JP5431171B2 - 自己免疫障害の処置 - Google Patents
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Description
本出願は、2007年9月15日に出願された米国仮特許出願第60/918,518号に対する優先権を主張する。
タンパク質不均一性は、ある範囲の翻訳後修飾によって引き起こされ得る。タンパク質不均一性は、しばしば、種々のタイプの翻訳後修飾(カルボキシル化、ヒドロキシル化、タンパク質分解プロセシング、硫酸化(suflation)、およびグリコシル化が挙げられる)から生じ、そのうちグリコシル化は、最も一般的な修飾である(非特許文献1)。翻訳後修飾は、潜在的に、生成物生成(例えば、適切なタンパク質折りたたみの程度に影響を及ぼすことによって)、安定性、ならびにある範囲の薬物動態学的パラメーターおよび薬力学的パラメーター、ならびに安全性および免疫原性に影響を及ぼし得る。上記治療用生物製剤の翻訳後修飾、もしくはタンパク質ベースの生物医薬品は、それらの治療適用に関してタンパク質特性に影響を及ぼし得る。
一局面において、本発明は、長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインおよび長さが227アミノ酸の改変Ig部分を含むリンホトキシン−βレセプター(LT−β−R)−Ig−融合タンパク質の集団を含む組成物に関し、ここで上記LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号21に示される野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけ失っており、上記LT−β−R−Ig−融合タンパク質は、N末端ピログルタミン酸を欠いている。
一実施形態において、上記関節リウマチ用薬物は、TNFインヒビターである。
本発明はまた、以下の項目を提供する。
(項目1)
リンホトキシン−βレセプター(LT−β−R)−Ig−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、該組成物は、長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインおよび長さが227アミノ酸の改変Ig部分を含み、ここで該LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号21に示される野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけを失っており、そして該LT−β−R−Ig−融合タンパク質は、N末端のピログルタミン酸を欠いている、組成物。
(項目2)
上記改変LT−β−R−Ig融合タンパク質のN末端アミノ酸は、非極性アミノ酸である、項目1に記載の組成物。
(項目3)
上記非極性アミノ酸は、バリン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸6)もしくはアラニン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸5)のいずれかである、項目2に記載の組成物。
(項目4)
上記LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも95%のN末端アミノ酸は、バリン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸6)もしくはアラニン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸5)のいずれかである、項目1に記載の組成物。
(項目5)
哺乳動物細胞において、配列番号4に示されるLTBRの細胞外ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現することによって作製される、項目1、3もしくは4のいずれか1項に記載の組成物。
(項目6)
上記核酸分子は、配列番号3に示される配列を含む、項目5に記載の組成物。
(項目7)
改変Ig部分は、IgG1アイソタイプのFc領域を含む、項目5に記載の組成物。
(項目8)
上記改変Ig部分は、配列番号2に示されるアミノ酸配列を含む、項目5に記載の組成物。
(項目9)
上記Ig部分は、グリコシル化されていない、項目5に記載の組成物。
(項目10)
哺乳動物細胞において、配列番号5に示されるLT−β−R−Ig融合タンパク質をコードする核酸分子を発現することによって作製される、項目5に記載の組成物。
(項目11)
上記核酸分子は、配列番号7に示される配列を含む、項目10に記載の組成物。
(項目12)
上記発現する工程は、製造スケールにおいて行われる、項目11に記載の組成物。
(項目13)
改変LT−β−R細胞外ドメインおよび改変Ig部分を含むリンホトキシン−βレセプター−免疫グロブリン(LT−β−R−Ig)−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、ここで該改変LT−β−R細胞外ドメインはグリコシル化されていない、組成物。
(項目14)
上記LTBRのグリコシル化されていない細胞外ドメインは、配列番号10のアミノ酸1〜194を含む、項目13に記載の組成物。
(項目15)
リンホトキシン−βレセプター−免疫グロブリン(LT−β−R−Ig)−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、該融合タンパク質は、長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインおよび改変Ig部分を含み、ここで該集団は、野生型LT−β−R−Ig融合タンパク質と比較して、低下したN末端ピログルタミン酸形成および低下したC末端不均一性を有する、組成物。
(項目16)
上記LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号4もしくは配列番号23のアミノ酸配列を示す改変LT−β−R細胞外ドメインを含む、項目15に記載の組成物。
(項目17)
上記改変Ig部分は、ヒンジ領域において変異を含む、項目15に記載の組成物。
(項目19)
長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインおよび長さが227アミノ酸の改変Ig部分を含むリンホトキシン−βレセプター(LT−β−R)−Ig−融合タンパク質の集団、および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物であって、ここで該LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号21に示される野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけ失っており、そして該LT−β−R−Ig−融合タンパク質は、N末端ピログルタミン酸を欠いている、組成物。
(項目20)
上記改変LT−β−R−Ig融合タンパク質のN末端アミノ酸は、非極性アミノ酸である、項目19に記載の組成物。
(項目21)
上記非極性アミノ酸は、バリン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸6)もしくはアラニン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸5)のいずれかである、項目20に記載の組成物。
(項目22)
上記LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも95%のN末端アミノ酸は、バリン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸6)もしくはアラニン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸5)のいずれかである、項目19に記載の組成物。
(項目23)
哺乳動物細胞において、配列番号4に示されるLTBRの細胞外ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現することによって作製される、項目19、21もしくは22のいずれかに記載の組成物。
(項目24)
項目23に記載の薬学的組成物を、被験体に投与する工程を包含する、自己免疫障害を処置するための方法。
(項目25)
上記自己免疫障害は、関節リウマチ、クローン病、もしくは全身エリテマトーデス(SLE)からなる群より選択される、項目24に記載の方法。
(項目26)
リンホトキシン−βレセプター−免疫グロブリン(LT−β−R−Ig)−融合タンパク質の集団および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物であって、該融合タンパク質は、長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインおよび改変Ig部分を含み、ここで該集団は、野生型LT−β−R−Ig融合タンパク質と比較して、低下したN末端ピログルタミン酸形成および低下したC末端不均一性を有する、薬学的組成物。
(項目27)
上記LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号4もしくは配列番号23のアミノ酸配列を示す改変LT−β−R細胞外ドメインを含む、項目26に記載の薬学的組成物。
(項目28)
上記改変Ig部分は、ヒンジ領域における変異を含む、項目26に記載の薬学的組成物。
(項目29)
配列番号5に示されるアミノ酸配列を含む、薬学的組成物。
(項目30)
項目29に記載の薬学的組成物を被験体に投与する工程を包含する、自己免疫障害を処置する方法。
(項目31)
上記自己免疫障害は、関節リウマチ、クローン病、もしくは全身エリテマトーデス(SLE)からなる群より選択される、項目30に記載の方法。
(項目32)
上記自己免疫障害は関節リウマチである、項目30に記載の方法。
(項目33)
上記薬学的組成物は、2週間に1回、約0.6〜3mg/kgの用量において上記被験体に投与される、項目32に記載の方法。
(項目34)
上記薬学的組成物は、皮下投与される、項目30に記載の方法。
(項目35)
長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインおよび長さが227アミノ酸の改変Ig部分を含む単離されたポリペプチドであって、ここで該ポリペプチドは、配列番号21に示される野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけ失っており、該ポリペプチドは、N末端ピログルタミン酸を欠いている、単離されたポリペプチド。
(項目36)
上記N末端アミノ酸は、非極性アミノ酸である、項目35に記載の単離されたポリペプチド。
(項目37)
上記非極性アミノ酸は、バリン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸6)もしくはアラニン(配列番号21の野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸5)のいずれかである、項目36に記載の単離されたポリペプチド。
(項目38)
哺乳動物細胞において、配列番号4に示されるLTBRの細胞外ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現することによって作製される、項目35に記載の単離されたポリペプチド。
(項目39)
項目35〜39のいずれか1項に記載のポリペプチドをコードする、単離された核酸分子。
(項目40)
上記核酸分子は、配列番号7に示されるヌクレオチド配列から構成される、項目39に記載の単離された核酸分子。
(項目41)
項目40に記載の核酸分子を含む、ベクター。
(項目42)
項目41に記載のベクターを発現する、宿主細胞。
(項目43)
上記細胞は、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞である、項目42に記載の細胞。
(項目44)
改変LT−β−R細胞外ドメインおよび改変Ig部分を含むリンホトキシン−βレセプター(LT−β−R)−Ig−融合タンパク質の集団を含む組成物を作製するためのプロセスであって、ここで該LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号21に示される野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけ失っており、該プロセスは、哺乳動物細胞において、配列番号8に示されるLT−β−R−Ig融合タンパク質をコードする核酸分子を発現する工程、該集団を、該培養上清から得る工程、および必要に応じて、該上清を精製して、それによって、改変LT−β−R細胞外ドメインおよび改変Ig部分を含むリンホトキシン−βレセプター(LT−Β−R)−Ig−融合タンパク質の集団を含む組成物を得る工程を包含し、ここで該LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号21に示される野生型LT−β−R部分の成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけ失っている、プロセス。
(項目45)
上記核酸分子は、配列番号7に示されるヌクレオチド配列を含む、項目44に記載のプロセス。
(項目46)
上記核酸分子は、配列番号7に示されるヌクレオチド配列からなる、項目44に記載のプロセス。
(項目47)
ヒト被験体における関節リウマチを処置するための方法であって、該方法は、該被験体にある用量のLT−β−R−Ig融合タンパク質を投与する工程を包含し、ここで該用量は、該被験体の血清において約0.14μg/ml〜約3.5μg/mlの平均濃度を維持するために十分である、方法。
(項目48)
ヒト被験体における関節リウマチを処置するための方法であって、該方法は、該被験体にある用量のLT−β−R−Ig融合タンパク質を投与する工程を包含し、ここで該用量は、該被験体の血清において約0.6μg/mlの最小平均濃度を維持するために十分である、方法。
(項目49)
上記LTBR−Ig融合タンパク質は、配列番号5に示されるアミノ酸配列を含む、項目48に記載の方法。
(項目50)
上記濃度は、7〜60日毎に1回、LT−β−R−Ig融合タンパク質を約0.01〜約5mg/kgの用量において投与することによって達成される、項目48に記載の方法。
(項目51)
ヒト被験体における関節リウマチを処置するための方法であって、該方法は、該被験体に、7〜30日ごとに多くて2回、約0.6〜3mg/kgの用量のLT−β−R−Ig融合タンパク質を投与する工程を包含する、方法。
(項目52)
7〜14日ごとに1回、約0.6〜3mg/kgの用量のLT−β−R−Ig融合タンパク質を投与する工程を包含する、項目51に記載の方法。
(項目53)
投与は、14〜30日ごとに1回である、項目51に記載の方法。
(項目54)
投与は、28〜60日ごとに1回である、項目51に記載の方法。
(項目55)
投与は、7〜30日ごとに1回である、項目51に記載の方法。
(項目56)
ヒト被験体における自己免疫障害を処置するための方法であって、該方法は、該被験体に、長さが193アミノ酸もしくは194アミノ酸の改変LT−β−R細胞外ドメインを含むLT−β−R−Ig融合タンパク質の集団を含むある用量の薬学的組成物を投与する工程を包含し、ここで該LT−β−R−Ig−融合タンパク質のうちの少なくとも90%は、配列番号21に示される野生型LT−β−R細胞外ドメインの成熟形態のN末端からわずか5アミノ酸だけ失っており、該用量は、該被験体の血清において約0.6μg/mlの最小平均濃度を維持するために十分である、方法。
(項目57)
上記LT−β−R−Ig融合タンパク質は、改変Ig部分をさらに含む、項目56に記載の方法。
(項目58)
上記自己免疫障害は、関節リウマチ、クローン病、もしくは全身エリテマトーデス(SLE)からなる群より選択される、項目56に記載の方法。
(項目59)
上記薬学的組成物は、配列番号5に示されるアミノ酸配列を含む、項目56に記載の方法。
(項目60)
投与は1ヶ月に2回である、項目59に記載の方法。
(項目61)
投与は1ヶ月に1回である、項目59に記載の方法。
(項目62)
投与は皮下である、項目59に記載の方法。
(項目63)
上記用量は約1mg/kgである、項目59に記載の方法。
(項目64)
上記用量は約3mg/kgである、項目59に記載の方法。
(項目65)
上記用量は、約7〜20日ごとに約1mg/kg投与される、項目59に記載の方法。
(項目66)
上記用量は、約14〜30日ごとに約3mg/kg投与される、項目59に記載の方法。
(項目67)
上記用量は、約14日ごとに約1mg/kg投与される、項目59に記載の方法。
(項目68)
上記自己免疫障害は関節リウマチであり、上記被験体は、関節リウマチと診断された後でかつ上記LT−β−R−Ig融合タンパク質の投与前に、関節リウマチ用薬物で処置されている、項目59に記載の方法。
(項目69)
上記関節リウマチ用薬物は、DMARD、NSAID、およびコルチコステロイドからなる群より選択される、項目68に記載の方法。
(項目70)
上記ヒトは、DMARD不十分応答者である、項目68に記載の方法。
(項目71)
上記関節リウマチ用薬物は、TNFインヒビターである、項目68に記載の方法。
(項目72)
上記関節リウマチ用薬物は、アダリムマブ(Humira(登録商標))、エタネルセプト(Enbrel(登録商標))、もしくはインフリキシマブ(Remicade(登録商標))である、項目68に記載の方法。
(項目73)
LT−β−R−Igは、上記関節リウマチ用薬物と組み合わせて投与される、項目68に記載の方法。
(項目74)
上記ヒトは、上記関節リウマチ用薬物に対する応答がLT−β−R−Igの投与前に不十分であるか否かを決定するために評価される、項目68に記載の方法。
(項目75)
上記ヒトは、上記関節リウマチ用薬物に対する不十分な応答を有することが決定され、次いで、該ヒトは、LT−β−R−Igを投与される、項目74に記載の方法。
(項目76)
上記ヒトは、関節リウマチの第1の発現に関して無症候性であり、そして関節リウマチの第2の発現に関して症候性である、項目68に記載の方法。
(項目77)
LT−β−R−Igは、上記関節リウマチ用薬物の代わりに投与される、項目68に記載の方法。
(項目78)
投与は、腫瘍壊死因子(TNF)インヒビターとの組み合わせにおいてである、項目68に記載の方法。
(項目79)
上記TNFインヒビターは、アダリムマブ(Humira(登録商標))、エタネルセプト(Enbrel(登録商標))、もしくはインフリキシマブ (Remicade(登録商標))である、項目78に記載の方法。
(項目80)
上記ヒトは、抗TNF不十分応答者である、項目68に記載の方法。
(項目81)
投与は、非ステロイド性抗炎症剤(NSAID)、コルチコステロイド、もしくは疾患改変抗リウマチ薬(DMARD)との組み合わせにおいてである、項目68に記載の方法。
(項目82)
投与は、メトトレキサートとの組み合わせにおいてである、項目68に記載の方法。
(項目83)
上記ヒトは、DMARD不十分応答者である、項目81に記載の方法。
本発明は、LTBR−Ig融合タンパク質の集団が低下した分子不均一性を有するという点において、治療的使用について改善されているLBTR−Ig融合タンパク質を含む組成物に関する。本発明は、LTBR−Ig融合タンパク質を含む組成物(薬学的組成物を含む)、ならびにタンパク質、核酸、ベクター、宿主細胞、およびこれらの作製法を提供する。
配列番号1は、非成熟もしくはプロセシングされていないヒトLTBR配列であり、すなわち、シグナル配列を含む。斜体のアミノ酸は、シグナル配列を示す。アミノ酸28〜225は、LTBRの細胞外領域である。
可溶性LTBRは、自己免疫障害を処置するために有用なリンホトキシン(LT)経路インヒビターである。自己免疫障害としては、例えば、自己免疫関節炎(関節リウマチ(RA)およびシェーグレン症候群を含む)、乾癬、多発性硬化症、炎症性腸疾患(IBD)(潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む)、インスリン依存性糖尿病、ブドウ膜炎、全身エリテマトーデス(SLE、もしくは狼瘡)、多発性軟骨炎、および移植片拒絶が挙げられる。本明細書に記載される薬剤および方法は、RAの処置に特に適している。
本発明は、LTBR(例えば、LTBR−Fc)の可溶性形態の低投与量もしくは頻度レジメンが、自己免疫障害、特に、関節リウマチ(RA)の症状を効率的に処置し得るという発見に一部基づく。従って、一局面において、本発明は、患者における自己免疫疾患を処置する方法を提供する。上記方法は、低容量および/もしくは低頻度において、LTBR遮断剤(例えば、可溶性LTBR融合タンパク質、例えば、LTBR−Fc)を上記被験体に投与する工程を包含する。
表2.ヒトの体重による、LTBR−Fcの例示的用量(mg)
本明細書に記載される方法および組成物は、他の治療(例えば、非ステロイド性抗炎症剤(NSAID)、コルチコステロイド、およびDMARD)と組み合わせて使用され得る。
可溶性LTBR(例えば、LTBR−Fc)は、例えば、自己免疫障害(例えば、RA)を処置するために被験体に投与するために、薬学的組成物として処方され得る。代表的には、薬学的組成物は、薬学的に受容可能なキャリアを含む。本明細書において使用される場合、「薬学的に受容可能なキャリア」としては、生理学的に適合性である任意および全ての溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。上記組成物は、can include a 薬学的に受容可能な塩(例えば、酸付加塩もしくは塩基付加塩(例えば、Bergeら,J.Pharm.Sci.66:1−19,1977を参照のこと))。
可溶性LTBR(例えば、LTBR−Fc)は、被験体(例えば、ヒト被験体)に、種々の方法によって投与され得る。多くの適用のために、投与経路は、以下の内の1つである:静脈内注射もしくは静脈内注入(IV)、皮下注射(SC)、腹腔内注射(IP)、または筋肉内注射。いくつかの倍、投与は、CNSに直接(例えば、鞘内、脳室内(ICV)、脳内もしくは頭蓋内)であり得る。上記薬剤は、固定用量として、またはmg/kg用量において投与され得る。
可溶性LTBR(例えば、LTBR−Fc)を含む薬学的組成物は、医療用デバイスで投与され得る。上記デバイスは、携帯性、室温での保管、および使用しやすさのような特徴とともに設計され得る。その結果、上記デバイスは、緊急の状況において、例えば、訓練されていない被験体によって、もしくは現場で救急救命要員によって、使用され得、医療機関および他の医療装備に移され得る。上記デバイスは、例えば、可溶性LTBRを含む薬学的調製物を貯蔵するための1つ以上のハウジングを含み得、そして上記薬剤の1つ以上の単位用量を送達するように構成され得る。
以下の実施例は、LTBRIgGの発現において見いだされた分子不均一性(N末端不均一性、C末端不均一性、ピログルタミン酸形成、およびシアル化が挙げられる)を解決するために作り出された多くの種々のLTBR免疫グロブリン融合タンパク質の特徴を記載する。
LTBRの全長mRNA(NP_002333)によってコードされるN末端の推定を、真核生物細胞に対して訓練された神経ネットワーク(NN)予測モデルもしくは隠れMarkovモデル(hidden Markov model)(HMM)のいずれかを使用して、SignalPのようなプログラムによって行った。これら2つのNNおよびHMM予測モデルは、上記タンパク質の示唆されたN末端に関する異なる結果を与え、これは、それぞれ、S28もしくはP30およびQ31を示唆した(アミノ酸数は、シグナル配列を含む番号付けをいう)。従って、多くのN末端配列予測が可能であり、上記タンパク質を発現し、その翻訳後修飾を評価することによってのみ、制限された変動性を有する最適なN末端が決定され得る。
表3:LTBR05およびLTBR06 対 LTBR01の比較
表4:LTBR05の生化学的特徴付けのまとめ
表5:LTBR06の生化学的特徴付けのまとめ
グリコシル化はまた、タンパク質不均一性、および活性に対して影響を有し得る。従って、不均一性をさらに低下させるために、グリコシル化変異体を、変動性のLTBRドメイングリコシル化が結合親和性、発現レベル、および折りたたみに影響を及ぼしたか否かを決定するために調査した。LTBR09は、さらなるN275Q変異(アミノ酸位置は、成熟タンパク質に言及する−種々の構築物の間の配列および変化の比較のために、図2を参照のこと)を有するLTBR06に基づく構築物であった。
表6:グリコシル化保有
表7:さらなるグリコシル化変異体
LTBRIgG薬物動態に対するシアル化の効果を研究するために、LTBRIgGのシアル化を、ラット肝臓由来のα−2,6−シアリルトランスフェラーゼ(Boehringer Mannheim)を使用して行った。α−2,6−シアリルトランスフェラーゼは、Gaβ1→4GlcNAcに対して特異的であり、そして末端N結合型ガラクトース残基のうちの75〜100%をシアル化する。LTBRIgGのシアル化は、シアル化タンパク質の種々のレベルを達成し、次いで、これらタンパク質を、薬物動態について評価した。低、中、および高度にシアル化されたLTBRIg(バージョンLTBR05)の薬物動態データを、マウス血清で分析した。結果を、以下の表8および9に記載する。
表8:LTBR−Ig PKデータ(濃度(μg/ml)のシアル化(SA))
上記TNFRIgG生成物entanerceptは、上記タンパク質内で顕著な誤った折りたたみ不均一性(LTBRIgGに類似の状況)を有する。TNFR/TNFの共結晶構造において示される摂食量域に基づいて、上記TNFR部分内の誤った折りたたみの程度の減少を補助するために、TNFRFcの短縮化バージョンを、TNFRの2.6ドメインを使用して作り出した。上記短縮化TNFレセプター分子は、TNFaリガンドに対する完全な結合活性を維持した。LTBRドメインおよびTNFRドメイン4ならびにドメイン3のC末端半分、ならびにいくつかの他のバリエーションのCRD構造アラインメントに基づいて、LTBRIgGの短縮化バージョンを発現させ、それらのLTa1b2に対する親和性について評価した(上記の表2を参照のこと)。
LTBRおよびIgGを接続するために使用され得る多くの異なるヒンジ構築物を作り出した。上記異なるヒンジの説明は、次に続くヒンジ配列を含め、図6に記載される。使用される場合、以下の配列は、上記LTBR細胞外ドメインのC末端アミノ酸(すなわち、M)の後ろに位置する。
LTBR06 ヒンジ: VDKTHTCPPCPAP(配列番号13)
ヒンジ 2211(D169N): VNKTHTCPPCPAP(配列番号14)
ヒンジ 2212(T198N): VDKNHTCPPCPAP(配列番号15)
