JP4786538B2 - 親油性薬物送達ビヒクルおよびその使用方法 - Google Patents
親油性薬物送達ビヒクルおよびその使用方法 Download PDFInfo
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Description
本出願は、米国仮特許出願番号60/447,508(2003年2月14日出願)および米国仮特許出願番号60/508,035(2003年10月1日出願)の利益を主張し、これらの両方の仮特許出願の開示は、その全体が、本明細書中に参考として援用される。
本発明は、アメリカ国立衛生研究所からの助成金番号HL65159によって援助される研究の間の一部をなす。政府は、本発明について、一定の権利を有し得る。
本出願は、生物活性因子の送達のための、組成物および方法に関する。特に、本出願は、脂質結合性ポリペプチド、脂質二重層、および生物活性因子を含む生物活性因子送達粒子に関する。
生物活性物質(例えば、治療因子、ワクチン免疫原、および栄養分)は、多くの場合、純粋な形態で投与され得ないが、この生物活性物質の溶解性を向上させ、そしてそれを適切な形態で包んで、望ましくない副作用を最小限にしつつ最適の有益な効果を達成する、生体適合性処方物中に取り込まれる必要がある。生物活性因子の有効な送達は、多くの場合、体内での因子の短いクリアランス時間、作用部位に対する非効率的な標的化、またはその生物活性因子自体の性質(例えば、水性媒体に対する難溶性または疎水性)によって妨げられる。従って、多くの処方方法が、送達を改良するために開発され、その方法としては、徐放性処方物、エマルジョン、およびリポソームの調製物が挙げられる。
本発明は、個体に対する生物活性因子の送達のための組成物および方法を提供する。
本発明は、個体に対する生物活性因子の送達のための、組成物および方法を提供する。送達ビヒクルは、脂質結合性ポリペプチドおよび脂質二重層を含む粒子中に取り込まれた生物活性因子の形態で提供される。粒子の内側は、脂質分子の疎水性部分(例えば、脂質の脂肪酸のアシル鎖)を含む脂質二重層の疎水性領域を含み、対照的に、リポソームは、二重層の脂質の親水性表面に取り囲まれた完全に閉じられた水性の内側を含む。本発明の粒子の内側の疎水的な性質は、例えば、その二重層中の脂質分子間の相互作用によってか、またはその二重層のリーフレットの間の疎水性領域中への隔離によって、疎水性分子の取り込みを許容する。少なくとも1つの疎水性領域を含む生物活性因子は、この粒子の疎水性の内側中に取り込まれ得る。本明細書中で使用される場合、脂質二重層の疎水性領域中への生物活性因子の「取り込み」とは、この二重層の脂質分子の疎水性領域もしくは疎水性部分(例えば、二重層を形成する脂質の脂肪酸のアシル鎖)中への可溶化、またはその疎水性領域もしくは疎水性部分への結合、あるいはこの脂肪酸のアシル鎖との相互作用を呼ぶ。
本発明は、「粒子」(また本明細書中で「送達粒子」または「生物活性因子送達粒子」と称される)を提供し、この粒子は、1つ以上の型の脂質結合性ポリペプチド、1つ以上の型の二重層を形成する脂質を含む脂質二重層、および1つ以上の生物活性因子を含む。いくつかの実施形態において、送達粒子はまた、1つ以上の型の二重層を形成しない脂質を含む。この粒子を含む組成物もまた、提供される。1つの実施形態において、送達粒子および薬学的に受容可能なキャリアを含有する薬学的組成物が、提供される。
本明細書中で使用される場合、「脂質結合性ポリペプチド」は、脂質表面と安定な相互作用を形成し、そして本発明の粒子の脂質二重層を安定化するために機能し得る、任意の、合成ペプチドもしくは合成タンパク質、または天然に存在するペプチドもしくは天然に存在するタンパク質を称する。粒子は、1つ以上の型の脂質結合性ポリペプチドを含み得る(すなわち、単一粒子中の脂質結合性ポリペプチドは、同一であってもよく、2以上の異なるポリペプチド配列で構成されてもよい)。この脂質結合性ポリペプチドは、この粒子の周縁を取り囲む。
