JP5135523B2 - 肝機能改善剤 - Google Patents
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Description
オルニプラビンを有効成分として含む肝機能改善剤、
肝機能改善剤の製造のためのオルニプラビンの使用、及び
オルニプラビンを投与することを含む、肝機能改善方法
に関する。
慢性肝炎モデルマウスにおける肝機能改善効果
(1)慢性肝炎モデルマウスの作製
慢性肝炎マウスの作製はVogtenらの方法(J. Mathys Vogten et al, Int J Colorectal Dis (2004) 19:387-394)を改良した方法により行った。
約30gのICRマウス(6週齢、雄、三協ラボサービス)を固形飼料(ラボMRストック)および蒸留水を自由に摂取させて5日間予備飼育を行った後に実験に供した。動物の飼育は22℃±2℃、湿度60±5%、光周期12時間サイクルの条件の動物飼育室で行った。
グルコース20g、ペプトン5g、酵母エキス3g、リン酸二カリウム3g、硫酸マグネシウム7水和物1gを1リットルの精製水に溶解し、塩酸あるいは水酸化ナトリウムでpHを5.5に調整して調製したA培地を、500ml容三角フラスコに入れ、121℃、15分間オートクレーブ滅菌した。これにスタキボトリス・ミクロスポラIFO30018株を接種して、25℃で4日間ロータリーシェーカーで180rpmにて培養した。この培養液を種培養液として、同様に調製した100mlのA培地を含む500ml容三角フラスコに1ml接種した。この接種の際に、L−オルニチンを1mg/mlとなるように添加した。これを25℃で4日間ロータリーシェーカーで180rpmにて培養した。この培養濾液中には、オルニプラビン(SMTP−7)が305μg/ml蓄積した。培養濾液3リットルのpHを3に塩酸で調整後、メチルエチルケトン2.7リットルを加えオルニプラビンを抽出した。この溶媒抽出液を濃縮乾固して1.9gの乾固物を得た。乾固物をメタノールに溶解し、LiChrolut RP-18固相抽出カラムに通した後に、逆相HPLCカラムを用いたクロマトグラフィーに供した。50mM酢酸アンモニウムを含む80%水性メタノールを用いて40℃で25ml/分の流速でカラムを展開し、保持時間34〜39分に溶出された画分から、431mgのオルニプラビンを得た。
6週間の四塩化炭素投与の後、統計的に同質となるようにオルニプラビン投与群および対照群の2群に分けた(オルニプラビン投与群:7匹、対照群:6匹)。オルニプラビン10mg/kgを腹腔内に連日投与した。対照群については生理食塩水2ml/kgを腹腔内に連日投与した。この操作を14日間行った。
得られた血漿サンプルについて、AST(アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、GOT)、ALT(アラニンアミノトランスフェラーゼ、GPT)及びChE(コリンエステラーゼ)量を測定した(HITACHI自動分析装置7180)。
Claims (2)
- オルニプラビンを有効成分として含む肝機能改善剤。
- 肝機能改善剤の製造のためのオルニプラビンの使用。
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