JP5590621B2 - 炎症性障害の処置を処置するためのアネキシンおよびその使用 - Google Patents
炎症性障害の処置を処置するためのアネキシンおよびその使用Info
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Description
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
炎症性障害の処置のための有効量のアネキシンA5を含む治療用薬学的組成物。
(項目2)
前記アネキシンA5の量が炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、項目1に記載の組成物。
(項目3)
前記炎症促進性サイトカインがTNF−α及びIL−1βから選択される、項目2に記載の組成物。
(項目4)
前記アネキシンA5の量が炎症性障害における臓器機能不全の処置に有効である、項目1乃至3のいずれか一項に記載の組成物。
(項目5)
前記臓器が心臓、肺、肝臓、腎臓及び脳からなる群より選択される、項目4に記載の組成物。
(項目6)
敗血症の処置に用いるための項目1に記載の組成物。
(項目7)
前記アネキシンA5の量がTNF−α及びIL−1βから選択される炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、項目6に記載の組成物。
(項目8)
前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、項目1乃至7のいずれか一項に記載の組成物。
(項目9)
敗血症の処置用の薬剤を調製するためのアネキシンA5の使用。
(項目10)
炎症性障害の処置用の薬剤を調製するためのアネキシンA5の使用。
(項目11)
前記アネキシンA5の量がTNF−α及びIL−1βから選択される炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、項目9又は10に記載の使用。
(項目12)
心機能不全の処置用の薬剤を調製するためのアネキシンA5の使用。
(項目13)
前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、項目9乃至12のいずれか一項に記載の使用。
(項目14)
前記アネキシンA5の量がマウス、ブタ、イヌ、ラット及びヒトからなる群より選択される哺乳動物の処置に有効である、項目13に記載の使用。
(項目15)
被験体において炎症性障害を処置する方法であって、該被験体に有効量のアネキシンA5を投与することを含む、方法。
(項目16)
前記アネキシンA5の量が炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、項目15に記載の方法。
(項目17)
前記炎症促進性サイトカインがTNF−αである、項目16に記載の方法。
(項目18)
前記炎症促進性サイトカインがIL−1βである、項目16に記載の方法。
(項目19)
前記アネキシンA5の量が前記炎症性障害における臓器機能不全の処置に有効である、項目15乃至18のいずれか一項に記載の方法。
(項目20)
前記臓器が心臓、肺、肝臓、腎臓及び脳からなる群より選択される、項目19に記載の方法。
(項目21)
被験体において敗血症を処置するための方法であって、該被験体に有効量のアネキシンA5を投与することを含む方法。
(項目22)
前記アネキシンA5の量がTNF−α及びIL−1βから選択される炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、項目21に記載の方法。
(項目23)
前記臓器が心臓、肺、肝臓、腎臓及び脳からなる群より選択される、項目22に記載の方法。
(項目24)
前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、項目21乃至23のいずれか一項に記載の方法。
(項目25)
前記被験体がマウス、ブタ、イヌ、ラット及びヒトからなる群より選択される哺乳動物である、項目21乃至24のいずれか一項に記載の方法。
(項目26)
アネキシンA5及び薬学的に受容可能な担体及びアネキシンA5を含む薬剤を調製するための使用説明書及び/又は炎症性障害を処置するためにアネキシンA5を投与するための使用説明書を含む、キット。
(項目27)
前記障害が敗血症である、項目26に記載のキット。
(項目28)