上記送達粒子は、1つ以上の生物活性因子を含む。本明細書中で使用される場合、「生物活性因子」は、生物学的(治療的または診断的が挙げられる)活性を有する、任意の化合物または任意の組成物を称する。生物活性因子は、医療上の処置、診断、または予防に有用である薬学的因子、薬物、化合物または組成物であり得る。
本発明の粒子は、脂質二重層を含み、この粒子は、一般的に、この粒子の内側から離れる方向を向く極性の頭部基、ならびに二重層を形成する脂質(単数または複数)および他の脂質成分(存在する場合)の疎水性部分を含む、この脂質二重層の疎水性領域を含む上記粒子の内側(すなわち、円形面の間の隙間)を含む円盤の円形の表面を有する。この二重層の端面における脂質分子の疎水性表面(生物活性因子送達粒子の円周の表面)は、上記で議論されるように、この粒子の脂質結合性ポリペプチドと接触する。粒子は、1つ以上の型の二重層を形成する脂質、または1つ以上の型の二重層を形成する脂質と1つ以上の型の二重層を形成しない脂質との混合物を含み得る。本明細書中で使用される場合、「脂質」は、有機溶媒に可溶であるかもしくは部分的に可溶であるか、または水相中に存在する場合、疎水的環境へと分離する、生物学的起源あるいは合成的起源の物質を称する。
本発明は、キメラの脂質結合性ポリペプチドを提供し、この脂質結合性ポリペプチドは、上記の送達粒子を調製するために使用され得る。キメラの脂質結合性ポリペプチドは、1つ以上の結合した「機能的部分」(例えば、1つ以上の標的部分、所望の生物学的活性を有する部分、精製を支援する親和性タグ、および/または特徴付けの研究もしくは局在性の研究のためのレポーター分子)を含み得る。生物学的活性を有する結合した部分は、上記送達粒子中に取り込まれる生物活性因子の生物学的活性によって、増大し得るかそして/または相乗効果を与えられ得る活性を有し得る。例えば、生物学的活性を有する部分は、抗菌(例えば、抗真菌、抗細菌、抗原生動物、静菌、静真菌、または抗ウイルス)活性を有し得る。1つの実施形態において、キメラの脂質結合性ポリペプチドの結合された機能的部分は、上記脂質結合性ポリペプチドが生物活性因子送達粒子中に取り込まれる場合、脂質二重層の疎水性表面と接触しない。別の実施形態において、結合された機能的部分は、上記脂質結合性ポリペプチドが生物活性因子送達粒子中に取り込まれる場合、脂質二重層の疎水性表面と接触する。いくつかの実施形態において、キメラの脂質結合性ポリペプチドの機能的部分は、天然のタンパク質に本来備わっているものである。いくつかの実施形態において、キメラの脂質結合性ポリペプチドは、細胞表面のレセプターもしくは他の細胞表面の部分によって認識されるリガンドもしくは配列、またはそれらのレセプターもしくは他の細胞表面の部分と相互作用し得るリガンドまたは配列を含む。
本発明のいくつかの実施形態において、このポリペプチドが、上記のような生物活性因子送達粒子中に取り込まれる場合、修飾が、この粒子の安定性を上昇させるか、または標的化能力を与えるように修飾された脂質結合性ポリペプチドが、提供される。いくつかの実施形態において、この修飾は、粒子の上記脂質結合性ポリペプチドが、粒子の円盤形構造またはコンフォメーションを安定化するのを可能にする。1つの実施形態において、この修飾としては、分子内ジスルフィド結合または分子間ジスルフィドの形成を可能にするアポリポタンパク質分子中へのシステイン残基の導入(例えば、部位特異的変異誘発による)が挙げられる。別の実施形態において、化学的架橋化剤が使用されて、アポリポタンパク質分子の間に分子間の連結が形成され、上記粒子の安定性を向上させる。分子間架橋は、この粒子からのアポリポタンパク質分子の解離を防ぐか、もしくは減少し、そして/またはこの粒子が、投与される個体内のアポリポタンパク質分子による置換を防ぐ。
本発明は、個体に対する生物活性因子の送達のための送達システムを提供し、このシステムは、上記のような生物活性因子送達粒子およびキャリアを含み、必要に応じて薬学的に受容可能なキャリアを含む。いくつかの実施形態において、この送達システムは、有効量の上記生物活性因子を含む。
本発明は、個体に対して生物活性因子を投与するための方法を提供する。本発明の方法は、脂質結合性ポリペプチド、脂質二重層、および生物活性因子を含む、上記のような送達粒子を投与する工程を包含し、この粒子の内側は、この脂質二重層の疎水性表面を含む。必要に応じて、治療有効量の上記粒子が、投与され、必要に応じて、薬学的に受容可能なキャリア中で、治療有効量の上記粒子が、投与される。一般的に、この粒子は、ネイティブなポアを制限した勾配ゲル電気泳動によって測定された場合、約7〜約29nmの直径を有する円盤形である。代表的に、この生物活性因子は、少なくとも1つの疎水性領域を含み、この疎水性領域は、上記脂質二重層の疎水性領域中に一体化され得る。
本発明の送達粒子は、標的化官能基(例えば、特定の細胞の型もしくは特定の組織の型、または感染性因子自体に対してこの粒子を標的化するための標的化官能基)を含み得る。いくつかの実施形態において、この粒子は、脂質結合性ポリペプチドまたは脂質成分に結合される標的部分を含む。いくつかの実施形態において、この粒子中に取り込まれるこの生物活性因子は、標的化能力を有する。
本発明は、生物活性因子送達粒子を処方するための方法を提供する。1つの実施形態において、二重層を形成する脂質および生物活性因子分子を含む混合物に脂質結合性ポリペプチド分子を添加する工程を包含するプロセスが、提供される。
本発明の粒子は、多様な条件下において長時間安定である(例えば、図5を参照のこと)。粒子、または本発明の粒子を含む組成物は、室温、冷蔵されて(例えば、約4℃)、または凍結されて(例えば、約−20℃〜約−80℃)で保存され得る。それらは、溶液中または乾燥された状態(例えば、凍結乾燥された状態)で保存され得る。生物活性因子送達粒子は、不活性な雰囲気下において凍結乾燥された状態、凍結された状態、または4℃にて溶液中で保存され得る。粒子は、個体に対する生物活性因子の投与の方法における使用のために、緩衝液(例えば、リン酸緩衝液または他の適切な緩衝液)のような液体媒体または例えば、薬学的に受容可能なキャリアのようなキャリア中に保存され得る。あるいは、粒子は、乾燥された形態、凍結乾燥された形態で保存され、次いで使用前に、液体媒体中に再構成され得る。
本明細書中に記載される試薬および粒子は、キット形態中に包装され得る。1つの局面において、本発明は、適切な包装中に送達粒子および/または送達粒子を調製するために有用な試薬を備えるキットを提供する。本発明のキットは、別個にか、または組み合わせにおいて以下のいずれかを備える:脂質結合性ポリペプチド(例えば、アポリポタンパク質)、リン脂質、生物活性因子、ベクター、試薬、酵素、宿主細胞ならびに/または組換え脂質結合性ポリペプチド(例えば、組換えアポリポタンパク質)および/もしくは脂質結合性ポリペプチドのキメラ(例えばアポリポタンパク質のキメラ)のクローニングおよび/または発現のための増殖培地、ならびに個体に対する投与のための送達粒子を処方するための試薬および/または薬学的に受容可能なキャリア。
(組換えApoA−Iの調製)
組換えApoA−Iを、Ryanら、(2003)Protein Expression and Purification 27:98−103に記載されるように調製し、そしてApoA−I−リン脂質−AmB粒子を調製するために、以下に記載するように使用した。
ApoA−I−リン脂質−AmB粒子を以下のように調製した:
7:3のモル比の、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)およびジミリストイルホスファチジルグリセロール(DMPG)を、クロロホルム:メタノール(3:1、v/v)中に溶解した。10mgの上記DMPC/DMPG混合物に、0.25mlのAmB(2mg/ml;酸性化したクロロホルム:メタノール(3:1、v/v)中に可溶化した)を添加した。この混合物を、N2ガス流下で乾燥して容器の壁上に薄いフィルムを形成した。その後、この乾燥した試料を、16時間凍結乾燥に供して、微量の溶媒を除去した。
