JP4997467B2 - サイレージ調製用添加剤及び該サイレージ調製用添加剤を用いるサイレージの調製方法並びにサイレージ調製用キット - Google Patents
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Description
内田仙二編「サイレージ科学の進歩」、デーリィ・ジャパン社、1999年 Nakanishi et al. Japanese Jounal of Lactic Acid Bacteria (2002) 13: 37-45. Tanaka et al. Grassland Science (2003) 49: 222-228.
(1)ロイテリン生産能を有するホモ型発酵乳酸菌と、グリセロールと、ビタミンB12と、を含む、サイレージ調製用添加剤。
本発明の実施形態に係るサイレージ調製用添加剤について説明する。本発明の実施形態に係るサイレージ調製用添加剤は、ロイテリン生産能を有するホモ型発酵乳酸菌と、グリセロールと、ビタミンB12と、を含むものである。
本実施形態に係るサイレージの調製方法について説明する。本実施形態に係るサイレージの調製方法は、サイレージ材料に、ロイテリン生産能を有するホモ型発酵乳酸菌を含むサイレージ調製用添加剤を添加する工程と、該ホモ型発酵乳酸菌を嫌気条件下で発酵させて、乳酸とロイテリンを生産させる工程と、を備えたサイレージの調製方法であって、該サイレージ調製用添加剤として、上述したサイレージ調製用添加剤を使用するものである。
次に、本実施形態のサイレージ調製用キットについて説明する。本実施形態のサイレージ調製用キットは、上述したサイレージ調製用添加剤を備えたキットである。サイレージ調製用キットの具体例としては、例えば、ロイテリン生産性乳酸菌と、グリセロールと、ビタミンB12とを、所定の容量を有する容器にそれぞれ個別に収容したものの集合体とすることができる。また、ロイテリン生産性乳酸菌と、グリセロールと、ビタミンB12を混合したものを、所定の容量を有する容器又は包装袋に収容することもできる。更に、上述したpH調整剤を容器又は包装袋に収容したものを備えてもよい。
本試験例においては、本発明のサイレージ調製用添加剤がサイレージ中でロイテリン生産に及ぼす影響について検討した。
1)サイレージ調製用添加剤の調製
ロイテリン生産性乳酸菌をMRS液体培地で前培養し、菌数が培養液重量当たり109cfu/gのロイテリン生産性乳酸菌の培養液を得た。また、グリセロール及びビタミンB12を下記表1の配合で調製し、サイレージ調製用添加剤(サンプル1〜4)とした。なお、各成分の配合量は、サイレージ材料に対する配合量で表した。また、ロイテリン生産性乳酸菌の配合量は、乳酸菌培養液(MRS液体培地)の重量%で表した。
乾燥した稲わら(品種:コシヒカリ)を約2cmの長さに細断し、これに水及びグルコースを加えたものをサイレージ材料として用いた。具体的には、水分含有率を85〜86重量%に調整し、稲わらの重量に対する糖含量を2重量%に調節したものをサイレージ材料とした。
上記サイレージ材料30gと各サンプル(1〜4)の混合物をそれぞれ食品包装用のプラスチック製パウチ(ナイロンとポリエチレンの積層フィルム製)に入れて、これを市販の吸引密封機でプラスチック製パウチの中の空気を吸引し、嫌気条件となるように密封した(パウチ法)。その後、上記混合物を25℃で30日間発酵させることにより、所望のサイレージを得た。
発酵終了後、得られたサイレージ中の乳酸菌数を酢酸添加MRS寒天平板培地を用いて測定した。
発酵終了後、得られたサイレージ中の乳酸菌数を濃リン酸及びトリプトファン処理比色法(田中ら (2005) 日本畜産学会第104回大会講演要旨, p.73.)により定量した。
サンプル中のグリセロール及びビタミンB12の配合量と併せて、結果を表2に示す。いずれの試験区も貯蔵後乳酸菌数が109cfu/g程度まで増殖し、乳酸発酵によってサイレージのpHは4以下まで低下した。
本試験例では本発明のサイレージ調製用添加剤が酪酸発酵に及ぼす影響について検討した。
1)サイレージ調製用添加剤
ロイテリン生産性乳酸菌をMRS液体培地で前培養し、菌数が培養液重量当たり109cfu/gのロイテリン生産性乳酸菌の培養液を得た。また、グリセロール及びビタミンB12を下記表3の配合で調製し、サイレージ調製用添加剤(サンプル5〜7)とした。更に、サイレージ材料を酪酸発酵に好適な中性付近のpH条件に保つために、pH調整剤として炭酸カルシウム(CaCO3)をサイレージ材料に対し2重量%を添加した。なお、各成分の配合量は、サイレージ材料に対する配合量で表した。また、ロイテリン生産性乳酸菌の配合量は、乳酸菌培養液(MRS液体培地)の重量%で表した。
乾燥した稲わら(品種:コシヒカリ)を約2cmの長さに細断し、これに水及びグルコースを加えたものをサイレージ材料として用いた。具体的には、酪酸発酵を起こりやすくするため、水分含有率を83〜84重量%に調整し、稲わらの重量に対する糖含量を0.4重量%に調節したものをサイレージ材料とした。
上記サイレージ材料30gとサンプル(4〜6)の混合物をそれぞれ食品包装用のプラスチック製パウチ(ナイロンとポリエチレンの積層フィルム製)に入れて、これを市販の吸引密封機でプラスチック製パウチの中の空気を吸引し、嫌気条件となるように密封した(パウチ法)。その後、上記混合物を25℃で14日間発酵させることにより、所望のサイレージを得た。
発酵終了後、得られたサイレージ中の有機酸組成をキャピラリー電気泳動法を用いて分析した。