アネキシンA5及び薬学的に受容可能な担体及びアネキシンA5を含む薬剤を調製するための使用説明書及び/又は被験体における臓器機能不全を処置するためにアネキシンA5を投与するための使用説明書を含む、キット。
・心拍数:毎分90拍超(頻脈)
・体温:36℃(96.8°F)未満又は38℃(100.4°F)超(低体温又は発熱)
・呼吸数:毎分20回超、又は血液ガスではPaCO2として32mmHg(4.3kPa)未満(頻呼吸又は過呼吸による低炭酸ガス血)
・白血球数:4,000個/mm3未満又は12,000個/mm3超(<4×109又は>12×109個/L)或いは10%超の帯状体(未熟な白血球);(白血球減少、白血球増加、又は帯状核細胞増加)
発熱及び白血球増加は急性期応答の特徴であるが、頻脈は血行動態悪化の初期徴候である場合が多い。頻呼吸は感染及び炎症による代謝ストレスの増大と関係づけることができるが、嫌気性細胞代謝の発現をもたらす灌流不良の徴候であるとすることもできる。
・心拍数:痛み及び薬剤投与などの刺激の無い場合において年齢的に正常値よりも上の2標準偏差超、又は30分超乃至4時間の説明のつかない持続性上昇。乳児では、迷走神経の刺激、ベータ遮断剤もしくは先天性心疾患の無い場合において年齢的に第10パーセンタイル未満、又は30分超の説明のつかない持続性低下も含む。
当業者なら認めるであろうが、SIRS基準は臨床的文脈内で注意深く解釈されなければならない。これらの基準は主として、今後の臨床研究がより厳密でより容易に再現可能となるように重症患者をより客観的に分類することを目的として存在する。
・肺−急性肺損傷(ALI:acute lung injury)(PaO2/FiO2<300)又は急性呼吸促迫症候群(ARDS:acute respiratory distress syndrome)(PaO2/FiO2<200)
・脳−脳障害−(症状:興奮、錯乱、昏睡);(病因:虚血、出血、微小血栓、微小膿瘍、多発性壊死性白質脳症)
・肝臓−蛋白質合成機能の破壊:凝固因子合成不能による進行性凝固障害として急性に現れる;代謝機能の破壊、非抱合型血清ビリルビン(間接ビリルビン)レベルの上昇をもたらすビリルビン代謝の停止として現れる。
・心臓−少なくとも部分的に筋細胞機能を抑制するサイトカインによる収縮期及び拡張期心不全;細胞損傷、が(本来、必ずしも虚血性ではないが)トロポニン漏出として現れる。
・Affinity Research、UK;アネキシンA5−死滅しつつある細胞の同定
・Bender MedSystems GmbH、D;Bender MedSystems GmbHはBoehringer Ingelheimを介してアネキシンA5の製造権を保持し、アネキシンA5製品の広範囲な各種フォーマット及びコンジュゲートを提供している。
・Clontech、Palo Alto、CA;ApoAlertアネキシンA5プロトコル
・IQ Products、Groningen、NL;ホスファチジルセリン検出用アネキシンA5
・Oncogene Research Products;AnxA5−Biotin、AnxA5−FITCアポトーシス検出キット
・R&D Systems;AnxA5−Fluorescein、AnxA5−Phycoerythrin
・Tau Technologies BV、NL;抗アネキシンA5抗体
・Trevigen、MD、USA;アネキシンA5アポトーシス用製品;TACS AnxA5−FITC、TACS AnxA5−Biotin
アネキシンA5の遺伝子配列の初期の公表文献は、1987年におけるエンドネキシンIIの開示文献である(Schaepferほか、1987年、Structural and functional characterization of endonexin II, a calcium−and phospholipid−binding protein. PNAS USA 84:6078−6082)。この蛋白質の初期の公表文献は1979年における開示文献である(Bonn, H及びKraus W. 1979年、Isolation and characterization of a new placental specific protein (PP10). Arch.Gynecol.227:125−134)。
動物 この研究は米国国立衛生研究所により公表された「Guide for the Care and Use of Laboratory」(NIH冊子第85−23号、1996年改訂)に準拠している。動物の使用は、University of Western Ontario (Canada) のAnimal Use Subcommitteeによって承認された。C57BL/6マウスはJackson Laboratoryから購入した。繁殖プログラムをLawson Health Research Instituteの動物飼育施設で行って子孫を生ませた。体重21乃至26gの成体(3乃至4ヶ月令)雄マウスについて研究を行った。
敗血症は、全ての病院又は集中治療室入院の2乃至11%において生じる一般的な臨床問題である[11、12]。過去20年にわたる多大な研究努力にもかかわらず、敗血症は、依然として集中治療室における主要な死因である。心筋機能不全は重症敗血症の患者でよくみられ、敗血症患者を高死亡率に関連づけられる多臓器不全発症の高いリスク状態にする[13]。エンドトキシン又はLPSは、敗血症時の心筋抑制に関与する重要な病原体である[3、4]。LPSの心機能に対する抑制作用は炎症促進性サイトカインの産生によって媒介される[14]。こうしたサイトカインの中で、TNF−αは敗血症時の心機能不全の主な要因の一つであると提唱されている[4、15]。心筋細胞はLPS投与後にTNF−αを合成し[15乃至17]、心筋内に産生された高レベルのTNF−αが心機能不全発症の一因となる[17]。
図2は、内毒素血症マウスにおける心筋TNF mRNAの発現に対するアネキシンA5の効果を示している。マウスをLPSで4時間処置して(4mg/kg i.p.、n=7)内毒素血症及び偽対照に比し有意な心筋TNF mRNA発現を誘発させた。アネキシンA5(5μg/kg i.v.、n=6)で処置すると、LPS単独の場合に比し、有意に心筋TNF mRNA発現が低下した。食塩水(100μL、i.p.)処置を偽対照とした(n=5)。TNF mRNAレベルはリアルタイムRT−PCRにより測定した。データは平均値±SEMであり、一元ANOVAに続いてNewman−Keulテストを行って解析されている。* 偽対照に対してP<0.01、# LPSに対してP<0.05。
マウスを以下の群、即ち、食塩水(偽対照、n=15)、組換えヒトアネキシンA5(n=11)、リポ多糖(LPS、n=16)及びLPSプラス組換えヒトアネキシンA5(n=17)処置群に無作為に割り付けた。LPS(4mg/kg i.p.)は敗血症をシミュレートするために投与した。マウスは、LPS投与の直後及び2時間後の2回の組換えヒトアネキシンA5(5μg/kg i.v.)注射により処置した。LPS投与の4時間後に、マウスをケタミン(50mg/kg)及びキシラジン(12.5mg/kg)混液のIP注射で麻酔し、Millar圧伝導カテーテルを用いてインビボ心機能を測定した。一部のマウスを屠殺し、採血し、心臓を摘出した。エクスビボでの心機能はLangendorff心臓標本を用いて測定した。心機能測定の終了後、血漿及び心臓を、更なる分析のために−80℃の冷凍庫に貯蔵した。
LPS及び/又はアネキシンA5処置の4時間後に、マウスをケタミン及びキシラジンで麻酔した。Millar圧伝導カテーテル(型式SPR−839、サイズ1.4F)を右頸動脈に挿入し、LV中へ進めた。10分間安定させた後、PowerLab Chartプログラム(ADInstruments、Mountain View、CA)を用い、シグナルを連続的に記録した。血行動態パラメータは、心臓圧−容量分析プログラム(PVAN 3.2、Millar Instruments、TX)により以前に報告されたようにして(Xiangほか、Circulation. 2009年、120:1065−1074)分析した。
LPS及び/又はアネキシンA5処置の4時間後に、マウスを屠殺した。マウスの心臓を摘出し、以前報告された(Pengほか、Circulation. 2005年、111:1637−1644)ようにしてLangendorffシステムで潅流して心機能を測定した。つまり、心臓を2mL/分の一定流量のKrebs−Henseleit緩衝液で潅流した。潅流緩衝液は37℃に維持し、95%O2及び5%CO2の混合気体で連続的に泡立たせた。6−0絹製縫合糸を左心室尖を介して置き、力−変位変換器(FT03、Grass Instrument Co.)に接続されている軽量剛性の連結棒を通した。収縮力及び心拍数をPowerLab Chartプログラム(ADInstruments、Mountain View、CA)によって測定した。心仕事量を上記力(g)に上記心拍数(拍/分)を乗じることで算出し、心重量に対して標準化した。
以前に報告された(Pengほか、Cardiovasc Res. 2003年;59:893−900及びGeoghegan−Morphetほか、Cardiovasc Res. 2007年;75:408−416)ようにしてTRIzol試薬(Invitrogen、Burlington、Ontario)を用い、LV心筋及び心筋細胞から全RNAを分離した。M−MLV逆転写酵素及びランダムプライマー(Invitrogen、Burlington、Ontario)を用いてcDNAを合成した。リアルタイムPCRは、SYBR Green PCR Master Mixをメーカー(Abm、Vecouver、BC)の使用説明書に従って用い、実施した。TNF−?のオリゴヌクレオチドプライマーはセンス5’ CCG ATG GGT TGT ACC TTG TC 3’及びアンチセンス5’ GGG CTG GGT AGA GAA TGG AT 3’とした。IL−1βのプライマーはセンス5’ ACAAGGAGAACCAAGCAACGAC 3’及びアンチセンス5’ GCTGATGTACCAGTTGGGGAAC 3’とした。センス5’ TTG AAA ATC CGG GGG AGA G 3’及びアンチセンス5’ ACA TTG TTC CAA CAT GCC AG 3’のオリゴヌクレオチドプライマーを用いる負荷対照として28SrRNAを使用した。サンプルはMJ Research Opticon Real−Time PCR装置を用いて35サイクル増幅した。
本出願者の以前の報告8、9に記載されているようにして、マウスTNF−α ELISAキット(Cedarlane Laboratory、Missisauga、Ontario)を用いて心筋及び血漿TNF−α蛋白質レベルを測定した。この左心室(LV)心筋組織をPBS中にホモゲナイズした。遠心分離後、上清を採集して蛋白質濃度及びTNF−α ELISAの測定を行った。心筋TNF−αの測定値は各サンプルの蛋白質濃度で標準化した。血漿IL−1β蛋白質レベルは、eBioscience Inc、CAからのELISAキットを用いて測定した。
心臓組織中のリン酸化/全p38及びERK1/2蛋白質レベルをウエスタンブロット分析により分析した。つまり、40μgの蛋白質をドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動により分離した。次に、蛋白質をポリビニリデンジフルオリド膜に移し、ブロットをp38(1:800、Cell Signaling、Danvers、MA)、リン酸化p38(Thr180/Tyr182、1:800、Cell Signaling)、ERK1/2(1:800、Cell Signaling)又はリン酸化ERK1/2(Thr202/Tyr204、1:800、Cell Signaling)に対する抗体でプローブした。ブロットを西洋ワサビペルオキシダーゼ−結合二次抗体(1:2,000、BioRad、Hercules、CA)でプローブし、ECL化学発光法を用いて検出を行った。
成体WT及びnNOS−/−マウスの心臓から心筋細胞を分離した。心臓をLangendorff装置に取り付け、45μg/mLのリベラーゼブレンザイムIV(Roche)を含む消化用緩衝液で潅流した。消化後、細胞を再懸濁し、漸増濃度(12.5μM乃至1.0mM)のCa2+を含有する緩衝液中の一連の沈殿及び再懸濁工程にかけた。次いで、棒状筋細胞をラミニン被覆35mm皿に50個/mm2の密度でプレートし、2%CO2中37℃で6時間培養した。この後に、アネキシンA5(1.0μg/ml)を添加するか、添加せずにLPS(2.5μg/ml)で4時間処置した。
Dynabead Protein G lmmunprecipitationキット(Invitrogen、CA)を用いてTLR4及びアネキシンA5の同時免疫沈降を実施した。つまり、磁気ダイナビーズを20μgのTLR4抗体(Santa Cruz、CA)含有抗体結合性緩衝液中に1時間懸濁した。心筋組織をNP40細胞溶解緩衝液にホモゲナイズし、超音波処理した。Lowry蛋白分析法(Bio−Rad、Mississauga、ON)を用いて蛋白質濃度を測定した。濃度を測定することによってチューブ当たり1mgの蛋白質と、使用量を等しくすることを可能とした。ヒト組換えアネキシンA5(Biovision、CA)500ngを組織サンプルに添加し、TLR4被覆ビーズと共に2時間インキュベートした。こうしたサンプルをダイナビーズから溶離させ、12%ポリアクリルアミドゲルに等しく負荷した。ウェスタンブロッティングを行い、抗アネキシンA5抗体(1:2,000、Biovision、CA)を用いてアネキシンA5を検出した。膜を取り除き、抗TLR4抗体(1:2,000、Santa Cruz、CA)を用いてTLR4について再プローブした。
