JP4626081B2 - Pancreatic lipase inhibitor - Google Patents

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Description

【0001】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特定の植物を原料として使用した膵臓リパーゼ阻害剤、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤、及びその利用に関するものである。より詳しくは、アカショウマ等のチダケサシ属に属する植物を含有してなる膵臓リパーゼ阻害剤に関し、参考として、キキョウを含有してなる、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤、及びこれらを用いた食用組成物に関する。
【0002】
【従来の技術】
近年、欧米型の食事形態や過食による摂取エネルギーの増加と運動不足による消費エネルギーの減少との格差が増大し、肥満体形が増えており、肥満は生活習慣病の発症要因として注目されている。一般的に、肥満状態とは、摂取エネルギーのうち運動等の諸活動によっても消費されない糖質や脂質等のエネルギー源が生体組織とくに皮下脂肪組織に異常に蓄積された結果、体重が骨格系あるいは生理機能の限界を超えて増加した状態をいう。肥満状態が慢性化すると糖尿病、動脈硬化症、脂肪肝、胆石症、腎臓障害等の疾患を合併症として起こしやすくなるといわれている。
【0003】
肥満を防止するために、医療分野における治療や予防はもとより、日常的に摂取する食事を通して肥満を予防する試みがこれまでに数多くなされてきた。すなわち、脂肪の代謝や燃焼を促進したり、体脂肪の蓄積を抑制することをねらった食品用素材として、L−カルニチン又はこれを含む畜肉ペプチド(特開平7−196485号、特開平10−66515号、特開2000−256200号各公報)、藻類の抽出物(特開2000−72642号公報)、果実ポリフェノール(特開平10−330278号公報)、共役ポリエン脂肪酸(特開2000−355538号公報)、特定のアミノ酸類とキサンチン誘導体の混合物(特開平10−330264号公報)、大豆や卵黄のリン脂質(特開平10−84880号公報)等が提案されている。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、これらの素材は実際的には効果が低かったり、実用的ではない簡単な実験結果に基づくものであったり、あるいは通常の食事形態において多量に摂取しなければならず、いずれも十分に満足できる効果を発揮し得るものではなかった。かかる現状に鑑み、本発明では、肥満を防止するために、食事で摂取する脂肪の吸収を効率的に阻害し、あるいは生体組織中の脂肪の代謝を有効に促進させ得る強力な抗肥満作用を有する天然物由来の素材を提供し、これを産業上有用に活用できる態様の組成物として提供することを課題とした。
【0005】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前記課題を解決するために、多数の植物原料及びそのエキス類と脂質代謝との関連性について鋭意検討を行った結果、アカショウマをはじめとするチダケサシ属に属する植物とキキョウが本発明の所望の効果を顕著に奏することを見出し、本発明を完成するに至った。
【0006】
すなわち、本発明によれば、チダケサシ属に属する植物を含有してなることを特徴とする膵臓リパーゼ阻害剤が提供される。なお、本発明の参考として、キキョウを含有してなることを特徴とする、脂肪細胞におけるインシュリン誘導によるグルコースからの脂肪合成阻害剤が提供され、これらを配合してなる食用組成物が提供される。ここで、チダケサシ属に属する植物はユキノシタ科のチダケサシ(Astilbe)属の植物であり、このうちアカショウマが代表例であり、その根及び/又は根茎の乾燥粉末又は抽出物(以下、エキスということがある)又は精製物を用いてなることが好ましい。チダケサシ属に属する植物の抽出物は水若しくは親水性有機溶媒を用いて、とりわけエタノール、アセトン又はこれらの含水物を用いて抽出されたものであることが望ましく、さらには含水アセトンを用いた抽出物の酢酸エチル可溶画分であることがより望ましい。また、キキョウはキキョウ科に属し、その根及び/又は根茎の乾燥粉末又は抽出物又は精製物を用いてなることが好ましく、該抽出物は水又は親水性有機溶媒を用いて、とりわけ水、エタノール、アセトン又はこれらの含水物を用いて抽出されたものであることが望ましく、さらには水抽出物のエタノール可溶画分であることがより望ましい。本発明の食用組成物は前記の膵臓リパーゼ阻害剤、脂肪細胞におけるインシュリン誘導によるグルコースからの脂肪合成阻害剤を配合してなることを特徴とするものである。
【0007】
【発明の実施の形態】
まず、本発明の膵臓リパーゼ阻害剤は、チダケサシ属に属する植物を含有してなることを特徴とするものである。チダケサシ(Astilbe)属に属する植物はユキノシタ科に分類され、本発明に係るものの例は後述するように種々あるが、代表例としてアカショウマ(学名:Astilbe thunbergii(SIEB.et ZUCC.)MIQ.)を挙げることができる。アカショウマは日本の山地にも自生する多年草で、その根茎を赤升麻とよび、古来より下熱、解毒、消炎等の目的で升麻(キンポウゲ科のサラシナショウマ:Cimicifuga simplex WORMSKJORD 等)の代用品として用いられてきた。本発明では、赤升麻あるいは紅升麻と称せられるものも包含する。
【0008】
チゲタサシ属の植物の例としてAstilbe chinensis、Astilbe austrosinensis、Astilbe thunbergii、Astilbe thunbergii(SIEB.et ZUCC.)Miq.:アカショウマ、Astilbe thunbergii(SIEB.et ZUCC.)MIQ.var.congesta BOISS.(=Astilbe odontophylla MIQ.):トリアシショウマ、Astilbe polyandra、Astilbe grandis、Astilbe rivularis、Astilbe japonica(MORR.et DECNE.)A.GRAY:アワモリショウマ、Astilbe micro−phylla KNOLL:チダケサシ等を挙げることができる。
【0009】
本発明で用いるアカショウマ等のチダケサシ属に属する植物の態様は、前記植物の根及び/又は根茎が望ましく、根及び/又は根茎そのもの、これに乾燥、細断あるいは粉砕等の加工処理を施したもの、これらを溶媒で抽出処理した抽出液、該抽出液から溶媒を除いた抽出物、該抽出物にシリカゲル、ケイ酸マグネシウム、イオン交換樹脂、活性アルミナ、セルロース、活性炭等の吸着剤を用いたカラムクロマトグラフィーや溶剤分別等の精製処理を施した精製物のいずれでもよい。食品用途に使用する場合は、前記植物の根及び/又は根茎を乾燥し適宜に粉砕した粉末、該乾燥物の細断片や粉末を水又は親水性有機溶媒で抽出した抽出物とするのが利便性の点から望ましい。また、医薬品用途に利用する場合は、前記の抽出液、抽出物あるいは高純度の精製物が望ましい。
【0010】
親水性有機溶媒としてメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等の低級一価アルコール類、プロピレングリコール、1,3−ブタンジオール、グリセリン等の多価アルコール類、アセトン、メチルエチルケトン、エーテル、石油エーテル、酢酸エチル及びこれらの含水物や混合物を例示することができる。本発明の所望の効果を奏するための抽出物を効率的に得るには、エタノール、アセトン、酢酸エチル及びこれらの含水物を抽出用溶媒とすることが好ましい。含水物の水分含量は、例えば、エタノールの場合では1〜99重量%、より好ましくは10〜50重量%であり、アセトンの場合には1〜50重量%、より好ましくは10〜30重量%であり、酢酸エチルの場合は80〜99重量%、より好ましくは85〜95重量%である。これらの範囲を外れると本発明の所望の効果が減少し又は抽出物の収量が低下する。
【0011】
本発明に係る抽出物を簡便かつ効率的に得るには、含水エタノール又は含水アセトンで抽出し、該抽出物をさらに酢酸エチルで分別してその可溶画分を採取するのがよい。抽出処理は該処理原料に対して1〜100重量倍程度の前記抽出用溶媒を加え、常圧もしくは加圧下、常温又は加熱状態で、適宜に攪拌して10分〜数日間抽出処理する。不溶物を濾過又は遠心分離して除き本発明に係る抽出液を得ることができ、さらに該抽出液から減圧蒸留、噴霧乾燥、凍結乾燥等の公知の手段で溶媒を除去することによって本発明に係る抽出物を得ることができる。
【0012】
アカショウマ等のチゲタサシ属に属する植物の根と根茎には、デンプンやタンニンのほかにベルゲニン、アスチルビン、アスチルビン酸等のフラボノイド類が含まれていることが知られており、これらの成分が前述の薬理作用を示すといわれている(Shimada,H.ら、Yakugaku Zasshi、第72巻、第578−588頁、1952年)。これに対して、本発明は、アカショウマ等のチダケサシ属の植物の前記形態のものが動物の脂肪細胞において、ノルエピネフリンによって誘導される脂肪の分解を促進し、アドレノコルチコトロピンホルモン(以下、ACTHと略す)誘導の脂肪分解を刺激し、また、インシュリンの誘導によるグルコースからの脂肪形成を阻害する作用、さらに、摂取する脂肪について膵臓リパーゼ活性を阻害する作用を見出したものである。
【0013】
一方、本発明で用いるキキョウ(Platycodon grandiflorum A.DECANDOLLE)はわが国を含む東アジアに自生する多年生草であり、キキョウ科に属する。その根や根茎はプラティコディン(platycodin)A、C、Dやポリガラシン(polygalacin)D等のサポニン類を含み、古来より鎮咳、去痰、消炎、排膿等の効能を有する生薬・漢方薬として用いられている。また、キキョウのエキスを利用する例として、プロテアーゼ阻害剤として歯周病の予防や治療のための組成物(特開平6−25000号公報)、温浴効果を期待する入浴剤(特開平6−206814号公報)、養毛・育毛料(特開平8−73324号公報)、アトピー性皮膚炎の予防・治療剤(特開平11−199500号公報)、抗チロシナーゼ活性をもつ化粧料(特開2000−198712号公報)等が提案されている。
【0014】
本発明において用いるキキョウの形態は、キキョウの根及び/又は根茎が望ましく、根及び/又は根茎自体、これを乾燥、細断あるいは粉砕等の加工処理に供したもの、これらに溶媒を加えて抽出処理した抽出液、該抽出液から溶媒を除いた抽出物、該抽出物にシリカゲル、ケイ酸マグネシウム、イオン交換樹脂、活性アルミナ、セルロース、活性炭等の吸着剤を充填したカラムクロマトグラフィーや溶剤分別等の精製処理を施した精製物のいずれでもよい。本発明の所望の効果を得るためには、食品用途に利用する場合は、キキョウの根及び/又は根茎を乾燥し適宜に粉砕した粉末、該乾燥物の細断物あるいは粉末を水及び/又は親水性有機溶媒を用いて抽出した抽出物が簡便かつ利便であり、医薬品用途に使用する場合は、前記の抽出液、抽出物あるいは精製物が望ましい。
【0015】
抽出処理に用いる親水性有機溶媒としてメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等の低級一価アルコール類、プロピレングリコール、1,3−ブタンジオール、グリセリン等の多価アルコール類、アセトン、メチルエチルケトン、エーテル、石油エーテル、酢酸エチル及びこれらの混合物を例示できる。本発明の所望の効果を奏する抽出物を効率的に得るための抽出溶媒としては水、エタノール、アセトン又はこれらの含水溶媒を用いるのが好ましく、さらには水又は水分含有率が50重量%以上の含水エタノールがより好ましい。50重量%未満では抽出物の収量や所望の活性が低下する。抽出物の好適な態様の例は水で抽出した抽出物をさらにエタノールで分別して得られる可溶画分である。
【0016】
抽出処理は次のように行えばよい。すなわち、前記形態の原料に対して等重量ないしは約100重量倍の前記抽出用溶媒を加え、常圧もしくは加圧の下、常温又は加熱状態で、必要に応じて攪拌しながら10分〜数日間抽出処理し、不溶物を遠心分離又は濾過して除去すれば本発明に係る抽出液を得ることができ、さらに該抽出液から減圧蒸留、凍結乾燥、噴霧乾燥等の手段で溶媒を除去することによって本発明に係る抽出物を得ることができる。
【0017】
本発明は、キキョウの根及び/又は根茎、その乾燥物、粉末、抽出物、精製物が動物の脂肪細胞において、インシュリンの誘導によるグルコースからの脂肪合成を阻害する作用を見出したものである。
【0018】
本発明の膵臓リパーゼ阻害剤の望ましい態様は、前述のようにして得られるチダケサシ属に属する植物、例えばアカショウマの根及び/又は根茎、その乾燥物、抽出物あるいは精製物を必須原料として含有せしめてなるものであり、本発明の脂肪細胞におけるインシュリン誘導によるグルコースからの脂肪合成阻害剤の望ましい態様は、キキョウの根及び/又は根茎、その乾燥物、抽出物あるいは精製物を必須原料として含有せしめてなるものである。なお、これらの剤は、本発明の趣旨に照らして、併用することが好ましく、より望ましい態様はチダケサシ属の植物由来のもの及びキキョウ由来のものの両者を含む組成物であり、最も望ましくはアカショウマの根茎の抽出物又は精製物と、キキョウの根茎の抽出物又は精製物とを含有してなるものである。これら二種類の植物由来の原料を併用することによって、本発明の目的である肥満防止効果が相乗的に発現する。この併用組成物における両原料の配合比率は、抗肥満効果を奏するための各々の作用の違い、該組成物の使用目的と用途、製造コスト等により適宜に変動させることができ、チダケサシ属の植物由来原料/キキョウ由来原料(重量比)=100/0〜0/100であるが、より好ましくは100/0〜50/50であり、最も好ましくは90/10〜60/40である。
【0019】
本発明の膵臓リパーゼ阻害剤、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤においては、本発明の趣旨に反しないかぎり種々の原料や成分を併用して配合することができる。例えば、通常の食品に使用される賦形剤、防湿剤、防腐剤、強化剤、増粘剤、乳化剤、酸化防止剤、甘味料、酸味料、調味料、着色料、香料等は好適である。また、肥満の予防や治療、ダイエットあるいは痩身のために用いられる公知の素材を併用してもよい。この具体例としては、ガルシニア・カンボジア果皮エキス、ヒドロキシクエン酸及びその塩、ブドウ種子エキス、リンゴ等の果実ポリフェノール、山査子果実エキス、グアバ葉エキス、ギムネマ・シルベスタ葉エキス、イチョウ葉エキス、リパーゼ阻害剤、α−及びβ−アミラーゼ阻害剤、L−カルニチン及びこれを含む畜肉ペプチド、アオサやアオノリ等の緑藻類抽出物、コンブ等の褐藻類エキス、共役二重結合を2〜4個有する共役ポリエン高級脂肪酸及びそのエステルや塩、異性化リノール酸、α−リノレン酸、大豆や卵黄由来のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸等のグリセロリン脂質及びこれらのリゾ体、ボラージ油、月見草油、唐辛子末及びそのエキス、ニンニク抽出エキス、スベリヒユ、プーアール茶葉粉末及びそのエキス、杜仲葉末及びそのエキス、ウーロン茶葉粉末及びそのエキス、サイリウム種皮、キチン、キトサン、キサンチン誘導体、シトラス・アウランチウムの抽出エキス、センナ葉又は茎のエキス、陳皮等を挙げることができる。なお、これらの例は肥満を防止あるいは抑制する作用のあるものの一部であって、本発明を限定するものではない。
【0020】
前述のように、本発明によれば、膵臓リパーゼの活性を阻害し、摂取する食事性脂肪の腸管吸収を抑制する作用を有する、アカショウマ等のチダケサシ属の植物を含有する膵臓リパーゼ阻害剤と、インシュリンによって誘導されるグルコースからの脂肪の合成を阻害する作用を有するキキョウを含有する、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤が提供される。ここで、チダケサシ属の植物及びキキョウの好ましい態様は乾燥粉末、抽出物あるいは精製物である。かかる剤はそのまま本発明の所望の目的のために使用しても差し支えないが、本発明ではこれらを配合してなる組成物も提供される。該組成物の態様としては食用組成物が好適である。
【0021】
本発明の食用組成物は、前述した剤、すなわち、アカショウマ等のチダケサシ属に属する植物を含有してなる膵臓リパーゼ阻害剤、キキョウを含有してなる脂肪細胞における脂肪合成阻害剤を含む組成物であって、これらの形態が望ましくは根及び/又は根茎の乾燥粉末、抽出物あるいは精製物であるものを必須原料として含有してなる前記剤を配合してなることを特徴とする。
【0022】
この食用組成物の態様としては、前記の膵臓リパーゼ阻害剤、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤を液状、ゲル状、粉末状あるいは固形状の食品、例えば、果実飲料、清涼飲料、茶、スープ、ゼリー、ヨーグルト、プリン、ケーキミックス、ふりかけ、味噌、醤油、ドレッシング、マヨネーズ、焼肉のたれ等の調味料、麺類、ハムやソーセージ等の畜肉魚肉加工食品、ジャム、牛乳、クリーム、バターやチーズ等の粉末状、固形状又は液状の乳製品、マーガリン、パン、ケーキ、クッキー等に添加した形態となすことができる。
【0023】
また、必要に応じてデキストリン、乳糖、澱粉又はその加工素材、セルロース末等の賦形剤、ビタミン、ミネラル、動植物や魚介類の油脂、たん白、糖質、色素、香料、その他の前記食用添加剤等と共に粉末、顆粒、ペレット、錠剤等に加工したり、ゼラチン等で被覆してカプセルに成形したり、あるいはドリンク類にして、栄養補助食品や健康食品として利用できる。このとき、前記の肥満防止やその治療、ダイエットあるいは痩身のために用いられる公知の食用素材を併用した組成物は好適である。なお、本発明の食用組成物は極めて多種類の形態にわたり、前記の例示に限定されるものではないが、肥満防止の点から油脂類や糖質を多量に含む食品類に添加した形態、前記の栄養補助食品や健康食品の形態が望ましい。
【0024】
前記の食品類や食用組成物における本発明の膵臓リパーゼ阻害剤、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤の配合量は、当該食品や食用組成物の種類、形態、利用目的や本発明の剤の種類、形態等により一律に規定し難いが、一般の加工食品類に添加する場合では、例えば、膵臓リパーゼ阻害剤(アカショウマの根茎を含水率50重量%の含水エタノールで抽出した抽出物):脂肪細胞における脂肪合成阻害剤(キキョウの根茎を水で抽出した抽出物)=50:50(重量比)のものであれば、概ね0.01〜50重量%であり、より好ましくは0.1〜30重量%である。この範囲を外れて少ないと経口摂取による本発明の所望効果が小さく、逆に多すぎると食品の種類によっては風味を損ねたり、当該食品を調製することが不可能になる場合がある。なお、本発明の前記剤はそのまま食用に供しても差し支えない。