発酵終了後、得られたサイレージ中の乳酸菌数を酢酸添加MRS寒天平板培地を用いて測定した。
発酵終了後、得られたサイレージ中の乳酸菌数を濃リン酸及びトリプトファン処理比色法(田中ら (2005) 日本畜産学会第104回大会講演要旨, p.73.)により定量した。
サンプル中のグリセロール及びビタミンB12の配合量と併せて、結果を表4に示す。炭酸カルシウム添加によっていずれの試験区もpHは5.4以上と実施例1に比べて高く、酪酸発酵に好適と考えられるpHとなった。そのため、ビタミンB12を配合していないサンプル5を使用した場合には酪酸発酵が認められた。
本試験例では本発明のサイレージ調製用添加剤が好気的変敗の抑制に及ぼす影響について検討した。
1)サイレージ調製用添加剤
ロイテリン生産性乳酸菌をMRS液体培地で前培養し、菌数が培養液重量当たり109cfu/gのロイテリン生産性乳酸菌の培養液を得た。また、グリセロール及びビタミンB12を下記表5の配合で調製し、サイレージ調製用添加剤(サンプル8〜15)とした。さらに、pH調整剤として炭酸ナトリウム(Na2CO3)を0.05重量%を添加したものも調製した(サンプル14及び15)。また、実施例の好気的変敗防止効果を確認するために、従来例として、グリセロールを比較的多量(1重量%)に添加したサンプルを調製した(サンプル10及び11)。更に、対照としてロイテリンを生産しないホモ型発酵乳酸菌であるラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)NGRI 0110株を用いた(サンプル8)。
乾燥した稲わら(品種:コシヒカリ)を約2cmの長さに細断し、これに水及びグルコースを加えたものをサイレージ材料として用いた。具体的には、水分含有率を65〜67重量%に調整し、糖含量を2重量%に調節したものをサイレージ材料とした。
上記サイレージ材料30gと各サンプル(8〜15)の混合物をそれぞれ食品包装用のプラスチック製パウチ(ナイロンとポリエチレンの積層フィルム製)に入れて、これを市販の吸引密封機でプラスチック製パウチの中の空気を吸引し、嫌気条件となるように密封した(パウチ法)。その後、上記混合物を25℃で14日間発酵させることにより、所望のサイレージを得た。
発酵終了後、得られたサイレージ中の有機酸組成をキャピラリー電気泳動法を用いて分析した。
発酵終了後、得られたサイレージ中の乳酸菌数を酢酸添加MRS寒天平板培地を用いて測定した。
発酵終了後、得られたサイレージ中の乳酸菌数を濃リン酸及びトリプトファン処理比色法(田中ら (2005) 日本畜産学会第104回大会講演要旨, p.73.)により定量した。
サイレージの好気的変敗を検討する目的で、乳酸代謝能を有し、好気的変敗原因菌となる酵母ピキア・エスピー(Pichia sp.)Y-1株を用いた。発酵終了後に上記パウチを開封し、ピキア・エスピー(Pichia sp.)Y-1株106cfu/gをサイレージに接種して25℃下に7日間静置培養した。その後、サイレージの酵母菌数及び酵母の乳酸代謝によるpHの上昇を調べることによって、サイレージの好気的変敗の評価を行った。なお、酵母菌数は酒石酸を添加したポテトデキストロース寒天平板培地を用いて測定した。
結果は表6及び表7に示した。いずれのサンプルを用いた場合も乳酸が生成されたことによって酪酸発酵が認められない良好な発酵品質となった(表6)。一方、開封後の好気的変敗については、ラクトバチルス・ラムノサスLactobacillus rhamnosus を添加したサンプル8、及びラクトバチルス・コリニフォルミス L. coryniformis のみを添加し、ビタミンB12、グリセロール及び炭酸ナトリウムを添加していないサンプル9の好気的変敗の進行は速く、pHの顕著な上昇が観察された(表7)。
Claims (9)
- ロイテリン生産能を有するホモ型発酵乳酸菌と、グリセロールと、ビタミンB12と、を含む、サイレージ調製用添加剤。
- 前記ロイテリン生産能を有するホモ型発酵乳酸菌が、ラクトバチルス・コリニフォルミス(Lactobacillus coryniformis)である、請求項1に記載のサイレージ調製用添加剤。
- pH調整剤を更に含有する、請求項1または2に記載のサイレージ調製用添加剤。
- 前記pH調整剤が、炭酸ナトリウム又は炭酸カルシウムである請求項3に記載のサイレージ調製用添加剤。
- 前記ビタミンB12濃度が、サイレージ材料重量当たり0.02〜0.03ppmである、請求項1〜4のいずれか1項に記載のサイレージ調製用添加剤。
- サイレージ材料に、ロイテリン生産能を有するホモ型発酵乳酸菌を含むサイレージ調製用添加剤を添加する工程と、
該ホモ型発酵乳酸菌を嫌気条件下で発酵させて、乳酸とロイテリンを生産させる工程と、
を備えたサイレージの調製方法であって、
該サイレージ調製用添加剤として、請求項1〜5のいずれか1項に記載のサイレージ調製用添加剤を使用することを特徴とする、サイレージの調製方法。 - 前記サイレージ調製用添加剤を添加した後、前記ホモ型発酵乳酸菌を発酵させる前に、pH調整剤を添加する工程を含む、請求項6に記載のサイレージの調製方法。
- 前記pH調整剤として、炭酸ナトリウム又は炭酸カルシウムを使用する請求項7に記載のサイレージの調製方法。
- 請求項1〜5のいずれか1項に記載のサイレージ調製用添加剤を備えたサイレージ調製用キット。
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