ヒンジ 2221(バリン欠失): DKTHTCPPCPAP(配列番号16)
ヒンジ 2217(全長): EPKSCDKTHTCPPCPAP(配列番号17)
ヒンジ 2219(G4−ヒンジ−G4Fc): ESCDKYGPPCPPCPAP(配列番号18)
ヒンジ 2218(G2−ヒンジ−G2Fc): CCVECPPCPAPPVAGP(配列番号19)
ヒンジ 2220(短いヒンジ−G1Fc): CPPCPAP(配列番号20)。
0.05mg/kg LTBR−Fc(バージョンLTBR06)の用量を、RA患者におけるLTBR−Fcの複数用量の安全性、寛容性および薬物動態を評価するために、無作為化した盲検プラセボ制御薬物上昇臨床試験において5つの用量コホートの最低として選択した。0.05mg/kgを、安全性および薬物動態の所見に関して、効果無しの用量であると予測したことから、最低用量コホートとして選択した。実際に、これは、初期研究における急性相応答に関して効果なし用量であった。効力を評価することは、上記研究の一時的な目的でも、二次的な目的でもなかった。投与を、4週間にわたって1週間に1回行った。上記コホートの全てのメンバーは、DMARD−IRであった。上記患者は、メトトレキサート治療を受けた一方で、上記研究のLTBR−Fcを受けた。
以下の実施例は、LTBR−Fc(バージョンLTBR06)の用量の範囲の効力を試験し、関節リウマチ(RA)の処置のための患者を投与したIIa相臨床研究からの結果を記載する。
表10:77日目におけるACR20/50/70応答速度(患者の%)
長期間の研究を使用して、RAを有する被験体において、LTBR−Fc(LTBR06)の安全性、寛容性および効力を評価した。以前の研究(例えば、実施例7に記載される研究)からの患者は、上記研究において含められ得る。上記研究設計は、LTBR−Fc(LTBR06)を以下の用量のうちの1つにおいて、RA患者に皮下に投与する工程を包含する:2週間ごとに1回70mg;2週間ごとに1回200mg;1ヶ月に1回70mg;1ヶ月に1回200mg;もしくはプラセボ用量。患者を、患者を上記応答において改善について評価し/以下の効力パラメーターのスコアを決定する:American College of Rheumatology(ACR) Core Set of maeasurements、DAS28、Short Form (SF−36)、Functional Assessment of Chronic Illness Therapy (FACIT) questionnaires、Sjogren’s Assessment。プラセボコントロール群と比較した場合のこのようなパラメーターにおける統計学的に有意な改善は、効力を示す。
(等価物)
全ての特許、特許出願、および参考文献は、その全体が本明細書に参考として援用される。矛盾する場合、本願が優先する。
配列表
<110> バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド
<120> 自己免疫障害の処置
<130> BGN-717PC
<140> 割り当て未
<141> 出願と同時
<150> 60/918,518
<151> 2007-03-15
配列番号1
GenPept ID No. P36941に対応する全長ヒト野生型LTBRアミノ酸配列(非成熟形態)
1 MLLPWATSAP GLAWGPLVLG LFGLLAASQP QAVPPYASEN QTCRDQEKEY YEPQHRICCS
61 RCPPGTYVSA KCSRIRDTVC ATCAENSYNE HWNYLTICQL CRPCDPVMGL EEIAPCTSKR
121 KTQCRCQPGM FCAAWALECT HCELLSDCPP GTEAELKDEV GKGNNHCVPC KAGHFQNTSS
181 PSARCQPHTR CENQGLVEAA PGTAQSDTTC KNPLEPLPPE MSGTMLMLAV LLPLAFFLLL
241 ATVFSCIWKS HPSLCRKLGS LLKRRPQGEG PNPVAGSWEP PKAHPYFPDL VQPLLPISGD
301 VSPVSTGLPA APVLEAGVPQ QQSPLDLTRE PQLEPGEQSQ VAHGTNGIHV TGGSMTITGN
361 IYIYNGPVLG GPPGPGDLPA TPEPPYPIPE EGDPGPPGLS TPHQEDGKAW HLAETEHCGA
421 TPSNRGPRNQ FITHD (配列番号1)
配列番号2
バリン変異アミノ酸を含むLTBR06のFc部分
V D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I S K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R D E L T K N Q V S L T C L V K G F Y P S D I A V E W E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G
配列番号3
LTBR06の細胞外ドメイン−核酸配列
1 ATGCTCCTGC CTTGGGCCAC CTCTGCCCCC GGCCTGGCCT GGGGGCCTCT
51 GGTGCTGGGC CTCTTCGGGC TCCTGGCAGC AGCGGTGCCT CCATATGCGT
101 CGGAGAACCA GACCTGCAGG GACCAGGAAA AGGAATACTA TGAGCCCCAG
151 CACCGCATCT GCTGCTCCCG CTGCCCGCCA GGCACCTATG TCTCAGCTAA
201 ATGTAGCCGC ATCCGGGACA CAGTTTGTGC CACATGTGCC GAGAATTCCT
251 ACAACGAGCA CTGGAACTAC CTGACCATCT GCCAGCTGTG CCGCCCCTGT
301 GACCCAGTGA TGGGCCTCGA GGAGATTGCC CCCTGCACAA GCAAACGGAA
351 GACCCAGTGC CGCTGCCAGC CGGGAATGTT CTGTGCTGCC TGGGCCCTCG
401 AGTGTACACA CTGCGAGCTA CTTTCTGACT GCCCGCCTGG CACTGAAGCC
451 GAGCTCAAAG ATGAAGTTGG GAAGGGTAAC AACCACTGCG TCCCCTGCAA
501 GGCAGGGCAC TTCCAGAATA CCTCCTCCCC CAGCGCCCGC TGCCAGCCCC
551 ACACCAGGTG TGAGAACCAA GGTCTGGTGG AGGCAGCTCC AGGCACTGCC
