JP3812962B2 - 単体インスリン類似体製剤 - Google Patents
単体インスリン類似体製剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3812962B2 JP3812962B2 JP14729695A JP14729695A JP3812962B2 JP 3812962 B2 JP3812962 B2 JP 3812962B2 JP 14729695 A JP14729695 A JP 14729695A JP 14729695 A JP14729695 A JP 14729695A JP 3812962 B2 JP3812962 B2 JP 3812962B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- insulin
- protamine
- solution
- pro
- lys
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
【産業上の利用分野】
本発明はヒト・インスリンの単体類似体に関する。特に本発明は、単体インスリン類似体、亜鉛、プロタミン、およびフェノール誘導体を含む種々の非経口製剤に関する。本製剤は延長された作用期間を提供する。インスリン類似体−プロタミン製剤を調製するための方法もまた記載する。
【0002】
【従来の技術】
1920年代のインスリン導入以来、耐え間なしの進歩により真性糖尿病の治療が改善されている。インスリンの精製および組換えDNA技術の発展に伴う有効性において主に進歩がなされている。異なる時間作用をもつ種々の製剤もまた開発されている。現在、一般に7つの市販のインスリン製剤:規定インスリン、セミレンテ・インスリン、グロビン・インスリン、イソファン・インスリン、インスリン亜鉛懸濁液、プロタミン亜鉛インスリン、およびウルトラレンテ・インスリンがある。
【0003】
利用可能な製剤が揃っているにもかかわらず、皮下注射治療によって患者に好都合な調整および正常化された血糖調節を今なお提供するに及ばずにいる。患者の生涯にわたる正常な血糖値からの頻繁な逸脱は、高血糖または低血糖、および長期の余病、例えば、網膜障害、神経障害、腎障害、ならびに細小血管障害および大血管障害を導く。
【0004】
極端な血糖値の回避を助けるために、糖尿病患者は、インスリンを食事毎に投与する複数回注射治療を行なうことが多い。しかし、この治療はまだ最大限に利用されていない。市販の最も迅速に作用するインスリンは、注射後にピークに達するのが余りにも遅く、余りにも長く持続するので、血糖値を調節するのに最適ではない。故に、皮下吸収法の速度論を変えるインスリン製剤およびインスリン類似体製剤の製作に、相当の努力がなされている。
【0005】
市販のインスリン医薬製剤の全部が、自己会合状態で主にヘキサマー型であるインスリンを含有するので、皮下注射貯留物から血流へのインスリン吸収について速度を制限する手段は、自己凝集インスリン・ヘキサマーの解離であると考えられる。最近、ヒト・インスリンよりも会合して高分子量の形態になる傾向の少ない単体インスリン類似体が開発されている。この自己会合性の欠如は、二量体の形成を主に途絶えさせることによって会合を減少させる、ヒト・インスリンのアミノ酸配列の修飾によるものである[例えば、Bremsら、Protein Engineering, 5:6, 527-533(1992) およびBrangeら、Nature, 333:679-682(1988) を参照]。従って、単体のインスリン類似体は比較的迅速に活性を開始するが、天然ヒト・インスリンの生物学的活性を保持している。これらインスリン類似体は、インスリンの注射時間および作用ピークを食事への応答に伴う食後のグルコース可動域と密接させるための迅速な吸収を提供する。
【0006】
単体類似体の物理的性質および特徴はインスリンに類似していない。例えば、種々の単体類似体は殆ど、または全く亜鉛によって誘導される会合をしないことをBremsらが開示している。観察されたどの会合も、多数の高分子量型に属する。これは、亜鉛の存在下において殆ど専ら整列したヘキサマー・コンフォメーションをとるインスリンと目覚ましく異なる[Brangeら、Diabetes Care, 13:923-954(1990)]。この会合の欠如が類似体の即作用性質の原因となる。類似体は会合する傾向が低いので、単体インスリン類似体を製剤化して中時間の作用期間を提供し得ることは、全く驚くべきことである。
【0007】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、使用の際に中時間の作用期間をもたらす単体インスリン類似体製剤を提供する。さらに本発明は、インスリン類似体−NPDと称される新規プロタミン結晶を提供する。また本発明は、インスリン類似体−NPDおよび可溶性単体インスリン類似体の混合物を提供する。この混合物は迅速な作用開始および中時間作用期間を提供する。従って、本混合物はインスリンおよび単体類似体の両方に優れる利点を有する。さらに本発明は、インスリン類似体−NPDの単一結晶を調製するための方法について定める。
【0008】
【課題を解決するための手段】
本発明は、単体インスリン類似体、プロタミン、亜鉛、およびフェノール誘導体を含むインスリン類似体−プロタミン製剤を提供する。
さらに本発明は、結晶性インスリン類似体−プロタミン複合体を提供する。この複合体はインスリン類似体−NPDと定義されている。LysB28ProB29−ヒト・インスリン−NPDは、LysB28ProB29−ヒト・インスリン、約0.27〜0.32mg/(100U インスリン類似体)のプロタミン、約0.35〜0.9重量%の亜鉛、およびフェノール誘導体を含む。
【0009】
さらに本発明は、約8〜22℃の温度で、ヘキサマー会合状態のLysB28ProB29−ヒト・インスリン水溶液とプロタミン溶液を混合することからなる、LysB28ProB29−ヒト・インスリン−NPDを調製するための方法を提供し、該水溶液は、pH約7.1〜7.6で、約0.35〜0.9重量%の亜鉛、LysB28ProB29−ヒト・インスリン、およびフェノール誘導体を含み;
該プロタミン溶液は、pH約7.1〜7.6でプロタミンを含み、最終プロタミン濃度が約0.27〜0.32mg/(100U インスリン類似体)である]。
また本発明は、迅速かつ中時間作用をする製剤を提供する。該製剤は、重量比が約1〜99:99〜1である単体インスリン類似体および結晶性インスリン類似体−NPDの混合物である。
最後に本発明は、真性糖尿病を患う患者にインスリン類似体−プロタミン結晶を含有する医薬組成物を投与することからなる、該患者を治療する方法を提供する。
【0010】
上述のように、本発明は種々の単体インスリン類似体製剤を提供する。明細書中に用いる用語「単体インスリン類似体」または「インスリン類似体」は、二量体化または自己会合する傾向の少ない即作用性インスリン類似体である。単体インスリン類似体は、B28位のProがAsp、Lys、Leu、Val、もしくはAlaと置換されていて、かつB29位のLysがLysもしくはProであるヒト・インスリン、デス(B28−B30)−ヒト・インスリン、またはデス(B27)−ヒト・インスリンである。単体インスリン類似体は、Chanceら[欧州特許公開第383472号]およびBrangeら[欧州特許公開第214826号]に記載されている(これらは本明細書の一部を構成する)。
【0011】
当業者は、単体インスリン類似体への他の修飾が可能であることを認識するであろう。これら修飾は当分野において広く許容され、B10位のヒスチジン残基とアスパラギン酸の置換、B1位のフェニルアラニン残基とアスパラギン酸の置換、B30位のスレオニン残基とアラニンの置換、B9位のセリン残基とアスパラギン酸の置換、単独でかまたはB2位の欠失と組合せてのB1位のアミノ酸欠失、およびB30位からのスレオニンの欠失が含まれる。
本明細書中に用いる全アミノ酸略語は、37 C.F.R. §1.822(b)(2)に示されているように、米国特許商標庁によって許容されているものである。特に好ましい単体インスリン類似体は、LysB28ProB29−ヒト・インスリン(B28がLysであり、B29がProである)およびAspB28−ヒト・インスリン(B28がAspである)である。
【0012】
用語「単体インスリン類似体−NPD」または「インスリン類似体−NPD」は、製剤の結晶性インスリン類似体およびプロタミン懸濁液である。NPDはDeFelippisによる中性プロタミン製剤(Neutral Protamine formulation according to DeFelippis)である。本組成物は、本明細書に記載の特許請求する方法に従って調製される。関連用語「インスリン類似体NPD結晶」、「結晶性インスリン類似体−NPD」、または「LysB28ProB29−ヒト・インスリン−プロタミン結晶」は、NPD製剤のインスリン類似体−プロタミン結晶を指す。
本明細書中に用いる用語「治療する」は、疾患、症状、または障害に抵抗するための患者の処置および看護を記述し、そして症状もしくは余病の開始を予防し、症状もしくは余病を緩和し、または疾患、症状、もしくは障害を排除するために本発明の化合物を投与することを含む。
【0013】
用語「等張剤」は、生理学的に寛容性であり、細胞膜を透過する水の正味の流動を防ぐために製剤に適当な張度を与える物質を指す。グリセリンのような化合物は、このような目的のために既知の濃度で一般に用いられる。等張剤の濃度はインスリン製剤の分野において既知の範囲内にある。
用語「フェノール誘導体」はm−クレゾール、フェノール、または好ましくはm−クレゾールおよびフェノールの混合物である。
用語「遊離塩基主成分」は製剤中のプロタミン量を指す。遊離塩基主成分は、市販品で非経口製剤に一般に用いられるプロタミン塩の、水および塩の含有量を調整する。好ましいプロタミンである硫酸プロタミンは、約80%プロタミンである。
【0014】
用語「IU」または「U」は国際単位である。
用語「イソファン比」は、KrayenbuehlとRosenberg[Steno Memorial Hospital Report (Copenhagen), 1:60(1946)]によって教示されたような、類似体と複合するのに必要なプロタミンの平衡量である。該イソファン比は、当分野において周知であり、Krayenbuehlらによって記載されている方法で滴定によって測定される。
【0015】
本発明は、単体インスリン類似体、プロタミン、亜鉛、およびフェノール誘導体を含むインスリン類似体−プロタミン製剤を提供する。プロタミン濃度は、遊離塩基を基準にして100Uのインスリン類似体に対し約0.2〜1.5mgのプロタミンが好ましい。最も好ましくは、プロタミン範囲が約0.27〜0.35mg/100Uである。亜鉛濃度は重量基準で約0.35〜0.9%である。好ましくは、亜鉛濃度が約0.7%である。
フェノール誘導体はm−クレゾール、フェノール、またはm−クレゾールおよびフェノールの混合物である。フェノール誘導体はm−クレゾールおよびフェノールであるのが好ましい。フェノール誘導体濃度は当業者に知られている。該濃度は保存効果(即ち、遅延微生物増殖)を維持するのに十分でなければならない。一般に、フェノール性濃度は、例えば1.0〜6.0mg/mlの範囲内であり、約2.5mg/ml以上が好ましい。最も好ましい濃度は約3mg/mlである。フェノール誘導体はインスリン類似体、プロタミン、および亜鉛を複合するよう作用し、さらに保存物質として働くので、フェノール誘導体の存在は重要である。しかし、インスリン類似体1分子につきフェノール1分子だけが結晶構造に結合すると考えられている。
【0016】
好ましくは、等張剤を製剤に添加する。好ましい等張剤はグリセリンである。等張剤濃度は、例えば14〜18mg/mlであり、好ましくは約16mg/mlである。製剤のpHを、生理学的に寛容な緩衝液、好ましくは二塩基性リン酸ナトリウムのようなリン酸緩衝液でもって緩衝してよい。他の生理学的に寛容な緩衝液には、TRIS、酢酸ナトリウム、またはクエン酸ナトリウムが含まれる。緩衝液の選択および濃度は当分野において知られている。一般に、該濃度は、例えば約1.5〜5.0mg/mlであり、好ましくは3.8mg/mlである。
【0017】
さらに本発明は、インスリン類似体−プロタミンが安定な結晶として存在する特定の条件を提供する。これら結晶の製剤をインスリン類似体−NPDと定義する。インスリン類似体−NPDは、製剤化されたインスリン類似体−NPD結晶の懸濁液であり、使用において中時間作用期間を生じる。インスリン類似体−NPD活性のプロフィールは、単体類似体の自己会合の欠如を考えると全く驚くべきものである。
【0018】
単体類似体を有する中時間作用する製剤を形成する能力が図1において証明されている。図1は、LysB28ProB29−hI−NPDおよびヒト・インスリン−NPHについての作用のプロフィールを開示する。NPDプロフィールはインスリン−NPHと類似している。NPD製剤およびインスリン−NPH製剤についての作用期間はほぼ等しい。しかし、最も意味深いことには、本製剤はインスリン−NPHより迅速に上昇し、より長期間安定である。この相違は、単体類似体の即作用性プロフィールを考えると全く思いがけないことである。
特に好ましいインスリン類似体−プロタミン製剤であるLysB28ProB29−ヒト・インスリン−NPDは、LysB28ProB29−ヒト・インスリン、約0.27〜0.32mg/(100U インスリン類似体)のプロタミン、約0.35〜0.9重量%の亜鉛、およびフェノール誘導体を含む。プロタミン濃度は、遊離塩基を基準にして0.3mg/100Uが好ましい。
【0019】
また本発明は、約8〜22℃の温度で、ヘキサマー会合状態のLysB28ProB29−ヒト・インスリン水溶液とプロタミン溶液を混合することからなる、LysB28ProB29−ヒト・インスリン−プロタミン結晶を調製するための方法を提供し、該水溶液は、pH約7.1〜7.6で、約0.35〜0.9重量%の亜鉛、LysB28ProB2 9−ヒト・インスリン、およびフェノール誘導体を含み、該プロタミン溶液は、pH約7.1〜7.6でプロタミンを含み、最終プロタミン濃度が約0.27〜0.32mg/(100U インスリン類似体)である。
発明時に、単体インスリン類似体は、会合してヘキサマーを形成する傾向を殆どもたないことが知られていた。単体インスリン類似体をプロタミンと会合させて結晶を形成させるのに必要な条件は、当分野において以前は知られていなかった。先行研究はインスリンに関する。インスリン−NPH[Hagedornによる中性プロタミン製剤(Neutral Protamine formulation according to Hagedorn)]またはイソファン・インスリン製剤の調製に関する教示[KrayenbuehlとRosenberg、Steno Memorial Hospital Report (Copenhagen), 1:60(1946)]は、単体インスリン類似体の異なる特性を考えると関係がない。実際、Humulin−NTM(インスリン−NPH)を調製する市販の方法である酸性−中性法によって、結晶性インスリン類似体−NPDを得ることはない。
【0020】
最も意味深いことには、本方法のパラメーター、即ち、結晶化温度およびインスリン類似体、亜鉛、およびフェノール誘導体のヘキサマー複合体形成は、安定なLysB28ProB29−hI−NPD結晶の形成を決定的に制限する。
結晶化温度は約8〜22℃、好ましくは13〜17℃でなければなれない。もし温度がこの範囲を逸脱するなら、大部分が非結晶のインスリン類似体−プロタミン製剤を得る結果となる。
インスリン類似体が、結晶化に先立ってヘキサマー状態に変換されることもまた重要である。単体結合状態で該方法を実行すると、結晶化によって非結晶性産物を得る結果となる。5〜36時間、振盪しないで結晶を形成させる。通例、24時間で良質の結晶を形成する。
【0021】
フェノール誘導体を含有し、濃度が重量基準で約0.35〜0.9%になるまで亜鉛を添加した希釈剤に、固体単体類似体を懸濁することにより、可溶性単体インスリン類似体を複合させてヘキサマー会合状態にする。亜鉛を塩として添加するのが好ましい。亜鉛塩の代表的な例には、酢酸亜鉛、臭化亜鉛、塩化亜鉛、フッ化亜鉛、ヨウ化亜鉛、および硫酸亜鉛が含まれる。これもまた本発明の方法に用いることのできる多くの他の亜鉛塩が存在することを、当業者は認識するであろう。好ましくは、酢酸亜鉛または塩化亜鉛を用いる。
インスリン類似体の希釈剤への溶解を、酸性溶解として一般に知られていることによって促進してもよい。酸性溶解においては、生理学的に寛容な酸、好ましくはHClでもってpH約3.0〜3.5に下げて、類似体の可溶性を増大させる。他の生理学的に寛容な酸には、酢酸、クエン酸、およびリン酸が含まれる。次いで、結晶化のために、生理学的に寛容な塩基、好ましくはNaOHでもって、pH約7.1〜7.6に調節する。他の生理学的に寛容な塩基には、KOHおよび水酸化アンモニウムが含まれる。
【0022】
最も意味深いことには、LysB28ProB29−hI−NPD複合体を調製する方法はNaCl濃度に敏感である。もし該濃度が約4mg/mlを超過するなら、インスリン類似体−NPD結晶は非結晶性産物と混在することになる。従って、単体類似体を中性のpHで溶解させて、塩イオンの形成を避けることが好ましい。別法として、緩衝液の添加に先立って、酸性のpHで希釈剤中に類似体を溶解させる。これによって、pH調節によって生じる塩の濃度を減少させる。しかし、成分を添加する順序は、ヘキサマーまたは非結晶製剤の形成に決定的ではない。
前述のように、等張剤を本発明の製剤に添加してもよい。類似体溶液、プロタミン溶液、または最終的なインスリン類似体−NPD製剤に、等張剤を添加することができる。同様に、類似体溶液、プロタミン溶液、または最終的なインスリン類似体−NPD製剤に、生理学的に寛容な緩衝液を添加してもよい。しかし、水溶液とプロタミンを混合するのに先立って、類似体溶液およびプロタミン溶液の両方が等張剤および緩衝液を含有しているのが好ましい。結晶性インスリン類似体−NPDを調製するための方法に及ぼすNaClの影響のため、グリセリンが好ましい等張剤である。
【0023】
また本発明は、結晶性固体としてのインスリン類似体−NPDおよび可溶性インスリン類似体の混合物を含むインスリン類似体製剤を提供する。懸濁したインスリン類似体−NPD:可溶性インスリン類似体の体積で約1:99〜99:1の範囲内で、これら混合物を調製する。可溶性インスリン類似体は、亜鉛、フェノール誘導体、等張剤、および緩衝液を含む水性希釈剤に溶解させた単体インスリン類似体である。希釈剤中の記載した濃度は、本明細書中に先に開示したものと同じである。インスリン類似体−NPD:可溶性インスリン類似体の比は25:75〜75:25が好ましく、50:50がより好ましい。個々の成分を混合することによって、該混合物を調製することは容易である。
本発明の混合製剤は、作用の迅速な開始および延長された期間の組み合わせのため、真性糖尿病の治療に特に適当である。患者の必要性、飲食物、および肉体的活動に基づいて各々個々の成分の量を変化させることにより、これら混合物を「微調節」する。また、懸濁したインスリン類似体−NPDおよび可溶性インスリン類似体は同質的である、即ち、それらの間のどんな平衡交換も明瞭であるので、懸濁したインスリン類似体−NPDおよび可溶性インスリン類似体の混合物は好都合である。
【0024】
多くの承認されたペプチド合成技術、例えば、古典的(溶液)方法、固相法、半合成法、およびより最近の組換えDNA法のいずれかによって、本発明のインスリン類似体を調製することができる。例えば、Chanceら[欧州特許公開第383472号]およびBrangeら[欧州特許公開第214826号]によって、種々の単体類似体の調製法が開示されている。
【0025】
【実施例】
以下の実施例はインスリン類似体の調製および本発明をさらに説明するためだけのものであり、本発明の範囲を限定しようとするものではない。
実施例1 LysB28ProB29−hI−NPDの調製
濃度200IU/ml(U200)のLysB28ProB29−ヒト・インスリン(LysB28ProB29−hI)溶液を、以下に挙げるものを含有する保存物質/緩衝液系にLysB28ProB29−hI結晶を含有する亜鉛を溶解することによって調製した:1.6mg/ml m−クレゾール、0.73mg/ml フェノール(89%として算定されたフェノール0.65mg/mlと等量)、16mg/ml グリセリン、および3.78mg/ml 二塩基性リン酸ナトリウム緩衝液。結晶中の外因性亜鉛濃度を、適量の酸性ZnO溶液(10mg/ml)を加えることによって補足し、最終濃度0.025mg/100IU(0.7%)にした。μl量の5M HClでもってpH約3に下げることにより、周囲温度でLysB28ProB29−hIを溶解させた。この溶液を清澄化した後、μl量の5M NaOHでもってpH7.5に再調節した。
遊離塩基を基準として算定した最終濃度0.6mg/100IUにするのに十分な固体硫酸プロタミンを保存物質/緩衝液溶液に溶解することによって、プロタミン溶液を調製した。この溶液をpH7.5に調節し、15℃で平衡化させた。
両方の溶液を注射用水で最終濃度に希釈し、濾過した。LysB28ProB29−hI部分のアリコート(5ml)を分離清浄ガラスバイアル中に満たし、試料を水浴中15℃でインキュベートした。平衡化のための適当な時間(15分)の後、プロタミン溶液(5ml)をLysB28ProB29−hI試料に速やかに加えて沈澱させた。15℃で約24時間結晶化を進行させた。
【0026】
実施例2 LysB28ProB29−hI−NPDの調製
LysB28ProB29−hIの溶解が中性のpHで起きることを除いて、実施例1と同一の方法である。最終pH7.4となるよう該方法を行った。
【0027】
実施例3 LysB28ProB29−hI−NPDの調製
インスリン類似体−NPDを実施例1に類似した方法で調製したが、LysB28ProB29−hIの酸性溶解を二塩基性リン酸ナトリウム緩衝液を除く全賦形剤の存在下で行なった。インスリン類似体溶液をpH7.4に戻した後、固体二塩基性リン酸ナトリウムを加える。二塩基性リン酸ナトリウムの添加によって該溶液を清澄化した。
【0028】
実施例4 インスリン類似体−NPD混合物製剤の調製
中時間および即作用するLysB28ProB29−hI製剤の混合物を以下のように調製する。中時間作用する懸濁調製物を実施例3に記載の方法によって調製し、これは混合物について中時間作用部分として働く。亜鉛含有LysB28ProB29−hI結晶を周囲温度で実施例1に記載の希釈剤に溶解することによって、LysB28ProB29−hI(100IU)の別の溶液を調製する。懸濁液部分の濃度[即ち、0.025mg/100IU(0.7%)]と一致させるために酸性ZnO溶液を添加することによって、この溶液中のLysB28ProB29−hIの外因性亜鉛濃度を補足する。HClおよび/またはNaOHの10%溶液を用いてpH7.4に調節した後、注射用水を用いて溶液を最終濃度に希釈する。この溶液が混合物の即作用部分である。所望の比率を得るよう適当な量の中時間および即作用部分を混合することによって、最終混合物を調製する。中時間作用部分の1部(体積)を即作用部分の1部(体積)と混合することによって、50/50混合物を調製する。
【0029】
実施例5 LysB28ProB29−hIプロタミン結晶化へのイオン強度の影響
プロタミンと混合するのに先立って、LysB28ProB29−hI部分にNaClを加えることにより、結晶化へのイオン強度の影響を評価した。総濃度が20、30、および40mM(1.2、1.8、および2.3mg/ml)になるようNaClを加えた。NaCl濃度が増加するにつれて、体積粒子サイズが多様式の挙動を示した(小粒子サイズでさらにピークに達する)。非結晶物質の増加を示しながらNaCl濃度が増加するにつれて、体積平均粒子サイズが減少した。粒子サイズ対NaCl濃度の結果を以下に示す:
【0030】
【表1】
【0031】
顕微鏡分析によって、全試料が非結晶および結晶性物質の混合物を包含することが示された。40mM NaClを含有する試料は、非結晶物質を主に有し、結晶を殆ど有さない。
【0032】
実施例6 LysB28ProB29−hI−NPDおよびヒト・インスリン−NPHの比較力学
この研究を知覚のあるイヌ・モデルで行なう。研究開始に先立って、3つの基礎試料を採取した。ソマトスタチンの注入(0.3μg/kg・分)を開始した。10分おいた後、NPDまたはNPHのいずれかを皮下注射投与した。血漿グルコースを頻繁にモニターし始め、正常血糖付近を維持するようにグルコース(20%)を多様な量で注入した。試料を残らず採取し、免疫反応性インスリン(Linco抗体)およびグルコースについて分析した。この結果を図1に示す。
【0033】
実施例7 Asp(B28)類似体・プロタミン結晶の調製
濃度200IU/ml(U200)のAsp(B28)−hI部分を、以下に挙げるものを含有する保存物質/緩衝液系に凍結乾燥物(95%純度)を溶解することによって調製した:1.6mg/ml m−クレゾール、0.73mg/ml フェノール(89%と算定されたフェノールの0.65mg/mlと等量)、16mg/ml グリセリン、および3.78mg/ml 二塩基性リン酸ナトリウム。適量の酸性ZnO溶液(10mg/ml)を用いて亜鉛を該系に追加し、最終濃度0.025mg/100IUを得た。周囲温度、中性のpHでAsp(B28)を溶解させた。この部分の最終pHは7.4であった。
実施例2に記載のように結晶化を行なった。最終プロタミン濃度の0.3mg/100U、0.35mg/100U、および0.4mg/100Uについて研究した。これらプロタミン濃度は、重量/重量基準で2.9%、9.3%、10.5%に各々対応する。インキュベーション温度には5℃(0.3mg/100Uのみ)、15℃、および22℃が含まれた。これらの温度で24時間後、試料を結晶構造について分析した。顕微鏡によって測定した結果は、少数の結晶および非結晶産物の混合物を示す。
【0034】
実施例8 Asp(B28)類似体・プロタミン結晶の調製
緩衝液を含まない希釈剤にタンパク質を最初に溶解することを除いて、実施例7に記載のようにAsp(B28)プロタミン結晶化を行なった。酸性ZnO貯蔵物の添加によって、試料をpH2.0〜2.5に十分に酸性化した。この溶液を清澄化した後、μl量の5N NaOHでもってpH約7に再調節した。47.25mg/mlの濃厚貯蔵溶液を用いてリン酸ナトリウム(二塩基性)を加え、最終濃度3.78mg/mlにした。この部分をμl量のHClを用いてpH7.4に調節した。
先の実施例に記載したように、Asp(B28)およびプロタミン部分を混合することによって結晶化を開始した。最終プロタミン濃度の0.3mg/100U、0.35mg/100U、および0.4mg/100Uについて研究した。インキュベーション温度には15℃および22℃が含まれた。これらの温度で24時間後、試料を結晶生成について分析した。顕微鏡によって測定した結果は、結晶および非結晶産物の混合物を示す。
【0035】
実施例9 Leu(B28)Pro(B29)類似体・プロタミン結晶の調製
実施例8に記載のように、バルクの酸性溶解についで5N NaOHでもってpH7.4に調節して、濃度200IU/ml(U200)のLeu(B28)Pro(B29)部分(93%純度)を調製した。上記のように結晶化した。最終プロタミン濃度の0.3mg/100U、0.35mg/100U、および0.4mg/100Uについて研究した。インキュベーション温度には5℃、15℃、および22℃が含まれた。これらの温度で24時間後、顕微鏡によって測定したところ、全試料は幾らか結晶を含むが、主に非結晶であった。
【0036】
実施例10 デス(B27)hI−プロタミン結晶
実施例8に記載のように、バルクの酸性溶解についで5N NaOHでもってpH7.4に調節して、200IU/ml(U200)濃度のデスThr(B27)(97.37%純度)部分を調製した。実施例8に記載のように結晶化を行なった。最終プロタミン濃度の0.3mg/100U、0.35mg/100U、および0.4mg/100Uについて研究した。インキュベーション温度には15℃および22℃が含まれた。これらの温度で24時間後、顕微鏡によって測定したところ、全試料は主に非結晶であった。定性的には、結晶が観察された。
【0037】
実施例11 デス(B28−B30)hI−プロタミン
実施例8に記載のように、バルクの酸性溶解についで5N NaOHでもってpH7.4に調節して、200IU/ml(U200)濃度のデス(28−30)(96.3%純度)部分を調製した。上述のように、タンパク質およびプロタミン部分の中性/中性混合法を用いて結晶化を試みた。最終プロタミン濃度の0.3mg/100U、0.35mg/100U、および0.4mg/100Uについて研究した。インキュベーション温度には15℃および22℃が含まれた。これらの温度で24時間後、顕微鏡によって測定したところ、全試料は主に非結晶であった。定性的には、結晶が観察された。この結晶を十分に定義した。
【0038】
実施例12 Asp(B28)類似体−プロタミン
インスリンAsp(B28)−ヒト・インスリン類似体溶液を、以下に挙げるものを含有する溶液(1ml)にタンパク質(16.6mg)を溶解することによって調製した:3.2mg/ml m−クレゾール、1.3mg/ml フェノール、および32mg/mlグリセリン。酸性亜鉛の貯蔵溶液[Zn2+で10mg/ml、酸化亜鉛(0.311g)を10%HCl(5ml)に溶解し、水で希釈して25mlにすることにより調製]のアリコート(14.4μl)を加えた。タンパク質を完全に溶解させるよう、この溶液はpH2.3であった。10%NaOHのアリコート(10μl)を加えて、pH7.06に調節した。この溶液に0.28M 二塩基性リン酸ナトリウム(100μl、pH7.0)を加え、これによって溶液をpH7.27にした。注射用水のアリコート(870μl)をこの溶液に加えた。さらに10%HCl(1μl)およびNaOH(0.7μl)を加え、溶液の最終容量を注射用水で2mlにし、その結果最終pH7.26になった。この溶液を0.2μm SuporRAcrodiscR13(Gelman Sciences)フィルターに通して使用前に濾過した。
以下に挙げるものを含有する溶液に硫酸プロタミンを溶解することによって、プロタミン貯蔵溶液を調製した:1.6mg/ml m−クレゾール、0.65mg/ml フェノール、16mg/ml グリセリン、および14mM 二塩基性リン酸ナトリウム。この溶液を最終pH7.3に調節した。遊離塩基を基準にして0.60mg/100Uの最終プロタミン濃度を得た。両溶液を0.22μm(Millipore SterivexTM-GV)フィルター・ユニットでもって使用前に濾過した。
【0039】
表2に概要を示しているように、温度制御下で比率1:1のAsp(B28)−ヒト・インスリン溶液を混合することによって結晶化させた。最終混合物条件は以下のとおりであった:3.94mg/ml Asp(B28)−ヒト・インスリン、0.0359mg/ml (0.9%)亜鉛イオン、1.6mg/ml m−クレゾール、0.65mg/ml フェノール、16mg/ml グリセリン、14mM 二塩基性リン酸ナトリウム、および0.30mg/100U プロタミン(pH7.3)。特に、AspB28−ヒト・インスリン溶液の部分(50〜200μl)をガラス・バイアルに移し、この試料を4、8、15、または23(周囲温度)℃に平衡させた。両プロタミン溶液の部分もこれら温度で平衡化させた。15〜20分後、当量のどちらかのプロタミン溶液を、ピペットでAsp(B28)−ヒト・インスリン試料に移した。この混合物を穏やかに撹拌し、蓋をし、次いで結晶化期間中、温度制御下に静置した。全試料を24時間後に顕微鏡で調べたところ、主に非結晶であることが分かった。48時間後、0.30mg/100U プロタミンを含有し、15℃でインキュベートした試料は、多量の針状結晶および一部非結晶物質を示した。
