JP4155430B2 - Skin aging inhibitor and use thereof - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、皮膚老化抑制剤に関するものであり、より詳しくは、特定の植物の溶媒抽出物を有効成分とする皮膚老化抑制剤、ならびにこれを配合した化粧料、医薬品、医薬部外品あるいは食品に関するものである。
【０００２】
【従来の技術および問題点】
皮膚老化は、主に加齢による皮膚機能の低下および紫外線・食物等による外的環境により進行する。外的環境においては特に太陽光由来の紫外線、代謝等によって発生する活性酸素やフリーラジカルおよび生体内外から何等かの刺激において活性化されるヒアルロニダーゼが皮膚老化を促進すると言われている。
【０００３】
太陽光および生体内で生成する活性酸素やフリーラジカルは、生体中の細胞、生体成分および組織に損傷を与え、細胞、器官の機能低下が生じ、結果として動脈硬化、脳心血管障害、糖尿病、白内障、シミ・ソバカス、皮膚皺・弛み、高血圧、老人性痴呆症および癌等の様々な疾病を引き起こすことが明らかにされている。また食品においては、脂質の過酸化物や重合物の形成、蛋白質の変性、酵素の活性低下、色素成分分解による無色化等の劣化を生じ、これらの成分を含む食品の品質低下の原因にもなっている。
【０００４】
一方、ヒアルロニダーゼは、通常生体中の組織に不活性な状態で存在しており、生体内外から何らかの刺激においてヒアルロニダーゼが活性化され、基質である高分子ヒアルロン酸が低分子化され、これが起炎物質となり、炎症が進行すると言われている。また、ヒアルロン酸の低分子化により皮膚に関しては皮膚保湿性および張り等の低下を招くことが推察されている。
【０００５】
そこで活性酸素およびラジカル消去作用を有するα−トコフェロール、アスコルビン酸、システインおよびグルタチオン等が皮膚老化抑制剤として利用されている。α−トコフェロールは、クロマン環と炭素数１６の側鎖からなっており、その特性から脂溶性を有する物質のみに活性酸素消去作用を有する。また、アスコルビン酸は、炭素２位および３位にエンジオール基を有し、これが、活性酸素消去の官能基となっており、その特性から水溶性物質のみに効果を発する。これらは優れた活性酸素消去作用を有するが、安定性に乏しく、溶液では加熱処理もしくは経時的に分解し、十分な効果が認められなくなる。
【０００６】
システインは水溶液中では特に安定性が悪く、数日間でシスチンに変化し、沈殿物が析出してくるし、グルタチオンは高温多湿の環境下では経時的に分解し、異臭が発生してくるという欠点を有している。
合成の抗酸化剤および皮膚老化抑制剤としてＢＨＴ（butylated hydroxytoluene）、ＢＨＡ（butylated hydroxyanisole）等の使用が試みられているが、動物実験の結果、発癌の可能性が指摘されている。
【０００７】
また、in vitroにおいて高いヒアルロニダーゼ活性阻害作用が確認されたグルチルリチン酸、クロモグリク酸ナトリウム、バイカリン、インドメタシンおよびアスピリン等が使用されている。
しかしながら、グリチルリチン酸およびバイカリンにおいては、天然物で古来使用されており、安全性は比較的高いと言われているが、極微量で甘味を有し、もしくは鮮やかな朱色の色調を有しており、用途および使用濃度に制限がある。クロモグリク酸ナトリウムにおいては、妊婦投与時の胎児毒性の報告があり、医薬品として厳重な使用上の注意を要する。またインドメタシンおよびアスピリンにおいては、局所的な使用で発疹・痒み等の副作用が認められている。
【０００８】
このように従来の皮膚老化抑制剤は安全性、品質および有用性等で問題を抱えており、使用が制限される医薬品等の一部の利用に留まっているのが現状である。このような状況下にあって、人体にとって皮膚に塗布および食しても安全で、活性酸素・ラジカル消去作用および／または、ヒアルロン酸の低分子化に対して顕著に抑制し、容易に製造可能で、且つ安定して供給できる皮膚老化抑制剤の開発が望まれていた。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、人体に対して安全性が高く、活性酸素消去作用および／またはヒアルロニダーゼ活性阻害作用が強い皮膚老化抑制剤を提供することにある。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は、上記目的を達成するために提案されたものであって、本発明者らの長年にわたる研究の結果として見いだされた、特定のインドネシア産薬草・薬木から抽出された抽出物が活性酸素消去作用および／または、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有するとの新知見に基づいて完成したものである。
【００１１】
すなわち、本発明によれば、学名：ピプトゥルス アルジェンテウス［Pipturus argenteus(Forst.f.)（インドネシア名：Ｔｒｅｍｂｅｓｉ）］および／または学名：フィランツス プルケル［ Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. （インドネシア名：Ｎａｇａ ｂｕａｎａ）の植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とする皮膚老化抑制剤が提供される。
【００１２】
また本発明によれば、学名：ピプトゥルス アルジェンテウス［Pipturus argenteus(Forst.f.)（インドネシア名：Ｔｒｅｍｂｅｓｉ）］の葉、茎および樹皮および／または学名：フィランツス プルケル［ Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. （インドネシア名：Ｎａｇａ ｂｕａｎａ）］の葉の植物の溶媒抽出物を有効成分として含有する皮膚老化抑制剤が提供される。上記皮膚老化抑制剤は、化粧料、医薬品、医薬部外品および食品等に配合して有用に用いられる。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明で使用する上記特定の植物は、インドネシアで古来生薬として、一般に複数の混合物の熱水抽出物を飲用し、腹痛、頭痛等の症状の治療に利用されている。
【００１４】
本発明においては、上記特定の植物の根、茎、葉、果実（種子）、花蕾、樹皮および虫えい等が用いられ、この抽出物に活性酸素消去作用および／または、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用があることに重要な意義がある。
抽出は溶媒によって行うが、抽出溶媒としては、低級アルコール、多価アルコール、低極性溶媒および極性溶媒を使用する。
【００１５】
低級アルコールとしては、メタノール、エタノール、プロパノールおよびイソプロピルアルコール等が使用される。多価アルコールとしては、グリセリン、ポリエチレングリコールおよび１，３−ブチレングリコール、低極性溶媒としては、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ノナンおよびデカン等の飽和炭化水素、ヘキセン、ヘプテン等の不飽和炭化水素、極性溶媒としては、水、アセトン、酢酸エチルおよび酢酸メチル等が使用され、これらの単独、あるいは２種以上を併用して抽出溶媒として用いられる。
【００１６】
