JP5606672B2 - Intestinal environment adjustment method using symbiotics - Google Patents

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Description

本発明は、腸内の健康に有用とされるプロバイオティクスを特定のプレバイオティクスを併用することにより、プロバイオティクスの胃酸耐性が向上し、ヒトや動物の大腸に効率よく到達し定着率を向上させる、かつプロバイオティクスの保存安定性を向上させることできるシンバイオティクスおよびこれを添加した飲食品、飼料およびペットフードに関する。さらに詳しくは、分子量が分子量マーカーとしてプルランを用いた高速液体クロマトグラフィーによるゲルろ過で重量平均分子量が3〜50kDaと算出されるガラクトマンナンであるプレバイオティクスとプロバイオティクスを併用するシンバイオティクスおよびこれを添加した飲食品、飼料およびペットフードに関する。   The present invention improves the gastric acid resistance of probiotics by using probiotics that are useful for intestinal health in combination with specific prebiotics, efficiently reaching the colon of humans and animals, and the establishment rate The present invention relates to synbiotics that can improve the storage stability of probiotics, and foods and drinks, feeds and pet foods to which these are added. More specifically, a synbiotic using a prebiotic and a probiotic, which is a galactomannan having a weight average molecular weight of 3 to 50 kDa calculated by gel filtration by high performance liquid chromatography using pullulan as a molecular weight marker, and this The present invention relates to foods and drinks, feeds and pet foods to which is added.

プロバイオティクスとは、消化管内の細菌叢を改善して宿主に有益な作用をもたらし得る有用な微生物を意味している。プロバイオティクス機能を持つ微生物を摂取すると、それらが消化管内の細菌叢に作用し、細菌叢の健常化をはかりながら、疾病の予防・改善を行うことができると言われている。プロバイオティクスを応用した技術開発として、いくつかものが知られている(特許文献1)。   Probiotics means useful microorganisms that can improve the bacterial flora in the gastrointestinal tract and have beneficial effects on the host. It is said that when microorganisms having a probiotic function are ingested, they act on the bacterial flora in the gastrointestinal tract, and the disease can be prevented and ameliorated while the bacterial flora is healthy. There are several known technology developments that apply probiotics (Patent Document 1).

また、プレバイオティクスとは、上記プロバイオティクスに含まれる有用な細菌や常在の有用腸内細菌の増殖を助けて、腸内環境の改善を促進する物質のことを意味し、簡単に消化されない物質が多い。例えば、オリゴ糖、食物繊維などは、プレバイオティクスとして働く。オリゴ糖は、乳酸菌、ビフィズス菌などの栄養となり、食物繊維は、腸内細菌をとどめさせて、その増殖を助ける。プレバイオティクスを応用した技術開発として、いくつかのものが知られている(特許文献2)。
上記プロバイオティクスとプレバイオティクスとを組み合わせたものをシンバイオティクスと称しているが、このシンバイオティクスに関する技術開発については、十分に進んでいなかった。
Prebiotics mean substances that help the growth of useful bacteria and resident useful intestinal bacteria contained in the above probiotics and promote the improvement of the intestinal environment. There are many substances that are not used. For example, oligosaccharides, dietary fiber, etc. act as prebiotics. Oligosaccharides serve as nutrients for lactic acid bacteria, bifidobacteria, etc., and dietary fiber keeps intestinal bacteria and helps their growth. There are several known technology developments that apply prebiotics (Patent Document 2).
A combination of the above probiotics and prebiotics is referred to as synbiotics, but technical development related to the synbiotics has not been sufficiently advanced.

特開2008−109945号公報JP 2008-109945 A 特表2007−537224号公報Special Table 2007-537224

本発明は、上記課題に鑑みてなされたものであり、その目的はシンバイオティクスを利用した腸内環境調整方法を提供することである。   This invention is made | formed in view of the said subject, The objective is to provide the intestinal environment adjustment method using a synbiotic.

上記課題を解決するための発明に係る腸内環境調整方法は、(A)プレバイオティクスとして、加水分解されたグァーの胚乳部分であって、次の性質を含むもの、(1)プルランを分子量マーカーとして用いた高速液体クロマトグラフィーによるゲルろ過で重量平均分子量が3〜50kDaと算出されるガラクトマンナン、(2)ケルダール法により窒素含量を測定し、係数6.25を乗じて算出されたタンパク質含量が1.0%以下であるものと、(B)プロバイオティクスとして、ビィフィズス菌、乳酸菌、枯草菌、酪酸生成菌、乳酸利用菌、プロピオン酸生成菌の一種または二種以上からなり、さらに水分含量が20%以下であるもの、の両者を含有するシンバイオティクスを経口投与することにより、腸管内で乳酸及び糖類から酪酸を生じさせて腸内環境を整えることを特徴とする。
本発明において、前記加水分解されたグァーの胚乳部分が、次の性質を含むもの、(3)固形分含量15%水溶液の粘度が、回転式粘度計で回転数60rpm、20℃で測定したときに20mPa・s以下であるもの、であることが好ましい。
また、前記加水分解されたグァーの胚乳部分が、次の性質を含むもの、(4)分解物の固形物含量が1.0%水溶液99gに1.0gのポリオキシエチレン付加型界面活性剤(POE)を添加して測定した曇点が60℃以下であるもの、(5)(A)分解物1質量部に対して、1/5質量部のイソプロピルアルコールを加えてよく湿らせた後、激しくかき混ぜながら水10質量部加えた溶液(溶液(5−1))の粘度がB型粘度計で25℃、No.1ローター、12rpmで測定したときに20mPa・s以下、(B)溶液(5−1)を沸騰水中で10分間加熱し冷却後に同条件で測定した粘度が20mPa・s以下(溶液5−2)、(C)溶液(5−2)1質量部に5%ホウ酸ナトリウム水溶液1/5質量部を添加し、混和、放置したものを動的粘弾性測定装置で、25℃、1Hzでひずみ依存性測定をすると、線形領域で貯蔵弾性率(G‘)>損失弾性率(G’‘)かつ線形領域から非線形領域を示す測定曲線を得るものであることが好ましい。
また、さらにツバキ科植物成分を経口投与することが好ましい。
本発明におけるプロバイオティクスとは、宿主の腸管内で有益な作用を発揮する微生物であり、好ましくは乳酸菌、ビフィズス菌、糖化菌、枯草菌、酪酸生成菌、乳酸利用菌、プロピオン酸生成菌、酵母である。
The method for adjusting the intestinal environment according to the invention for solving the above-mentioned problems is as follows: (A) As a prebiotic, a hydrolyzed guar endosperm part having the following properties: (1) Pullulan having a molecular weight Galactomannan whose weight average molecular weight is calculated to be 3-50 kDa by gel filtration by high performance liquid chromatography used as a marker, (2) Protein content calculated by measuring nitrogen content by Kjeldahl method and multiplying by coefficient 6.25 1.0% or less, and (B) as a probiotic, it consists of one or more of bifidobacteria, lactic acid bacteria, Bacillus subtilis, butyric acid-producing bacteria, lactic acid-utilizing bacteria, and propionic acid-producing bacteria. Oral administration of symbiotics containing both of which content is 20% or less, and butyric acid from lactic acid and saccharides in the intestine Difference was characterized by arranging the intestinal environment.
In the present invention, the endosperm portion of the hydrolyzed guar has the following properties: (3) When the viscosity of a 15% solid content aqueous solution is measured with a rotary viscometer at 60 rpm and 20 ° C. It is preferably 20 mPa · s or less.
In addition, the hydrolyzed guar endosperm part has the following properties: (4) 1.0 g of polyoxyethylene addition type surfactant (99 g of aqueous solution containing 1.0% solids content of degradation product) The cloud point measured by adding POE) is 60 ° C. or less, (5) (A) 1 part by mass of decomposition product, 1/5 parts by mass of isopropyl alcohol is added and moistened well, The viscosity of a solution (solution (5-1)) added with 10 parts by mass of water while stirring vigorously was 25 ° C. with a B-type viscometer. 1 rotor, measured at 12 rpm, 20 mPa · s or less, (B) Solution (5-1) heated in boiling water for 10 minutes, cooled and measured under the same conditions, viscosity of 20 mPa · s or less (solution 5-2) , (C) 1/5 parts by mass of 5% aqueous sodium borate solution was added to 1 part by mass of solution (5-2), and the mixture was allowed to stand with a dynamic viscoelasticity measuring device at 25 ° C. and 1 Hz. When the measurement is performed, it is preferable that the storage elastic modulus (G ′)> loss elastic modulus (G ″) in the linear region and a measurement curve indicating the non-linear region from the linear region is obtained.
Furthermore, it is preferable to orally administer camellia plant components.
The probiotic in the present invention is a microorganism that exhibits a beneficial action in the intestinal tract of the host, preferably lactic acid bacteria, bifidobacteria, saccharifying bacteria, Bacillus subtilis, butyric acid producing bacteria, lactic acid utilizing bacteria, propionic acid producing bacteria, Yeast.

本発明における乳酸菌とは、乳酸桿菌および乳酸球菌であり、好ましくは、Lactobacillus属細菌、Streptococcus属細菌、Enterococcus属細菌、Lactococcus属細菌、Pediococcus属細菌およびLeuconostoc属細菌である。   The lactic acid bacteria in the present invention are Lactobacillus and Lactococcus, preferably Lactobacillus genus bacteria, Streptococcus genus bacteria, Enterococcus genus bacteria, Lactococcus genus bacteria, Pediococcus genus bacteria and Leuconostoc genus bacteria.

本発明におけるLactobacillus属細菌は、Lactobacillus acidophilus、 L.gasseri、 L.johnsonii、L.delbrueckii、L.delbrueckii subsp.bulgaricus、L.bulgaricus、L.helveticus、L.rhamnosus、L.casei、L.plantarum、L.reuteri、L.salivarius、L.sake、L.salivarius、L.cellobiosusおよびL.brevisが例示できる。   Lactobacillus genus bacteria in the present invention are Lactobacillus acidophilus, L. et al. gasseri, L.M. johnsonii, L.M. delbrueckii, L .; delbrueckii subsp. bulgaricus, L .; bulgaricus, L .; helveticus, L.H. rhamnosus, L .; casei, L .; plantarum, L .; reuteri, L.M. salivarius, L.M. sake, L.M. salivarius, L.M. cellobiosus and L. Brevis can be exemplified.

本発明におけるStreptococcus属細菌は、Streptococcus thermophilus、S.sanguis、S.mitis、S. pseudopneumoniae、S.pasteuri、S.parasanguinis、S.parasanguinis、S.salivarius、S.vestibularis、S.pasteuri、およびS.oralisが例示できる。
本発明におけるEnterococcus属細菌は、E.malodoratus、E.malodoratus、E.facialisおよびE.faceiumが例示できる。
The genus Streptococcus in the present invention is Streptococcus thermophilus, S. cerevisiae. sanguis, S .; mitis, S.M. pseudoneumoniae, S. p. pasturi, S .; parasanguinis, S. et al. parasanguinis, S. et al. salivarius, S.M. vestibularis, S .; pasturi, and S. p. oralis can be exemplified.
The Enterococcus bacterium in the present invention is E. coli. malodoratus, E.M. malodoratus, E.M. facialis and E.I. faceium can be exemplified.

本発明におけるLactococcus属細菌は、Lactococcus lactisおよびLactococcus lactis subsp.cremorisが例示できる。
本発明におけるPediococcus属細菌は、Pediococcus damnosusおよびP.acidilacticiが例示できる。
本発明におけるLeuconostoc属細菌は、L.mesenteroidesおよびL.sakeが例示できる。
The bacteria belonging to the genus Lactococcus in the present invention are Lactococcus lactis and Lactococcus lactis subsp. Cremoris can be exemplified.
Pediococcus genus bacteria in the present invention include Pediococcus damnosus and P. Acidilactici can be exemplified.
The genus Leuconostoc in the present invention is L. mesenteroides and L.M. An example is sake.

本発明におけるビィフィズス菌とは、Bifidobacterium属細菌のことを指す。好ましくは、Bifidobacterium bifidum、B.adolescentis、B.longum、B.infantis、B.breve、B.animalis、B.pseudolongum、B.thermophilum、B.boum、B.magunum、B.pullorum、B.catenulatum、B.suis、B.pseudocatenulatum、B.gallinarum、B.dentium、B.ruminantium、B.angulatum、B.merycicum、B.gallicum、B.saeculare、B.inopinatum、B.minimum、B.denticolens、B.subtile、B.coryneforme、B.cuniculi、B.asteroides、B.choerinumおよびB.indicumである。   The bifidobacteria in the present invention refers to a bacterium belonging to the genus Bifidobacterium. Preferably, Bifidobacterium bifidum, B.I. adolescentis, B.M. longum, B.M. infantis, B.M. breve, B.M. animalis, B. et al. pseudolongum, B.I. thermophilum, B.M. room, B.B. magunum, B.M. pullorum, B.I. catenatum, B. et al. suis, B.M. pseudocateulatum, B.I. gallinarum, B.I. denium, B.M. luminantium, B.M. angulatum, B.I. mericicum, B.M. gallicum, B.I. saeculare, B.I. inopinatum, B.I. minimum, B.M. denticolens, B.M. subtile, B.M. coryneform, B.M. cuniculi, B.M. asteroides, B.I. choerinum and B.E. indicum.

本発明における糖化菌とは、Bacillus mesentericusである。
本発明における枯草菌とは、Bacillus subtilis、好ましくは、Bacillus subtilis var. nattoである。
本発明における酪酸生成菌とは、Clostridium butyricumおよびT−RELP法による細菌解析でClostridium subcluster XIVaに分類される細菌である。
The saccharifying bacterium in the present invention is Bacillus mesentericus.
Bacillus subtilis in the present invention refers to Bacillus subtilis, preferably Bacillus subtilis var. NATTO.
The butyric acid-producing bacterium in the present invention is a bacterium classified as Clostridium subcluster XIVa by bacterial analysis by Clostridium butyricum and T-RELP method.

本発明におけるT−RELP法による細菌解析でClostridium subcluster XIVaに分類される細菌は、Eubacterium hallii、E.ramulus、E.rectale、E.ventriosumおよびRoseburia intestinalisが例示できる。   Bacteria classified as Clostridium subcluster XIVa in the bacterial analysis by the T-RELP method in the present invention are classified into Eubacterium halliii, E. et al. Ramulus, E.M. Rectale, E.I. Ventriosum and Roseburia intestinalis can be exemplified.

本発明における乳酸利用菌とは、Megasphaera elsdeniiである。
本発明におけるプロピオン酸生成菌とは、Propionibacterium属細菌のことであり、好ましくは、Propionibacterium freudenreichiiである。
The lactic acid-utilizing bacterium in the present invention is Megaphaera elsdenii.
The propionic acid-producing bacterium in the present invention is a genus Propionibacterium, and is preferably Propionibacterium fredenreichii.

本発明におけるガラクトマンナンとは、D−マンノースがβ−(1→4)結合したマンナン鎖を主鎖とし、D−マンノースのO−6位からα−ガラクトシル基が結合した櫛状の分岐構造を有し、分子量マーカーとしてプルランを用いた高速液体クロマトグラフィーによるゲルろ過で測定した重量平均分子量が3〜50kDaと算出される物質を指す。
本発明のガラクトマンナンのマンノース直鎖の鎖長は、30単位〜200単位の範囲内に80%以上分布している。
本発明のガラクトマンナンの5%水溶液の粘度は、ブルックフィールド粘度計を用いて5℃,60rpmで、Lowローターにて測定したときに5〜20mPa・sである。
The galactomannan in the present invention is a comb-like branched structure in which a main chain is a mannan chain in which D-mannose is β- (1 → 4) bonded, and an α-galactosyl group is bonded from the O-6 position of D-mannose. It has a weight average molecular weight measured by gel filtration by high performance liquid chromatography using pullulan as a molecular weight marker.
The chain length of the mannose straight chain of the galactomannan of the present invention is distributed 80% or more within the range of 30 units to 200 units.
The viscosity of a 5% aqueous solution of galactomannan of the present invention is 5 to 20 mPa · s when measured with a Low rotor at 5 ° C. and 60 rpm using a Brookfield viscometer.

本発明のガラクトマンナンの食物繊維含量は、AOAC 985.29に記載の酵素重量法により測定したときに65%以上である。
本発明のガラクトマンナンは、ガラクトマンナンを含有するマメ科植物種子の胚乳部分をヘミセルラーゼ製剤により酸性域で酵素的に加水分解することで得られた溶液の加水分解反応を停止させ、この溶液を遠心分離処理を行って未反応物を除去し、次いで精製処理、加熱殺菌処理及び冷却処理を行った後、中和処理を行うことによって得ることができる。
The dietary fiber content of the galactomannan of the present invention is 65% or more as measured by the enzyme gravimetric method described in AOAC 985.29.
The galactomannan of the present invention stops the hydrolysis reaction of the solution obtained by enzymatically hydrolyzing the endosperm portion of legume seeds containing galactomannan in the acidic region with a hemicellulase preparation. It can be obtained by carrying out a centrifugal separation treatment to remove unreacted substances, followed by a purification treatment, a heat sterilization treatment and a cooling treatment, followed by a neutralization treatment.

本発明のガラクトマンナンを含有するマメ科植物とは、グアー(Cyamopsis tetragonolobus)、イナゴマメ(Ceratonia siliqua)、ケンタッキー・コーヒーマメ(Gymnocladus dioica)、ムラサキウマゴヤシ(Medicago sativa)、クローバ(Trifolium pratense)、ダイズサヤ(Glycine hispida)、タラ(Actinidia callosa LINDLEY)、セスバニア(Sesbania bisibinonia)、カシア(Cassia tora Linn)およびフェヌグリーク(Trigonella foenum graecum L)が例示でき、資源の豊富さと味の観点からグアー(Cyamopsis tetragonolobus)、フェヌグリーク(Trigonella foenum graecum L)及びイナゴマメ(Ceratonia siliqua)が好ましく、最も好ましくはグアー(Cyamopsis tetragonolobus)である。   Leguminous plants containing the galactomannan of the present invention include guar (Cyamopsis tetragonolobus), locust bean (Ceratonia siliqua), Kentucky coffee bean (Gymnocladus dioica), and purple peas (Medica pea). Glycine hispida), cod (Actinida callosa LINDLEY), Sesbania (Sesbania bibinionia), Cassia (Cassia tora Linn) and fenugreek (Trigonella fonumum) s tetragonolobus, Fenugreek (Trigonella foenum graecum L) and carob bean (Ceratonia siliqua) are preferred, and most preferred are gua (Cyamopsis tetragonolobus).

本発明のガラクトマンナンを得るときに実施される加水分解反応で用いるヘミセルラーゼ製剤は、ガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ及びβ−マンノシダーゼを含有し、それら酵素の比活性の割合が1〜100:1:0〜0.5、もしくはガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ、酸性プロテアーゼ及びβ−マンノシダーゼを含有し、それら酵素の比活性の割合が1〜100:1:0〜0.15:0〜0.5、もしくはガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ、酸性プロテアーゼ及びβ−マンノシダーゼを含有し、それら酵素の比活性の割合が1〜10:1:0〜0.05:0〜0.5である。ここで、本発明で酵素として用いるβ−ガラクトマンナナーゼの比活性とは、β−ガラクトマンナナーゼがガラクトマンナンであるローカストビーンガムに37℃、pH5.0で作用するとき、反応初期の1分間に1マイクロモルのマンノースに相当する還元力の増加をもたらす試料1g中の酵素量のことを指す。β−ガラクトマンナナーゼの分子量は、SDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動後にクーマシーブルー染色(CBB染色)した結果、20kDa〜60kDaを示すことがよい。当該分子量のより好ましい範囲は30kDa〜50kDaであり、最も好ましい範囲は35kDa〜45kDaである。   The hemicellulase preparation used in the hydrolysis reaction carried out when obtaining the galactomannan of the present invention contains galactomannanase, α-galactosidase and β-mannosidase, and the ratio of specific activities of these enzymes is 1 to 100: 1: 0 to 0.5, or galactomannanase, α-galactosidase, acid protease and β-mannosidase, the ratio of specific activities of these enzymes being 1 to 100: 1: 0 to 0.15: 0 to 0.5, Alternatively, it contains galactomannanase, α-galactosidase, acid protease and β-mannosidase, and the ratio of the specific activities of these enzymes is 1 to 10: 1: 0 to 0.05: 0 to 0.5. Here, the specific activity of β-galactomannanase used as an enzyme in the present invention is 1 per minute at the beginning of the reaction when β-galactomannanase acts on locust bean gum, which is galactomannan, at 37 ° C. and pH 5.0. It refers to the amount of enzyme in 1 g of sample that causes an increase in reducing power corresponding to micromolar mannose. The molecular weight of β-galactomannanase is preferably 20 kDa to 60 kDa as a result of Coomassie blue staining (CBB staining) after SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The more preferable range of the molecular weight is 30 kDa to 50 kDa, and the most preferable range is 35 kDa to 45 kDa.

本発明で酵素として用いるα−ガラクトシダーゼの比活性とは、当該α−ガラクトシダーゼがp−ニトロフェニル−α−ガラクシドに37℃、pH5.5で作用するとき、反応初期の1分間に1マイクロモルのp−ニトロフェニルを遊離する試料1g中の酵素量のことを指す。
本発明で酵素として使用する酸性プロテアーゼの比活性とは、当該酸性プロテアーゼが乳製カゼインに30℃、pH3.0で作用するとき、反応初期の1分間に1マイクログラムのチロシンに相当する非蛋白性のフォリン試液呈色物質の増加をもたらす試料1g中の酵素量のことを指す。
本発明で酵素として使用するβ−マンノシダーゼの比活性とは、当該β−マンノシダーゼがp−ニトロフェニル−β−マンノシドに37℃、pH5.5で作用するとき、反応初期の1分間に1マイクロモルのp−ニトロフェニルを遊離する試料1g中の酵素量のことを指す。
The specific activity of α-galactosidase used as an enzyme in the present invention means that when the α-galactosidase acts on p-nitrophenyl-α-galacside at 37 ° C. and pH 5.5, 1 micromole per minute at the beginning of the reaction. It refers to the amount of enzyme in 1 g of sample that liberates p-nitrophenyl.
The specific activity of the acidic protease used as an enzyme in the present invention is a non-protein equivalent to 1 microgram of tyrosine in 1 minute of the initial reaction when the acidic protease acts on dairy casein at 30 ° C. and pH 3.0. It refers to the amount of enzyme in 1 g of a sample that causes an increase in the sex forin test solution color substance.
The specific activity of β-mannosidase used as an enzyme in the present invention is defined as 1 micromole per minute at the beginning of the reaction when the β-mannosidase acts on p-nitrophenyl-β-mannoside at 37 ° C. and pH 5.5. It refers to the amount of enzyme in 1 g of sample that liberates p-nitrophenyl.

本発明のガラクトマンナンを得るときに実施される加水分解反応で用いるヘミセルラーゼ製剤は、Penicillium属細菌、Streptomyces属細菌、Enterococcus属細菌、Vibrio属細菌、Aeromonas属細菌、Bacillus属細菌、Clostridium属細菌、Aspergillus属カビ、Rhizopus属カビ及びTricohderma属酵母の微生物群から選択される少なくとも1種に由来し、例えば、Penicillium属細菌はP.purpurogenam、Enterococcus属細菌はE.caseliflavas、Clostridium属細菌はC.tertium、Aspergillus属カビはA.niger、Rhizopus属カビはR.niveus、Tricohderma属酵母はT.reeseiが、それぞれ例示できる。   The hemicellulase preparation used in the hydrolysis reaction carried out when obtaining the galactomannan of the present invention is a Penicillium bacterium, Streptomyces bacterium, Enterococcus bacterium, Vibrio genus bacteria, Aeromonas genus bacteria, Bacillus genus bacteria, Clostridium genus bacteria, Aspergillus is derived from at least one species selected from the group of microorganisms of the genus Aspergillus, Rhizopus and Trichohderma. purpurogenam, Enterococcus spp. caseliflavas, Clostridium spp. tertium, Aspergillus sp. niger, Rhizopus sp. niveus, Trichoderma yeasts are T. cerevisiae. reesei can be illustrated respectively.

本発明のガラクトマンナンを得るときに実施される加水分解反応における酸性域は、pH2.0〜pH6.0である。
本発明のガラクトマンナンを得るときに実施される加水分解反応における温度および反応時間は、50℃〜80℃で8時間〜24時間、または60℃〜80℃で3時間〜12時間である。
本発明のガラクトマンナンを得るときに実施される加水分解反応の停止は、特に限定されないが、85℃以上で15分間〜60分間加熱が好ましい。
The acidic range in the hydrolysis reaction carried out when obtaining the galactomannan of the present invention is pH 2.0 to pH 6.0.
The temperature and reaction time in the hydrolysis reaction carried out when obtaining the galactomannan of the present invention is 50 to 80 ° C. for 8 to 24 hours, or 60 to 80 ° C. for 3 to 12 hours.
Although the stop of the hydrolysis reaction carried out when obtaining the galactomannan of the present invention is not particularly limited, heating at 85 ° C. or higher for 15 minutes to 60 minutes is preferable.

本発明のツバキ科植物成分とは、水、アルコール、酢酸エチル、石油エーテル等の有機溶媒による溶剤抽出、水蒸気蒸留、圧搾、油脂吸着、液化ガス抽出、超臨界抽出、乾留により得られる成分を指す。好ましくは抽出効率の観点から溶剤抽出、最も好ましくは水及び酢酸エチルによる溶剤抽出である。このようにして得られた抽出物は、必要に応じて吸着樹脂、濾過膜等により精製しても問題はない。例えば、茶の場合では酢酸エチルにより抽出して得られたポリフェノール化合物を用いることも可能である。緑茶の場合、生葉又は乾燥葉から(+)−カテキン、(+)−ガロカテキン、(−)−ガロカテキンガレート、(−)−エピカテキン、(−)−エピカテキンガレート、(−)−エピガロカテキン、(−)−エピガロカテキンガレートのポリフェノール化合物が抽出され、これらポリフェノール化合物の1種または2種以上の混合物として用いることができが、好ましくは(−)−ガロカテキンガレート、(−)−エピカテキンガレート、(−)−エピガロカテキンガレートの1種または2種以上の混合物として用いることができる。単独で用いる場合、(+)−カテキン、(+)−ガロカテキン、(−)−ガロカテキンガレート、(−)−エピカテキン、(−)−エピカテキンガレート、(−)−エピガロカテキン又は(−)−エピガロカテキンガレートが好ましく、さらに好ましくは、(−)−エピガロカテキンガレート、(−)−エピカテキンガレート又は(−)−ガロカテキンガレートであり、最も好ましくは、(−)−エピガロカテキンガレートである。   The camellia plant component of the present invention refers to a component obtained by solvent extraction with water, alcohol, ethyl acetate, petroleum ether or other organic solvent, steam distillation, pressing, oil adsorption, liquefied gas extraction, supercritical extraction, dry distillation. . Solvent extraction is preferable from the viewpoint of extraction efficiency, and solvent extraction with water and ethyl acetate is most preferable. The extract obtained in this manner can be purified with an adsorbent resin, a filtration membrane, or the like, if necessary. For example, in the case of tea, it is possible to use a polyphenol compound obtained by extraction with ethyl acetate. In the case of green tea, (+)-catechin, (+)-gallocatechin, (−)-gallocatechin gallate, (−)-epicatechin, (−)-epicatechin gallate, (−)-epigaro from fresh or dried leaves A polyphenol compound of catechin and (−)-epigallocatechin gallate is extracted and can be used as one or a mixture of two or more of these polyphenol compounds, preferably (−)-gallocatechin gallate, (−) — Epicatechin gallate and (-)-epigallocatechin gallate can be used as one kind or a mixture of two or more kinds. When used alone, (+)-catechin, (+)-gallocatechin, (-)-gallocatechin gallate, (-)-epicatechin, (-)-epicatechin gallate, (-)-epigallocatechin or (- ) -Epigallocatechin gallate is preferred, more preferably (-)-epigallocatechin gallate, (-)-epicatechin gallate or (-)-gallocatechin gallate, most preferably (-)-epigallocategalate. Catechin gallate.

