JP3920041B2 - Hydrates and crystals of neuraminic acid compounds - Google Patents

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、優れたシアリダーゼ阻害活性を有するノイラミン酸化合物（Ｉ）の水和物、結晶、及び、該水和物または結晶を有効成分として含有する医薬、特に抗インフルエンザ剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
特開平１０−３３０３７３号公報には、式（Ｉ）で表されるノイラミン酸化合物（以下、化合物（Ｉ）という）が開示されている。化合物（Ｉ）は優れたシアリダーゼ阻害作用を示し、インフルエンザ治療薬及び予防薬としての有用性が期待できる。しかし、本化合物を医薬の原体として実用化するには保存安定性、取り扱いの容易さが要求される。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
発明者等は、化合物（Ｉ）について鋭意検討を行った結果、化合物（Ｉ）の水和物が優れた安定性を示す結晶として得られることを見出した。化合物（Ｉ）の水和物結晶は、特開平１０-３３０３７３号公報に実施例３５として記載された化合物（Ｉ）のトリフルオロ酢酸塩と比較して、保存安定性及び取り扱いの容易性が著しく改善されており、医薬として実用化する上で極めて有用であることを見出し、本発明を完成した。
【０００４】
【問題を解決するための手段】
本発明は、
（１） 式（Ｉ）
【０００５】
【化３】
【０００６】
で表される化合物の水和物、
（２） 式（Ｉ）
【０００７】
【化４】
【０００８】
で表される化合物を含有する結晶、
（３） （２）において、式（Ｉ）で表される化合物の水和物結晶、
及び
（４） （２）及び（３）において、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折において、面間隔が４．０、４．４、４．７、７．５及び１０．２オングストロームに主ピークを示す式（Ｉ）で表される化合物の水和物結晶
である。
本発明の結晶は、その内部構造が三次元的に構成原子（又はその集団）の規則正しい繰り返しでできている固体をいい、そのような規則正しい内部構造を持たない無定形の固体とは区別される。
【０００９】
同じ化合物の結晶であっても、結晶化の条件によって、複数の異なる内部構造及び物理化学的性質を有する結晶（結晶多形）が生成することがあるが、本発明の結晶は、これら結晶多形のいずれであってもよく、２以上の結晶多形の混合物であっても良い。
【００１０】
化合物（Ｉ）は分子内にグアニジノ基及びカルボキシル基を有するので、薬理的に毒性を示さない酸又は塩基と結合して薬理上許容される塩を形成することができる。
【００１１】
薬理上許容される塩としては、例えばフッ化水素酸塩、塩化水素酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩；硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、りん酸塩のような無機酸塩；メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩のようなアルカンスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリールスルホン酸塩；酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、しゅう酸塩、マレイン酸塩のような有機酸塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩のようなアミノ酸塩；リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩のような金属塩；アンモニウム塩、ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、エチレンジアミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、プロカイン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩のような有機アミン若しくは有機アンモニウム塩等を挙げることができ、好適にはリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩のようなアルカリ金属塩；酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩のような有機酸塩；または塩酸塩、硫酸塩のような無機酸塩である。
【００１２】
また、化合物（Ｉ）及びその薬理上許容される塩は、大気中に放置したり、水又は有機溶媒と混和することによって水又は溶媒を吸収し、水和物又は溶媒和物を形成する場合がある。
【００１３】
本発明の化合物（Ｉ）を含有する結晶は、化合物（Ｉ）からなる結晶に加え、化合物（Ｉ）の薬理上許容される塩、水和物または溶媒和物からなる結晶を包含する。これら化合物（Ｉ）を含有する結晶のうち好適には水和物結晶である。
【００１４】
本発明の化合物（Ｉ）を含有する結晶の一形態として、例えば、銅のＫα線（波長λ＝１．５４オングストローム）の照射で得られる粉末Ｘ線回折において、面間隔ｄ＝４．０、４．４、４．７、７．５及び１０．２オングストロームに主ピークを示す結晶を挙げることができる。ここで主ピークは面間隔ｄ＝４．７オングストロームを示すピークの強度を１００としたときの相対強度が８０以上のピークである。尚、図面１の粉末Ｘ線解析パターンにおいて縦軸は回折強度をカウント／秒（ｃｐｓ）単位で示し、横軸は回折角度２θ（度）を示す。また、面間隔ｄ（単位：オングストローム）は、式 2ｄsinθ＝ｎλ においてｎ＝１として算出することができる。
