JP5041403B2

JP5041403B2 - Caffeine analogue

Info

Publication number: JP5041403B2
Application number: JP2007024575A
Authority: JP
Inventors: 淳一小林; 玄明石山; 賢吾大下; 裕康中田
Original assignee: Hokkaido University NUC; Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
Current assignee: Hokkaido University NUC; Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
Priority date: 2007-02-02
Filing date: 2007-02-02
Publication date: 2012-10-03
Anticipated expiration: 2027-02-02
Also published as: JP2008189577A; WO2008093825A1

Description

本発明は、本発明はカフェイン類縁体に関する。詳細には、アデノシンレセプターに作用するカフェイン類縁体に関する。 The present invention relates to caffeine analogs. Specifically, it relates to caffeine analogs that act on adenosine receptors.

生体内において、アデノシンはアデノシンレセプターに特異的に作用して、血圧、呼吸機能、胃腸機能、尿量および運動性能の調整といった種々の生理活性を示す。このような生理活性を示すことから、アデノシンレセプターの発現は、大脳や心臓の虚血、睡眠障害、炎症、癌等の疾患に関与していると考えられている。 In vivo, adenosine specifically acts on adenosine receptors and exhibits various physiological activities such as regulation of blood pressure, respiratory function, gastrointestinal function, urine volume and exercise performance. Since it exhibits such physiological activity, the expression of adenosine receptor is considered to be involved in diseases such as cerebral and cardiac ischemia, sleep disorder, inflammation, and cancer.

しかしながら、アデノシンそのものは、内因性の物質であるので、それ自体を投与しても、生体内で分解されてしまう。このため、アデノシンレセプターを継続的に発現させ、作用を持続させるためには、外因性の物質を投与する必要がある。また、アデノシンレセプターには、４つのサブタイプ（Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_２Ｂ、Ａ_３）が存在し、それぞれが特定の化合物と作用して特有の生理機能を示す（非特許文献１）。このことから、アデノシンレセプターの生理機能を調べたり、種々の疾患の治療に利用するためには、アデノシンレセプターのサブタイプそれぞれに特異的に作用する化合物を合成する必要がある。 However, since adenosine itself is an endogenous substance, it is degraded in vivo even if it is administered. For this reason, it is necessary to administer an exogenous substance in order to continuously express the adenosine receptor and maintain the action. In addition, there are four subtypes (A ₁ , A _2A , A _2B , A ₃ ) in the adenosine receptor, each acting with a specific compound and exhibiting a specific physiological function (Non-patent Document 1). Therefore, in order to examine the physiological functions of adenosine receptors and to use them for the treatment of various diseases, it is necessary to synthesize compounds that specifically act on each of the subtypes of adenosine receptors.

アデノシンレセプターに作用する外因性の物質としては、古くからカフェインが知られている（非特許文献２）。カフェインは、アデノシンレセプターのサブタイプ（Ａ_１、Ａ_２Ａ）のアンタゴニストであり、筋小胞体（sarcoplasmic reticulum ＳＲ）からカルシウムイオンの遊離を促進したり、ホスホジエステラーゼを阻害したりする。これにより、カフェインは、血圧、呼吸機能、胃腸機能、尿量および運動性能の調節といった種々の生理活性を示す。また、カフェイン以外のアデノシンレセプターのアンタゴニスト、及びアゴニストも開発されている（非特許文献３、特許文献１〜５）。
特開平７−１１８２３７号公報特表２００６−５１５３１６号公報特表２００６−５１６２７０号公報特表２００６−５１８３９０号公報特表２００６−５２７２０２号公報 Olah MEら、Annu Rev Pharmacol Toxicol. 1995年、第35巻、第581-606頁 Fredholm BBら、Pharmacol Rev、1999年、第51巻第1号、第83-133頁 Jacobson KAら、Nat Rev Drug Discov、2006年、第5巻第3号、第247-64頁 As an exogenous substance that acts on the adenosine receptor, caffeine has been known for a long time (Non-patent Document 2). Caffeine is an adenosine receptor subtype (A ₁ , A _2A ) antagonist that promotes calcium ion release from sarcoplasmic reticulum SR and inhibits phosphodiesterase. As a result, caffeine exhibits various physiological activities such as blood pressure, respiratory function, gastrointestinal function, urine volume and exercise performance. In addition, antagonists and agonists of adenosine receptors other than caffeine have been developed (Non-patent Document 3, Patent Documents 1 to 5).
JP 7-118237 A JP-T-2006-515316 JP-T-2006-516270 JP-T-2006-518390 JP-T-2006-527202 Olah ME et al., Annu Rev Pharmacol Toxicol. 1995, 35, 581-606 Fredholm BB et al., Pharmacol Rev, 1999, 51, 1, 83-133 Jacobson KA et al., Nat Rev Drug Discov, 2006, Vol. 5, No. 3, pp. 247-64

アデノシンレセプターのサブタイプＡ_１は（以下、アデノシンレセプターのサブタイプＡ_Ｘを「アデノシンレセプターＡ_Ｘ」と省略する場合がある。）、細胞内カルシウムイオン濃度を上昇させ細胞を興奮させるのに働き、アデノシンレセプターＡ_２は逆に興奮を抑制するのに働くことが判明している。しかし、アデノシンレセプターＡ_３については未解明な部分が多く、アデノシンレセプターＡ_３に作用する新規物質を開発し、アデノシンレセプターＡ_３の働きについて解明することが求められている。また、他のサブタイプについても、アデノシンレセプターを発現させるような新規な化合物が求められている。 Adenosine receptor subtype A ₁ (hereinafter, adenosine receptor subtype A _X may be abbreviated as “adenosine receptor A _X ”) works to increase intracellular calcium ion concentration and excite cells, adenosine receptor a ₂ have been found to act to suppress excitement reversed. However, unexplained parts about adenosine receptor A ₃ is large and develop new agents that act on the adenosine receptor A _3, it is required to elucidate the action of adenosine receptor A _3. Further, for other subtypes, there is a demand for novel compounds that can express adenosine receptors.

そこで、本発明は、アデノシンレセプターに作用する新規な化合物を提供することを課題とする。 Then, this invention makes it a subject to provide the novel compound which acts on an adenosine receptor.

本発明者らは、アデノシンレセプターを発現させるようなカフェイン類縁体の構造について鋭意検討した結果、以下の発明を完成するに至った。 As a result of intensive studies on the structure of a caffeine analog that expresses an adenosine receptor, the present inventors have completed the following invention.

第１の本発明は、下記一般式（１）で示されるカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩である。 The first aspect of the present invention is a caffeine analog represented by the following general formula (1) and a pharmacologically acceptable salt.

式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基である。炭素数１から３のアルキル基としては、直鎖または分岐鎖のいずれでもよく、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基を挙げることができる。この中でも、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいはメチル基であることが好ましく、さらに、Ｒ^１およびＲ^２は、メチル基であることがより好ましい。 In formula (1), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms. The alkyl group having 1 to 3 carbon atoms may be linear or branched, and examples thereof include a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group. Among these, R ¹ , R ² and R ³ are each preferably a hydrogen atom or a methyl group, and R ¹ and R ² are more preferably a methyl group.

第２の本発明は、下記一般式（２）で示されるカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩である。 The second aspect of the present invention is a caffeine analog represented by the following general formula (2) and a pharmacologically acceptable salt.

式（２）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、式（１）のものと同様である。 In formula (2), R ¹ , R ² and R ³ are the same as those in formula (1).

第１および第２の本発明のカフェイン類縁体は、アデノシンレセプターに作用するという性質を有している。これにより、アデノシンレセプターが関与していると考えられる、大脳や心臓の虚血、睡眠障害、炎症および癌を治療するための有効成分として使用されることが考えられる。また、第１および第２の本発明のカフェイン類縁体は、アデノシンレセプターＡ_３に作用するという性質を有している点で、特徴的である。 The first and second caffeine analogs of the present invention have the property of acting on adenosine receptors. Thus, it may be used as an active ingredient for treating cerebral and cardiac ischemia, sleep disorders, inflammation, and cancer, which are thought to involve an adenosine receptor. Further, caffeine analogues of the first and second invention, in that it has the property of acting on the adenosine receptor A _3, which is a characteristic.

第１および第２の本発明において、薬理学的に許容される塩とは、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、りん酸塩、臭化水素酸塩などの無機酸塩、ぎ酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩などの有機酸塩を挙げることができる。また、化合物によっては水和物を形成するが、このような水和物についても本発明の範囲に含有される。 In the first and second inventions, the pharmacologically acceptable salt is, for example, an inorganic acid salt such as hydrochloride, sulfate, nitrate, phosphate, hydrobromide, formate, Examples thereof include organic acid salts such as acetate, trifluoroacetate, tartrate, maleate, fumarate, methanesulfonate, benzenesulfonate, and toluenesulfonate. Moreover, although a hydrate is formed depending on a compound, such a hydrate is also contained in the scope of the present invention.

第３の本発明は、下記一般式（３）で示される化合物と、 The third aspect of the present invention is a compound represented by the following general formula (3):

下記一般式（４）で示される化合物とを、

A compound represented by the following general formula (4):

触媒の存在下においてカップリング反応させ、
下記一般式（５）で示される化合物を製造する工程、

A coupling reaction in the presence of a catalyst,
A step of producing a compound represented by the following general formula (5):

および、一般式（５）で示される化合物を光環化反応させる工程、
を備えている、第１および第２の本発明のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩の製造方法である。

And a step of photocyclizing the compound represented by the general formula (5),
The caffeine analogs of the first and second inventions, and a method for producing a pharmacologically acceptable salt.

上記式（３）および（５）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、式（１）におけるものと同様である。また、式（４）中、Ｘ^１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基であり、好ましくはＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｆであり、より好ましくはＣｌ、Ｂｒである。なお、ＯＴｆとは、トリフルオロメタンスルホン酸基である（以下、同様。）。 In the above formulas (3) and (5), R ¹ , R ² and R ³ are the same as those in formula (1). In formula (4), X ¹ is a substituent selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf, preferably Cl, Br, I, OTf, more preferably Cl, Br. It is. Note that OTf is a trifluoromethanesulfonic acid group (hereinafter the same).

第４の本発明は、下記一般式（６）で示される化合物と、 The fourth aspect of the present invention is a compound represented by the following general formula (6):

下記一般式（７）で示される化合物とを、

A compound represented by the following general formula (7):

触媒の存在下においてカップリング反応させ、
下記一般式（８）で示される化合物を製造する工程、

A coupling reaction in the presence of a catalyst,
A step of producing a compound represented by the following general formula (8):

および、一般式（８）で示される化合物を分子内環化反応させる工程、
を備えている、第１の本発明のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩の製造方法である。

And a step of intramolecular cyclization reaction of the compound represented by the general formula (8),
A caffeine analog of the first invention, and a method for producing a pharmacologically acceptable salt.

式（６）および式（８）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、式（１）におけるものと同様である。また、式（６）、式（７）および式（８）におけるＸ^２およびＸ^３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基であり、好ましくはＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｆ、より好ましくはＣｌ、Ｂｒである。また、式（７）中のＲ^４は、炭素数１から５のアルキル基であり、例えば、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチルを上げることができるが、この中でもｎ−ブチルが好ましい。また、当該カップリング反応において使用する触媒としては、パラジウム触媒を挙げることができる。 In formula (6) and formula (8), R ¹ , R ² and R ³ are the same as those in formula (1). X ² and X ³ in formula (6), formula (7) and formula (8) are substituents selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf, and preferably Cl, Br, I and OTf, more preferably Cl and Br. R ⁴ in formula (7) is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, and examples thereof include n-propyl, n-butyl, and n-pentyl. Among these, n-butyl is preferable. . Moreover, a palladium catalyst can be mentioned as a catalyst used in the said coupling reaction.

第５の本発明は、第１および第２の本発明のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、アデノシンレセプターへの作用が有効な疾患用の試薬又は医薬組成物である。第５の本発明の試薬又は医薬組成物は、アデノシンレセプターＡ_３への作用が有効な疾患用に使用することができる点で特徴的である。 The fifth aspect of the present invention is a reagent for a disease effective for an action on an adenosine receptor, comprising the caffeine analogs of the first and second aspects of the present invention and a pharmacologically acceptable salt as active ingredients. It is a pharmaceutical composition. Reagent or pharmaceutical composition of the present invention of the fifth is characteristic in that it can act on the adenosine receptor A ₃ are used for effective disease.

本発明のカフェイン類縁体および薬理学的に許容される塩は、アデノシンレセプターに作用する従来にはない新規な化合物である。 The caffeine analogs and pharmacologically acceptable salts of the present invention are unconventional novel compounds that act on adenosine receptors.

以下本発明を図面に示す実施形態に基づき説明する。 Hereinafter, the present invention will be described based on embodiments shown in the drawings.

＜カフェイン類縁体＞
第１形態のカフェイン類縁体は、下記一般式（１）で表される化合物である。 <Caffeine analogs>
The caffeine analog of the first form is a compound represented by the following general formula (1).

式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基である。炭素数１から３のアルキル基は、直鎖または分岐鎖のいずれでもよく、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基を挙げることができる。この中でも、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいはメチル基であることが好ましく、Ｒ^１およびＲ^２は、メチル基であることがより好ましい。 In formula (1), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms. The alkyl group having 1 to 3 carbon atoms may be linear or branched, and examples thereof include a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group. Among these, R ¹ , R ² and R ³ are each preferably a hydrogen atom or a methyl group, and R ¹ and R ² are more preferably a methyl group.

第２形態のカフェイン類縁体は、下記一般式（２）で表される化合物である。 The caffeine analog of the second form is a compound represented by the following general formula (2).

式（２）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、上記式（１）のものと同様である。 In the formula (2), R ¹ , R ² and R ³ are the same as those in the above formula (1).

本発明のカフェイン類縁体は、アデノシンレセプターに作用するカフェイン類縁体である。特に、アデノシンレセプターのサブタイプＡ_３に高い特異性で結合する化合物である。本発明のカフェイン類縁体は、アデノシンレセプターの作用を調べるための試薬あるいは該作用が有効な疾患の医薬組成物として使用されることが期待できる。また、特に、アデノシンレセプターのサブタイプＡ_３の作用についての研究促進にも役立ち、該作用が有効な疾患の発見に役立つと共に、該疾患の医薬組成物として使用されることが期待される。 The caffeine analog of the present invention is a caffeine analog that acts on an adenosine receptor. In particular, a compound that binds with high specificity to subtype A ₃ adenosine receptors. The caffeine analog of the present invention can be expected to be used as a reagent for examining the action of an adenosine receptor or as a pharmaceutical composition for a disease for which the action is effective. In particular, also helps promote research on the action of subtype A ₃ adenosine receptors, with a the acting helps discover effective disease, be used as pharmaceutical compositions of the disease is expected.

アデノシンレセプターの各サブタイプの作用について説明する。アデノシンレセプターＡ_１およびＡ_３は、百日咳毒素感受性Ｇ_ｉタンパクの活性化を通して、アデニル酸シクラーゼ活性を阻害するように働き、細胞のｃＡＭＰレベルの低下を引き起こす。また、アデノシンレセプターＡ_２ＡおよびＡ_２Ｂは、Ｇ_ｓタンパクの活性化を通して、アデニル酸シクラーゼ活性を刺激するように働き、細胞のｃＡＭＰレベルの上昇を引き起こす。そして、例えば、アデノシンレセプターＡ_２Ａは冠状動脈血管拡張を調節し、アデノシンレセプターＡ_２Ｂは肥満細胞活性化、喘息、血管拡張、細胞成長の調節、腸機能、および神経分泌の調節に関係しているとされ、また、アデノシンレセプターＡ_３は細胞増殖過程を調節する。 The action of each subtype of the adenosine receptor will be described. Adenosine receptor A ₁ and A _3, through the activation of pertussis toxin-sensitive G _i protein acts to inhibit adenylate cyclase activity, causing a decrease in cellular cAMP levels. Furthermore, adenosine receptor _{A 2A} and _{A 2B,} through activation of _{G s} proteins serve to stimulate adenylate cyclase activity, it causes an increase in cellular cAMP levels. And, for example, adenosine receptor A _2A regulates coronary vasodilation, and adenosine receptor A _2B is involved in mast cell activation, asthma, vasodilation, regulation of cell growth, intestinal function, and regulation of neurosecretion. is a Further, adenosine receptor a ₃ regulates cell proliferation processes.

上記のような作用を有するため、それぞれのサブタイプのアゴニストおよびアンタゴニストは、例えば以下の利用が考えられる。アデノシンＡ_１アゴニストは、神経保護剤、抗てんかん薬等としての使用が期待される。また、アデノシンＡ_１アンタゴニストは、抗アレルギー薬、抗炎症薬、中枢神経刺激薬、利尿薬、抗喘息薬、強心薬、冠拡張薬、鎮咳薬、ウイルス感染および免疫不全症の治療薬等としての使用が期待される。また、アデノシンＡ_２Ａアンタゴニストは、アルツハイマー病等の各種痴呆、脳卒中等による神経変性障害、パーキンソン病様症状の治療薬等としての使用が期待される。また、アデノシンＡ_２Ｂアンタゴニストは、腸の塩化物イオン分泌をブロックするのに使用され、下痢を含む、炎症性の消化管障害の治療に有用である。Ａ_２Ａアゴニストは、消炎剤、心臓ストレス誘起剤、脊髄損傷治療剤としての使用、また、Ａ_３アゴニストは関節リウマチなどの自己免疫疾患、結腸がんに対する治療に有用である。 Since it has the above action, each subtype of agonist and antagonist can be used, for example, as follows. Adenosine A ₁ agonists, neuroprotective agents, for use as antiepileptic drugs or the like is expected. Furthermore, adenosine A ₁ antagonists, antiallergic agents, anti-inflammatory drugs, central nervous stimulants, diuretics, antiasthmatic agents, cardiotonics, coronary vasodilators, antitussive agents, viral infections and immunodeficiency diseases as therapeutic agents and the like Expected to be used. Adenosine A _2A antagonists are expected to be used as therapeutic agents for various dementias such as Alzheimer's disease, neurodegenerative disorders due to stroke, etc., Parkinson's disease-like symptoms, and the like. Adenosine A _2B antagonists are also used to block intestinal chloride ion secretion and are useful in the treatment of inflammatory gastrointestinal disorders, including diarrhea. A _2A agonists, anti-inflammatory agents, cardiac stress inducer, use as spinal cord injury therapeutic agents, also, A ₃ agonists are useful in autoimmune diseases, treatment for colon cancer, such as rheumatoid arthritis.

上記した第１形態および第２形態のカフェイン類縁体は、薬理学的に許容される塩の形態であってもよい。薬理学的に許容される塩とは、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、りん酸塩、臭化水素酸塩などの無機酸塩、ぎ酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩などの有機酸塩を挙げることができる。また、化合物によっては水和物を形成するが、このような水和物についても本発明の範囲に含有される。 The caffeine analogs of the first and second forms described above may be in the form of pharmacologically acceptable salts. Examples of pharmacologically acceptable salts include inorganic acid salts such as hydrochloride, sulfate, nitrate, phosphate, and hydrobromide, formate, acetate, trifluoroacetate, and tartrate. And organic acid salts such as maleate, fumarate, methanesulfonate, benzenesulfonate, and toluenesulfonate. Moreover, although a hydrate is formed depending on a compound, such a hydrate is also contained in the scope of the present invention.

＜カフェイン類縁体の製造方法（ルートＡ）＞
上記カフェイン類縁体の製造方法を以下に示す。製造方法は、ルートＡおよびルートＢの大きく二つに分けられる。ルートＡは、第１形態および第２形態のカフェイン類縁体の両方を製造する方法である。そして、ルートＢは第１形態のカフェイン類縁体を製造する方法である。 <Method for producing caffeine analog (Route A)>
A method for producing the above caffeine analog is shown below. The manufacturing method can be roughly divided into route A and route B. Route A is a method for producing both the first and second forms of caffeine analogs. Route B is a method for producing the first form of caffeine analog.

まず、ルートＡについて説明する。ルートＡはカップリング反応工程と光環化反応工程を備えて構成される。以下、工程順に説明する。 First, route A will be described. Route A comprises a coupling reaction step and a photocyclization reaction step. Hereinafter, it demonstrates in order of a process.

（カップリング反応工程）
カップリング反応工程においては、下記一般式（３）で示される化合物と、 (Coupling reaction process)
In the coupling reaction step, a compound represented by the following general formula (3):

下記一般式（４）で示される化合物とを、

A compound represented by the following general formula (4):

触媒の存在下においてカップリング反応させる。式（３）中のＲ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、式（１）におけるものと同様である。また、式（４）中のＸ^１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基であり、好ましくはＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＴｆ、より好ましくはＣｌ、Ｂｒである。

The coupling reaction is carried out in the presence of a catalyst. R ¹ , R ² and R ³ in the formula ( ³ ) are the same as those in the formula (1). X ¹ in formula (4) is a substituent selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf, preferably Cl, Br, I, OTf, more preferably Cl, Br. .

反応は、溶媒中、触媒の存在下で行われる。溶媒としては、反応原料に不活性なものであれば特に制限なく用いることができ、例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、トルエン、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）等を用いることができる。また、触媒としては、パラジウム触媒、ニッケル触媒等を用いることができ、収率が高い点からパラジウム触媒を用いることが好ましい。パラジウム触媒としては、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、Ｐｄ（Ｐｔ−Ｂｕ_３）₂、Ｐｄ（ＯＡｃ）₂を挙げることができる。また、配位子、添加剤を添加することにより、収率を向上させることができる。配位子としては、例えば、Ｘｐｈｏｓ等のリン系の配位子を挙げることができる。また、添加剤としては、Ｃｓ_２ＣＯ_３等が挙げられる。 The reaction is performed in a solvent in the presence of a catalyst. Any solvent can be used without particular limitation as long as it is inert to the reaction raw material. For example, dimethylformamide (DMF), toluene, N-methylpyrrolidone (NMP), or the like can be used. Moreover, as a catalyst, a palladium catalyst, a nickel catalyst, etc. can be used, and it is preferable to use a palladium catalyst from a point with a high yield. Examples of the palladium catalyst include Pd ₂ (dba) ₃ , Pd (PPh ₃ ) ₄ , Pd (Pt—Bu ₃ ) ₂ , and Pd (OAc) ₂ . Moreover, a yield can be improved by adding a ligand and an additive. Examples of the ligand include phosphorus-based ligands such as Xphos. As the additives, such as _Cs 2 CO _3.

そして、上記のカップリング反応により、下記一般式（５）で示される化合物が製造される。 And the compound shown by following General formula (5) is manufactured by said coupling reaction.

式（５）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、式（１）におけるものと同様である。 In formula (5), R ¹ , R ² and R ³ are the same as those in formula (1).

（光環化反応工程）
光環化反応工程においては、上記のカップリング反応工程で得られた式（５）の化合物に対して、光を照射し環化反応させる。環化反応は以下の二つの機構によって進む。
一つ目の機構は、下記式（Ｉ）のように光環化反応が進行して、式（１）の第１形態のカフェイン類縁体が製造される。 (Photocyclization reaction process)
In the photocyclization reaction step, the compound of formula (5) obtained in the coupling reaction step is irradiated with light to cause a cyclization reaction. The cyclization reaction proceeds by the following two mechanisms.
In the first mechanism, a photocyclization reaction proceeds as shown in the following formula (I) to produce a caffeine analog of the first form of formula (1).

二つ目の機構は、下記式（ＩＩ）のように光環化反応が進行して、式（２）の第２形態のカフェイン類縁体が製造される。 In the second mechanism, the photocyclization reaction proceeds as shown in the following formula (II), and the caffeine analog of the second form of the formula (2) is produced.

実際の反応においては、上記（Ｉ）（ＩＩ）の反応の両方が進行するため、第１形態および第２形態のカフェイン類縁体の混合物が得られる。これら混合物の分離は、カラムクロマトグラフィーによる通常の方法により行うことができる。 In the actual reaction, since both the reactions (I) and (II) proceed, a mixture of caffeine analogs of the first form and the second form is obtained. Separation of these mixtures can be performed by a conventional method using column chromatography.

なお、Ｒ^３がアルキル基の場合は、上記（ＩＩ）の反応が進行し、第２形態のカフェイン類縁体のみが得られる。これは、アルキル基Ｒ^３の嵩高さのため、（ＩＩ）の反応が選択的に進行するためであると考えられる。 When R ³ is an alkyl group, the reaction (II) proceeds, and only the caffeine analog of the second form is obtained. This is considered to be because the reaction (II) proceeds selectively due to the bulkiness of the alkyl group R ³ .

Ｒ^３がアルキル基である第１形態のカフェイン類縁体を得るためには、Ｒ^３がＨである原料化合物を用いて上記（Ｉ）のルートで式（１）の化合物（この状態ではＲ^３はＨ）を得て、これをアルキル化してＲ^３にアルキル基を導入すればよい。 For R ³ to obtain a caffeine analogues of the first aspect is an alkyl group, the compound of formula (1) using a starting compound wherein R ³ is H in the root of the (I) (in this state R ³ is obtained by obtaining H), alkylating this and introducing an alkyl group into R ³ .

＜カフェイン類縁体の製造方法（ルートＢ）＞
次にルートＢについて説明する。ルートＢはカップリング反応工程と分子内環化反応工程を備えて構成される。以下、工程順に説明する。 <Method for producing caffeine analog (Route B)>
Next, route B will be described. Route B comprises a coupling reaction step and an intramolecular cyclization reaction step. Hereinafter, it demonstrates in order of a process.

（カップリング反応工程）
カップリング反応工程においては、下記一般式（６）で示される化合物と、 (Coupling reaction process)
In the coupling reaction step, a compound represented by the following general formula (6):

下記一般式（７）で示される化合物とを、

A compound represented by the following general formula (7):

触媒の存在下においてカップリング反応させる。式（６）中のＲ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、式（１）におけるものと同様である。また、式（６）および式（７）中のＸ^２、Ｘ^３はそれぞれ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる基であり、好ましくはＣｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＯＴｆ、より好ましくはＣｌ、Ｂｒである。また、式（７）中のＲ^４は、炭素数１から５のアルキル基であり、例えば、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチルを上げることができるが、この中でもｎ−ブチルが好ましい。

The coupling reaction is carried out in the presence of a catalyst. R ¹ , R ² and R ³ in the formula (6) are the same as those in the formula (1). X ² and X ³ in formula (6) and formula (7) are groups selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf, respectively, preferably Cl, I, Br, OTf, More preferred are Cl and Br. R ⁴ in formula (7) is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms, and examples thereof include n-propyl, n-butyl, and n-pentyl. Among these, n-butyl is preferable. .

本工程のカップリング反応は一般にスティルカップリング反応呼ばれているものであり、溶媒中、触媒の存在下で行われる。溶媒としては、反応原料に不活性なものであれば特に制限なく用いることができ、例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、トルエン、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、アセトニトリル等を用いることができる。触媒としては、パラジウム触媒を用いることができ、パラジウム触媒としては、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、Ｐｄ（ｄｂａ）_３を挙げることができる。また、配位子、添加剤を添加することにより、収率を向上させることができる。配位子としては、ＡｓＰｈ_３、ＰＰｈ_３等を挙げることができる。また、添加剤としては、ＣｕＯ、ＣｕＩ、ＬｉＣｌ等を挙げることができる。 The coupling reaction in this step is generally called Still coupling reaction, and is performed in a solvent in the presence of a catalyst. Any solvent can be used without particular limitation as long as it is inert to the reaction raw materials. For example, dimethylformamide (DMF), toluene, N-methylpyrrolidone (NMP), dioxane, tetrahydrofuran (THF), acetonitrile and the like can be used. Can be used. A palladium catalyst can be used as the catalyst, and examples of the palladium catalyst include Pd (PPh ₃ ) ₄ and Pd (dba) ₃ . Moreover, a yield can be improved by adding a ligand and an additive. Examples of the ligand include AsPh ₃ and PPh ₃ . In addition, examples of the additive include CuO, CuI, and LiCl.

