JP4227092B2 - 走査型電子顕微鏡を用いる生体物質アッセイシステムおよびアッセイ法 - Google Patents
走査型電子顕微鏡を用いる生体物質アッセイシステムおよびアッセイ法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4227092B2 JP4227092B2 JP2004297194A JP2004297194A JP4227092B2 JP 4227092 B2 JP4227092 B2 JP 4227092B2 JP 2004297194 A JP2004297194 A JP 2004297194A JP 2004297194 A JP2004297194 A JP 2004297194A JP 4227092 B2 JP4227092 B2 JP 4227092B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- probe
- regions
- independent
- dna
- biological sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
Description
図1は本発明の実施に好適なDNAチップの一部を斜視図で示す概念図である。チップ100は酸化膜表面を有するシリコン基板101に形成される。各エレメント1は700nmφの円柱の形をしている。各エレメントの間隔2は300nmである。すなわち、エレメントは1μmピッチで並んでいる。エレメントは50×50の単位で、一転鎖線3で囲って示すように、ひとつのエレメントグループをなしており、各エレメントグループ3は20×20個整列して、設けられている。各エレメントグループ3間には幅40nm、深さ20nmの溝5が存在し、エレメントグループ内の各エレメントの4隅にはインデクシング用のピラー4が設けてある。隣接するエレメント間のピラー4はそれぞれのエレメントで共用される。ピラー4は円筒形で径が最低50nmφから10nmごとに17段、高さが5nmから10nmごとに17段の組み合わせのものを各エレメントの4隅のピラー4をバーコードのようにインデクシングに用いる。よって1エレメントグループ3内に9回同じピラー4が出現するが、同一サイズのピラー4が連続して出現しない様に、なおかつ、ピラー4のサイズがなるべくランダムになるように配列してある。
図6(a),(b),(c)はピラー4のプローブハイブリダイゼーションの速度を速める効果の他の例について説明する全体図であり、図7は、図6による効果の詳細な説明図である。
アフィニティー精製ポリクローナル抗AFP抗体と抗CEA抗体を、異なるエレメントに固定したプロテインチップを得る。これとは別に、同じ抗AFP抗体と抗CEA抗体をパパイン分解して得られるF(ab’)2断片にSH基を導入する。挿入されるSH基はF(ab’)21分子あたり3〜4分子である。20nmの金ナノ粒子と混合し、表面にF(ab’)2が結合した粒子を得る。試料として1zmol/μlの濃度のAFP単独、5zmol/μlの濃度のCEA単独、何も入っていないコントロールを用意する。溶媒は0.1%Tween20と0.5%BASを含むPBS(pH7.4)である。プロテインチップに各溶液を反応させ、さらに金ナノ粒子標識F(ab’)2を反応させる。反応時間は最初の試料反応が5分間、金ナノ粒子標識F(ab’)2の反応が5分間である。反応終了後、0.1%Tween20と0.5%BASを含む緩衝液で洗浄し、SEMで検出する。
Claims (10)
- 基板上にそれぞれ異なったプローブを固定するための独立した複数の領域が設けられ、前記独立した複数の領域の4隅に特定の形を持つ構造体が配置されており、これらの4隅に配置された特定の形を持つ構造体の組み合わせを前記独立した複数の領域ごとに異なったものとした生体試料解析チップであって、
前記独立した複数の領域ごとに異なったものとした前記構造体の組み合わせの電子顕微鏡像が、前記独立した複数の領域のインデクシングに使用される、生体試料解析チップ。 - 前記独立した複数の領域の個々の大きさが、700nmφの円形の面積以下、3nmφの円形の面積以上である、請求項1に記載の生体試料解析チップ。
- 前記構造体が、円筒形のピラーであり、径が50nmφから10nmごとに17段、高さが5nmから10nmごとに17段の組み合わせのものが前記各領域の4隅に配置されている、請求項1または2に記載の生体試料解析チップ。
- 基板上にそれぞれ異なったプローブを固定するための独立した複数の領域が設けられ、前記独立した複数の領域の4隅に特定の形を持つ構造体が配置されており、これらの4隅に配置された特定の形を持つ構造体の組み合わせを前記独立した複数の領域ごとに異なったものとした生体試料解析チップを用いる生体試料解析法であって、
前記プローブと結合する試料標的物質が導電性の微粒子により標識されたものであり、
前記生体試料解析チップ表面に電子線を照射して、前記構造体および前記導電性の微粒子から放出される2次電子を検出する工程を含み、
前記独立した複数の領域ごとに異なったものとした前記構造体の組み合わせの電子顕微鏡像が、前記独立した複数の領域のインデクシングに使用される、方法。 - 前記プローブがDNAプローブであり、前記試料標的物質が、該プローブとハイブリダイズずるDNA断片である、請求項4に記載の方法。
- 前記プローブが抗体またはそのF(ab’) 2 断片であり、前記試料標的物質が該抗体に対する抗原である、請求項4または5記載の方法。
- 前記生体試料解析チップ上に試料溶液を滴下してその上面に薄いプレートまたは所定の速度で回転するロッドを配置し、これを基板上で左右に移動させて前記プローブと試料溶液中の試料との結合を促進する請求項4〜6のいずれかに記載の方法。
- 前記独立した複数の領域の個々の大きさが、700nmφの円形の面積以下、3nmφの円形の面積以上である、請求項4〜7のいずれかに記載の方法。
- 前記構造体が、円筒形のピラーであり、径が50nmφから10nmごとに17段、高さが5nmから10nmごとに17段の組み合わせのものが前記各領域の4隅に配置されている、請求項4〜8のいずれかに記載の方法。
- 前記導電性の微粒子が金微粒子である、請求項4〜9のいずれかに記載の方法。
Priority Applications (13)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2004297194A JP4227092B2 (ja) | 2004-10-12 | 2004-10-12 | 走査型電子顕微鏡を用いる生体物質アッセイシステムおよびアッセイ法 |
EP05016714A EP1626278A3 (en) | 2004-08-03 | 2005-08-01 | Cellomics system |
EP07013611A EP1901067A3 (en) | 2004-08-03 | 2005-08-01 | Cellomics system |
US11/195,662 US7569354B2 (en) | 2004-08-03 | 2005-08-03 | Cellomics system |
US12/143,156 US20090042200A1 (en) | 2004-08-03 | 2008-06-20 | Cellomics system |
US12/143,181 US20090042739A1 (en) | 2004-08-03 | 2008-06-20 | Cellomics system |
US12/471,993 US20100018862A1 (en) | 2004-08-03 | 2009-05-26 | Cellomics system |
US12/472,037 US20090325215A1 (en) | 2004-08-03 | 2009-05-26 | Cellomics system |
US12/472,010 US20100016569A1 (en) | 2004-08-03 | 2009-05-26 | Cellomics system |
US12/471,947 US20100016568A1 (en) | 2004-08-03 | 2009-05-26 | Cellomics system |
US12/471,853 US20100021933A1 (en) | 2004-08-03 | 2009-05-26 | Cellomics systems |
US13/755,079 US20130252848A1 (en) | 2004-08-03 | 2013-01-31 | Cellomics system |