【0026】
【実施例】
実施例1
アカショウマ(Astilbe thunbergii(SIEB.et ZUCC.)MIQ.)の乾燥根茎を約5mm角以下のサイズに破砕し、これをさらに粉砕機で処理して200タイラーメッシュをパスした微粉末(試料A−1)を調製した。
【0027】
実施例2
実施例1で得たアカショウマの根茎の破砕片1Kgをステンレス製抽出釜に仕込み、含水率40重量%の含水エタノール10Lを加え、時々かき混ぜながら60℃で6時間抽出処理した。ついで、残渣を濾別して抽出液を得、該抽出液から減圧下に溶媒を留去して赤褐色の抽出物(試料A−2)75gを得た。
【0028】
実施例3
実施例1で得たアカショウマの根茎の微粉末1Kgをステンレス製抽出釜に仕込み、含水率20重量%の含水アセトン5Lを加えて還流下で3時間抽出処理した後、濾過して抽出液と残渣に分けた。該残渣に再び前記含水アセトン5Lを添加して同様に処理して抽出液を得た。両抽出液をあわせて減圧下に溶媒を留去して赤褐色の抽出物(試料A−3)68gを調製した。
【0029】
実施例4
実施例3で得たアカショウマの根茎の抽出物(試料A−3)45gを蒸留水1Lに懸濁させ、該懸濁液を酢酸エチル200mLずつで5回に分けて溶剤分別処理に供し、溶媒を減圧留去して酢酸エチル可溶画分(試料A−4)29g及び不溶画分(試料A−5)15gの各精製物を調製した。
【0030】
実施例5
トリアシショウマ(Astilbe odontophylla MIQ.)の根茎を日干しにして乾燥後、この破砕片1Kgを実施例2と同様に処理して赤茶色の抽出物(試料A−6)85gを得た。
【0031】
参考実施例1
キキョウ(Platycodon grandiflorum A.DC.)の根を含む根茎の天日乾燥物を約5mm角以下のサイズに破砕し、これをさらに粉砕処理して200タイラーメッシュ通過の微粉末(試料P−1)を調製した。
【0032】
参考実施例2
参考実施例1で得たキキョウの根を含む根茎の破砕片1Kgをステンレス製抽出釜に仕込み、蒸留水20Lを加えて還流下で5時間抽出処理した後、残渣を濾別して抽出液を得、該抽出液の水分を蒸発させて褐色の抽出物(試料P−2)310gを得た。
【0033】
参考実施例3
参考実施例2で得たキキョウの根を含む根茎の抽出物(試料P−2)150gに含水率5重量%の含水エタノール1Lを加え、室温にて時々かき混ぜながら抽出処理して可溶分と不溶分とに分け、溶媒を減圧留去してエタノール可溶画分(試料P−3)110g及び不溶画分(試料P−4)35gの各精製物を調製した。
【0034】
試験例
本発明に係るアカショウマ及びキキョウの各種加工処理物について、以下に述べる方法で抗肥満試験を行った。
(A)ノルエピネフリンにより誘導される脂肪細胞の脂肪分解能:
5週齢のウィスター系雄性ラット(日本クレア(株)から購入)に実験用標準飼料(オリエンタル酵母(株)製)及び水を自由摂取させて飼育した6週齢ラット(体重:150〜160g)を頚椎脱臼により屠殺し、直ちに副睾丸脂肪組織を除去した。ついで、ロドベルの方法(Rodbell,M.,J.Biol.Chem.,239,375−380,1964)により、該脂肪組織から脂肪細胞を単離して採取した。
【0035】
前記脂肪細胞フラクションの一部(50μL)をハンクス・バランス液(pH7.4)200μL中で、37℃にて1時間インキュベートした。なお、ここで使用したハンクス・バランス液は、2.5%ウシ血清アルブミン(和光純薬工業(株)製。但し、遊離脂肪酸を除去処理済み。)、ノルエピネフリン(三共(株)製)25μL(最終濃度として0.05μg/mL)及び、所定量の試験物質含有溶液(試料A−1〜A−6、P−1〜P−4及びこれらの混合物のいずれか1種をハンクス・バランス液(pH7.4)に所定濃度で溶解ないし分散させた試験溶液として)25μLを添加したものである。
【0036】
インキュベートした後、生成する遊離脂肪酸量を次のようにして測定した。操作はすべて25℃で行った。すなわち、前記のインキュベートした液250μLを入れた試験管に2%メタノール含有クロロホルム/n−ヘプタン(1/1)混液3mLを加え、振とう器で10分間水平振とうして抽出処理した後、5分間遠心分離(2000×g)し、上層を吸引除去した。ついで、下層に銅試薬1mLを添加し、10分間振とう後、10分間遠心分離(2000×g)した。
【0037】
次に、抽出された脂肪酸の銅塩を含む上部有機層0.5mLを、0.05%の3−(2)−t−ブチル−4−ヒドロキシアニソール含有のクロロホルム中、0.1重量/容量%濃度の金属キレート化剤(バソキュプロイン:2,9−ジメチル−4,7−ジフェニル−1,10−フェナンスロリン)0.5mLで処理し、分光光度計(日本分光(株)製、ORD/UV−5スペクトロメーター)で480nmにおける吸光度を測定した。
【0038】
脂肪分解能は脂肪細胞1mLから1時間あたりで生成する遊離脂肪酸量(μモル)として求め、各試験物質の脂肪分解能は、対照試験においてノルエピネフリン(添加量:0.05μg/mL反応混合物)のみによる遊離脂肪酸生成量(実測値:6.14±0.08μmol/mL充填脂肪細胞/hr)を100としたときの相対値(n=3〜5の平均値の比較)で示した。なお、本実験系では、ノルエピネフリン及び試験物質を添加しない場合の脂肪分解能はゼロであった。この結果を表1〜表3に示す。
【0039】
【表1】

Figure 0004626081
【0040】
【表2】
Figure 0004626081
【0041】
【表3】
Figure 0004626081
【0042】
表1〜表3において、( )内の数字は3〜5回の実験結果の平均値±標準誤差を示す。表1のデータから、ノルエピネフリンにより誘導される脂肪細胞の脂肪の加水分解能は、試料A−1〜A−4及びA−6のいずれによっても濃度依存的に促進され、とりわけアカショウマやトリアシショウマの根茎の乾燥粉末、含水エタノール抽出物、含水アセトン抽出物及びその酢酸エチル可溶画分において顕著な効果を奏することが明らかになった。また、表2及び表3のデータをあわせると、アカショウマ等のチダケサシ属に属する植物の各加工処理物とキキョウの各加工処理物とを併用した場合には脂肪細胞からの脂肪の加水分解能が相乗的に増強されることが明らかになった。
【0043】
(B)ACTHにより誘導される脂肪細胞の脂肪分解能:
本試験方法は、前述の(A)の試験法において、ノルエピネフリン(三共(株)製)25μL(最終濃度として0.05μg/mL)をACTH(第一製薬(株)製)25μL(最終濃度として0.5μg/mL)に置きかえること以外は同条件に設定して行った。この結果を表4〜表6に示す。なお、同表において、脂肪分解能はノルエピネフリン添加の場合と同義であり、各試験物質の脂肪分解能は対照試験においてACTH(添加量:0.5μg/mL反応混合物)のみによる遊離脂肪酸生成量(実測値:2.27±0.03μmol/mL充填脂肪細胞/hr)を100としたときの相対値(n=3の平均値の比較)で示した。表4〜表6中( )内の数字は3回の実験結果の平均値±標準誤差を示す。また、本実験系ではACTH及び試験物質を添加しない場合の脂肪分解能はゼロであった。
【0044】
【表4】
Figure 0004626081
【0045】
【表5】
Figure 0004626081
【0046】
【表6】
Figure 0004626081
【0047】
表4のデータから、ACTHにより誘導される脂肪細胞の脂肪の加水分解能は、試料A−1〜A−4及びA−6のいずれによっても濃度依存的に促進され、試料P−1〜P−3によっても若干促進されるが、とりわけアカショウマやトリアシショウマの根茎の各種加工処理物(乾燥粉末、含水エタノール抽出物、含水アセトン抽出物及びその酢酸エチル可溶画分)において顕著な効果を奏することが明らかになった。また、表5及び表6のデータをあわせると、アカショウマ等のチダケサシ属の植物の各加工処理物とキキョウの各加工処理物とを併用した場合にはACTH誘導による脂肪細胞からの脂肪の加水分解能が相乗的に増強されることが認められた。
【0048】
(C)インシュリンにより誘導されるグルコースからの脂肪合成能:前述の(A)の試験法で用いた脂肪細胞のフラクションの一部(50μL)をハンクス・バランス液(pH7.4)200μL中で、37℃にて1時間インキュベートした。なお、該ハンクス・バランス液は、2.5%ウシ血清アルブミン(前記(A)の試験法で使用したものと同じ。)、〔U−14C]グルコース25μL(最終濃度として0.5μCi=18.5KBq/mL)、インシュリン(シグマ社製、試薬グレード)25μL(最終濃度として1nM)及び、所定量の試験物質含有溶液(試料A−1〜A−6、P−1〜P−4及びこれらの混合物のいずれか1種をハンクス・バランス液(pH7.4)に所定濃度で溶解ないし分散させた試験溶液として)25μLを添加したものである。
【0049】
ついで、文献(Dole,V.P.,J.Clin.Invest.,35,150−154,1956)に記載のドール抽出混合物5mLを加えて反応を停止させ、試験管を5分間強く振り、さらにヘプタン3mL及び蒸留水2mLを添加して5分間強く振とうした。上層(ヘプタン層)の3mLを栓付試験管に移し、同量の0.05モル水酸化ナトリウム含有の50%エタノールとともに激しく振とうして遊離脂肪酸を除去した。この後、ヘプタン層1mLとシンチレーション液(ACSII、アマーシャム社製)10mLを計測用硝子瓶に採り、パッカード液体シンチレーション・カウンターを用いて放射能値を測定した。
