JP4653979B2 - 結晶化を介するモキシデクチンの精製方法 - Google Patents

Description

本発明は、一般に、薬理特性を有し、獣医の使用についての化合物の精製に関する。さらに詳しくは、本発明はモキシデクチン（ｍｏｘｉｄｅｃｔｉｎ）の新規な精製方法、およびそれにより得られるモキシデクチンに関する。

本発明はモキシデクチンとして知られている駆虫薬の精製に関する。モキシデクチンの化学名は、［６Ｒ，２３Ｅ，２５Ｓ（Ｅ）］−５−Ｏ−デメンチル−２８−デオキシ−２５−（１，３−ジメチル−１１−ブテニル０−６，２８−エポキシ−２３−９メトキシイミノ）ミルベマイシンＢである。モキシデクチンの組成物およびその種々の使用が、Ａｓａｔｏらの米国特許第４９１６１５４号に、およびサザーランドらの米国特許第４９００７５３号に記載されている。さらには、モキシデクチンについての形態学的特性、化合物および製法も、米国特許第５１０６９９４号およびその対応する欧州特許、ＥＰ１７０００６に開示されている。モキシデクチンの精製に使用されるもう一つ別の方法が米国特許第４９８８８２４号に開示されている。

モキシデクチンは、温血動物ならびに農作物における蠕虫、外部寄生虫、昆虫、コエダニおよび線虫の感染および蔓延の防止、処理または制御における駆虫薬として有用である。ウシおよびヒツジの農場主にとって、ダニおよび蠕虫のような寄生虫を制御するのに特に有用である。モキシデクチンは、皮下注射により、またはピルもしくは錠剤の形態にて経口的に、局所的または「ドレンチ」を含む、種々の方法にて家畜および他の動物に投与することができる。

現在、モキシデクチンを精製するのに用いられる２つの方法が米国特許第４９８８８２４号の実施例１７および１９に記載されている。実施例１７および１９の方法により、各々、８９％および７１％の精製レベルがもたらされる。モキシデクチンを精製すると現在知られており、かつ用いられるもう一つ別の方法が、以下の工程：モキシデクチンをシクロメチルヘキサン（ＭＣＨ）に溶かし、水をそのモキシデクチン／ＭＣＨ溶液に添加し、長期間にわたってモキシデクチンの沈殿物を得る、を含むものである。この方法により純度が９０−９２％の生成物を得ることができるが、終えるまでに何日もかかる。現行の方法は費用集約的で、時間のかかるものであり、そうして得られる最終生成物の純度は多くの用途には十分に高いものではない。

純度がより高ければ、動物ならびにヒトで使用するための医薬製剤の適当な処方が可能となるであろう。無定形モキシデクチンを高純度の結晶性モキシデクチンに変換させる方法もまた当業者に有用であろう。
当業者が現在利用可能な別の方法により、高純度を達成することもできるが、典型的には、クロロホルムおよびジクロロメタンなどの有害な溶媒を利用することとなるであろう。そのような方法はまた、順相および逆相クロマトグラフィー工程（シリカ媒体）などのより複雑なプロセスを含みうる。
したがって、当該分野にて必要とされるものは、費用効率が高く、時間がそれほどかからないでモキシデクチンを精製し、現在利用可能な純度よりも高い純度の最終生成物を生成する、新しい方法である。また、動物、さらにはヒトで使用するための用途をも含め、多種の医薬的用途に用いるのに安全な、当該分野にて利用可能な純度よりも高い純度のモキシデクチンが必要とされている。

米国特許第４９１６１５４号 米国特許第４９００７５３号 米国特許第５１０６９９４号 米国特許第４９８８８２４号

発明の詳細な説明

（発明の要約）
本発明の一の具体例において、モキシデクチンを第一の溶媒と合してモキシデクチン溶液を得ることを含む、モキシデクチンの精製方法が提供される。該溶液をついで約５０℃の温度でまたはそれより低い温度で濃縮し、その後で該モキシデクチン溶液の温度を約４０℃ないし３０℃の範囲内の温度に冷却する。第二の溶媒を該モキシデクチン溶液と合し；その後、該モキシデクチン溶液からモキシデクチン結晶が生じるように、温度を約３０℃ないし１０℃の範囲内に下げながら、その溶液をかき混ぜる。ついで、該結晶を該モキシデクチン溶液より精製し、乾燥させる

