JP4549698B2 - シナノショウキランの無菌人工培養方法 - Google Patents
シナノショウキランの無菌人工培養方法 Download PDFInfo
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Description
人工受粉させた種子に発芽阻害物質の除去処理及び殺菌処理を施す前処理工程と、
種子を発芽促進剤が入った培地に播種し培養する第一の培養工程と、発根促進剤を入れた培地で培養する第二の培養工程とを設けて苗を生長させる培養工程と、
培養した苗を培地から培養土に移し替えて順化、育苗させる工程
からなる、野生ランの大量生産方法である。
人工増殖のための試料として、シナノショウキランの花茎、さく果、及び地下茎を採取した。シナノショウキランの生息地では、開花・結実期の気温12〜26℃、10cm深さの地温17〜18℃、40cm深さの地温15〜17℃、湿度66〜99%、照度610〜43700lx、光子量11〜658μmolm-2s-1との測定結果を得た。シナノショウキランの好む環境は、高温になることはないが、湿度が高く直射の届きにくい環境であることが予想できる。
<無菌発芽と無菌増殖>
1)無菌発芽
採取したさく果は、流水下で脱脂綿でこすりながら表面を洗浄し、70%エタノールに30秒間浸漬して攪拌した。つぎに1%次亜鉛素酸ナトリウム水溶液に10分浸漬・攪拌し、滅菌水で5分×3回すすいだ。さらに、70%エタノールに1分浸漬・攪拌した後、ガスバーナーで表面を焼いて完全に滅菌した。
無菌発芽培地で発芽後、プロトコーム状あるいはリゾームへと生長した段階で数種の無菌増殖培地へと移植し、定期的な重量測定、写真撮影など行い経過を観察した。
<考察>
ショウキラン属は、これまで殆ど研究例がなく、ショウキランの保護対策を確立するために、人工受粉、無菌培養に取り組んできた。
Claims (8)
- シナノショウキランの無菌人工培養において、種子を無菌発芽培地上で無菌的に発芽させる工程と、発芽し分化したものを無菌増殖培地で増殖させる工程とを備え、
前記無菌発芽培地の成分組成が、無機質の窒素・リン・カリウムを約1:1:3の割合で含有する複合肥料0.5〜8.0kgm -3 、窒素源0.5〜5.0kgm -3 、炭素源2.0〜60.0kgm -3 、凝固剤0〜20.0kgm -3 、の組成要件を満たし、また、
前記無菌増殖培地の成分組成が、無機質の窒素・リン・カリウムを約1:1:3の割合で含有する複合肥料0.5〜8.0kgm -3 、窒素源0.5〜5.0kgm -3 、炭素源2.0〜60.0kgm -3 、凝固剤0〜20.0kgm -3 、の組成要件を満たす、
ことを特徴とするシナノショウキランの無菌人工培養方法。 - 前記無菌増殖培地で増殖させる工程の後、さらに無菌肥大培地であるNorstog培地で肥大させることを特徴とする請求項1記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
- 前記無菌発芽培地及び前記無菌増殖培地の成分組成のうち、複合肥料が微粉ハイポネックス(ハイポネックスジャパン(株)登録商標)であることを特徴とする請求項1又は2記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
- 前記無菌発芽培地及び前記無菌増殖培地の成分組成のうち、窒素源がタンパク質の加水分解物であることを特徴とする請求項1、2又は3記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
- 前記タンパク質の加水分解物が、カザミノ酸であることを特徴とする請求項4記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
- 前記無菌発芽培地及び前記無菌増殖培地の成分組成のうち、炭素源が単糖類、二糖類又はオリゴ糖の群から選ばれる一種又は二種以上であることを特徴とする請求項1〜5いずれか一記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
- 前記無菌発芽培地及び前記無菌増殖培地の成分組成のうち、凝固剤がゲルライト(ジェランガム)であることを特徴とする請求項1〜6いずれか一記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
- 前記無菌発芽培地及び前記無菌増殖培地が、pH約5.3〜6.0であることを特徴とする請求項1〜7いずれか一記載のシナノショウキランの無菌人工培養方法。
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