kidney when the concentration of the substance is higher than the concentration of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample 3. A method for providing data for determination of chromosomal dominant polycystic kidney according to claim 2.
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenaceturic acid, 3-phenylpropionic acid
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸 When the detected or quantified chromosome dominant polycystic kidney marker substance is selected from the group consisting of the following reduced cationic substance and reduced anionic substance, the chromosome dominant polycystic kidney marker present in the test blood sample characterized in that indicate that when lower than the concentration of autosomal dominant polycystic kidney markers substance concentration of the substance is present in a normal control blood sample, the provider of the test blood sample is autosomal dominant polycystic kidney A method for providing data for determination of chromosomal dominant polycystic kidney according to claim 2.
(Decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid
染色体優性多発性嚢胞腎非ヒト動物に被検物質を投与する工程Ａ；
該非ヒト動物から血液試料を採取する工程Ｂ；
該血液試料中に存在する、以下の蓄積カチオン性物質、減少カチオン性物質、蓄積アニオン性物質、及び減少アニオン性物質からなる群から選ばれる１種又は２種以上の染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質を検出又は定量する工程Ｃ；
（蓄積カチオン性物質）：５−メチル−２−デオキシシチジン、グルコサミン、エクトイン
（減少カチオン性物質）：２−デオキシシチジン
（蓄積アニオン性物質）：アラントエート、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、フェナセツル酸、３−フェニルプロピオン酸
（減少アニオン性物質）：デカン酸、ヒドロキシデカン酸；
血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果を正常対照血液試料中に存在する染色体優性多発性嚢胞腎マーカー物質の検出結果又は定量結果と比較する工程Ｄ； A screening method for a preventive / therapeutic agent for chromosome dominant polycystic kidney disease, comprising the following steps A to D.
Administering a test substance to a chromosome dominant polycystic kidney non-human animal, step A;
Collecting a blood sample from the non-human animal B;
One or more chromosomal dominant polycystic kidney markers selected from the group consisting of the following accumulated cationic substances, reduced cationic substances, accumulated anionic substances, and reduced anionic substances present in the blood sample Detecting or quantifying the substance C;
(Accumulating cationic substance): 5-methyl-2-deoxycytidine, glucosamine, ectoine (decreasing cationic substance): 2-deoxycytidine (accumulating anionic substance): allantoate, o-hydroxybenzoic acid, phenacetic acid, 3- Phenylpropionic acid (decreasing anionic substance): decanoic acid, hydroxydecanoic acid;
Comparing the detection result or quantification result of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the blood sample with the detection result or quantification result of the chromosomal dominant polycystic kidney marker substance present in the normal control blood sample;
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2010261665A JP5717128B2 (en) | 2010-11-24 | 2010-11-24 | Chromosomal dominant polycystic kidney determination method and prophylactic / therapeutic drug screening method |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2010261665A JP5717128B2 (en) | 2010-11-24 | 2010-11-24 | Chromosomal dominant polycystic kidney determination method and prophylactic / therapeutic drug screening method |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2012112784A JP2012112784A (en) | 2012-06-14 |
| JP5717128B2 true JP5717128B2 (en) | 2015-05-13 |
Family
ID=46497154
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2010261665A Expired - Fee Related JP5717128B2 (en) | 2010-11-24 | 2010-11-24 | Chromosomal dominant polycystic kidney determination method and prophylactic / therapeutic drug screening method |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5717128B2 (en) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2590868A (en) * | 2018-06-21 | 2021-07-07 | Maruha Nichiro Corp | Kidney function maintenance and protection agent, and method for evaluating effect thereof |
| JP7013416B2 (en) * | 2018-06-21 | 2022-01-31 | マルハニチロ株式会社 | Renal function maintenance and protective agents, and methods for evaluating their effects |
| CN114755313A (en) * | 2021-01-08 | 2022-07-15 | 复旦大学附属华山医院 | Acute kidney injury markers comprising urine NAD + metabolites |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5164296A (en) * | 1990-08-31 | 1992-11-17 | University Of Maryland At Baltimore | Assay methods involving ouabain |
| DE60039601D1 (en) * | 1999-05-24 | 2008-09-04 | Avi Biopharma Inc | ANTISENSE AGAINST C-MYC FOR THE TREATMENT OF POLYCYSTIC KIDNEY DISEASE |
| WO2002006529A2 (en) * | 2000-07-13 | 2002-01-24 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Detection and treatment of polycystic kidney disease |
| EP1726303A4 (en) * | 2004-03-19 | 2011-03-02 | Ajinomoto Kk | Therapeutic agent for renal anemia |
| JP5119430B2 (en) * | 2005-04-08 | 2013-01-16 | 国立大学法人名古屋大学 | Genes associated with polycystic kidney disease and uses thereof |
| JP2007001900A (en) * | 2005-06-22 | 2007-01-11 | Univ Nagoya | Tryptophanase inhibitor and composition containing the inhibitor |
| WO2010126146A1 (en) * | 2009-04-30 | 2010-11-04 | Tanaka Noriaki | Method or apparatus for determination of severity of renal diseases and method for operation of the apparatus |
-
2010
- 2010-11-24 JP JP2010261665A patent/JP5717128B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2012112784A (en) | 2012-06-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bales et al. | Cholinergic dysfunction in a mouse model of Alzheimer disease is reversed by an anti-Aβ antibody | |
| Villa et al. | Serum cystatin C concentration as a marker of acute renal dysfunction in critically ill patients | |
| Schwartz et al. | Glomerular filtration rate measurement and estimation in chronic kidney disease | |
| US11674903B2 (en) | System and method for monitoring the health of dialysis patients | |
| Simmons et al. | TSPO–PET imaging using [18F] PBR06 is a potential translatable biomarker for treatment response in Huntington’s disease: Preclinical evidence with the p75NTR ligand LM11A-31 | |
| JP6762529B2 (en) | Pathophysiology biomarkers of kidney disease | |
| JP5717128B2 (en) | Chromosomal dominant polycystic kidney determination method and prophylactic / therapeutic drug screening method | |
| JPWO2011136228A1 (en) | Markers for kidney disease diagnosis and use thereof | |
| Mitobe et al. | Clinical effects of calcium channel blockers and renin-angiotensin-aldosterone system inhibitors on changes in the estimated glomerular filtration rate in patients with polycystic kidney disease | |
| Maniaki et al. | Chronic kidney disease in cats and dogs: Managing proteinuria | |
| Wang et al. | Tubulointerstitial fibrosis of living donor kidneys associates with urinary monocyte chemoattractant protein 1 | |
| CN103097891A (en) | Method for testing the severity of an illness | |
| Kashani et al. | Proposal for a new classification of solutes of interest in uremia and hemodialysis | |
| JP5757626B2 (en) | A new marker for renal disease in humans | |
| Zhou et al. | Irisin and volume overload are associated with protein energy wasting in peritoneal dialysis patients | |
| JP2012112785A (en) | Evaluation method of dialysis membrane | |
| JP6883847B2 (en) | Method for measuring amyloid β protein and tau protein and / or phosphorylated tau protein | |
| JP6222629B2 (en) | Biomarkers for dysuria | |
| WO2022230870A1 (en) | Method for examining progression of chronic kidney disease in subject, and kit | |
| Abdollahzadeh Estakhri et al. | An investigation of the relationship between beta-2 microglobulin (β2M) and inflammatory factors (serum levels of CRP and albumin) and high density lipoproteins (HDL) in hemodialysis patients | |
| US20240241140A1 (en) | Method for examining progression of chronic kidney disease in subject, and kit | |
| Syme | Laboratory evaluation of renal disorders | |
| JP5069804B2 (en) | A method for determining the degree of progression in patients with amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and monitoring the progression | |
| Ansari et al. | Prospective study of thyroid functions in children with chronic kidney disease | |
| Miloševski-Lomić et al. | Integrated urinary biomarkers can predict early acute kidney injury in children undergoing chemotherapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130815 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20131211 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131212 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140121 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140818 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141009 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20150305 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20150311 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5717128 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |