JP5510796B2

JP5510796B2 - 低侵襲血管新生計測装置

Info

Publication number: JP5510796B2
Application number: JP2010003600A
Authority: JP
Inventors: 亮小阪
Original assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 2010-01-12
Filing date: 2010-01-12
Publication date: 2014-06-04
Anticipated expiration: 2030-01-12
Also published as: JP2011142929A

Description

本発明は、医療分野、特に臓器移植や再生医療の分野において、移植手術後の臓器周辺における栄養血管網の新生過程や、糖尿病患者の末梢血管障害の治療効果を定量的に評価、診断するための低侵襲血管新生計測装置に関する。

近年、病気や事故によって失われた体の細胞や組織、臓器などの再生や機能回復を、細胞移植や組織移植することで実現する再生医療の研究開発が進んでおり、再生骨や再生軟骨、再生皮膚、再生角膜、再生心筋、再生腎臓、再生肝臓などが研究対象となっている。
これら再生組織や再生臓器を生体内へ移植した後、長期間安定して機能させるためには、酸素や栄養を供給できるような栄養血管網を、再生組織や再生臓器に誘導する必要がある。
そのため、再生組織や再生臓器を生体に移植した後、再生組織や再生臓器周辺の栄養血管網の新生度を評価することが重要である。

すなわち、こうした臓器移植に際しては、移植手術時に主要な血管は接続されるが、臓器移植の正否は、移植手術後、移植された臓器周辺における栄養血管網の新生度が大きく影響する。
主要血管の接続が成功しても、その後栄養血管網が健全に新生されなければ、結局移植された臓器に栄養が補給されず、最悪の場合壊死してしまう。
したがって、移植手術後、臓器周辺における栄養血管網の新生状況を正確に計測し、投薬治療、再手術の要否を的確に診断することが非常に重要である。
このことは、糖尿病患者の末梢血管障害の治療効果を定量的に診断する上でもまったく同様である。

従来、血液中の成分濃度を計測する装置として、下記特許文献１にみられるように、生体を撮像して得られる生体画像中の血管像に基づいて血液に含まれる成分濃度を算出することが知られている。

また、脳表面を含む複数部位の血流量の変化を計測する装置として、下記特許文献２にみられるように、複数の光照射プローブと複数の光検出プローブで、検出光量のマッピングを行うことが知られている。

さらに下記特許文献３には、300〜700nmの波長領域を使用した生体情報計測装置が、下記特許文献４には、３種類以上の光の吸収度合いの違いにより血液量を計測する血液量測定装置が、下記特許文献５には、所定波長の光を血液流路中に照射して、ヘマトクリットまたは酸素飽和度を求める血液特性計測装置が示されている。

これらの計測装置では、測定部位における血液の成分濃度や血液量は計測できるものの、臓器周辺における栄養血管網の新生度を計測することはできず、病理標本による侵襲を伴う検査や、血管造影剤による血管造影、超音波エコーを用いた画像診断技術などを使用して、生体内の血管を画像化することにより、非侵襲での検査方法が行われている。

特開２００８−８６４４９号公報特開２００６−２１８１９６号公報特開２００５−１２５１０６号公報特開２００３−１９４７１４号公報特開平１１−１０４１１４号公報

しかし、病理標本検査や血管造影検査は、被験者に大きな負担を掛けるものであり、これを定期的に行うと、被験者の健康を阻害するおそれが生じる。
また、超音波エコーを用いた画像診断技術では、画像分解能に制限があるため、細かい細動脈や毛細血管などの細い血管網までは評価することは困難である。
そこで、非侵襲あるいは低侵襲で被験者に負担を与えず、しかも簡便な計測装置により高精度に栄養血管網の新生度や末梢血管障害の治療効果の計測を可能にすることが強く求められている。

そこで、上記の課題を解決するため、本発明の低侵襲血管新生計測装置においては、次のような技術的手段を講じた。すなわち、
（１）新生血管の新生度を計測する装置において、生体組織透過性の高い近赤外光を照射するため、新生血管測定部位と基準部位の中間に密着され、広角の照射角を備える発光部と、該発光部から照射された近赤外光が、前記新生血管測定部位において散乱反射して得られる反射近赤外光と、前記基準部位において散乱反射して得られる反射近赤外光をそれぞれ受光し、その受光強度を検出するため、前記新生血管測定部位と、基準部位の双方に密着される２つのフォトダイオードと、前記発光部から照射された近赤外光の発光強度と前記フォトダイオードのそれぞれで受光した前記反射近赤外光の受光強度とに基づいて、前記新生血管測定部位と前記基準部位における近赤外光の減衰率をそれぞれ演算する２つの減衰率演算部と、前記減衰率演算部の双方が演算した減衰率の差分に基づいて、前記基準部位と対比した前記新生血管測定部位における血液量を演算する血液量演算手段と、該血液量を記録する記録部と、前記血液量の時間経過に応じた変化率に基づいて、前記新生血管測定部位内における新生血管の新生度を評価する血管新生度評価手段とを備えた。

（２）新生血管の新生度を計測する装置において、生体組織透過性の高い近赤外光を照射するため、新生血管測定部位と基準部位の中間に密着され、広角の照射角を備える発光部と、該発光部から照射された近赤外光が、前記新生血管測定部位を透過して得られる透過近赤外光と、前記基準部位において透過して得られる透過赤外光をそれぞれ受光し、その受光強度を検出するため、前記新生血管測定部位と、基準部位の双方に密着される２つのフォトダイオードと、前記発光部から照射された近赤外光の発光強度と前記フォトダイオードのそれぞれで受光した前記透過近赤外光の受光強度とに基づいて、前記新生血管測定部位と前記基準部位における近赤外光の減衰率をそれぞれ演算する２つの減衰率演算部と、前記減衰率演算部の双方が演算した減衰率の差分に基づいて、前記基準部位と対比した前記新生血管測定部位における血液量を演算する血液量演算手段と、該血液量を記録する記録部と、前記血液量の時間経過に応じた変化率に基づいて、前記新生血管測定部位内における新生血管の新生度を評価する血管新生度評価手段とを備えた。

（３）上記の低侵襲血管新生計測装置において、前記発光部は、酸化ヘモグロビンと還元ヘモグロビンの等吸収点となる波長を前記新生血管測定部位と前記基準部位に照射するようにした。

（４）上記の低侵襲血管新生計測装置において、ひとつの発光部から照射された近赤外光の前記反射近赤外光あるいは前記透過近赤外光を、前記フォトダイオードを複数用いて受光するようにした。

（８）上記の低侵襲血管新生計測装置において、前記発光部と前記フォトダイオードが２つの組からなり、前記減衰率演算部は、一方の組により前記新生血管測定部位における近赤外光の減衰率を演算するとともに、他方の組により、前記新生血管測定部位の近傍にある基準部位における近赤外光の減衰率を演算し、前記血管新生度評価手段は、前記新生血管測定部位における近赤外光の減衰率に基づいて演算された血液量の変化率と、前記基準部位における近赤外光の減衰率に基づいて演算された血液量の変化率とを比較することにより、前記新生血管測定部位内における新生血管の新生度を評価するようにした。

本発明によれば、次のような効果を奏することができる。
（１）生体外から近赤外線を測定部位に照射するため、非侵襲あるいは低侵襲で血管新生度の計測評価が可能となる。
（２）新生血管網を画像化するのではなく、血液量として評価するため、細動脈や毛細血管などの極めて細い新生血管網の新生度を計測評価することができ、造影剤を使用する必要もない。
（３）新生血管網の測定部位近傍に基準点を取るため、患者の生理状態の変動や日内変動の影響を軽減することができる。

第１実施例の基本ブロック図を示す。血管新生度を評価する評価部の構成例を示す。本実施例による血管新生計測装置をラットに用いた場合の実験結果を示す。実験に使用したプローブを示す。本発明の第２実施例の基本ブロック図を示す。各実施例で使用する計測プローブの例を示す。内視鏡を使用した生体内への適用例を示す。光ファイバを使用した生体内への適用例を示す。

以下、本発明の実施例を、図面を参照しつつ説明する。

図１は本発明の基本ブロック図を示すものであり、ＬＥＤまたは半導体レーザー素子からなる発光素子とこれを駆動する駆動回路からなる発光部１ａ、１ｂと、この発光部１ａ、１ｂから照射された近赤外光が、測定部位内において散乱反射して得られる反射近赤外光を受光するためのフォトダイオードからなる素子及びその出力を増幅する増幅回路からなる受光部２ａ、２ｂを備えている。

例えば、生体内の近赤外光が到達する範囲に植え込まれた、鼻や耳の再生軟骨や指の再生骨、再生皮膚などを対象に、発光部１ａ、１ｂから、生体の窓と呼ばれ、血液中のヘモグロビンに吸収される以外は、生体組織に対しては透過性が高い600〜1000nmの近赤外光を新生血管測定部位、及びその周辺の基準部位に照射し、新生血管測定部位内及び基準部位を散乱反射して得られた近赤外光をフォトダイオードあるいはフォトトランジスタを使用した受光部２ａ、２ｂでそれぞれ受光する。

そして、発光部１ａ、１ｂの信号と受光部２ａ、２ｂの信号に基づいて演算部５で新生血管測定部位内のヘモグロビンによる近赤外光の減衰率から、ランベルト・ベールの法則を利用して血液量を算出し、記録部６で計測値を保存する。
また、生体の日内変動や生理状態による変動の影響を補償するため、ほぼ同等の生体組織である新生血管測定部の近傍でも血液量を計測し、記録部で計測値を保存する。最後に評価部７で、新生血管の新生開始時からの新生血管測定部とその近傍の血液量の変化を差分することで、新生血管の新生度を評価する。

すなわち、発光部１ａの発光素子及び受光部２ａの受光素子は、新生血管測定部位である、再生治療を行った部分の直上付近に密着されるものであり、減衰率演算部３ａにより、発光部１ａの発光強度と受光部２ａの受光強度とに基づいて、新生血管測定部位における近赤外光の減衰率が演算される。

一方、発光部１ｂの発光素子及び受光部２ｂの受光素子は、移植された臓器の周辺であって、ほぼ同等の生体組織を有し、移植手術とは直接関わりなく、細動脈や毛細血管が健全に巡らされている基準部位に密着されるものであり、同様に、減衰率演算部３ｂにより、発光部１ｂの発光強度と受光部２ｂの受光強度とに基づいて、基準部位における近赤外光の減衰率が演算される。

各減衰率演算部３ａ、３ｂで演算された各減衰率は、血液量演算部５により新生血管測定部位における血液量を演算し、記録部６に計測日時とともに記録する。
同様に、血液量演算部５は基準部位における血液量を演算し、記録部６に計測日時とともに記録する。

血管新生度評価部７は、記録された新生血管測定部位における血液量及び基準部位における血液量に基づいて、手術後からの経過時間に応じた両者の血液量の変化率を求め、その差分に基づいて、正常な血液新生が行われた場合の変化率と比較し、細動脈や毛細血管が健全に新生しているか否かを評価する。

なお、血管新生度評価部７が、手術後からの経過時間に応じた新生血管測定部位の血液量の変化率と、基準部位における血液量の変化率の差分に基づいて、正常な血液新生が行われたか否かを評価しているが、これは、計測時の被験者の脈拍変動や体調等により左右するため、新生血管による影響のない基準部位における血液量の変化と新生血管測定部位における血液量の変化を比較することにより、被験者の脈拍変動や体調等による影響を排除するためである。
このような被験者の脈拍変動や体調等による影響が少ない場合は、必ずしも基準部位における血液量の変化率を求める必要はない。

図２に、血管新生度を評価する評価部の構成例を示す。
新生血管測定部位において、細動脈や毛細血管の新生が進むにつれ、その密度が高くなり、血液量が増大していく。一方、この発光部１ａから新生血管測定部位に照射された近赤外光は、血液中の赤血球に含まれるヘモグロビンに対し吸収性の高い波長を有しているため、細動脈や毛細血管の新生につれ、新生血管測定部位内での吸収量が増加し、散乱反射する反射近赤外光が減少することになる。
したがって、減衰率演算部３ａにより、発光部１ａからの発光強度と受光部２ａで検出される受光強度に基づいて減衰率を演算すれば、血液量演算部５により血液量を求めることができ、移植手術後の経過時間に応じた血液量の変化率を求めることができる。

同様に、発光部１ｂからの発光強度と受光部２ｂで検出される受光強度に基づいて、基準部位における血液量の変化率を求め、両者の差をとれば、基準部位における血液量の変化率と比較した新生血管測定部位における血液量の変化率と、血管新生診断マップにおける良好な血液量の変化率と比較することにより、新生血管測定部位において、細動脈や毛細血管の新生が健全に進行しているか否かを診断することが可能になる。

図３に、血管新生計測装置をラットに用いた場合の実験結果を示す。
本実験では、図４に示すように、半導体レーザー素子を使用した発光部から発光用光ファイバを通じて計測部位に近赤外光を照射し、浅部受光用光ファイバと深部受光用の光ファイバを通じて受光部により近赤外光を受光する。
なお、浅部受光用光ファイバと深部受光用の光ファイバは、その受光部が光源から半径方向に異なる距離にその先端が設置され、反射角に応じて浅部及び深部からの近赤外光を受光し、浅部の再生に関与しない毛細血管の血液量変化を補償する。

また、新生血管の測定部位の近傍に、血液量の基準部位を設け、同様の発光部及び受光部により、基準部位の血液量変化を求めた。
なお、血液量変化は赤血球数密度の変化として計測し、血管新生開始時、２日目、５日目の計測を行った。そして、５日間の赤血球数密度の変化の計測結果と５日目の実験終了時の病理標本結果による血管新生度合いの結果をまとめた。

その結果、本実施例により赤血球密度が、基準部位と比較して平均9.49×10⁴個/mm³増加したことが計測されたラット（血管誘導ゲルを使用）については、組織染色で血管誘導ゲルを使用して、血管新生が良好に進行していることが確認できた。
一方、基準部位と比較した赤血球密度の増加が平均5.90×10⁴個/mm³にとどまったラットについては、血管誘導ゲルを使用したものの、組織染色部位で血管新生が不良と評価され、さらに血管誘導ゲルを使用しないラットについては、基準部位と比較した赤血球密度の増加が平均1.58×10⁴個/mm³と計測された。
本試験の結果、本実施例により計測された赤血球密度の増加が、血管新生度を非侵襲で評価する上で有用なパラメータになることが確認された。

図５は本発明の実施例の基本ブロック図を示すものであり、１つの発光部１ｃに対し、２つの受光素子２ｃ、２ｄを使用した例を示す。
この発光部１ｃは、新生血管測定部位及び基準部位の双方に照射し得るよう広角な発光素子を備えており、減衰率演算部３ａ、３ｂの双方に発光部１ｃの発光強度が入力される点を除いて、他の構成は図１、図２と同様である。

図６に、実施例で使用する計測プローブの例を示す。
図６に示すプローブは、生体組織に密着させるフレキシブルシートに発光素子である発光用ＬＥＤ、受光素子である受光用ＬＥＤを配列したものである。このプローブは、特に第２実施例に使用されるものであり、フレキシブルシートにおける発光用ＬＥＤ、受光用ＬＥＤの配列に基づいて、新生血管の測定部位と基準部位を含め、広範囲の部位について、血液量を測定し、血管新生度を評価することが可能である。

図７は、計測対象が生体外から近赤外光の到達しない部位にある、再生心筋や再生骨、再生軟骨、再生腎臓、再生肝臓などの大規模な新生血管の新生度を出来るだけ少ない侵襲で評価する際の生体内への適用例を示す。

生体外から近赤外光の到達しない深い狭い部位の血管新生を評価する場合、体表面より生体内の再生部位近傍まで、事前に留置されたカテーテルを通じて挿入したプローブを利用する。
ここで使用するプローブは、図８に示されるように弾力性のある合成樹脂の中に、発光用光ファイバと受光用光ファイバが埋め込まれており、その先端が血管新生部位あるいは基準部位に密着され、それぞれの末端は、外部に設置された機器内の発光部、受光部に接続されている。そして、発光部から発光用光ファイバを通じて、新生血管測定部位に近赤外光を照射し、新生血管測定部位内を散乱反射して得られた近赤外光を、受光用光ファイバを通じて受光部で受光する。他の構成は実施例１と同様である。

以上、実施例では、発光部から照射された近赤外光が、新生血管の測定部位及び基準部位内において散乱反射して得られる反射近赤外光を受光することにより血液量を計測したが、測定部位によっては、受光部により透過した透過近赤外光を受光することにより血液量を計測してもよい。この場合は、受光部は、新生血管の測定部位及び基準部位を挟んで発光部に相対するよう被験者に密着させる。

以上のとおり、本発明によれば、生体組織透過性の高い近赤外光を測定部位内に照射するための発光部と、測定部位内において得られる反射近赤外光あるいは透過赤外光を受光するための受光部を設け、新生血管測定部位とその近傍の基準部位の血液量を測定するという簡便な構成で、血管の新生度を簡単にしかも高精度に計測することができるので、患者の再生臓器の再生度あるいは糖尿病患者の末梢血管障害の治療効果を、定期的かつ定量的に診断する診断機器として広く利用されることが期待できる。

１ａ〜１ｄ発光部
２ａ〜２ｄ受光部
３ａ、３ｂ減衰率演算部
５演算部

Claims

新生血管の新生度を計測する装置において、
生体組織透過性の高い近赤外光を照射するため、新生血管測定部位と基準部位の中間に密着され、広角の照射角を備える発光部と、
該発光部から照射された近赤外光が、前記新生血管測定部位において散乱反射して得られる反射近赤外光と、前記基準部位において散乱反射して得られる反射近赤外光をそれぞれ受光し、その受光強度を検出するため、前記新生血管測定部位と、基準部位の双方に密着される２つのフォトダイオードと、
前記発光部から照射された近赤外光の発光強度と前記フォトダイオードのそれぞれで受光した前記反射近赤外光の受光強度とに基づいて、前記新生血管測定部位と前記基準部位における近赤外光の減衰率をそれぞれ演算する２つの減衰率演算部と、
前記減衰率演算部の双方が演算した減衰率の差分に基づいて、前記基準部位と対比した前記新生血管測定部位における血液量を演算する血液量演算手段と、
該血液量を記録する記録部と、
前記血液量の時間経過に応じた変化率に基づいて、前記新生血管測定部位内における新生血管の新生度を評価する血管新生度評価手段とを備えたことを特徴とする低侵襲血管新生計測装置。
新生血管の新生度を計測する装置において、
生体組織透過性の高い近赤外光を照射するため、新生血管測定部位と基準部位の中間に密着され、広角の照射角を備える発光部と、
該発光部から照射された近赤外光が、前記新生血管測定部位を透過して得られる透過近赤外光と、前記基準部位において透過して得られる透過赤外光をそれぞれ受光し、その受光強度を検出するため、前記新生血管測定部位と、基準部位の双方に密着される２つのフォトダイオードと、
前記発光部から照射された近赤外光の発光強度と前記フォトダイオードのそれぞれで受光した前記透過近赤外光の受光強度とに基づいて、前記新生血管測定部位と前記基準部位における近赤外光の減衰率をそれぞれ演算する２つの減衰率演算部と、
前記減衰率演算部の双方が演算した減衰率の差分に基づいて、前記基準部位と対比した前記新生血管測定部位における血液量を演算する血液量演算手段と、
該血液量を記録する記録部と、
前記血液量の時間経過に応じた変化率に基づいて、前記新生血管測定部位内における新生血管の新生度を評価する血管新生度評価手段とを備えたことを特徴とする低侵襲血管新生計測装置。
請求項１または２記載の低侵襲血管新生計測装置において、
前記発光部は、酸化ヘモグロビンと還元ヘモグロビンの等吸収点となる波長を前記新生血管測定部位と前記基準部位に照射することを特徴とする低侵襲血管新生計測装置。
請求項１ないし３のいずれか１項に記載の低侵襲血管新生計測装置において、
前記発光部から照射された近赤外光の前記反射近赤外光あるいは前記透過近赤外光を、前記フォトダイオードを複数用いて受光するようにしたことを特徴とする低侵襲血管新生計測装置。