さらなる具体例において、固形モキシデクチンを精製する方法は、固形モキシデクチンをメチルシクロヘキサン（ＭＣＨ）に溶かし、それによりモキシデクチン／ＭＣＨ溶液を得ることを含む。次に、モキシデクチン／ＭＣＨ溶液を、真空下、約４５℃ないし５０℃のポット温度で濃縮する。ｎ−ヘプタンをモキシデクチン／ＭＣＨ溶液に、かき混ぜながら、ｎ−ヘプタンに対するＭＣＨの割合を約１：４にて添加する。得られた溶液を約３０℃で約４−５時間放置し、その後、モキシデクチン結晶が生じるように、該溶液を約１０℃の温度で約２−３時間放置する。そうして得られた結晶性モキシデクチンを濾過し、真空下で乾燥させる。

本発明はまた、無定形モキシデクチンからモキシデクチン結晶を生成する方法を提供する。この具体例によれば、まず無定形モキシデクチンを第一の溶媒に加えてモキシデクチン溶液を得る。次に、蒸留操作を用いて、その溶液について約４５−５０℃の範囲内にある温度で、その溶液中に含まれるモキシデクチンの重量％が約４０−４４％の範囲内にあるようにする。ついで、該溶液を冷却し、該溶液について約３０−３５℃の範囲内にある温度で第二の溶媒をこのモキシデクチン溶液に加える。かき混ぜが約２−８時間にわたって大きくなるように該溶液をかき混ぜるが、次に該溶液の温度をその間にわたって約１０℃に下げて、モキシデクチンが結晶化するようにする。そのモキシデクチン結晶を乾燥させて回収する。

本発明はまた、本明細書に記載の種々の具体例に従って精製される、約９４−９６％またはそれ以上の純度の、実質的に溶媒不含であると記載されており、獣医的またはヒト医療の分野における用途を含め、広範囲の医薬的用途に適する、モキシデクチン結晶を提供する。
加えて、本発明は、広大な範囲の駆虫薬および抗寄生虫薬の用途にて、適宜効果的な、本発明にて得られた結晶性モキシデクチンを用いるモキシデクチンの組成物を提供する。
本発明のこれらのおよび他の目的は、以下に示される発明の詳細な記載からさらに明らかになるであろう。

（発明の詳細な記載）
結晶形態のモキシデクチンは、都合よくは、多くの獣医薬の処方に配合することができる。これらの獣医の処方は、家禽類、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウサギ、ウマ、イヌ、ネコおよびヒトなどの温血動物ならびに農作物における病気を妨げ、かつ制御するための駆虫薬、外部寄生虫薬、殺虫剤、ダニ駆除剤および線虫駆除剤として有用である。モキシデクチンは局所、経口、皮下および種々の他の獣医薬および医薬処方に配合するのに適している。医薬および獣医薬処方は、注射用および徐放性処方、溶液、懸濁液、ボーラス、経口用錠剤および動物の駆虫薬として用いるための液体ドレンチを含む、種々の方法にて投与することができる。

本発明はモキシデクチンと第一の溶媒の溶液を製造することを含む。モキシデクチンは当業者に利用可能などのような供給源からも得ることができる。好ましくは、モキシデクチンは精製していないか、または「原料」の状態であるか、あるいは無定形の状態にあるのが好ましい。典型的には、モキシデクチンを生成するのに利用することができる小規模または大規模（工業的）な方法から誘導してもよい。モキシデクチンはアルカリ性加水分解によるなどのデブロッキング化学反応より得ることができる。限定を目的としない一例として、米国特許第４９８８８２４号に記載の方法はモキシデクチンを生成するための有用な方法である。典型的には、以下に記載の方法に有用なモキシデクチンは、初期の（乾燥）純度が、多くが約９０−９２％の範囲内にある、約９２％未満であろう。