US14/640,471 US20150231635A1 (en) | 2004-08-03 | 2015-03-06 | Cellomics system |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2004297194A JP4227092B2 (ja) | 2004-10-12 | 2004-10-12 | 走査型電子顕微鏡を用いる生体物質アッセイシステムおよびアッセイ法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006112792A JP2006112792A (ja) | 2006-04-27 |
JP4227092B2 true JP4227092B2 (ja) | 2009-02-18 |
Family
ID=36381439
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004297194A Expired - Fee Related JP4227092B2 (ja) | 2004-08-03 | 2004-10-12 | 走査型電子顕微鏡を用いる生体物質アッセイシステムおよびアッセイ法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4227092B2 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5583417B2 (ja) * | 2010-01-29 | 2014-09-03 | 公益財団法人神奈川科学技術アカデミー | 薄膜状元素の識別方法 |
JP4895062B1 (ja) * | 2011-02-01 | 2012-03-14 | 田中貴金属工業株式会社 | 食品中の動物肉由来タンパク質の免疫クロマト検出方法 |
EP4145131A4 (en) * | 2020-04-30 | 2024-05-29 | National University Corporation Hamamatsu University School Of Medicine | IMMUNOCHROMATOGRAPHY MEASUREMENT METHODS, EXCELLENT FOR IMMUNOCHROMATOGRAPHY MEASUREMENT, IMMUNOCHROMATOGRAPHY CHIP AND IMMUNOCHROMATOGRAPHY MEASUREMENT KIT |
-
2004
- 2004-10-12 JP JP2004297194A patent/JP4227092B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2006112792A (ja) | 2006-04-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5816291B2 (ja) | 生体分子分析方法及び生体分子分析装置 | |
US7985539B2 (en) | Nanoparticle probes with raman spectroscopic fingerprints for analyte detection | |
EP2147295B1 (en) | Sers nanotag assays | |
EP2410341A1 (en) | Analysis chip, analysis method and method for stirring solution | |
WO2009126336A1 (en) | Methods of controlling the sensitivity and dynamic range of a homogeneous assay | |
US20100248979A1 (en) | Reversed flow through platform for rapid analysis of target analytes with increased sensitivity and specificity and the device thereof | |
JP5822929B2 (ja) | 核酸分析装置 | |
US6756014B2 (en) | Biochemical sensor and biochemical testing system using the same | |
US20080050842A1 (en) | Method of visualization and quanitification of biopolymer molecules immobilized on solid support | |
JP4227092B2 (ja) | 走査型電子顕微鏡を用いる生体物質アッセイシステムおよびアッセイ法 | |
EP3074533B1 (en) | Method and device for accelerated surface-based reactions | |
JP2004520052A (ja) | 遺伝的特性を検出するための生化学的方法及び装置 | |
JP4099540B2 (ja) | 生体試料解析チップおよび解析法 | |
JP2003526096A (ja) | 核酸、dna、rna、pna及び蛋白質などの分子化合物のハイブリダイゼーションを同時かつ多角的に検出し定量化するための方法及びシステム | |
JP4637565B2 (ja) | 生体試料標識物および生体物質標識法および生体物質の検査法 | |
JP4076698B2 (ja) | 生体由来物質の検出方法および装置 | |
JP2015139373A (ja) | 生体分子分析デバイス、及び生体分子分析装置 | |
JP4740700B2 (ja) | 生体物質解析チップ、生体物質解析キットおよびこれらを用いる生体物質解析法 | |
US20040161862A1 (en) | Method of visualization and quantification of biopolymer molecules immobilized on solid support | |
JP4045535B2 (ja) | ビーズを用いた生化学的分析方法 | |
JP2002253233A (ja) | 生化学センサ及びこれを用いた生化学検査装置 | |
JP2005091246A (ja) | デバイスおよびその製造方法 | |
JP2001269198A (ja) | 多型遺伝子の型を決定する方法 | |
Moreau et al. | Applications—Example of Genotyping | |
Hodko et al. | IN DIAGNOSTICS AND NANOTECHNOLOGY |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060217 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20070125 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20070125 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20070319 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20070703 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20080213 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20080402 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080729 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080925 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20081104 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20081127 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111205 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121205 Year of fee payment: 4 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |