JP5146966B2 - キナーゼ阻害剤としてのヘテロアリールピロロピリジノン活性 - Google Patents
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Description
Aは、ピリジン−4−イル、3−フルオロ−ピリジン−4−イル、および2−アミノ−ピリミジン−4−イルからなる群から選択され、
R1は、水素、ハロゲンおよび(C1−C6)アルキルからなる群から選択され、
R2は、水素、(C1−C6)アルキル、(C2−C6)アルケニル、(C2−C6)アルキニル、(C3−C6)シクロアルキル、(C1−C6)ハロアルキル、(C1−C6)ポリフッ化アルキル、ヘテロサイクリル、アリール、ヘテロアリール、(C3−C6)シクロアルキル−(C1−C6)アルキル、ヘテロサイクリル−(C1−C6)アルキル、アリール−(C1−C6)アルキル、ヘテロアリール−(C1−C6)アルキル、(C1−C8)ヒドロキシアルキル、(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、アリールオキシ−(C1−C8)アルキル、ヘテロアリールオキシ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)アミノアルキル、(C1−C8)アルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)ジアルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、カルバモイル−(C1−C8)アルキル、およびアルコキシカルボニルからなる群から選択され、上記アリール、ヘテロアリール、ヘテロサイクリル、アリールオキシおよびヘテロアリールオキシ部分の各々は、未置換であるか、または1個以上の置換基によって置換されていてよく、各置換基は、アルキル、アリール、−OCF3、−OC(O)アルキル、−OC(O)アリール、−CF3、ヘテロアリール、アラルキル、アルキルアリール、ヘテロアラルキル、アルキルヘテロアリール、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アシル、アリール、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、ヘテロアリールスルフィニル、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アラルキルチオ、ヘテロアラルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクレニル、−NH(アルキル)、−NH(シクロアルキル)、および−N(アルキル)2からなる群から独立に選択され、
R3、R4、R5およびR6は各々水素、(C1−C6)ハロアルキル、(C1−C6)ポリフッ化アルキル、(C1−C6)ハロアルケニル、(C1−C8)ポリフッ化アルケニル、(C1−C8)ヒドロキシアルキル、(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、アリールオキシ−(C1−C8)アルキル、ヘテロアリールオキシ−(C1−C8)アルキル、アリール−(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)アジドアルキル基、(C1−C8)アミノアルキル、(C1−C8)アルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)ジアルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、および(C1−C8)アルキル−OC(O)−アミノ(C1−C8)アルキルからなる群から独立に選択され、ただしR3、R4、R5またはR6の少なくとも1つは水素と異なる。)
によって表されるヘテロアリールピロロピリジノン誘導体
または医薬的に許容される塩またはその溶媒和物に関する。
Aは、ピリジン−4−イル、3−フルオロ−ピリジン−4−イル、および2−アミノ−ピリミジン−4−イルからなる群から選択され、
R1は、水素、ハロゲンおよび(C1−C6)アルキルからなる群から選択され、
R2は、水素、(C1−C6)アルキル、(C2−C6)アルケニル、(C2−C6)アルキニル、(C3−C6)シクロアルキル、(C1−C6)ハロアルキル、(C1−C6)ポリフッ化アルキル、ヘテロサイクリル、アリール、ヘテロアリール、(C3−C8)シクロアルキル−(C1−C6)アルキル、ヘテロサイクリル−(C1−C6)アルキル、アリール−(C1−C6)アルキル、ヘテロアリール−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)ヒドロキシアルキル、(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、アリールオキシ−(C1−C8)アルキル、ヘテロアリールオキシ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)アミノアルキル、(C1−C8)アルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)ジアルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、カルバモイル−(C1−C8)アルキル、およびアルコキシカルボニルからなる群から選択され、上記アリール、ヘテロアリール、ヘテロサイクリル、アリールオキシ、およびヘテロアリールオキシ部分の各々は、未置換であっても、または1つ以上の置換基で置換されていてもよく、各置換基は、アルキル、アリール、−OCF3、−OC(O)アルキル、−OC(O)アリール、−CF3、ヘテロアリール、アラルキルアルキルアリール、ヘテロアラルキル、アルキルヘテロアリール、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アシル、アリール、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、ヘテロアリールスルフィニル、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アラルキルチオ、ヘテロアラルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリレニル、−NH(アルキル)、−NH(シクロアルキル)、および−N(アルキル)2からなる群から独立に選択され、
R3、R4、R5およびR6は各々独立に、水素、(C1−C6)ハロアルキル、(C1−C6)ポリフッ化アルキル、(C1−C6)ハロアルケニル、(C1−C6)ポリフッ化アルケニル、(C1−C8)ヒドロキシアルキル、(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、アリールオキシ−(C1−C8)アルキル、ヘテロアリールオキシ−(C1−C8)アルキル、アリール−(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)アジドアルキル基、(C1−C8)アミノアルキル、(C1−C8)アルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)ジアルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、および(C1−C8)アルキル−OC(O)−アミノ(C1−C8)アルキルからなる群から選択されるが、ただし、R3、R4、R5またはR6の少なくとも1つは水素と異なる。)
によって表されるヘテロアリールピロロピリジノン誘導体、
または医薬的に許容される塩またはこれの溶媒和物に関する。
このように得られた化合物を、例えば、Qがtert−ブトキシカルボニル基である場合、酸性条件で、例えばトリフルオロ酢酸の、および適切な溶媒、好ましくはジクロロメタンの存在下で、室温で、および約1時間から約6時間の間に含まれる時間、式(IIIc)の化合物に変換できる。
式(I)の化合物は、タンパク質キナーゼ阻害剤として活性であり、したがって、例えば腫瘍細胞の調節できない増殖を限定するために有用である。
ダウエックス樹脂捕捉技術の使用に基づいたアッセイの方法を通して、推定Cdc7阻害剤の阻害活性、および選択される化合物の効力を測定する。
− 10μl試験化合物(10はnMからuMまでの範囲で濃度を増大して、容量応答曲線を生じる)。試験化合物用の溶媒は、3%DMSOを含有した(最終濃度1%)。
− 冷ATP(2mM最終濃度)および放射活性ATP(冷ATPと1/5000モル比)の混合物である10μl基質MCM2(6mM最終濃度)。
− 反応を開始した10μl酵素(Cdc7/Dbf4、2nM最終濃度)。50mM HEPES(pH7.9)で含まれる反応の緩衝剤は、15mM MgCl2、2mM DTT、3μM NaVO3、2mMグリセロホスフェートおよび0.2mg/ml BSAを含有する。
− 室温で60分間の温置の後、150mM蟻酸の存在下で、各ウエルにダウエックス樹脂150μlを添加することによって、反応を停止させた。さらに60分の温置の後、懸濁液50μLを廃棄し、マイクロシンチ(MicroScint)40(Packard)150μlを含有する96穴オプチプレートに移す。5から10分振った後、プレートを、PackardのTOP−Count放射活性読取装置で1分間読取った。
y=底部+(頂部−底部)/(1+10A((logIC50−x)*スロープ))
(式中、xは、阻害剤濃度の対数であり、yは応答であり、yは底部で出発し、S字型を有する頂部になる。)
を使用して、コンピュータプログラムのアッセイエックスプローラー(Assay Explorer)によって、実験データを解析した。
キナーゼ反応:100μl緩衝液(トリスHCl 10mM(pH7.5)、MgCl2 10mM、7.5mM DTT)の最終体積中の1.5μMヒストンH1基質、25μM ATP(0.2μCi P33γ−ATP)、バスキュロウイルス同時発現Cdk2/サイクリンA 30ng、10μM阻害剤を、96U底部ウエルプレートの各ウエルに添加した。37℃温置で10分後、EDTA(120mM)20μlによって反応を停止させた。
検出:濾材を、37℃で乾燥させ、この後100μl/ウエルのシンチラント(scintillant)を添加し、およびトップ−カウント装置での放射活性計測によって、33P標識ヒストンH1を検出した。
結果:データを解析し、酵素の総活性(=100%)に当たる阻害率(%)として表された。
y=底部+(頂部−底部)/(1+10A((logIC50−x)*スロープ))
(式中、xは、阻害剤濃度の対数であり、yは応答であり、yは底部で出発し、S字型を有する頂部になる。)
を使用して、コンピュータプログラムのグラフパッドプリズム(GraphPad Prizm)によって、実験データを解析した。
キナーゼ反応:100μl緩衝液(トリスHCl 10mM(pH7.5)、MgCl2 10mM、7.5mM DTT+0.2mg/ml BSA)の最終体積中の1.5μMヒストンH1(シグマ番号H−5505)基質、25μM ATP(0.2μCi P33γ−ATP)、バスキュロウイルス同時発現cdk2/GST−サイクリンE 15ng、適切な濃度の阻害剤を、96U底部ウエルプレートの各ウエルに添加した。37℃温置で10分後、EDTA(120mM)20μlによって反応を停止させた。
捕捉:100μlを各ウエルからマルチクスリーンプレートに移し、ホスホセルロース濾材に基質を結合させた。この後、プレートを150μl/ウエルPBS(Ca++/Mg++なし)で三回洗浄し、マルチスクリーン濾過システムによって濾過した。
検出:濾材を、37℃で乾燥させ、この後100μl/ウエルのシンチラント(scintillant)を添加し、およびトップ−カウント装置での放射活性計測によって、33P標識ヒストンH1を検出した。
キナーゼ反応:100μl緩衝液(トリスHCl 10mM(pH7.5)、MgCl2 10mM、7.5mM DTT+0.2mg/ml BSA)の最終体積中の1.5μMヒストンH1(シグマ番号H−5505)基質、25μM ATP(0.2μCi P33γ−ATP)、バスキュロウイルス同時発現Cdk1/サイクリンB1 30ng、適切な濃度の阻害剤を、96U底ウエルプレートの各ウエルに添加した。37℃温置で10分後、EDTA(120mM)20μlによって反応を停止させた。
捕捉:100μlを各ウエルからマルチクスリーンプレートに移し、ホスホセルロース濾材に基質を結合させた。この後、プレートを150μl/ウエルPBS(Ca++/Mg++なし)で三回洗浄し、マルチスクリーン濾過システムによって濾過した。
検出:濾材を、37℃で乾燥させ、この後100μl/ウエルのシンチラント(scintillant)を添加し、およびトップ−カウント装置での放射活性計測によって、33P標識ヒストンH1を検出した。
キナーゼ反応:50μl緩衝液(トリスHCl 10mM(pH7.5)、MgCl2 10mM、7.5mM DTT+0.2mg/ml BSA)の最終体積中の0.4μMマウスGST−Rb(769−921)(サンタクルーズから得られる番号sc−4112)基質、10μM ATP(0.5μCi P33γ−ATP)、バスキュロウイルス発現GST−Cdk4/GST−サイクリンD1 100ng、適切な濃度の阻害剤を、96U底部ウエルプレートの各ウエルに添加した。37℃温置で40分後、EDTA(120mM)20μlによって反応を停止させた。
捕捉:60μlを各ウエルからマルチクスリーンプレートに移し、ホスホセルロース濾材に基質を結合させた。この後、プレートを150μl/ウエルPBS(Ca++/Mg++なし)で三回洗浄し、マルチスクリーン濾過システムによって濾過した。
検出:濾材を、37℃で乾燥させ、この後100μl/ウエルのシンチラント(scintillant)を添加し、およびトップ−カウント装置での放射活性計測によって、33P標識ヒストンH1を検出した。
以下のプロトコルにしたがって、Cdk5/p25活性の阻害アッセイを行った。
キナーゼ反応:100μl緩衝液(ヘペス 20mM(pH7.5)、MgCl2 15mM、1mM DTT)の最終体積中の1.0μMビオチン化ヒストンペプチド基質、0.25μCi P33g−ATP、4nM Cdk5/p25複合体、0から100μM阻害剤を、96U底部ウエルプレートの各ウエルに添加した。37℃温置で20分後、0.1%トリトンX−100、50μM ATPおよび5mM EDTAを含有するリン酸緩衝生理食塩水中の500μgSPAビーズの添加によって反応を停止させた。ビーズを固定させ、33P標識ペプチドに組み込まれた放射活性を、トップ−カウントシンチレーション計測計で検出した。
結果:式:
100×(1−(未知−バックグランド)/(酵素対照−バックグランド))
を使用して、データを解析し、阻害率(%)として表現した。
Y=100/[1+10A((LogEC50−X)*スロープ)]
の変動を使用してIC50値を計算した。
(X=log(μM)およびY=阻害率(%))
33P−γ−ATPで追跡されたATP(ガンマリン酸標識された、Redivue(登録商標)コード番号AH9968、1000から3000Ci/ミリモル、米国ニュージャージー州ピスケータウエイ(Piscataway,NJ USA)のAmersham Biosciences)の存在下で、およびこれら自体の最適緩衝液およびコファクターの存在下でのこれらの特異的ser−thrまたはtyrキナーゼにより、特異的ペプチドまたはタンパク質基質を、トランスリン酸化する。
i)ダウエックス樹脂調製:
湿潤樹脂(SIGMA、特別注文で調製された樹脂ダウエックス1×8 200から400メッシュ、2.5Kg)500gを秤量し、150mM蟻酸ナトリウム(pH3.00)中で21まで希釈した。
この後、pHを測定し、3.00周辺であるべきである。
洗浄樹脂は、1週間超安定である。保存樹脂を、使用前に4℃で保存する。
ヘペス50mM(pH7.9)
MnCl2 3mM
DTT 1mM
NaVO3 3uM
BSA 0.2mg/ml
iii)酵素予備活性化:
キナーゼ阻害アッセイを開始する前に、総酵素ミックスの1/60に等しい体積で、KB中の100uM ATPの存在下で、30分間、28℃で、IGF−1Rを予備温置する。これは、酵素自動リン酸化および完全活性化を可能にする。
酵素濃度=6nM
IRS1基質=10uM
ATP=6uM
33P−γ−ATP=1nM
試験ミックスは、
1)3×酵素ミックス(キナーゼ緩衝液3×で行われた)、7μl/ウエル
2)3×基質およびATPミックス(ddH2Oで行われた)、33P−γ−ATPと一緒に、7μl/ウエル
3)3×試験化合物(ddH2O−3%DMSOに希釈)−7μl/ウエル
から構成される。
i)化合物の希釈:
試験化合物は、100%DMSO中の10mM溶液として利用でき、専任実験室によって96穴プレートに分配する。
化合物希釈(3×)7μlを用いて、384ウエルプレート、V底(試験プレート)を調製し、この後プレートトラック12ロボット化ステーション(Perkin Elmer、米国02481−4078マサチューセッツ州ウエールスレイ、ウイリアムストリート45)に乗せる。ロボットは、酵素ミックス(3×)のための1つのリサーバーおよびATPミックス(3×)のためのものと一緒に、アッセイを開始するための1つの384チップピペット採取ヘッド、これに加えて樹脂を分散するための1つの96チップヘッドを有する。
特別注文版の「アッセイエクスプローラー」ソフトウエアパッケージ(Elsevier MDL、94577カリフォルニア州サン リンドロ)を使用して、データを分析した。単一の化合物濃度については、阻害活性は、特に、阻害剤が除外された場合に得られる酵素の総活性と比較して化合物の存在下で得られた阻害率(%)として表された。所望の阻害を示す化合物を、IC50計算を通して阻害剤の効力を研究するためにさらに分析できる。この場合には、阻害剤の一連の希釈を使用して得られた阻害データを、以下の方程式を使用して非線状回帰によって合わせることができる。
正常なヒト上皮線維芽細胞(NHDF)の成長因子刺激に応答するS6リボソームタンパク質のリン酸化を、細胞でのIGF−1誘発シグナル形質導入を阻害する上での化合物効力、およびEGFおよびPDGF刺激に対する選択性を評価するために使用した。プロモセル(PromoCell)(Heidelberg、ドイツ国)から得たNHDF細胞を、完全線維芽細胞成長培地(PromoCell)中の5%CO2で湿潤化された大気中で、37℃で維持させた。アッセイについては、NHDFを、0.1%子ウシ血清アルブミン(BSA)を含有する血清不含培地中で、5000細胞/ウエルの密度で、384穴組織培養プレート(透明および平坦底のブラックプレート、Matrix Technologies,Inc.、米国ニューハンプシャー州ハドソン)に植え付け、5日間温置した。飢餓細胞を、1時間、所望の用量の化合物で処理し、この後さらに2時間、10nM IGF−1(Invitrogen Corp.、米国カリフォルニア州)、10nM EGF(Gibco BRL、米国)または1nM PDGF−B/B(Roche Diagnostics GmbH、ドイツ国)のいずれかで刺激した。この後、細胞を、室温で20分間、PBS/3.7%パラホルムアルデヒド中で固定し、PBSで二回洗浄し、15分間、PBS/0.3%トリトンX−100で透過された。この後、ウエルを、1時間、PBS/1%脱脂粉乳(Bio−Rad Laboratories、米国カリフォルニア州ヘラクレス)で飽和させ、この後1時間、37℃で、PBS/1%ミルク/0.3ツイーン20中での1/2000希釈で抗ホスホ−S6(Ser235/236)抗体(Cell Signaling Technology,米国マサチューセッツ州ビバリー、cat.番号2211)でプローブ探査した。この後、ウエルをPBSで二回洗浄し、1時間、37℃で、PBS/1%ミルク/0.3%ツイーン20+1マイクロg/mL DAPI(4,6−ジアミジノ−2−フェニルインドール)+1/500ヤギ抗ウサギCy5(登録商標)接合二次抗体(Amersham Biosciences、英国バッキンガムシャー、リトルチャーフォント(Litte Chalfont, Buckinghamshire,UK)と共に温置した。この後、ウエルをPBSで2回洗浄し、40マイクロL PBSを、免疫蛍光分析のために各ウエルに残した。DAPIおよびCy5(登録商標)チャネルでの蛍光画像を自動的に取得し、保存し、セロミックス アレースキャン(Cellomics Array Scan)(登録商標)IV装置(Cellomics、米国ピッツバーグ(Pittsburgh,USA))を使用して分析した。Cellomicsの細胞毒性アルゴリズムを、各細胞について10フィールド/ウエルで、ホスホ−S6(Cy5(登録商標)シグナルパラメーター:「ミーン リソ マス pH」)に連結した細胞質蛍光を定量するために使用し、最終的に平均集合値として表された。特に指示されない限り、試薬は、Sigma−Aldrich、米国ミズーリー州セントルイスから得た。
このインビトロキナーゼ阻害アッセイは、IGF−1Rについて記述されるものと同じである。原理、ダウエックス樹脂の調製、試験化合物の希釈、ロボット化アッセイおよびデータ分析は、厳密に同じであった。
ヘペス 50mM(pH7.0)
MnCl2 10mM
DTT 1mM
NaVO3 3uM
BSA 0.2mg/ml
酵素濃度=2.5nM
基質(LRRWSLGの4×繰返し)=8uM
ATP=10uM
33P−γ−ATP=1nM
ヒト大腸癌セルラインHCT−116を、10%FCS(EuroClone、イタリア国)2mM L−グルタミンおよび1%ペニシリン/ストレプトマイシンで補足したF12培地(Gibco)を使用して24ウエルプレート(Costar)中に5000細胞/cm2で植え付け、37℃、5%CO2および96%相対湿度で維持した。次の日、プレートを、DMSO中の10mM保存液から出発する適切な希釈の化合物5μlで二重に処理した。2つの未処理対照ウエルが各プレートに含まれた。処理の72時間後、培地を廃棄し、0.05%(w/v)トリプシン、0.02%(w/v)EDTA(Gibco)0.5mLを用いて、細胞を各ウエルから取り出した。サンプルを、イソトン(Coulter)9.5mLで希釈し、マルチスター3細胞計測計(Beckman Coulter)を使用して計数した。データを、対照ウエルの百分率として評価した。
CTRの百分率(%)=(処理済み−ブランク)/(対照−ブランク)
MicrosoftのエクセルS字型曲線フィッティングを使用して、LSW/データ分析によって、IC50値を計算した。
試験化合物を、100%DMSOで10mM溶液として調製し、96ウエルのプレートに分配する。
i)阻害率(%)研究については、1mM、100μMおよび10μMでの個々の希釈プレートを、100%DMSOで調製し、この後ddH2O、3%DMSOで3倍濃度(30、3および0.3μM)で希釈する。マルチメック96(Beckman)を化合物のために使用して、試験プレートにピペット採取する。
シリカゲル(メルクの等級9395、60A)でフラッシュクロマトグラフィーを行った。996ウォーターズPDA検出器を具備したウォーターズ2790HPLCシステム、およびエレクトロスプレー(ESI)イオン源を具備したマイクロマスモード.ZQ単一の四極子質量分析計を使用して、ウォーターズXテラRP18(4.6×50mm、3.5μm)カラム上でHPLCを行った。可動相Aは、酢酸アンモニウム5mM緩衝液(酢酸/アセトニトリル95:5でpH5.5)であり、可動相Bは、H2O/アセトニトリル(5:95)であった。8分で10から90%までのの勾配は、90%Bを2分保持する。220nmおよび254nmでのUV検出。流速1ml/分。注入容積10μl。完全走査、質量範囲、100から800amuまで。末梢電圧は2.5KVであった。源温度は、120℃であった;コーンは10Vであった。滞留時間(HPLCr.t.)は、220nmで、または254nmで数分で示される。質量は、m/z比で示される。