この手順によって調製した粒子は、凍結乾燥した形態で3ヶ月を超えて安定であった。
UV/可視光走査を、ApoA−I−リン脂質粒子(上記のように調製したが、AmBを添加しなかった)に対して行い、そしてAmB含有粒子についての走査と比較した。図1は、AmBを含まない粒子についての走査を示す。観察された唯一のピークは、280nm付近におけるタンパク質のピークであった。図2は、上記のように調製したAmB含有粒子についての走査を示す。280nm付近におけるピークに加えて、多くのさらなるピークが、300〜400nm領域のスペクトル中に観察され、AmBの存在を確認した。遊離のAmBは、水性媒体に対して不溶性であり、そしてそれは、図2に観察されるスペクトルの特性とは異なるスペクトルの特性を有する。Maddenら、(1990)Chemistry and Physics of Lipids,52:189−98。
ApoA−I−DMPC/DMPG−AmB粒子を、実施例1に記載したように調製し、そしてこの複合体の抗真菌活性を決定するために使用した。S.cerevisiaeの培養物を、種々の量のApoA−I−DMPC/DMPG−AmB粒子(0〜25μg AmB/ml)の存在下で、YPD培地において増殖させた。この培養物を、30℃にて16時間増殖させ、そして培養物の増殖の程度を分光光度的にモニタリングした。図8に示すように、このAmB含有粒子は、用量依存様式での真菌増殖の阻害において非常に有効であった。
組換えApoE3NT末端ドメイン(ApoE3NT)を、Fisherら、(1997)Biochem Cell Biol 75:45−53のように調製した。ApoE3NT−AmB含有粒子を、実施例1に記載したようなコール酸透析法によって調製し、そしてそれを、長期安定性を評価するために使用した。
ApoA−I−POPC粒子を実施例1に記載したコール酸塩透析方法を使用して、調製した。ApoA−I−POPC粒子のネイティブなPAGE勾配ゲル分析は、図4に示される。AmBを含まない粒子は、レーン1に示され、そしてAmBを含む粒子は、レーン2に示される。このゲルは、上記粒子中へのAmBの取り込みが、その大きさを変えないことを示す。しかし、このゲルは、POPC含有粒子が、DMPC/DMPG粒子(レーン3に示される)とは異なる大きさであることを示唆する。
ApoA−I、AmB、egg PC、DPPG、およびコレステロールをマイクロフルイダイザーの試料保持器中で合わせ、そしてマイクロフルイダイザープロセッサーの反応チャンバーに18,000psiにて通過させた。生じた溶液を回収し、そして粒子処方物、疎水性物質の取り込み、大きさ、および安定性に関して特徴付けした。約16nmの直径のAmB含有粒子を入手し、この粒子は、凍結乾燥および水性溶媒における再構成に対して安定であった。
AmB含有リン脂質小胞の懸濁液を、DMSO中のAmBの20〜40mg/ml溶液のアリコート(2.5mgのAmBに相当する)を、7:3のモル比のDMPC:DMPGを含む先に形成したリン脂質の水性分散物に添加することによって調製した。この小胞をこのリン脂質の液相転移温度(約24℃)までゲルにてインキュベートした。4mgのアポリポタンパク質の添加は、AmB含有生物活性因子送達粒子の形成と一致して、試料の濁度における時間依存的減少を生じた。試料の完全な透明性を、21〜25℃にて1〜20分間の穏やかな浴での超音波処理または24℃にて超音波処理なしで4〜16時間の穏やかな浴によって達成した。生じた粒子は、>90%のAmBの取り込み効率(すなわち、送達粒子中に回収されるAmB出発物質の%)を示し、そして濾過、遠心分離、または透析の際に、物質は喪失しなかった。他の試験は、同様の結果が、5mg/10mgのリン脂質と同じ高さに調整したAmB濃度で達成され得ることを示した。この手順は、試験した、5つのアポリポタンパク質(ApoA−I、ApoE3NT、Bombyx mori ApoIII、および抗真菌ペプチドを含むC末端伸長を含むヒトApoA−Iの改変形態、ヒスタチン 5、およびS.cerevisiaeのα−接合因子ペプチドを含むC末端伸長を含むヒトApoA−Iの改変形態)のいずれによっても等しく良好に作用した。