【００１５】
【発明の実施の形態】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩は、特開平１０-３３０３７３号公報に開示された方法又はそれに準ずる方法に従って製造することができる。
【００１６】
化合物（Ｉ）を含有する結晶は、化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩を適当な溶媒に溶解し、ｐＨの調整、溶液の濃縮、良溶媒と貧溶媒の混合等を行い、化合物（Ｉ）、その薬理上許容される塩または溶媒和物（水和物を含む）を過飽和状態に導いて析出させることによって製造することができる。
【００１７】
結晶の析出は、反応容器中で自然に開始し得るが、種結晶の接種、超音波刺激、反応器の表面を擦る等の機械的刺激を与えることによっても開始又は促進させることができる。
【００１８】
より具体的には、本発明の化合物（Ｉ）を含有する結晶（特に水和物結晶）は、化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩を含む水溶液を、必要に応じて、適切なｐＨに調節し、濃縮し、冷却することにより結晶を析出させ、次いで析出した結晶を単離することによって製造することができる。
【００１９】
また、化合物（Ｉ）を含有する結晶（特に水和物結晶）は、これを含む水溶液を逆相シリカゲルカラムにて精製し、化合物（Ｉ）を含む分画を、必要に応じて、濃縮し、冷却することにより結晶を析出させ、ついで析出した結晶を単離することによっても製造することができる。
【００２０】
得られた結晶は、再結晶やスラリー精製によって、その純度及び品質を向上させることができる。
【００２１】
化合物（Ｉ）を含有する結晶（特に水和物結晶）を結晶化させるための温度としては、０乃至４０℃が好ましく、更に好適には２０乃至３０℃である。
【００２２】
化合物（Ｉ）を含有する結晶（特に水和物結晶）を結晶化させるために適切なｐＨとしては、化合物（Ｉ）の水和物の水に対する溶解度が小さいｐＨ４乃至９が好ましく、更に好適には５乃至７である。
【００２３】
析出した結晶は、例えば、ろ過、遠心分離、または傾斜法によって単離することができる。単離した結晶は必要に応じて適当な溶媒で洗浄することができる。
【００２４】
水和物結晶を洗浄する場合、例えば水、エタノール、イソプロパノール、アセトン、酢酸エチル、トルエン、アセトニトリル、酢酸メチルまたはエーテルのような溶媒を使用することができ、好適には水、アセトン、酢酸エチル又はトルエンである。
【００２５】
単離した結晶（特に水和物結晶）は、通常１０乃至１００℃の温度で、好ましくは３０乃至５０℃の温度で重量がほぼ一定になるまで乾燥させることができる。結晶の乾燥は、必要に応じて、シリカゲルまたは塩化カルシウムのような乾燥剤の存在下、または、減圧下で行うこともできる。
【００２６】
乾燥した結晶（特に水和物結晶）は、通常１０乃至３０℃の温度、２０％乃至９０％の相対湿度で好ましくは２０乃至３０℃の温度、５０％乃至８０％の相対湿度で重量がほぼ一定になるまで吸湿させてもよい。
【００２７】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩の逆相シリカゲルカラム精製に用いる溶離液は水、アセトン、アセトニトリル、メタノール、エタノール及びこれらの混合溶媒であり、好適には水、メタノール及びその混合溶媒である。逆相シリカゲルとしては、シリカゲル表面がアルキル基等の有機残基で修飾されたものを用いることができるが、好適にはオクタデシル基で修飾されたものである。
【００２８】
再結晶は、化合物（Ｉ）を含有する結晶を良溶媒に溶解させ、貧溶媒を加えることによって結晶を析出させる等、有機合成化学の分野で通常使用される方法によって達成される。
【００２９】
化合物（Ｉ）の水和物結晶の再結晶に用いる良溶媒としては、例えばメタノール、エタノールのようなアルコール類を挙げることができ、好適にはメタノールである。
【００３０】
化合物（Ｉ）の水和物結晶の再結晶に用いる貧溶媒としては、例えば水、ヘキサン、ジイソプロピルエーテル、ｔ-ブチルメチルエーテル等を挙げることができ、好適には水、ヘキサンまたはジイソプロピルエーテルであり、更に好適には水またはジイソプロピルエーテルである。
【００３１】
スラリー精製とは、化合物の結晶を適切な溶媒に懸濁させて撹拌したのち、結晶を再び単離する操作である。水和物結晶のスラリー精製に用いる溶媒としては、例えばアセトン、メチルエチルケトン、酢酸メチル、酢酸エチル、アセトニトリル、塩化メチレン、トルエン、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、水、ヘキサン、ジイソプロピルエーテル、エーテル等を挙げることができ、好適にはアセトン、メチルエチルケトン、酢酸メチル、酢酸エチル、アセトニトリル、エタノールまたはイソプロパノールであり、更に好適にはアセトンまたは酢酸エチルである。
【００３２】
再結晶及びスラリー精製で得られた結晶についても、上記と同様にして単離することができる。
【００３３】
化合物（Ｉ）を含有する結晶（特に水和物結晶）を医薬、特にインフルエンザの治療剤または予防剤として使用する場合には、それ自体あるいは適宜の薬理学的に許容される、賦形剤、希釈剤等と混合し、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、注射剤、軟膏剤、液剤、懸濁剤、エアゾール剤、トローチ剤等によって投与することができる。本発明の医薬は、経口的または非経口的に投与することができるが、有効成分である化合物（Ｉ）が肺または気道（口腔内及び鼻腔内を含む）へ直接送達され得る方法によって投与されることが好ましい。