氷酢酸(40mL)および48%臭化水素酸(15mL)中の4−アセチルピリジン(10mL、90ミリモル)の攪拌溶液に、氷酢酸(10mL)中のブロミン(4.65mL、90ミリモル)を滴下で添加した。添加後、溶液を室温で一夜攪拌した。白色沈殿物を濾取し、無水エタノールで洗浄し、これにより微量のジブロモ誘導体を含有する白色固形物として標記化合物(22.2g、90%)を得て、これを次の段階にそのまま使用した。
−78℃まで冷却し、アルゴン下で無水THF(150mL)中の3−フルオロピリジン(14g、144.2ミリモル)の攪拌溶液に、n−ヘプタン中のリチウムジイソプロピルアミド(LDA)の2N溶液79.mL(158.6ミリモル)、THF、エチルベンゼンを、1時間で滴下でゆっくりと添加した。2.5時間攪拌した後、無水THF25ml中の冷却溶液(約0℃)を、ゆっくりと滴下し、反応混合液を−78℃で1.5時間攪拌した。溶液を−30℃に加温し、水700mL中の塩化アンモニウム(150g)の溶液を添加した。混合物を酢酸エチル(3×400mL)で抽出し、有機相を生理食塩水(4×200mL)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。濃縮後、油状物をn−ヘキサン(40mL)で結晶化させて、1−(3−フルオロピリジン−4−イル)エタノール15.6g(76%収率)を得た。トルエン(100mL)中の1−(3−フルオロピリジン−4−イル)エタノール(10g、70.3ミリモル)および市販の活性化MnO2(8g、92.1ミリモル)の混合物を、出発材料が消えるまで環流させた。冷却後、セライトの床で混合物を濾過し、ケークをトルエンで洗浄し、有機相を濃縮して、3−フルオロ−4−アセチルピリジン(6.9g、70%)を得て、これを次の段階で直接使用した。氷酢酸(14mL)および48%臭化水素酸(5.3mL)中の3−フルオロ−4−アセチルピリジン(5.3g、38.1ミリモル)の攪拌溶液に、氷酢酸(5.3mL)中の臭素(2mL、38ミリモル)をゆっくりと滴下で添加した。添加後、溶液を60℃で2.5時間攪拌した。添加の後、溶液を60℃で2.5時間攪拌した。この溶液を冷却し、酢酸エチル(70mL)を添加した。攪拌の30分後、混合物を濾取し、固形物を十分に酢酸エチルで洗浄し、乾燥させた。標記化合物を、82%収率で得た(9.4g)。
3,3−ジメトキシ−2−ブタノン(25g、189.2ミリモル)およびN,N−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール(22.5g、189.2ミリモル)の混合物を、30時間、110℃で攪拌し、この後蒸留(115℃、1mmHg)し、これにより黄色固形物として1−(ジメチルアミノ)−4,4−ジメトキシペント−1−エン−3−オン(27.3g、146ミリモル、77%)を得た。無水エタノール(400mL)中のナトリウム(3.48g、151.6ミリモル)の溶液に、固形塩酸グアニジン(14.5g、151.6ミリモル)を室温(rt)で添加して、白色懸濁液を得て、これに、無水エタノール(50mL)中の1−(ジメチルアミノ)−4,4−ジメトキシペント−1−エン−3−オン(28.4g、151.6ミリモル)の溶液を添加した。混合液を19時間環流させた。冷却後、沈殿物を濾過し、エタノールで、および多量の水で洗浄して、これにより白色固形物(8.56g)を得た。エタノール性溶液を乾固するまで濃縮し、沸騰酢酸エチル(1L)で取込み、加熱しながら濾過し、この後冷却して、第二の産物を得た。4−(1,1−ジメトキシエチル)ピリミジン−2−アミンの総量:17.66g、63.5%。蟻酸中の上記アミン(17.5g、95.5ミリモル)の溶液を室温で、6時間攪拌し、乾固するまで濃縮し、残渣をエタノール(50mL)で攪拌し、この後濾過して、1−(2−アミノピリミジン−4−イル)エタノン(9.2g、70%)を得た。氷酢酸(1mL)中の1−(2−アミノピリミジン−4−イル)エタノン(412mg、3ミリモル)の溶液に、48%水性HBr(0.3mL)、酢酸(0.4mL)中のブロミン(0.153mL)を添加し、得られた有機溶液を、室温で15時間攪拌した。酢酸エチル(15mL)での希釈後、沈殿物を濾過し、酢酸エチルで洗浄して、これにより白色固形物(580mg、65%)として標記化合物を得た。
DLアスパラギン酸(1g)を、ジオキサン/水1:1 20mL中に溶解し、トリエチルアミン4.15mLを添加した。混合液を0℃まで冷却し、重炭酸ジ−tert−ブチルを添加した。溶液を、一夜室温で静置した。懸濁液を濃縮し、酢酸エチルおよび水で抽出した。水性抽出物を5%水性NaHSO4で酸性化し、この後AcOEtで三回抽出した。有機抽出物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸散させて、標記化合物1.53gを供した。
DCM100mL中のN−(tert−ブトキシカルボニル)−DL−アスパラギン酸1g(4.29ミリモル)および1−(3−ジメチルアミノプロピル)−3−エチルカルボジイミドヒドロクロリド(EDCl)0.98g(5.15ミリモル)の混合物を一夜室温で攪拌した。溶液を、5%水性NaHSO4で三回抽出し、有機抽出物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸散させた。この方法で、標記化合物750mgを回収した。
0℃に冷却した無水THF15mL中の水素化ホウ素ナトリウム192mgの溶液に、無水THF15mLに溶解したDL−(2,5−ジオキソ−テトラヒドロ−フラン−3−イル)カルバミン酸tert−ブチルエステル1gを滴下で添加し、攪拌を4時間、0℃で維持した。
DMF/DCM1:5の混合液中のDL−3−tert−ブトキシカルボニルアミノ−4−ヒドロキシ−酪酸1gの溶液に、イミダゾール1.24gおよびtert−ブチルジメチルシリルクロリド1.7gを添加した。溶液を、一夜室温で攪拌させた。溶液を、5%水性NaHSO4で三回抽出し、水相をDCMで二回洗浄した。有機抽出物を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸散させて、標記化合物2.1gを供した。
[M+H]+=334;[M−H]−=332
ジオキサン/H2O(2:1、110mL)中のDL−2−アミノ−コハク酸4−メチルエステルの攪拌溶液に、Na2CO3(3.92g、0.037モル)を添加した。CO2の発生が終わると、さらにNa2CO3(3.92g、0.037モル)を添加し、続いてBoc2O(8.87g、0.04モル)を添加し、反応混合液を0℃で1時間(白色沈殿物が30分以内に形成される)、室温で一夜攪拌した。溶媒を除去し、残渣をEt2Oで洗浄した。水性溶液を、飽和水性NaHSO4で酸性化し、Et2Oで抽出した。有機相を無水Na2SO4上で乾燥させ、蒸散させて、白色固形物(6.7g、74%)として標記化合物を得た。
[M+H]+=248;[M−H]−=246
−10℃で乾燥THF(100mL)中のDL−2−tert−ブトキシカルボニルアミノ−コハク酸4−メチルエステル(5g、0.02モル)の溶液に、Et3N(3.1mL、0.022モル)を添加し、続いてエチルクロロホルメート(2.1mL、0.022モル)を添加した。10分後、NaBH4(2.27g、0.06モル)を添加し、この後MeOHを0℃で20分の期間をかけて混合液に滴下した。反応混合液を0℃で1時間攪拌し、室温で2時間攪拌し、この後飽和水性NaHSO4で中和した。有機溶媒を除去し、生成物をAcOEtで三回抽出した。
[M+H]+=234
CH2Cl2(10mL)中のDL−3−tert−ブトキシカルボニルアミノ−4−ヒドロキシ−酪酸メチルエステル(700mg、3ミリモル)の攪拌溶液に、Et3N(0.626mL、4.5ミリモル)およびメタンスルホニルクロリド(0.350mL、4.5ミリモル)を0℃で添加した。反応混合物を0℃で30分間、室温で2時間攪拌した。有機相を生理食塩水、飽和水性NaHSO4、飽和水性NaHCO3および生理食塩水で洗浄し、乾燥させ、溶媒を除去して対応のメシレート(712mg、76%)を得た。
DL−4−アジド−3−tert−ブトキシカルボニルアミノ−酪酸メチルエステル(450mg、1.74ミリモル)をTHF(12mL)に溶解し、LiOH(393mg)の水性溶液を添加することによって加水分解した。
DCM70mL中のDL−3−tert−ブトキシカルボニルアミノ−4−(tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ)酪酸2gの溶液に、メルドラムの酸1gおよび4−ジメチルアミノピリジン1.1gを添加した。溶液を0℃に冷却し、DCM30mL中に溶解したEDCl 1.37gを滴下で添加した。3時間攪拌を維持し、この後、溶液を5%水性NaHSO4で三回抽出した。有機抽出物を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸散させた。固形物を、酢酸エチル200mLに溶解し、4時間環流し、この後乾固するまで濃縮した。シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーにより原料生成物を精製し、これにより油状物として標記化合物510mgを供した。
1H NMR(DMSO−d6/400MHz)δppm:−0.09−−0.07(6H),0.76−0.92(9H),1.44(9H),2,52(m,1H),2.81(m,1H),3.3(2H),3.7(m,2H),4.27(m,1H)。
Boc−O−ベンジル−L−ベータ−ホモセリンから出発して、
1H NMR(DMSO−d6/400MHz)δppm:2.4(dd,1H),2.7(dd,1H),3.01−3.17(dd,2H),3.48(s,2H),3.77(m,1H),4.46(s,2H),7.28(m,2H),7.33(m,3H),8.06(bs,1H)。
[M+H]+=234
Boc−β−LYS(Z)−OHジシクロヘキシルアミンから出発して、
ESI(+)MS:m/z 405(MH+)
DL−4−アジド−3−tert−ブトキシカルボニルアミノ酪酸
1H NMR(DMSO−d6/400MHz)δppm:2.3(m,2H),3.11(m,3H),3.85(m,2H),9.5(s,1H)。
窒素雰囲気下で−20℃に冷却した無水THF(100mL)中のtert−ブチル2,4−ジオキソピペリジン−1−カルボキシレート(3.84g、18ミリモル)の溶液に、THF(54mL)中の1M LiHMDSを滴下で添加した。攪拌下で20分後、(3−ブロモ−プロポキシメチル)−ベンゼン(54ミリモル)を添加し、溶液を、−20℃で2時間攪拌した。反応混合液を5%水性KHSO4に注ぎ、DCMで二回抽出した。収集した有機相を500mLに濃縮し、TFA50mLを添加した。得られる溶液を室温で1時間攪拌した。蒸散後、カラムクロマトグラフィー(ヘキサン/EtOAc1:2)によって、残渣を精製して、標記化合物3.85g(14.7ミリモル、82%)を得た。
ESI(+)MS:m/z262(MH+)。
1H NMR(44MHz,DMSO−D6)δppm1.60(m,1H),1.97(m,1H),2.59(m,1H),3.15(m,1H),3.40(m,1H),3.51(m,2H),4.46(s,2H),7.33(m,6H),8.06(m,2H)。
ESI(+)MS:m/z248(MH*)。
1,1−トリフルオロ−3−ヨード−プロパンから、
ESI(+)MS:/m/z 210(MH+)
ESI(+)MS:/m/z 190(MH+)
1−フルオロ−2−ブロモ−エタンから、
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.65(m,1H),2.07(m,1H),2.63(m,1H),3.15−3.43(m,4H),4.48(m,1H),4.52(m,1H),8.08(s,1H)
ESI(+)MS:m/z160(MH+)。
無水EtOH(40mL)中の2−ブロモ−1−ピリジン−4−イルエタノンヒドロブロミド(0.76g、2.59ミリモル)およびDL−2−(3−ベンジルオキシカルボニルアミノ−プロピル)−4,6−ジオキソ−ピペリジン−1−カルボン酸tert−ブチルエステル(1.05g、2.59ミリモル)の懸濁液に、酢酸アンモニウム(0.81g、10.8ミリモル)を添加し、深赤色溶液を、室温で18時間攪拌した。溶媒除去の後、残渣を酢酸エチル/完全エタノール15:1(50mL)で処理し、沈殿物を濾取し、得られた溶液をフラッスシリカゲルにかけ、酢酸エチル/完全エタノール15:1で溶出した。この方法で、黄色味を帯びた固形物(0.4g、30%収率)として標記化合物を得た。
ESI(+)MS:m/z505(MH+)
実施例19でと類似の方法で作用させて、実施例21から32で以下の化合物も得た。
1H NMR(DMSO−d6/400MHz)δppm:2.91(dd,1H),3.01(dd,1H),3.51(m,2H),3.87(m,1H),4.53(s,2H),6.96(s,br,1H),7.01(s,1H),7.34(m,5H),7.61(d,2H),8.49(d,2H),11.91(bs,1H)。
[M+H]+=334
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.92(m,1H),2.19(m,1H),3.10(m,1H),3.26(m,1H),3.53(m,1H),4.54(m,1H),4.63(m,1H),7.01(s,1H),7.07(s,1H),7.65(d,2H),8.49(d,2H),11.80(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z260(MH+)。
最初に溶出されたピーク) 1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm2.05(m,1H),2.24(m,1H),3.15(m,1H),3.30(m,1H),3.60(m,1H),4.56(m,1H),4.68(m,1H),7.31(s,1H),7.59(s,1H),8.26(d,2H),8.72(d,2H),12.53(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z260(MH+)。
第二に溶出されたピーク) 1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm2.08(m,1H),2.24(m,1H),3.15(m,1H),3.30(m,1H),3.60(m,1H),4.56(m,1H),4.68(m,1H),7.31(s,1H),7.59(s,1H),8.26(d,2H),8.72(d,2H),12.53(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z260(MH+)。
HPLC r.t.6.76[M+H]+=458;[M−H]−=456
1H NMR(DMSO−d6/400MHz)δppm:2.87(dd,1H),3.02(dd,1H),3.50(dd,1H),3.57(dd,1H),3.83(m,1H),7.02(s,1H),7.20(s,1H),7.62(d,2H),8.49(d,2H),11.95(bs,1H)。
[M+H]+=269
類似の方法で作用させ、1−(2−アミノピリミジン−4−イル)−2−ブロモエタノンヒドロブロミドから出発することによって、以下の化合物も得た。
1H NMR(DMSO−d6/400MHz)δppm:2.88(dd,1H),2.97(dd,1H),3.46(m,2H),3.82(m,1H),4.49(s,2H),6.28(bs,2H),6.87(d,1H),6.94(bs,1H),6.99(s,1H),7.32(m,5H),8.13(d,1H),11.74(bs,1H)。
[M+H]+=350
