JP4342314B2 - 病変部位への特異的送達のための開裂薬剤 - Google Patents
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Description
i)免疫調節タンパク質(IRP)またはその機能性フラグメントである少なくとも1個の調節部分と、
ii)前記IRPを不活性化またはほぼ不活性化する担体タンパク質と、
iii)これらの間に配される少なくとも1個の開裂部位とを有することにより、前記調節部分がホスト体内の標的臓器又は組織中若しくは標的臓器又は組織の付近に存在する場合に前記開裂部位が開裂して調節部分が前記担体タンパク質から遊離することによってその調節活性を回復することを特徴とする治療薬が提供される。
i)治療活性を有する少なくとも1個の調節部分と、
ii)前記調節部分を不活性化またはほぼ不活性化する担体タンパク質と、
iii)これらの間に配される少なくとも1個の開裂部位とを有する治療薬において、前記開裂部位がマトリクス・メタロプロテイナーゼ(MMP)またはアグリカナーゼの基質からなることにより、ホスト体内でMMPまたはアグリカナーゼが活性である部位において前記開裂部位が開裂して前記調節部分が前記担体タンパク質から遊離することによってその治療機能を発揮することを特徴とする治療薬が提供される。
i)免疫調節タンパク質(IRP)またはその機能性フラグメントである少なくとも1個の調節部分と、
ii)前記IRPを不活性化またはほぼ不活性化する担体タンパク質と、
iii)これらの間に配される少なくとも1個の開裂部位とを有する治療薬において、前記開裂部位が補体系の少なくとも1つの酵素の基質からなることにより、前記治療薬がホスト体内の補体が活性である部位内または付近にある場合に前記開裂部位が開裂して前記免疫調節部分が前記担体タンパク質から遊離することによってその免疫調節活性が発揮されることを特徴とする治療薬が提供される。
アミノ酸配列:RNITEGEARSVILTVKを有するIGD1、
アミノ酸配列:TTFKEEEGLGSVELSGLを有するIGD2、及び、
アミノ酸配列:GYTGEDFVDIPENFFGVGG−EEDITVQTVTWPDMELPLPRNITEGEARGSVILTVKPIFEVSPSPLEPEEPFTFAPを有するIGD75がある。
(1)ラットDAF−IgG1では、可溶性のDAF(4個の短いコンセンサス反復配列(short consensus repeats)(SCRs)からなる)と比較して、補体の古典的経路の調節能が10倍低下している。
実施例
組換えタンパク質の調製
方法例1:−ラットDAF−Ig及びCD59−Ig
ラットDAFの4個のSCRをコードしたDNAを発現ベクターSigpIg(R&Dシステムズ)にクローニングし、CD59のシグナルペプチドとGPIアンカーシグナル配列を除いた細胞外ドメインの全体をコードしたDNAを、ベクターpIgPlus(R&Dシステムズ)にクローニングした。いずれの場合も調節因子をコードしたDNAを、ヒトIgG1のヒンジ領域及びFcドメインをコードしたDNAの上流かつ同じフレーム内にクローニングした。高レベルの発現を実現するため、シグナルペプチド、調節因子、及びIgドメインをコードしたDNAをPCRによって高発現ベクターであるpDR2ΔEF1αにサブクローニングした。製造者の指示にしたがってリポフェクタミン(ライフテクノロジーズ)を使用してCHO細胞をトランスフェクトし、400μg/mlのヒグロマイシンB(ライフテクノロジーズ)による選択を行って安定した細胞系を確立した。上清を回収してProsepAカラム(バイオプロセシング社、コンセット 英国)に流して融合タンパク質を精製した。このカラムをPBS次いで0.1Mクエン酸塩緩衝液(pH5.0)にて洗ってコンタミナントとなるウシIgを除去し、0.1Mグリシン/HCl(pH2.5)で融合タンパク質を溶出した。溶出したタンパク質はTrisにて中和し、限外濾過で濃縮してPBS中に透析した。