【0050】
脂肪合成能は脂肪細胞1mL、1時間あたりのDPMとして求め、各試験物質の脂肪合成能は、対照試験においてインシュリンのみ添加によるDPM量(実測値:(57±2)×10−4/mL充填脂肪細胞/hr)を100としたときの相対値(n=3の平均値の比較)で示した。この結果を表7〜表9に示す。なお、本実験系では、インシュリン及び試験物質を添加しない場合のDPM実測値は(27±2)×10−4/mL充填脂肪細胞/hrであり、前記基準の相対値は47であった。この値は、インシュリン無添加下で各試験物質の添加量を増やしてもほとんど変化がなかった。
【0051】
【表7】
Figure 0004626081
【0052】
【表8】
Figure 0004626081
【0053】
【表9】
Figure 0004626081
【0054】
これらのデータから、インシュリンの添加により脂肪細胞中でグルコースから脂肪の合成能が増加するが、この脂肪合成能はインシュリン共存下において試料A−1〜A−4及びA−6のいずれの添加によっても濃度依存的に抑制されて減少し、とりわけアカショウマやトリアシショウマの根茎の加工処理物(乾燥粉末、含水エタノール抽出物、含水アセトン抽出物及びその酢酸エチル可溶画分)において顕著な脂肪合成抑制効果が認められた。また、アカショウマ等のチダケサシ属に属する植物及びキキョウの各加工処理物を併用すると脂肪細胞における脂肪合成能が相乗的に抑制されることが明らかになった。
【0055】
(D)膵臓リパーゼによる脂肪分解能:
シグマ社から購入した試薬グレードのオレイン酸トリグリセリド80mg、ホスファチジルコリン10mg、タウロコール酸5mg及び0.1モル/L塩化ナトリウムを含むトリス緩衝液(N−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−2−アミノエタンスルホン酸、pH7.0)9mLを5分間超音波処理し、この0.1mLに膵臓リパーゼ0.05mL(10ユニット)及び所定濃度の試験物質溶液(前記緩衝液に溶解ないし分散させたもの)0.1mLを加えて37℃で30分間インキュベートした。このインキュベート液を前述の(A)の試験法と同様に処理し、生成した遊離脂肪酸量を測定した。膵臓リパーゼ活性、すなわち該リパーゼによる脂肪分解能は前記インキュベート液である反応混合物1Lから1時間あたりに生成するオレイン酸のモル数として求め、各試験物質を共存させた場合のリパーゼ活性は、試験物質を添加しない対照試験におけるリパーゼ活性を100としたときの相対値(n=4の実測値の平均値の比較)で示した。この結果を表10に示す。
【0056】
【表10】
Figure 0004626081
【0057】
表10のデータから、膵臓リパーゼによる脂肪分解能はキキョウの各加工処理物(試料P−1〜P−3)の添加濃度に依存して顕著に抑制されること、これと対比するとアカショウマ等の加工処理物(試料A−1〜A−6)では当該抑制効果が小さいが抽出物や精製物は抑制効果が大きいこと、キキョウ及びアカショウマ等のチダケサシ属植物の各加工処理物を併用すると脂肪分解能の相乗的な抑制効果を奏することが明らかになった。
【0058】
(E)高脂肪食の長期投与試験:
3週齢のICR系雌性マウス(日本クレア社から購入)を、温度及び湿度の管理下、12時間の明暗サイクルで、餌料及び水を自由摂取させて1週間飼育後、高脂肪食餌料を8週間にわたり摂取させ、エーテル麻酔下に屠殺し、常法により体重、肝臓組織の中性脂質量及び総コレステロール量を測定した。なお、対照群の高脂肪食餌料組成(単位:重量%)は、牛脂40、コーンスターチ10、砂糖9、ミネラル混合物(オリエンタル酵母(株)製、AIN−76)4、ビタミン混合物(同社製、AIN 1977)1及びカゼイン36とし、試験物質を添加した場合はカゼインの一部を試験物質(5重量%)に置き換えた餌料とした。
【0059】
肝臓の中性脂質及び総コレステロールは、肝臓組織の一部(0.5g)をクレブス・リンガーのリン酸緩衝液(pH7.4)4.5mL中でホモジナイズし、該ホモジネート0.2mLをクロロホルム/メタノール(2/1、容量比)4mLで抽出、ついで窒素雰囲気下で濃縮して抽出物を得、これを測定用試料としてトリグリセリドEテストキット及び総コレステロールEテストキット(いずれも和光純薬(株)製)を用いて測定した。この結果を表11に示す。同表中の数字は平均値±標準誤差を表わす(n=14、ANOVA統計処理)。なお、本試験の対照群及び試験群ともに摂取エネルギー量に有意差は認められなかった。
【0060】
【表11】
Figure 0004626081
【0061】
このことから、高脂肪食のみを8週間摂取した場合に比べて、キキョウの各加工処理物(試料P−1〜P−3)を添加した場合に体重が減り、肝臓組織中の総コレステロール量は変化しないが、中性脂質量が顕著に減少することが明らかになった。アカショウマ等の各加工処理物(試料A−1〜A−4及びA−6)でも当該現象は若干認められた。また、キキョウ及びアカショウマ等のチダケサシ属に属する植物の各加工処理物を併用すると体重減少等の相乗効果が認められた。
【0062】
参考試作例1
試料A−2及び試料P−3(1:1、重量比)からなる本発明の混合物120mgにガルシニア・カンボジア果皮エキス30mg、ミツロウ50mg及びボラージ油50mgを加え、約45℃で十分に混合して均質な状態にし、これをカプセル充填機に供して一粒あたり内容量が250mgのゼラチン被覆カプセル製剤を試作した。本カプセル製剤をダイエット希望のボランティア(体脂肪率基準の肥満度が20%以上の成人男女)10名対象に1日あたり1粒、2週間摂取のモニター試験に供したところ9名に体重減少が認められた。この製剤は経口摂取が可能な抗肥満用の食用組成物又は医薬用組成物として利用できる。また、本発明の前記混合物を試料A−3のみ、試料A−6のみ又は試料P−2のみの各同量とし、他の条件は同一にしてカプセル製剤を試作した。これらにも同様の抗肥満効果が認められた。
【0063】
参考試作例2
試料A−2:ウーロン茶葉粉末=3:2(重量比)からなる本発明の混合物5.0Kgを化工澱粉(松谷化学(株)製、商品名:パインフロー(登録商標))3.5Kg、第三リン酸カルシウム0.3Kg、ビタミンB0.3Kg、ビタミンB0.3Kg、ビタミンB0.2Kg及びビタミンC0.4Kgとともに配合機に仕込み10分間攪拌混合した。該混合物を直打式打錠機に供給して直径7mm、高さ4mm、重量150mgのタブレットを作成した後、コーティング機でシェラック薄膜をコーティングして錠剤形状の食品を試作した。
【0064】
参考試作例3
家庭用ホイッパーにバター100g、ショートニング120g、上白糖90g及び牛乳100mLを入れ、攪拌しながら鶏卵1個を加えて十分に混合した後、薄力粉190g、ベーキングパウダー1gとともに試料A−1及び試料P−2(3:1、重量比)からなる本発明の混合物10gを添加して十分に捏ねあわせた。これを30分間ねかせた後、金型で50個に分割し、オーブンで焼いてバタークッキーを試作した。
【0065】
参考試作例4
市販の野菜ジュース1Lに、試料A−2:試料P−3:葡萄種子エキス(インターヘルス社製、商品名:アクティビン(登録商標))=1:2:1(重量比)からなる本発明の混合物5gを加えて混合し、肥満防止用野菜ジュースを試作した。これは元の野菜ジュースと比較して何ら遜色のないものであった。
【0066】
【発明の効果】
本発明によれば、チダケサシ属に属する植物を含有してなる膵臓リパーゼ阻害剤、及び、キキョウを含有してなる、脂肪細胞におけるインシュリン誘導によるグルコースからの脂肪合成阻害剤が提供される。これらの剤は、アカショウマ等のチダケサシ属に属する植物の根及び/又は根茎の乾燥粉末、その抽出物又は精製物等の加工処理物に起因して、膵臓リパーゼによる脂肪の加水分解能を阻害し、したがって腸管からの脂肪の吸収を抑制し、高脂肪食の摂取による体重増加や肝臓中の中性脂質量の上昇を抑制する効果を奏する。また、キキョウの根及び/又は根茎の前記同様の加工処理物に起因して、インシュリンによって誘導される脂肪細胞中のグルコースからの脂肪の合成能を抑制する効果を奏する。さらに、起源が異なる前記加工処理物を併用して含有するものは相乗的に顕著な抗肥満効果を奏する。本発明では、また、前記の膵臓リパーゼ阻害剤、脂肪細胞における脂肪合成阻害剤を配合してなる食用組成物が提供され、これは肥満症状の予防、治療、痩身、減体重、ダイエット等のために有効利用され得るものである。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
  The present invention uses a specific plant as a raw material.Pancreatic lipase inhibitor, A fat synthesis inhibitor in adipocytes, and use thereof. More specifically, it contains a plant belonging to the genus Pleurotus such as red pepper.Regarding pancreatic lipase inhibitor,The present invention relates to a fat synthesis inhibitor in fat cells, comprising kyoto, and an edible composition using them.
[0002]
[Prior art]
In recent years, the disparity between the increase in energy consumption due to Western dietary forms and overeating and the decrease in energy consumption due to lack of exercise has increased, obesity has increased, and obesity has attracted attention as a cause of lifestyle-related diseases. In general, an obese state is a result of abnormal accumulation of energy sources such as carbohydrates and lipids in the ingested energy that are not consumed by activities such as exercise. This refers to an increased state that exceeds the limit of physiological functions. When the obesity state becomes chronic, it is said that diseases such as diabetes, arteriosclerosis, fatty liver, cholelithiasis, and kidney damage are likely to occur as complications.
[0003]
In order to prevent obesity, many attempts have been made to prevent obesity not only through treatment and prevention in the medical field but also through meals taken on a daily basis. That is, L-carnitine or a livestock peptide containing the same (JP-A-7-196485, JP-A-10-66515) as a food material aimed at promoting fat metabolism and combustion or suppressing the accumulation of body fat. , JP-A 2000-256200), algae extract (JP-A 2000-72642), fruit polyphenol (JP-A 10-330278), conjugated polyene fatty acid (JP-A 2000-355538) A mixture of specific amino acids and a xanthine derivative (Japanese Patent Laid-Open No. 10-330264), soybean and egg yolk phospholipids (Japanese Patent Laid-Open No. 10-84880), and the like have been proposed.
[0004]
[Problems to be solved by the invention]
However, these materials are practically ineffective, are based on simple experimental results that are not practical, or must be consumed in large amounts in normal dietary forms, both of which are fully satisfactory It was not possible to exert the effect that can be. In view of the present situation, in the present invention, in order to prevent obesity, the present invention has a powerful anti-obesity action that can effectively inhibit the absorption of fat taken in the diet or can effectively promote the metabolism of fat in living tissues. An object of the present invention is to provide a material derived from a natural product, and to provide it as a composition in an aspect that can be effectively used industrially.
[0005]
[Means for Solving the Problems]
In order to solve the above problems, the present inventors have conducted extensive studies on the relationship between a large number of plant raw materials and their extracts and lipid metabolism. The inventors have found that the desired effects of the present invention are remarkably exhibited, and have completed the present invention.
[0006]
  That is, according to the present invention, it is characterized by comprising a plant belonging to the genus Pleurotus.Pancreatic lipase inhibitors are provided. As a reference of the present inventionAn inhibitor of fat synthesis from glucose induced by insulin in adipocytes is provided, comprising:,theseAn edible composition is provided. Here, the plant belonging to the genus Pleurotus is a plant belonging to the genus Astilbe belonging to the family Uchinosidae, and among them, red pepper is a representative example, and its root and / or rhizome dry powder or extract (hereinafter referred to as an extract). It is preferable to use a purified product. It is desirable that the plant extract belonging to the genus Pleurotus is extracted with water or a hydrophilic organic solvent, in particular, ethanol, acetone or a hydrated product thereof, and further an extract using hydrated acetone. The ethyl acetate soluble fraction is more desirable. In addition, Kyodo belongs to the family Kleopteraceae and it is preferable to use a dry powder or extract or purified product of its roots and / or rhizomes, and the extract uses water or a hydrophilic organic solvent, especially water, ethanol. , Acetone or a hydrated product thereof, and more preferably an ethanol-soluble fraction of the water extract. The edible composition of the present invention is the above-mentionedPancreatic lipase inhibitorIt is characterized by comprising a fat synthesis inhibitor from glucose induced by insulin induction in fat cells.
[0007]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
  First, the present inventionPancreatic lipase inhibitorIs characterized by containing a plant belonging to the genus Pleurotus. Plants belonging to the genus Astilbe are classified into the family Uchinosidae, and there are various examples according to the present invention as described later. As representative examples, Akashima (scientific name: Astilbe thunbergii (SIEB. Et ZUCC.) MIQ.) Is used. Can be mentioned. A red ginger is a perennial that grows naturally in the mountains of Japan. Its rhizome is called red hemp, and since ancient times it has been used as a substitute for hemp (Cimifugu simplex WORMSKJORD, etc.) for the purpose of lower fever, detoxification, and anti-inflammation. Has been used. In the present invention, what is referred to as red hemp or red hemp is also included.
[0008]
Examples of plants of the genus Tigetasis are Astilbe chinensis, Astilbe austrosinensis, Astilbe thunbergii, Astilbe thunbergii (SIEB. Et ZUCC.) Miq. : Akashouma, Astilbe thumbergii (SIEB. Et ZUCC.) MIQ. var. congesta BOISS. (= Astilbe odontophylla MIQ.): Triacioma, Astilbe polyandra, Astilbe grandis, Astilbe rivalaris, Astilbe japonica (MORR. Et DECNE.) GRAY: Awamorishouma, Astilbe micro-phylla KNOLL: Prickly pear.
[0009]
The aspect of the plant belonging to the genus Pleurotus such as red pepper used in the present invention is preferably the root and / or rhizome of the plant, and the root and / or rhizome itself, which has been subjected to processing such as drying, shredding or grinding. Extracts obtained by extracting these with a solvent, extracts obtained by removing the solvent from the extract, columns using adsorbents such as silica gel, magnesium silicate, ion exchange resin, activated alumina, cellulose, activated carbon Any purified product subjected to a purification treatment such as chromatography or solvent fractionation may be used. When used for food applications, it is convenient to use a powder obtained by drying and appropriately pulverizing the roots and / or rhizomes of the plant, and an extract obtained by extracting fine pieces or powder of the dried product with water or a hydrophilic organic solvent. Desirable from the viewpoint of sex. Moreover, when using for a pharmaceutical use, the said extract, an extract, or a highly purified product is desirable.
[0010]
As hydrophilic organic solvents, lower monohydric alcohols such as methanol, ethanol, propanol and isopropanol, polyhydric alcohols such as propylene glycol, 1,3-butanediol and glycerin, acetone, methyl ethyl ketone, ether, petroleum ether, ethyl acetate and These hydrates and mixtures can be exemplified. In order to efficiently obtain an extract for producing the desired effect of the present invention, it is preferable to use ethanol, acetone, ethyl acetate and a hydrated product thereof as an extraction solvent. The water content of the hydrated product is, for example, 1 to 99% by weight in the case of ethanol, more preferably 10 to 50% by weight, and 1 to 50% by weight in the case of acetone, more preferably 10 to 30% by weight. In the case of ethyl acetate, it is 80 to 99% by weight, more preferably 85 to 95% by weight. Outside these ranges, the desired effect of the present invention is reduced or the yield of the extract is reduced.
[0011]
In order to easily and efficiently obtain the extract according to the present invention, it is preferable to extract with water-containing ethanol or water-containing acetone, and further extract the extract with ethyl acetate to collect the soluble fraction. In the extraction treatment, the extraction solvent is added in an amount of about 1 to 100 times by weight with respect to the raw material to be treated, and the mixture is appropriately stirred at normal temperature or under pressure at room temperature or in a heated state for 10 minutes to several days. The insoluble matter can be removed by filtration or centrifugation, and the extract according to the present invention can be obtained. Further, the solvent is removed from the extract by known means such as vacuum distillation, spray drying, freeze drying, etc. Such an extract can be obtained.
[0012]
  It is known that the roots and rhizomes of plants belonging to the genus Tigetasas, such as red pepper, contain flavonoids such as bergenin, astilbine, and astilbic acid in addition to starch and tannin. (Shimada, H. et al., Yakugaku Zassi, 72, 578-588, 1952). In contrast, in the present invention, the above-mentioned plant of the genus Pleurotus such as red ginger promotes the degradation of fat induced by norepinephrine in animal adipocytes, and adrenocorticotropin hormone (hereinafter abbreviated as ACTH). ) Stimulates induced lipolysis and also inhibits adipogenesis from glucose induced by insulin,In addition, it inhibits pancreatic lipase activity in the ingested fatIs found.
[0013]
On the other hand, Kyokyo (Platycodon grandiflorum A. DECANDOLLE) used in the present invention is a perennial grass that grows naturally in East Asia including Japan, and belongs to the family Oleaceae. Its roots and rhizomes contain saponins such as platycodin A, C, D and polygalacin D, and have been used as herbal medicines and herbal medicines with antitussive, expectorant, antiphlogistic, drainage, etc. since ancient times. ing. Further, as an example of using an extract of Kyoukyo, as a protease inhibitor, a composition for preventing or treating periodontal disease (Japanese Patent Laid-Open No. 6-25000), a bath agent that expects a warm bath effect (Japanese Patent Laid-Open No. 6-206814). No.), hair nourishing / hair restoration (JP-A-8-73324), prevention / treatment agent for atopic dermatitis (JP-A-11-199500), cosmetic having anti-tyrosinase activity (JP 2000-2000) 198712) and the like have been proposed.
[0014]
As for the form of kyokyo used in the present invention, kyokyo root and / or rhizome is desirable, and the root and / or rhizome itself, which has been subjected to processing such as drying, shredding or pulverization, are added with a solvent and extracted. Treated extract, extract obtained by removing the solvent from the extract, column chromatography filled with an adsorbent such as silica gel, magnesium silicate, ion exchange resin, activated alumina, cellulose, activated carbon, etc. Any of the purified products subjected to the purification treatment of In order to obtain the desired effect of the present invention, when used for food applications, a powder obtained by drying and appropriately pulverizing roots and / or rhizomes of fennel, a shredded product or a powder of the dried product and water and / or An extract extracted using a hydrophilic organic solvent is simple and convenient, and the above extract, extract or purified product is desirable when used for pharmaceutical applications.
[0015]
As hydrophilic organic solvents used for extraction treatment, lower monohydric alcohols such as methanol, ethanol, propanol and isopropanol, polyhydric alcohols such as propylene glycol, 1,3-butanediol and glycerin, acetone, methyl ethyl ketone, ether and petroleum ether And ethyl acetate and mixtures thereof. As an extraction solvent for efficiently obtaining an extract exhibiting the desired effect of the present invention, it is preferable to use water, ethanol, acetone or a water-containing solvent thereof, and further, water or water content is 50% by weight or more. Hydrous ethanol is more preferred. If it is less than 50% by weight, the yield and desired activity of the extract are lowered. An example of a suitable embodiment of the extract is a soluble fraction obtained by further fractionating an extract extracted with water with ethanol.
[0016]
The extraction process may be performed as follows. That is, the extraction solvent is added in an equal weight or about 100 times by weight with respect to the raw material in the above form, and is stirred for 10 minutes to several days at normal temperature or under pressure, at room temperature or in a heated state, if necessary. When the extraction treatment is performed and the insoluble matter is removed by centrifugation or filtration, the extract according to the present invention can be obtained, and the solvent is further removed from the extract by means such as vacuum distillation, freeze drying, spray drying and the like. Thus, the extract according to the present invention can be obtained.
[0017]
The present invention has found that the roots and / or rhizomes of kyoto, its dried product, powder, extract and purified product inhibit the fat synthesis from glucose induced by insulin in animal adipocytes.
[0018]
  Of the present inventionPancreatic lipase inhibitorA desirable embodiment of the present invention comprises a plant belonging to the genus Pterodum obtained as described above, for example, the root and / or rhizome of red pepper, a dried product, an extract or a purified product thereof as an essential raw material. A desirable embodiment of an insulin synthesis-inducing fat synthesis inhibitor from glucose in adipocytes of the present invention is to contain cypress root and / or rhizome, dried product, extract or purified product as an essential raw material.In addition,These agents are preferably used in combination in the light of the gist of the present invention, and a more desirable embodiment is a composition containing both of those derived from the plant of the genus Pleurotus and those derived from Kyodo, and most preferably of the rhizome of red pepper. An extract or purified product, and an extract or purified product of Rhizome rhizomes. By using these two kinds of plant-derived raw materials in combination, the obesity prevention effect which is the object of the present invention is synergistically expressed. The blending ratio of both raw materials in this combination composition can be appropriately varied depending on the difference in action for producing an anti-obesity effect, the purpose and use of the composition, the production cost, etc. Origin material / Chrysanthemum origin material (weight ratio) = 100/0 to 0/100, more preferably 100/0 to 50/50, and most preferably 90/10 to 60/40.
[0019]
  Of the present inventionPancreatic lipase inhibitorThe fat synthesis inhibitor in adipocytes can be used in combination with various raw materials and components as long as not departing from the spirit of the present invention. For example, excipients, moisture-proofing agents, antiseptics, strengthening agents, thickeners, emulsifiers, antioxidants, sweeteners, acidulants, seasonings, colorants, fragrances and the like that are used in ordinary foods are suitable. . Moreover, you may use together the well-known raw material used for the prevention and treatment of obesity, a diet, or slimming. Specific examples include Garcinia cambodia skin extract, hydroxycitric acid and salts thereof, grape seed extract, fruit polyphenols such as apples, mountain extract fruit extract, guava leaf extract, gymnema sylvesta leaf extract, ginkgo biloba extract, lipase inhibitor , Α- and β-amylase inhibitors, L-carnitine and animal meat peptides containing the same, green algal extracts such as Aosa and Aonori, brown algae extracts such as kombu, conjugated polyene higher fatty acids having 2 to 4 conjugated double bonds And its esters and salts, isomerized linoleic acid, α-linolenic acid, phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylserine, phosphatidylinositol, phosphatidic acid and other glycerophospholipids derived from soybean and egg yolk, and their lyso forms, borage oil, evening primrose oil , Chili Powder and extract thereof, garlic extract, submarine powder, puerh tea leaf powder and extract thereof, nakanaka leaf powder and extract thereof, oolong tea leaf powder and extract thereof, psyllium seed coat, chitin, chitosan, xanthine derivatives, citrus aurantium extract extract, senna Examples thereof include leaf or stem extracts and skins. These examples are only part of those having an action of preventing or suppressing obesity, and do not limit the present invention.
[0020]
  As described above, according to the present invention, the plant contains a plant belonging to the genus Pleurotus such as red ginger that has an action of inhibiting pancreatic lipase activity and suppressing intestinal absorption of dietary fat to be ingested.Pancreatic lipase inhibitorAnd a fat synthesis inhibitor in adipocytes, which contains a Japanese cypress having an action of inhibiting the synthesis of fat from glucose induced by insulin. Here, a preferred embodiment of the plant belonging to the genus Chrysanthemum and Kyoka is a dry powder, an extract or a purified product. Such an agent may be used as it is for the desired purpose of the present invention, but the present invention also provides a composition comprising these. As an aspect of the composition, an edible composition is suitable.
[0021]
  The edible composition of the present invention comprises the aforementioned agent, that is, a plant belonging to the genus Pleurotus such as red pepper.Pancreatic lipase inhibitor,A composition comprising an adipocyte-containing adipose synthesis inhibitor comprising cypress, which is preferably a dry powder, extract or purified product of roots and / or rhizomes as an essential ingredient. It is characterized by comprising the above-mentioned agent.
[0022]
  As an aspect of this edible composition, the above-mentionedPancreatic lipase inhibitor, Adipose cell fat synthesis inhibitor in liquid, gel, powder or solid food, eg fruit drink, soft drink, tea, soup, jelly, yogurt, pudding, cake mix, sprinkle, miso, soy sauce, dressing Seasonings such as mayonnaise, grilled meat, noodles, processed meat and fish products such as ham and sausage, powdered, solid or liquid dairy products such as jam, milk, cream, butter and cheese, margarine, bread, cake It can be made into a form added to a cookie or the like.
[0023]
In addition, dextrin, lactose, starch or processed materials thereof, excipients such as cellulose powder, vitamins, minerals, fats and oils of animals and plants and seafood, proteins, sugars, pigments, flavors, and other edible additives as necessary It can be processed into powders, granules, pellets, tablets, etc. together with agents, etc., coated with gelatin or the like to form capsules, or used as a drink or as a dietary supplement or health food. At this time, the composition which used together the well-known edible material used for the said obesity prevention and its treatment, diet, or slimming is suitable. In addition, the edible composition of the present invention is not limited to the above examples over a very wide variety of forms, but from the viewpoint of preventing obesity, the form added to foods containing a large amount of oils and fats, The form of nutritional supplements and health foods is desirable.
[0024]
  In the foods and edible compositions described above,Pancreatic lipase inhibitorThe amount of the fat synthesis inhibitor in the adipocytes is difficult to define uniformly depending on the type and form of the food or edible composition, the purpose of use and the type and form of the agent of the present invention. In the case of adding, for example,Pancreatic lipase inhibitor(Extract extracted from rhizomes of red pepper with hydrous ethanol having a water content of 50% by weight): Fat synthesis inhibitor in fat cells (extract extracted from rhizomes of Kyodo with water) = 50: 50 (weight ratio) If present, it is generally from 0.01 to 50% by weight, more preferably from 0.1 to 30% by weight. If it is less than this range, the desired effect of the present invention by ingestion is small. Conversely, if it is too much, depending on the type of food, the flavor may be impaired or it may be impossible to prepare the food. The agent of the present invention may be used for food as it is.
[0026]
【Example】
Example 1
A dried rhizome of Astilbe thumbergii (SIEB. Et ZUCC.) MIQ. Was crushed to a size of about 5 mm square or less, and this was further processed by a pulverizer to give a fine powder that passed 200 Tyler mesh (Sample A-1 ) Was prepared.