そして、上記のカップリング反応により、下記一般式（８）で示される化合物が製造される。 And the compound shown by following General formula (8) is manufactured by said coupling reaction.

（分子内環化反応工程）
分子内環化反応工程においては、上記のカップリング反応工程で得られた式（８）の化合物を、分子内環化させる。これにより第１形態のカフェイン類縁体が製造される。 (Intramolecular cyclization reaction process)
In the intramolecular cyclization reaction step, the compound of formula (8) obtained in the above coupling reaction step is intramolecular cyclization. Thereby, the caffeine analog of the 1st form is manufactured.

また、Ｒ^３アルキル基の第１のカフェイン類縁体を製造する場合は、まず、Ｒ^３がＨの原料を使用して、式（８）の化合物を得て、これを分子内環化して得られた式（１）の化合物をアルキル化してＲ^３にアルキル基を導入して製造することもできる。この場合は、最初からＲ^３がアルキル基のものを原料とした場合よりも収率がよく好ましい。 In the case of producing the first caffeine analog of the R ³ alkyl group, first, a compound of the formula (8) is obtained using a raw material in which R ³ is H, and this is intramolecularly cyclized. It can also be produced by alkylating the resulting compound of formula (1) and introducing an alkyl group into R ³ . In this case, the yield is better than the case where R ³ is an alkyl group as a starting material.

＜医薬組成物の製造＞
本発明のカフェイン類縁体は、一般的な方法により医薬品組成物とすることができる。医薬組成物としては、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬および軟ゼラチンカプセル剤、液剤、シロップ剤等の経口投与の形態とすることができる。また、例えば、直腸内に投与する坐薬、または、注射剤といった、非経口投与の形態とすることもできる。 <Manufacture of pharmaceutical composition>
The caffeine analog of the present invention can be made into a pharmaceutical composition by a general method. The pharmaceutical composition can be in the form of oral administration such as tablets, coated tablets, dragees, hard and soft gelatin capsules, solutions, syrups and the like. Moreover, it can also be set as the form of parenteral administration, such as a suppository administered into a rectum, or an injection.

医薬品組成物、薬学的に不活性な無機または有機担体を用いて調整することができる。例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、および硬ゼラチンカプセル剤用の担体としては、ラクトース、コーンスターチまたはその誘導体、タルク、ステアリン酸またはその塩等が挙げられる。軟ゼラチンカプセル剤用の担体としては、例えば、植物油、ワックス、脂肪、半固体および液体ポリオール等が挙げられる。 Pharmaceutical compositions can be prepared using pharmaceutically inert inorganic or organic carriers. For example, carriers for tablets, coated tablets, dragees, and hard gelatin capsules include lactose, corn starch or derivatives thereof, talc, stearic acid or salts thereof, and the like. Examples of carriers for soft gelatin capsules include vegetable oils, waxes, fats, semi-solid and liquid polyols.

液剤およびシロップ剤用の担体としては、例えば、水、ポリオール、グリセロール、植物油等が挙げられる。坐薬用の担体としては、例えば、天然油、硬化油、ワックス、脂肪、半液体または液体ポリオール等が挙げられる。また、注射剤は、例えば生理食塩水を用いて調整できる。 Examples of carriers for liquids and syrups include water, polyols, glycerol, vegetable oils and the like. Examples of suppository carriers include natural oils, hydrogenated oils, waxes, fats, semi-liquid or liquid polyols, and the like. The injection can be adjusted using, for example, physiological saline.

また、医薬品組成物は、保存料、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、着香料、浸透圧を変化させるための塩、緩衝剤、マスキング剤、または抗酸化剤を含有していてもよい。また、他の治療に有用な物質を含有して複合剤とすることもできる。 In addition, the pharmaceutical composition is a preservative, solubilizer, stabilizer, wetting agent, emulsifier, sweetener, colorant, flavor, salt for changing osmotic pressure, buffer, masking agent, or antioxidant. May be contained. Moreover, it can also be set as a composite agent containing the substance useful for another treatment.

医薬品組成物の投与量は、治療する症状、対象の年齢、投与経路等を考慮して、既知の手法により決定される。例えば、経口投与（成人）では、本発明のカフェイン類縁体を１０ｍｇ〜２ｇ／一日、好ましくは１０ｍｇ〜７００ｍｇ／一日とすることができる。また、非経口投与（成人）では、１０ｍｇ〜７００ｍｇ／一日、好ましくは５０ｍｇ〜２００ｍｇ／一日とすることができる。なお、該投与量は、カフェイン類縁体そのものの場合であり、薬理学的に許容される塩の場合は、分子量に従って適宜変更される。 The dosage of the pharmaceutical composition is determined by a known method in consideration of the symptoms to be treated, the age of the subject, the administration route, and the like. For example, for oral administration (adult), the caffeine analog of the present invention can be 10 mg to 2 g / day, preferably 10 mg to 700 mg / day. For parenteral administration (adult), the dose can be 10 mg to 700 mg / day, preferably 50 mg to 200 mg / day. The dose is in the case of caffeine analog itself, and in the case of a pharmacologically acceptable salt, it is appropriately changed according to the molecular weight.

（ルートＢのスティルカップリング反応における反応条件の検討）
本発明者は、ルートＢのスティルカップリング反応の好ましい条件を検討すべく、以下の式（ＩＩＩ）で示す実験を行った。実験は、触媒の種類、配位子の有無および種類、触媒の濃度、添加剤の有無および種類を変更して行った。結果を表１に示す。 (Examination of reaction conditions in Root B still coupling reaction)
The present inventor conducted an experiment represented by the following formula (III) in order to examine preferable conditions for the still coupling reaction of the route B. The experiment was carried out by changing the type of catalyst, the presence / absence and type of ligand, the concentration of catalyst, the presence / absence and type of additive. The results are shown in Table 1.

表１より以下のことが分かった。
（１）添加剤としてＣｕＩを加えた場合に反応が進行した（ｅｎｔｒｙ３および５〜９）。
（２）ｅｎｔｒｙ７および８を比較してわかるように、配位子をＡｓＰｈ_３からＰＰｈ_３に変えると、収率が向上した。
（３）ｅｎｔｒｙ７および９を比較してわかるように、触媒濃度を高くすると収率が向上した。 Table 1 shows the following.
(1) The reaction proceeded when CuI was added as an additive (entries 3 and 5-9).
(2) As can be seen by comparing entries 7 and 8, the yield was improved when the ligand was changed from AsPh ₃ to PPh ₃ .
(3) As can be seen by comparing entries 7 and 9, the yield was improved when the catalyst concentration was increased.

以上より、ルートＢのカップリング反応においては、高収率で結果物を得る観点から、添加剤としてＣｕＩを加えることが好ましく、配位子としては、ＡｓＰｈ_２を用いることが好ましく、パラジウム触媒の濃度は高い方が好ましいことが分かった。 From the above, in the coupling reaction of Route B, it is preferable to add CuI as an additive from the viewpoint of obtaining a resultant product with high yield, and AsPh ₂ is preferably used as a ligand. It was found that a higher concentration is preferable.

（製造例１）
１，３−ジメチル−５−（ピリジン−３−イリミノ）−イミダゾリジン−２，４−ジオン（１０）の合成 (Production Example 1)
Synthesis of 1,3-dimethyl-5- (pyridine-3-irimino) -imidazolidine-2,4-dione (10)

ルートＡの中間体である式（５）の化合物（Ｒ^１、Ｒ^２がメチル、Ｒ^３がＨ）である１，３−ジメチル−５−（ピリジン−３−イリミノ）−イミダゾリジン−２，４−ジオンを以下の手順で合成した。

1,3-dimethyl-5- (pyridine-3-irimino) -imidazolidine- ² , a compound of formula (5) that is an intermediate of route A (R ¹ , R ² is methyl, R ³ is H) 4-dione was synthesized by the following procedure.

５−アミノ−１，３−ジメチルウラシル（７８．０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（２３．０ｍｇ、２５μｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２´，４´，６´−トリイソプロピルビフェニル（２４．２ｍｇ、５０μｍｏｌ）、および、Ｃｓ_２ＣＯ_３（２３０．３ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）が充填された乾燥したシュレンク管に、ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）を加えた。シュレンク管中の混合物を、室温（２３℃）にて、１０分間撹拌した。 5-amino-1,3-dimethyluracil (78.0 mg, 0.5 mmol), Pd ₂ (dba) ₃ (23.0 mg, 25 μmol), 2-dicyclohexylphosphino-2 ′, 4 ′, 6′-tri To a dry Schlenk tube charged with isopropylbiphenyl (24.2 mg, 50 μmol) and Cs ₂ CO ₃ (230.3 mg, 0.71 mmol) was added DMF (0.25 mL). The mixture in the Schlenk tube was stirred at room temperature (23 ° C.) for 10 minutes.

この混合物に、３−クロロピリジン（４８μＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加え、６５℃で１８時間撹拌した。反応混合物は、セライトを通してろ過し、得られた残渣をシリカゲルを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、６０：１→２０：１）により精製した。これにより茶色オイル状の標題化合物（１０）を１０１．１ｍｇ（収率：８７％）得た。 To this mixture was added 3-chloropyridine (48 μL, 0.5 mmol) and stirred at 65 ° C. for 18 hours. The reaction mixture was filtered through Celite, and the obtained residue was purified by flash column chromatography using silica gel (developing solvent: CHCl ₃ / MeOH, 60: 1 → 20: 1). As a result, 101.1 mg (yield: 87%) of the title compound (10) as a brown oil was obtained.

化合物（１０）の物性を以下に示す。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝４．５，１．６Ｈｚ），７．３８−７．２９（２Ｈ，ｍ），６．１５（１Ｈ，ｓ），３．５５（３Ｈ，ｓ），３．５４（１Ｈ，ｓ），２．５２（１Ｈ，ｓ）； The physical properties of the compound (10) are shown below.
¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.48 (1H, d, J = 8.4 Hz), 8.27 (1H, dt, J = 4.5, 1.6 Hz), 7.38-7.29 (2H, m), 6.15 (1H, s), 3.55 (3H, s), 3.54 (1H, s), 2.52 (1H, s);

^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１６１．０，１４９．９，１４１．６，１３９．５，１３８．８，１２５．９，１２３．６，１１７．４，３７．３，２８．６； ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 161.0, 149.9, 141.6, 139.5, 138.8, 125.9, 123.6, 117.4, 37.3, 28.6;

ＩＲ（ＫＢｒ）ν_ｍａｘ３４２８，３３１８，１６９８，１６４０ｃｍ^−１；
ＨＲＥＳＩＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１１Ｈ_１２Ｎ_４Ｏ_２（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２３２．０９６０，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２３２．０９７１． IR (KBr) ν _max 3428, 3318, 1698, 1640 cm ⁻¹ ;
_{_{HRESIMS calcd for C 11 H 12 N}} 4 O 2 (M +) m / z232.0960, found m / z232.0971.

（製造例２）
１，３−ジメチル−５−（メチルピリジン−３−イル−アミノ）−１Ｈ−ピリミジン−２，４−ジオン（１１）の合成 (Production Example 2)
Synthesis of 1,3-dimethyl-5- (methylpyridin-3-yl-amino) -1H-pyrimidine-2,4-dione (11)

ルートＡの中間体である式（５）の化合物（Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３がメチル）である１，３−ジメチル−５−（メチルピリジン−３−イル−アミノ）−１Ｈ−ピリミジン−２，４−ジオン（１１）を以下の手順で合成した。

1,3-dimethyl-5- (methylpyridin-3-yl-amino) -1H-pyrimidine-a compound of formula (5) which is an intermediate of route A (R ¹ , R ² and R ³ are methyl) 2,4-dione (11) was synthesized by the following procedure.

ＤＭＦ（１ｍＬ）中の製造例１で合成した化合物（１０）（５１．２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（８．１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１０分間放置した後、反応溶液にＭｅＩ（１４μＬ，０．２２ｍｍｏｌ）を加えて、３時間撹拌した。反応混合物は、セライトを通してろ過し、得られた残渣をシリカゲルを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、５：１）により精製した。これにより茶色オイル状の標題化合物（１１）を４４．４ｍｇ（収率：８２％）得た。 To a solution of compound (10) synthesized in Preparation Example 1 (51.2 mg, 0.22 mmol) in DMF (1 mL) was added NaH (8.1 mg, 0.33 mmol). After leaving at room temperature for 10 minutes, MeI (14 μL, 0.22 mmol) was added to the reaction solution and stirred for 3 hours. The reaction mixture was filtered through celite, and the obtained residue was purified by flash column chromatography using silica gel (developing solvent: CHCl ₃ / MeOH, 5: 1). As a result, 44.4 mg (yield: 82%) of the title compound (11) as a brown oil was obtained.

化合物（１１）の物性を以下に示す。
^ＩＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．９８（ｌＨ，ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），７．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），７．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．６Ｈｚ），６．８８（ｌＨ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，３．０Ｈｚ），３．３１（３Ｈ，ｓ），３．２４（３Ｈ，ｓ），３．０６（３Ｈ，ｓ）； The physical properties of the compound (11) are shown below.
^I HNMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.98 (1H, d, J = 3.0 Hz), 7.92 (1H, d, J = 4.5 Hz), 7.00 (1H, dd, J = 8. 4, 4.6 Hz), 6.88 (lH, dd, J = 8.5, 3.0 Hz), 3.31 (3H, s), 3.24 (3H, s), 3.06 (3H, s);

^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１６１．０，１５１．０，１４４．８，１４２．６，１３９．４，１３５．７，１２３．３，１２０．３，１１９．７，３９．５，３７．１，２８．２； ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 161.0, 151.0, 144.8, 142.6, 139.4, 135.7, 123.3, 120.3, 119.7, 39.5, 37. 1,28.2;

ＩＲ（ＫＢｒ）ν_ｍａｘ１７０６，１６５２，１４８８ｃｍ^−１；
ＨＲＥＳＩＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１２Ｈ_１４Ｎ_４Ｏ_２（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２４６．１１１６，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２４６．１１２５． IR (KBr) ν _max 1706, 1652, 1488 cm ⁻¹ ;
HRESIMS calcd forC ₁₂ H ₁₄ N ₄ O ₂ (M ⁺ ) m / z 246.1116, found m / z 246.1125.

（製造例３）
２，４−ジメチル−４，９−ジヒドロ−２，４，５，９−テトラアザ−フルオレン−１，３−ジオン（１２）および２,４−ジメチル−４，９−ジヒドロ−２,４,７,９−テトラアザ−フルオレン−１,３−ジオン（１３）の合成 (Production Example 3)
2,4-Dimethyl-4,9-dihydro-2,4,5,9-tetraaza-fluorene-1,3-dione (12) and 2,4-dimethyl-4,9-dihydro-2,4,7 Of 9,9-tetraaza-fluorene-1,3-dione (13)

本発明のカフェイン類縁体である式（１）の化合物（Ｒ^１、Ｒ^２がメチル、Ｒ^３がＨ）である標題化合物（１２）および本発明のカフェイン類縁体である式（２）の化合物（Ｒ^１、Ｒ^２がメチル、Ｒ^３がＨ）である標題化合物（１３）を以下の手順で合成した。

Title compound (12) which is a compound of the formula (1) which is a caffeine analog of the present invention (R ¹ , R ² is methyl, R ³ is H) and a formula (2) which is a caffeine analog of the present invention (13) was synthesized by the following procedure (R ¹ , R ² is methyl, R ³ is H).

イソプロパノール（４０ｍＬ）中の製造例１で合成した化合物（１０）（１００．２ｍｇ,０．４３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温にてタングステンランプを用いて２４時間照射した。混合物は、減圧下で濃縮し、シリカゲルを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ，５：１,ヘキサン／酢酸エチル／アセトン,２：１：１）により精製した。これにより茶色オイル状の標題化合物（１２）を１１１．２ｍｇ（収率：９０％）、および、茶色オイル状の標題化合物（１３）を２ｍｇ（収率：２％）得た。 A solution of compound (10) synthesized in Preparation Example 1 (100.2 mg, 0.43 mmol) in isopropanol (40 mL) was irradiated with a tungsten lamp for 24 hours at room temperature. The mixture was concentrated under reduced pressure and purified by flash column chromatography using silica gel (developing solvent: CHCl ₃ / MeOH, 5: 1, hexane / ethyl acetate / acetone, 2: 1: 1). As a result, 11.2 mg (yield: 90%) of the title compound (12) as a brown oil and 2 mg (yield: 2%) of the title compound (13) as a brown oil were obtained.

化合物（１２）の物性を以下に示す。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ-ｄ_６）δ１２．２（１Ｈ，ｓ），８．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．４，４．２Ｈｚ），７．８７（１Ｈ，ｄｄ,Ｊ＝１．４，８．６Ｈｚ），７．４２（ｌＨ，ｄｄ，Ｊ＝４．４，８．４Ｈｚ），３．９９（３Ｈ，ｓ），３．３４（３Ｈ，ｓ）； The physical properties of the compound (12) are shown below.
¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 12.2 (1H, s), 8.51 (1H, dd, J = 1.4, 4.2 Hz), 7.87 (1H, dd, J = 1. 4,8.6 Hz), 7.42 (1H, dd, J = 4.4, 8.4 Hz), 3.99 (3H, s), 3.34 (3H, s);

^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１５６．２，１５１．０，１４３．５，１３２．９，１２５．１，１２１．２，１２０．８，１１５．８，１０１．５，３２．１，２７．９； ¹³ C NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 156.2, 151.0, 143.5, 132.9, 125.1, 121.2, 120.8, 115.8, 101.5, 32.1, 27.9;

ＩＲ（ＫＢｒ）ν_ｍａｘ１６９８，１６５０ｃｍ^−１；
ＨＲＥＳＩＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１１Ｈ_１０Ｎ_４Ｏ_２（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２３０．０８０４，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２３０．０８０９． IR (KBr) ν _max 1698, 1650 cm ⁻¹ ;
HRESIMS calcd forC ₁₁ H ₁₀ N ₄ O ₂ (M ⁺ ) m / z 230.0804, found m / z 230.0809.

化合物（１３）の物性を以下に示す。 The physical properties of the compound (13) are shown below.