抽出は、Pipturus argenteus(Forst.f.)等に溶媒を加えて、必要あれば撹拌しながら１０ないし６０℃、好ましくは溶媒の沸点ないし室温以下で抽出を行う。但し、水の場合沸騰した熱水で抽出してもよい。
混合溶媒の使用量に格別の限定はないが、一応の目安として乾燥植物（破砕物）１部に対して溶媒を１ないし２０部、好ましくは５ないし１０部程度とするのがよい。
このようにして得られた抽出物には、活性酸素消去成分および／またはヒアルロニダーゼ活性阻害成分が高濃度に含まれる。
【００１７】
本発明に係わる皮膚老化抑制剤は、上記の方法で抽出した抽出物をそのまま有用成分として使用するほか、抽出物の精製物も有用成分として使用することができる。該処理物としては、有用成分の濃縮物、ペースト状物、乾燥物、および／または希釈物が広く使用される。
例えば、抽出物をそのまま真空（凍結）乾燥したり、減圧濃縮した後、真空（凍結）乾燥したり、あるいは減圧濃縮した後、各種溶媒で溶媒分画を行い、活性酸素消去成分および／またはヒアルロニダーゼ活性阻害成分を精製し、真空（凍結）乾燥したり、またあるいは抽出物をカラムに負荷した後、真空（凍結）乾燥するカラムクロマトグラフィーを利用した濃縮精製方法によって処理物を製造してもよい。尚、処理物としては、最終の乾燥工程まで行うことなく、それに至るまでの途中の上記した各工程で操作を停止し、目的に応じた形状および濃縮物を選択使用することも可能である。
【００１８】
また、本発明に係わる皮膚老化抑制剤は、化粧料、食品、医薬品および医薬部外品等に用いることができる。化粧料および医薬品・医薬部外品の皮膚外用剤においては、自体公知の各種の任意配合成分（例えば、油剤、保湿剤、増粘剤、防腐剤、乳化剤、キレート剤、顔料、ｐＨ調整剤、薬効成分、紫外線吸収剤、香料）を適宜配合し、クリーム、ミルクローションおよびローション等を製造することができる。
【００１９】
また、その剤型も、上記で示した他、ファンデーション、パック、ローション、エッセンス、軟膏、ゲル剤、パウダー、リップクリーム、口紅、サンケアおよびバスソルト等のその目的に応じて任意選択することができ、美白剤、抗炎症剤、抗酸化剤および吸湿剤、保湿剤等を本発明の目的を損なわない範囲で、その時々の目的に応じて適宜添加して使用することができる。
【００２０】
保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコールおよびジプロピレングリコール等の多価アルコール、アミノ酸、乳酸ナトリウムおよびピロリドンカルボン酸ナトリウム等のＮＭＦ成分、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、フィブロネクチン、ヘパリン類似物質およびキトサン等の水溶性高分子物質等を例示することができる。
【００２１】
増粘剤としては、例えばアルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、マルメロ種子抽出物、トラガントゴムおよびデンプン等の天然高分子物質、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、可溶性デンプンおよびカチオン化セルロース等の半合成高分子化合物、カルボキシビニルポリマーおよびポリビニルポリマー等の合成高分子物質等を例示することができる。
【００２２】
防腐剤としては、例えば安息香酸塩、サリチル酸塩、ソルビン酸塩、デヒドロ酢酸塩、パラオキシ安息香酸エステル、２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテル、３，４，４’−トリクロロカルバニド、塩化ベンザルコニウム、ヒノキチオール、レゾルシンおよびエタノール等を例示することができる。
【００２３】
酸化防止剤としては、例えばジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピルおよびアスコルビン酸等を例示することができる。紫外線吸収剤・遮蔽剤としては、例えば４−メトキシベンゾフェノン、オクチルジメチルパラアミノベンゾエート、エチルヘキシルパラメトキシシンナメート、酸化チタン、カオリン、酸化亜鉛およびタルク等を例示することができる。
【００２４】
さらに、キレート剤としては、例えばエチレンジアミン四酢酸、ピロリン酸、ヘキサメタリン酸、クエン酸、グルコン酸、酒石酸およびこれらの塩類を例示することができ、ｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウム、ホウ酸、ホウ砂およびリン酸水素カリウム等をそれぞれ例示することができる。
【００２５】
【実施例】
以下に本発明を実施例により具体的に説明する。
まず、本発明で使用した植物の抽出物の製造例を示すが抽出方法はこれに限定されるものではない。
【００２６】
［製造例１］
Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. 根乾燥物の破砕物１００ｇに対して、５０ｖ／ｖ％エタノール１，０００ｍＬを加え、室温暗所にて７日間撹拌抽出を行った。
これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出物を得た。
【００２７】
［製造例２］
Pipturus argenteus(Forst.f.)葉乾燥物の破砕物１００ｇに対して、精製水１，０００ｍＬを加え、湯浴上で１時間撹拌抽出を行った。
これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出物を得た。
【００３０】
［製造例３］
フィランツス プルケル［Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A.]葉乾燥物の破砕物１００ｇに対して、グリセリン１，０００ｍＬを加え、室温暗所にて７日間撹拌抽出を行った。
これを遠心分離・加圧ろ過し、抽出物を得た。
【００３１】
［実施例１］ラジカル消去作用試験
各製造例によって得られた抽出物のラジカル消去作用を下記の条件にて測定した。
【００３２】
（１）測定方法
試料を含む０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）２ｍＬにエタノール２ｍＬおよび０．５ｍＭのα，α−diphenyl−β−picrylhydral(DPPH・) エタノール溶液１ｍＬを加え、３０分後に５１７ｎｍの波長にて吸光値を測定した。試料は酢酸緩衝液にて０．２％に希釈した。
ラジカル消去率（％）＝
｛Blank のOD−（試料添加時のOD−0.02%BHT添加時のOD）×100 ｝
／（Blank のOD− 0.02%BHT 添加時のOD）
ＢＨＴ：ブチルヒドロキシトルエン
【００３３】
（２）測定結果
植物抽出物のラジカル消去作用の結果を表１に示した。各々の抽出物は１００μＭ α−トコフェロール濃度に相当するラジカル消去作用が認められた。
【００３４】
（３）考察
Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. 等の抽出物は、乾燥試料に対して１０％濃度で抽出しており、ラジカル消去率測定時の添加濃度は、乾燥物換算すると０．０２％以下となる。一方、１００μＭ α−トコフェロールは、重量濃度換算すると約０．００４％である。この結果から各々の抽出物には、α−トコフェロールに相当するラジカル消去成分が、約２０％以上含有されていることになり、これらの抽出物は、非常に少ない添加量で活性酸素消去剤として使用することができる。
【００３５】