[0027]
Example 2
1 Kg of red rhizome rhizome fragments obtained in Example 1 was placed in a stainless steel extraction kettle, 10 L of hydrous ethanol having a water content of 40% by weight was added, and extracted at 60 ° C. for 6 hours with occasional stirring. Subsequently, the residue was separated by filtration to obtain an extract, and the solvent was distilled off from the extract under reduced pressure to obtain 75 g of a reddish brown extract (sample A-2).
[0028]
Example 3
1 kg of red rhizome rhizome powder obtained in Example 1 was placed in a stainless steel extraction kettle, 5 L of water-containing acetone having a water content of 20% by weight was added, and the mixture was extracted for 3 hours under reflux. Divided into. The residue was again added with 5 L of water-containing acetone and treated in the same manner to obtain an extract. Both extracts were combined and the solvent was distilled off under reduced pressure to prepare 68 g of a reddish brown extract (sample A-3).
[0029]
Example 4
45 g of red rhizome extract (sample A-3) obtained in Example 3 was suspended in 1 L of distilled water, and the suspension was divided into 5 portions of 200 mL of ethyl acetate and subjected to solvent fractionation treatment. Was distilled off under reduced pressure to prepare each purified product of 29 g of ethyl acetate soluble fraction (sample A-4) and 15 g of insoluble fraction (sample A-5).
[0030]
Example 5
After drying the rhizomes of tricholoma (Astilbe odontophylla MIQ.) By sun-drying, 1 Kg of this crushed piece was treated in the same manner as in Example 2 to obtain 85 g of a reddish brown extract (sample A-6).
[0031]
Reference Example 1
  The dried sun-dried rhizomes containing roots of Pyocodon grandiflorum A.DC. were crushed to a size of about 5 mm square or less and further pulverized to give fine powder passing through 200 Tyler mesh (sample P-1) Was prepared.
[0032]
Reference Example 2
Reference Example 11 Kg of rhizome fragment containing the roots of Kyoko obtained in the above was placed in a stainless steel extraction kettle, 20 L of distilled water was added and the mixture was extracted for 5 hours under reflux, and the residue was filtered to obtain an extract. The water was evaporated to obtain 310 g of a brown extract (sample P-2).
[0033]
Reference Example 3
Reference Example 2Add 1 L of water-containing ethanol with a water content of 5% by weight to 150 g of the rhizome extract (Sample P-2) containing the roots of Kyokyo, and extract it with stirring at room temperature to obtain soluble and insoluble components. The solvent was distilled off under reduced pressure to prepare each purified product of 110 g of ethanol-soluble fraction (sample P-3) and 35 g of insoluble fraction (sample P-4).
[0034]
Test example
The anti-obesity test was performed by the method described below about the various processed products of the red pepper and the Kyoko which concern on this invention.
(A) Adipocyte lipolysis induced by norepinephrine:
6-week-old rats (body weight: 150-160 g) reared by allowing 5 weeks old Wistar male rats (purchased from Clea Japan Co., Ltd.) to freely ingest experimental standard diet (produced by Oriental Yeast Co., Ltd.) and water. Was sacrificed by cervical dislocation and the testicular adipose tissue was immediately removed. The method of Rodbell (Rodbell, M., J. Biol. Chem.,239, 375-380, 1964), adipocytes were isolated and collected from the adipose tissue.
[0035]
A part (50 μL) of the adipocyte fraction was incubated in 200 μL of Hanks Balance solution (pH 7.4) at 37 ° C. for 1 hour. The Hanks balance solution used here was 2.5% bovine serum albumin (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., but free fatty acid was removed), norepinephrine (manufactured by Sankyo Co., Ltd.) 25 μL ( As a final concentration, 0.05 μg / mL) and a predetermined amount of a test substance-containing solution (samples A-1 to A-6, P-1 to P-4, and a mixture thereof are added to a Hanks balance solution ( As a test solution dissolved or dispersed at a predetermined concentration in pH 7.4), 25 μL is added.
[0036]
After the incubation, the amount of free fatty acid produced was measured as follows. All operations were performed at 25 ° C. That is, 3 mL of a 2% methanol-containing chloroform / n-heptane (1/1) mixture was added to a test tube containing 250 μL of the incubated solution, and the mixture was shaken horizontally for 10 minutes with a shaker and extracted. Centrifugation was performed for a minute (2000 × g), and the upper layer was removed by suction. Next, 1 mL of a copper reagent was added to the lower layer, shaken for 10 minutes, and then centrifuged (2000 × g) for 10 minutes.
[0037]
Next, 0.5 mL of the upper organic layer containing the extracted fatty acid copper salt was added in 0.1% w / v in chloroform containing 0.05% 3- (2) -t-butyl-4-hydroxyanisole. % Metal chelating agent (vasocuproin: 2,9-dimethyl-4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline) treated with 0.5 mL, spectrophotometer (JASCO Corporation, ORD / Absorbance at 480 nm was measured with a UV-5 spectrometer.
[0038]
Lipolysis is determined as the amount of free fatty acid (μmol) produced per hour from 1 mL of fat cells, and the lipolysis of each test substance is released only by norepinephrine (addition amount: 0.05 μg / mL reaction mixture) in the control test. The relative values (comparison of the average values of n = 3 to 5) when the amount of fatty acid produced (actual value: 6.14 ± 0.08 μmol / mL packed adipocytes / hr) is taken as 100 are shown. In this experimental system, the fat resolving power when norepinephrine and the test substance were not added was zero. The results are shown in Tables 1 to 3.
[0039]
[Table 1]
Figure 0004626081
[0040]
[Table 2]
Figure 0004626081
[0041]
[Table 3]
Figure 0004626081
[0042]
In Tables 1 to 3, the numbers in parentheses indicate average values ± standard errors of 3 to 5 experimental results. From the data in Table 1, adipocyte fat hydrolyzing ability induced by norepinephrine was promoted in a concentration-dependent manner by any of samples A-1 to A-4 and A-6, and in particular, for red pepper and triash. It became clear that the rhizome dry powder, the water-containing ethanol extract, the water-containing acetone extract, and its ethyl acetate soluble fraction had remarkable effects. In addition, when the data in Tables 2 and 3 are combined, the hydrolytic resolution of fat from fat cells is synergistic when each processed product of a plant belonging to the genus Pleurotus such as red pepper and each processed product of Kyary is combined. It became clear that it was strengthened.
[0043]
(B) Adipocyte lipolysis induced by ACTH:
In this test method (A), 25 μL of norepinephrine (manufactured by Sankyo Co., Ltd.) (0.05 μg / mL as the final concentration) is 25 μL (manufactured by Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd.) as the final concentration. The conditions were the same except that it was replaced with 0.5 μg / mL. The results are shown in Tables 4-6. In the table, the lipolytic power is synonymous with norepinephrine addition, and the lipolytic power of each test substance is the amount of free fatty acid produced (actual value) only by ACTH (added amount: 0.5 μg / mL reaction mixture) in the control test. : 2.27 ± 0.03 μmol / mL filled adipocytes / hr), relative to 100 (n = 3 average value comparison). The numbers in parentheses in Tables 4 to 6 indicate the average value ± standard error of the results of three experiments. In this experimental system, the lipolytic ability when ACTH and the test substance were not added was zero.
[0044]
[Table 4]
Figure 0004626081
[0045]
[Table 5]
Figure 0004626081
[0046]
[Table 6]
Figure 0004626081
[0047]
From the data in Table 4, ACTH-induced adipocyte fat hydrolytic resolution was promoted in a concentration-dependent manner by any of Samples A-1 to A-4 and A-6, and Samples P-1 to P- Although it is also slightly accelerated by No. 3, it has a remarkable effect especially in various processed products (dry powder, hydrous ethanol extract, hydrous acetone extract and ethyl acetate soluble fraction thereof) of rhizomes of red pepper and triashia. It became clear. In addition, when the data in Tables 5 and 6 are combined, the hydrolytic resolution of fat from fat cells by ACTH induction when each processed product of the plant belonging to the genus Pleurotus such as red pepper and each processed product of Kyary is combined. Was found to be synergistically enhanced.
[0048]
(C) Capability of fat synthesis from glucose induced by insulin: A part (50 μL) of the fraction of adipocytes used in the test method of (A) described above in 200 μL of Hanks Balance solution (pH 7.4), Incubated for 1 hour at 37 ° C. The Hanks balance solution was 2.5% bovine serum albumin (the same as that used in the test method (A)), [U-14C] 25 μL of glucose (0.5 μCi = 18.5 KBq / mL as a final concentration), 25 μL of insulin (manufactured by Sigma, reagent grade) (1 nM as a final concentration), and a predetermined amount of a test substance-containing solution (Sample A-1 to A-1) 25 μL of A-6, P-1 to P-4, or a mixture thereof as a test solution in which Hank's balance solution (pH 7.4) is dissolved or dispersed at a predetermined concentration is added. .
[0049]
The literature (Dole, VP, J. Clin. Invest.,35, 150-154, 1956) was added to stop the reaction, and the test tube was shaken vigorously for 5 minutes. Further, 3 mL of heptane and 2 mL of distilled water were added and shaken vigorously for 5 minutes. 3 mL of the upper layer (heptane layer) was transferred to a stoppered test tube and vigorously shaken with the same amount of 50% ethanol containing 0.05 molar sodium hydroxide to remove free fatty acids. Thereafter, 1 mL of a heptane layer and 10 mL of scintillation liquid (ACSII, manufactured by Amersham) were taken in a measuring glass bottle, and the radioactivity value was measured using a Packard liquid scintillation counter.