ラットDAF(C−末端残基はLys254)の4個のSCR及びシグナルペプチドをコードしたDNAを発現ベクターpDR2ΔEF1に直接クローニングした。CHO細胞を上記のようにトランスフェクトした。モノクローナル抗DAF(RDII-24)カラムでアフィニティークロマトグラフィを行ってsDAFを調製した。50mMのジエチルアミン(pH11)を用いてタンパク質を溶出し、直ちに凍結乾燥した。乾燥したタンパク質を1M NaClを含むリン酸緩衝液中に可溶化し、Superose12ゲル濾過カラム(アマシャム・ファルマシア・バイオテックAB、ウプサラ スウェーデン)にかけた。タンパク質をPBSで溶出し、DAFを含む画分を特定した。限外濾過によって純粋なDAFを濃縮した。トランスフェクトしたCHO細胞で細胞外部分の全体(GPIアンカーを除く)を含む可溶性のCD59も生産されており、idENTIGENcyf(カーディフ 英国)から入手した。
コントロールとしてSCRを含む融合タンパク質を実施例1と同様にして更に調製した。このタンパク質はC調節機能を持たないものであった。
2段階PCRによってアミノ酸(Ser−Gly−Gly−Gly−Gly)2−SerがCD59と抗体のヒンジ領域の間に挿入されたCD59含有融合タンパク質を更に調製した。簡単に述べると、CD59とIgドメインをコードしたDNAを2つの別々の反応で、CD59の3’末端及びIgのヒンジ領域の5’末端にスペーサードメインの配列が組み込まれた新規なプライマーを用いて再増幅した。これら2種類のPCR産物を混合してスペーサードメインをコードした相補的DNA配列でアニールさせた。外側プライマーを用いたPCRの後、その産物を発現ベクターpDR2ΔEF1αにライゲートした。上述のように細胞をトランスフェクトし、第2のCD59−Igタンパク質を精製した。ピアース・クーマシーアッセイ(Perbio Science UK Ltd,タッテンホール 英国)を用い、ウシ血清アルブミンをスタンダードとして用いてタンパク質の濃度を決定した。
方法例5:−本発明に基づくヒトDAF−IgG2及びヒトDAF−IgG4
Harris CL等(Immunology,100,462(2000))によって述べられるようにしてヒトDAF−IgG1を作成した。ヒトDAFとIgG2またはIgG4のいずれかとからなる融合タンパク質を以下のようにして作成した。すなわち、ヒトIgG4またはIgG2のヒンジ領域及びFcをコードしたDNAをヒト末梢血白血球RNAからRT−PCRによって増幅した。抗体のヒンジ領域のアミノ末端配列は次のとおり。
IgG4長鎖ヒンジ: VDKRVES…
IgG2: ERKCCV…
プライマーは後の高発現ベクターpDR2ΔEF1αへのライゲーションを可能とする制限部位を組み込んだものである(5’末端のBamH1及び3’末端のEcoRV)。DAF配列を有するプラスミドを鋳型として用いたPCRによって、シグナルペプチドと、hDAFの最初の3個あるいは4個のSCRドメインのいずれかをコードしたDNAを増幅した。DAFドメインのカルボキシ末端配列は次のとおり。
4SCR型(IgG4長鎖ヒンジを有する):…KSLTSK
4SCR型(IgG4短鎖ヒンジ及びIgG2を有する):…PPPECRG
増幅されたDNAはアガロースゲル上での電気泳動によって鋳型から分離した。このインサートをゲルから抽出し、PCRプライマーにコードされた部位(3’末端のBamH1及び5’末端のXbal)で適当な制限酵素により切断し、ヒト免疫グロブリンのヒンジ領域及びFcドメインをコードしたDNAの上流かつ同じフレーム内となるようにpDR2ΔEF1αにライゲートした。PCR反応でDNAプルーフリーディングポリメラーゼを使用し、PCRによってエラーが導入されなかったことを配列決定により確認した。製造者の指示にしたがってリポフェクタミン(ライフテクノロジーズ)を使用してCHO細胞をトランスフェクトし、400μg/mlのヒグロマイシンB(ライフテクノロジーズ)による選択を行って安定した細胞系を確立した。上清を回収してProsepAカラム(バイオプロセシング社、コンセット 英国)に流して融合タンパク質を精製した。このカラムをPBS次いで0.1Mクエン酸塩緩衝液(pH5.0)にて洗ってコンタミナントとなるウシIgを除去し、0.1Mグリシン/HCl(pH2.5)で融合タンパク質を溶出した。溶出したタンパク質はTrisにて中和し、限外濾過で濃縮してPBS中に透析した。精製したタンパク質はSDS−PAGEで分析した。
プロトコール例1:−DAF−Ig及びsDAFの機能分析
ラットDAFの機能を評価するため、抗体でコートしたヒツジ赤血球(E;2%(v:v))を、PBS中で30分間、1/500に希釈したウサギ抗ヒツジE(Amboceptor, Behring Diagnostics GmbH)とともに細胞をインキュベートすることによって調製した。感作したEは、GVB(CFD(C−固定希釈液に0.1%(w/v)ゼラチンを加えたもの(Immunol 100 463(2000)))からなるゼラチンベロナール緩衝液)中で3回洗い、2%に再懸濁した。部分的溶血(50〜80%)が起こるラット血清濃度を求めるため、抗体コート抗ヒツジE(EA)を37℃で30分間、異なる希釈度の血清とともにインキュベートした。細胞を遠心してペレットとした後、少量の上清(50μl)を水(100μl)に加え、415nmでの吸光度を測定することによって溶血量を定量した。血清の代わりに、緩衝液のみ(0%コントロール)または0.1%TritonX100(100%コントロール)をEに加えることによってコントロール試料を調製した。溶血率(%)は次のように計算した。溶血率(%)=100x(試料のA415−0%コントロールのA415)/(100%コントロールのA415−0%コントロールのA415)。この組換え阻害剤の機能を試験するため、50〜80%の溶血率を与える所定の希釈度のラット血清及び異なる希釈度の試験タンパク質とともにEAをインキュベートした。37℃でのインキュベーションの後、溶血率(%)を上述のように求めた。
モルモットE(GPE)をGVB中で洗い2%(v:v)となるようにGVBに再懸濁した。これを、モノクローナル抗C8アフィニティーカラムに流すことによってC8を除去した等量の25%(v:v)正常ヒト血清と37℃で30分間インキュベートした。得られた細胞(GPE−C5b7)を10mM EDTAを含むPBSで洗い、2%となるように再懸濁した。PBS/EDTA中でGPE−C5b7を異なる希釈度のラット血清と37℃で30分間インキュベートすることによって、50〜80%の溶血率を与えるラット血清量を求めた。可溶性CD59の機能を評価するため、PBS/EDTA中でGPE−C5b7を異なる希釈度の試験薬剤及び所定濃度のラット血清とインキュベートした。0%及び100%コントロールを含め、溶血率(%)を上述のように求めた。
説明例1:DAF−Igのin vivoでのクリアランスはsDAFと比較して遅くなる。
説明例2:−DAF−Igは抗原誘導関節炎(AIA)の発症を遅らせ、進行を阻害する。
実施例1:−DAF−Ig、sDAF、CD59−Ig及びCD59のパパインによる開裂のin vitroでの機能分析
溶血アッセイによって、DAF−Ig及びsDAFがCの古典的経路を阻害する能力について分析を行い、sCR1による溶血の阻害と比較した。sDAF及びsCR1がいずれも強力な溶血の阻害剤であったのに対し、DAF−Igの溶血阻害能は低かった(図3)。パパインを用いてIgをDAFから切断する実験によって、DAFのin vitroでの機能活性はIgの切断によって回復することが示された。このことは、パパインによる消化によってIgドメインから切り離されたDAFが、CHO細胞から分泌されたsDAFと同等の活性を有することによって示された。
図6は本発明に基づく治療薬のプロドラッグ型を模式的に示したものであり、調節部分と担体タンパク質のヒンジ領域の間の標的酵素開裂部位の位置が示されている。
ヒトIgG2のヒンジ領域(ERKCCV・・・のアミノ酸配列で始まる)、CH2及びCH3ドメインをコードしたDNAを、末梢血単核細胞の全RNAからRT−PCRによって増幅し、高発現ベクターPDR2ΔEF1αにライゲートした(Charreau et al in Transplantation 58 1222(1994)。ヒトDAFのシグナルペプチドと最初の3個のSCR(・・・CREIYのアミノ酸配列で終わる)をコードしたDNAを鋳型プラスミドからPCRにより増幅して、前述の方法例5で述べたように、抗体ヒンジ領域をコードしたDNAの上流かつ同じフレーム内となるように同ベクターにライゲートした。CHO細胞をトランスフェクトして融合タンパク質(S3DAF−IgG2。「親」分子とも呼ぶ。開裂部位を持たない。)を方法例1で述べたように精製した。「DIPEN」とここで呼ぶ酵素部位をコードしたDNA(購入したオリゴマー)をDAFとIgをコードしたDNAの間に挿入することにより、実施例2で述べたようにBamH1制限部位を用いた治療薬の所定のプロドラッグ型(「DIPENプロドラッグ」と呼ぶ)を調製した。挿入した酵素部位の配列はGEDFVDIPENFFGVGGEEDである。これを図16に示し、開裂部位を示した(DIPEN配列の直ぐ上流)。この部位は多くのMMPによって切断されるものである。