【００３４】
これらの製剤は、賦形剤（例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビットのような糖類；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α−デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプンのようなデンプン誘導体；結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、内部架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウムのような珪酸塩類；リン酸カルシウムのようなリン酸塩類；炭酸カルシウムのような炭酸塩類；硫酸カルシウムのような硫酸塩類等）、結合剤（例えば、前記の賦形剤；ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マグロゴール等）、崩壊剤（例えば、前記の賦形剤；クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドンのような化学修飾された、デンプンまたはセルロース誘導体等）、滑沢剤（例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ビーガム；ビーズワックス、ゲイロウのようなワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸のようなカルボン酸類；安息香酸ナトリウムのようなカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウムのような硫酸類塩；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウムのようなラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物のような珪酸類；前記の賦形剤におけるデンプン誘導体等）、安定剤（例えば、メチルパラベン、プロピルパラベンのようなパラヒドロキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェノール類；チメロサール；無水酢酸；ソルビン酸等）、矯味矯臭剤（例えば、通常使用される、甘味料、酸味料、香料等）、懸濁化剤（例えば、ポリソルベート８０、カルボキシメチルセルロースナトリウム等）、希釈剤、製剤用溶剤（例えば、水、エタノール、グリセリン等）等の添加物を用いて周知の方法で製造される。
【００３５】
その使用量は投与される者の症状・体重・年齢等により異なるが、１日当たり下限０．１ｍｇ（好適には１ｍｇ）、上限１０００ｍｇ（好適には、５００ｍｇ）を、１日当り１乃至数回、症状に応じて投与することが望ましい。
【００３６】
【実施例】
以下に実施例、製剤例及び試験例を示し、本発明を更に詳細に説明する。
（製造例１）
５−アセタミド−４−グアニジノ−９−Ｏ−オクタノイル−２、３、４、５−テトラデオキシ−７−Ｏ−メチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エノピラソン酸水和物結晶
（１）特開平１０−３３０３７３号公報の実施例３５（ｉ）の化合物、５−アセタミド−４−（Ｎ，Ｎ’−ビス−ｔ−ブチロキシカルボニル）グアニジノ−９−Ｏ−オクタノイル−２，３，４，５−テトラデオキシ−７−Ｏ−メチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エノピラノソン酸ジフェニルメチル（３．４６ｇ、４．１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（２７ｍｌ）、トリフルオロ酢酸（１４ｍｌ）に溶解し、室温で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮乾固した後、トルエン（５ｍｌ）で３回共沸乾固した。得られた油状物を酢酸エチル（１０ｍｌ）に溶解した。一方、本溶液を飽和重曹水（５０ｍｌ）に注加し、２０%炭酸ナトリウム水溶液を加えｐＨ８．５にした。室温で３時間攪拌した後、塩酸（３ｍｌ）でｐＨ５．０に調整し、室温で１時間攪拌した。更に氷冷下１時間撹拌後、結晶を吸引ろ過し、外温５０℃にて１０時間真空乾燥した。空気中で１日間放置し、標記目的化合物を結晶として得た。（０．９７ｇ、５１％）
赤外線吸収スペクトル(KBr)νmax cm^-1: 3412, 2929, 2856, 1676, 1401, 1320, 1285, 1205, 1137, 722.
¹Ｈ核磁気共鳴スペクトル(400MHz, CD₃OD)δppm: 5.88(1H, d, J=2.5 Hz), 4.45 (3H, m), 4.27 (1H, dd, J=10.0 Hz, 10.0 Hz), 4.15 (1H, m), 3.47 (2H, m), 3.42 (3H, s), 2.37 (2H, t, J=7.4 Hz), 2.10 (3H, s), 1.31 (2H, m), 1.20-1.40 (8H, m), 0.85-0.95 (3H, m).
¹³Ｃ核磁気共鳴スペクトル(100MHz, CD₃OD)δppm: 176.5, 173.7, 164.7, 158.9, 146.7, 108.7, 80.1, 78.0, 69.3, 66.8, 61.4, 52.4, 35.1, 32.8, 30.2, 30.1, 26.0, 23.7, 22.8, 14.4.