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.70(m,4H),2.92(m,1H),3.19(m,1H),3.42(m,2H),3.49(m,1H),4.43(s,2H),6.29(s,2H),6.90(d,1H),6.98(s,1H),7,01(s,1H),7.20−7.35(m,5H),8.13(d,1H),11.62(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z378(MH+)。
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.80(m,1H),2.07(m,1H),3.07(m,1H),3.24(m,1H),3.47(m,1H),3.55(m,2H),4.50(m,2H),6.30(s,2H),6.91(d,1H),7.01(s,1H),7.03(s,1H),7.25−7.35(m,5H),8.14(d,1H),11.60(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z364(MH+)。
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.92(m,1H),2.15(m,1H),3.11(m,1H),3.32(m,1H),3.52(dd,1H),4.52(t,1H),4.64(t,1H),6.33(s,2H),6.94(d,1H),7.04(s,1H),7.07(s,1H),8.17(d,1H),11.68(s,1H)。
第一の溶出ピーク)ee99%
第二の溶出ピーク)ee96%
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.81(m,1H),2.01(m,1H),2.27(m,1H),2.41(m,1H),3.12(m,1H),3.42(m,2H),7.30(s,1H),7.35(d,1H),7.51(s,1H),7.97(s,2H),8.24(d,1H),12.33(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z326(MH+)。
第一の溶出ピーク)ee99%
第二の溶出ピーク)ee98%
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm2.32(m,1H),2.40(m,1H),3.11(m,1H),3.58(m,2H),4.55(m,1H),7.29(s,1H),7.34(d,1H),7.51(s,1H),8.01(s,2H),8.24(d,1H),12.34(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z306(MH+)。
DL−6−(3−ベンジルオキシカルボニルアミノ−プロピル)−4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−1,4,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−5−カルボン酸tert−ブチルエステル(0.4g)を、シクロヘキサン(10mL)および完全EtOH(20mL)に溶解し、炭素(0.2g)上の10%Pdを添加し、混合物を1.5時間環流させた。セライトを通して濾過し、および減圧下での溶媒蒸散の後、化合物を、2.5時間、室温で、ジオキサン(20mL)中の4N HClで処理した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチルで処理した。沈殿物を濾過し、少量の酢酸エチルで洗浄し乾燥させた。残渣をジオキサン中の4M HClに溶解した。溶液を濃縮し、ジヒドロクリリドとして標記化合物を黄色味がかった固形物として回収した(0.29g、定量)
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.57−1.71(m,4H)2.71−2.77(m,1H)2.78−2.84(m,2H)3.05−3.11(m,1H)3.67−3.78(m,1H)7.35(d,J=1.59Hz,1H)7.57(d,J=2.32Hz,1H)7.85(s,3H)8.23(d,J=7.07Hz,2H)8.70(d,J=7.07Hz,2H)12.94(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z271(MH+)。
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.40(m,1H),1.54(m,2H),1.65(m,1H),2.91(m,1H),3.18(m,1H),3.40(m,2H),3.48(m,1H),4.44(t,1H),6.30(s,2H),6.91(d,1H),6.99(s,1H),7.02(s,1H),8.13(d,1H),11.62(s,1H)。
ESI(+)MS:288m/z(MH+)。
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm1.69(m,1H),1.84(m,1H),3.05(m,1H),3.21(m,1H),3.51(m,1H,4.79(t,2H),6.31(s,2H),6.92(d,1H),7.01(s,1H),7.03(s,1H),8.15(d,1H),11.60(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z274(MH+)。
乾燥DMF(2mL)中の(R)−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−6−ベンジルオキシメチル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン(73mg、0.21ミリモル)の攪拌混合物に、18−クラウン−6エーテル(110.5mg、0.42ミリモル)、K2CO3(115.5mg、0.84ミリモル)およびCF3CH2OSO2CF3(0.21ミリモル)を添加した。反応混合物を50℃で7時間加熱し、この後水で処理し、AcOEtで抽出した。有機相を無水Na2SO4上で乾燥させ、蒸散させて、粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー(溶出剤:DCM/MeOH95:5)によって精製して標記化合物64mgを供した。
[M+H]+=432
4M HCl 5mL中のDL−6−(tert−ブチル−ジメチル−シラニルオキシメチル)−4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−1,4,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−5−カルボン酸tert−ブチルエステル50mgの溶液を、室温で4時間攪拌した。溶液を濃縮し、標記化合物を回収した。
アルゴン下および0℃で冷却しつつ、無水DMF(3mL)中のDL−6−(3−アミノ−プロピル)−4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−5−カルボン酸tert−ブチルエステル(0.1g、0.296ミリモル)の溶液に、トリフルオロ酢酸(0.25mL、3.2ミリモル)および新たに蒸留したベンズアルデヒド(0.055mL、0.539ミリモル)を添加した。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(0.17g、0.81ミリモル)を添加し、透明な黄色法益を室温で60時間攪拌した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、乾燥させ、フラッシュシリカゲルにかけて、最初にDCM/メタノール15:1で溶出して、DL−6−(3−ジベンジルアミノ−プロピル)−4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−1,4,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−5−カルボン酸tert−ブチルエステル(0.035g、0.063ミリモル、21%)を収集し、この後DCM/メタノール/30%水性アンモニア15:10:0.2で、DL−6−(3−ベンジルアミノ−プロピル)−4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−1,4,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−5−カルボン酸tert−ブチルエステル(0.03g、0.065ミリモル、22%)を収集した。2つの化合物を、メタノール(2mL)に別個に溶解し、室温で2.5時間、ジオキサン(2mL)中の4N HClで処理した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチルで処理した。沈殿物を濾過し、少量の酢酸エチルで洗浄し、乾燥させた。得られたのは、ジヒドロクロリドとしてDL−6−(3−ジベンジルアミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、およびジヒドロクロリドとしてDL−6−(3−ジベンジルアミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オンであった。
ESI(+)MS:m/z451(MH+)。
ESI(+)MS:m/z361(MH+)。
メタノール(3mL)中のDL−6−(3−アミノ−プロピル)−4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−1,4,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−5−カルボン酸tert−ブチルエステル(0.1g、0.296ミリモル)の溶液に、2−メチル−プロピオンアルデヒド(0.023mL、0.25ミリモル)およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム(0.03g、0.49ミリモル)を添加し、溶液を室温で4時間攪拌した。溶媒を除去し、水を添加し、粗生成物を酢酸エチルで二回抽出し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。フラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製し、これによりDCM/メタノール15:2で溶出し、この後DCM/メタノール/30%水性アンモニア15:2:0.1で溶出した。保護された化合物(0.045g、0.097ミリモル、40%)をメタノール(2.5mL)に溶解し、室温で2.5時間、ジオキサン(1mL)中の4N HClで処理した。溶液を濃縮し、残渣を酢酸エチルで処理した。ジヒドロクロリドとしての標記化合物の黄色沈殿物を濾過し、少量の酢酸エチルで洗浄し、乾燥させた。
ESI(+)MS:m/z327(MH+)。
1H NMR(400MHz,DMSO−D6)δppm0.97−1.04(m,12H)2.48−2.55(m,14H)3.70−3.80(m,1H)7.38(s,1H)7.54−7.57(m,1H)8.22(d,J=6.58Hz,2H)8.70(d,J=6.95Hz,2H)12.93(s,1H)。
ESI(+)MS:m/z383(MH+)。
THF(1M、0.15ミリモル、0.150mL)中のMe3Pの溶液を、室温でTHF(1mL)およびNaOH(1M、0.165ミリモル、0.165mL)中の6−アジドメチル−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン(0.075ミリモル、20mg)の攪拌混合物に添加した。この後、THF/H2O(1mL)中のBoc2O(0.165ミリモル、36mg)の溶液を添加した。2日後、リン酸緩衝溶液(pH7)の添加により、混合物を急冷した。CH2Cl2を用いた抽出、有機抽出物の乾燥、溶媒の除去およびCH2Cl2/ヘキサンを用いた滴定で、標記化合物16mgを得た。
[M+H]+=343
CH2Cl2(1mL)中の(4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピロロ[3,2−c]ピリジン−6−イルメチル)−カルバミン酸tert−ブチルエステル(0.046ミリモル、16mg)の攪拌混合物に、TFA(1mL)を添加した。2時間後、溶媒を除去して、標記化合物(14mg)を得た。
[M+N]+=471
ここで上に記述されるプロセスにより、以下の化合物を製造した。
6−[(ジイソプロピルアミノ)−メチル]−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
6−(3−アミノ−プロピル)−2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−7−(3,3,3−トリフルオロ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
7−(2−フルオロ−エチル)−2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
6−ベンジルオキシメチル−2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−1−エチル−7−(2−フルオロ−エチル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(2−フルオロ−エチル)−1−(2,2,2−トリフルオロ−エチル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−1−エチル−7−(3,3,3−トリフルオロ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−1−(2,2,2−トリフルオロ−エチル)−7−(3,3,3−トリフルオロ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;および
2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−6−アジドメチル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン。
Claims (3)
- 式(I)
Aは、ピリジン−4−イル、3−フルオロ−ピリジン−4−イル、および2−アミノ−ピリミジン−4−イルからなる群から選択され、
R1は、水素、ハロゲンおよび(C1−C6)アルキルからなる群から選択され、
R2は、水素、(C1−C6)アルキル、(C 2 −C6)アルケニル、(C 2 −C6)アルキニル、(C3−C6)シクロアルキル、(C1−C6)ハロアルキル、(C1−C6)ポリフッ化アルキル、ヘテロサイクリル、アリール、ヘテロアリール、(C3−C6)シクロアルキル−(C1−C6)アルキル、ヘテロサイクリル−(C1−C6)アルキル、アリール−(C1−C6)アルキル、ヘテロアリール−(C1−C6)アルキル、(C1−C8)ヒドロキシアルキル、(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、アリールオキシ−(C1−C8)アルキル、ヘテロアリールオキシ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)アミノアルキル、(C1−C8)アルキルアミノ−(C1−C6)アルキル、(C1−C8)ジアルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、カルバモイル−(C1−C8)アルキル、およびアルコキシカルボニルからなる群から選択され、上記アリール、ヘテロアリール、ヘテロサイクリル、アリールオキシおよびヘテロアリールオキシ部分の各々は、未置換であるか、または1個以上の置換基によって置換されていてよく、各置換基は、アルキル、アリール、−OCF3、−OC(O)アルキル、−OC(O)アリール、−CF3、ヘテロアリール、アラルキル、アルキルアリール、ヘテロアラルキル、アルキルヘテロアリール、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アシル、アリール、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ニトロ、シアノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、アラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、ヘテロアリールスルフィニル、アルキルチオ、アリールチオ、ヘテロアリールチオ、アラルキルチオ、ヘテロアラルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクレニル、−NH(アルキル)、−NH(シクロアルキル)、および−N(アルキル)2からなる群から独立に選択され、