第一の溶媒は、好ましくは、メタノール、エタノール、メチルシクロヘキサン、ヘキサン、ベンジルアルコール、トルエン、ヘプタンおよびそれらの混合液からなる群より選択される。モキシデクチン溶解能を有する他の溶媒も利用することができる。さらには、費用および安全性も適当な溶媒を選択するのに影響を及ぼすであろう。最も好ましい溶媒は極微量にて生理学的に許容され、かくして医薬製剤にて微量にて含まれるのに適するであろう。これらのうち、第一の溶媒としてシクロメチルヘキサン（ＭＣＨ）を用いるのが好ましい。モキシデクチンを約１：１ないし１：２の範囲内にある重量比で第一の溶媒と合してモキシデクチン溶液を生成する。

モキシデクチンと第一の溶媒を合した後、得られたモキシデクチン溶液を好ましくは真空下で濃縮する。この濃縮工程の結果として、モキシデクチン溶液中のモキシデクチンの割合が約４０−５０重量％と、好ましくは約４０−４４重量％となる。その溶液中でのモキシデクチンの濃縮は、典型的には、約５０℃またはそれより下の温度で行う。約４０−５０℃の範囲内にある温度が好ましく、約４５−５０℃の範囲内にある温度が望ましい。許容されるプロトコルを用いての蒸留操作が望ましいモキシデクチン濃度を得る好ましい手段である。もう一つ別の具体例において、モキシデクチン／第一の溶媒（例えば、ＭＣＨ）溶液を、約４５℃ないし５０℃のポット温度、真空下で蒸留させる。真空にし、温度範囲を調整して、カップリング変性などの熱作用を最小にする。

その後、濃縮したモキシデクチン溶液の温度を冷却し、約３０℃に調節する。約３０−４０℃の範囲内で変化することもできる。
次に、第二の溶媒をモキシデクチン溶液に添加する。この第二の溶媒は好ましくは非極性有機溶媒である。さらに好ましくは、第二の溶媒はヘキサン、ヘプタン、トルエン、イソオクタン、モキシデクチンの溶解能を有する他の非極性有機溶媒またはそれらの混合液からなる群より選択される。このうち、ｎ−ヘキサンおよびｎ−ヘプタンが特に好ましいことが多い。他の適当な非極性有機溶媒は当業者により選択されてもよく、結晶化される分子種の物理および化学特性を評価することにより確認することができる。その上、費用および安全性も適当な非極性有機溶媒を選択するのに影響を及ぼすであろう。最も好ましい非極性有機溶媒は極微量にて生理学的に許容され、かくして医薬製剤にて微量にて含まれるのに適するであろう。

第二の溶媒を第一の溶媒に対して約２：１ないし６：１の範囲内の重量比にて加える。この重量比は約３：１であることがより好ましい。好ましくは、第二の溶媒を、攪拌によるなどの、かき混ぜながら添加する。
クロロホルムおよびジクロロメタンなどのより危険性の高い溶媒は、本発明の方法の一部として避けるのが好ましい。

第二の溶媒を添加した後、モキシデクチン溶液をさらに約３０℃−１０℃の間の温度に、さらに好ましくは約２５−１０℃の間に調節する。さらに望ましくは、溶液の温度を、好ましくは、ゆっくりと攪拌するなどのかき混ぜの下で、今説明した範囲の上端から下端に徐々に下げる。本発明の方法のこの部分の操作にて、該溶液からモキシデクチン結晶が生成するであろう。好ましくは、約２ないし１２時間の期間、より好ましくは約３ないし６時間の期間を用いて最適な結晶処方を行う。このこと自体が現状に比べて有利な点であり、現状においては結晶化に際して４８時間までまたはそれ以上にて供する必要があることが多い。

その後、モキシデクチン結晶を該溶液より濾過する。これは緩やかにかき混ぜながら達成することもできる。一度得られたならば、そのモキシデクチン結晶を好ましくは真空下で乾燥させる。その乾燥させたモキシデクチン結晶は、望ましくは、実質的に溶媒不含とすべきであり、すなわち、確立された医薬品の中に最大ほんの微量の残留溶媒を含むだけとすべきである。

