JP5329924B2 - Fermented food containing lactic acid bacteria and method for producing the same - Google Patents
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Description
本発明は、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌を含有する発酵食品およびその製造方法に関するものである。 The present invention relates to a fermented food containing lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus, and a method for producing the same.
乳酸菌の培養は、種々の態様で行われており、乳酸菌製剤の製造や発酵乳、乳酸菌飲料、チーズなどの製造のために獣乳を培地として行われる場合が最も多い。しかしながら、一般に乳酸菌は、その種類によって栄養の要求性が異なるため、獣乳のみからなる培地ではあまり増殖せず、比較的増殖活性に優れた菌株であっても、獣乳のみからなる培地では、発酵乳や乳酸菌飲料の製造に当たって十分な酸度の発酵物を得るために、数日間の培養を行わなければならないとされている。 Cultivation of lactic acid bacteria is carried out in various modes, and animal milk is most often used as a medium for the production of lactic acid bacteria preparations and the production of fermented milk, lactic acid bacteria beverages, cheese and the like. However, in general, lactic acid bacteria have different nutritional requirements depending on the type of the lactic acid bacteria, so that they do not grow so much in a medium consisting only of animal milk. In order to obtain a fermented product having sufficient acidity in producing fermented milk and lactic acid bacteria beverages, it is said that several days of culture must be performed.
ところが、長時間にわたる乳酸菌の培養は、生菌数の低下を招く原因となることから、種々の生理効果を期待する生菌数を重視した乳酸菌飲料や発酵乳等の製造のための培養としては必ずしも好ましい方法とはいえなかった。 However, since culturing lactic acid bacteria over a long period of time causes a decrease in the number of viable bacteria, as a culture for production of lactic acid bacteria beverages, fermented milk, etc. with an emphasis on the number of viable bacteria expecting various physiological effects It was not necessarily a preferable method.
また、乳酸菌発酵物の風味を問題とする各種飲食品の製造のためには、増殖性の観点のみから使用菌株を選定することはできないため、増殖性が悪くても風味の良い発酵物を与える乳酸菌を選択、使用する場合もある。 In addition, for the production of various foods and beverages that have a problem with the flavor of lactic acid bacteria fermented products, it is not possible to select the strain to be used from the standpoint of growth. In some cases, lactic acid bacteria are selected and used.
そこで、乳酸菌の培養においては、培養効率を向上させる目的で種々の増殖促進物質を培地に添加しておくことが常法であり、よく知られている。一般に、増殖促進物質として有効とされているものを例示すれば、クロレラエキス、鉄塩、ビタミン類、アミノ酸やペプチドを含有するタンパク分解物、酵母エキスなどを挙げることができる。 Therefore, in culturing lactic acid bacteria, it is a common method and well known to add various growth promoting substances to the medium for the purpose of improving the culture efficiency. In general, chlorella extract, iron salts, vitamins, proteolysates containing amino acids and peptides, yeast extract and the like can be mentioned as examples of substances that are effective as growth promoting substances.
また、この他にも、乳酸菌の増殖促進を目的とした技術として、近年では、酒粕の水抽出物および／またはタンパク分解酵素処理した酒粕の水抽出物を用いる方法（特許文献１）、コーヒーノキ属植物の葉から抽出された抽出液を用いる方法（特許文献２）およびカカオ豆および／またはカカオ豆の外皮であるカカオハスクの水と相溶性のある有機溶媒の抽出残渣または該残渣の水抽出物を用いる方法（特許文献３）等が報告されている。 In addition, as a technique for promoting the growth of lactic acid bacteria, in recent years, a method using a water extract of sake lees and / or a water extract of liquor treated with a proteolytic enzyme (Patent Document 1), A method using an extract extracted from leaves of a plant (Patent Document 2) and an extraction residue of an organic solvent compatible with water of cacao beans and / or cacao husk which is a shell of cacao beans, or an aqueous extract of the residue A method to be used (Patent Document 3) has been reported.
一方で、乳酸菌の有用性あるいは有効性を保持するためには、菌の増殖を促進させるのみならず、乳酸菌発酵物中の菌の死滅を抑制し、生残性を向上させる必要がある。一般に、乳酸菌の生残性の低下は、脱脂粉乳等を用いて得られる乳酸菌発酵物を含有する低脂肪の発酵乳食品を調製する場合や乳酸発酵が進み過ぎた場合に顕著となるため、低カロリーの発酵乳食品を製造したり、ｐＨの低い発酵乳食品を製造するときほど問題となる。このような乳酸菌の生残性の低下を防ぎ、乳酸菌発酵物中の乳酸菌数の維持を目的として使用される素材としては、クロレラ等が知られている。 On the other hand, in order to maintain the usefulness or effectiveness of lactic acid bacteria, it is necessary not only to promote the growth of the bacteria, but also to suppress the killing of the bacteria in the lactic acid bacteria fermentation product and improve the survival. In general, the decrease in the viability of lactic acid bacteria is significant when preparing low-fat fermented milk foods containing fermented lactic acid bacteria obtained using skim milk powder or when lactic acid fermentation has progressed too much. It becomes more problematic when producing calorie fermented milk food or producing fermented milk food with low pH. Chlorella and the like are known as materials used for the purpose of preventing such a decrease in the survival of lactic acid bacteria and maintaining the number of lactic acid bacteria in the fermented lactic acid bacteria.
しかしながら、乳酸菌発酵物やそれを含有してなる発酵乳食品のような飲食品の製造において、従来から知られている乳酸菌の増殖促進効果を目的として添加される物質、或いは乳酸菌の生残性を改善する目的で配合される物質は、十分な効果が得られるほど使用すると製品の風味そのものに影響を与えてしまう場合が多く、また、製品のコストを上昇させる原因となることもある。更に、生きた乳酸菌を多く含有する状態を維持できても、乳酸菌の活性を維持することができず、十分な生理効果が期待できなくなる場合もあった。 However, in the production of foods and drinks such as fermented lactic acid bacteria and fermented milk foods containing the same, substances that are conventionally added for the purpose of promoting the growth of lactic acid bacteria, or the survival of lactic acid bacteria Substances added for the purpose of improvement often affect the flavor of the product when used to the extent that sufficient effects are obtained, and may increase the cost of the product. Furthermore, even if the state containing many living lactic acid bacteria can be maintained, the activity of the lactic acid bacteria cannot be maintained, and a sufficient physiological effect may not be expected.
また、グァバ葉エキスには、血糖値上昇抑制作用、総コレステロール濃度低下作用（非特許文献１及び非特許文献２）や細菌増殖抑制作用（特許文献４）があることが知られている。 Further, it is known that guava leaf extract has a blood glucose level increase inhibitory action, a total cholesterol concentration lowering action (Non-patent Documents 1 and 2) and a bacterial growth inhibitory action (Patent Document 4).
従って、本発明の目的は、生きた乳酸菌を多く含有する発酵食品及びその製造方法を提供するものである。 Accordingly, an object of the present invention is to provide a fermented food containing a large amount of living lactic acid bacteria and a method for producing the same.
本発明者らは、このような課題を解決するために鋭意検討を行った結果、発酵食品の製造段階においてグァバ葉エキスを乳酸菌培養培地に添加して乳酸菌を培養することにより、乳酸菌、特にラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の増殖活性を簡便に向上させ得ること及び製品化後のこれらの生菌数を維持し得ることを見出した。 As a result of intensive studies to solve such problems, the present inventors have added guava leaf extract to a lactic acid bacteria culture medium in the production stage of fermented foods, and cultivated lactic acid bacteria. It has been found that the growth activity of lactic acid bacteria belonging to the genus Bacillus and / or Streptococcus can be easily improved and that the number of these viable bacteria after commercialization can be maintained.
すなわち、本発明はグァバ葉エキスと、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌とを含有することを特徴とする発酵食品を提供するものである。 That is, the present invention provides a fermented food characterized by containing a guava leaf extract and a lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus.
また、本発明はラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌を含有する発酵食品の製造において、グァバ葉エキスを配合することを特徴とするラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌を含有する発酵食品の製造方法を提供するものである。 In addition, the present invention contains a lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus characterized by blending a guava leaf extract in the production of a fermented food containing a lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus. A method for producing a fermented food is provided.
また、本発明はグァバ葉エキスを有効成分とする、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の増殖促進剤を提供するものである。 The present invention also provides a growth promoter for lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus, comprising guava leaf extract as an active ingredient.
また、本発明はグァバ葉エキスを配合することを特徴とするラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の増殖促進方法を提供するものである。 The present invention also provides a method for promoting the growth of lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus, characterized in that it contains a guava leaf extract.
また、本発明はグァバ葉エキスを有効成分とする、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の生残性改善剤を提供するものである。 The present invention also provides a survival improver for lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus, comprising guava leaf extract as an active ingredient.
さらに、本発明はグァバ葉エキスを配合することを特徴とするラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の生残性改善方法を提供するものである。 Furthermore, this invention provides the survival improvement method of the lactic acid bacteria which belong to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus characterized by mix | blending a guava leaf extract.
本発明の発酵食品に用いられるグァバ葉エキスは、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌に対して優れた増殖促進作用及び／又は生残性改善作用を有するものであるから、これらを添加・混合して得られる発酵食品は、長期に保存しても生菌数を損なうことがなく、また、健康増進に優れたものとなる。 Since the guava leaf extract used in the fermented food of the present invention has an excellent growth promoting action and / or survival improving action against lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus, these are added. -The fermented food obtained by mixing does not impair the number of viable bacteria even if stored for a long period of time, and is excellent in health promotion.
本発明において、グァバ葉エキスとは、グァバ（バンジロウ）の葉を、水溶性溶媒で、抽出釜等の常法の抽出手段により抽出したものである。 In the present invention, the guava leaf extract is obtained by extracting guava (bunjirou) leaves with a water-soluble solvent by a conventional extraction means such as an extraction kettle.
グァバとは、学名をPsidium guajava Linn,として知られているフトモモ科に属する植物を意味する。
原料として用いるグァバ葉は、生葉又はその細断物でもよいが、有効成分の抽出効率を考慮してそれを乾燥した乾燥葉又はその細断物を使用するのが好ましい。
生葉の乾燥手段としては、天日乾燥、熱風乾燥、焙煎等が挙げられるが、風味の改善を考慮する場合には、乾燥後焙煎するのが好ましい。この焙煎条件としては、１００℃以上で５〜６０分間が好ましく、特に２３０〜２６０℃で１０〜２０分間が好ましい。
細断物の平均的な大きさとしては、適当なサイズでよいが、抽出効率や作業効率を考慮して、１〜１０ｍｍが好ましく、特に３〜５ｍｍが好ましい。
Guava means a plant belonging to the family Myrtaceae known by the scientific name Psidium guajava Linn.
The guava leaf used as a raw material may be a raw leaf or a chopped product thereof, but it is preferable to use a dried leaf or a chopped product thereof dried in consideration of the extraction efficiency of an active ingredient.
Examples of means for drying fresh leaves include sun drying, hot air drying, roasting, and the like. However, when improvement of flavor is taken into consideration, roasting after drying is preferable. The roasting condition is preferably 100 ° C. or more and 5 to 60 minutes, and particularly preferably 230 to 260 ° C. for 10 to 20 minutes.
The average size of the shredded material may be an appropriate size, but is preferably 1 to 10 mm, particularly preferably 3 to 5 mm in consideration of extraction efficiency and work efficiency.
本発明に用いる水溶性溶媒とは、水或いは親水性の有機溶媒（アルコール類、ケトン類、エステル類等）、又はこれら２種以上を混合した混合溶媒をいう。
親水性の有機溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール等のアルコール類；アセトン、メチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類等が挙げられる。
この水溶性有機溶媒のうち、摂取時の安全性等を考慮して、水、アルコール類或いはこれらの混合溶媒が好ましい。このアルコール類のうちでも炭素数１〜４の低級アルコール類が好ましく、さらにエタノールが好ましい。このときの水：エタノールの配合割合は、０．１〜９９．９：９９．９〜０．１（Ｖ／Ｖ）が好ましく、６０〜４０：４０〜６０（Ｖ／Ｖ）がより好ましい。
The water-soluble solvent used in the present invention refers to water or a hydrophilic organic solvent (alcohols, ketones, esters, etc.), or a mixed solvent obtained by mixing two or more of these.
Examples of the hydrophilic organic solvent include alcohols such as methanol, ethanol, n-butanol and isobutanol; ketones such as acetone and methyl ketone; esters such as methyl acetate and ethyl acetate.
Of these water-soluble organic solvents, water, alcohols, or a mixed solvent thereof is preferable in consideration of safety during intake. Among these alcohols, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms are preferable, and ethanol is more preferable. The mixing ratio of water: ethanol at this time is preferably from 0.1 to 99.9: 99.9 to 0.1 (V / V), and more preferably from 60 to 40:40 to 60 (V / V).
また、前記水溶性溶媒は、グァバ葉の酸抽出物又はアルカリ抽出物を得るため、酸やアルカリを用いてｐＨを調整されたものでもよい。
酸抽出の場合、ｐＨ２．５〜５．５が好ましく、使用する酸としては、ギ酸、酢酸、硫酸、塩酸、クエン酸等が挙げられる。
アルカリ抽出の場合、ｐＨ８．０〜１２．０が好ましく、使用するアルカリとしては炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム等が挙げられる。
The water-soluble solvent may be one whose pH is adjusted using an acid or an alkali in order to obtain an acid extract or an alkali extract of guava leaves.
In the case of acid extraction, pH 2.5 to 5.5 is preferable, and examples of the acid used include formic acid, acetic acid, sulfuric acid, hydrochloric acid, and citric acid.
In the case of alkali extraction, pH 8.0 to 12.0 is preferable, and examples of the alkali used include sodium carbonate, sodium hydrogen carbonate, sodium citrate, potassium citrate and the like.
また、抽出に用いる水溶性溶媒の使用量は、グァバ葉１質量部に対し、１〜８０質量部が好ましく、抽出効率及び濃縮工程での作業効率を考慮して、５〜５０質量部がより好ましい。 The amount of the water-soluble solvent used in the extraction is to guava leaves 1 part by weight, preferably 1 to 80 parts by mass, in consideration of the working efficiency of the extraction efficiency and enrichment step, 5 to 50 parts by weight More preferred.
本発明におけるグァバ葉の抽出条件は、原料の状態、使用する溶媒の種類などにより異なるが、通常、常圧ないし加圧下、すなわち、約１〜２気圧の範囲で、適宜加温又は加熱して行われる。具体的な抽出条件は、原料の状態、製品等に応じて適宜変更可能であることは言うまでもない。 The extraction conditions for guava leaves in the present invention vary depending on the state of the raw material, the type of solvent used, etc., but are usually appropriately heated or heated under normal pressure or under pressure, that is, in the range of about 1 to 2 atmospheres. Done. Needless to say, the specific extraction conditions can be appropriately changed according to the state of the raw material, the product, and the like.
例えば、水抽出の場合、植物１質量部に対して５〜５０質量部の水を用い、３０〜１００℃、１〜１２０分間抽出を行なうのが望ましく、更に熱水抽出の場合、５０〜１００℃、好ましくは６０〜９８℃の加熱条件下で、１〜１２０分、好ましくは３〜２５分間抽出を行うことが望ましい。 For example, in the case of water extraction, it is desirable to perform extraction at 30 to 100 ° C. for 1 to 120 minutes using 5 to 50 parts by weight of water with respect to 1 part by weight of the plant, and in the case of hot water extraction, 50 to 100. It is desirable to perform extraction for 1 to 120 minutes, preferably 3 to 25 minutes under heating conditions of ° C, preferably 60 to 98 ° C.
また、例えば、酸抽出の場合、植物１質量部に対して１〜８０質量部の酸性（ｐＨ２．５〜５．５）の水溶性溶媒を用い、３０〜１００℃、１〜１２０分間抽出を行なうのが望ましく、更に、ｐＨ３．０〜５．０、好ましくはｐＨ３．０〜４．０と調整された酸の水溶液を用い、５０〜１００℃、好ましくは６０〜９８℃の加熱条件下で、１〜１２０分、好ましくは３〜２５分間抽出を行うことが望ましい。 For example, in the case of acid extraction, 1 to 80 parts by mass of an acidic (pH 2.5 to 5.5) water-soluble solvent is used with respect to 1 part by mass of the plant, and extraction is performed at 30 to 100 ° C. for 1 to 120 minutes. Further, it is desirable to carry out the reaction using an aqueous acid solution adjusted to pH 3.0 to 5.0, preferably pH 3.0 to 4.0, under heating conditions of 50 to 100 ° C., preferably 60 to 98 ° C. It is desirable to perform extraction for 1 to 120 minutes, preferably 3 to 25 minutes.
また、例えば、水エタノール抽出の場合、植物１質量部に対して５〜５０質量部の水エタノール溶液（水０．１〜９９．９：エタノール９９．９〜０．１（Ｖ／Ｖ））を用い、１０〜４０℃、好ましくは１５〜２５℃の条件下で、１〜４８時間抽出を行なうのが望ましく、更に水エタノール溶媒（水６０〜４０：エタノール４０〜６０（Ｖ／Ｖ））を用い、１０〜４０℃、好ましくは１５〜２５℃の条件下で、１〜４８時間、好ましくは１０〜２４時間抽出を行うことが望ましい。 For example, in the case of water ethanol extraction, 5 to 50 parts by mass of a water ethanol solution (water 0.1 to 99.9: ethanol 99.9 to 0.1 (V / V)) with respect to 1 part by mass of the plant. It is desirable to perform extraction for 1 to 48 hours under conditions of 10 to 40 ° C., preferably 15 to 25 ° C., and a water ethanol solvent (water 60 to 40: ethanol 40 to 60 (V / V)). It is desirable to perform extraction at 10 to 40 ° C., preferably 15 to 25 ° C. for 1 to 48 hours, preferably 10 to 24 hours.
本発明に用いるグァバ葉エキスは、種々の抽出方法にて得られた各抽出物、例えば上記熱水抽出物や親水性有機溶媒による抽出物等を単独で又は２種類以上組み合わせて使用することができる。当該抽出物は、これをそのまま使用してもよく、抽出後更に常法により抽出液を分離し、必要により不純物を除去した後使用することもできる。
また、当該抽出物を得た後、更に、適当なクロマトグラフィー処理等の精製処理等を加えて精製してもよく、当該抽出物の精製レベル、使用形態などについては特に制限はない。上記抽出方法によれば、原料のグァバ葉に存在する雑菌、例えば一般細菌、かび、酵母類等に対する殺菌処理が行えるので、得られたグァバ葉エキスは、雑菌汚染の心配が少なく、衛生的観点からみても安全性の高いものであるので好ましい。
また、一旦真空濃縮機等にかけて濃縮し、抽出溶媒を除去して使用してもよく、またフリーズ・ドライ法、熱風乾燥等を用いて、粉末化して用いてもよい。
As the guava leaf extract used in the present invention, each extract obtained by various extraction methods, for example, the above hot water extract or an extract with a hydrophilic organic solvent may be used alone or in combination of two or more. it can. The extract may be used as it is, or may be used after the extraction liquid is further separated by a conventional method after extraction and impurities are removed if necessary.
Moreover, after obtaining the said extract, you may refine | purify further by adding purification processes, such as a suitable chromatographic process, and there is no restriction | limiting in particular about the refinement | purification level of the said extract, a usage form, etc. According to the above extraction method, since germs such as general bacteria, fungi, yeasts, etc. existing in the raw guava leaf can be sterilized, the obtained guava leaf extract is less likely to be contaminated with bacteria and has a hygienic viewpoint. This is preferable because it is highly safe.
Alternatively, it may be concentrated once in a vacuum concentrator, etc., and the extraction solvent may be removed before use. Alternatively, it may be powdered using a freeze-drying method, hot air drying, or the like.
本発明の発酵食品におけるグァバ葉エキスの使用量は、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌に対して増殖促進作用及び／又は生残性改善作用を発揮させると共にグァバ葉エキスの効能を発揮させるため、当該発酵食品中に、乾燥物換算として、０．０１〜０．７０重量％であることが好ましく、より０．０２〜０．７０重量％、特に０．０５〜０．６０重量％であることが好ましい。 The amount of guava leaf extract used in the fermented food of the present invention exerts the effect of promoting the growth and / or survival of lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus and also demonstrates the efficacy of guava leaf extract. Therefore, in the fermented food, it is preferably 0.01 to 0.70% by weight, more preferably 0.02 to 0.70% by weight, particularly 0.05 to 0.60% by weight in terms of dry matter. It is preferable that
特に、乳酸菌に対して優れた増殖促進作用及び／又は生残性改善作用を発揮させることを考慮して、グァバ葉エキスを乳酸菌培地中に、乾燥物換算として、０．０１〜１．００重量％含有させることが好ましく、より０．０１〜０．８０重量％、特に０．０２〜０．７０重量％含有させることが好ましい。
例えば、水抽出で得られた抽出エキス（以下、「水抽出エキス」という）であれば、乾燥物換算として、乳酸菌培地中に、０．０１〜０．８０重量％程度含有させることが好ましく、特に好ましくは０．０２〜０．７０重量％含有させる。また、例えば、酸抽出で得られた抽出エキス（以下、「酸抽出エキス」という）であれば、乾燥物換算として、乳酸菌培地中に、０．０１〜０．９５重量％程度含有させることが好ましく、特に好ましくは０．０２〜０．８３重量％含有させる。
このときの乳酸菌培地への使用量は、発酵食品の風味への影響を考慮して、１．００重量％以下が好ましく、一方、十分にラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌に対する生残性改善効果及び／又は増殖促進効果が得られる点を考慮して、０．０１重量％以上が好ましい。
In particular, in view of exhibiting an excellent growth promoting action and / or survival improvement action for lactic acid bacteria, 0.01 to 1.00 wt. %, Preferably 0.01 to 0.80% by weight, more preferably 0.02 to 0.70% by weight.
For example, if it is an extract obtained by water extraction (hereinafter referred to as “water extract”), it is preferable to contain about 0.01 to 0.80% by weight in the lactic acid bacteria medium as a dry matter, Particularly preferably, 0.02 to 0.70% by weight is contained. In addition, for example, if it is an extract obtained by acid extraction (hereinafter referred to as “acid extract”), it can be contained in a lactic acid bacteria medium in an amount of about 0.01 to 0.95% by weight in terms of dry matter. The content is preferably 0.02 to 0.83% by weight, particularly preferably.
The amount used in the lactic acid bacteria medium at this time is preferably 1.00% by weight or less in consideration of the effect on the flavor of the fermented food, while surviving sufficiently against lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus. Considering the point that the effect of improving the property and / or the effect of promoting the growth can be obtained, 0.01% by weight or more is preferable.
グァバ葉エキスを添加する乳酸菌培養培地としては、牛乳、山羊乳、馬乳、羊乳等の生乳や、脱脂粉乳、全粉乳、生クリーム等の乳製品等からなる獣乳培地や各種合成培地を挙げることができる。そして、この培地は、通常の乳酸菌培地に使用される成分を添加したものであってもよい。このような成分としては、例えば、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等のビタミン類や、各種ペプチド、アミノ酸類、カルシウム、マグネシウム等の塩類が挙げられる。 Lactic acid bacteria culture media to which guava leaf extract is added include raw milk media such as cow's milk, goat's milk, horse milk, and sheep milk, and veterinary milk media consisting of dairy products such as skim milk powder, whole milk powder, and fresh cream, and various synthetic media. Can be mentioned. And this culture medium may add the component used for a normal lactic acid bacteria culture medium. Examples of such components include vitamins such as vitamin A, vitamin Bs, vitamin C, and vitamin E, and salts such as various peptides, amino acids, calcium, and magnesium.
本発明における、グァバ葉エキスの発酵食品の製造工程における添加時期は、特に限定されないが、乳酸菌発酵前であることが好ましいが、これに限らず、乳酸菌の発酵の途中で加えても、また乳酸菌の発酵の終了後に加えてもよい。また、複数回に分けて加えることも可能である。特に、後記実施例に示すように、グァバ葉エキスを乳酸菌の発酵前の乳酸菌培地に配合すると、グァバ葉エキスにより菌が増殖促進し、培養終了時の菌数と菌の生残性とを高い状態で維持することができるため好ましい。 The addition time of the guava leaf extract in the production process of the fermented food in the present invention is not particularly limited, but is preferably before lactic acid bacteria fermentation, but is not limited thereto, and may be added during the fermentation of lactic acid bacteria. It may be added after the end of fermentation. It is also possible to add in multiple times. In particular, as shown in the examples below, when guava leaf extract is added to the lactic acid bacteria medium before fermentation of lactic acid bacteria, the guava leaf extract promotes the growth of the bacteria, and the number of bacteria at the end of the culture and the survival of the bacteria are high. Since it can maintain in a state, it is preferable.
本発明において、培養に用いられる乳酸菌としては、ラクトバチルス属及びストレプトコッカス属に属する乳酸菌であれば特に限定されず、例えば、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・クレモリス、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・サリバリウス、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・ファーメンタム、ラクトバチルス・ロイテリ、ラクトバチルス・クリスパータス、ラクトバチルス・ユーグルティ、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバチルス・ジョンソニー、ストレプトコッカス・サーモフィルス等を挙げることができる。これらの乳酸菌の中でもラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ストレプトコッカス・サーモフィルスから選ばれる１種以上の乳酸菌が好ましい。
このうち、特に、ラクトバチルス・カゼイＹＩＴ９０２９株（受託番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−１３６６、寄託日：１９８７年５月１８日）、ストレプトコッカス・サーモフィルスＹＩＴ２０２１株（受託番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−７５３７、寄託日：２００１年４月５日）から選ばれる１種以上の乳酸菌が好ましい。なお、これらの菌株は、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されている。
In the present invention, the lactic acid bacterium used for the culture is not particularly limited as long as it is a lactic acid bacterium belonging to the genus Lactobacillus and Streptococcus. , Lactobacillus salivarius, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus crispartus, Lactobacillus eugleti, Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus, Lactobacillus delbruecki Subspecies Delbrucky, Lactobacillus johnsonii, Streptococcus thermophilus, etc. can be mentioned. Among these lactic acid bacteria, at least one lactic acid bacterium selected from Lactobacillus casei, Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus and Streptococcus thermophilus is preferable.
Among these, in particular, Lactobacillus casei YIT9029 strain (Accession number: FERM BP-1366, Deposit date: May 18, 1987), Streptococcus thermophilus YIT2021 strain (Accession number: FERM BP-7537, Deposit date: 2001) One or more types of lactic acid bacteria selected from April 5, 2012) are preferred. These strains are deposited at the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology Patent Organism Depositary.
なお、前記乳酸菌の中には、獣乳からなる培地では十分に増殖しないものも含まれており、本発明で用いるグァバ葉エキスは、このような菌の培養において、特に顕著な効果を与える。具体的に挙げれば、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・クレモリス、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ストレプトコッカス・サーモフィルス等の乳酸菌を培養する際に培地にグァバ葉エキスを添加すれば優れた増殖促進作用及び／又は生残性改善作用を得ることができる。 The lactic acid bacteria include those that do not grow sufficiently in a medium made of animal milk, and the guava leaf extract used in the present invention gives a particularly remarkable effect in culturing such bacteria. Specifically, lactobacilli such as Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus cremoris, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus, Streptococcus thermophilus, etc. When guava leaf extract is added to the medium during culturing, an excellent growth promoting action and / or survival improvement action can be obtained.
更に、本発明の発酵食品におけるグァバ葉エキスによる乳酸菌に対する生残性改善効果及び／又は増殖促進効果は、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の他に複数種の微生物を含有する場合であっても得ることができる。このため、本発明の発酵食品には、前記する乳酸菌の他に、ラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラクチス、ラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・クレモリス、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ラフィノラクチス等のラクトコッカス属細菌、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム等のエンテロコッカス属細菌、ヒトの腸内フローラの主要なものとして知られるビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラータム、ビフィドバクテリウム・アングラータム、ヒトの腸内から分離される由来を持つビフィドバクテリウム・ガリカム、食品に利用されているビフィドバクテリウム・ラクチス、ビフィドバクテリウム・アニマリス等のビフィドバクテリウム属細菌を含有させてもよい。 Furthermore, the survival improvement effect and / or the growth promoting effect on lactic acid bacteria by the guava leaf extract in the fermented food of the present invention is when the lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus contain a plurality of microorganisms. It can be obtained even if it exists. Therefore, the fermented food of the present invention includes, in addition to the lactic acid bacteria described above, Lactococcus lactis subspecies lactis, Lactococcus lactis subspecies cremolith, Lactococcus plantarum, Lactococcus raffinolactis, etc. Lactococcus bacteria, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium bacteria, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium Infantitis, Bifidobacterium addresscentis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacteria・ Bifidobacterium gallicum derived from Angratum, human gut, Bifidobacterium lactis, Bifidobacterium Animalis etc. used in food You may make it contain.
また特に、本発明の発酵食品において、当該発酵食品中のラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の菌数は、グァバ葉エキスによる乳酸菌に対する顕著な生残性改善効果及び／又は増殖促進効果が得られるので、１×１０7／ｍｌ以上、特に１×１０8／ｍｌ以上が好ましい。 In particular, in the fermented food of the present invention, the number of lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus in the fermented food is a remarkable survival improvement effect and / or growth promoting effect on lactic acid bacteria by guava leaf extract. Is preferably 1 × 10 7 / ml or more, particularly preferably 1 × 10 8 / ml or more.
本発明の発酵食品を得るための乳酸菌の培養条件は特に限定されないが、例えば、３０〜４０℃程度の温度で５〜２４時間程度でよい。また、このときの培養条件としては、静置、攪拌、振盪、通気等から用いる乳酸菌の培養に適した方法を適宜選択して行えばよい。 The culture conditions of the lactic acid bacteria for obtaining the fermented food of the present invention are not particularly limited, and may be, for example, about 30 to 40 ° C. for about 5 to 24 hours. Moreover, as culture conditions at this time, a method suitable for culturing lactic acid bacteria used from standing, stirring, shaking, aeration and the like may be appropriately selected.
このようにして得られる発酵食品は、グァバ葉エキスによって、長期間保存した場合でも、生きた乳酸菌を、その活性を低下させることなく、高濃度で含有しているものである。ここで、保存の温度帯は、室温（１０〜４０℃）〜チルド温度（０〜１０℃）が好ましいが、特にチルド温度帯（０〜１０℃）が好ましい。
そして、これと通常食品に添加することが認められている他の副素材とを混合することにより所望の発酵食品とすることができる。
The fermented food obtained in this way contains live lactic acid bacteria at a high concentration without reducing its activity even when stored for a long time with guava leaf extract. Here, the temperature range for storage is preferably room temperature (10 to 40 ° C.) to chilled temperature (0 to 10 ° C.), but the chilled temperature range (0 to 10 ° C.) is particularly preferable.
And it can be set as a desired fermented food by mixing this and the other auxiliary material recognized to add to normal food.
本発明の発酵食品は、上記ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌（及び必要に応じてその他の微生物）を用いた発酵食品の製造において、任意の段階でグァバ葉エキスを添加する以外は、従来より知られている乳酸菌を使用した発酵食品の製造方法に従い製造することができる。例えば、脱脂粉乳とグァバ葉エキス、甘味料、香料等を一緒に溶解、均質化した後、殺菌処理を行い、所望のラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌を接種して、容器に充填後、培養すればよい。また、脱脂粉乳溶液を殺菌処理する前または後でグァバ葉エキスを添加し、所望のラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌を接種して培養し、これを均質化処理して発酵乳ベースを得、次いで、別途調製したシロップ溶液を添加・混合し、更にフレーバー等を添加して最終製品に仕上げればよい。また、殺菌処理した脱脂粉乳溶液を、所望のラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌を接種して培養し、これを均質化処理して発酵乳ベースを得、次いで、別途調製したシロップ溶液とグァバ葉エキスとを添加・混合し、更にフレーバー等を添加して最終製品に仕上げてもよい。 The fermented food of the present invention, except for adding guava leaf extract at any stage in the production of fermented foods using lactic acid bacteria (and other microorganisms as necessary) belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus It can be produced according to a conventionally known method for producing a fermented food using lactic acid bacteria. For example, skim milk powder and guava leaf extract, sweetener, flavor, etc. are dissolved and homogenized together, then sterilized, inoculated with lactic acid bacteria belonging to the desired genus Lactobacillus and / or Streptococcus, and filled into containers After that, it may be cultured. Also, before or after sterilizing the skim milk solution, add guava leaf extract, inoculate and cultivate lactic acid bacteria belonging to the desired genus Lactobacillus and / or Streptococcus, homogenize this and fermented milk base Then, a separately prepared syrup solution may be added and mixed, and flavor and the like may be further added to finish the final product. Further, the sterilized skim milk solution is inoculated with a lactic acid bacterium belonging to the desired genus Lactobacillus and / or Streptococcus, cultured, and homogenized to obtain a fermented milk base, and then a separately prepared syrup solution And guava leaf extract may be added and mixed, and flavor and the like may be further added to finish the final product.
ここで、発酵食品とは、乳等省令により定められている発酵乳、乳製品乳酸菌飲料等の飲料やハードヨーグルト、ソフトヨーグルト、プレーンヨーグルト、更にはケフィア、チーズ等も包含するものである。また、本発明の発酵食品には、種々の乳酸菌を利用した飲食品、例えば、プレーンタイプ、フレーバードタイプ、フルーツタイプ、甘味タイプ、ソフトタイプ、ドリンクタイプ、固形（ハード）タイプ、フローズンタイプ等の発酵乳、乳酸菌飲料、ケフィア、チーズ等が含まれる。 Here, the fermented food includes beverages such as fermented milk and dairy lactic acid bacteria beverages, hard yoghurt, soft yoghurt, plain yoghurt, kefir, cheese, and the like specified by a ministerial ordinance. The fermented food of the present invention includes foods and drinks using various lactic acid bacteria, such as plain type, flavored type, fruit type, sweetness type, soft type, drink type, solid (hard) type, frozen type, etc. Fermented milk, lactic acid bacteria beverages, kefir, cheese and the like are included.
これらの発酵食品は、必要に応じて、シロップ等の甘味料のほか、それ以外の各種食品素材、例えば、各種糖質、増粘剤、乳化剤、各種ビタミン剤、酸化防止剤、安定化剤等の任意成分を配合することができる。これらの食品素材として具体的なものは、ショ糖、グルコース、フルクトース、パラチノース、トレハロース、ラクトース、キシロース、麦芽糖等の糖質、ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチトール、パラチニット、還元水飴、還元麦芽糖水飴等の糖アルコール、アスパルテーム、ソーマチン、スクラロース、アセスルファムＫ、ステビア等の高甘味度甘味料、寒天、ゼラチン、カラギーナン、グァーガム、キサンタンガム、ペクチン、ローカストビーンガム、ジェランガム、カルボキシメチルセルロース、大豆多糖類、アルギン酸プロピレングリコール等の各種増粘（安定）剤、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤、クリーム、バター、サワークリームなどの乳脂肪、クエン酸、乳酸、酢酸、リンゴ酸、酒石酸、グルコン酸等の酸味料、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ類等の各種ビタミン類、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄、マンガン等のミネラル分、ヨーグルト系、ベリー系、オレンジ系、花梨系、シソ系、シトラス系、アップル系、ミント系、グレープ系、アプリコット系、ペア、カスタードクリーム、ピーチ、メロン、バナナ、トロピカル、ハーブ系、紅茶、コーヒー等のフレーバー類を挙げることができる。 These fermented foods, if necessary, in addition to sweeteners such as syrup, various other food materials such as various sugars, thickeners, emulsifiers, various vitamins, antioxidants, stabilizers, etc. These optional components can be blended. Specific examples of these food materials include sugars such as sucrose, glucose, fructose, palatinose, trehalose, lactose, xylose, maltose, sorbitol, xylitol, erythritol, lactitol, palatinit, reduced starch syrup, reduced maltose starch syrup, etc. High-sweetness sweeteners such as sugar alcohol, aspartame, thaumatin, sucralose, acesulfame K, stevia, agar, gelatin, carrageenan, guar gum, xanthan gum, pectin, locust bean gum, gellan gum, carboxymethylcellulose, soy polysaccharide, propylene glycol alginate, etc. Various thickeners (stable), sucrose fatty acid ester, glycerin fatty acid ester, polyglycerin fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, lecithin emulsifier, etc. Milk fat such as cream, butter, sour cream, acidulants such as citric acid, lactic acid, acetic acid, malic acid, tartaric acid, gluconic acid, various vitamins such as vitamin A, vitamin B, vitamin C, vitamin E, calcium , Magnesium, zinc, iron, manganese and other minerals, yogurt, berry, orange, pear, perilla, citrus, apple, mint, grape, apricot, pair, custard cream, peach, Flavors such as melon, banana, tropical, herbal, tea and coffee can be mentioned.
斯くして得られる発酵食品は健康増進に優れ、また風味劣化の少ない飲食品として有用性が高いものである。また、本発明の発酵食品は、培地に添加されたグァバ葉エキス又はこれを有効成分とする上記増殖促進剤又は生残性改善剤により乳酸菌の増殖促進作用や生残性改善作用に優れているので、十分な乳酸菌数およびその生菌数が維持されたものとなる。 The fermented food thus obtained is excellent in health promotion and highly useful as a food or drink with little flavor deterioration. In addition, the fermented food of the present invention is excellent in the effect of promoting the growth and survival of lactic acid bacteria by the above-described growth promoter or survival improver comprising the guava leaf extract added to the medium as an active ingredient. Therefore, the sufficient number of lactic acid bacteria and the number of viable bacteria are maintained.
本発明において、「増殖促進剤」とは、乳酸菌に対する増殖促進作用を有するものを意味し、より具体的には、後述の実施例１乃至３の方法により求められる培養終了時（製造時）の当該増殖促進剤を添加した場合の生菌数（Ａ）が、当該増殖促進剤を添加しない場合の生菌数（Ｂ）より大きいものを意味する。当該増殖促進作用は、前記生菌数（Ｂ）を１００％としたときの前記生菌数（Ａ）の百分率が１０４％以上であるものが好ましく、さらに２００％以上が好ましく、さらに３００％以上が好ましく、特に４００％以上が好ましい。
また、本発明において、「増殖促進剤」とは、後述の実施例１又は２の方法により求められる培養終了時（製造時）の当該増殖促進剤を添加した場合の酸度が、当該増殖促進剤を添加しない場合の酸度より大きいものを意味する。
In the present invention, the “growth promoter” means an agent having a growth promoting action against lactic acid bacteria, and more specifically, at the end of culture (during production) determined by the methods of Examples 1 to 3 described later. It means that the viable cell count (A) when the growth promoter is added is larger than the viable cell count (B) when the growth promoter is not added. The growth promoting action is preferably such that the percentage of the viable cell count (A) is 104% or more when the viable cell count (B) is 100%, more preferably 200% or more, and further 300% or more. Is preferable, and 400% or more is particularly preferable.
In the present invention, the term “growth promoter” means that the acidity when the growth promoter is added at the end of culture (during production) determined by the method of Example 1 or 2 described later is the growth promoter. Means the acidity is greater than when acid is not added.
本発明において、「生残性改善剤」とは、乳酸菌に対する生残性改善作用を有するものを意味し、より具体的には、後述の実施例１乃至３の方法により求められる保存後の当該生残性改善剤を添加した場合の生菌数（Ｃ）が、当該生残性改善剤を添加しない場合の生菌数（Ｄ）より大きいものを意味する。当該生残性改善作用は、１０℃１週間保存後または１０℃２週間保存後における前記生菌数（Ｃ）が前記生菌数（Ｄ）の１．０８倍以上であるものが好ましく、さらに２倍以上が好ましく、さらに５倍以上が好ましく、さらに１０倍以上が好ましく、特に５０倍以上が好ましい。 In the present invention, the “survival improver” means an agent having a survival improving effect on lactic acid bacteria, and more specifically, the stored product obtained by the method of Examples 1 to 3 described later. It means that the viable cell count (C) when the survival improver is added is larger than the viable cell count (D) when the survival improver is not added. The viability improving action is preferably such that the viable cell count (C) after storage at 10 ° C. for 1 week or 10 ° C. for 2 weeks is 1.08 times or more of the viable cell count (D). It is preferably 2 times or more, more preferably 5 times or more, further preferably 10 times or more, and particularly preferably 50 times or more.
また、本発明に用いられるグァバ葉エキスは、上述のとおり、グァバ葉エキスを発酵食品の原材料として発酵食品、特に乳酸菌培養培地に配合することによって、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する生きた乳酸菌を増殖促進させ、高濃度に含有し、しかも長期間保存後の生存性に優れた発酵食品が得られることから、ラクトバチルス属及び／又はストレプトコッカス属に属する乳酸菌の増殖促進剤又は生残性改善剤の有効成分として使用することができる。
当該増殖促進剤又は生残性改善剤は、グァバ葉エキスの他、必要に応じて、一般的な食品素材、例えば、上記の甘味料、各種糖質、増粘剤、乳化剤、各種ビタミン剤、酸化防止剤、安定化剤等の任意成分を配合し、常法により製造することができる。
Further, as described above, the guava leaf extract used in the present invention is a living organism belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus by blending the guava leaf extract as a raw material of the fermented food with a fermented food, particularly a lactic acid bacteria culture medium. Lactic acid bacteria are promoted to grow, contain fermented foods that are contained in high concentrations and have excellent survival after long-term storage, so that the growth promoter or survival of lactic acid bacteria belonging to the genus Lactobacillus and / or Streptococcus It can be used as an active ingredient of an improving agent.
In addition to the guava leaf extract, the growth promoter or survival improver is a general food material, for example, the above-mentioned sweeteners, various sugars, thickeners, emulsifiers, various vitamin agents, Optional components such as antioxidants and stabilizers can be blended and produced by conventional methods.
本発明に用いられるグァバ葉エキスは、血糖値抑制作用を有し、また、糖尿病、高血圧、腎臓疾患、ウイルス感染等の予防・治療に効果があることが知られている。さらに、ヨーグルト等の発酵乳が血糖値抑制作用及びインスリン分泌促進作用を有し、また当該発酵乳に含まれる乳酸菌やビフィズス菌が整腸作用、抗腫瘍作用、抗変異作用、血圧低下作用、抗潰瘍作用、コレステロール低下作用等を有することが知られている。本発明の発酵食品は、グァバ葉エキス及びヨーグルト等の発酵乳に期待される前記の有用作用を複合的に作用させることができ、好適に利用することができる。
特に、グァバ葉エキス及びヨーグルト等の発酵乳を併用することで、個々の成分が示す血糖値抑制作用より一層高い血糖値抑制作用が得られ、より好適に利用することができる。
The guava leaf extract used in the present invention has a blood glucose level suppressing action and is known to be effective in the prevention and treatment of diabetes, hypertension, kidney disease, viral infection and the like. Furthermore, fermented milk such as yogurt has a blood glucose level suppressing action and an insulin secretion promoting action, and lactic acid bacteria and bifidobacteria contained in the fermented milk are intestinal regulating action, antitumor action, antimutation action, blood pressure lowering action, It is known to have ulcer action, cholesterol lowering action and the like. The fermented food of the present invention can make the above-mentioned useful effects expected for fermented milk such as guava leaf extract and yogurt act in a complex manner, and can be suitably used.
In particular, by using fermented milk such as guava leaf extract and yogurt in combination, a blood glucose level inhibitory action higher than the blood sugar level inhibitory action exhibited by the individual components can be obtained, and can be used more suitably.
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらにより何ら制約されるものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated further in detail, this invention is not restrict | limited at all by these.
製造例１
（１）グァバ葉熱水抽出物
グァバ葉を乾燥し、250℃で15分間焙煎した後、５ｍｍ程度に細断した。この茶葉1ｋｇを95℃の熱水20ｋｇに入れ、10分間抽出を行なった。150メッシュのフィルターで固液分離を行った後、加熱温度60℃、真空度21kPaの条件下での減圧濃縮によりグァバ葉熱水抽出物を得た。
更に、フリーズドライにてグァバ葉熱水抽出物を粉末とした。
このグァバ葉熱水抽出物粉末をグァバ葉エキス粉末として、以下の実施例１〜３に使用した。
Production Example 1
(1) Guava Hanetsu water extract guava leaves were dried, after decoction 15 minutes Maabu at 250 ° C., was chopped into approximately 5 mm. 1 kg of this tea leaf was put into 20 kg of hot water at 95 ° C. and extracted for 10 minutes. After solid-liquid separation with a 150 mesh filter, a guava leaf hot water extract was obtained by concentration under reduced pressure under conditions of a heating temperature of 60 ° C. and a vacuum of 21 kPa.
Further, the guava leaf hot water extract was powdered by freeze drying.
This guava leaf hot water extract powder was used as a guava leaf extract powder in the following Examples 1 to 3.
実施例１
（１）試験方法
無脂乳固形分8.1重量%（以下、「％」と略す）の牛乳に、グァバ葉エキス粉末を0.374%添加したもの（添加培地）としないもの（無添加培地）を調製し、加熱殺菌後、ラクトバチルス・カゼイYIT9029のスターターを1%、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカスYIT0446のスターター0.5%を接種し、37℃で11時間培養した。グァバ葉エキス無し、有りについて、培養終了後（製造時）、10℃1週間保存後、10℃2週間保存後の生菌数を測定した結果を表１に示す（表中の数値は、グァバ葉エキス無添加の製造時の菌数を100％としたときの百分率で示す）。さらに、培養終了後（製造時）の酸度（培養物を9gとって、その中の有機酸をフェノールフタレインを指示薬として0.1N NaOHで滴定したときの滴定値）を測定した結果を表２に示す。
Example 1
(1) Test method Prepare milk with non-fat milk solids content of 8.1% by weight (hereinafter abbreviated as “%”) with 0.374% guava leaf extract powder (added medium) and non-added medium (without added medium). After heat sterilization, 1% of a starter of Lactobacillus casei YIT9029 and 0.5% of a starter of Lactobacillus delbrooky subspecies Bulgaricus YIT0446 were inoculated and cultured at 37 ° C. for 11 hours. With and without guava leaf extract, the number of viable cells measured after culturing (during production), after storage at 10 ° C for 1 week, and after storage at 10 ° C for 2 weeks is shown in Table 1 (the values in the table are guava) (Shown as a percentage when the number of bacteria at the time of production without leaf extract is 100%). Further, Table 2 shows the results of measurement of acidity after titration (during production) (titration value when 9 g of culture was titrated with 0.1N NaOH using phenolphthalein as an organic acid) Show.
（２）結果
表１及び表２から明らかなように、グァバ葉エキスを添加した方は、しない方に比べて酸度上昇が大きく、また、培養終了時のラクトバチルス・カゼイYIT9029及びラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカスYIT0446の生菌数が多く、乳酸菌増殖促進効果が見られた。さらに、10℃1週間保存後、10℃2週間保存後のラクトバチルス・カゼイYIT9029及びラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカスYIT0446の生菌数においても、グァバ葉エキスを添加した方は、しない方に比べて生残性が改善されており、特に、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカスYIT0446に対する生残性改善効果が顕著であった。
(2) Results As is apparent from Tables 1 and 2, the addition of guava leaf extract showed a greater increase in acidity compared to the case without guava leaf extract. In addition, Lactobacillus casei YIT9029 and Lactobacillus del There were many viable bacteria of Brooky Subspecies Bulgaricus YIT0446, and the effect of promoting the growth of lactic acid bacteria was observed. Furthermore, after storage at 10 ° C. for 1 week, Lactobacillus casei YIT9029 and Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus YIT0446 after vigorous storage, those who added guava leaf extract, Survival was improved compared to those who did not, especially the survival improvement effect on Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus YIT0446.