S3DAF−IgG2(親分子)及びDIPENプロドラッグを、実施例2で述べたようにタンパク質Aアフィニティークロマトグラフィ及びSuperose12カラムでのゲル濾過により精製した。基本的にプロトコール例1で述べたようにして抗体コートヒツジ赤血球(EA)の溶血の阻害によって機能活性を評価した(図17)。このとき、各インキュベーション液で緩衝液の組成(GVB,PBSまたはTris/Ca2+)が等しくなるようにした。コントロールのインキュベーション液は、非調節性SCRを有する融合タンパク質(ネガティブコントロール)と、酵母に産生させたDAFの3個のSCR部分を含んだものである。IH50の計算とモル濃度の調節(等モル数のDAF)によって、DIPENプロドラッグはDAFの3SCR型よりも活性が約20倍低いことが示された。酵素部位の挿入が「スペーサー」ドメインとして機能し、S3DAF−IgG2の活性が一部回復した(「親分子」をDIPENプロドラッグと比較した)。
実施例2に述べたようにして両薬剤をTris/NaCl/Ca2+中にゲル濾過し(図18、プロドラッグの濾過)、37℃で24時間インキュベートした。MMP3(Calbiochem、組換え触媒ドメイン)の存在下でS3DAF−IgG2をインキュベートして標的酵素による非特異的開裂を評価した。各インキュベーション液から所定の時点に少量づつを採取して、還元性SDS−PAGEローディングバッファ中で実験の終了まで凍結保存した。Morrisseyの方法(Morrissey.,Anal Biochem 117 307−10(1980))にしたがって試料を10%ゲルに流して銀染色した(図19)。37℃で保存した場合、いずれの分子も安定であった。親分子はMMP3の存在下でも安定であった。
下記の表に示した濃度でプロドラッグを1、2.5、5、7.5及び24時間にわたってMMP3とインキュベートした。
プロドラッグがメタロプロテアーゼ部位で開裂されたことを確認するため、上記のインキュベーション液(図20)の一部を11%還元性SDS−PAGEゲルに流してウエスタンブロットし、BC14でプローブして開裂後に生成した(抗体「側」の)ネオエピトープを検出した(実施例2及び図11で述べたようにして行った)。DIPENプロドラッグをMMP3とインキュベートした場合にはBC14反応性のネオエピトープが検出されたが、プロドラッグのみをインキュベートした場合(プロドラッグコントロール)や、親分子をMMP3とインキュベートした場合には反応性ネオエピトープは検出されなかった(図21)。同様のインキュベーション液(DIPENプロドラッグ 200μg/ml、MMP3 5μg/ml)から得た試料を、非還元性SDS−PAGE、及びモノクローナル抗DAF抗体を使用したウエスタンブロットによって分析した。コントロールとしてプロドラッグをMMP3の非存在下でインキュベートした。プロドラッグを酵素とインキュベートした場合に、放出されたDAFが検出された(図22)。
DIPEN薬剤をMMP3とインキュベートすることによって補体調節活性が回復することを証明するため、下記のインキュベーション液を調製した。
(2)プロドラッグ(200μg/ml);MMP3(5μg/ml)
(3)BSA(200μg/ml);MMP3(5μg/ml)
タンパク質は最大で24時間インキュベートしてSDS−PAGE及び銀染色によって分析した(図23の挿図)。補体調節活性についてプロトコール例で述べたように溶血アッセイによって、プロドラッグの3時間及び6時間のインキュベーション(MMPの存在下及び非存在下)、及びBSAの6時間のインキュベーション(MMPの存在下)を分析した。溶血率(%)ならびに阻害率(%)を算出した(ネガティブコントロール(非調節性融合タンパク質)との比較。)(図23)。BSAのインキュベーション中のMMP3の存在によって補体によって媒介されるEAの溶血に影響は見られなかった。図23から分かるように、DIPENプロドラッグをMMP3と3時間インキュベートすることによってほぼ完全なDAF活性が回復した。
精製酵素ではなく、後炎症性サイトカインで処理した軟骨細胞から放出された酵素によってプロドラッグが開裂されるかを判定するため、実施例2で述べた治療薬(ヒトDAFの4個のSCR部分をヒトIgG4及び挿入された酵素部位としての「IGD75」と融合させたもの(図7))を用いて実験を行った。