^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ-ｄ_６）δ１２．６（１Ｈ，ｓ），８．８６（１Ｈ，ｓ），８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４，７Ｈｚ），８．００（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），３．８０（３Ｈ，ｓ），３．３４（３Ｈ，ｓ）； ¹ HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 12.6 (1H, s), 8.86 (1H, s), 8.23 (1H, d, J = 4, 7 Hz), 8.00 (1H, d , J = 5.6 Hz), 3.80 (3H, s), 3.34 (3H, s);

^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ１５６．２，１５０．８，１３７．８，１３７．１，１３３．７，１２５．６，１１９．０，１１６．３，１１５．２，３２．３，２８．０； ¹³ C NMR (125 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 156.2, 150.8, 137.8, 137.1, 133.7, 125.6, 119.0, 116.3, 115.2, 32.3 28.0;

ＩＲ（ＫＢｒ）ν_ｍａｘ１６９８，１６３８ｃｍ^−１；
ＨＲＥＳＩＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１１Ｈ_１０Ｎ_４Ｏ_２（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２３０．０８０４，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２３０．０７９６． IR (KBr) ν _max 1698, 1638 cm ⁻¹ ;
_{_{HRESIMS calcd for C 11 H 10 N}} 4 O 2 (M +) m / z230.0804, found m / z230.0796.

（製造例４）
２，５，９−トリメチル−４，９−ジヒドロ−２，４，５，９−テトラアザ−フルオレン−１，３−ジオン（１４）の合成 (Production Example 4)
Synthesis of 2,5,9-trimethyl-4,9-dihydro-2,4,5,9-tetraaza-fluorene-1,3-dione (14)

アセトン（１６０ｍＬ）中の化合物（１１）（４６ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温にてタングステンランプを用いて２０時間照射した。混合物は、減圧下で濃縮し、Ｃ_１８カラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ，２０：８０→８０：２０）により精製した。これにより茶色オイル状の標題化合物（１４）を２．９ｍｇ（収率：６％）得た。 A solution of compound (11) (46 mg, 0.19 mmol) in acetone (160 mL) was irradiated with a tungsten lamp at room temperature for 20 hours. The mixture was concentrated under reduced pressure and purified by _C18 column chromatography (developing solvent: MeOH / H ₂ O, 20: 80 → 80: 20). As a result, 2.9 mg (yield: 6%) of the title compound (14) as a brown oil was obtained.

化合物（１４）の物性を以下に示す。
^ｌＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ８．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．４，１．２Ｈｚ），８．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．７，１．１Ｈｚ），７．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．６，４．４Ｈｚ），４．０９（３Ｈ，ｓ），４．００（３Ｈ，ｓ），３．３７（３Ｈ，ｓ）； The physical properties of the compound (14) are shown below.
^l HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.54 (1H, dd, J = 4.4, 1.2 Hz), 8.15 (1H, dd, J = 8.7, 1.1 Hz), 7. 49 (1H, dd, J = 8.6, 4.4 Hz), 4.09 (3H, s), 4.00 (3H, s), 3.37 (3H, s);

ＨＲＥＳＩＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１２Ｈ_１２Ｎ_４Ｏ_２（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２４４．０９６０，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２４４．０９６２． HRESIMS calcd for C ₁₂ H ₁₂ N ₄ O ₂ (M ⁺ ) m / z 244.0960, found m / z 244.0962.

（製造例５）
２，４，９−トリメチル−４，９−ジヒドロ−２，４，７，９−テトラアザフルオレン−１，３−ジオン（１´）の合成 (Production Example 5)
Synthesis of 2,4,9-trimethyl-4,9-dihydro-2,4,7,9-tetraazafluorene-1,3-dione (1 ')

ＤＭＦ（２ｍＬ）中の製造例３で合成した化合物（１２）（７．０ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨ（１６．２ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３０分間放置した後、反応溶液にＤＭＦ（０．２ｍＬ）中のＭｅＩ（２μＬ，０．０３２ｍｍｏｌ）溶液を加えて、２時間撹拌した。反応混合物は、セライトを通してろ過し、得られた残渣をＣ_１８カラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ、５０：５０→１００：０）により精製した。これにより黄色固体の標題化合物（１）を６．４ｍｇ（収率：８６％）得た。 To a solution of compound (12) synthesized in Preparation 3 (7.0 mg, 0.03 mmol) in DMF (2 mL) was added NaH (16.2 mg, 0.7 mmol). After standing at room temperature for 30 minutes, a solution of MeI (2 μL, 0.032 mmol) in DMF (0.2 mL) was added to the reaction solution and stirred for 2 hours. The reaction mixture was filtered through celite, and the obtained residue was purified by _C18 column chromatography (developing solvent: MeOH / H ₂ O, 50: 50 → 100: 0). As a result, 6.4 mg (yield: 86%) of the title compound (1) as a yellow solid was obtained.

化合物（１´）の物性を以下に示す。
^１ＨＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ-ｄ_６）δ９．１１（１Ｈ，ｂｒｓ），８．２９（１Ｈ，ｂｒｓ），８．０１（１Ｈ，ｂｒｓ），４．４２（３Ｈ，ｓ），３．９０（３Ｈ，ｓ），３．５１（３Ｈ，ｓ）； The physical properties of the compound (1 ′) are shown below.
¹ HNMR (600 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.11 (1H, br s), 8.29 (1 H, br s), 8.01 (1 H, br s), 4.42 (3H, s), 3 .90 (3H, s), 3.51 (3H, s);

ＨＲＥＳｌＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１２Ｈ_１２Ｎ_４Ｏ_２（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２４４．０９６０，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２４４．０９６３． _{_{HRESlMS calcd for C 12 H 12 N}} 4 O 2 (M +) m / z244.0960, found m / z244.0963.

（製造例６）
５−アミノ−６−（３−クロロピリジン−４−イル）−１，３−ジメチル−１Ｈ−ピリミジン−２，４−ジオン（１７） (Production Example 6)
5-Amino-6- (3-chloropyridin-4-yl) -1,3-dimethyl-1H-pyrimidine-2,4-dione (17)

ルートＢの中間体である式（８）の化合物（Ｒ^１、Ｒ^２がメチル、Ｒ^３がＨ、Ｘ^３がＣｌ）である標題化合物（１７）を以下の手順で合成した。

The title compound (17), which is a compound of formula (8) (R ¹ , R ² is methyl, R ³ is H, X ³ is Cl), which is an intermediate of route B, was synthesized by the following procedure.

５−アミノ−６−クロロ−１，３−ジメチルウラシル（５０．０ｍｇ、０．２６２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（１２０．２ｍｇ、０．１３１ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（６９．３ｍｇ、０．２６２ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（７０．７ｍｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）およびＬｉＣｌ（１６．０ｍｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）が充填された乾燥したシュレンク管に、ＤＭＦ（１．５ｍＬ）を加えた。シュレンク管中の混合物を、１１０℃にて、３０分間撹拌した。 5-Amino-6-chloro-1,3-dimethyluracil (50.0 mg, 0.262 mmol), Pd ₂ (dba) ₃ (120.2 mg, 0.131 mmol), PPh ₃ (69.3 mg, 0.262 mmol) ), CuI (70.7 mg, 0.367 mmol) and LiCl (16.0 mg, 0.367 mmol) were charged to a dry Schlenk tube with DMF (1.5 mL). The mixture in the Schlenk tube was stirred at 110 ° C. for 30 minutes.

この混合物に、３−クロロ−４−トリブチルスズスタニルピリジン（８０μＬ、０．２６２ｍｍｏｌ）を加え、１１℃で１９時間撹拌した。反応混合物は、セライトを通してろ過し、得られた残渣をシリカゲルを用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー（展開溶媒：ヘキサン／ＣＨＣｌ_３、６０：１→２０：１、そして、ヘキサン／酢酸エチル、６：１→２：３）により精製した。これにより茶色オイル状の標題化合物（１７）を３８．２ｍｇ（収率：５５％）得た。 To this mixture, 3-chloro-4-tributyltinstannylpyridine (80 μL, 0.262 mmol) was added and stirred at 11 ° C. for 19 hours. The reaction mixture was filtered through celite, and the obtained residue was subjected to flash column chromatography using silica gel (developing solvent: hexane / CHCl ₃ , 60: 1 → 20: 1, and hexane / ethyl acetate, 6: 1 → 2: 3). As a result, 38.2 mg (yield: 55%) of the title compound (17) as a brown oil was obtained.

化合物（１７）の物性を以下に示す。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．８３（１Ｈ，ｓ），８．７０（ＩＨ，ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），７．３２（ＩＨ，ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），３．４７（３Ｈ，ｓ），３．０８（３Ｈ，ｓ），２．８３（２Ｈ，ｂｒｓ）； The physical properties of the compound (17) are shown below.
¹ HNMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ 8.83 (1H, s), 8.70 (IH, d, J = 4.9 Hz), 7.32 (IH, d, J = 4.9 Hz), 3.47 (3H, s), 3.08 (3H, s), 2.83 (2H, br s);

^１３ＣＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１５９．８，１５０．９，１５０．１，１４９．１，１３７．８，１３１．４，１２５．０，１２４．１，１１９．９，３３．３，２８．７．； ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ 159.8, 150.9, 150.1, 149.1, 137.8, 131.4, 125.0, 124.1, 119.9, 33.3, 28. 7). ;

ＨＲＥＳＩＭＳｃａｌｃｄｆｏｒＣ_１１Ｈ_１１Ｎ_４Ｏ_２Ｃｌ（Ｍ^＋）ｍ／ｚ２６６．０５７０，ｆｏｕｎｄｍ／ｚ２６６．０５６９． _{_{HRESIMS calcd for C 11 H 11 N}} 4 O 2 Cl (M +) m / z266.0570, found m / z266.0569.