[0050]
The fat synthesis capacity was determined as 1 mL of adipocytes per hour and DPM per hour, and the fat synthesis capacity of each test substance was the amount of DPM by adding only insulin in the control test (actual value: (57 ± 2) × 10-4/ ML filled adipocytes / hr), relative to 100 (n = 3 average value comparison). The results are shown in Tables 7-9. In this experimental system, the measured DPM value without adding insulin and test substance is (27 ± 2) × 10.-4The relative value of the standard was 47. This value hardly changed even when the amount of each test substance added was increased in the absence of insulin.
[0051]
[Table 7]
Figure 0004626081
[0052]
[Table 8]
Figure 0004626081
[0053]
[Table 9]
Figure 0004626081
[0054]
From these data, the addition of insulin increases the ability to synthesize fat from glucose in adipocytes, and this ability to synthesize fat is determined by the addition of any of samples A-1 to A-4 and A-6 in the presence of insulin. Is also suppressed in a concentration-dependent manner, especially in the processing of red rhizome and triash rhizome processed products (dry powder, hydrous ethanol extract, hydrous acetone extract and its ethyl acetate soluble fraction). An inhibitory effect was observed. In addition, it was revealed that the ability of fat synthesis in adipocytes is synergistically suppressed when a processed product of plants belonging to the genus Pleurotus such as red pepper and Kyoka is used in combination.
[0055]
(D) Fat resolution by pancreatic lipase:
Tris buffer solution (N-tris (hydroxymethyl) methyl-2-aminoethanesulfonic acid containing 80 mg of reagent grade triglyceride purchased from Sigma, 10 mg of phosphatidylcholine, 5 mg of taurocholic acid and 0.1 mol / L sodium chloride, 9 mL of pH 7.0) was sonicated for 5 minutes, and 0.1 mL of pancreatic lipase 0.05 mL (10 units) and 0.1 mL of a test substance solution (dissolved or dispersed in the buffer solution) having a predetermined concentration were added to 0.1 mL. In addition, it was incubated at 37 ° C. for 30 minutes. This incubation solution was treated in the same manner as in the test method (A) described above, and the amount of free fatty acid produced was measured. Pancreatic lipase activity, that is, lipolysis by the lipase, is determined as the number of moles of oleic acid produced per hour from 1 L of the reaction mixture as the incubation solution, and the lipase activity when each test substance coexists The relative value when the lipase activity in the control test without addition is defined as 100 (comparison of the average value of the actual measurement values of n = 4) is shown. The results are shown in Table 10.
[0056]
[Table 10]
Figure 0004626081
[0057]
  From the data of Table 10, the fat resolution by pancreatic lipase is remarkably suppressed depending on the addition concentration of each processed product (samples P-1 to P-3) of Kyoko,In contrast to thisIn the processed products such as red pepper (samples A-1 to A-6), the suppression effect is small.However, extracts and refined products have a great inhibitory effectIn addition, it has been clarified that the combined use of each processed product of the plant belonging to the genus Pleurotus such as Kyoka and Pepper shows a synergistic inhibitory effect on lipolysis.
[0058]
(E) Long-term administration test of high fat diet:
Three-week-old ICR female mice (purchased from CLEA Japan, Inc.) were reared for one week with free access to food and water in a 12 hour light / dark cycle under temperature and humidity control. It was ingested over a week, sacrificed under ether anesthesia, and the body weight, the amount of neutral lipid and total cholesterol in liver tissue were measured by a conventional method. The high-fat diet composition (unit:% by weight) of the control group is beef tallow 40, corn starch 10, sugar 9, mineral mixture (Oriental Yeast Co., Ltd., AIN-76) 4, vitamin mixture (manufactured by the company, AIN) 1977) 1 and casein 36. When a test substance was added, a part of casein was replaced with a test substance (5% by weight).
[0059]
Neutral lipids and total cholesterol in the liver were obtained by homogenizing a portion of liver tissue (0.5 g) in 4.5 mL of Krebs Ringer's phosphate buffer (pH 7.4), and adding 0.2 mL of the homogenate to chloroform / Extraction with 4 mL of methanol (2/1, volume ratio), followed by concentration under a nitrogen atmosphere gave an extract, which was used as a measurement sample for triglyceride E test kit and total cholesterol E test kit (both Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) )). The results are shown in Table 11. The numbers in the table represent the mean value ± standard error (n = 14, ANOVA statistical processing). There was no significant difference in the amount of energy consumed between the control group and the test group in this study.
[0060]
[Table 11]
Figure 0004626081
[0061]
From this, compared with the case where only a high fat diet was ingested for 8 weeks, the weight decreased when each processed product (samples P-1 to P-3) was added, and the total cholesterol amount in the liver tissue Was not changed, but the amount of neutral lipid was found to be significantly reduced. This phenomenon was also slightly observed in each processed product (samples A-1 to A-4 and A-6) such as red pepper. In addition, synergistic effects such as weight loss were observed when each processed product of plants belonging to the genus Pleurotus such as Kyoka and Akashouma was used.
[0062]
Reference prototype 1
  Add 120 mg of Garcinia camphor skin extract, 50 mg of beeswax and 50 mg of borage oil to 120 mg of the mixture of the present invention consisting of sample A-2 and sample P-3 (1: 1, weight ratio) and mix well at about 45 ° C. The mixture was homogenized and subjected to a capsule filling machine to produce a gelatin-coated capsule preparation having an inner volume of 250 mg per grain. When 10 volunteers (adult males and females with body fat percentage based on obesity level of 20% or more) who wish to diet were subjected to a monitor test of taking 1 capsule per day for 2 weeks, 9 people lost weight. Admitted. This preparation can be used as an anti-obesity edible composition or pharmaceutical composition that can be taken orally. Moreover, the said mixture of this invention was made into each sample A-3 only, only sample A-6, or each sample P-2, and the other conditions were made the same, and the capsule formulation was made as an experiment. Similar anti-obesity effects were also observed in these.
[0063]
Reference prototype 2
  Sample A-2: Oolong tea leaves powder = 3: 2 (weight ratio) of the mixture of the present invention 5.0Kg modified starch (Matsuya Chemical Co., Ltd., trade name: Pineflow)(Registered trademark)) 3.5Kg, tricalcium phosphate 0.3Kg, vitamin B10.3Kg, vitamin B20.3Kg, vitamin B6Together with 0.2 kg and vitamin C 0.4 kg, it was charged into a blender and stirred and mixed for 10 minutes. The mixture was supplied to a direct tableting machine to prepare a tablet having a diameter of 7 mm, a height of 4 mm, and a weight of 150 mg, and then a shellac thin film was coated by a coating machine to produce a tablet-shaped food.
[0064]
Reference prototype 3
  Put 100g butter, 120g shortening, 90g white sugar and 100ml milk into a domestic whipper, add 1 egg while stirring and mix well, then sample A-1 and sample P-2 together with 190g soft flour and 1g baking powder 10 g of the mixture of the present invention (3: 1, weight ratio) was added and kneaded thoroughly. This was allowed to stand for 30 minutes, then divided into 50 pieces with a mold and baked in an oven to produce a butter cookie.
[0065]
Reference prototype 4
  To 1 liter of commercially available vegetable juice, sample A-2: sample P-3: camellia seed extract (trade name: activin, manufactured by Inter Health)(Registered trademark)) = 1: 2: 1 (weight ratio) 5 g of the mixture of the present invention was added and mixed to produce a vegetable juice for preventing obesity. This was no inferior to the original vegetable juice.
[0066]
【The invention's effect】
  According to the present invention, it comprises a plant belonging to the genus PleurotusPancreatic lipase inhibitorAn inhibitor of fat synthesis from glucose induced by insulin in adipocytes is provided, which comprises Kyokyo. These agents inhibit the hydrolytic ability of fat by pancreatic lipase due to processed powders such as dried powder, extracts or purified products of roots and / or rhizomes of plants belonging to the genus Pleurotus such as red pepper, Therefore, the absorption of fat from the intestinal tract is suppressed, and the effect of suppressing the increase in body weight and the increase in the amount of neutral lipids in the liver due to the intake of a high fat diet is exhibited. Moreover, due to the same processed product of the roots and / or rhizomes of kyoto, there is an effect of suppressing the ability to synthesize fat from glucose in fat cells induced by insulin. Furthermore, the combination containing the processed products having different origins synergistically exhibits a remarkable anti-obesity effect. In the present invention, the above-mentionedPancreatic lipase inhibitorAn edible composition comprising an adipocyte fat synthesis inhibitor is provided, which can be effectively used for the prevention, treatment, slimming, weight loss, diet, etc. of obesity symptoms.

Claims (1)

チダケサシ属に属する植物であるアカショウマ又はトリアシショウマの根及び/又は根茎の抽出物又は精製物を含有してなる膵臓リパーゼ阻害剤。A pancreatic lipase inhibitor comprising an extract or purified product of the roots and / or rhizomes of red or tricholoma which is a plant belonging to the genus Pleurotus.
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