【００３６】
［実施例２］ＳＯＤ様活性作用
各製造例によって得られた抽出物のＳＯＤ様活性作用を下記の条件にて測定した。
【００３７】
（１）測定方法
０．０５Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ１０．２）２．４ｍＬに３ｍＭキサンチン、３ｍＭ ＥＤＴＡ、０．１５％ウシ血清アルブミン、０．７５ｍＭニトロブルーテトラゾリウムをそれぞれ０．１ｍＬ加える。これにＳＯＤ様活性成分を含む試料を加え、２５℃で１０分放置後、キサンチンオキシダーゼ溶液を加えて２５℃でインキュベートした。２０分後６ｍＭ塩化銅溶液０．１ｍＬを加えて反応を止め、５６０ｎｍの吸光度を測定した。試料無添加時の吸光値を５０％阻止する濃度を１unit/mL とし、その希釈倍数によりＳＯＤ様活性を測定した。
【００３８】
（２）測定結果
植物抽出物のＳＯＤ様活性の結果を表２に示した。各々の抽出物は、２０，０００ units/mL 以上の高い活性が認められた。
【００３９】

【００４０】
（３）考察
ＳＯＤは、スーパーオキサイドアニオンを消去する酵素であり、加熱、糖添加および経時的に失活する。また、高分子のため経口および経皮吸収することができない。しかし上記の植物由来の活性酸素消去作用成分は、低分子で安定性がよい。経口および経皮からの吸収も期待される。
【００４１】
［実施例３］ヒアルロニダーゼ活性阻害作用試験
各製造例によって得られた抽出物のヒアルロニダーゼ活性阻害作用を下記の条件にて測定した。
【００４２】
（１）測定方法
０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）にて試料を１０％に希釈し、その希釈液０．２ｍＬにヒアルロニダーゼ（Type IV-S ）溶液０．１ｍＬを加え、３７℃で２０分間インキュベートした。その後試薬０．２ｍＬを加え、さらに３７℃で２０分間インキュベートし、０．６％ヒアルロン酸０．５ｍＬを加え、３７℃で４０分間インキュベートした。０．４Ｎ水酸化ナトリウム溶液０．２ｍＬを加え、反応停止する。その後ホウ酸試薬を０．２ｍＬ加え、３分間ウォータバスで加熱する。ｐ−ＤＡＢ試薬（ｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド１０％塩酸−酢酸溶液）５ｍＬを加え、３７℃で２０分間インキュベートし、５８５ｎｍにて吸光値を測定し、下記の阻害率の計算式より、阻害率（％）を求めた。
ヒアルロニダーゼ活性阻害率（％）＝
100−｛（試料無添加時OD−試料添加時のOD）／試料無添加時OD｝× 100
【００４３】
（２）測定結果
植物抽出物のヒアルロニダーゼ活性阻害作用の結果を表３に示した。各々の抽出物は、クロモグリク酸ナトリウム２０％濃度に相当するヒアルロニダーゼ活性阻害作用が認められた。
【００４４】

【００４５】
（３）考察
Pipturus argenteus(Forst.f.)等の抽出物は、乾燥試料に対して１０％濃度で抽出しており、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用測定時の添加濃度は、乾燥物換算すると１０％以下となる。一方、クロモグリク酸ナトリウムは、０．２％濃度で植物抽出物１０％添加時と同程度の阻害率となる。この結果から各々の抽出物には、クロモグリク酸ナトリウムに相当するヒアルロニダーゼ活性阻害成分が、約２０％以上含有していることになり、これらの抽出物は、非常に少ない添加量でヒアルロニダーゼ活性阻害剤原料として使用することができる。
【００４６】
［実施例４］ヘアレスマウス紫外線照射法による皮膚改善度試験
実施例１、実施例２および実施例３の結果からこれらの植物抽出物に肌弛み・肌荒れを改善することが期待されたので、実施例５、処方例１および処方例３についてヘアレスマウス紫外線照射法による皮膚改善度試験を実施した。
（１）試験方法
予め一日一定量の紫外線（ＵＶＡ−ＢＬＢランプ）照射量を４ヶ月間照射し、肌弛み・肌荒れを誘発したヘアレスマウスを作製した。これらのヘアレスマウス（ＨＲ−１ 雌）を５群（１群８匹）にグルーピングし、表４処方のクリーム、乳液等を朝晩の１日２回、ヘアレスマウス背面部に連続塗布し、３ヶ月後に肌弛み・肌荒れの改善度を表５に示す基準にて調べた。
また別途、連続塗布における発疹、紅斑等の副作用についても調べた。
【００４７】

【００４８】

【００４９】
（２）試験結果
効果は、「改善度＋」を１＋、「改善度２＋」を２＋とし、総和で示した。
抽出物配合処方のＮｏ２試料およびＮｏ４試料は、各々の基剤と比較しても著しい弛み・肌荒れ改善効果を示した。またこれらの試料は連続使用においても皮膚異常は何ら認められなかった（表６）。
【００５０】

【００５１】
（３）考察
フィランツス プルケル［Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. ］抽出物含有化粧料において副作用なく、著しい肌弛み・肌荒れ改善効果が認められた。活性酸素消去作用および／またはヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有する他の抽出物においても同様の改善効果が期待できる。
【００５２】
［実施例５］皮膚外用剤の調製
製造例で得られた抽出物を有効成分として用い、下記に示す組成にて皮膚外用剤を調製した。処方例の配合中、「適量」とは、全体で１００重量％になる量を意味する。
【００５３】

Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却してクリームを製造した。
【００５４】

Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却してクリームを製造した。
【００５６】
＜処方例３ 化粧水＞
（重量％）
エタノール １５．０
製造例１で得られた抽出物 １．０
エチルパラベン ０．１
クエン酸 ０．１
クエン酸ナトリウム ０．３
１，３−ブチレングリコール ４．０
エデト酸二ナトリウム ０．０１
精製水 適 量
上記の各成分を混合、均一に撹拌、溶解し、化粧水を製造した。
【００５７】
＜処方例４ 親水性軟膏＞
Ａ （重量％）
ポリオキシエチレンセチルエーテル ２．０
グリセリンモノステアレート １０．０
流動パラフィン １０．０
ワセリン ４．０
セタノール ５．０
製造例２で得られた抽出物 １．０
Ｂ
プロピレングリコール １０．０
メチルパラベン ０．１
精製水 適 量
Ａに属する成分を加熱溶解する。別に、Ｂに属する成分を加熱溶解する。ＡにＢを添加して撹拌、乳化後、冷却して親水性軟膏を製造した。
【００５９】
［実施例６］内服剤の調製
製造例２で得られた抽出物を用い、下記に示す組成にて内服剤を調製した。
＜処方例１ 顆粒剤＞
（重量％）
製造例２で得られた抽出物 １．０
乳糖 ３０．０
コーンスターチ ６０．０
結晶セルロース ８．０
ポリビニールピロリドン １．０
ポリビニールピロリドンを５０％エタノール溶解し、これを乳糖、結晶セルロース、コーンスターチに添加し、均一に混合し、顆粒装置を用い、造粒する。乾燥後整粒し、顆粒剤を製造した。
【００６０】
［実施例７］錠菓の調製
製造例２で得られた抽出物を用い、下記に示す組成にて錠菓を調製した。
＜処方例１ 錠菓＞
（重量％）
クエン酸 １．０
脱脂粉乳 １５．０
ショ糖エステル １．０
フレバー ０．８
粉糖 ２０．０
製造例２で得られた抽出物 １．０
乳糖 ６１．２
上記原料を均一に混合し、５０％エタノール溶液を適量添加し、顆粒装置を用い、造粒する。乾燥後、これを打錠し、錠菓を製造した。
【００６１】
【発明の効果】
本発明に係わる植物で得られた抽出物は、優れた活性酸素消去作用および／またはヒアルロニダーゼ活性阻害作用を有し、安全性も高いため、化粧料、食品、医薬品および医薬部外品等の皮膚老化防止を目的とするあらゆる分野に応用してその効果を発揮することができる。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
TECHNICAL FIELD The present invention relates to a skin aging inhibitor, and more specifically, a skin aging inhibitor comprising a solvent extract of a specific plant as an active ingredient, and a cosmetic, pharmaceutical, quasi-drug or food containing the same. It is about.
[0002]
[Prior art and problems]
Skin aging proceeds mainly due to a decrease in skin function due to aging and an external environment such as ultraviolet rays and food. In the external environment, it is said that active oxygen and free radicals generated by sunlight, metabolism, etc., and hyaluronidase activated by some stimulus from inside and outside the body promote skin aging.
[0003]
Sunlight and free radicals and free radicals generated in the body damage cells, biological components and tissues in the body, resulting in decreased function of cells and organs, resulting in arteriosclerosis, cerebrocardiovascular disorders, diabetes, It has been shown to cause various diseases such as cataracts, spots / sobacas, skin wrinkles / sagging, hypertension, senile dementia and cancer. In foods, lipid peroxides and polymers are formed, proteins are denatured, enzyme activity is decreased, and color components are degraded due to degradation of pigments, resulting in deterioration of the quality of foods containing these components. It has become.
[0004]
On the other hand, hyaluronidase usually exists in an inactive state in tissues in the living body, and hyaluronidase is activated by some kind of stimulation from inside and outside the body, and the high molecular weight hyaluronic acid as a substrate is reduced to a low molecular weight. It is said that inflammation progresses. In addition, it has been inferred that lowering the molecular weight of hyaluronic acid leads to a decrease in skin moisturizing property and tension.
[0005]
Accordingly, α-tocopherol, ascorbic acid, cysteine, glutathione and the like having active oxygen and radical scavenging action are used as skin aging inhibitors. α-tocopherol is composed of a chroman ring and a side chain having 16 carbon atoms, and has only an active oxygen scavenging action only on a substance having fat solubility due to its characteristics. Further, ascorbic acid has an enediol group at the 2nd and 3rd positions of carbon, which is a functional group for scavenging active oxygen, and is effective only for water-soluble substances due to its characteristics. Although these have an excellent active oxygen scavenging action, they are poor in stability, and in solution, they decompose by heat treatment or with time, and a sufficient effect is not recognized.
[0006]
Cysteine is particularly unstable in aqueous solution, and it turns into cystine within a few days, and precipitates are deposited.Glutathione decomposes over time in a hot and humid environment, generating a strange odor. Have.
Although attempts have been made to use BHT (butylated hydroxytoluene), BHA (butylated hydroxyanisole) and the like as synthetic antioxidants and skin aging inhibitors, animal experiments have pointed out the possibility of carcinogenesis.
[0007]
In addition, glycyrrhizic acid, cromoglycate sodium, baicalin, indomethacin, aspirin, and the like, which have been confirmed to have high hyaluronidase activity inhibitory activity in vitro, are used.
However, glycyrrhizic acid and baicalin have been used in natural products since ancient times, and are said to be relatively safe, but have a very small amount of sweetness or a vivid vermilion color tone. There are restrictions on the application and use concentration. In the case of cromoglycate sodium, there are reports of fetal toxicity when administered to pregnant women, and strict caution is required as a medicinal product. Indomethacin and aspirin have been observed to cause side effects such as rash and itching when used locally.
[0008]
As described above, conventional skin aging inhibitors have problems in safety, quality, usefulness, and the like, and the present situation is that they are limited to the use of some pharmaceuticals and the like whose use is restricted. Under such circumstances, it is safe to apply and eat to the skin for the human body, and can be easily manufactured with a markedly suppressed active oxygen / radical scavenging action and / or low molecular weight of hyaluronic acid. Development of a skin aging inhibitor that can be stably supplied has been desired.
[0009]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a skin aging inhibitor that is highly safe for the human body and has a strong active oxygen scavenging action and / or hyaluronidase activity inhibitory action.
[0010]
[Means for Solving the Problems]
The present invention has been proposed in order to achieve the above-mentioned object, and an extract extracted from a specific Indonesian herb or medicinal tree found as a result of the inventors' long-term research is active. It has been completed based on the new finding that it has an oxygen scavenging action and / or a hyaluronidase activity inhibitory action.
[0011]
That is, according to the present invention, the scientific name: Pipturus argenteus (Forst.f.) (Indonesian name: Trembesi) and / or the scientific name: Phyllanthus pulcher (Baill.) MA (Indonesian name: Naga) A skin aging inhibitor comprising a solvent extract of a plant ( buana) as an active ingredient is provided.
[0012]
Further, according to the present invention, Scientific name: Piputurusu Al Gente mouse [Pipturus argenteus (Indonesia name: Trembesi) (Forst.f.)] Leaves, stems and bark and / or scientific name: (. Baill) Firantsusu Purukeru [Phyllanthus pulcher MA (Indonesian name: Naga buana)] The skin aging inhibitor containing the solvent extract of the plant of a leaf plant as an active ingredient is provided. The above skin aging inhibitor is usefully used in cosmetics, pharmaceuticals, quasi drugs and foods.
[0013]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
The above-mentioned specific plant used in the present invention is generally used in Indonesia as an ancient crude drug, and a plurality of mixtures of hot water extracts are drunk and used for the treatment of symptoms such as abdominal pain and headache.
[0014]
In the present invention, roots, stems, leaves, fruits (seed), flower buds, bark, insect gills and the like of the specific plant are used, and this extract has an active oxygen scavenging action and / or a hyaluronidase activity inhibiting action. Of particular significance.
Extraction is performed with a solvent, and a lower alcohol, a polyhydric alcohol, a low polarity solvent and a polar solvent are used as the extraction solvent.
[0015]
As the lower alcohol, methanol, ethanol, propanol, isopropyl alcohol and the like are used. Examples of the polyhydric alcohol include glycerin, polyethylene glycol and 1,3-butylene glycol, and examples of the low polarity solvent include saturated hydrocarbons such as pentane, hexane, heptane, octane, nonane and decane, and unsaturated hydrocarbons such as hexene and heptene. As the polar solvent, water, acetone, ethyl acetate, methyl acetate and the like are used, and these are used alone or in combination of two or more as an extraction solvent.
[0016]
Extraction is carried out by adding a solvent to Pipturus argenteus (Forst. F.) Or the like, with stirring if necessary, at 10 to 60 ° C., preferably at the boiling point of the solvent or below room temperature. However, in the case of water, it may be extracted with boiling hot water.
The amount of the mixed solvent used is not particularly limited, but as a guideline, the solvent may be used in an amount of 1 to 20 parts, preferably about 5 to 10 parts per 1 part of the dried plant (crushed material).
The extract thus obtained contains a high concentration of an active oxygen scavenging component and / or a hyaluronidase activity inhibiting component.
[0017]
The skin aging inhibitor according to the present invention uses the extract extracted by the above method as a useful component as it is, and a purified product of the extract can also be used as a useful component. As the treated product, a concentrate, a paste, a dried product, and / or a diluted product of useful components are widely used.
For example, the extract is directly vacuum (frozen) dried, concentrated under reduced pressure, then vacuum (frozen) dried, or concentrated under reduced pressure, followed by solvent fractionation with various solvents to remove active oxygen and / or hyaluronidase. The activity-inhibiting component may be purified and vacuum (freeze) dried, or the processed product may be produced by a concentration purification method using column chromatography in which the extract is loaded on the column and then vacuum (freeze) dried. . In addition, as a processed material, it is also possible to select and use the shape and concentrate according to the objective, without performing until the final drying process, stopping operation | movement at each process mentioned above in the middle.
[0018]
Further, the skin aging inhibitor according to the present invention can be used in cosmetics, foods, pharmaceuticals, quasi drugs and the like. In skin preparations for cosmetics and pharmaceuticals and quasi-drugs, various optional ingredients known per se (for example, oils, moisturizers, thickeners, preservatives, emulsifiers, chelating agents, pigments, pH adjusters, A medicinal component, an ultraviolet absorber, and a fragrance) can be appropriately blended to produce a cream, milk lotion, lotion or the like.
[0019]
In addition to the above, the dosage form can be arbitrarily selected according to the purpose such as foundation, pack, lotion, essence, ointment, gel, powder, lip balm, lipstick, sun care and bath salt. A whitening agent, an anti-inflammatory agent, an antioxidant, a hygroscopic agent, a moisturizing agent, and the like can be appropriately added and used depending on the purpose of the present invention as long as the purpose of the present invention is not impaired.
[0020]
Examples of the humectant include glycerin, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, sorbitol, mannitol, polyhydric alcohols such as polyethylene glycol and dipropylene glycol, amino acids, NMF components such as sodium lactate and sodium pyrrolidonecarboxylate, hyaluronic acid And water-soluble polymer substances such as collagen, elastin, chondroitin sulfate, dermatan sulfate, fibronectin, heparin-like substance, and chitosan.
[0021]
Examples of thickeners include natural polymeric substances such as sodium alginate, xanthan gum, quince seed extract, tragacanth gum and starch, semi-synthetic polymeric compounds such as methyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, carboxymethyl cellulose, soluble starch and cationized cellulose, carboxy Examples include synthetic polymer materials such as vinyl polymers and polyvinyl polymers.
[0022]
Examples of the preservative include benzoate, salicylate, sorbate, dehydroacetate, paraoxybenzoate, 2,4,4′-trichloro-2′-hydroxydiphenyl ether, 3,4,4′-trichlorocarbamate. Examples thereof include nido, benzalkonium chloride, hinokitiol, resorcin, and ethanol.
[0023]
Examples of the antioxidant include dibutylhydroxytoluene, butylhydroxyanisole, propyl gallate and ascorbic acid. Examples of the ultraviolet absorber / shielding agent include 4-methoxybenzophenone, octyldimethylparaaminobenzoate, ethylhexylparamethoxycinnamate, titanium oxide, kaolin, zinc oxide and talc.
[0024]
Furthermore, examples of the chelating agent include ethylenediaminetetraacetic acid, pyrophosphoric acid, hexametaphosphoric acid, citric acid, gluconic acid, tartaric acid, and salts thereof, and examples of the pH adjusting agent include sodium hydroxide, boric acid, boron. Examples thereof include sand and potassium hydrogen phosphate.
[0025]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described specifically by way of examples.
First, although the example of manufacture of the plant extract used by this invention is shown, the extraction method is not limited to this.
[0026]
[Production Example 1]
Phyllanthus pulcher (Baill.) MA Root crushed 100 g was added with 1,000 mL of 50 v / v% ethanol, and stirred and extracted in the dark at room temperature for 7 days.
This was centrifuged and filtered under pressure to obtain an extract.
[0027]
[Production Example 2]
Purified water (1,000 mL) was added to 100 g of the crushed Pipturus argenteus (Forst. F.) Leaf dried product, and the mixture was extracted with stirring for 1 hour in a hot water bath.
This was centrifuged and filtered under pressure to obtain an extract.
[0030]
[Production Example 3 ]
To 100 g of pulverized phyllanthus pulcher [ Phyllanthus pulcher (Baill.) MA ] leaf crushed material, 1,000 mL of glycerin was added, followed by stirring and extraction in the dark at room temperature for 7 days.
This was centrifuged and filtered under pressure to obtain an extract.
[0031]
[Example 1] Radical scavenging action test The radical scavenging action of the extract obtained in each production example was measured under the following conditions.
[0032]
(1) Measurement method Add 2 mL of ethanol and 1 mL of 0.5 mM α, α-diphenyl-β-picrylhydral (DPPH ·) ethanol solution to 2 mL of 0.1 M acetate buffer (pH 5.5) containing the sample, and 30 minutes later. Absorbance values were measured at a wavelength of 517 nm. Samples were diluted to 0.2% with acetate buffer.
Radical scavenging rate (%) =
{Blank OD-(OD at sample addition-OD at 0.02% BHT addition) x 100}
/ (Blank OD-OD with 0.02% BHT added)
BHT: Butylhydroxytoluene [0033]
(2) Measurement results Table 1 shows the results of radical scavenging action of the plant extract. Each extract was found to have a radical scavenging action corresponding to a concentration of 100 μM α-tocopherol.
[0034]
(3) Consideration
Extracts such as Phyllanthus pulcher (Baill.) MA are extracted at a concentration of 10% with respect to the dry sample, and the concentration added when measuring the radical scavenging rate is 0.02% or less in terms of dry matter. On the other hand, 100 μM α-tocopherol is about 0.004% in terms of weight concentration. From this result, each extract contains about 20% or more of a radical scavenging component corresponding to α-tocopherol, and these extracts can be used as an active oxygen scavenger with a very small addition amount. Can be used.
[0035]

[0036]
[Example 2] SOD-like activity The SOD-like activity of the extract obtained in each production example was measured under the following conditions.
[0037]
(1) Measuring method 0.1 mL each of 3 mM xanthine, 3 mM EDTA, 0.15% bovine serum albumin, and 0.75 mM nitroblue tetrazolium is added to 2.4 mL of 0.05 M sodium carbonate buffer (pH 10.2). To this was added a sample containing an SOD-like active ingredient and allowed to stand at 25 ° C. for 10 minutes, and then a xanthine oxidase solution was added and incubated at 25 ° C. After 20 minutes, 0.1 mL of 6 mM copper chloride solution was added to stop the reaction, and the absorbance at 560 nm was measured. The concentration at which 50% of the absorbance value when no sample was added was 1 unit / mL, and the SOD-like activity was measured by the dilution factor.
[0038]
(2) Measurement results Table 2 shows the results of the SOD-like activity of the plant extract. Each extract showed high activity of 20,000 units / mL or more.
[0039]

[0040]
(3) Discussion SOD is an enzyme that eliminates the superoxide anion and deactivates with heating, addition of sugar, and time. Moreover, since it is a polymer, it cannot be absorbed orally and transdermally. However, the above-mentioned plant-derived active oxygen scavenging component has a low molecular weight and good stability. Absorption from the oral and dermal routes is also expected.
[0041]
[Example 3] Hyaluronidase activity inhibitory action test The hyaluronidase activity inhibitory action of the extract obtained in each production example was measured under the following conditions.
[0042]
(1) Measurement method The sample was diluted to 10% with 0.1 M acetate buffer (pH 4.0), 0.1 mL of hyaluronidase (Type IV-S) solution was added to 0.2 mL of the diluted solution, and the mixture was incubated at 37 ° C. Incubated for 20 minutes. Thereafter, 0.2 mL of a reagent was added and further incubated at 37 ° C. for 20 minutes, 0.5 mL of 0.6% hyaluronic acid was added, and incubated at 37 ° C. for 40 minutes. The reaction is stopped by adding 0.2 mL of 0.4N sodium hydroxide solution. Thereafter, 0.2 mL of boric acid reagent is added and heated in a water bath for 3 minutes. 5 mL of p-DAB reagent (p-dimethylaminobenzaldehyde 10% hydrochloric acid-acetic acid solution) was added, incubated at 37 ° C. for 20 minutes, the absorbance value was measured at 585 nm, and the inhibition rate ( %).
Hyaluronidase activity inhibition rate (%) =
100-{(OD when sample is not added-OD when sample is added) / OD when sample is not added} × 100
[0043]
(2) Measurement results Table 3 shows the results of the hyaluronidase activity inhibitory action of the plant extract. Each extract was confirmed to have a hyaluronidase activity inhibitory effect corresponding to 20% sodium cromoglycate concentration.
[0044]

[0045]
(3) Consideration
Extracts such as Pipturus argenteus (Forst. F.) Are extracted at a concentration of 10% with respect to the dried sample, and the added concentration at the time of measuring the hyaluronidase activity inhibitory action is 10% or less in terms of the dried product. On the other hand, sodium cromoglycate has an inhibition rate comparable to that obtained when 10% of plant extract is added at a concentration of 0.2%. As a result, each extract contains about 20% or more of a hyaluronidase activity inhibitory component corresponding to sodium cromoglycate, and these extracts are hyaluronidase activity inhibitors with a very small addition amount. Can be used as a raw material.
[0046]
[Example 4] Skin improvement test by hairless mouse ultraviolet irradiation method Since the results of Examples 1, 2 and 3 were expected to improve skin looseness and rough skin, these tests were conducted. About Example 5, Formulation Example 1 and Formulation Example 3, the skin improvement test by the hairless mouse ultraviolet irradiation method was implemented.
(1) Test method A predetermined amount of ultraviolet light (UVA-BLB lamp) was irradiated for 4 months in advance to produce hairless mice that induced skin looseness and rough skin. These hairless mice (HR-1 female) were grouped into 5 groups (8 per group), and the creams and emulsions shown in Table 4 were continuously applied to the back of the hairless mice twice a day in the morning and evening for 3 months. Later, the degree of improvement in skin looseness and roughness was examined according to the criteria shown in Table 5.
Separately, side effects such as rash and erythema in continuous application were also examined.
[0047]

[0048]

[0049]
(2) The results of the test results are shown as a sum total, where “improvement level +” is 1+ and “improvement level 2+” is 2+.
The No. 2 sample and No. 4 sample of the extract blending prescription showed a remarkable effect of improving sag and rough skin even when compared with the respective bases. In addition, these samples showed no skin abnormality even after continuous use (Table 6).
[0050]

[0051]
(3) Consideration
In the cosmetics containing the extract of Phyllanthus pulcher (Baill. MA) , no significant side effects and no significant skin looseness / roughness improvement effects were observed. The same improvement effect can be expected from other extracts having an action of scavenging reactive oxygen and / or an action of inhibiting hyaluronidase activity.
[0052]
[Example 5] Preparation of external preparation for skin An external preparation for skin having the composition shown below was prepared using the extract obtained in Production Example as an active ingredient. In the formulation of the formulation examples, “appropriate amount” means an amount that is 100% by weight as a whole.
[0053]

The components belonging to A are dissolved by heating. Separately, the component belonging to B is dissolved by heating. B was added to A, stirred and emulsified, and then cooled to produce a cream.
[0054]

The components belonging to A are dissolved by heating. Separately, the component belonging to B is dissolved by heating. B was added to A, stirred and emulsified, and then cooled to produce a cream.
[0056]
<Prescription example 3 lotion>
(weight%)
Ethanol 15.0
Extract obtained in Production Example 1 1.0
Ethylparaben 0.1
Citric acid 0.1
Sodium citrate 0.3
1,3-butylene glycol 4.0
Edetate disodium 0.01
Purified water appropriate amount Each of the above components was mixed, stirred and dissolved uniformly to produce a skin lotion.
[0057]
<Prescription Example 4 Hydrophilic Ointment>
A (wt%)
Polyoxyethylene cetyl ether 2.0
Glycerol monostearate 10.0
Liquid paraffin 10.0
Vaseline 4.0
Cetanol 5.0
Extract obtained in Production Example 2 1.0
B
Propylene glycol 10.0
Methylparaben 0.1
Purified water Appropriate amount The ingredients belonging to A are dissolved by heating. Separately, the component belonging to B is dissolved by heating. B was added to A, stirred and emulsified, and then cooled to produce a hydrophilic ointment.
[0059]
[Example 6 ] Preparation of internal preparation Using the extract obtained in Production Example 2, an internal preparation was prepared with the composition shown below.
<Prescription Example 1 Granule>
(weight%)
Extract obtained in Production Example 2 1.0
Lactose 30.0
Cornstarch 60.0
Crystalline cellulose 8.0
Polyvinylpyrrolidone 1.0
Polyvinylpyrrolidone is dissolved in 50% ethanol, added to lactose, crystalline cellulose, and corn starch, mixed uniformly, and granulated using a granule apparatus. After drying, the particles were sized to produce granules.
[0060]
[Example 7 ] Preparation of tablet confectionery Using the extract obtained in Production Example 2, tablet confectionery was prepared with the composition shown below.
<Prescription Example 1 Tablet Confectionery>
(weight%)
Citric acid 1.0
Nonfat dry milk 15.0
Sucrose ester 1.0
Frevers 0.8
Powdered sugar 20.0
Extract obtained in Production Example 2 1.0
Lactose 61.2
The above raw materials are uniformly mixed, an appropriate amount of 50% ethanol solution is added, and granulation is performed using a granule apparatus. After drying, this was tableted to produce tablet confectionery.
[0061]
【The invention's effect】
The extract obtained from the plant according to the present invention has excellent active oxygen scavenging action and / or hyaluronidase activity inhibitory action and high safety, and therefore skin of cosmetics, foods, pharmaceuticals, quasi drugs and the like. It can be applied to all fields aimed at preventing aging and exert its effects.

Claims (6)

学名：ピプトゥルス アルジェンテウス［Pipturus argenteus(Forst.f.)（インドネシア名：Ｔｒｅｍｂｅｓｉ）］および／または学名：フィランツス プルケル［ Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. （インドネシア名：Ｎａｇａ ｂｕａｎａ）］の植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とする皮膚老化抑制剤。Solvent extraction of plants of scientific name: Pipturus argenteus (Forst.f.) (Indonesian name: Trembesi) and / or scientific name: Phyllanthus pulcher (Baill.) MA (Indonesian name: Naga buana) A skin aging inhibitor comprising a product as an active ingredient. 学名：ピプトゥルス アルジェンテウス［Pipturus argenteus(Forst.f.)（インドネシア名：Ｔｒｅｍｂｅｓｉ）］の葉、茎および樹皮および／または学名：フィランツス プルケル［ Phyllanthus pulcher(Baill.)M.A. （インドネシア名：Ｎａｇａ ｂｕａｎａ）］の葉の植物の溶媒抽出物を有効成分として含有することを特徴とする請求項１記載の皮膚老化抑制剤。Scientific name: Pipturus argenteus (Forst.f.) (Indonesian name: Trembesi)] leaves, stems and bark and / or scientific name: Phyllanthus pulcher (Baill.) MA (Indonesian name: Naga buana) The skin aging inhibitor according to claim 1, comprising a solvent extract of a leaf plant as an active ingredient. 請求項１または２記載の皮膚老化抑制剤を含有する化粧料。  Cosmetics containing the skin aging inhibitor of Claim 1 or 2. 請求項１または２記載の皮膚老化抑制剤を含有する医薬品。  A pharmaceutical comprising the skin aging inhibitor according to claim 1 or 2. 請求項１または２記載の皮膚老化抑制剤を含有する医薬部外品。  A quasi-drug containing the skin aging inhibitor according to claim 1 or 2. 請求項１または２記載の皮膚老化抑制剤を含有する食品。  A food containing the skin aging inhibitor according to claim 1 or 2.