上記の化合物の物性評価に用いた機器を以下に説明する。
ＩＲスペクトルは、ＪＡＳＣＯＦＴ／ＩＲ-５３００スペクトロメーターを用いて測定した。また、プロトンおよびカーボンＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ５００ＭＨｚおよび/または６００ＭＨｚスペクトロメーターを用いて測定した。ＥＳＩマススペクトルは、ＪＥＯＬＪＭＳ-ＳＸ１０２Ａスペクトロメーターを用いて測定した。 The equipment used for evaluating the physical properties of the above compounds will be described below.
The IR spectrum was measured using a JASCO FT / IR-5300 spectrometer. Proton and carbon NMR spectra were measured using a Bruker 500 MHz and / or 600 MHz spectrometer. The ESI mass spectrum was measured using a JEOL JMS-SX102A spectrometer.

＜実施例１＞
上記の製造例３で得られた化合物（１３）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Example 1>
The affinity for the adenosine receptor was evaluated for the compound (13) obtained in Production Example 3 according to the following evaluation method.

＜実施例２＞
上記の製造例３で得られた化合物（１２）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Example 2>
The affinity for the adenosine receptor was evaluated for the compound (12) obtained in Production Example 3 according to the following evaluation method.

＜実施例３＞
上記の製造例４で得られた化合物（１４）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Example 3>
The affinity for the adenosine receptor was evaluated for the compound (14) obtained in Production Example 4 according to the following evaluation method.

＜実施例４＞
上記の製造例５で得られた化合物（１´）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Example 4>
The affinity for the adenosine receptor was evaluated for the compound (1 ′) obtained in Production Example 5 according to the following evaluation method.

＜参考例１＞
７−ブロモ−ｅｕｄｉｓｔｏｍｉｎＤ（ＢＥＤ）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 1>
The affinity for adenosine receptor was evaluated for 7-bromo-eudistomin D (BED) according to the following evaluation method.

＜参考例２＞
カフェインに対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 2>
The affinity for adenosine receptors was evaluated for caffeine according to the following evaluation method.

＜参考例３＞
Ａ_１選択的キサンチンアミン類（ＸＡＣ）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 3>
A ₁ selective xanthines amines relative (XAC), was evaluated affinity for adenosine receptor according to the following evaluation methods.

＜参考例４＞
Ａ_２Ａ選択的化合物であるＣＧＳ２１６８０に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 4>
Against A _2A selective compounds CGS 21680, it was evaluated affinity for adenosine receptor according to the following evaluation methods.

＜参考例５＞
Ａ_３選択的化合物である５’−（Ｎ−エチルカルボキサミド）アデノシン（ＮＥＣＡ）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 5>
The affinity for the adenosine receptor was evaluated according to the following evaluation method for 5 ′-(N-ethylcarboxamide) adenosine (NECA), which is an A ₃ selective compound.

＜参考例６＞
製造例１で合成した化合物（１０）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 6>
For the compound (10) synthesized in Production Example 1, the affinity for the adenosine receptor was evaluated according to the following evaluation method.

＜参考例７＞
製造例２で合成した化合物（１１）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 7>
The affinity for the adenosine receptor was evaluated according to the following evaluation method for the compound (11) synthesized in Production Example 2.

＜参考例８＞
製造例６で合成した化合物（１７）に対して、以下の評価方法に従ってアデノシンレセプターに対する親和性を評価した。 <Reference Example 8>
For the compound (17) synthesized in Production Example 6, the affinity for the adenosine receptor was evaluated according to the following evaluation method.

＜評価方法＞ <Evaluation method>

上記実施例および参考例の化合物に対して、アデノシンレセプターのサブタイプ（Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３）それぞれに対する親和性を評価した。 The affinity for each of the subtypes (A ₁ , A _2A , A ₃ ) of the adenosine receptor was evaluated for the compounds of the above Examples and Reference Examples.

（アデノシンレセプターに対する結合試験）
（１）アデノシンレセプターのサブタイプＡ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３を発現する細胞膜の作製
まず、アデノシンレセプターのサブタイプＡ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３を発現する細胞膜を作製した。人アデノシンＡ_１、Ａ_２ＡおよびＡ_３レセプターを発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞株をレセプター原料として使用した。該ＨＥＫ２９３Ｔ細胞株に、Ｅｆｆｅｃｔｅｎｅトランスフェクション試薬（ＱＩＡＧＥＮ社製）を用いて、ヒトアデノシンＡ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３レセプター構造をコードしているプラスミド（ＵＭＲｃＤＮＡリソースセンター（Ｒｏｌｌａ，ＭＯ，ＵＳＡ））を導入した。 (Binding test for adenosine receptor)
(1) Preparation of cell membranes expressing adenosine receptor subtypes A ₁ , A _2A and A ₃ First, cell membranes expressing adenosine receptor subtypes A ₁ , A _2A and A ₃ were prepared. The HEK293T cell line expressing human adenosine A ₁ , A _2A and A ₃ receptors was used as a receptor material. A plasmid encoding the human adenosine A ₁ , A _2A , A ₃ receptor structure (UMR cDNA Resource Center (Rolla, MO, USA)) using the Effectene transfection reagent (manufactured by QIAGEN) on the HEK293T cell line Was introduced.

５％の二酸化炭素含有加湿空気雰囲気下において、１０％ウシ胎児血清、１００μｇ/ｍＬのカナマイシンが添加されたＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓｍｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅ’ｓｍｅｄｉｕｍ中で、該細胞株を３７℃、４８時間培養した。その後、該細胞株を取り出し、該細胞株をプロテアーゼ阻害薬混合物（ロシュ・ダイアグノスティクス社製）を添加した５０ｍＭＴｒｉｓ-ＨＣｌバッファー（ｐＨ７．４）含有溶解バッファー中でホモジネートし、低速遠心分離により、細胞小器官および核を取り除いた。 In a humidified air atmosphere containing 5% carbon dioxide, the cell line was cultured at 37 ° C. for 48 hours in Dulbecco's modified Eagle's medium supplemented with 10% fetal bovine serum and 100 μg / mL kanamycin. Thereafter, the cell line was removed, and the cell line was homogenized in a lysis buffer containing 50 mM Tris-HCl buffer (pH 7.4) supplemented with a protease inhibitor mixture (Roche Diagnostics) and subjected to low-speed centrifugation. Organelles and nuclei were removed.

得られた上澄み液に対して、遠心分離（３００００ｘｇ、２０分間）を施し、沈殿した細胞膜を回収し、二度にわたり洗浄して、アデノシンレセプターのサブタイプＡ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３を発現する細胞膜を得た。得られた該細胞膜は、溶解バッファー中でサスペンドし、使用するまで−８０℃で保存した。 The obtained supernatant is centrifuged (30000 × g, 20 minutes), and the precipitated cell membrane is collected and washed twice to express adenosine receptor subtypes A ₁ , A _2A , and A ₃ . A cell membrane was obtained. The resulting cell membrane was suspended in lysis buffer and stored at −80 ° C. until use.

（２）結合アッセイ
アデノシンレセプターのサブタイプ（Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３）に対するラジオリガンド結合アッセイは、サブタイプごとにそれぞれ、トリチウムラベルした[^３Ｈ]ＤＰＣＰＸ（パーキンエルマー社製）、[^３Ｈ]ＣＧＳ２１６８０（パーキンエルマー社製）、または[^３Ｈ]ＮＥＣＡ（パーキンエルマー社製）を用いて、以下のようにして行った。 (2) Binding assay Radioligand binding assays for adenosine receptor subtypes (A ₁ , A _2A , A ₃ ) were performed using tritium-labeled [ ³ H] DPCPX (manufactured by PerkinElmer), [ ³ This was carried out using H] CGS 21680 (manufactured by Perkin Elmer) or [ ³ H] NECA (manufactured by Perkin Elmer) as follows.

上記で作製したアデノシンレセプターのサブタイプＡ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３を発現する細胞膜は、サブタイプごとにそれぞれ、上記の[^３Ｈ]ＤＰＣＰＸ（４ｎＭ）、[^３Ｈ]ＣＧＳ２１６８０（１２ｎＭ）、または[^３Ｈ]ＮＥＣＡ（３２ｎＭ）と共に、トリス−アセテート緩衝液（ｐＨ７．４，５０ｍＭ）、ＭｇＣｌ_２（５ｎＭ）、ＥＤＴＡ（１ｍＭ）、アデノシンデアミラーゼ（１Ｕ/ｍＬ）を含有する２５０μＬのアッセイ緩衝液中にて２５℃、６０分間培養した。 The cell membranes expressing the subtypes A ₁ , A _2A , and A ₃ of the adenosine receptor prepared above are each [ ³ H] DPCPX (4 nM), [ ³ H] CGS 21680 (12 nM), or with ^{[3 H] NECA (32nM)} , tris - acetate buffer _{(pH7.4,50mM), MgCl 2 (5nM} ), EDTA (1mM), 250μL assay buffer containing adenosine deaminase (1U / mL) Cultured at 25 ° C. for 60 minutes.