実施例1
A.nigerを所定期間培養し、加水分解反応に用いる酵素群をあらかじめ採取しておいた。このようにして採取したA. niger由来の酵素群は、β−ガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ、酸性プロテアーゼ及びβ−マンノシダーゼの混合物であった。
次に、水900部に塩酸を加えてpHを4.5に調整した後、その水に上記の酵素群0.2部とグアー豆(Cyamopsis tetragonolobus)の胚乳100部とを添加混合し、55℃〜65℃で24時間酵素を作用させ、酵素的に加水分解した。
次に、反応液を90℃,30分間加熱することにより酵素を失活させ、加水分解反応を停止させた。
Example 1
A. Niger was cultured for a predetermined period, and an enzyme group used for the hydrolysis reaction was collected in advance. A. collected in this manner. The enzyme group derived from niger was a mixture of β-galactomannanase, α-galactosidase, acid protease and β-mannosidase.
Next, after adding hydrochloric acid to 900 parts of water to adjust the pH to 4.5, 0.2 parts of the above enzyme group and 100 parts of guar bean (Cyamopsis tetragonolobus) endosperm were added to and mixed with the water. The enzyme was allowed to act for 24 hours at a temperature between 65 ° C. and 65 ° C., and hydrolyzed enzymatically.
Next, the enzyme was deactivated by heating the reaction solution at 90 ° C. for 30 minutes to stop the hydrolysis reaction.

次に、加水分解物を含む反応液を遠心分離装置(石川島播磨重工業社製、商品名HS−50L)で3000rpm,供給量6m/hで遠心分離処理し、反応液を未反応物と清澄液とに分離させるとともに、清澄液のみを採取した。
次に、採取した溶液(清澄液)に珪藻土系濾過助剤及び活性炭を添加して60分間攪拌した後、第1濾過手段である濾過装置(昭和製作所社製、商品名202B、濾過圧:250kg/cm)を用いて濾過する粗精製を行った。その結果、前記溶液中に含まれる不純物をある程度吸着除去した。さらに、粗精製された前記溶液に珪藻土系濾過助剤のみを添加して60分間攪拌した後、第1濾過手段よりも目の細かい第2濾過手段である精密濾過装置(中央製作所社製、商品名FS−50B、流量:300L/h)を用いて濾過する本精製を行った。その結果、前記溶液中に含まれる不純物をほぼ完全に吸着除去し、本発明のガラクトマンナンを含有する無色透明で臭いのない溶液を得た。
Next, the reaction solution containing the hydrolyzate is centrifuged at 3000 rpm with a supply rate of 6 m 3 / h using a centrifuge (trade name HS-50L, manufactured by Ishikawajima-Harima Heavy Industries Co., Ltd.), and the reaction solution is clarified with unreacted substances. Only the clear liquid was collected.
Next, after adding a diatomaceous earth filter aid and activated carbon to the collected solution (clarified liquid) and stirring for 60 minutes, a filtration device (trade name 202B, manufactured by Showa Seisakusho Co., Ltd., filtration pressure: 250 kg, which is the first filtration means) / Cm 2 ), and crude purification was performed. As a result, the impurities contained in the solution were removed by adsorption to some extent. Furthermore, after adding only a diatomaceous earth filter aid to the roughly purified solution and stirring for 60 minutes, a microfiltration device (manufactured by Chuo Seisakusho Co., Ltd., which is a second filtration means finer than the first filtration means) This purification was carried out using No. FS-50B, flow rate: 300 L / h). As a result, the impurities contained in the solution were almost completely adsorbed and removed to obtain a colorless, transparent and odorless solution containing the galactomannan of the present invention.

次に、UHT殺菌装置(日阪製作所社製、商品名FX−05)を用いて、前記溶液をUHT殺菌処理しかつ直ちに強制冷却した。なお、この処理では、入り口温度を140℃に設定し、出口温度を4℃に設定し、殺菌時間を4秒に設定した。
次に、pHが酸性域に保持されていた溶液をNaOHで中和してpH=約7.0にした。
さらに、得られた中性の溶液を遠心式薄膜濃縮装置(アルファ・ラバル社製、商品名CT−6)を用いて固形分として20%になるように所定時間減圧濃縮した。
Next, the solution was subjected to UHT sterilization using a UHT sterilizer (trade name FX-05, manufactured by Nisaka Manufacturing Co., Ltd.) and immediately forcedly cooled. In this process, the inlet temperature was set to 140 ° C., the outlet temperature was set to 4 ° C., and the sterilization time was set to 4 seconds.
Next, the solution whose pH was maintained in the acidic range was neutralized with NaOH to pH = about 7.0.
Further, the obtained neutral solution was concentrated under reduced pressure for a predetermined time using a centrifugal thin film concentration apparatus (trade name CT-6, manufactured by Alfa Laval Co., Ltd.) so that the solid content was 20%.

その後、噴霧乾燥装置(大川原化工機社製、商品名OC−35)を用いて90分間噴霧乾燥を行い、本発明のガラクトマンナンの白色粉末70部を得た。
そして、得られた粉末状のガラクトマンナンをサンプルとして下記の測定を行った。具体的には、カラムにG3000PW(東ソー株式会社製)を充填したものを固定相として用い、高速液体クロマトグラフィーを行った。このような測定の結果、マンナン主鎖の糖鎖の80%以上はマンノースの重合度が30〜40単位の範囲内に包含されていた。なお、このとき糖鎖単位の標準試薬として、グルコース重合度が既知の直鎖デキストリン(グルコースの重合度:50,100,150)を用いた。
本実施例のガラクトマンナンの重量平均分子量、食物繊維含量、5%溶液の粘度を測定したところ、重量平均分子量が20kDa、食物繊維含量が82%、粘度が8mPa・sであった。
本実施例のガラクトマンナン0.4gにイソプロピルアルコール0.08mlを加えてよく湿らした後、厳しくかき混ぜながら水4mlを加え、更に均一に分散するまで激しくかき混ぜ、粘度を測定した(均一分散後)。また、この液を沸騰した水浴上で約10分間加熱した後に粘度を測定した(10分加熱冷却後)。粘度計はB型粘度計を用い、ローター番号は No.1、測定温度は25℃および粘度計の回転数は12rpmとした。均一分散後の粘度は7.4mPa・sであり、10分加熱冷却後粘度は7.4mPa・sであった。
Thereafter, spray drying was performed for 90 minutes using a spray drying apparatus (trade name OC-35, manufactured by Okawara Chemical Industries Co., Ltd.) to obtain 70 parts of white powder of galactomannan of the present invention.
Then, the following measurement was performed using the obtained powdery galactomannan as a sample. Specifically, high-performance liquid chromatography was performed using a column packed with G3000PW (manufactured by Tosoh Corporation) as a stationary phase. As a result of such measurement, 80% or more of the sugar chains of the mannan main chain were included in the range of 30 to 40 units of mannose polymerization. At this time, a linear dextrin having a known degree of glucose polymerization (degree of polymerization of glucose: 50, 100, 150) was used as a standard reagent for the sugar chain unit.
When the weight average molecular weight, dietary fiber content, and viscosity of a 5% solution of the galactomannan of this example were measured, the weight average molecular weight was 20 kDa, the dietary fiber content was 82%, and the viscosity was 8 mPa · s.
To 0.4 g of galactomannan of this example, 0.08 ml of isopropyl alcohol was added and moistened well, then 4 ml of water was added while stirring vigorously, and stirred vigorously until evenly dispersed, and the viscosity was measured (after uniform dispersion). The viscosity of the solution was measured after heating for about 10 minutes on a boiling water bath (after heating and cooling for 10 minutes). The viscometer used was a B-type viscometer, the rotor number was No. 1, the measurement temperature was 25 ° C., and the rotation speed of the viscometer was 12 rpm. The viscosity after uniform dispersion was 7.4 mPa · s, and the viscosity after heating and cooling for 10 minutes was 7.4 mPa · s.

10分加熱冷却後の溶液3.5mlに5%ホウ酸ナトリウム溶液0.7mlを加え、混和して放置し、動的粘弾性の歪依存性測定に供した。尚、試験装置は、動的粘弾性物性計測装置ARES(T.Aインスツルメンツ株式会社製)を用いた。測定温度は25℃、および測定周波数は1.0Hzとした。その結果、図1に示したように、線形領域で貯蔵弾性率(G‘)>損失弾性率(G’‘)かつ線形領域から非線形領域を示す測定曲線が得られた。   To 3.5 ml of the solution after heating and cooling for 10 minutes, 0.7 ml of a 5% sodium borate solution was added, mixed and allowed to stand, and subjected to strain dependence measurement of dynamic viscoelasticity. In addition, the dynamic viscoelastic property measuring device ARES (made by TA Instruments Co., Ltd.) was used for the test apparatus. The measurement temperature was 25 ° C., and the measurement frequency was 1.0 Hz. As a result, as shown in FIG. 1, a storage curve (G ′)> loss elastic modulus (G ″) in a linear region and a measurement curve indicating a non-linear region from the linear region was obtained.

実施例2
A.nigerを所定期間培養し、加水分解反応に用いる酵素群をあらかじめ採取しておいた。このようにして採取したA.niger由来の酵素群は、β−ガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ、酸性プロテアーゼ及びβ−マンノシダーゼの混合物であった。
次に、水900部に塩酸を加えてpHを4.5に調整した後、その水に上記の酵素群0.1部とグアー豆(C.tetragonolobus)の胚乳100部とを添加混合し、70℃〜75℃で8時間酵素を作用させた。この後、実施例1と同様の方法を実施し、本発明のガラクトマンナンの白色粉末70部を得た。
Example 2
A. Niger was cultured for a predetermined period, and an enzyme group used for the hydrolysis reaction was collected in advance. A. collected in this manner. The enzyme group derived from niger was a mixture of β-galactomannanase, α-galactosidase, acid protease and β-mannosidase.
Next, hydrochloric acid was added to 900 parts of water to adjust the pH to 4.5, and 0.1 parts of the above enzyme group and 100 parts of guar bean (C. tetragonolobus) endosperm were added to and mixed with the water. The enzyme was allowed to act at 70 ° C to 75 ° C for 8 hours. Thereafter, the same method as in Example 1 was performed to obtain 70 parts of white powder of galactomannan of the present invention.

得られた粉末状のガラクトマンナンについて、実施例1と同様の測定及び評価を行った。その結果、マンナン主鎖の糖鎖の80%以上は、マンノースの重合度が30〜40単位の範囲内に包含されていた。また、本実施例のガラクトマンナンの重量平均分子量は16kDa、食物繊維含量は76%、5%水溶液の粘度は5mPa・s、であった。   About the obtained powdery galactomannan, the same measurement and evaluation as Example 1 were performed. As a result, 80% or more of the sugar chains of the mannan main chain were included in the range of 30 to 40 units of mannose polymerization. Further, the galactomannan of this example had a weight average molecular weight of 16 kDa, a dietary fiber content of 76%, and a 5% aqueous solution having a viscosity of 5 mPa · s.

本実施例のガラクトマンナン0.4gにイソプロピルアルコール0.08mlを加えてよく湿らした後、厳しくかき混ぜながら水4mlを加え、更に均一に分散するまで激しくかき混ぜ、粘度を測定した(均一分散後)。また、この液を沸騰した水浴上で約10分間加熱した後に粘度を測定した(10分加熱冷却後)。粘度計はB型粘度計を用い、ローター番号は No.1、測定温度は25℃および粘度計の回転数は12rpmとした。均一分散後の粘度は4.9mPa・sであり、10分加熱冷却後粘度は5.1mPa・sであった。   To 0.4 g of galactomannan of this example, 0.08 ml of isopropyl alcohol was added and moistened well, then 4 ml of water was added while stirring vigorously, and stirred vigorously until evenly dispersed, and the viscosity was measured (after uniform dispersion). The viscosity of the solution was measured after heating for about 10 minutes on a boiling water bath (after heating and cooling for 10 minutes). The viscometer used was a B-type viscometer, the rotor number was No. 1, the measurement temperature was 25 ° C., and the viscosity of the viscometer was 12 rpm. The viscosity after uniform dispersion was 4.9 mPa · s, and the viscosity after heating and cooling for 10 minutes was 5.1 mPa · s.