実施例２
（１）試験方法
脱脂粉乳9.1%、乳タンパク0.8%、更に表３に示すグァバ葉エキス粉末0〜0.7%（0, 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7%）及びイオン交換水を含む培地を調製し、加熱殺菌後、ラクトバチルス・カゼイYIT9029のスターターを1.0%、ストレプトコッカス・サーモフィルスYIT2021のスターター0.5%を接種し、37℃で9.5時間培養した。培養終了後(製造時)、10℃2週間保存後の生菌数を測定し、また酸度も測定した。
その結果を表３及び表４に示す。
Example 2
(1) Test method Non-fat dry milk 9.1%, milk protein 0.8%, guava leaf extract powder 0 to 0.7% (0, 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7%) and ions shown in Table 3 and ions A medium containing exchange water was prepared, and after heat sterilization, 1.0% of a starter of Lactobacillus casei YIT9029 and 0.5% of a starter of Streptococcus thermophilus YIT2021 were inoculated and cultured at 37 ° C. for 9.5 hours. After completion of the culture (during production), the number of viable bacteria after storage at 10 ° C. for 2 weeks was measured, and the acidity was also measured.
The results are shown in Tables 3 and 4.
（２）結果
ラクトバチルス・カゼイYIT9029の結果を表３に示す。このように、グァバ葉エキスを添加すると、培養終了後(製造時)のラクトバチルス・カゼイYIT9029の生菌数が多くなり、しかも添加量が増えるに従い、生菌数も多くなった。
また、表４に示すとおり、酸度については、グァバ葉エキス粉末を添加した場合、無添加に比べて高かった。以上のことから、グァバ葉エキス添加により、乳酸菌の増殖が促進され、その添加量が0.30%以上の場合、顕著であった。
また、10℃2週間保存後の生残性に関しては、ラクトバチルス・カゼイYIT9029と共にストレプトコッカス・サーモフィルスYIT2021でも改善効果が確認され、特にストレプトコッカス・サーモフィルスYIT2021については、グァバ葉エキス粉末無添加では、10℃2週間保存後の生菌数が製造時の生菌数（1.3×109/ml）を100%としたときに1%にまで著しく低下したのに対し、グァバ葉エキス粉末0.05％添加で77％、0.10％添加で57％、0.20％添加で48％、0.30％添加で44％、0.40％添加で41％、0.50％添加で35％、0.60％添加で42％、0.70％添加で48％ (無添加の製造時の生菌数を100%とする)であり、乳酸菌の生残性が顕著に改善された。
(2) Results Table 3 shows the results of Lactobacillus casei YIT9029. Thus, when the guava leaf extract was added, the viable cell count of Lactobacillus casei YIT9029 after completion of the culture (during production) increased, and the viable cell count increased as the addition amount increased.
Further, as shown in Table 4, for acidity, when added pressure to the guava leaf extract powder was higher as compared with no addition. From the above, the addition of guava leaf extract promoted the growth of lactic acid bacteria, which was remarkable when the addition amount was 0.30% or more.
In addition, regarding the survivability after storage at 10 ° C. for 2 weeks, the improvement effect was confirmed in Streptococcus thermophilus YIT2021 together with Lactobacillus casei YIT9029, especially for Streptococcus thermophilus YIT2021, in the absence of guava leaf extract powder, The viable count after storage at 10 ° C for 2 weeks was significantly reduced to 1% when the viable count at the time of production (1.3 x 10 9 / ml) was taken as 100%, while 0.05% guava leaf extract powder was added. 77%, 57% with 0.10% addition, 48% with 0.20% addition, 44% with 0.30% addition, 41% with 0.40% addition, 35% with 0.50% addition, 42% with 0.60% addition, and 0.70% addition The survival rate of lactic acid bacteria was remarkably improved by 48% (the number of viable bacteria at the time of production without addition was 100%).
実施例３
（１）試験方法
脱脂粉乳9.1%、乳タンパク0.8%、更に表５に示すグァバ葉エキス粉末0〜0.20%（0, 0.01, 0.03, 0.05, 0.1, 0.2%）及びイオン交換水を含む培地を調製し、加熱殺菌後、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカスYIT0446のスターターを0.5%、ストレプトコッカス・サーモフィルスYIT2021のスターターを0.5%接種し、37℃で7時間培養した。培養終了後(製造時)、10℃2週間保存後の菌数を測定した。
Example 3
(1) Test method A medium containing non-fat dry milk 9.1%, milk protein 0.8%, and guava leaf extract powder 0 to 0.20% (0, 0.01, 0.03, 0.05, 0.1, 0.2%) shown in Table 5 and ion-exchanged water. After preparation and heat sterilization, 0.5% starter of Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus YIT0446 and 0.5% starter of Streptococcus thermophilus YIT2021 were inoculated and cultured at 37 ° C. for 7 hours. After completion of the culture (during manufacturing), it was boss measure the number of bacteria after storage 10 ° C. 2 weeks.
（２）結果
グァバ葉エキス粉末を添加すると、ストレプトコッカス・サーモフィルスYIT2021の培養終了時（製造時）の生菌数が、無添加に比べ、0.01%〜0.20%で増加しており、乳酸菌の増殖が促進された。また、ラクトバチルス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカスYIT0446については、グァバ葉エキス粉末無添加では、10℃2週間保存後の生菌数が製造時の生菌数（5.6×108/ｍｌ）を100％としたときに43％まで低下したのに対し、グァバ葉エキス粉末0.01%添加で102％、0.03%添加で84％、0.05%添加で66％、0.10%添加で71％、0.20%添加で82％と生残性が顕著に改善された。
また、ストレプトコッカス・サーモフィルスYIT2021の培養終了時（製造時）の生菌数が、グァバ葉エキス粉末無添加（グァバ葉エキス粉末無添加の生菌数（4.5×108/ml）を100%とした場合）に比べ、グァバ葉エキス粉末0.01%添加で140%、0.03%添加で162%、0.05%添加で124%、0.10%添加で122%、0.20%添加で120%と、乳酸菌の増殖が促進された。また、10℃2週間保存後の生残性に関しては、0.20%添加で無添加の１３倍と生残性の改善効果が確認された。
(2) Results When guava leaf extract powder was added, the number of viable bacteria at the end of culture (production) of Streptococcus thermophilus YIT2021 increased by 0.01% to 0.20% compared to the absence of addition, and the growth of lactic acid bacteria Was promoted. In addition, for Lactobacillus delbruecki subspecies bulgaricus YIT0446, without adding guava leaf extract powder, the viable count after storage at 10 ° C for 2 weeks is the viable count at the time of manufacture (5.6 x 10 8 / ml) Was reduced to 43% when guava leaf extract was taken as 100%, compared to 102% with 0.01% guava leaf extract powder, 84% with 0.03% addition, 66% with 0.05% addition, 71% with 0.2% addition, 0.20% Survival was significantly improved by the addition of 82%.
In addition, the number of viable bacteria at the end of the culture of Streptococcus thermophilus YIT2021 (at the time of production) is 100% of the number of viable bacteria without addition of guava leaf extract powder (4.5 × 10 8 / ml) without addition of guava leaf extract powder. Compared to the case of guava leaf extract powder, 0.01% addition of 140%, 0.03% addition of 162%, 0.05% addition of 124%, 0.10% addition of 122%, 0.20% addition of 120%, the growth of lactic acid bacteria Was promoted. In addition, regarding the survival after storage at 10 ° C. for 2 weeks, the effect of improving the survival was confirmed with the addition of 0.20% and 13 times that of no addition.
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