得られた培養混合物は、セルハーベスター（ブランデル社製）を用いて、０．１％のポリエチレンイミンをあらかじめ含浸させたガラス繊維ろ紙（ワットマン社製）にハーベストし、５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）にて三回洗浄した。そして、得られたガラス繊維ろ紙の放射能を、液体カクテルと混合後シンチレーションカウンターにより測定した。以上の操作および測定は、すべての実験について、２回あるいは３回繰返して行った。 The obtained culture mixture was harvested on a glass fiber filter paper (manufactured by Whatman) pre-impregnated with 0.1% polyethyleneimine using a cell harvester (brandel), and 50 mM Tris-HCl buffer ( Washed three times at pH 7.4). And the radioactivity of the obtained glass fiber filter paper was measured with a scintillation counter after mixing with a liquid cocktail. The above operation and measurement were repeated twice or three times for all experiments.

アデノシンレセプターのサブタイプ（Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３）への非特異的結合は、ＸＡＣ、ＣＧＳ２１６８０、およびＮＥＣＡのそれぞれの存在下（それぞれ１０μＭ）においての、結合活性として定義される。Ｋｄ値およびＢｍａｘ値は、非線形回帰分析（ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ４（ＧｒａｐｈＰａｄ社製））による１部位結合モデルを使用して決定される。 Non-specific binding to adenosine receptor subtypes (A ₁ , A _2A , A ₃ ) is defined as binding activity in the respective presence of XAC, CGS 21680, and NECA (10 μM each). Kd and Bmax values are determined using a one-site binding model by non-linear regression analysis (GraphPad Prism 4 (GraphPad)).

得られたＫｄ値およびＢｍａｘ値から、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いて、阻害定数（Ｋｉ値）を計算した。結果を表２に示す。「Ｋｉ値」とは、化合物がターゲットに結合する強さの逆数であり、Ｋｉ値が小さいほど、化合物とターゲットとの結合力が強いことを意味する。本発明においては、カフェイン類縁体がアデノシンレセプターの各サブタイプに結合する強さの逆数ということになり、Ｋｉ値が小さいほど、カフェイン類縁体とアデノシンレセプターとの親和性が高いということになる。 The inhibition constant (Ki value) was calculated from the obtained Kd value and Bmax value using the Cheng-Prusoff equation. The results are shown in Table 2. The “Ki value” is the reciprocal of the strength with which the compound binds to the target, and the smaller the Ki value, the stronger the binding force between the compound and the target. In the present invention, the caffeine analog is the reciprocal of the strength of binding to each subtype of the adenosine receptor, and the smaller the Ki value, the higher the affinity between the caffeine analog and the adenosine receptor. Become.

上記のアッセイでは、化合物の親和性が非常に低い場合は、「阻害割合（％）」を算出し、これにより親和性を評価した。「阻害割合（％）」は、実施例および比較例の化合物の濃度が１００μＭの場合に、アデノシンレセプターのサブタイプ（Ａ_１、Ａ_２Ａ、Ａ_３）のそれぞれに対する、[^３Ｈ]ＤＰＣＰＸ（４ｎＭ）、[^３Ｈ]ＣＧＳ２１６８０（１２ｎＭ）、または[^３Ｈ]ＮＥＣＡ（３２ｎＭ）の結合が阻害された割合を以下の数式Ａにより算出して求めた。 In the above assay, when the affinity of the compound was very low, an “inhibition ratio (%)” was calculated, and thereby the affinity was evaluated. The “inhibition rate (%)” is [ ³ H] DPCPX (4 nM) for each of the adenosine receptor subtypes (A ₁ , A _2A , A ₃ ) when the concentration of the compound of Example and Comparative Example is 100 μM. ), [ ³ H] CGS 21680 (12 nM), or [ ³ H] NECA (32 nM) was inhibited by the following formula A.

＜評価結果＞

表２に示した「Ｋｉ値」は、２回または３回にわたって試験を繰り返して得られた値の平均値（平均値±誤差）である。また、ラジオリガンドである、[^３Ｈ]ＤＰＣＰＸ、[^３Ｈ]ＣＧＳ２１６８０、および[^３Ｈ]ＮＥＣＡのＫｉ値は、Ｋｄ値がそれぞれ５ｎＭ、５２ｎＭ、および６．５ｎＭとして、Ｂｍａｘ値がそれぞれ８６００ｆｍｏｌ／ｍｇプロテイン、７０００ｆｍｏｌ／ｍｇプロテイン、３１０ｆｍｏｌ／ｍｇプロテイン、として算出した。 The “Ki value” shown in Table 2 is an average value (average value ± error) of values obtained by repeating the test twice or three times. Further, the Ki values of [ ³ H] DPCPX, [ ³ H] CGS 21680, and [ ³ H] NECA, which are radioligands, have a Kd value of 5 nM, 52 nM, and 6.5 nM, respectively, and a Bmax value of 8600 fmol / Calculated as mg protein, 7000 fmol / mg protein, 310 fmol / mg protein.

表２より、本発明のカフェイン類縁体（実施例１〜実施例４）は、アデノシンレセプターへの作用が有効な化合物であることが示された。 From Table 2, it was shown that the caffeine analogs (Examples 1 to 4) of the present invention are effective compounds for action on adenosine receptors.

以上、現時点において、もっとも、実践的であり、かつ、好ましいと思われる実施形態に関連して本発明を説明したが、本発明は、本願明細書中に開示された実施形態に限定されるものではなく、請求の範囲および明細書全体から読み取れる発明の要旨或いは思想に反しない範囲で適宜変更可能であり、そのような変更を伴うカフェイン類縁体、およびその製造方法もまた本発明の技術的範囲に包含されるものとして理解されなければならない。 While the present invention has been described in connection with embodiments that are presently the most practical and preferred, the present invention is not limited to the embodiments disclosed herein. However, the present invention can be modified as appropriate without departing from the spirit or idea of the invention that can be read from the claims and the entire specification, and caffeine analogs accompanying such changes, and the production method thereof are also technical aspects of the present invention. It should be understood as encompassed by the scope.

Claims

下記一般式（１）で示されるカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩。

（式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基である。） A caffeine analog represented by the following general formula (1) and a pharmacologically acceptable salt.

(In formula (1), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.)

下記一般式（２）で示されるカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩。

（式（２）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基である。） A caffeine analog represented by the following general formula (2) and a pharmacologically acceptable salt.

(In formula (2), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.)

下記一般式（３）で示される化合物と、

（式（３）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基である。）
下記一般式（４）で示される化合物とを、

（式（４）中、Ｘ^１は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基である。）
触媒の存在下においてカップリング反応させ、
下記一般式（５）で示される化合物を製造する工程、

（式（５）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基である。）
および、一般式（５）で示される化合物を光環化反応させる工程、
を備えている、請求項１または請求項２に記載のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩の製造方法。 A compound represented by the following general formula (3);

(In formula (3), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.)
A compound represented by the following general formula (4):

(In Formula (4), X ¹ is a substituent selected from the group consisting of F, Cl, Br, I, and OTf.)
A coupling reaction in the presence of a catalyst,
A step of producing a compound represented by the following general formula (5):

(In Formula (5), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms.)
And a step of photocyclizing the compound represented by the general formula (5),
A method for producing a caffeine analog according to claim 1 or 2, and a pharmacologically acceptable salt.

下記一般式（６）で示される化合物と、

（式（６）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基であり、Ｘ^２は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基である。）
下記一般式（７）で示される化合物とを、

（式（７）中、Ｘ^３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基であり、Ｒ^４は、炭素数１〜５のアルキル基である。）
触媒の存在下においてカップリング反応させ、
下記一般式（８）で示される化合物を製造する工程、

（式（８）中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、それぞれ水素原子あるいは炭素数１から３のアルキル基であり、Ｘ^３は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩおよびＯＴｆからなる群から選ばれる置換基である。）
および、一般式（８）で示される化合物を分子内環化反応させる工程、
を備えている、請求項１に記載のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩の製造方法。 A compound represented by the following general formula (6):

(In Formula (6), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms, and X ² is selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf) Which is a substituent.
A compound represented by the following general formula (7):

(In formula (7), X ³ is a substituent selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf, and R ⁴ is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms.)
A coupling reaction in the presence of a catalyst,
A step of producing a compound represented by the following general formula (8):

(In Formula (8), R ¹ , R ² and R ³ are each a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 3 carbon atoms, and X ³ is selected from the group consisting of F, Cl, Br, I and OTf) Which is a substituent.
And a step of intramolecular cyclization reaction of the compound represented by the general formula (8),
The caffeine analog according to claim 1, and a method for producing a pharmacologically acceptable salt.

アデノシンレセプターに作用する請求項１または請求項２に記載のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩。 The caffeine analog according to claim 1 or 2, which acts on an adenosine receptor, and a pharmacologically acceptable salt.

アデノシンレセプターがアデノシンレセプターＡ_３である、請求項５に記載のカフェイン類縁体、および薬理学的に許容される塩。 Adenosine receptor is an adenosine receptor A _3, Caffeine analogs, and a pharmacologically acceptable salt thereof according to claim 5.

請求項１または請求項２に記載のカフェイン類縁体、あるいは薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する、アデノシンレセプターへの作用が有効な疾患用の試薬又は医薬組成物。 A reagent or pharmaceutical composition for a disease having an effect on an adenosine receptor, comprising the caffeine analog according to claim 1 or 2 or a pharmacologically acceptable salt as an active ingredient.

アデノシンレセプターがアデノシンレセプターＡ_３である、請求項７に記載の試薬又は医薬組成物。 Adenosine receptor is an adenosine receptor A _3, the reagent or pharmaceutical composition according to claim 7.