601 CAGTCCGACA CAACCTGCAA AAATCCATTA GAGCCACTGC CCCCAGAGAT
651 GTCAGGAACC ATG
配列番号4
LTBR06の細胞外ドメイン−アミノ酸配列
A V P P Y A S E N Q T C R D Q E K E Y Y E P Q H R I C C S R C P P G T Y V S A K C S R I R D T V C A T C A E N S Y N E H W N Y L T I C Q L C R P C D P V M G L E E I A P C T S K R K T Q C R C Q P G M F C A A W A L E C T H C E L L S D C P P G T E A E L K D E V G K G N N H C V P C K A G H F Q N T S S P S A R C Q P H T R C E N Q G L V E A A P G T A Q S D T T C K N P L E P L P P E M S G T M
配列番号5
LTBR06の成熟形態のアミノ酸配列
AVP PYASENQTCR DQEKEYYEPQ HRICCSRCPP GTYVSAKCSR IRDTVCATCA ENSYNEHWNY LTICQLCRPC DPVMGLEEIA PCTSKRKTQC RCQPGMFCAA WALECTHCEL LSDCPPGTEA
ELKDEVGKGN NHCVPCKAGH FQNTSSPSAR CQPHTRCENQ GLVEAAPGTA QSDTTCKNPL EPLPPEMSGT MVDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPG
配列番号6
LTBR01-アミノ酸
MLLPWATSAP GLAWGPLVLG LFGLLAASQPQAVP PYASENQTCR DQEKEYYEPQ
HRICCSRCPP GTYVSAKCSR IRDTVCATCA ENSYNEHWNY LTICQLCRPC
DPVMGLEEIA PCTSKRKTQC RCQPGMFCAA WALECTHCEL LSDCPPGTEA
ELKDEVGKGN NHCVPCKAGH FQNTSSPSAR CQPHTRCENQ GLVEAAPGTA
QSDTTCKNPL EPLPPEMSGT MVDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK
DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS
TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV
YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL
DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK
配列番号7
LTBR06-核酸
1 ATGCTCCTGC CTTGGGCCAC CTCTGCCCCC GGCCTGGCCT GGGGGCCTCT
51 GGTGCTGGGC CTCTTCGGGC TCCTGGCAGC AGCGGTGCCT CCATATGCGT
101 CGGAGAACCA GACCTGCAGG GACCAGGAAA AGGAATACTA TGAGCCCCAG
151 CACCGCATCT GCTGCTCCCG CTGCCCGCCA GGCACCTATG TCTCAGCTAA
201 ATGTAGCCGC ATCCGGGACA CAGTTTGTGC CACATGTGCC GAGAATTCCT
251 ACAACGAGCA CTGGAACTAC CTGACCATCT GCCAGCTGTG CCGCCCCTGT
301 GACCCAGTGA TGGGCCTCGA GGAGATTGCC CCCTGCACAA GCAAACGGAA
351 GACCCAGTGC CGCTGCCAGC CGGGAATGTT CTGTGCTGCC TGGGCCCTCG
401 AGTGTACACA CTGCGAGCTA CTTTCTGACT GCCCGCCTGG CACTGAAGCC
451 GAGCTCAAAG ATGAAGTTGG GAAGGGTAAC AACCACTGCG TCCCCTGCAA
501 GGCAGGGCAC TTCCAGAATA CCTCCTCCCC CAGCGCCCGC TGCCAGCCCC
551 ACACCAGGTG TGAGAACCAA GGTCTGGTGG AGGCAGCTCC AGGCACTGCC
601 CAGTCCGACA CAACCTGCAA AAATCCATTA GAGCCACTGC CCCCAGAGAT
651 GTCAGGAACC ATGGTCGACA AAACTCACAC ATGCCCACCG TGCCCAGCAC
701 CTGAACTCCT GGGGGGACCG TCAGTCTTCC TCTTCCCCCC AAAACCCAAG
751 GACACCCTCA TGATCTCCCG GACCCCTGAG GTCACATGCG TGGTGGTGGA
801 CGTGAGCCAC GAAGACCCTG AGGTCAAGTT CAACTGGTAC GTGGACGGCG
851 TGGAGGTGCA TAATGCCAAG ACAAAGCCGC GGGAGGAGCA GTACAACAGC
901 ACGTACCGTG TGGTCAGCGT CCTCACCGTC CTGCACCAGG ACTGGCTGAA
951 TGGCAAGGAG TACAAGTGCA AGGTCTCCAA CAAAGCCCTC CCAGCCCCCA
1001 TCGAGAAAAC CATCTCCAAA GCCAAAGGGC AGCCCCGAGA ACCACAGGTG
1051 TACACCCTGC CCCCATCCCG GGATGAGCTG ACCAAGAACC AGGTCAGCCT
1101 GACCTGCCTG GTCAAAGGCT TCTATCCCAG CGACATCGCC GTGGAGTGGG
1151 AGAGCAATGG GCAGCCGGAG AACAACTACA AGACCACGCC TCCCGTGTTG
1201 GACTCCGACG GCTCCTTCTT CCTCTACAGC AAGCTCACCG TGGACAAGAG
1251 CAGGTGGCAG CAGGGGAACG TCTTCTCATG CTCCGTGATG CATGAGGCTC
1301 TGCACAACCA CTACACGCAG AAGAGCCTCT CCCTGTCTCC GGGT
配列番号8
シグナル配列を含むLTBR06アミノ酸配列
1 MLLPWATSAP GLAWGPLVLG LFGLLAAAVP PYASENQTCR DQEKEYYEPQ