これらのデータは、理想的にはIgG2を主鎖とし、メタロプロテアーゼによる短い開裂部位を含んだ新規なプロドラッグの調製法を説明するものである。「親」分子への酵素部位の挿入によってある程度の機能は回復するものの、本プロドラッグは放出されるDAFと比較して活性が大幅に低減している。この酵素部位を更に短縮化することによってプロドラッグの機能阻害を最大化することが可能である。親分子(酵素部位を含まない)では機能はほぼ二桁低下している。DIPENプロドラッグは、試験を行った複数のメタロプロテアーゼによって開裂された。消化後のDAFの放出ならびにネオエピトープの生成が銀染色及びウエスタンブロットによって実証された。銀染色による評価によれば開裂反応はほぼ完全であった。プロドラッグをMMP3とインキュベートすることによって薬剤はほぼ完全な補体調節機能を回復した。標的細胞である軟骨細胞から放出された天然酵素を用いてこれらの薬剤の開裂の分析が行われた点は重要である。
Claims (28)
- ホストの免疫系の1以上の反応を調節する治療薬であって、
i)補体調節タンパク質(CReg)またはその機能性フラグメントである少なくとも1個の調節部分と、
ii)IgG抗体またはそのフラグメントである担体タンパク質であって、前記CRegを不活性化またはほぼ不活性化する担体タンパク質と、
iii)これらの間に配される、酵素の基質である少なくとも1個の酵素的に開裂可能な部位とを有することにより、前記調節部分がホスト体内の標的臓器又は組織中若しくは標的臓器又は組織の付近に存在する場合に前記開裂部位が開裂して調節部分が前記担体タンパク質から遊離することによってその調節活性を回復することを特徴とする治療薬。 - 全身的には不活性である治療薬であって、
i)補体調節タンパク質(CReg)を含み、免疫調節剤としての治療活性を有する少なくとも1個の調節部分と、
ii)前記調節部分を不活性化またはほぼ不活性化する、IgG抗体である担体タンパク質と、
iii)これらの間に配される少なくとも1個の酵素的に開裂可能な部位とを有する治療薬において、前記酵素的に開裂可能な部位がマトリクス・メタロプロテイナーゼ(MMP)またはアグリカナーゼの基質であることにより、ホスト体内でMMPまたはアグリカナーゼが活性である部位において前記酵素的に開裂可能な部位が開裂して前記調節部分が前記担体タンパク質から遊離することによってその治療機能を発揮することを特徴とする治療薬。 - ホストの免疫系の1以上の反応を調節するための治療薬であって、
i)補体調節タンパク質(CReg)またはその機能性フラグメントである少なくとも1個の調節部分と、
ii)前記CRegを不活性化またはほぼ不活性化する、IgG抗体である担体タンパク質と、
iii)これらの間に配される、補体系の少なくとも1つの酵素の基質からなる少なくとも1個の酵素的に開裂可能な部位とを有する治療薬において、前記治療薬がホスト体内の補体が活性である部位内または付近にある場合に前記開裂部位が開裂して前記免疫調節部分が前記担体タンパク質から遊離することによってその免疫調節活性が発揮されることを特徴とする治療薬。 - 前記CRegは、崩壊加速因子、または血漿プロテアーゼ因子1の補因子、または膜攻撃複合体の形成阻害因子、またはこれらの組合わせとして機能することを特徴とする請求項1乃至3のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記治療薬は、複数の調節部分を有し、そのうちの2個が異なる活性を有することを特徴とする請求項1乃至4のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位は、補体系の酵素の基質であることを特徴とする請求項1乃至5のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位は、複数の開裂部位からなることを特徴とする請求項1乃至6のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位の少なくとも1個は、マトリクス・メタロプロテイナーゼ(MMP)またはアグリカナーゼの基質からなることを特徴とする請求項1乃至7のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位は、MMP3またはMMP8の基質