JP5207346B2

JP5207346B2 - Microfluidic chip device

Info

Publication number: JP5207346B2
Application number: JP2007224761A
Authority: JP
Inventors: 民生谷川; 明彦市川
Original assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Current assignee: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology AIST
Priority date: 2007-08-30
Filing date: 2007-08-30
Publication date: 2013-06-12
Anticipated expiration: 2027-08-30
Also published as: JP2009055816A

Description

本発明は、マイクロ流体チップ装置に関する。 The present invention relates to a microfluidic chip equipment.

マイクロ流体チップ内部で細胞など培養、操作する技術が開発されている。例えば、新たなクローンニング手法として特許文献１に示すように、自動核移植装置が提案されており、このようなマイクロ流体チップを用いて細胞操作を行う研究が盛んに行われている。 Techniques for culturing and manipulating cells inside a microfluidic chip have been developed. For example, as shown in Patent Document 1 as a new cloning technique, an automatic nuclear transfer device has been proposed, and researches on cell manipulation using such a microfluidic chip have been actively conducted.

特許文献２には、表面に微細な溝を有し、かつ、前記溝以外の部分に貫通孔を有する第１の基板と、前記溝を有する第１の基板の表面に接合される平面を有する第２の基板と、を少なくとも周囲が密となるように接合してなる一体化チップを、内部に貫通孔を有するチップホルダーにそれぞれの貫通孔同士が当接するように密に貼り付け、前記貫通孔を細胞注入孔とし、かつ、前記第１の基板と前記第２の基板との接合部に前記溝によって形成される空間を細胞の流路としてなる、細胞マイクロレオロジー観察・測定用ディスポーザブルチップが記載されている。 Patent Document 2 has a first substrate having a fine groove on the surface and a through hole in a portion other than the groove, and a plane bonded to the surface of the first substrate having the groove. An integrated chip formed by joining the second substrate and at least the periphery so as to be dense is affixed to a chip holder having a through-hole inside so that the through-holes are in contact with each other. Disposable chip for cell microrheology observation / measurement comprising a hole as a cell injection hole, and a space formed by the groove at a joint portion between the first substrate and the second substrate as a cell flow path Have been described.

特許文献３には、脱着式チューブを用いたマイクロチップが記載されている。 Patent Document 3 describes a microchip using a detachable tube.

特許文献４には、サンプルリザーバを用いた電気泳動によるサンプル導入方法が記載されている。 Patent Document 4 describes a sample introduction method by electrophoresis using a sample reservoir.

特開２００６−３２５４２９号公報JP 2006-325429 A 特開２００５−３１７８６１号公報JP 2005-317861 A 特開２００５−２５７２８２号公報JP 2005-257282 A 特開２００２−３１０８５８号公報JP 2002-310858 A

特許文献３には、脱着式チューブを用いて垂直方向から流体の送出入を行うことが提案されている。また、特許文献４には、サンプルを収容したキャピラリの一端を流路の入口の近傍に配置することが提案されている。 Patent Document 3 proposes that a fluid is sent and received from a vertical direction using a detachable tube. Patent Document 4 proposes that one end of a capillary containing a sample is arranged in the vicinity of the inlet of the flow path.

マイクロ流体チップに培養液や細胞を導入する際には、流路側からパンチなどで穴を開け、チューブを接続するなどしてそこから流路内部に流し入れ行われてきた。しかし、接続部分に気泡がたまったり、デッドスペース部分に細胞がはまり込み、必ずしも投入の確率は高くなかった。そのため、卵細胞など個数が少なく貴重な独立体である細胞を扱うためには不十分である。 When introducing a culture solution or cells into a microfluidic chip, holes have been made with a punch or the like from the flow channel side, and a tube is connected to flow into the flow channel from there. However, bubbles accumulated in the connection part or cells stuck in the dead space part, and the probability of injection was not necessarily high. For this reason, it is insufficient for handling a small number of eggs such as egg cells, which are valuable independent bodies.

また、特許文献２に示されるように、たとえば細胞マイクロレオロジー観察・測定用ディスポーザブルチップなど、基幹部分である流路について検討されているが、細胞のような独立体の導入については触れられていない。 Also, as disclosed in Patent Document 2, for example, a disposable chip for cell microrheology observation / measurement has been studied for a flow path that is a fundamental part, but introduction of an independent body such as a cell is not mentioned. .

回収時も同様に、コネクタ部分で細胞が引っかかることがある。 Similarly, at the time of collection, cells may be caught at the connector portion.

本発明は、かかる点に鑑みてマイクロ流体チップに形成された流路への試料、例えば細胞などの独立体の投入を簡便に、しかも投入の成功率を向上させることを目的とする。 In view of the above, an object of the present invention is to easily introduce an independent body such as a cell into a flow path formed in a microfluidic chip, and to improve the success rate of the introduction.

本発明は、加えて試料の回収の成功率をも向上させることを目的とする。 Another object of the present invention is to improve the success rate of sample recovery.

本発明は、マイクロ流体チップ本体（１Ａ）、対面基板ガラス板（２）及び流体送入用チューブからなり、前記マイクロ流体チップ本体（１Ａ）と対面基板ガラス板（２）との間に流路（３）が形成され、前記流路（３）の一端に接続される流体送入用ポート（４）にチューブコネクタ用孔（５）が設けられ、前記流体送入用チューブが前記チューブコネクタ用孔（５）に接続されてなるマイクロ流体チップ装置において、前記チューブコネクタ用孔（５）は、前記流路（３）の一端から外方に向けて斜め上方に形成されるとともに、前記流体送入用チューブは、前記チューブコネクタ用孔（５、５Ａ）に嵌合される円筒形状の第１のチューブ（６）と柔軟性を有する第２のチューブ（７）とで構成され、前記第２のチューブ（７）は、前記第１のチューブ（６）の内部に形成された２段孔（１３）に嵌合される外側の太管部（９）と、この太管部（９）と一体に形成された細管部（８）とからなり、前記第１のチューブ（６）が前記チューブコネクタ用孔（５）に嵌合されたとき、前記第２のチューブ（７）の細管部（８）先端が前記流路（３）内に位置するようにしたことを特徴とするマイクロ流体チップ装置を提供する。 The present invention, microfluidic chip body (1A), facing the substrate glass plate (2) and consists of a fluid delivery necessity tube, flow between the microfluidic chip body (1A) and the facing substrate glass plate (2) A channel connector hole (5) is provided in the fluid inlet port (4) formed in the channel (3) and connected to one end of the channel (3), and the fluid inlet tube is connected to the tube connector. in the microfluidic chip device made connected to use holes (5), said tube connector hole (5) has one end formed obliquely upward outwardly from Rutotomoni of the channel (3), wherein the fluid The feeding tube is composed of a cylindrical first tube (6) fitted in the tube connector hole (5, 5A) and a flexible second tube (7). 2 tube (7) An outer thick tube portion (9) fitted in a two-stage hole (13) formed inside one tube (6), and a thin tube portion (8) formed integrally with the thick tube portion (9) When the first tube (6) is fitted into the tube connector hole (5), the tip of the thin tube portion (8) of the second tube (7) is the flow path (3). And a microfluidic chip device characterized in that the microfluidic chip device is located inside the microfluidic chip device.

本発明によれば、流路へのチューブコネクタ孔が流路に対して斜め方向に形成され、斜め方向に形成されたチューブコネクタ用孔に案内するチューブが配設され、試料投入が流路内でなされるので、試料の投入への成功率を向上させることができる。 According to the present invention, the tube connector hole to the flow path is formed in an oblique direction with respect to the flow path, the tube for guiding the tube connector hole formed in the oblique direction is disposed, Therefore, the success rate of sample introduction can be improved.

更に本発明によれば、斜め方向の面を持つ流体回収導通口を形成しているためにピペットによる試料の回収の成功率を向上させることができる。 Furthermore, according to the present invention, since the fluid recovery conduction port having an oblique surface is formed, the success rate of the sample recovery by the pipette can be improved.

以下、本発明の実施例を図面に基づいて説明する。 Embodiments of the present invention will be described below with reference to the drawings.

図１は、本発明の実施例のマイクロ流体チップの製作方法および完成されたマイクロ流体チップ装置およびマイクロ流体チップを示す。尚、図は、一部断面部分を示す。 FIG. 1 shows a method of manufacturing a microfluidic chip according to an embodiment of the present invention, a completed microfluidic chip device, and a microfluidic chip. The figure shows a partial cross-sectional portion.

図１（ａ）において、高分子であるＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）チップ本体１Ａが対面基板ガラス板２と一体となって準備され、両者間には流路（微細流路）３が形成される。 In FIG. 1A, a polymer PDMS (polydimethylsiloxane) chip body 1A is prepared integrally with a facing substrate glass plate 2, and a flow path (fine flow path) 3 is formed between them. .

図１（ｂ）において、ＰＤＭＳチップ本体１Ａの流体送入用ポート４の位置に、２段構成のチューブコネクタ用孔５が設けられる。チューブコネクタ用孔５は、流路３に対して斜めの方向、図１（ｂ）の場合、左側にある流路３に対して左下から右上方向に形成される。 In FIG. 1B, a tube connector hole 5 having a two-stage structure is provided at the position of the fluid inlet port 4 of the PDMS chip body 1A. Tube connector hole 5, an oblique direction with respect to the flow path 3, the case of FIG. 1 (b), is formed in the right upper direction from the lower left with respect to the flow channel 3 on the left.

図１（ｂ´）において、シリコンチューブで構成される第一のチューブ６が案内チューブ部材として準備される。第一のチューブ６は、円筒形状をなし、段差のある２段孔１３とされ、先端部は同一径、後端部は末広がり状とされる。そして、図１（ｂ）において、第一のチューブ６は斜め方向配置のチューブコネクタ用孔５に斜め方向に嵌合される。このように、図１（ｃ）に示すＰＤＭＳチップ１すなわちマイクロ流体チップが構成される。 In FIG.1 (b '), the 1st tube 6 comprised with a silicon tube is prepared as a guide tube member. The first tube 6 has a cylindrical shape and is a two-step hole 13 having a step, the tip portion has the same diameter, and the rear end portion has a divergent shape. In FIG. 1B, the first tube 6 is fitted into the tube connector hole 5 arranged in an oblique direction in an oblique direction. Thus, the PDMS chip 1 shown in FIG. 1C, that is, the microfluidic chip is configured.

図１（ｃ´）において、テフロンチューブで構成される第二のチューブ７が被案内チューブ部材として準備される。テフロンチューブで作製される第二のチューブ７はやや柔らかい柔軟性を持つ。第二のチューブ７は、内側の細管部８と外側の太管部９とが一体となって形成される。太管部９は、断面外形が台形状をなし、最細部１１および最太部１２が細管部８の長手方向に配置され、細管部８の中央部に配置される。このような形状でなくても、例えば中央部が太いタイコ状としてもよい。第二のチューブ７は内部中央に試料投入孔１４を有する。そして、図１（ｃ）において、第一のチューブ６を案内として第一のチューブ６の２段孔１３に第二のチューブ７が嵌合、密着（密封）される。これによって空気の導入を防ぐことができる。第二のチューブ７は段差で受けられ、しっかり止められる。第二のチューブ７は第一のチューブ６から取り外し可能である。 In FIG.1 (c '), the 2nd tube 7 comprised with a Teflon tube is prepared as a guided tube member. The second tube 7 made of a Teflon tube has a slightly soft flexibility. The second tube 7 is formed by integrally forming an inner thin tube portion 8 and an outer thick tube portion 9. The thick tube portion 9 has a trapezoidal cross-sectional outer shape, and the finest portion 11 and the thickest portion 12 are arranged in the longitudinal direction of the thin tube portion 8 and are arranged in the central portion of the thin tube portion 8. Even if it is not such a shape, it is good also as a Tyco shape with a thick center part, for example. The second tube 7 has a sample insertion hole 14 in the center of the inside. In FIG. 1C, the second tube 7 is fitted into and closely attached (sealed) to the two-stage hole 13 of the first tube 6 using the first tube 6 as a guide. This can prevent the introduction of air. The second tube 7 is received at the level difference and secured. The second tube 7 is removable from the first tube 6.

このようにして、図１（ｄ）に示すようにマイクロ流体チップを用いたマイクロ流体チップ装置１００が形成される。 In this way, the microfluidic chip device 100 using the microfluidic chip is formed as shown in FIG.

図１（ｄ）において、マイクロ流体チップ装置１００には、流路を備えたＰＤＭＳチップ（マイクロ流体チップ本体となる。）１の流体送入用ポート４の位置にチューブコネクタ用孔５が形成され、チューブコネクタ用孔５に、第一のチューブ６および第二のチューブ７から形成される流体送入用チューブ１０が設けられる。 1D, in the microfluidic chip device 100, a tube connector hole 5 is formed at the position of the fluid delivery port 4 of a PDMS chip (which becomes a microfluidic chip body) 1 having a flow path. The tube connector hole 5 is provided with a fluid feeding tube 10 formed from the first tube 6 and the second tube 7.

チューブコネクタ用孔５は、流路３に対して斜め方向に形成され、斜め方向に形成されたチューブコネクタ用孔５に第一のチューブ６が配設されて固定され、第一のチューブ６内に、第一チューブよりも細い管の第二のチューブ７が第一のチューブ６の流路側先端から突き出る形状で配設される。このような突き出た形状に伴ない、また第二チューブの柔軟性によって第二のチューブの先端部を流路３内に位置させることができる。第二のチューブ７の先端の位置は、第一のチューブ６の内管の径と第二のチューブ７の外形形状によって適宜に調整可能であり、通常予め設定した設計に従って止められ、前述のように、流路３内に配設することができる。このようにすることによって流路３の端部に形成される撓み部３１に貴重な個体としての細胞を送入され、滞留させるということがなくなる。 The tube connector hole 5 is formed in an oblique direction with respect to the flow path 3, and the first tube 6 is disposed and fixed in the tube connector hole 5 formed in the oblique direction. In addition, the second tube 7, which is thinner than the first tube, is arranged in a shape protruding from the flow path side tip of the first tube 6. Accompanying such protruding shape, and the flexibility of the second tube, the tip of the second tube can be positioned in the flow path 3. The position of the tip of the second tube 7 can be adjusted as appropriate according to the diameter of the inner tube of the first tube 6 and the outer shape of the second tube 7, and is usually stopped according to a preset design, as described above. In addition, it can be disposed in the flow path 3. By doing in this way, the cell as a valuable individual is not sent to the bending part 31 formed in the edge part of the flow path 3, and it does not stay.

上述のように、第二のチューブ７は、細管部８および細管部８の中央部に設けられ、断面外形が台形状をなし、最細部１１および最太部１２が細管部長手方向に配設された太管部９とから形成される。少なくとも太管部９の一部である後端側は第一のチューブ６から露出するようにして第一のチューブ６に嵌合される。露出しないで、第一のチューブ６内に太管部９を位置させてもよいが、細管部８は第一のチューブ６の両側に露出される。 As described above, the second tube 7 is provided at the narrow tube portion 8 and the central portion of the narrow tube portion 8, the cross-sectional outer shape is trapezoidal, and the finest portion 11 and the thickest portion 12 are disposed in the longitudinal direction of the thin tube portion. The thick tube portion 9 is formed. At least the rear end side that is a part of the thick tube portion 9 is fitted to the first tube 6 so as to be exposed from the first tube 6. Although the thick tube portion 9 may be positioned in the first tube 6 without being exposed, the thin tube portion 8 is exposed on both sides of the first tube 6.

試料の投入方法について説明する。 A method for loading the sample will be described.

試料は細胞などの個体が対象となる。ただし、培養液などの液体に適用することもできる。１例として１００μｍ程度の細胞９０を扱うことを検討する。 Samples are individuals such as cells. However, it can also be applied to a liquid such as a culture solution. As an example, consider handling a cell 90 of about 100 μm.

第二のチューブ７は、内径２００μｍ、外径４００μｍのテフロンチューブとして形成され、チューブ３０に接続され、中央部に設けた試料投入孔１４に細胞を吸引する。投入部分の流路に１ｍｍのパンチで開孔されたチューブコネクタ用孔５に内径１ｍｍの第一のチューブ６が接続される。接続は心棒を使って間隙を埋めることで第二のチューブ７を密着して固定する。このような構成によって空気の流入は防止される。第一のチューブ６に、細胞を吸引した第二のチューブ７を差し入れ、止める。このようにして図１（ｄ）に示す装置を構成し、試料投入孔先端１４Ａから直接流路３に細胞９０の投入を行う。これによって図１（ｄ）に示すように撓み部３１に滞留させることなく細胞９０を連続して投入する。細胞９０を斜め方向固定手段および斜め方向投入手段によって簡便にムダなく連続して投入することができる。 The second tube 7 is formed as a Teflon tube having an inner diameter of 200 μm and an outer diameter of 400 μm, is connected to the tube 30, and sucks cells into the sample insertion hole 14 provided in the center. A first tube 6 having an inner diameter of 1 mm is connected to a tube connector hole 5 which is opened with a 1 mm punch in the flow path of the input portion. The connection uses the mandrel to close the second tube 7 by filling the gap. With such a configuration, inflow of air is prevented. The second tube 7 having sucked the cells is inserted into the first tube 6 and stopped. In this way, the apparatus shown in FIG. 1 (d) is configured, and the cells 90 are input directly into the flow path 3 from the sample input hole tip 14A. As a result, as shown in FIG. 1 (d), the cells 90 are continuously introduced without staying in the bending portion 31. The cells 90 can be continuously and easily introduced without waste by the oblique direction fixing means and the oblique direction introduction means.

図２は、細胞投入を示す写真図である。図２（ａ）はその写真図を示し、図２（ｂ）はその模写図を示す。図２の右側図は投入前を示し、図２の左側図は投入後を示す。このように、図１（ｄ）に示す構成によって、細胞を連続して流路３に直接に投入し得ることが確認できた。 FIG. 2 is a photograph showing cell input. FIG. 2A shows a photograph thereof, and FIG. 2B shows a copy thereof. The right side view of FIG. 2 shows before the insertion, and the left side view of FIG. 2 shows after the insertion. As described above, it was confirmed that the cells shown in FIG.

従来まではガラスチップや高分子樹脂チップに対して垂直にチューブを差し入れていた。そのため、直角部分にデッドスペースができ、そこに気泡や細胞がトラップされる。本実施例では、まずそのスペースをなくすために角度をつけてＰＤＭＳチップ１に穴を開け、第一のチューブ６をつなげる。次にそのチューブ６の内径より細い外径のテフロンチューブである第二のチューブ７を用いて細胞９０を吸引し、ＰＤＭＳチップ１の第一のチューブ６に差し入れる。それにより、投入先端の試料投入口１４が流路３に近づくため、投入成功率が向上する。 Until now, the tube was inserted perpendicular to the glass chip or polymer resin chip. As a result, a dead space is formed at a right angle, and bubbles and cells are trapped there. In this embodiment, first, a hole is formed in the PDMS chip 1 at an angle to eliminate the space, and the first tube 6 is connected. Next, the cell 90 is sucked using the second tube 7 which is a Teflon tube having an outer diameter smaller than the inner diameter of the tube 6 and is inserted into the first tube 6 of the PDMS chip 1. As a result, the sample introduction port 14 at the introduction tip approaches the flow path 3, so that the introduction success rate is improved.

試料回収方法を図３を用いて説明する。 A sample recovery method will be described with reference to FIG.

図３において、流体送出用ポート２１の位置に、流路３の一部が切開されることによって流体回収導通口２２が形成される。本例の場合、流体回収導通口２２は４面からなる四角錐台をなし、下部が狭く、上部が広くなって開口する。このような四角錐台形状の流体回収導通口２２は、流路３に対して斜め方向の面２３を有することになる。流体回収導通口２２は円錐台形状としてもよい。 In FIG. 3, a fluid recovery port 22 is formed by cutting a part of the flow path 3 at the position of the fluid delivery port 21. In the case of this example, the fluid recovery conduction port 22 has a quadrangular pyramid consisting of four surfaces, and the lower part is narrow and the upper part is widened and opened. Such a quadrangular frustum-shaped fluid recovery conduction port 22 has a surface 23 oblique to the flow path 3. The fluid recovery conduction port 22 may have a truncated cone shape.

流体回収導通口２２を介して細胞９０を斜め方向からピペット（図示せず）で導出させる。 The cell 90 is led out by a pipette (not shown) from the oblique direction through the fluid recovery conduction port 22.

このように斜め方向の細胞回収を行うと、従来あったチューブ接続付近のデッドスペースに細胞がはまり込むということがなくなる。流体回収導通口２２には角度をつけた面を設け、ピペット配置が斜め方向配置であることを許容することによって細胞９０が流体回収導通口２２上部付近に来ても回収しやすくなる。 When the cells are collected in an oblique direction as described above, the cells do not get stuck in the conventional dead space near the tube connection. By providing the fluid recovery conduction port 22 with an angled surface and allowing the pipette to be arranged in an oblique direction, the cells 90 can be easily collected even if they come near the fluid recovery conduction port 22.

マイクロ流体チップ装置１００から細胞９０を取り出すために流体（液体）を用いると、大量の液体中から細胞９０を探すことが必要になる。そこで、流路終端を切開し、開放させることで、流速が急激に遅くなり、流路出口付近で細胞がとどまる。そこでピペットで細胞を回収することで回収率が向上する。 When a fluid (liquid) is used to take out the cells 90 from the microfluidic chip device 100, it is necessary to search for the cells 90 from a large amount of liquid. Therefore, by incising and opening the end of the flow path, the flow rate decreases rapidly, and the cells stay near the flow path outlet. Therefore, collecting the cells with a pipette improves the collection rate.

多数のビーズの内、図４に直径１００ミクロンのポリチレンビーズを用いた投入ならびに回収実験の結果を示す。２０個のビーズをチューブに入れた（図４（ａ））。図４（ｂ）はその送入状態を示し、図４（ｃ）、図４（ｄ）は２０個選定したことを示す。マイクロ流体チップに導入し（図４（ｅ））、回収を行った（図４（ｆ））。結果として２０個すべてのビーズの回収に成功した。 Of the large number of beads, FIG. 4 shows the results of the input and recovery experiments using 100-micron diameter polyethylene beads. Twenty beads were placed in a tube (FIG. 4 (a)). FIG. 4B shows the delivery state, and FIGS. 4C and 4D show that 20 pieces have been selected. It was introduced into the microfluidic chip (FIG. 4 (e)) and collected (FIG. 4 (f)). As a result, all 20 beads were successfully collected.

図５は、本発明の実施例の第２の実施例を示す。第一の実施例と同一の構成には同一の番号が付してあり、第一の実施例について行った説明を援用するものとする。また、試料の投入方法、試料の回収方法についても第一の実施例について行った説明を援用するものとする。特に、第一の実施例との差異について説明する。 FIG. 5 shows a second embodiment of the embodiment of the present invention. The same number is attached | subjected to the structure same as a 1st Example, and the description performed about the 1st Example shall be used. The explanation given for the first embodiment is also used for the sample input method and sample recovery method. In particular, differences from the first embodiment will be described.

図５において、第一のチューブに相当するチューブ６１は、マイクロ流体本体１Ａに一体として形成され、これによってマイクロ流体チップ、すなわちＰＤＭＳチップ１が構成される。この状態を図５（ｃ）に示す。 In FIG. 5, a tube 61 corresponding to the first tube is formed integrally with the microfluid main body 1A, thereby forming a microfluidic chip, that is, the PDMS chip 1. This state is shown in FIG.

図５（ｃ）においては、チューブ６１を使用しているが、一体構成としているために、内部に挿入、貫通させる第二チューブに相当する細いチューブ７をチューブコネクタ用孔５Ａに直接的に密着させることができ、従ってチューブ６１の機能は細いチューブ７を案内し、固定しておく固定部材であれば足りる。すなわち、チューブコネクタ用孔５Ａに連通する案内面である案内部を有する固定部材が設けられる。固定部材の典型的な例が内部に案内管が形成されたチューブ６ということになる。 In FIG. 5C, the tube 61 is used. However, since the tube 61 is integrated, the thin tube 7 corresponding to the second tube inserted and penetrated inside is directly attached to the tube connector hole 5A. Therefore, the function of the tube 61 is sufficient if it is a fixing member that guides and fixes the thin tube 7. That is, a fixing member having a guide portion which is a guide surface communicating with the tube connector hole 5A is provided. A typical example of the fixing member is a tube 6 in which a guide tube is formed.

このように、この例によれば、チューブコネクタ用孔５Ａは、流路３に対して斜め方向に形成され、斜め方向に形成されたチューブコネクタ用孔５Ａに連通する案内部を有する固体部材（チューブ６）が一体的に、もしくは別体として構成され、接続されて一体的にされて設けられ、案内部およびチューブコネクタ用孔５Ａを貫通して案内部もしくはチューブコネクタ用孔５Ａ自体に密着し、先端部が流路３内に達する細いチューブ７（第一の実施例の第二のチューブ７に相当）が配設されて流体送入用チューブが形成される。 Thus, according to this example, the tube connector hole 5A is formed in an oblique direction with respect to the flow path 3 and has a solid member having a guide portion communicating with the tube connector hole 5A formed in the oblique direction ( The tube 6) is formed integrally or as a separate body, connected and integrally provided, and penetrates the guide portion and the tube connector hole 5A and is in close contact with the guide portion or the tube connector hole 5A itself. Then, a thin tube 7 (corresponding to the second tube 7 of the first embodiment) whose tip portion reaches the flow path 3 is disposed to form a fluid feeding tube.

このようにして、図５（ｄ）に示すマイクロ流体チップおよびマイクロ流体チップ装置１００が構成される。 In this way, the microfluidic chip and microfluidic chip device 100 shown in FIG.

本発明の実施例のマイクロ流体チップの製作法および完成製品を示す（一部断面を含む）図。The figure which shows the manufacturing method of the microfluidic chip of the Example of this invention, and a completed product (a partial cross section is included). 細胞投入方法を示す図。The figure which shows the cell injection | throwing-in method. 細胞回収方法を示す図。The figure which shows the cell collection | recovery method. 投入・回収実験の結果を示す図。The figure which shows the result of a loading and collection | recovery experiment. 本発明の他の実施例のマイクロ流体チップの製作法および完成製品を示す図。The figure which shows the manufacturing method and finished product of the microfluidic chip of other examples of the present invention.

符号の説明Explanation of symbols

１…マイクロ流体チップ（ＰＤＭＳチップ）、１Ａ…ＰＤＭＳチップ本体、２…ガラス板、３…流路、４…流体送入用ポート、５，５Ａ…チューブコネクタ用孔、６…第一のチューブ（案内チューブ部材）、７…第二のチューブ（投入チューブ部材）、８…細管部、９…太管部、１０…流体送入用チューブ（流体投入用チューブ）、１１…最細部、１２…最太部、１３…２段孔、１４…試料投入孔、２１…流体送出口ポート、２２…流体回収導通口、２３…斜め方向の面、１００…マイクロ流体チップ装置。
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Microfluidic chip (PDMS chip), 1A ... PDMS chip body, 2 ... Glass plate, 3 ... Flow path, 4 ... Fluid feeding port, 5, 5A ... Tube connector hole, 6 ... First tube ( Guide tube member), 7 ... Second tube (input tube member), 8 ... Thin tube portion, 9 ... Thick tube portion, 10 ... Fluid feed tube (fluid input tube), 11 ... Most detailed, 12 ... Maximum Thick part, 13 ... 2 step hole, 14 ... Sample input hole, 21 ... Fluid delivery port, 22 ... Fluid recovery conduction port, 23 ... Diagonal surface, 100 ... Microfluidic chip device.

Claims

マイクロ流体チップ本体（１Ａ）、対面基板ガラス板（２）及び流体送入用チューブからなり、前記マイクロ流体チップ本体（１Ａ）と対面基板ガラス板（２）との間に流路（３）が形成され、前記流路（３）の一端に接続される流体送入用ポート（４）にチューブコネクタ用孔（５）が設けられ、前記流体送入用チューブが前記チューブコネクタ用孔（５）に接続されてなるマイクロ流体チップ装置において、
前記チューブコネクタ用孔（５）は、前記流路（３）の一端から外方に向けて斜め上方に形成されるとともに、前記流体送入用チューブは、前記チューブコネクタ用孔（５、５Ａ）に嵌合される円筒形状の第１のチューブ（６）と柔軟性を有する第２のチューブ（７）とで構成され、前記第２のチューブ（７）は、前記第１のチューブ（６）の内部に形成された２段孔（１３）に嵌合される外側の太管部（９）と、この太管部（９）と一体に形成された細管部（８）とからなり、前記第１のチューブ（６）が前記チューブコネクタ用孔（５）に嵌合されたとき、前記第２のチューブ（７）の細管部（８）先端が前記流路（３）内に位置するようにしたことを特徴とするマイクロ流体チップ装置。 Microfluidic chip body (1A), facing the substrate glass plate (2) and the fluid feed consists of necessity tube, the flow path (3) between the microfluidic chip body (1A) and the facing substrate glass plate (2) Is formed, and a tube port hole (5) is provided in a fluid feed port (4) connected to one end of the flow path (3), and the fluid feed tube is connected to the tube connector hole (5). In the microfluidic chip device connected to
The tube connector hole (5) has one end formed obliquely upward outwardly from Rutotomoni of the channel (3), said fluid feed necessity tube, the tube connector holes (5, 5A) The first tube (6) having a cylindrical shape that is fitted to the second tube (7) and the second tube (7) having flexibility, and the second tube (7) is the first tube (6). An outer thick tube portion (9) fitted in a two-stage hole (13) formed inside the tube, and a thin tube portion (8) formed integrally with the thick tube portion (9), When the first tube (6) is fitted into the tube connector hole (5), the tip of the thin tube portion (8) of the second tube (7) is positioned in the flow path (3). microfluidic chip device, characterized in that the.