R3、R4、R5およびR6は各々水素、(C1−C6)ハロアルキル、(C1−C6)ポリフッ化アルキル、(C 2 −C6)ハロアルケニル、(C 2 −C6)ポリフッ化アルケニル、(C1−C8)ヒドロキシアルキル、(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、アリールオキシ−(C1−C8)アルキル、ヘテロアリールオキシ−(C1−C8)アルキル、アリール−(C1−C8)アルコキシ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)アジドアルキル基、(C1−C8)アミノアルキル、(C1−C8)アルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、(C1−C8)ジアルキルアミノ−(C1−C8)アルキル、および(C1−C8)アルキル−OC(O)−アミノ−(C1−C8)アルキルからなる群から独立に選択されるが、ただしR3、R4、R5またはR6の内の少なくとも1つは水素と異なる)
によって表される化合物または医薬的に許容できる塩またはこの溶媒和物。 - R3およびR4の両方が水素原子であるか、
R5およびR6の両方が水素原子であるか、
R1、R4、R5およびR6が水素原子であるか、または
R1、R3、R4およびR6が水素原子である請求項1に記載の化合物。 - (R)−6−ベンジルオキシメチル−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−7−(2−フルオロ−エチル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
(R)および(S)−7−(2−フルオロ−エチル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オンヒドロクロリド、
6−アジドメチル−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
(R)−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−6−ベンジルオキシメチル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(2−ベンジルオキシプロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(2−フルオロ−エチル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(3,3,3−トリフルオロ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オンヒドロクロリド、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(3,3−ジフルオロ−アリル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オンヒドロクロリド、
DL−6−(3−アミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(3−ヒドロキシ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
(R)−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−6−ベンジルオキシメチル−1−(2,2,2−トリフルオロ−エチル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−6−ヒドロキシメチル−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オンヒドロクロリド、
DL−6−(3−ベンジルアミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、および
DL−6−(3−ジベンジルアミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−6−(3−イソブチルアミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−6−(3−ジイソブチルアミノ−プロピル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
(4−オキソ−2−ピリジン−4−イル−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピロロ[3,2−c]ピリジン−6−イルメチル)−カルバミン酸tert−ブチルエステル、
6−アミノメチル−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オンビス−トリフルオロアセテート、
6−(イソプロピルアミノ−メチル)−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
6−[(ジイソプロピルアミノ)−メチル]−2−ピリジン−4−イル−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
6−(3−アミノ−プロピル)−2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−7−(3,3,3−トリフルオロ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
7−(2−フルオロ−エチル)−2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン;
5−(2−ベンジルオキシ−エチル)−ピペリジン−2,4−ジオン、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(2−ヒドロキシ−エチル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
DL−2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−7−(2−ヒドロキシ−プロピル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、
6−ベンジルオキシメチル−2−(3−フルオロ−ピリジン−4−イル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン、および
2−(2−アミノ−ピリミジン−4−イル)−1−エチル−7−(2−フルオロ−エチル)−1,5,6,7−テトラヒドロ−ピロロ[3,2−c]ピリジン−4−オン
からなる群から選択される請求項1に記載の化合物。
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