51 HRICCSRCPP GTYVSAKCSR IRDTVCATCA ENSYNEHWNY LTICQLCRPC
101 DPVMGLEEIA PCTSKRKTQC RCQPGMFCAA WALECTHCEL LSDCPPGTEA
151 ELKDEVGKGN NHCVPCKAGH FQNTSSPSAR CQPHTRCENQ GLVEAAPGTA
201 QSDTTCKNPL EPLPPEMSGT MVDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK
251 DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS
301 TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV
351 YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL
401 DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPG
配列番号9
LTBR05,アミノ酸配列の成熟形態
SQPQAVP PYASENQTCR DQEKEYYEPQ HRICCSRCPP GTYVSAKCSR IRDTVCATCA ENSYNEHWNY LTICQLCRPC DPVMGLEEIA PCTSKRKTQC RCQPGMFCAA WALECTHCEL LSDCPPGTEA ELKDEVGKGN NHCVPCKAGH FQNTSSPSAR CQPHTRCENQ GLVEAAPGTA QSDTTCKNPL EPLPPEMSGT MVDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPG
配列番号10
グリコシル化されていないLTBRIgG
1 AVPPYASEQQ TCRDQEKEYY EPQHRICCSR CPPGTYVSAK CSRIRDTVCA
51 TCAENSYNEH WNYLTICQLC RPCDPVMGLE EIAPCTSKRK TQCRCQPGMF
101 CAAWALECTH CELLSDCPPG TEAELKDEVG KGNNHCVPCK AGHFQQTSSP
151 SARCQPHTRC ENQGLVEAAP GTAQSDTTCK NPLEPLPPEM SGTMVDKTHT
201 CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF
251 NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN
301 KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS
351 DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC
401 SVMHEALHNH YTQKSLSLSP G
配列番号11
LTBR01,成熟形態アミノ酸配列
SQPQAVP PYASENQTCR DQEKEYYEPQ HRICCSRCPP GTYVSAKCSR IRDTVCATCA ENSYNEHWNY LTICQLCRPC DPVMGLEEIA PCTSKRKTQC RCQPGMFCAA WALECTHCEL LSDCPPGTEA ELKDEVGKGN NHCVPCKAGH FQNTSSPSAR CQPHTRCENQ GLVEAAPGTA
QSDTTCKNPL EPLPPEMSGT MVDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK
DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYNS
TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV
YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL
DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPGK
配列番号12
LTBR09,成熟形態アミノ酸配列
AVP PYASENQTCR DQEKEYYEPQ HRICCSRCPP GTYVSAKCSR IRDTVCATCA ENSYNEHWNY LTICQLCRPC DPVMGLEEIA PCTSKRKTQC RCQPGMFCAA WALECTHCEL LSDCPPGTEA ELKDEVGKGN NHCVPCKAGH FQNTSSPSAR CQPHTRCENQ GLVEAAPGTA QSDTTCKNPL EPLPPEMSGT MVDKTHTCPP CPAPELLGGP SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK TKPREEQYQS TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ KSLSLSPG
配列番号13
LTBR06ヒンジ
VDKTHTCPPCPAP
配列番号14
ヒンジ2211 (D169N)
VNKTHTCPPCPAP
配列番号15
ヒンジ2212 (T198N)
VDKNHTCPPCPAP
配列番号16
ヒンジ2221 (バリン欠失)
DKTHTCPPCPAP
配列番号17
ヒンジ2217 (全長)
EPKSCDKTHTCPPCPAP
配列番号18
ヒンジ2219 (G4-ヒンジ-G4Fc)
ESCDKYGPPCPPCPAP
配列番号19
ヒンジ2218 (G2-ヒンジ-G2Fc)
CCVECPPCPAPPVAGP
配列番号20
ヒンジ2220 (短いヒンジ - G1Fc)
CPPCPAP (配列番号20)
配列番号21
GenPept ID No. P36941に対応するヒト野生型LTBRアミノ酸配列の細胞外ドメイン(非成熟形態)
1 MLLPWATSAP GLAWGPLVLG LFGLLAASQP QAVPPYASEN QTCRDQEKEY YEPQHRICCS
61 RCPPGTYVSA KCSRIRDTVC ATCAENSYNE HWNYLTICQL CRPCDPVMGL EEIAPCTSKR
121 KTQCRCQPGM FCAAWALECT HCELLSDCPP GTEAELKDEV GKGNNHCVPC KAGHFQNTSS
181 PSARCQPHTR CENQGLVEAA PGTAQSDTTC KNPLEPLPPE MSGTM
配列番号22
Fcドメイン-アミノ酸
C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I S K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R D E L T K N Q V S L T C L V K G F Y P S D I A V E W E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G
配列番号23
LTBR06のN−5細胞外ドメイン-アミノ酸配列
A V P P Y A S E N Q T C R D Q E K E Y Y E P Q H R I C C S R C P P G T Y V S A K C S R I R D T V C A T C A E N S Y N E H W N Y L T I C Q L C R P C D P V M G L E E I A P C T S K R K T Q C R C Q P G M F C A A W A L E C T H C E L L S D C P P G T E A E L K D E V G K G N N H C V P C K A G H F Q N T S S P S A R C Q P H T R C E N Q G L V E A A P G T A Q S D T T C K N P L E P L P P E M S G T
Claims (33)
- リンホトキシン−βレセプター(LTβR)−Ig融合タンパク質を含む、被験体における自己免疫疾患の処置における使用のための組成物であって、該LTβR−Ig融合タンパク質は、配列番号5または配列番号8に記載のアミノ酸配列を含む、組成物。
- 請求項1に記載の組成物であって、前記LTβR−Ig融合タンパク質は、配列番号5のLTβR細胞外ドメインにおけるN結合型グリコシル化部位の一方または両方においてN→Qの変異を含み、ここで、N結合型グリコシル化部位は、配列番号11のアミノ酸1〜194を参照した場合のN13およびN150に対応する、組成物。
- LTβR−Ig融合タンパク質を含む、被験体における自己免疫疾患の処置における使用のための組成物であって、該LTβR−Ig融合タンパク質はLTβR細胞外ドメインを含み、該LTβR細胞外ドメインは、配列番号10のアミノ酸1〜194を含む、組成物。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物であって、前記LTβR−Ig融合タンパク質のIg部分は、配列番号5のLTβR IgドメインのN結合型グリコシル化部位においてN→Q変異を含み、ここでN結合型グリコシル化部位は、配列番号11を参照した場合のN276に対応する、組成物。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物であって、前記LTβR−Ig融合タンパク質の前記細胞外ドメインおよびIg部分は、グリコシル化されていない、組成物。
- 配列番号5に記載のアミノ酸配列からなるリンホトキシン−βレセプター(LTβR)−Ig融合タンパク質を含む、薬学的組成物。
- 多発性硬化症の処置における使用のための、請求項1〜6のいずれか1項に記載の組成物。
- 関節リウマチの処置における使用のための、請求項1〜6のいずれか1項に記載の組成物。
- 配列番号11と比較して1または複数の変異を含むLTβR−Ig融合タンパク質を含む薬学的組成物であって、該1または複数の変異は、N13Q、N150Q、およびN276Qからなる群より選択される、薬学的組成物。
- 前記LTβR−Ig融合タンパク質は、N13Q変異を含む、請求項9に記載の組成物。
- 前記LTβR−Ig融合タンパク質は、N13Q変異およびN150Q変異を含む、請求項9に記載の組成物。
- 前記LTβR−Ig融合タンパク質は、N13Q変異、N150Q変異、およびN276Q変異を含む、請求項9に記載の組成物。
- 請求項1〜6および9〜12のいずれか1項に記載の組成物であって、前記LTβR−Ig融合タンパク質は、該LTβR−Ig融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を、哺乳動物細胞中で発現させることによって作製される、組成物。
- 前記LTβR−Ig融合タンパク質のIg部分は、改変Fc領域を含む、請求項1〜6および9〜12のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記改変Ig部分は、IgG1アイソタイプのFc領域を含む、請求項14に記載の組成物。
- 前記改変Ig部分は、ヒンジ領域に変異を含む、請求項14に記載の組成物。
- 前記LTβR−Ig融合タンパク質のIg部分は、グリコシル化されていない、請求項13に記載の組成物。
- 前記発現が、製造スケールで行われる、請求項13に記載の組成物。
- 請求項1〜6および9〜12のいずれか1項に記載の組成物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
- 患者における自己免疫疾患の処置における使用のための、請求項19に記載の薬学的組成物。
- 前記自己免疫疾患が、多発性硬化症または関節リウマチである、請求項20に記載の薬学的組成物。
- 配列番号11と比較して1または複数の変異を含むLTβR−Ig融合タンパク質を含む単離ポリペプチドであって、該1または複数の変異は、N13Q、N150QおよびN276Qからなる群より選択される、単離ポリペプチド。
- 請求項22に記載のポリペプチドをコードする、単離核酸分子。
- 請求項23に記載の核酸分子を含む、ベクター。
- 請求項24に記載のベクターを発現する、単離宿主細胞または培養宿主細胞。
- チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞である、請求項25に記載の細胞。
- 配列番号5と比較して1または複数の変異を含むLTβR−Ig融合タンパク質を含む単離ポリペプチドであって、該1または複数の変異は、配列番号11を参照した場合のN13Q、N150QおよびN276Qからなる群より選択される、単離ポリペプチド。
- 請求項27に記載のポリペプチドをコードする、単離核酸分子。
- 請求項28に記載の核酸分子を含む、ベクター。
- 請求項29に記載のベクターを発現する、単離宿主細胞または培養宿主細胞。
- チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞である、請求項30に記載の細胞。
- 請求項1に記載の組成物におけるリンホトキシン−βレセプター(LTβR)−Ig融合タンパク質のアミノ酸配列をコードする、単離核酸分子。
- 前記核酸分子は、配列番号7に記載されるものである、請求項32に記載の単離核酸分子。
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