結果は全て平均値±SEMで表した。二元配置分散分析(ANOVA)に続いてボンフェローニ補正した対応のないスチューデントのt検定を行い、処置群間の差を検出した。P値が0.05未満である場合に統計的有意性を付与した。
食塩水、アネキシンA5、LPS又はLPSプラスアネキシンA5処置の4時間後に、マウスを麻酔し、心機能をMillar圧伝導カテーテルにより測定した。得られる血行動態パラメータとしては、平均動脈圧(MAP:mean artery pressure)、心拍数、左心室駆出率(LVEF:left ventricle ejection fraction)、心拍出量、左心室圧微分値(LV dP/dtmax及びdP/dtmin)、最大dP/dt時の圧(P@dP/dtmax)、LV収縮終期圧(LVESP:LV end systolic pressure)、LV拡張終期圧(LVEDP:LV end diastolic pressure)、LV拡張終期容積(LVEDV:LV end diastolic volume)、等容性弛緩の時定数(Tau)及び最大パワーが挙げられる(表2、図4)。LPS処置後、MAP、LVEF、LV+dP/dtmax及び−dP/dtmin、P@dP/dtmax、LVESP、LVEDP及び最大パワーは有意に(P<0.01)減少したが、LVEDVは有意に(P<0.01)増加した。アネキシンA5を処置すると、内毒素血症マウスのLVESP及びP@dP/dtmaxは有意に増加した(P<0.05、表2)。重要なことは、LV +dP/dtmax及び−dP/dtminが、LPS群に比し、LPS及びアネキシンA5処置群において有意に増加したことである(P<0.05、図4)。
食塩水、アネキシンA5、LPS又はLPSプラスアネキシンA5処置の4時間後に、動物を屠殺し、心機能をLangendorff心臓標本を用いて測定した。心拍数及び収縮力を記録した。心仕事量並びに収縮(+dF/dtmax)及び弛緩(−dF/dtmin)速度を解析した。その結果、収縮及び弛緩速度、収縮力並びに心仕事量は、偽対照に比しLPS処置群では有意に減少することが分かった(図5、P<0.001)。組換えヒトアネキシンA5で処置すると、LPS群に比し、4種の心臓パラメータの全てが有意に改善した(図6、P<0.01)。
食塩水、アネキシンA5、LPS又はLPSプラスアネキシンA5処置の4時間後に、心筋TNF mRNA及び蛋白質発現をそれぞれ、リアルタイムRT−PCR及びELISAにより測定した。TNF−α mRNA及び蛋白質レベルはいずれも、食塩水処置の偽対照に比し、LPS処置マウスのLV心筋において有意に増大した(P<0.01、図6A及び図6B)。アネキシンA5により処置すると、LPSにより誘発されるTNF−α発現は有意に低下した(P<0.05、図6A及び図6B)。同様に、TNF−α及びIL−1βの血漿レベルは、LPS処置マウスでは有意に増大し(P<0.01)、これはアネキシンA5処置により有意に低下した(P<0.05、図6C及び図6D)。
本発明者らは、p38及びERK1/2 MARKをLPSにより活性化することにより心筋TNF−αの発現がもたらされることを証明した。p38及びERK1/2はLPS誘発TNF−α発現において重要な役割を果たしていることから、心筋p38及びERK1/2のリン酸化に対するアネキシンA5の効果をウエスタンブロット分析法により検討した。LPS(4mg/kg、IP)処置の30分後、心筋p38及びERK1/2のリン酸化は有意に増大した(P<0.05、図4)。アネキシンA5をLPSと共に処置すると、p38及びERK1/2のリン酸化は対照レベルまで戻った(P<0.05、図7)。
心筋細胞におけるTNF−α及びIL−1βの発現に対するアネキシンA5の直接的効果を明らかにするために、成体心筋細胞を摘出して培養した。上記に報告したインビボデータと一致して、LPSは、この培養成体心筋細胞においてリアルタイムRT−PCRにより測定したTNF−α及びIL−1β mRNAレベルを有意に増大させ、この反応はアネキシンA5処置により抑止された(P<0.05、図8A及び図8B)。
アネキシンA5がLPS誘発TLR4シグナル伝達を阻害するメカニズムをさらに明らかにするために、同時免疫沈降法を用いてアネキシンA5及びTLR4受容体間の相互作用を検討した。食塩水及びLPS処置マウスからの心筋組織をホモゲナイズし、アネキシンA5と共にインキュベートした。磁気ダイナビーズを抗TLR4抗体で被覆してTLR4受容体を沈降させ、アネキシンA5についてブロットした。陽性対照として組換えヒトアネキシンA5を使用した。データから、食塩水及びLPS処置マウスの両方からの心筋サンプルにおけるアネキシンA5特異的バンド、これがアネキシンA5及びTLR4受容体間の相互作用を示していることが分かった(図9)。
Claims (44)
- 敗血症の処置のための有効量のアネキシンA5又はその変異体を含む治療用薬学的組成物であって、該アネキシンA5又はその変異体は、TLR4受容体と相互作用する、組成物。
- 前記組成物は、血液凝固障害を有しない被験体において使用するためのものである、請求項1に記載の組成物。
- 前記敗血症は、頻脈、低体温、発熱、頻呼吸、白血球減少、白血球増加、および帯状核細胞増加のうちの少なくとも2つによって特徴づけられ、感染が疑われるか又は証明されている、請求項1又は2に記載の組成物。
- 前記敗血症は、さらに、全身性低潅流によって特徴づけられる、請求項3に記載の組成物。
- 前記敗血症はさらに、輸液蘇生後の低血圧によって特徴づけられる、請求項3又は4に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5又はその変異体の量が炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、請求項1乃至5のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記炎症促進性サイトカインがTNF−α及びIL−1βから選択される、請求項6に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、請求項1乃至7のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5は、全長の天然に存在するポリペプチドである、請求項1乃至8のいずれか一項に記載の組成物。
- 敗血症の処置用の薬剤を調製するためのアネキシンA5又はその変異体の使用であって、該アネキシンA5又はその変異体は、TLR4受容体と相互作用する、使用。
- 前記薬剤は、血液凝固障害を有しない被験体において使用するためのものである、請求項10に記載の使用。
- 前記敗血症は、頻脈、低体温、発熱、頻呼吸、白血球減少、白血球増加、および帯状核細胞増加のうちの少なくとも2つによって特徴づけられ、感染が疑われるか又は証明されている、請求項10又は11に記載の組成物。
- 前記敗血症は、さらに、全身性低潅流によって特徴づけられる、請求項12に記載の組成物。
- 前記敗血症はさらに、輸液蘇生後の低血圧によって特徴づけられる、請求項12又は13に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5又はその変異体の量がTNF−α及びIL−1βから選択される炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、請求項10乃至14のいずれか一項に記載の使用。
- 前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、請求項10乃至15のいずれか一項に記載の使用。
- 前記アネキシンA5は、全長の天然に存在するポリペプチドである、請求項10乃至16のいずれか一項に記載の使用。
- 前記アネキシンA5又はその変異体の量がマウス、ブタ、イヌ、ラット及びヒトからなる群より選択される哺乳動物の処置に有効である、請求項10乃至17のいずれか一項に記載の使用。
- 被験体において敗血症を処置するための組成物であって、有効量のアネキシンA5又はその変異体を含む、組成物であって、該アネキシンA5又はその変異体は、TLR4受容体と相互作用する、組成物。
- 前記組成物は、血液凝固障害を有しない被験体において使用するためのものである、請求項19に記載の組成物。
- 前記敗血症は、頻脈、低体温、発熱、頻呼吸、白血球減少、白血球増加、および帯状核細胞増加のうちの少なくとも2つによって特徴づけられ、感染が疑われるか又は証明されている、請求項19又は20に記載の組成物。
- 前記敗血症は、さらに、全身性低潅流によって特徴づけられる、請求項21に記載の組成物。
- 前記敗血症はさらに、輸液蘇生後の低血圧によって特徴づけられる、請求項21又は22に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5又はその変異体の量がTNF−α及びIL−1βから選択される炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、請求項19乃至23のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、請求項19乃至24のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5は、全長の天然に存在するポリペプチドである、請求項19乃至25のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記被験体がマウス、ブタ、イヌ、ラット及びヒトからなる群より選択される哺乳動物である、請求項19乃至26のいずれか一項に記載の組成物。
- アネキシンA5又はその変異体及び薬学的に受容可能な担体及びアネキシンA5又はその変異体を含む薬剤を調製するための使用説明書及び/又は敗血症を処置するためにアネキシンA5又はその変異体を投与するための使用説明書を含む、キットであって、該アネキシンA5又はその変異体は、TLR4受容体と相互作用する、キット。
- 前記薬剤は、血液凝固障害を有しない被験体において使用するためのものである、請求項28に記載のキット。
- 前記敗血症は、頻脈、低体温、発熱、頻呼吸、白血球減少、白血球増加、および帯状核細胞増加のうちの少なくとも2つによって特徴づけられ、感染が疑われるか又は証明されている、請求項28又は29に記載のキット。
- 前記敗血症は、さらに、全身性低潅流によって特徴づけられる、請求項30に記載のキット。
- 前記敗血症はさらに、輸液蘇生後の低血圧によって特徴づけられる、請求項30又は31に記載のキット。
- 被験体における敗血症の処置することによって播種性血管内凝固(DIC)の発症を予防するための治療的薬学的組成物であって、該組成物は、アネキシンA5又はその変異体を含み、該アネキシンA5又はその変異体は、TLR4受容体と相互作用する、組成物。
- 前記アネキシンA5又はその変異体は、血液凝固障害を有しない被験体において使用するためのものである、請求項33に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5又はその変異体は、TNF−α及びIL−1βからなる群より選択される炎症促進性サイトカインを阻害するのに有効である、請求項33又は34に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5がアネキシンA5ポリペプチド、アネキシンA5核酸及びアネキシンA5を含む組換え細胞からなる群より選択される、請求項33乃至35のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5又はその変異体の量がマウス、ブタ、イヌ、ラット及びヒトからなる群より選択される哺乳動物の処置に有効である、請求項33乃至36のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記アネキシンA5は、全長の天然に存在するポリペプチドである、請求項33乃至37のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記敗血症は、頻脈、低体温、発熱、頻呼吸、白血球減少、白血球増加、および帯状核細胞増加のうちの少なくとも2つによって特徴づけられ、感染が疑われるか又は証明されている、請求項33乃至38のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記敗血症は、さらに、全身性低潅流によって特徴づけられる、請求項39に記載の組成物。
- 前記敗血症はさらに、輸液蘇生後の低血圧によって特徴づけられる、請求項39又は40に記載の組成物。
- 前記変異体は、全長の天然に存在するアネキシンに対して少なくとも80%同一である配列を有する、請求項1、19又は33に記載の組成物。
- 前記変異体は、全長の天然に存在するアネキシンに対して少なくとも80%同一である配列を有する、請求項10に記載の使用。
- 前記変異体は、全長の天然に存在するアネキシンに対して少なくとも80%同一である配列を有する、請求項28に記載のキット。
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