実施例6に記載した方法を使用する生物活性因子送達粒子中への生物活性因子の取り込みを、以下のような、Schoutenら、(1993)Molecular Pharmacology 44:486−492によって調製した「neo−HDL」粒子中への取り込みと比較した:3mgの卵黄ホスファチジルコリン、0.9mgのコレステロール、および1.5mgのAmB(クロロホルム中に溶解した)を、20mlのガラスバイアル中で混合し、そしてこの溶媒を、窒素流下でエバポレートした。脱気し、そして窒素で飽和した10mlの超音波処理緩衝液(10mMのTris HCI(pH8.0)、100mMのKCI、1mMのEDTA、および0.025%のNaN3)を添加し、そしてこのバイアルの内容物を、窒素流下で、Macrotip(14μmの平均出力)によって超音波処理した。温度を、41℃より高く、かつ50℃以下に維持した。この超音波処理を60分後に停止し、そして温度を、42℃に調整した。超音波処理を続け、そして20mgのApoA−I(2mlの4M尿素中に溶解した)を、10等量で10分間にわたって添加した。全てのタンパク質を添加した後、超音波処理を42℃にて30分間続けた。
ApoA−I−AmB粒子(実施例6のように調製した)およびAmBの市販のリポソーム処方物(AmBisome(登録商標))の抗真菌活性を、酵母(S.cerevisiae)の増殖を阻害するそれらの能力に関して比較した。図10のデータは、ApoA−I−AmB生物活性因子送達粒子が、S.cerevisiaeの増殖を、同じ量の、AmB処方物(AmBisome(登録商標)のような)より、より効果的に阻害したことを示す。ApoA−I−AmB生物活性因子送達粒子は、1μg/mlにて90%の増殖阻害を達成したが、この阻害のレベルは、25μg/mlのAmBisome(登録商標)を必要とした。
カンプトテシン含有生物活性因子送達粒子を、以下のように調製した:7:3のモル比のDMPC:DMPG(全量5mg)を、緩衝液(20mMのリン酸ナトリウム、pH7.0)中に、1分間ボルテックスすることによって分散して、リン脂質二重層小胞の分散物を生成した。DMSO中の10μlの10mg/mlのカンプトテシン溶液を、このリン脂質二重層の分散物に添加した。その後、2mgの組換えヒトアポリポタンパク質A−I(20mMのリン酸ナトリウム中の0.5mlの4mg/ml溶液、pH7.0)を添加し、そしてこの試料を、その後、超音波処理に供した。その後、この清澄化した試料を13,000×gにて3分間遠心分離し、そしてこの上清を除去し、そして4℃にて保存した。
AmB含有生物活性因子送達粒子の調製物を、以下のように、凍結割断の電子顕微鏡検査のために調製した:DMPC:DMPG(7:3のモル比)のAmB生物活性因子送達粒子(3mg/mlのタンパク質)の試料(実施例6にあるように調製した)を、サンドウィッチ技術を使用してクエンチし、液体窒素は、プロパンを冷却した。凍結固定した試料を、加工する前に、2時間未満、液体窒素中に保存した。この割断プロセスをJOEL JED−900フリーズエッチング装置において実施し、そしてこの露出した割断平面を25〜35度の角度にて30秒間Ptで覆い、そして35秒間、炭素で覆った(2kV/60〜80mA、1×10−5Torr)。この方法で作製したレプリカを、24時間、濃縮した発煙HNO3で浄化し、その後、少なくとも5回、新しいクロロホルム/メタノール(重量で1:1)と一緒に攪拌を繰り返した。この方法で浄化したレプリカを、JOEL 100 CXまたはPhilips CM 10電子顕微鏡上で試験した。
AmB含有生物活性因子送達粒子のインビボ抗真菌活性は、以下のように評価される。
6〜8週齢の雌のBALB/cマウス(20〜25g)が、標準的な実験室の条件下で、飼育され、そして維持される。
3匹のマウスの群の各々は、10mMのリン酸ナトリウムを用いてpH7.4に緩衝した生理食塩水中の、AmB含有生物活性因子送達粒子中の用量(例えば、1mg/kg、2mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、または15mg/kgのAmB)、またはAmBを含まないコントロール粒子を受ける。単回用量は、0.1mlの量を腹腔内に投与される。予備的な研究は、この生物活性因子送達粒子が、これらの条件下において、完全に溶解性であることを示した。
AmB含有粒子の治療域は以下のように、決定され、そしてAmBisome(登録商標)と比較される。
マウスは、処置の最後の日の後、1日目に屠殺される。この腎臓および脳は、無菌的に取り除かれ、そして重量が量られる。組織は、ホモジェナイズされ、そして通常の生理食塩水中に連続的に希釈される。このホモジネートは、コロニー形成単位(CFU)を決定するために、PDA(ポテトデキストロース寒天)プレート上で48時間培養される。組織のCFU/gの真菌負荷が、決定される。
腎臓または脳における生菌および平均CFUの差は、適切な統計学的検定を使用して比較される。
血液の試料、肝臓の試料、腎臓の試料、肺の試料、および脳脊髄液の試料は、感染したマウスから、0.8mg/kgの用量および2.0mg/kgの用量で、AmB生物活性因子送達粒子またはAmBisome(登録商標)の静脈内注入後、10分、2時間、8時間、および24時間の時点にて採取される。マウスは、一般的な麻酔下におかれ、全血は、腋下の血管から採取される。開胸が行われ、そして組織試料は、通常の生理食塩水を用いて灌流され、次いで外科的に除去される。組織は、1−アミノ−4−ニトロナフタレンを含むメタノールを用いてホモジェナイズされる。血清および組織ホモジネートの上清は、分析まで保存される。各サンプル中のAmBの濃度は、Granichら、(1986)Antimicrob.Agents Chemother.29:584−88に記載されるように、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)によって決定される。要約すると、血清試料(0.1ml)は、1mlあたり1.0mgの内部標準(1−アミノ−4−ニトロナフタレン)を含む1.0mlのメタノールと組み合わされ、そしてボルテックスすることによって混合される。遠心分離後、この上清は、減圧下で乾燥され、その後、HPLCカラム(C18逆相)上への注入のために0.2mlのメタノールで再溶解される。計量された水分を含む組織試料は、1mlあたり5.0mgの内部標準を含む10容量のメタノール中でガラスのホモジェナイザーによってホモジェナイズされ、そして遠心分離される。この移動相は、アセトニトリルの混合物および10mMの酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.0;11:17(vol/vol))の混合物である(1.0ml/分の流速)。AmBの濃度は、内部標準のピークの高さに対するAmBのピークの高さの比によって決定される。
生物活性因子送達粒子は、上記脂質結合性ポリペプチド成分に結合するVIP標的化部分を用いて調製される。
研究を行って、AmB含有生物活性因子送達粒子の安全性および毒性を決定した。この粒子を、実施例6にあるように調製した。
実験を行って、AmBの生物活性因子送達粒子中への処方が、その抗真菌効果を損なうか否かを決定した。
Claims (22)