本発明の精製方法に従って得られたモキシデクチン結晶は、典型的には、約９４％−９６％の範囲内にある純度を有するであろう。かかる純度は既知の合成プロトコルを用いて無定形モキシデクチンを製造する結果として得られることが多い９０％−９２％の初期純度よりも高い。いずれにしても、本発明は、最終純度を、モキシデクチンについてその開始純度よりも約１．５ないし１０％またはそれ以上、さらに好ましくは約２ないし６％高くすることを目的とする。純度は許容されるプロトコルを用いて高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。純度を測定するのに当該分野にて利用可能な他の方法を利用してもよい。

本発明のモキシデクチン結晶は、多種の医薬的用途、特に獣医薬に利用することができる。かくして、上記した方法に従って得られるモキシデクチンは数種類の抗寄生虫薬、外部寄生虫薬および駆虫薬に配合してもよく、ならびに他の関連する用途に用いてもよい。
所望により、純度を最適とするために、本発明の方法を付加的に１またはそれ以上の回数繰り返してもよい。
次の実施例は本発明の１またはそれ以上の態様を説明するものであり、単に例示を目的として提供されるものであって、発明の範囲を限定するものと解釈すべきではない。

（実施例）
実施例１
表１は、該方法の種々の態様を変えながら、本発明の操作により得られた精製の結果を報告する。

＊（単離した後のＭＴＭ（モキシデクチン・テクニカル・マテリアル）の純度％は溶媒不含の純度である。）
ＴＳ＝全固形物

本発明は、米国特許第４９８８８２４号の実施例１７および１９に説明されているような、モキシデクチンを精製するのに現在使用されている方法に比べていくつかの有利な点を付与する。本発明はおよそ数時間の間に達成することができ、それに対して現在使用されている方法は終えるのに数日を必要とするかもしれない。本発明は約９４％ないし９６％の純度の結晶性モキシデクチン製品を生成するのに対して、現在使用の方法は純度が９２％未満の最終生成物をもたらす。加えて、本発明は現在使用されている方法と比べて費用節減をもたらす。

本発明のさらなる利点はバッチ生成に付随するものである。本発明を利用することで、所定の規格標準に十分に合致するほど純粋でない、あるいは分解された、モキシデクチンを回収できる。回収は、そうしなければ廃棄されるであろうバッチを取っておく一方で、単に結晶化プロセスを繰り返し、そうして所定の規格標準に合致するようにモキシデクチンの純度を増加させることにより達成されうる。

本発明の意義をより明確にするために、実施例を示す。これらの実施例は単なる例示であって、何ら発明の範囲あるいは基本原理を限定するものと解釈すべきではない。実際、本明細書に示されている修飾に加えて、本発明の種々の修飾が実施例および本明細書の記載から当業者に明らかとなるであろう。そのような修飾も、特許請求の範囲内にあることを意図とする。

Claims (24)

1. ａ）モキシデクチンをメチルシクロヘキサン（ＭＣＨ）と合してモキシデクチン溶液を得；
   ｂ）該溶液を ５０℃の温度でまたはそれより低い温度で濃縮し、その後で該モキシデクチン溶液を ４０℃ないし３０℃の範囲内にある温度にまで冷却し；
   ｃ）ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサンまたはその混合液を該モキシデクチン溶液と合し、ここでｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサンまたはその混合液はメチルシクロヘキサンに対して２：１ないし６：１の重量割合で存在し；ついで
   ｄ）該モキシデクチン溶液からモキシデクチン結晶が生じるように、温度を ３０℃ないし１０℃の範囲内に下げながら、その溶液をかき混ぜ；
   ｅ）該結晶を該モキシデクチン溶液より濾過し；そして
   ｆ）該結晶を乾燥させる
   ことを含む、モキシデクチンの精製方法。
2. 乾燥させた結晶が最低 ９４％の純度を有するところの、請求項１記載の方法。
3. 乾燥させた結晶が ９４−９６％の純度を有するところの、請求項２記載の方法。
4. モキシデクチン溶液が ４０−５０％の全固形物（ＴＳ）濃度範囲を有するところの、請求項１記載の方法。
5. モキシデクチン溶液が ４０−４４％の全固形物（ＴＳ）濃度範囲を有するところの、請求項４記載の方法。
6. ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサンまたはその混合液をかき混ぜながら添加するところの、請求項１記載の方法。
7. モキシデクチン溶液のかき混ぜを、ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサンまたはその混合液を添加しながら、１５−３０ｒｐｍの速度で行い、その後で該モキシデクチン溶液のかき混ぜ速度を５０−７０ｒｐｍの速度にまで上昇させるところの、請求項６記載の方法。
8. 工程ｄ）にて温度を ２５から１０℃に下げるところの、請求項１記載の方法。
9. 温度を ２時間ないし１２時間の時間枠にわたって下げるところの、請求項８記載の方法。
10. 温度がその時間枠を通して徐々に下げられるところの、請求項９記載の方法。
11. 該ｎ−ヘプタンがｎ−ヘプタン：ＭＣＨについて ３：１の重量割合にてモキシデクチン／ＭＣＨ溶液に添加されるところの、請求項１記載の方法。
12. 該ｎ−ヘキサンがｎ−ヘキサン：ＭＣＨについて ３：１の割合にてモキシデクチン／ＭＣＨ溶液に添加されるところの、請求項１記載の方法。
13. 工程ｂ）にて溶液を真空下で濃縮するところの、請求項１記載の方法。
14. 工程ｂ）にて溶液を ４０ないし５０℃の範囲内にある温度で濃縮するところの、請求項１３記載の方法。
15. 工程ｂ）にて溶液を ４５ないし５０℃の範囲内にある温度で濃縮するところの、請求項１４記載の方法。
16. 工程ａ）にてモキシデクチンが無定形モキシデクチンであるところの、請求項１記載の方法。
17. モキシデクチンがデブロッキング化学反応より得られるところの、請求項１６記載の方法。
18. 化学反応がアルカリ性加水分解反応であるところの、請求項１７記載の方法。
19. 無定形モキシデクチンが ９０−９２％の純度を有するところの、請求項１８記載の方法。
20. モキシデクチンを １：１ないし１：２の重量比にてＭＣＨと合すところの、請求項１記載の方法。
21. ａ）固形モキシデクチンをメチルシクロヘキサン（ＭＣＨ）に溶かしてモキシデクチン／ＭＣＨ溶液を得；
    ｂ）該モキシデクチン／ＭＣＨ溶液を、真空下、 ４５℃ないし５０℃のポット温度で濃縮し；
    ｃ）ｎ−ヘプタンをモキシデクチン／ＭＣＨ溶液に、ｎ−ヘプタン：ＭＣＨを、かき混ぜながら、 ４：１の割合にて添加し；
    ｄ）得られた溶液を ３０℃で ４−５時間放置し；
    ｅ）モキシデクチン結晶が生じるように、該溶液を １０℃の温度で ２−３時間放置し；そして
    ｆ）該結晶性モキシデクチンを濾過し、真空下で乾燥させる、
    ことを含む、固形モキシデクチンの精製方法。
22. 結晶性モキシデクチンの純度が少なくとも ９４−９６％であるところの、請求項２１記載の方法。
23. 無定形モキシデクチンからモキシデクチン結晶を生成する方法であって、
    ａ．無定形モキシデクチンをメチルシクロヘキサン（ＭＣＨ）に加え、モキシデクチン溶液を得；その後
    ｂ．その溶液について ４５−５０℃の範囲内にある温度で、その溶液中に含まれるモキシデクチンの重量％が ４０−４４％の範囲内にあるようにし；
    ｃ．該溶液を冷却し、該溶液について ３０−３５℃の範囲内にある温度でｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサンまたはその混合液をこのモキシデクチン溶液に加え、ここでｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサンまたはその混合液はメチルシクロヘキサンに対して２：１ないし６：１の重量割合で存在し；
    ｄ．かき混ぜが ２−８時間にわたって大きくなるように該溶液をかき混ぜるが、該溶液の温度をその間にわたって １０℃に下げて、モキシデクチンが結晶化するようにし；そして
    ｅ．そのモキシデクチン結晶を乾燥させる
    ことを含む、方法。
24. モキシデクチン結晶が無定形モキシデクチンよりも少なくとも ２−５％純粋であるところの、請求項２３記載の方法。