からなることを特徴とする請求項8に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位の少なくとも1個は、アグリカンのinter−globularドメイン(IGD)の部分からなることを特徴とする請求項1乃至9のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位は、前記IGDの17〜75個のアミノ酸からなることを特徴とする請求項10に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位は、前記IGDのアグリカナーゼ開裂部位の最小部分からなることを特徴とする請求項10に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位はアミノ酸配列DIPENを含むことを特徴とする請求項8に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位はアミノ酸配列:GEDFVDIPENFFGVGGEEDを有することを特徴とする請求項8または13に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位はアミノ酸配列:RNITEGEARGSVILTVKを有することを特徴とする請求項8に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位はアミノ酸配列:TTFKEEGLGSVELSGLを有することを特徴とする請求項8に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位はアミノ酸配列:GYTGEDFVDIPENFFGVGGEEDITVQTVTWPDMELPLPRNITEGEARGSVILTVKPIFEVSPSPLEPEEPFTFAPを有することを特徴とする請求項8に記載の治療薬。
- 前記IgG抗体は、ヒト免疫グロブリンIgG4、IgG2、またはIgG1であることを特徴とする請求項1乃至17のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記免疫グロブリンのFabアームの1以上は、更なる調節部分を含むかまたはこれにより置換されていることを特徴とする請求項1乃至17のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記免疫グロブリンのFabアームの1以上は、標的化部分を含むかまたはこれにより置換されていることを特徴とする請求項1乃至19のいずれか1つに記載の治療薬。
- 前記標的化部分は、1以上の膜標的化分子からなることを特徴とする請求項20に記載の治療薬。
- 前記標的化部分は、前記調節部分と前記酵素的に開裂可能な開裂部位との間に挿入された1以上のアドレシンを有することによって、開裂後に前記アドレシンが調節部分をその標的部位に誘導することを特徴とする請求項21に記載の治療薬。
- 前記アドレシンはAPT542であることを特徴とする請求項22に記載の治療薬。
- 前記酵素的に開裂可能な部位は、前記調節部分と前記担体タンパク質のヒンジ領域との間に配されることを特徴とする請求項1乃至23のいずれか1つに記載の治療薬。
- 請求項1乃至24のいずれか1つに記載の治療薬を製造する方法であって、調節部分、担体タンパク質、およびこれらの間に配されるアミノ酸配列またはタンパク質である、少なくとも1個の酵素的に開裂可能な部位をコードした少なくとも1個の核酸分子でトランスフォームまたはトランスフェクトした細胞にタンパク質を発現させることを含む方法。
- 請求項1乃至24のいずれか1つに記載の治療薬を含む、疾患を治療するための薬剤。
- 治療する前記疾患が、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、腎炎、多発性硬化症、成人呼吸窮迫症候群(ARDS)、虚血再灌流傷害、脱髄、重症筋無力症、アルツス反応、臓器移植後の拒絶反応からなる群から少なくとも1つ選択される炎症性、免疫性、外傷性、または虚血性の疾患である請求項26に記載の薬剤。
- 請求項1乃至24のいずれか1つに記載の治療薬と薬学的に許容される担体を組み合わせて含む医薬組成物。
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