- 脂質結合性ポリペプチド、脂質二重層、および生物活性因子を含有する生物活性因子送達粒子を含む、個体において真菌感染を処置するための組成物であって、該生物活性因子は、少なくとも1つの疎水性領域を含む抗真菌剤であり、ここで、該抗真菌剤は、非ポリペプチドであり、該送達粒子は親水性のコアを含まず、該脂質二重層の内側は、疎水性領域を含み、該生物活性因子は、該脂質二重層の疎水性領域と結合し、該脂質結合性ポリペプチドがクラスAの両親媒性のα−ヘリックス構造モチーフおよび/またはβ−シートモチーフを含み、そして、該粒子が、該脂質結合性ポリペプチドの該α−ヘリックスおよび/またはβ−シートによって取り囲まれる、平らであり、円板状の脂質二重層を有する円盤形であり、該脂質結合ポリペプチドは、該粒子の周縁のまわりで該脂質二重層の疎水性表面に結合し、該組成物は、10mg/kg以下の投薬量で該個体に投与され、該生物活性因子はアンホテリシンBであることを特徴とする、組成物。
- 前記円盤形粒子は、7nm〜29nmの直径を有する、請求項1に記載の組成物。
- 前記生物活性因子の疎水性領域は、前記脂質二重層の内側において疎水性表面と結合する、請求項1〜2のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記脂質結合性ポリペプチドは、アポリポタンパク質である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記アポリポタンパク質は、交換可能なアポリポタンパク質である、請求項4に記載の組成物。
- 前記アポリポタンパク質は、ヒトアポリポタンパク質A−Iである、請求項5に記載の組成物。
- 前記アポリポタンパク質は、機能的部分を含むキメラアポリポタンパク質である、請求項4に記載の組成物。
- 前記機能的部分は、標的部分である、請求項7に記載の組成物。
- 前記機能的部分は、生物学的活性を含む、請求項7に記載の組成物。
- 前記アポリポタンパク質は、前記粒子の安定性を向上するために修飾されており、該修飾が、分子間または分子内のジスルフィド結合を形成するアポリポタンパク質分子中へのシステイン残基の導入;およびアポリポタンパク質分子の間に分子間の連結を形成する化学的架橋剤の使用からなる群より選択される、請求項4に記載の組成物。
- 前記修飾は、分子間ジスルフィド結合または分子内ジスルフィド結合を形成するシステイン残基の導入を包含する、請求項10に記載の組成物。
- 前記脂質二重層は、リン脂質を含む、請求項1〜11のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記リン脂質は、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)およびジミリストイルホスファチジルグリセロール(DMPG)を含む、請求項12に記載の組成物。
- 薬学的に受容可能なキャリアをさらに含有する、請求項1〜13のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記組成物は、徐放のために処方される、請求項14に記載の組成物。
- 個体に対して生物活性因子を投与するための、請求項14に記載の組成物。
- 前記組成物は、治療有効量の前記生物活性因子を含有する、請求項16に記載の組成物。
- 前記組成物は、非経口投与のために適切である、請求項16〜17のいずれか1項に記載の組成物。
- 前記非経口投与は、静脈内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、経粘膜投与、および鞘内投与からなる群より選択される、請求項18に記載の組成物。
- 前記組成物は、エアロゾルとして投与されるために適切である、請求項16または17に記載の組成物。
- 前記組成物は、徐放のために処方される、請求項16または17に記載の組成物。
- 個体において真菌感染を処置するためのキットであって、請求項14、または15に記載の組成物、および該個体に前記生物活性因子を投与するための方法において使用する指示書を備える、キット。
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