本結晶について、銅のＫα線（波長λ＝１．５４オングストローム）の照射で得られる粉末Ｘ線回折パターンを図１に示す。尚、粉末Ｘ線解析パターンの縦軸は回折強度をカウント／秒（ｃｐｓ）単位で示し、横軸は回折角度２θ（度）を示す。
（２）標記化合物は次の方法によっても得られた。
【００３７】
特開平１０−３３０３７３号公報の実施例３５（ｉｉ）の化合物、５−アセタミド−４−グアニジノ−９−Ｏ−オクタノイル−２、３、４、５−テトラデオキシ−７−Ｏ−メチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エノピラソン酸トリフルオロ酢酸塩（３.０ｇ、５.１ｍｍｏｌ）を逆相カラムクロマトグラフィー（ナカライテスク社製コスモシル75Ｃ18PREP、１００ｇ）に付し、メタノール−水（０：１、１：１、２：１）を用いてメタノール含量を上げながら溶出させた。目的物を含む分画を減圧下濃縮し、析出した結晶を吸引ろ過し、減圧下乾燥した。空気中で１日間放置し、標記目的化合物を結晶として得た（１.２ｇ、４９％）。なお、得られた化合物の物性データは上記（１）で得られたものと完全に一致した。
（試験例１）安定性試験
本発明の製造例１の化合物（Ｉ）の結晶および対照として特開平１０−３３０３７３号公報に実施例３５として記載されている化合物（Ｉ）の非晶形粉末（トリフルオロ酢酸塩）を４０℃、相対湿度７５％のデシケーター中で保存し、１４日（２週）、２８日（４週）、５６日（８週）後の残存率を測定した。結果を表１に示す。更に、別途、６０℃、シリカゲルデシケーター中での１４日（２週）、２８日（４週）、５６日（８週）後の残存率を測定した。結果を表２に示す。
【００３８】
化合物の残存率（％）は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて測定した化合物の残存率から求めた。なお、ＨＰＬＣ測定条件は次の通りである。
【００３９】
カラム：化学物質評価研究機構製 L-column ODS(4.6mm I.D x 250mm)
移動相：0.1mol/リン酸緩衝液(pH3)：アセトニトリル(7:3)
流量 ：1mL/min
検出 ：230nm
カラム温度：３０℃
表１に示すように、化合物（Ｉ）の非晶形粉末（トリフルオロ酢酸塩）は４０℃、加湿状態で極めて安定性が低く、５６日後には１０.２％程度の含量に低下した。これに対して、本発明の化合物（Ｉ）の結晶（水和物結晶）は、同条件で１００％の残存率を示し、極めて高い保存安定性を有する。
表２に示すように、化合物（Ｉ）の非晶形粉末（トリフルオロ酢酸塩）は、６０℃、乾燥状態でも安定性が低く、５６日後には８９％程度の含量に低下した。これに対し、本発明の化合物（Ｉ）の結晶（水和物結晶）は、同条件で９９％以上の高い残存率を示し、極めて高い保存安定性を有する。
（製剤例１）液剤１
製造例１の化合物が１０％（W/W）、塩化ベンザルコニウムが０．０４％（W/W）、フェネチルアルコールが０．４０％（W/W）、精製水が８９．５６％（W/W）となるように液剤を調整する。
（製剤例２）液剤２
製造例１の化合物が１０％（W/W）、塩化ベンザルコニウムが０．０４％（W/W）、ポリエチレングリコール４００が１０％（W/W）、プロピレングリコールが３０％（W/W）、精製水が３９．９６％（W/W）となるように液剤を調整する。
（製剤例３）散剤
製造例１の化合物が４０％（W/W）、ラクトースが６０％（W/W）となるように散剤を調整する。
（製剤例４）エアゾール剤
製造例１の化合物が１０％（W/W）、レシチンが０．５％（W/W）、フロン１１が３４．５％（W/W）、フロン１２が５５％（W/W）となるようにエアゾール剤を調整する。
【００４０】
【発明の効果】
本発明の化合物（Ｉ）を含有する結晶（特に水和物結晶）は、非晶形のトリフルオロ酢酸塩と比較して保存安定性に優れ、実用的に取り扱いやすい結晶であるので、医薬（特にインフルエンザの治療剤又は予防剤）の原体として有用である。また、化合物（Ｉ）の水和物は優れた結晶を与える分子形態として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、製造例１で得られた５−アセタミド−４−グアニジノ−９−Ｏ−オクタノイル−２、３、４、５−テトラデオキシ−７−Ｏ−メチル−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エノピラソン酸水和物結晶について、銅のＫα線（波長λ＝１．５４オングストローム）の照射で得られる粉末Ｘ線回折パターンである。尚、粉末Ｘ線解析パターンの縦軸は回折強度をカウント／秒（ｃｐｓ）単位で示し、横軸は回折角度２θ（度）を示す。なお、面間隔ｄ（オングストローム）は、式 ２ｄsinθ＝ｎλ においてｎ＝１として算出することができる。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention relates to hydrates and crystals of neuraminic acid compound (I) having excellent sialidase inhibitory activity, and medicaments, particularly anti-influenza agents, containing the hydrates or crystals as active ingredients.
[0002]
[Prior art]
Japanese Laid-Open Patent Publication No. 10-330373 discloses a neuraminic acid compound represented by formula (I) (hereinafter referred to as compound (I)). Compound (I) exhibits an excellent sialidase inhibitory action and can be expected to be useful as an influenza therapeutic agent and prophylactic agent. However, in order to put this compound into practical use as a drug substance, storage stability and ease of handling are required.
[0003]
[Problems to be solved by the invention]
As a result of intensive studies on the compound (I), the inventors have found that a hydrate of the compound (I) can be obtained as a crystal exhibiting excellent stability. The hydrate crystals of Compound (I) are remarkably more storage stable and easier to handle than the trifluoroacetate salt of Compound (I) described as Example 35 in JP-A-10-330373. The present invention has been completed by finding out that it has been improved and is extremely useful for practical use as a medicine.
[0004]
[Means for solving problems]
The present invention
(1) Formula (I)
[0005]
[Chemical 3]
[0006]
Hydrate of the compound represented by
(2) Formula (I)
[0007]
[Formula 4]
[0008]
A crystal containing a compound represented by:
(3) In (2), a hydrate crystal of the compound represented by formula (I),
And (4) In (2) and (3), in the powder X-ray diffraction obtained by irradiation with copper Kα rays, the interplanar spacing is 4.0, 4.4, 4.7, 7.5 and 10.2. It is a hydrate crystal of the compound represented by the formula (I) showing a main peak in angstroms.
The crystal of the present invention refers to a solid whose internal structure is composed of regularly repeated constituent atoms (or a group thereof) in a three-dimensional manner, and is distinguished from an amorphous solid that does not have such a regular internal structure. .
[0009]
Even crystals of the same compound may produce crystals (crystal polymorphs) having a plurality of different internal structures and physicochemical properties depending on the crystallization conditions. Any form may be sufficient and the mixture of two or more crystal polymorphs may be sufficient.
[0010]
Since compound (I) has a guanidino group and a carboxyl group in the molecule, it can form a pharmacologically acceptable salt by binding to an acid or base that is not pharmacologically toxic.
[0011]
Examples of pharmacologically acceptable salts include hydrohalides such as hydrofluoride, hydrochloride, hydrobromide and hydroiodide; nitrates, perchlorates and sulfates. Inorganic salts such as phosphates; alkane sulfonates such as methanesulfonate, ethanesulfonate and trifluoromethanesulfonate; arylsulfones such as benzenesulfonate and p-toluenesulfonate Acid salts; organic acid salts such as acetate, trifluoroacetate, citrate, tartrate, oxalate, maleate; glycine, lysine, arginine, ornithine, glutamate, aspartate Amino acid salts such as lithium salts, alkali metal salts such as sodium salts and potassium salts; alkaline earth metal salts such as calcium salts and magnesium salts; aluminum Metal salts such as um salt, iron salt, zinc salt, copper salt, nickel salt, cobalt salt; ammonium salt, t-octylamine salt, dibenzylamine salt, morpholine salt, glucosamine salt, ethylenediamine salt, guanidine salt, diethylamine Salt, triethylamine salt, dicyclohexylamine salt, procaine salt, ethanolamine salt, diethanolamine salt, piperazine salt, organic amine salt such as tetramethylammonium salt, and the like, preferably lithium salt, sodium salt Alkali metal salts such as potassium salts; organic acid salts such as acetates and trifluoroacetates; or inorganic acid salts such as hydrochlorides and sulfates.
[0012]
Compound (I) and a pharmacologically acceptable salt thereof may be left in the air or mixed with water or an organic solvent to absorb water or a solvent to form a hydrate or solvate. There is.
[0013]
The crystal containing the compound (I) of the present invention includes a crystal composed of a pharmacologically acceptable salt, hydrate or solvate of the compound (I) in addition to a crystal composed of the compound (I). Of these crystals containing compound (I), hydrate crystals are preferred.
[0014]
As one form of the crystal containing the compound (I) of the present invention, for example, in powder X-ray diffraction obtained by irradiation with copper Kα rays (wavelength λ = 1.54 Å), the interplanar spacing d = 4.0, Examples thereof include crystals having main peaks at 4.4, 4.7, 7.5, and 10.2 angstroms. Here, the main peak is a peak having a relative intensity of 80 or more when the intensity of the peak showing the inter-plane distance d = 4.7 angstrom is 100. In the powder X-ray analysis pattern of FIG. 1, the vertical axis represents diffraction intensity in units of count / second (cps), and the horizontal axis represents diffraction angle 2θ (degrees). Further, the surface interval d (unit: angstrom) can be calculated as n = 1 in the formula 2dsinθ = nλ.
[0015]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Compound (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof can be produced according to the method disclosed in JP-A-10-330373 or a method analogous thereto.
[0016]
A crystal containing compound (I) is prepared by dissolving compound (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof in an appropriate solvent, adjusting pH, concentrating the solution, mixing a good solvent and a poor solvent, and the like. (I) It can be produced by introducing a pharmacologically acceptable salt or solvate (including hydrate) into a supersaturated state and precipitating it.
[0017]
Crystal precipitation can be initiated spontaneously in the reaction vessel, but can also be initiated or promoted by applying mechanical stimuli such as seed crystal inoculation, ultrasonic stimulation, or rubbing the reactor surface.
[0018]
More specifically, the crystal (especially hydrate crystal) containing the compound (I) of the present invention is prepared by adding an aqueous solution containing the compound (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof as appropriate. It can be produced by adjusting the pH, concentrating and cooling to precipitate crystals and then isolating the precipitated crystals.
[0019]
In addition, for crystals (especially hydrate crystals) containing compound (I), an aqueous solution containing the same is purified by a reverse phase silica gel column, and the fraction containing compound (I) is concentrated as necessary. It can also be produced by cooling to precipitate crystals and then isolating the precipitated crystals.
[0020]
The purity and quality of the obtained crystal can be improved by recrystallization or slurry purification.
[0021]
The temperature for crystallizing the crystal containing the compound (I) (particularly the hydrate crystal) is preferably 0 to 40 ° C, more preferably 20 to 30 ° C.
[0022]
The pH suitable for crystallizing the crystal (particularly hydrate crystal) containing the compound (I) is preferably pH 4 to 9, in which the solubility of the hydrate of the compound (I) in water is small, and more preferably Is 5-7.
[0023]
The precipitated crystals can be isolated, for example, by filtration, centrifugation, or gradient methods. The isolated crystals can be washed with a suitable solvent as necessary.
[0024]
When washing the hydrate crystals, a solvent such as water, ethanol, isopropanol, acetone, ethyl acetate, toluene, acetonitrile, methyl acetate or ether can be used, preferably water, acetone, ethyl acetate or Toluene.
[0025]
The isolated crystals (especially hydrate crystals) can be dried usually at a temperature of 10 to 100 ° C., preferably at a temperature of 30 to 50 ° C. until the weight is almost constant. If necessary, the crystals can be dried in the presence of a desiccant such as silica gel or calcium chloride, or under reduced pressure.
[0026]
Dry crystals (especially hydrate crystals) usually weigh approximately 10-30 ° C., 20% to 90% relative humidity, preferably 20-30 ° C., 50% to 80% relative humidity. You may absorb moisture until it becomes constant.
[0027]
The eluent used for the reverse phase silica gel column purification of compound (I) or a pharmacologically acceptable salt thereof is water, acetone, acetonitrile, methanol, ethanol and a mixed solvent thereof, preferably water, methanol and a mixed solvent thereof. It is. As the reversed-phase silica gel, those having the silica gel surface modified with an organic residue such as an alkyl group can be used, but those modified with an octadecyl group are preferred.
[0028]
Recrystallization is achieved by a method usually used in the field of synthetic organic chemistry, such as dissolving a crystal containing Compound (I) in a good solvent and adding a poor solvent to precipitate the crystal.
[0029]
Examples of the good solvent used for recrystallization of the hydrate crystals of compound (I) include alcohols such as methanol and ethanol, and methanol is preferred.
[0030]
Examples of the poor solvent used for recrystallization of the hydrate crystals of compound (I) include water, hexane, diisopropyl ether, t-butyl methyl ether, and the like, preferably water, hexane or diisopropyl ether. More preferably, it is water or diisopropyl ether.
[0031]
Slurry purification is an operation in which a crystal of a compound is suspended in an appropriate solvent and stirred, and then the crystal is isolated again. Solvents used for slurry purification of hydrate crystals include, for example, acetone, methyl ethyl ketone, methyl acetate, ethyl acetate, acetonitrile, methylene chloride, toluene, ethanol, isopropanol, tetrahydrofuran, N, N-dimethylformamide, water, hexane, diisopropyl ether. Ether, and the like. Acetone, methyl ethyl ketone, methyl acetate, ethyl acetate, acetonitrile, ethanol or isopropanol are preferable, and acetone or ethyl acetate is more preferable.
[0032]
The crystals obtained by recrystallization and slurry purification can also be isolated in the same manner as described above.
[0033]
When the crystal (especially hydrate crystal) containing the compound (I) is used as a medicine, particularly a therapeutic or prophylactic agent for influenza, the excipient itself, or appropriate pharmacologically acceptable, It can be mixed with diluents and administered by tablets, capsules, granules, powders, syrups, injections, ointments, solutions, suspensions, aerosols, troches and the like. The medicament of the present invention can be administered orally or parenterally, but is administered by a method in which the active ingredient Compound (I) can be directly delivered to the lung or respiratory tract (including intraoral and intranasal). It is preferable.
[0034]
These formulations include excipients (eg, sugars such as lactose, sucrose, glucose, mannitol, sorbit; starch derivatives such as corn starch, potato starch, α-starch, dextrin, carboxymethyl starch; crystalline cellulose, Low substituted hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, carboxymethylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, cellulose derivatives such as internally cross-linked sodium carboxymethylcellulose; gum arabic; dextran; pullulan; light anhydrous silicic acid, synthetic aluminum silicate, magnesium magnesium aluminometasilicate Silicates such as; phosphates such as calcium phosphate; carbonates such as calcium carbonate; sulfates such as calcium sulfate), binders (eg For example, the above excipients; gelatin; polyvinyl pyrrolidone; tuna gorgol etc.), disintegrants (eg, the above excipients; chemically modified such as croscarmellose sodium, sodium carboxymethyl starch, cross-linked polyvinyl pyrrolidone, Starch or cellulose derivatives, etc.), lubricants (eg, talc; stearic acid; stearic acid metal salts such as calcium stearate and magnesium stearate; colloidal silica; bee gum; waxes such as beeswax and gallows; boric acid; glycol Carboxylic acids such as fumaric acid and adipic acid; sodium carboxylic acid salts such as sodium benzoate; sulfates such as sodium sulfate; leucine; lauryl sulfates such as sodium lauryl sulfate and magnesium lauryl sulfate; silicic anhydride , Silicic acids such as silicic acid hydrate; starch derivatives in the above-mentioned excipients, stabilizers (for example, parahydroxybenzoic acid esters such as methylparaben and propylparaben; chlorobutanol, benzyl alcohol, phenylethyl alcohol) Alcohols such as: benzalkonium chloride; phenols such as phenol and cresol; thimerosal; acetic anhydride; sorbic acid, etc.], flavoring agents (eg, commonly used sweeteners, acidulants, flavors, etc.), It is produced by a known method using additives such as a suspending agent (for example, polysorbate 80, sodium carboxymethyl cellulose), a diluent, a solvent for preparation (for example, water, ethanol, glycerin, etc.).
[0035]
The amount used varies depending on the symptoms, body weight, age, etc. of the person to be administered, but the lower limit per day is 0.1 mg (preferably 1 mg), the upper limit is 1000 mg (preferably 500 mg), 1 to several times per day, It is desirable to administer depending on the symptoms.
[0036]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, Formulation Examples and Test Examples.
(Production Example 1)
5-acetamido-4-guanidino-9-O-octanoyl-2,3,4,5-tetradeoxy-7-O-methyl-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyrazonic acid hydrate crystals ( 1) Compound of Example 35 (i) of JP-A-10-330373, 5-acetamido-4- (N, N′-bis-t-butyroxycarbonyl) guanidino-9-O-octanoyl-2,3 , 4,5-tetradeoxy-7-O-methyl-D-glycero-D-galacto-non-2-enopyranosonic acid diphenylmethyl (3.46 g, 4.1 mmol) was added to methylene chloride (27 ml), trifluoroacetic acid ( 14 ml) and stirred at room temperature overnight. The reaction solution was concentrated to dryness under reduced pressure, and then azeotropically dried three times with toluene (5 ml). The resulting oil was dissolved in ethyl acetate (10 ml). On the other hand, this solution was poured into saturated sodium bicarbonate water (50 ml), and 20% aqueous sodium carbonate solution was added to adjust the pH to 8.5. The mixture was stirred at room temperature for 3 hours, adjusted to pH 5.0 with hydrochloric acid (3 ml), and stirred at room temperature for 1 hour. Further, after stirring for 1 hour under ice cooling, the crystals were suction filtered and dried in vacuum at an external temperature of 50 ° C. for 10 hours. The product was left in the air for 1 day to give the title object compound as crystals. (0.97g, 51%)
Infrared absorption spectrum (KBr) νmax cm ^-1 : 3412, 2929, 2856, 1676, 1401, 1320, 1285, 1205, 1137, 722.
¹ H nuclear magnetic resonance spectrum (400 MHz, CD ₃ OD) δ ppm: 5.88 (1H, d, J = 2.5 Hz), 4.45 (3H, m), 4.27 (1H, dd, J = 10.0 Hz, 10.0 Hz), 4.15 (1H, m), 3.47 (2H, m), 3.42 (3H, s), 2.37 (2H, t, J = 7.4 Hz), 2.10 (3H, s), 1.31 (2H, m), 1.20-1.40 ( 8H, m), 0.85-0.95 (3H, m).
¹³ C nuclear magnetic resonance spectrum (100 MHz, CD ₃ OD) δ ppm: 176.5, 173.7, 164.7, 158.9, 146.7, 108.7, 80.1, 78.0, 69.3, 66.8, 61.4, 52.4, 35.1, 32.8, 30.2, 30.1, 26.0, 23.7 , 22.8, 14.4.
FIG. 1 shows a powder X-ray diffraction pattern of this crystal obtained by irradiation with copper Kα rays (wavelength λ = 1.54 Å). The vertical axis of the powder X-ray analysis pattern indicates the diffraction intensity in units of count / second (cps), and the horizontal axis indicates the diffraction angle 2θ (degrees).
(2) The title compound was also obtained by the following method.
[0037]
Example 35 (ii) of JP-A-10-330373, 5-acetamido-4-guanidino-9-O-octanoyl-2,3,4,5-tetradeoxy-7-O-methyl-D- Glycero-D-galacto-non-2-enopyrazonic acid trifluoroacetate (3.0 g, 5.1 mmol) was subjected to reverse phase column chromatography (Nacalai Tesque Cosmosil 75C18PREP, 100 g) and methanol-water (0 : 1, 1: 1,2: 1) and increasing the methanol content. The fraction containing the desired product was concentrated under reduced pressure, and the precipitated crystals were suction filtered and dried under reduced pressure. The product was left in the air for 1 day to give the title object compound as crystals (1.2 g, 49%). The physical property data of the obtained compound was completely consistent with that obtained in the above (1).
(Test Example 1) Stability Test Amorphous powder of compound (I) described as Example 35 in JP-A-10-330373 as a crystal of compound (I) of Production Example 1 of the present invention and a control Fluoroacetate) was stored in a desiccator at 40 ° C. and 75% relative humidity, and the residual rate after 14 days (2 weeks), 28 days (4 weeks), and 56 days (8 weeks) was measured. The results are shown in Table 1. Furthermore, the residual rate after 14 days (2 weeks), 28 days (4 weeks), and 56 days (8 weeks) in a silica gel desiccator at 60 ° C. was measured separately. The results are shown in Table 2.
[0038]
The residual ratio (%) of the compound was determined from the residual ratio of the compound measured using high performance liquid chromatography (HPLC). The HPLC measurement conditions are as follows.
[0039]
Column: L-column ODS (4.6mm ID x 250mm), manufactured by Chemical Substance Evaluation Research Organization
Mobile phase: 0.1 mol / phosphate buffer (pH 3): acetonitrile (7: 3)
Flow rate: 1mL / min
Detection: 230nm
Column temperature: 30 ° C
As shown in Table 1, the amorphous powder (trifluoroacetate salt) of Compound (I) was extremely unstable in a humidified state at 40 ° C. and decreased to a content of about 10.2% after 56 days. On the other hand, the crystal (hydrate crystal) of the compound (I) of the present invention exhibits a residual rate of 100% under the same conditions and has extremely high storage stability.
As shown in Table 2, the amorphous powder (trifluoroacetate salt) of Compound (I) had low stability even at 60 ° C. in a dry state, and decreased to a content of about 89% after 56 days. In contrast, the crystal (hydrate crystal) of the compound (I) of the present invention exhibits a high residual rate of 99% or more under the same conditions, and has extremely high storage stability.
(Formulation example 1) Solution 1
Compound of Production Example 1 is 10% (W / W), benzalkonium chloride is 0.04% (W / W), phenethyl alcohol is 0.40% (W / W), and purified water is 89.56% ( Adjust the solution so that (W / W).
(Formulation Example 2) Solution 2
Compound of Production Example 1 is 10% (W / W), benzalkonium chloride is 0.04% (W / W), polyethylene glycol 400 is 10% (W / W), propylene glycol is 30% (W / W) ), Adjust the liquid so that the purified water is 39.96% (W / W).
(Formulation example 3) Powder is adjusted so that the compound of the powder manufacture example 1 may be 40% (W / W), and lactose will be 60% (W / W).
(Formulation example 4) 10% (W / W) of the compound of Aerosol Preparation Example 1, 0.5% (W / W) of lecithin, 34.5% (W / W) of Freon 11 and 55 of Freon 12 Adjust the aerosol so that it becomes% (W / W).
[0040]
【The invention's effect】
Crystals (especially hydrate crystals) containing the compound (I) of the present invention are crystals that are excellent in storage stability and practically easy to handle compared to amorphous trifluoroacetate, It is useful as a drug substance for the treatment or prevention of influenza. The hydrate of compound (I) is useful as a molecular form that gives excellent crystals.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 shows 5-acetamido-4-guanidino-9-O-octanoyl-2,3,4,5-tetradeoxy-7-O-methyl-D-glycero-obtained in Production Example 1 It is a powder X-ray-diffraction pattern obtained by irradiation of copper Kα rays (wavelength λ = 1.54 Å) for D-galacto-non-2-enopyrazonic acid hydrate crystals. The vertical axis of the powder X-ray analysis pattern indicates the diffraction intensity in units of count / second (cps), and the horizontal axis indicates the diffraction angle 2θ (degrees). The surface distance d (angstrom) can be calculated as n = 1 in the equation 2dsin θ = nλ.

Claims (2)

式（I）
で表される化合物の水和物結晶。Formula (I)
Hydrate crystals of the compound represented by 請求項１において、銅のＫα線の照射で得られる粉末Ｘ線回折において、面間隔が４．０、４．４、４．７、７．５及び１０．２オングストロームに主ピークを示す式（I）で表される化合物の水和物結晶。  In the powder X-ray diffraction obtained by irradiation of copper Kα rays in claim 1, formulas showing main peaks at interplanar spacings of 4.0, 4.4, 4.7, 7.5, and 10.2 angstroms ( Hydrate crystals of the compound represented by I).