10分加熱冷却後の溶液3.5mlに5%ホウ酸ナトリウム溶液0.7mlを加え、混和して放置し、動的粘弾性の歪依存性測定に供した。尚、試験装置は、動的粘弾性物性計測装置ARES(T.Aインスツルメンツ株式会社製)を用いた。測定温度は25℃、および測定周波数は1.0Hzとした。その結果、図2に示したように、線形領域で貯蔵弾性率(G‘)>損失弾性率(G’‘)かつ線形領域から非線形領域を示す測定曲線が得られた。   To 3.5 ml of the solution after heating and cooling for 10 minutes, 0.7 ml of a 5% sodium borate solution was added, mixed and allowed to stand, and subjected to strain dependence measurement of dynamic viscoelasticity. In addition, the dynamic viscoelastic property measuring device ARES (made by TA Instruments Co., Ltd.) was used for the test apparatus. The measurement temperature was 25 ° C., and the measurement frequency was 1.0 Hz. As a result, as shown in FIG. 2, a storage curve (G ′)> loss elastic modulus (G ″) in the linear region and a measurement curve indicating the non-linear region from the linear region was obtained.

比較例1
A.nigerを所定期間培養し、加水分解反応に用いる酵素群をあらかじめ採取しておいた。このようにして採取したA.niger由来の酵素群は、β−ガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ、酸性プロテアーゼ及びβ−マンノシダーゼの混合物であった。
次に、水900部に塩酸を加えてpHを4.5に調整した後、その水に上記の酵素群0.2部とグアー豆(C.tetragonolobus)の胚乳100部とを添加混合し、55℃〜65℃で72時間酵素を作用させ、酵素的に加水分解した。
Comparative Example 1
A. Niger was cultured for a predetermined period, and an enzyme group used for the hydrolysis reaction was collected in advance. A. collected in this manner. The enzyme group derived from niger was a mixture of β-galactomannanase, α-galactosidase, acid protease and β-mannosidase.
Next, hydrochloric acid was added to 900 parts of water to adjust the pH to 4.5, and then 0.2 parts of the enzyme group and 100 parts of guar beans (C. tetragonolobus) endosperm were added to and mixed with the water. The enzyme was allowed to act at 55 ° C to 65 ° C for 72 hours and hydrolyzed enzymatically.

次に、反応液を90℃,30分間加熱することにより酵素を失活させ、加水分解反応を停止させた。
次に、加水分解物を含む反応液を遠心分離装置(石川島播磨重工業社製、商品名HS−50L)で3000rpm,供給量6m/hで遠心分離処理し、反応液を未反応物と清澄液とに分離させるとともに、清澄液のみを採取した。
次に、採取した溶液(清澄液)に珪藻土系濾過助剤及び活性炭を添加して60分間攪拌した後、第1濾過手段である濾過装置(昭和製作所社製、商品名202B、濾過圧:250kg/cm)を用いて濾過する粗精製を行った。その結果、前記溶液中に含まれる不純物をある程度吸着除去した。さらに、粗精製された前記溶液に珪藻土系濾過助剤のみを添加して60分間攪拌した後、第1濾過手段よりも目の細かい第2濾過手段である精密濾過装置(中央製作所社製、商品名FS−50B、流量:300L/h)を用いて濾過した。その結果、前記溶液中に含まれる不純物をほぼ完全に吸着除去した。
Next, the enzyme was deactivated by heating the reaction solution at 90 ° C. for 30 minutes to stop the hydrolysis reaction.
Next, the reaction solution containing the hydrolyzate is centrifuged at 3000 rpm with a supply rate of 6 m 3 / h using a centrifuge (trade name HS-50L, manufactured by Ishikawajima-Harima Heavy Industries Co., Ltd.), and the reaction solution is clarified with unreacted substances. Only the clear liquid was collected.
Next, after adding a diatomaceous earth filter aid and activated carbon to the collected solution (clarified liquid) and stirring for 60 minutes, a filtration device (trade name 202B, manufactured by Showa Seisakusho Co., Ltd., filtration pressure: 250 kg, which is the first filtration means) / Cm 2 ), and crude purification was performed. As a result, the impurities contained in the solution were removed by adsorption to some extent. Furthermore, after adding only a diatomaceous earth filter aid to the roughly purified solution and stirring for 60 minutes, a microfiltration device (manufactured by Chuo Seisakusho Co., Ltd., which is a second filtration means finer than the first filtration means) No. FS-50B, flow rate: 300 L / h). As a result, the impurities contained in the solution were almost completely adsorbed and removed.

次に、UHT殺菌装置(日阪製作所社製、商品名FX−05)を用いて、前記溶液をUHT殺菌処理しかつ直ちに強制冷却した。なお、この処理では、入り口温度を140℃に設定し、出口温度を4℃に設定し、殺菌時間を4秒に設定した。
次に、pHが酸性域に保持されていた溶液をNaOHで中和してpH=約7.0にした。
さらに、得られた中性の溶液を遠心式薄膜濃縮装置(アルファ・ラバル社製、商品名CT−6)を用いて固形分として20%になるように所定時間減圧濃縮した。濃縮液を陰イオンカラムクロマトグラフィーおよび陽イオンカラムクロマトグラフィー処理し、除タンパク処理した。
その後、噴霧乾燥装置(大川原化工機社製、商品名OC−35)を用いて90分間噴霧乾燥を行い、比較品の白色粉末65部を得た。
Next, the solution was subjected to UHT sterilization using a UHT sterilizer (trade name FX-05, manufactured by Nisaka Manufacturing Co., Ltd.) and immediately forcedly cooled. In this process, the inlet temperature was set to 140 ° C., the outlet temperature was set to 4 ° C., and the sterilization time was set to 4 seconds.
Next, the solution whose pH was maintained in the acidic range was neutralized with NaOH to pH = about 7.0.
Further, the obtained neutral solution was concentrated under reduced pressure for a predetermined time using a centrifugal thin film concentration apparatus (trade name CT-6, manufactured by Alfa Laval Co., Ltd.) so that the solid content was 20%. The concentrate was subjected to anion column chromatography and cation column chromatography to remove proteins.
Thereafter, spray drying was performed for 90 minutes using a spray drying apparatus (trade name OC-35, manufactured by Okawara Chemical Industries Co., Ltd.) to obtain 65 parts of a white powder as a comparative product.

そして、得られた粉末状のガラクトマンナンをサンプルとして下記の測定を行った。具体的には、カラムにG3000PW(東ソー株式会社製)を充填したものを固定相として用い、高速液体クロマトグラフィーを行った。このような測定の結果、マンナン主鎖の糖鎖の80%以上はマンノースの重合度が30〜40単位の範囲内に包含されていなかった。なお、このとき糖鎖単位の標準試薬として、グルコース重合度が既知の直鎖デキストリン(グルコースの重合度:50,100,150)を用いた。   Then, the following measurement was performed using the obtained powdery galactomannan as a sample. Specifically, high-performance liquid chromatography was performed using a column packed with G3000PW (manufactured by Tosoh Corporation) as a stationary phase. As a result of such measurement, 80% or more of the sugar chains of the mannan main chain were not included within the range of 30 to 40 units of mannose polymerization. At this time, a linear dextrin having a known degree of glucose polymerization (degree of polymerization of glucose: 50, 100, 150) was used as a standard reagent for the sugar chain unit.

本比較例のガラクトマンナンの重量平均分子量、食物繊維含量、5%溶液の粘度を測定したところ、重量平均分子量が1.5kDa、食物繊維含量が54%、粘度が3mPa・sであった。   When the weight average molecular weight, dietary fiber content, and viscosity of a 5% solution of the galactomannan of this comparative example were measured, the weight average molecular weight was 1.5 kDa, the dietary fiber content was 54%, and the viscosity was 3 mPa · s.

本比較例のガラクトマンナン0.4gにイソプロピルアルコール0.08mlを加えてよく湿らした後、厳しくかき混ぜながら水4mlを加え、更に均一に分散するまで激しくかき混ぜ、粘度を測定した(均一分散後)。また、この液を沸騰した水浴上で約10分間加熱した後に粘度を測定した(10分加熱冷却後)。粘度計はB型粘度計を用い、ローター番号は No.1、測定温度は25℃および粘度計の回転数は12rpmとした。均一分散後の粘度は2.5mPa・sであり、10分加熱冷却後粘度は2.3mPa・sであった。
10分加熱冷却後の溶液3.5mlに5%ホウ酸ナトリウム溶液0.7mlを加え、混和して放置し、動的粘弾性の歪依存性測定を供しようとしたところ、この溶液はゲル状態を呈しないために、測定することは不可能であった。このことより本発明のガラクトマンナンとは異なる性質のものであった。
0.04 ml of isopropyl alcohol was added to 0.4 g of the galactomannan of this comparative example and moistened well. Then, 4 ml of water was added while stirring vigorously, and stirred vigorously until evenly dispersed, and the viscosity was measured (after uniform dispersion). The viscosity of the solution was measured after heating for about 10 minutes on a boiling water bath (after heating and cooling for 10 minutes). The viscometer used was a B-type viscometer, the rotor number was No. 1, the measurement temperature was 25 ° C., and the rotation speed of the viscometer was 12 rpm. The viscosity after uniform dispersion was 2.5 mPa · s, and the viscosity after heating and cooling for 10 minutes was 2.3 mPa · s.
When 0.7 ml of 5% sodium borate solution was added to 3.5 ml of the solution after heating and cooling for 10 minutes, the mixture was allowed to stand and subjected to strain dependence measurement of dynamic viscoelasticity. It was impossible to measure because From this, it was a thing different from the galactomannan of this invention.

比較例2
A.nigerを所定期間培養し、加水分解反応に用いる酵素群をあらかじめ採取しておいた。このようにして採取したA.niger由来の酵素群は、β−ガラクトマンナナーゼ、α−ガラクトシダーゼ、酸性プロテアーゼ及びβ−マンノシダーゼの混合物であった。
次に、水900部に塩酸を加えてpHを4.5に調整した後、その水に上記の酵素群0.2部とグアー豆(C.tetragonolobus)の胚乳100部とを添加混合し、55℃〜65℃で3時間酵素を作用させ、酵素的に加水分解した。
Comparative Example 2
A. Niger was cultured for a predetermined period, and an enzyme group used for the hydrolysis reaction was collected in advance. A. collected in this manner. The enzyme group derived from niger was a mixture of β-galactomannanase, α-galactosidase, acid protease and β-mannosidase.
Next, hydrochloric acid was added to 900 parts of water to adjust the pH to 4.5, and then 0.2 parts of the enzyme group and 100 parts of guar beans (C. tetragonolobus) endosperm were added to and mixed with the water. The enzyme was allowed to act at 55 ° C. to 65 ° C. for 3 hours to hydrolyze enzymatically.

次に、反応液を90℃,30分間加熱することにより酵素を失活させ、加水分解反応を停止させた。
次に、加水分解物を含む反応液を遠心分離装置(石川島播磨重工業社製、商品名HS−50L)で3000rpm,供給量6m/hで遠心分離処理し、反応液を未反応物と清澄液とに分離させるとともに、清澄液のみを採取した。
Next, the enzyme was deactivated by heating the reaction solution at 90 ° C. for 30 minutes to stop the hydrolysis reaction.
Next, the reaction solution containing the hydrolyzate is centrifuged at 3000 rpm with a supply rate of 6 m 3 / h using a centrifuge (trade name HS-50L, manufactured by Ishikawajima-Harima Heavy Industries Co., Ltd.), and the reaction solution is clarified with unreacted substances. Only the clear liquid was collected.

次に、採取した溶液(清澄液)に珪藻土系濾過助剤及び活性炭を添加して60分間攪拌した後、第1濾過手段である濾過装置(昭和製作所社製、商品名202B、濾過圧:250kg/cm)を用いて濾過する粗精製を行った。その結果、前記溶液中に含まれる不純物をある程度吸着除去した。さらに、粗精製された前記溶液に珪藻土系濾過助剤のみを添加して60分間攪拌した後、第1濾過手段よりも目の細かい第2濾過手段である精密濾過装置(中央製作所社製、商品名FS−50B、流量:300L/h)を用いて濾過した。その結果、前記溶液中に含まれる不純物をほぼ完全に吸着除去した。 Next, after adding a diatomaceous earth filter aid and activated carbon to the collected solution (clarified liquid) and stirring for 60 minutes, a filtration device (trade name 202B, manufactured by Showa Seisakusho Co., Ltd., filtration pressure: 250 kg, which is the first filtration means) / Cm 2 ), and crude purification was performed. As a result, the impurities contained in the solution were removed by adsorption to some extent. Furthermore, after adding only a diatomaceous earth filter aid to the roughly purified solution and stirring for 60 minutes, a microfiltration device (manufactured by Chuo Seisakusho Co., Ltd., which is a second filtration means finer than the first filtration means) No. FS-50B, flow rate: 300 L / h). As a result, the impurities contained in the solution were almost completely adsorbed and removed.

次に、UHT殺菌装置(日阪製作所社製、商品名FX−05)を用いて、前記溶液をUHT殺菌処理しかつ直ちに強制冷却した。なお、この処理では、入り口温度を140℃に設定し、出口温度を4℃に設定し、殺菌時間を4秒に設定した。
次に、pHが酸性域に保持されていた溶液をNaOHで中和してpH=約7.0にした。
さらに、得られた中性の溶液を遠心式薄膜濃縮装置(アルファ・ラバル社製、商品名CT−6)を用いて固形分として20%になるように所定時間減圧濃縮した。濃縮液を陰イオンカラムクロマトグラフィーおよび陽イオンカラムクロマトグラフィー処理し、除タンパク処理した。
Next, the solution was subjected to UHT sterilization using a UHT sterilizer (trade name FX-05, manufactured by Nisaka Manufacturing Co., Ltd.) and immediately forcedly cooled. In this process, the inlet temperature was set to 140 ° C., the outlet temperature was set to 4 ° C., and the sterilization time was set to 4 seconds.
Next, the solution whose pH was maintained in the acidic range was neutralized with NaOH to pH = about 7.0.
Further, the obtained neutral solution was concentrated under reduced pressure for a predetermined time using a centrifugal thin film concentration apparatus (trade name CT-6, manufactured by Alfa Laval Co., Ltd.) so that the solid content was 20%. The concentrate was subjected to anion column chromatography and cation column chromatography to remove proteins.

その後、噴霧乾燥装置(大川原化工機社製、商品名OC−35)を用いて90分間噴霧乾燥を行い、比較品の白色粉末32部を得た。
そして、得られた粉末状のガラクトマンナンをサンプルとして下記の測定を行った。具体的には、カラムにG3000PW(東ソー株式会社製)を充填したものを固定相として用い、高速液体クロマトグラフィーを行った。このような測定の結果、マンナン主鎖の糖鎖の80%以上はマンノースの重合度が30〜40単位の範囲内に包含されていなかった。なお、このとき糖鎖単位の標準試薬として、グルコース重合度が既知の直鎖デキストリン(グルコースの重合度:50,100,150)を用いた。
本比較例のガラクトマンナンの重量平均分子量、食物繊維含量及び5%溶液の粘度を測定したところ、重量平均分子量が83kDa、食物繊維含量が82%、粘度が150mPa・sであった。
本比較例のガラクトマンナン0.4gにイソプロピルアルコール0.08mlを加えてよく湿らした後、厳しくかき混ぜながら水4mlを加え、更に均一に分散するまで激しくかき混ぜ、粘度を測定しようとしたが、この溶液は高粘度を呈し、この条件では粘度測定が不可能であった。よって、以後の測定も実施不可能であった。このことより本発明のガラクトマンナンとは異なる性質のものであった。
Thereafter, spray drying was performed for 90 minutes using a spray drying apparatus (trade name OC-35, manufactured by Okawara Chemical Industries Co., Ltd.) to obtain 32 parts of a comparative white powder.
Then, the following measurement was performed using the obtained powdery galactomannan as a sample. Specifically, high-performance liquid chromatography was performed using a column packed with G3000PW (manufactured by Tosoh Corporation) as a stationary phase. As a result of such measurement, 80% or more of the sugar chains of the mannan main chain were not included within the range of 30 to 40 units of mannose polymerization. At this time, a linear dextrin having a known degree of glucose polymerization (degree of polymerization of glucose: 50, 100, 150) was used as a standard reagent for the sugar chain unit.
When the weight average molecular weight, dietary fiber content, and viscosity of a 5% solution of the galactomannan of this comparative example were measured, the weight average molecular weight was 83 kDa, the dietary fiber content was 82%, and the viscosity was 150 mPa · s.
After adding 0.08 ml of isopropyl alcohol to 0.4 g of galactomannan of this comparative example and moistening well, 4 ml of water was added while stirring vigorously, and the mixture was further vigorously stirred until evenly dispersed to measure the viscosity. Exhibited a high viscosity, and viscosity measurement was impossible under these conditions. Therefore, subsequent measurements could not be performed. From this, it was a thing different from the galactomannan of this invention.

実施例3
プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)10質量部およびプロバイオティクスとして、1.0×10個/gのLactobacillus acidophilus粉末1質量部を混合し、シンバイオティクスLAC−1(SLAC−1)を調製した。
同様に、Aとプロバイオティクスとして、1×10個/gのL.gasseri(2)、L.johnsonii(3)、L.delbrueckii(4)、L.delbrueckii subsp.bulgaricus(5)、L.bulgaricus(6)、L.helveticus(7)、L.rhamnosus(8)、L.casei(9)、L.plantarum(10)、L.reuteri(11)、L.salivarius(12)、L.sake(13)、L.salivarius(14)、L.cellobiosus(15)およびL.brevis(16)を用いて、それぞれシンバイオティクスLAC−2〜16(SLAC−2〜16)を調製した。
Example 3
Prebiotics as galactomannan prepared in Example 1 (A) 10 parts by weight and as probiotics, mixed Lactobacillus acidophilus powder 1 part by weight of 1.0 × 10 8 cells / g, synbiotic LAC-1 ( SLAC-1) was prepared.
Similarly, as A and probiotic, 1 × 10 8 cells / g L.I. gasseri (2), L.M. johnsonii (3), L.M. delbrueckii (4), L .; delbrueckii subsp. bulgaricus (5), L. et al. bulgaricus (6), L. et al. helveticus (7), L.H. rhamnosus (8), L. et al. casei (9), L.C. plantarum (10), L. et al. reuteri (11), L.L. salivarius (12), L.M. sake (13), L.M. salivarius (14), L. et al. cellobiosus (15) and L. Synbiotics LAC-2-16 (SLAC-2-16) were prepared using brevis (16), respectively.

比較例3
比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)10質量部およびプロバイオティクスとして、1.0×10個/gのLactobacillus acidophilus粉末1質量部を混合し、比較シンバイオティクス−1(CSLAC−1)を調製した。
同様に、Aとプロバイオティクスとして、1×10個/gのL. gasseri(2)、L.johnsonii(3)、L.delbrueckii(4)、L.delbrueckii subsp.bulgaricus(5)、L.bulgaricus(6)、L.helveticus(7)、L.rhamnosus(8)、L.casei(9)、L.plantarum(10)、L.reuteri(11)、L.salivarius(12)、L.sake(13)、L.salivarius(14)、L.cellobiosus(15)およびL.brevis(16)を用いて、それぞれ比較シンバイオティクスLAC−2〜16(CSLAC−2〜16)を調製した。
Comparative Example 3
10 parts by mass of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 1 part by mass of 1.0 × 10 8 pieces / g Lactobacillus acidophilus powder as a probiotic were mixed, and Comparative Synbiotic-1 (CSLAC-1) was prepared.
Similarly, as A and probiotic, 1 × 10 8 cells / g L.I. gasseri (2), L.M. johnsonii (3), L.M. delbrueckii (4), L .; delbrueckii subsp. bulgaricus (5), L. et al. bulgaricus (6), L. et al. helveticus (7), L.H. rhamnosus (8), L. et al. casei (9), L.C. plantarum (10), L. et al. reuteri (11), L.L. salivarius (12), L.M. sake (13), L.M. salivarius (14), L. et al. cellobiosus (15) and L. Brevis (16) was used to prepare comparative synbiotics LAC-2-16 (CSLAC-2-16), respectively.

試験例1
男性4名(平均年齢43±5才)より新鮮糞便150gずつを集めた。これらの糞便を一つの3000mLの三角フラスコに注入した。4倍重量のリン酸緩衝液(pH7.0)を添加し、嫌気的に均一に懸濁した。試験管に9.5mLずつ嫌気的に分注した後に、実施例3で調製したSLAC−1〜16、および比較例3で調製したCSLAC−1〜16を、それぞれの試験管に0.5gずつ添加した。各試験管を37℃で24時間嫌気的に培養した。培養後に培養液をろ過し、得られたろ液中の酢酸、プロピオン酸及び酪酸を定量した。定量には、イオン排除高速液体クロマトグラフィー(Waters 製、以下HPLC)を用いた。前処理およびHPLCの条件は、Anim.Sci.Technol.69:571−575(1998)に準拠した。
その結果を表1に示した。
Test example 1
150 g of fresh stool was collected from 4 males (average age 43 ± 5 years). These feces were injected into a 3000 mL Erlenmeyer flask. A 4-fold weight phosphate buffer (pH 7.0) was added and suspended uniformly anaerobically. After anaerobically dispensing 9.5 mL into each test tube, 0.5 g each of SLAC-1 to 16 prepared in Example 3 and CSLAC-1 to 16 prepared in Comparative Example 3 were added to each test tube. Added. Each tube was anaerobically cultured at 37 ° C. for 24 hours. After the cultivation, the culture solution was filtered, and acetic acid, propionic acid and butyric acid in the obtained filtrate were quantified. For quantification, ion-exclusion high performance liquid chromatography (manufactured by Waters, hereinafter HPLC) was used. Pretreatment and HPLC conditions are described in Anim. Sci. Technol. 69: 571-575 (1998).
The results are shown in Table 1.

Figure 0005606672
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表1に示したように、比較例3で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例3で調製したシンバイオティクスは、糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 1, when compared with the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 3, the symbiotic prepared in Example 3 increased the production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment. Was shown to be in place.

実施例4
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例2で調製したガラクトマンナン(B)100質量部およびプロバイオティクスとして、1.2×10個/gのStreptococcus thermophilus(1)、S.sanguis(2)、S.mitis(3)、S.pseudopneumoniae(4)、S.pasteuri(5)、S.parasanguinis(6)、S.parasanguinis(7)、S.salivarius(8)、S.vestibularis(9)、S.pasteuri(10)、S.oralis(11)1質量部より、それぞれシンバイオティクスS−1〜11(SS−1〜11)を調製した。
Example 4
As in Example 3, 100 parts by mass of galactomannan (B) prepared in Example 2 as prebiotics and 1.2 × 10 8 pieces / g of Streptococcus thermophilus (1), S. sanguis (2), S. et al. mitis (3), S.M. pseudoneumoniae (4), S. p. pasturi (5), S.P. parasanguinis (6), S. et al. parasanguinis (7), S. et al. salivarius (8), S. et al. vestibularis (9), S.V. pasturi (10), S.P. Synbiotics S-1 to 11 (SS-1 to 11) were prepared from 1 part by weight of oralis (11).

比較例4
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例2で調製したガラクトマンナン(CB)100質量部およびプロバイオティクスとして、1.2×10個/gのStreptococcus thermophilus(1)、S.sanguis(2)、S.mitis(3)、S.pseudopneumoniae(4)、S.pasteuri(5)、S.parasanguinis(6)、S.parasanguinis(7)、S.salivarius(8)、S.vestibularis(9)、S.pasteuri(10)、S.oralis(11)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスS−1〜11(CSS−1〜11)を調製した。
Comparative Example 4
As in Example 3, 100 parts by mass of galactomannan (CB) prepared in Comparative Example 2 as a comparative prebiotic and 1.2 × 10 8 pieces / g of Streptococcus thermophilus (1), S. sanguis (2), S. et al. mitis (3), S.M. pseudoneumoniae (4), S. p. pasturi (5), S.P. parasanguinis (6), S. et al. parasanguinis (7), S. et al. salivarius (8), S. et al. vestibularis (9), S.V. pasturi (10), S.P. Comparative Symbiotics S-1 to 11 (CSS-1 to 11) were prepared from 1 part by weight of olialis (11).

試験例2
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例4で調製したSS−1〜11および比較例4で調製したCSS−1〜11で行った。
その結果を表2に示した。
Test example 2
Similar to Test Example 1, SS-1 to 11 prepared in Example 4 and CSS-1 prepared in Comparative Example 4 were used in the same test using fresh stool of four men (average age 43 ± 5 years). 11 was done.
The results are shown in Table 2.

Figure 0005606672
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表2に示したように、比較例4で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例4で調製したシンバイオティクスは、糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 2, when compared with the comparative symbiotic prepared in Comparative Example 4, the symbiotic prepared in Example 4 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment. Was shown to be in place.

実施例5
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)200質量部およびプロバイオティクスとして、1.5×10個/gのEnterococcus malodoratus(1)、E. malodoratus(2)、E.facialis(3)およびE.faceium(4)1質量部より、それぞれシンバイオティクスE−1〜11(SE−1〜4)を調製した。
Example 5
In the same manner as in Example 3, 200 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 1.5 × 10 7 pieces / g of Enterococcus malodoratus (1), E. coli as probiotics. malodoratus (2), E.M. facialis (3) and E. coli. Synbiotics E-1 to 11 (SE-1 to 4) were prepared from 1 part by mass of faceium (4).

比較例5
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)200質量部およびプロバイオティクスとして、1.5×10個/gのEnterococcus malodoratus(1)、E.malodoratus(2)、E.facialis(3)およびE.faceium(4)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスE−1〜11(CSE−1〜4)を調製した。
Comparative Example 5
In the same manner as in Example 3, 200 parts by mass of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 1.5 × 10 7 Enterococcus malodoratus (1), E. coli as probiotics. malodoratus (2), E.M. facialis (3) and E. coli. Comparative Symbiotics E-1 to 11 (CSE-1 to 4) were prepared from 1 part by mass of faceium (4).

試験例3
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を、実施例5で調製したSE−1〜4および比較例5で調製したCSE−1〜4で行った。
その結果を表3に示した。
Test example 3
Similar to Test Example 1, similar tests using fresh stool of 4 males (average age 43 ± 5 years old) were prepared as SE-1 to 4 prepared in Example 5 and CSE-1 prepared in Comparative Example 5 Performed at ~ 4.
The results are shown in Table 3.

Figure 0005606672
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表3に示したように、比較例5で調製した比較シンパイオティクスと比較して、実施例5で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 3, in comparison with the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 5, the symbiotic prepared in Example 5 increased the production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment Was shown to be in place.

実施例6
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例2で調製したガラクトマンナン(B)1質量部およびプロバイオティクスとして、1.1×10個/gのLactococcus lactis(1)およびL.lactis subsp.cremoris(2)1質量部より、それぞれシンバイオティクスLC−1および2(SLC−1および2)を調製した。
Example 6
As in Example 3, 1 part by mass of galactomannan (B) prepared in Example 2 as prebiotics and 1.1 × 10 8 pieces / g of Lactococcus lactis (1) and L. lactis subsp. Synbiotics LC-1 and 2 (SLC-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of cremoris (2), respectively.

比較例6
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例2で調製したガラクトマンナン(CB)1質量部およびプロバイオティクスとして、1.1×10個/gのLactococcus lactis(1)およびL.lactis subsp.cremoris(2)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスLC−1および2(CSLC−1および2)を調製した。
Comparative Example 6
As in Example 3, 1 part by mass of galactomannan (CB) prepared in Comparative Example 2 as a comparative prebiotic and 1.1 × 10 8 pieces / g of Lactococcus lactis (1) and L. lactis subsp. Comparative Symbiotics LC-1 and 2 (CSLC-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of cremoris (2), respectively.

試験例4
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例6で調製したSLC−1および2と比較例6で調製したCSLC−1および2で行った。
その結果を表4に示した。
Test example 4
Similar to Test Example 1, SLC-1 and 2 prepared in Example 6 and CSLC-1 prepared in Comparative Example 6 and the same test using fresh stool of 4 males (average age 43 ± 5 years) and 2 performed.
The results are shown in Table 4.

Figure 0005606672
Figure 0005606672

表4に示したように、比較例6で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例6で調製したシンバイオティクスは、糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 4, when compared with the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 6, the symbiotics prepared in Example 6 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment Was shown to be in place.

実施例7
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)500質量部およびプロバイオティクスとして、1.4×10個/gのPediococcus damnosus(1)およびP.acidilactici(2)1質量部より、それぞれシンバイオティクスP−1および2(SP−1および2)を調製した。
Example 7
In the same manner as in Example 3, 500 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 1.4 × 10 8 pieces / g of Pediococcus damnosus (1) Synbiotics P-1 and 2 (SP-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of acidilactici (2), respectively.

比較例7
実施例3と同様に比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)500質量部およびプロバイオティクスとして、1.4×10個/gのPediococcus damnosus(1)およびP.acidilactici(2)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスP−1および2(CSP−1および2)を調製した。
Comparative Example 7
In the same manner as in Example 3, 500 parts by mass of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 1.4 × 10 8 pieces / g of Pediococcus damnosus (1) and P. Comparative synbiotics P-1 and 2 (CSP-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of acidilactici (2), respectively.

試験例5
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例7で調製したSP−1および2と比較例7で調製したCSP−1および2で行った。
その結果を表5に示した。
Test Example 5
Similar to Test Example 1, SP-1 and 2 prepared in Example 7 and CSP-1 prepared in Comparative Example 7 and the same test using fresh stool of four men (average age 43 ± 5 years) and 2 performed.
The results are shown in Table 5.

Figure 0005606672
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表5に示したように、比較例6で調製した比較シンパイオティクスと比較して、実施例7で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 5, as compared with the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 6, the symbiotic prepared in Example 7 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment Was shown to be in place.

実施例8
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)200質量部およびプロバイオティクスとして、1.8×10個/gのLeuconostoc mesenteroides(1)およびL.sake(2)1質量部より、それぞれシンバイオティクスLCN−1および2(SLCN−1および2)を調製した。
Example 8
In the same manner as in Example 3, 200 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 1.8 × 10 7 pieces / g of Leuconostoc mesenteroides (1) and L. Synbiotics LCN-1 and 2 (SLCN-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of cake (2), respectively.

比較例8
実施例3と同様に比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)200質量部およびプロバイオティクスとして、1.8×10個/gのLeuconostoc mesenteroides(1)およびL.sake(2)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスLCN−1および2(CSLCN−1および2)を調製した。
Comparative Example 8
As in Example 3, 200 parts by mass of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 1.8 × 10 7 Leuconostoc mesenteroides (1) and L. Comparative Symbiotics LCN-1 and 2 (CSLCN-1 and 2) were prepared from 1 part by weight of sake (2), respectively.

試験例6
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例8で調製したSLCN−1および2と比較例8で調製したCSLCN−1および2で行った。
その結果を表6に示した。
Test Example 6
Similar to Test Example 1, similar tests using fresh stool of 4 males (average age 43 ± 5 years) were performed in SLCN-1 and 2 prepared in Example 8 and CSLCN-1 prepared in Comparative Example 8 and 2 performed.
The results are shown in Table 6.

Figure 0005606672
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表6に示したように、比較例8で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例8で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 6, when compared with the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 8, the symbiotics prepared in Example 8 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment was reduced. It was shown that it was prepared.

実施例9
実施例3と同様にプレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)300質量部およびプロバイオティクスとして、1.5×10個/gのBifidobacterium bifidum(1)、B.adolescentis(2)、B.longum(3)、B.infantis(4)、B.breve(4)、B.animalis(5)、B.pseudolongum(6)、B.thermophilum(7)、B.boum(8)、B.magunum(9)、B.pullorum(10)、B.catenulatum(11)、B.suis(12)、B.pseudocatenulatum(13)、B.gallinarum(14)、B.dentium(15)、B.ruminantium(16)、B.angulatum(17)、B.merycicum(18)、B.gallicum(19)、B.saeculare(20)、B.inopinatum(21)、B.minimum(22)、B.denticolens(23)、B.subtile(24)、B.coryneforme(25)、B.cuniculi(26)、B.asteroides(27)、B.choerinum(28)、B.indicum(29)1質量部より、それぞれシンバイオティクスBIF−1〜29(SBIF−1〜29)を調製した。
Example 9
As in Example 3, 300 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 1.5 × 10 8 pieces / g of Bifidobacterium bifidum (1), B. adolescentis (2), B.I. longum (3), B.I. infantis (4), B.I. breve (4), B.I. animalis (5), B.I. pseudolongum (6), B.I. thermophilum (7), B.I. room (8), B.I. magunum (9), B.I. pullorum (10), B.I. catenatum (11), B.I. suis (12), B.I. pseudocateulatum (13), B.I. Gallinarum (14), B.I. denium (15), B.I. luminantium (16), B.I. angulatum (17), B.I. mericicum (18), B.I. Gallicum (19), B.I. saeculare (20), B.I. inopinatum (21), B.I. minimum (22), B.I. denticolens (23), B.I. subtile (24), B.I. coryneform (25), B.I. cuniculi (26), B.I. asteroides (27), B.I. choerinum (28), B.I. Synbiotics BIF-1 to 29 (SBIF-1 to 29) were prepared from 1 part by mass of indicum (29).

比較例9
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)300質量部およびプロバイオティクスとして、1.5×10個/gのBifidobacterium bifidum(1)、B.adolescentis(2)、B.longum(3)、B.infantis(4)、B.breve(4)、B.animalis(5)、B.pseudolongum(6)、B.thermophilum(7)、B.boum(8)、B.magunum(9)、B.pullorum(10)、B.catenulatum(11)、B.suis(12)、B.pseudocatenulatum(13)、B.gallinarum(14)、B.dentium(15)、B.ruminantium(16)、B.angulatum(17)、B.merycicum(18)、B.gallicum(19)、B.saeculare(20)、B.inopinatum(21)、B.minimum(22)、B.denticolens(23)、B.subtile(24)、B.coryneforme(25)、B.cuniculi(26)、B.asteroides(27)、B.choerinum(28)、B.indicum(29)1質量部より、それぞれシンバイオティクスBIF−1〜29(CSBIF−1〜29)を調製した。
Comparative Example 9
As in Example 3, 300 parts by mass of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 1.5 × 10 8 pieces / g of Bifidobacterium bifidum (1), B. adolescentis (2), B.I. longum (3), B.I. infantis (4), B.I. breve (4), B.I. animalis (5), B.I. pseudolongum (6), B.I. thermophilum (7), B.I. room (8), B.I. magunum (9), B.I. pullorum (10), B.I. catenatum (11), B.I. suis (12), B.I. pseudocateulatum (13), B.I. Gallinarum (14), B.I. denium (15), B.I. luminantium (16), B.I. angulatum (17), B.I. mericicum (18), B.I. Gallicum (19), B.I. saeculare (20), B.I. inopinatum (21), B.I. minimum (22), B.I. denticolens (23), B.I. subtile (24), B.I. coryneform (25), B.I. cuniculi (26), B.I. asteroides (27), B.I. choerinum (28), B.I. Synbiotics BIF-1 to 29 (CSBIF-1 to 29) were prepared from 1 part by mass of indicum (29).

試験例7
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例9で調製したSBIF−1〜29および比較例9で調製したCSBIF−1〜29で行った。
その結果を表7に示した。
Test Example 7
Similar to Test Example 1, SBIF-1 to 29 prepared in Example 9 and CSBIF-1 prepared in Comparative Example 9 were used in the same test using fresh stool of four men (average age 43 ± 5 years). 29.
The results are shown in Table 7.

Figure 0005606672
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表7に示したように、比較例9で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例9で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 7, when compared to the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 9, the symbiotics prepared in Example 9 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment was reduced. It was shown that it was prepared.

実施例10
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例2で調製したガラクトマンナン(B)500質量部およびプロバイオティクスとして、3.8×10個/gのBacillus subtilis(1)およびB.subtilis var.natto(2)1質量部より、それぞれシンバイオティクスBAC−1および2(SBAC−1および2)を調製した。
Example 10
As in Example 3, 500 parts by mass of galactomannan (B) prepared in Example 2 as prebiotics and 3.8 × 10 6 / g Bacillus subtilis (1) and B. subtilis var. Synbiotics BAC-1 and 2 (SBAC-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of Natto (2), respectively.

比較例10
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例2で調製したガラクトマンナン(CB)500質量部およびプロバイオティクスとして、3.8×10個/gのBacillus subtilis(1)およびB.subtilis var.natto(2)1質量部より、それぞれ比較シンババイオティクスBAC−1および2(CSBAC−1および2)を調製した。
Comparative Example 10
As in Example 3, 500 parts by mass of galactomannan (CB) prepared in Comparative Example 2 as a comparative prebiotic and 3.8 × 10 6 / g Bacillus subtilis (1) and B. subtilis var. Comparative Simbabiotics BAC-1 and 2 (CSBAC-1 and 2) were prepared from 1 part by mass of Natto (2), respectively.

試験例8
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例10で調製したSBAC−1および2と比較例10で調製したCSBAC−1および2で行った。
その結果を表8に示した。
Test Example 8
Similar to Test Example 1, SBAC-1 and 2 prepared in Example 10 and CSBAC-1 prepared in Comparative Example 10 and the same test using fresh stool of four men (average age 43 ± 5 years) and 2 performed.
The results are shown in Table 8.

Figure 0005606672
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表8に示したように、比較例10で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例10で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 8, when compared with the comparative sympiotics prepared in Comparative Example 10, the symbiotic prepared in Example 10 increased the production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment was reduced. It was shown that it was prepared.

実施例11
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)1000質量部およびプロバイオティクスとして、2.0×10個/gのClostridium butyricum(1)、Eubacterium hallii(2)、E.ramulus(3)、E.rectale(4)、E.ventriosum(5)およびRoseburia intestinalis(6)1質量部より、それぞれシンバイオティクスBUT−1〜6(SBUT−1〜6)を調製した。
Example 11
As in Example 3, 1000 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 2.0 × 10 7 / g Clostridium butyricum (1), Eubacterium hallii ( 2), E.I. ramulus (3), E.I. rectale (4), E.I. Synbiotics BUT-1 to 6 (SBUT-1 to 6) were prepared from 1 part by mass of ventriosum (5) and Roseburia intestinalis (6), respectively.

比較例11
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)1000質量部およびプロバイオティクスとして、2.0×10個/gのClostridium butyricum(1)、Eubacterium hallii(2)、E.ramulus(3)、E.rectale(4)、E.ventriosum(5)およびRoseburia intestinalis(6)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスBUT−1〜6(CSBUT−1〜6)を調製した。
Comparative Example 11
As in Example 3, 1000 parts by weight of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 2.0 × 10 7 / g Clostridium butyricum (1), Eubacterium hallilium as a probiotic. (2), E.I. ramulus (3), E.I. rectale (4), E.I. Comparative Symbiotics BUT-1 to 6 (CSBUT-1 to 6) were prepared from 1 part by mass of ventriosum (5) and Roseburia intestinalis (6), respectively.

試験例9
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例11で調製したSBUT−1〜6および比較例11で調製したCSBUT−1〜6で行った。
その結果を表9に示した。
Test Example 9
Similar to Test Example 1, SBUT-1 to 6 prepared in Example 11 and CSBUT-1 to 1 prepared in Comparative Example 11 were used in the same test using fresh stool of four men (average age 43 ± 5 years). 6 was done.
The results are shown in Table 9.

Figure 0005606672
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表9に示したように、比較例11で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例11で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 9, when compared with the comparative symbiotic prepared in Comparative Example 11, the symbiotic prepared in Example 11 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment was reduced. It was shown that it was prepared.

実施例12
実施例3と同様に、プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)2000質量部およびプロバイオティクスとして、4.0×10個/gのMegasphaera elsdenii(1)およびPropionibacterium freudenreichii(2)1質量部より、それぞれシンバイオティクスAUB−1および2(SAUB−1および2)を調製した。
Example 12
As in Example 3, 2000 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 4.0 × 10 7 cells / g of Megaphaera elsdenii (1) and Propionibacterium fredenreichii ( 2) Synbiotics AUB-1 and 2 (SAUB-1 and 2) were prepared from 1 part by mass, respectively.

比較例12
実施例3と同様に、比較プレバイオティクスとして比較例1で調製したガラクトマンナン(CA)2000質量部およびプロバイオティクスとして、4.0×10個/gのMegasphaera elsdenii(1)およびPropionibacterium freudenreichii(2)1質量部より、それぞれ比較シンバイオティクスAUB−1および2(CSAUB−1および2)を調製した。
Comparative Example 12
As in Example 3, 2000 parts by mass of galactomannan (CA) prepared in Comparative Example 1 as a comparative prebiotic and 4.0 × 10 7 cells / g of Megaphaera elsdenii (1) and Propionibacterium fredenreichiii as probiotics. (2) Comparative Synbiotics AUB-1 and 2 (CSAUB-1 and 2) were prepared from 1 part by mass, respectively.

試験例10
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例12で調製したSAUB−1および2と比較例12で調製したCSAUB−1および2で行った。
その結果を表10に示した。
Test Example 10
Similar to Test Example 1, SAUB-1 and 2 prepared in Example 12 and CSAUB-1 prepared in Comparative Example 12 and a similar test using fresh stool of four men (average age 43 ± 5 years) and 2 performed.
The results are shown in Table 10.

Figure 0005606672
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表10に示したように、比較例12で調製した比較シンパイオティクスと比較すると、実施例12で調製したシンバイオティクスは糞便培養により酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 10, when compared with the comparative symbiotic prepared in Comparative Example 12, the symbiotic prepared in Example 12 increased production of acetic acid, propionic acid and butyric acid by fecal culture, and the intestinal environment was reduced. It was shown that it was prepared.

試験例11
乳酸菌として、Lactobacillus属細菌であるLactobacillus acidophilusを用いた実施例3で調製したシンバイオティクスLAC−1(SLAC−1)と比較例3で調製した比較シンパイオティクス−1(CSLAC−1)を、それぞれ1日3gずつ4週間、ローマ−IIIの基準で過敏性腸症候群(IBS)と診断された男性5名、女性5名(平均年齢35±7才)に投与する試験を実施した。試験は、二重盲検、クロスオーバー試験を実施した。ウォッシュアウトは4週間とした。
摂取前と摂取4週間目に、健康関連QOLをSF−36(36−Item Short Form)、胃腸症状をGSRS(Gastrointestinal symptom Rating Scale)、不安・鬱をHADS(Hospital Anxiety and Depression Scale)により、それぞれ評価した。
その結果を表11〜13に示した。
Test Example 11
Synbiotic LAC-1 (SLAC-1) prepared in Example 3 using Lactobacillus acidophilus, a Lactobacillus genus bacterium, as lactic acid bacteria, and comparative symbiotics-1 (CSLAC-1) prepared in Comparative Example 3, respectively. A study was conducted in which 5 g and 5 women (average age 35 ± 7 years) diagnosed with irritable bowel syndrome (IBS) on a Rome-III basis were administered 3 g daily for 4 weeks. The test was a double-blind, crossover test. Washout was 4 weeks.
Before ingestion and 4 weeks after ingestion, health-related QOL is SF-36 (36-Item Short Form), gastrointestinal symptoms are GSRS (Gastrointestinal Symptom Rating Scale), anxiety / depression is HADS (Hospital Anxiety and Depression, respectively) evaluated.
The results are shown in Tables 11-13.

Figure 0005606672
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表11〜表13に示したように、本実施形態のシンパイオティクスを摂取させることにより、健康関連QOL、胃腸症状および不安・鬱の評価項目が改善され、腸内環境を整えることがわかった。
試験例12
ビフィズス菌として、Bifidobacterium属細菌であるBifidobacterium longumを用いた実施例9で調製したシンバイオティクスBIF−3(SBIF−3)と比較例9で調製した比較シンパイオティクス−3(CBIF−3)を、それぞれ1日5gずつ2週間、ローマ−IIIの基準でIBSと診断された男性4名、女性6名(平均年齢38±7才)に投与する試験を実施した。試験は、二重盲検、クロスオーバー試験を実施した。ウォッシュアウトは4週間とした。
As shown in Tables 11 to 13, it was found that by taking the sympiotics of this embodiment, the evaluation items of health-related QOL, gastrointestinal symptoms and anxiety / depression were improved and the intestinal environment was adjusted. .
Test Example 12
Synbiotic BIF-3 (SBIF-3) prepared in Example 9 using Bifidobacterium longum which is a bacterium belonging to the genus Bifidobacterium as bifidobacteria, and comparative symbiotics-3 (CBIF-3) prepared in Comparative Example 9, A test was conducted in which 5 g each day was administered to 4 men and 6 women (average age 38 ± 7 years) diagnosed with IBS on the Rome-III basis for 2 weeks. The test was a double-blind, crossover test. Washout was 4 weeks.

摂取前と摂取2週間目に、健康関連QOLをSF−36(36−Item Short Form)、胃腸症状をGSRS(Gastrointestinal symptom Rating Scale)、不安・鬱をHADS(Hospital Anxiety and Depression Scale)により、それぞれ評価した。
その結果を表14〜16に示した。
Before and 2 weeks after ingestion, health-related QOL is SF-36 (36-Item Short Form), gastrointestinal symptoms are GSRS (Gastrointestinal Symptom Rating Scale), anxiety / depression is HADS (Hospital Anxiety and Depression), respectively. evaluated.
The results are shown in Tables 14-16.

Figure 0005606672
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表14〜表16に示したように、本実施形態のシンパイオティクスを摂取させることにより、健康関連QOL、胃腸症状および不安・鬱の評価項目が改善され、腸内環境を整えることがわかった。
実施例11
プレバイオティクスとして実施例1で調製したガラクトマンナン(A)10質量部およびプロバイオティクスとして、1.0×10個/gのLactobacillus acidophilus粉末1質量部、緑茶カテキン類(太陽化学(株)製、サンフェノン)0.01質量部よりシンパイオティクスLACC−1(SLACC−1)を調製した。
同様に、Aと緑茶カテキン類とプロバイオティクスとして、1×10個/gのL.gasseri(2)、L.johnsonii(3)、L.delbrueckii(4)、L.delbrueckii subsp.bulgaricus(5)、L.bulgaricus(6)、L.helveticus(7)、L.rhamnosus(8)、L.casei(9)、L.plantarum(10)、L.reuteri(11)、L.salivarius(12)、L.sake(13)、L.salivarius(14)、L.cellobiosus(15)およびL.brevis(16)を用いて、それぞれシンバイオティクスLAC−2〜16(SLACC−2〜16)を調製した。
As shown in Tables 14 to 16, it was found that by taking the sympiotics of this embodiment, the evaluation items of health-related QOL, gastrointestinal symptoms and anxiety / depression were improved and the intestinal environment was adjusted. .
Example 11
10 parts by mass of galactomannan (A) prepared in Example 1 as prebiotics and 1 part by mass of Lactobacillus acidophilus powder of 1.0 × 10 8 / g as probiotics, green tea catechins (Taiyo Kagaku Co., Ltd.) Sympiotics LACC-1 (SLACC-1) was prepared from 0.01 parts by mass of Sanphenon (manufactured by Sanfenon).
Similarly, as A, green tea catechins and probiotics, 1 × 10 8 L / g L.I. gasseri (2), L.M. johnsonii (3), L.M. delbrueckii (4), L .; delbrueckii subsp. bulgaricus (5), L. et al. bulgaricus (6), L. et al. helveticus (7), L.H. rhamnosus (8), L. et al. casei (9), L.C. plantarum (10), L. et al. reuteri (11), L.L. salivarius (12), L.M. sake (13), L.M. salivarius (14), L. et al. cellobiosus (15) and L. Synbiotics LAC-2 to 16 (SLACC-2 to 16) were prepared using brevis (16), respectively.

試験例13
試験例1と同様に、男性4名(平均年齢43±5才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施例4で調製したSLACC−1〜11で行った。
その結果を表17に示した。
Test Example 13
Similar to Test Example 1, similar tests using fresh stool of 4 males (average age 43 ± 5 years old) were performed with SLACC-1 to 11 prepared in Example 4.
The results are shown in Table 17.

Figure 0005606672
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表17に示したように、試験例1の表1のSLAC−1〜11より実施例12で調製したSLACC−1〜11では、糞便培養によりさらに酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 17, in SLACC-1 to 11 prepared in Example 12 from SLAC-1 to 11 in Table 1 of Test Example 1, production of acetic acid, propionic acid and butyric acid was further increased by fecal culture, It was shown that the intestinal environment was prepared.

試験例14
シンパイオティクスとして実施例3で調製したSLAC−9(実施例1で調製したガラクトマンナンとL.caseiからなるシンパイオティクス)、特表2007−537224号14頁第0100段〜第0101段に記載の方法のうち(a)で調製したコンニャク加水分解物10質量部および1.0×10個/gのL.caseiより調製した比較品A、および市販のパラチニット(和光純薬(株)製、1,6−GPS:49質量%、1,1−GPM:49質量%)10質量部および1.0×10個/gのL.caseiより調製した比較品Bで試験例1と同様に男性4名(平均年齢44±8才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施した。
その結果を表18に示した。
Test Example 14
SLAC-9 prepared in Example 3 as sympiotics (sympiotics comprising galactomannan prepared in Example 1 and L. casei), described in JP-T 2007-537224, page 14, pp. 0100 to 0101 Of the konjac hydrolyzate prepared in (a) and 1.0 × 10 8 L / g of L. Comparative product A prepared from casei, and 10 parts by mass of commercially available paratinite (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 1,6-GPS: 49% by mass, 1,1-GPM: 49% by mass) and 1.0 × 10 8 L / g. In the same manner as in Test Example 1, a similar test using fresh stool of 4 males (average age 44 ± 8 years old) was performed with Comparative Product B prepared from casei.
The results are shown in Table 18.

Figure 0005606672
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表18に示したように、SLAC−9は、比較品AおよびBと比較して、糞便培養によりさらに酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 18, compared to Comparative products A and B, SLAC-9 showed that the production of acetic acid, propionic acid and butyric acid was further increased by fecal culture, and the intestinal environment was adjusted. It was.

試験例15
シンパイオティクスとして実施例9で調製したSBIF−5(実施例1で調製したガラクトマンナンとB.animalisからなるシンパイオティクス)、特表2007−537224号14頁第0100段〜第0101段に記載の方法のうち(b)で調製したコンニャク加水分解物300質量部および1.5×10個/gのB.animalisより調製した比較品AA、および市販のパラチニット(和光純薬(株)製、1,6−GPS:49質量%、1,1−GPM:49質量%)10質量部および1.0×10個/gのB.animalisより調製した比較品BBで試験例1と同様に男性4名(平均年齢40±6才)の新鮮糞便を用いた同様の試験を実施した。
その結果を表19に示した。
Test Example 15
As sympiotics, SBIF-5 prepared in Example 9 (sympiotics composed of galactomannan and B. animalis prepared in Example 1), described in JP-T 2007-537224, page 14, 0100 to 0101 300 parts by weight of the konjac hydrolyzate prepared in (b) and 1.5 × 10 8 pieces / g B. Comparative product AA prepared from animalis, and 10 parts by mass of commercially available paratinite (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 1,6-GPS: 49 mass%, 1,1-GPM: 49 mass%) and 1.0 × 10 8 / g B.c. In the same manner as in Test Example 1, a similar test using fresh stool of 4 males (average age 40 ± 6 years old) was performed on the comparative product BB prepared from animalis.
The results are shown in Table 19.

Figure 0005606672
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表19に示したように、SBIF−5は、比較品AAおよびBBと比較して、糞便培養によりさらに酢酸、プロピオン酸および酪酸の産生が増加し、腸内環境が整えられたことが示された。   As shown in Table 19, SBIF-5 showed that the production of acetic acid, propionic acid and butyric acid was further increased by stool culture and the intestinal environment was adjusted as compared with comparative products AA and BB. It was.

試験例16
SLAC−9、比較品Aを、それぞれ1日3gずつ4週間、ローマ−IIIの基準で過敏性腸症候群(IBS)と診断された男性6名、女性4名(平均年齢33±2才)に投与する試験を実施した。試験は、二重盲検、クロスオーバー試験を実施した。ウォッシュアウトは4週間とした。
摂取前と摂取4週間目に、健康関連QOLをSF−36(36−Item Short Form)、胃腸症状をGSRS(Gastrointestinal symptom Rating Scale)、不安・鬱をHADS(Hospital Anxiety and Depression Scale)により、それぞれ評価した。
その結果を表20〜22に示した。
Test Example 16
SLAC-9 and Comparative product A for 3 weeks a day for 4 weeks, 6 males and 4 females (average age 33 ± 2 years) diagnosed with irritable bowel syndrome (IBS) on the basis of Rome-III A study to administer was conducted. The test was a double-blind, crossover test. Washout was 4 weeks.
Before ingestion and 4 weeks after ingestion, health-related QOL is SF-36 (36-Item Short Form), gastrointestinal symptoms are GSRS (Gastrointestinal Symptom Rating Scale), anxiety / depression is HADS (Hospital Anxiety and Depression, respectively) evaluated.
The results are shown in Tables 20-22.

Figure 0005606672
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表20〜表22に示したように、本実施形態のシンパイオティクスを摂取させることにより、健康関連QOL、胃腸症状および不安・鬱の評価項目が有意に改善され、腸内環境を整えることがわかった。しかしながら、比較品Aを摂取した場合は、健康関連QOL、胃腸症状および不安・鬱の評価項目は有意差はなく、改善される傾向であった。   As shown in Tables 20 to 22, by taking the sympiotics of the present embodiment, the evaluation items of health-related QOL, gastrointestinal symptoms and anxiety / depression are significantly improved, and the intestinal environment can be adjusted. all right. However, when the comparative product A was ingested, the evaluation items of health-related QOL, gastrointestinal symptoms and anxiety / depression were not significantly different, and tended to be improved.

試験例17
SBIF−5、比較品BBを、それぞれ1日5gずつ2週間、ローマ−IIIの基準で過敏性腸症候群(IBS)と診断された男性5名、女性3名(平均年齢31±4才)に投与する試験を実施した。試験は、二重盲検、クロスオーバー試験を実施した。ウォッシュアウトは4週間とした。
摂取前と摂取2週間目に、健康関連QOLをSF−36(36−Item Short Form)、胃腸症状をGSRS(Gastrointestinal symptom Rating Scale)、不安・鬱をHADS(Hospital Anxiety and Depression Scale)により、それぞれ評価した。
その結果を表23〜25に示した。
Test Example 17
SBIF-5 and comparative product BB were administered to 5 males and 3 females (average age 31 ± 4 years) diagnosed with irritable bowel syndrome (IBS) on the basis of Rome-III for 5 weeks a day for 2 weeks each. A study to administer was conducted. The test was a double-blind, crossover test. Washout was 4 weeks.
Before and 2 weeks after ingestion, health-related QOL is SF-36 (36-Item Short Form), gastrointestinal symptoms are GSRS (Gastrointestinal Symptom Rating Scale), anxiety / depression is HADS (Hospital Anxiety and Depression), respectively. evaluated.
The results are shown in Tables 23-25.

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表23〜表25に示したように、本実施形態のシンパイオティクスを摂取させることにより、健康関連QOL、胃腸症状および不安・鬱の評価項目が有意に改善され、腸内環境を整えることがわかった。しかしながら、比較品BBを摂取した場合は、健康関連QOL、胃腸症状および不安・鬱の評価項目は有意差はなく、改善される傾向であった。   As shown in Tables 23 to 25, by taking the sympiotics of the present embodiment, the evaluation items of health-related QOL, gastrointestinal symptoms and anxiety / depression are significantly improved, and the intestinal environment can be adjusted. all right. However, when the comparative product BB was ingested, there was no significant difference in the evaluation items of health-related QOL, gastrointestinal symptoms, and anxiety / depression, and there was a tendency to improve.

実施例A
脱脂粉乳9.5kg、無塩バター3kg、上白糖10.5kg、実施例1で調製したガラクトマンナン5kg及び水72kgをホモミキサーで混合し、原料ミックスを調製した。
この原料ミックスを50℃まで加温し、80kg/cmで均質処理した後、プレート式殺菌機で90℃、10分間加熱殺菌し、プレート式熱交換機で42℃まで冷却した。そして、発酵乳製造用のビフィドバクテリウム・ロンガムのスターター4質量%を添加した後、100ml容の容器に充填し、42℃で発酵を行い、乳酸酸度が0.75%になったところで5℃まで冷却して、静置型発酵乳を製造した(実施例A発酵乳)。
Example A
Non-fat dry milk 9.5 kg, unsalted butter 3 kg, upper white sugar 10.5 kg, galactomannan 5 kg prepared in Example 1 and water 72 kg were mixed with a homomixer to prepare a raw material mix.
This raw material mix was heated to 50 ° C., homogenized at 80 kg / cm 2 , then sterilized by heating at 90 ° C. for 10 minutes with a plate type sterilizer, and cooled to 42 ° C. with a plate type heat exchanger. After adding 4% by mass of a starter of Bifidobacterium longum for producing fermented milk, it was filled in a 100 ml container, fermented at 42 ° C., and when the lactic acid acidity reached 0.75%, 5 Cooled to 0 ° C. to produce stationary type fermented milk (Example A fermented milk).

比較例A
脱脂粉乳9.5kg、無塩バター3kg、上白糖10.5kg、比較例1で調製したガラクトマンナン5kg及び水72kgをホモミキサーで混合し、原料ミックスを調製した。
この原料ミックスを50℃まで加温し、80kg/cmで均質処理した後、プレート式殺菌機で90℃、10分間加熱殺菌し、プレート式熱交換機で42℃まで冷却した。そして、発酵乳製造用のビフィドバクテリウム・ロンガムのスターター4質量%を添加した後、100ml容の容器に充填し、42℃で発酵を行い、乳酸酸度が0.75%になったところで5℃まで冷却して、静置型発酵乳を製造した(比較例A発酵乳)。
Comparative Example A
Non-fat dry milk 9.5 kg, unsalted butter 3 kg, upper white sugar 10.5 kg, galactomannan 5 kg prepared in Comparative Example 1 and water 72 kg were mixed with a homomixer to prepare a raw material mix.
This raw material mix was heated to 50 ° C., homogenized at 80 kg / cm 2 , then sterilized by heating at 90 ° C. for 10 minutes with a plate type sterilizer, and cooled to 42 ° C. with a plate type heat exchanger. Then, after adding 4% by mass of a starter of Bifidobacterium longum for producing fermented milk, it was filled in a 100 ml container, fermented at 42 ° C., and when the lactic acid acidity reached 0.75%, 5 Cooled to 0 ° C. to produce stationary type fermented milk (Comparative Example A fermented milk).

比較例B
脱脂粉乳9.5kg、無塩バター3kg、上白糖10.5kg、比較例2で調製したガラクトマンナン5kg及び水72kgをホモミキサーで混合し、原料ミックスを調製した。
この原料ミックスを50℃まで加温し、80kg/cmで均質処理した後、プレート式殺菌機で90℃、10分間加熱殺菌し、プレート式熱交換機で42℃まで冷却した。そして、発酵乳製造用のビフィドバクテリウム・ロンガムのスターター4質量%を添加した後、100ml容の容器に充填し、42℃で発酵を行い、乳酸酸度が発酵乳100g当たり、0.75%になったところで5℃まで冷却して、静置型発酵乳を製造した(比較例B発酵乳)。
Comparative Example B
Non-fat dry milk 9.5 kg, unsalted butter 3 kg, upper white sugar 10.5 kg, galactomannan 5 kg prepared in Comparative Example 2 and water 72 kg were mixed with a homomixer to prepare a raw material mix.
This raw material mix was heated to 50 ° C., homogenized at 80 kg / cm 2 , then sterilized by heating at 90 ° C. for 10 minutes with a plate type sterilizer, and cooled to 42 ° C. with a plate type heat exchanger. Then, after adding 4% by mass of a starter of Bifidobacterium longum for producing fermented milk, it is filled in a 100 ml container, fermented at 42 ° C., and lactic acid acidity is 0.75% per 100 g of fermented milk. When it became, it cooled to 5 degreeC and manufactured stationary type fermented milk (comparative example B fermented milk).

試験例A
実施例Aで調製した実施例A発酵乳および比較例Aで調製した比較例A発酵乳を4℃で14日間保存した。保存3、7および14日目に乳酸酸度を測定することで保存中の発酵乳の過発酵を調べた。尚、乳酸酸度は、0.1N水酸化ナトリウム溶液による中和滴定法で測定した。製造直後の乳酸酸度を100として、その上昇率で示した。その結果を表26に示した。
Test example A
Example A fermented milk prepared in Example A and Comparative Example A fermented milk prepared in Comparative Example A were stored at 4 ° C. for 14 days. The overfermentation of the fermented milk during storage was examined by measuring the lactic acid acidity on the 3rd, 7th and 14th days of storage. The lactic acid acidity was measured by neutralization titration with a 0.1N sodium hydroxide solution. The rate of increase was shown with the lactic acid acidity immediately after production as 100. The results are shown in Table 26.

Figure 0005606672
Figure 0005606672

表26に示したように、実施例A発酵乳は保存中に乳酸酸度が上昇せずに過発酵認められなかったが、比較例A発酵乳は保存中に乳酸酸度が上昇し、過発酵が確認された。   As shown in Table 26, the fermented milk of Example A did not increase in lactate during storage and no overfermentation was observed, but the fermented milk of Comparative Example A increased in lactate during storage and overfermented. confirmed.

試験例B
実施例Aで調製した実施例A発酵乳および比較例Bで調製した比較例B発酵乳について、5人のパネラーを用いた官能評価を実施した。尚、評価項目及び評価基準は表27に示した。
Test example B
Sensory evaluation using five panelists was performed on the fermented milk of Example A prepared in Example A and the fermented milk of Comparative Example B prepared in Comparative Example B. Evaluation items and evaluation criteria are shown in Table 27.

Figure 0005606672
Figure 0005606672

表28に示したように実施例A発酵乳は、比較例B発酵乳と比較して、おいしさ、のど越し、風味および総合評価のすべての官能評価項目において優れていることが確認された。   As shown in Table 28, it was confirmed that the fermented milk of Example A was superior to all the sensory evaluation items of taste, throat, flavor and comprehensive evaluation as compared with the fermented milk of Comparative Example B.

Figure 0005606672
Figure 0005606672

本発明によれば、プレバイオティクスとプロバイオティクスとを組み合わせたシンバイオティクスを利用した腸内環境調整方法を提供することができる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the intestinal environment adjustment method using the synbiotic which combined prebiotic and probiotic can be provided.

実施例1で得られたガラクトマンナンの歪依存性測定を行った結果を示すグラフである。グラフ中の●はG’‘を意味し、▲はG‘を意味する(図2においても同じ)。It is a graph which shows the result of having performed distortion dependence measurement of the galactomannan obtained in Example 1. FIG. In the graph, ● means G ″ and ▲ means G ′ (the same applies to FIG. 2). 実施例2で得られたガラクトマンナンの歪依存性測定を行った結果を示すグラフである。It is a graph which shows the result of having performed distortion dependence measurement of the galactomannan obtained in Example 2. FIG.

Claims (2)

(A)プレバイオティクスとして、加水分解されたグァーの胚乳部分であって、次の性質を含むもの、(1)プルランを分子量マーカーとして用いた高速液体クロマトグラフィーによるゲルろ過で重量平均分子量が3〜50kDaと算出されるガラクトマンナン、(2)ケルダール法により窒素含量を測定し、係数6.25を乗じて算出されたタンパク質含量が1.0%以下であるものと、(B)プロバイオティクスとして、酪酸生成菌からなり、さらに水分含量が20%以下であるもの、の両者を含有するシンバイオティクスであって、
前記加水分解されたグァーの胚乳部分が、次の性質を含むもの、(3)固形分含量15%水溶液の粘度が、回転式粘度計で回転数60rpm、20℃で測定したときに20mPa・s以下であるものであり、
前記加水分解されたグァーの胚乳部分が、次の性質を含むもの、(4)分解物の固形物含量が1.0%水溶液99gに1.0gのポリオキシエチレン付加型界面活性剤(POE)を添加して測定した曇点が60℃以下であるもの、であり、
(A)前記加水分解されたグァーの胚乳部分1質量部に対して、1/5質量部のイソプロピルアルコールを加えてよく湿らせた後、激しくかき混ぜながら水10質量部加えた溶液(溶液(1))の粘度がB型粘度計で25℃、No.1ローター、12rpmで測定したときに20mPa・s以下、
(B)溶液(1)を沸騰水中で10分間加熱し冷却後に同条件で測定した粘度が20mPa・s以下(溶液2)、
(C)溶液(2)1質量部に5%ホウ酸ナトリウム水溶液1/5質量部を添加し、混和、放置したものを動的粘弾性測定装置で、25℃、1Hzでひずみ依存性測定をすると、線形領域で貯蔵弾性率(G‘)>損失弾性率(G’‘)かつ線形領域から非線形領域を示す測定曲線を得るものであり、
前記酪酸生成菌が、Clostridium butyricum、Eubacterium hallii、E.ramulus、E.rectale、E.ventriosum、Roseburia intestinalisからなる群から選択される少なくとも一つであることを特徴とするシンバイオティクス。
(A) As a prebiotic, hydrolyzed guar endosperm portion containing the following properties: (1) gel filtration by high performance liquid chromatography using pullulan as a molecular weight marker, the weight average molecular weight is 3 A galactomannan calculated as ˜50 kDa, (2) a protein content calculated by measuring the nitrogen content by the Kjeldahl method and multiplying by a coefficient of 6.25 is 1.0% or less, and (B) probiotics As a symbiotic containing both butyric acid-producing bacteria and having a water content of 20% or less,
The endosperm portion of the hydrolyzed guar has the following properties: (3) When the viscosity of a 15% solid content aqueous solution is measured with a rotary viscometer at a rotation speed of 60 rpm and 20 ° C., 20 mPa · s Is the following:
The endosperm portion of the hydrolyzed guar has the following properties: (4) 1.0 g of polyoxyethylene addition type surfactant (POE) in 99 g of 1.0% aqueous solution with a solid content of the degradation product of 1.0% The cloud point measured by adding is 60 ° C. or less,
(A) To 1 part by mass of the hydrolyzed guar endosperm, 1/5 part by mass of isopropyl alcohol was added and moistened, and then 10 parts by mass of water (solution (1 )) When measured with a B-type viscometer at 25 ° C., No. 1 rotor, 12 rpm, 20 mPa · s or less,
(B) Solution (1) is heated in boiling water for 10 minutes, cooled, and the viscosity measured under the same conditions is 20 mPa · s or less (Solution 2),
(C) Solution (2) Add 1/5 parts by mass of 5% aqueous sodium borate solution to 1 part by mass, mix and leave the mixture with a dynamic viscoelasticity measuring device at 25 ° C and 1 Hz. Then, the storage elastic modulus (G ′)> loss elastic modulus (G ″) in the linear region and the measurement curve indicating the non-linear region from the linear region is obtained.
The butyric acid producing bacterium is Clostridium butyricum, Eubacterium halliii, E. coli. Ramulus, E.M. Rectale, E.I. A symbiotic which is at least one selected from the group consisting of ventriosum and Roseburia intestinalis .
さらにツバキ科植物成分を含有することを特徴とする請求項1に記載のシンバイオティクス。 The synbiotic according to claim 1, further comprising a camellia plant component.
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