【0040】
実施例13
インスリンAsp(B28)−ヒト・インスリン類似体溶液を、以下に挙げるものを含有する溶液(0.71ml)にタンパク質(10.62mg)を溶解することによって調製した:3.2mg/ml m−クレゾール、1.3mg/ml フェノール、および32mg/ml グリセリン。酸性亜鉛の貯蔵溶液[Zn2+で10mg/ml、酸化亜鉛(0.311g)を10%HCl(5ml)に溶解し、水で希釈して25mlにすることにより調製]のアリコート(10.2μl)を加えた。タンパク質を完全に溶解させるよう、この溶液はpH2.3であった。10%NaOHのアリコート(6.5μl)を加えて、pH7.00に調節した。この溶液に0.28M 二塩基性リン酸ナトリウム(71μl、pH7.0)を加え、これによって溶液をpH7.26にした。注射用水のアリコート(620μl)をこの溶液に加えた。さらに10%HCl(0.2μl)およびNaOH(0.6μl)を加え、溶液の最終容量を注射用水で1.42mlにし、結果最終pH7.42になった。この溶液を0.2μm SuporRAcrodiscR13(Gelman Sciences)フィルターに通して使用前に濾過した。
以下に挙げるものを含有する溶液に硫酸プロタミンを溶解することによって、プロタミン貯蔵溶液を調製した:1.6mg/ml m−クレゾール、0.65mg/ml フェノール、16mg/ml グリセリン、および14mM 二塩基性リン酸ナトリウム。この溶液を最終pH7.4に調節し、遊離塩基を基準にして0.60mg/100Uの最終プロタミン濃度を得た。この溶液を0.22μm(Millipore SterivexTM-GV)フィルター・ユニットでもって使用前に濾過した。
【0041】
温度制御下(13℃、15℃、17℃、および23℃)で、実施例12に記載のように比率1:1でプロタミン溶液とAsp(B28)−ヒト・インスリン溶液を混合することによって結晶化させた。この結果を表2に示す。最終混合物条件は以下のとおりであった:3.74mg/ml Asp(B28)−ヒト・インスリン、0.0359mg/ml (0.9%)亜鉛イオン、1.6mg/ml m−クレゾール、0.65mg/mlフェノール、16mg/ml グリセリン、14mM 二塩基性リン酸ナトリウム、および0.30mg/100U プロタミン(pH7.4)。4つの異なる結晶化温度について評価した。15℃に平衡化したAsp(B28)−ヒト・インスリンのアリコート(1ml)を、同じ温度に調節したプロタミン溶液(1ml)と混合した。穏やかに撹拌した後、調製物を15℃で静置した。Asp(B28)−ヒト・インスリン溶液(100μl)を13℃に平衡化し、次いで同じ温度に調節したプロタミン溶液(100μl)と混合することによって、別の試料を調製した。最終混合物を13℃でインキュベートした。2つのアリコート(100μl)を平衡化し、混合し、次いで17℃でインキュベートすることを除いて同様の方法で、第3の試料を調製した。周囲温度に平衡化したAsp(B28)−ヒト・インスリンおよびプロタミン溶液のアリコート(80μl)を混合し、周囲温度(23℃)でインキュベートすることによって、最終溶液を調製した。以下の表2に挙げるように、24時間後およびさらに時間間隔をおいた後、顕微鏡によって全試料を評価した。
【0042】
【表2】
a 全溶液は以下に挙げるものもまた含有する:0.9%亜鉛イオン、1.6mg/ml m−クレゾール、0.65mg/ml フェノール、16mg/ml グリセリン、および14mM 二塩基性リン酸ナトリウム(pH7.4)。
b 600×(Nikon Optiphot 66顕微鏡)または1000×(Zeiss Axioplan微分界面差顕微鏡)倍率の顕微鏡によって、結晶化結果を評価した。両顕微鏡には写真撮影のための付属品を装備した。
【0043】
上記実施例に従って調製した結晶を図2および3に示す。
【0044】
【図面の簡単な説明】
【図1】 図1は、LysB28ProB29−hI−NPDおよびヒト・インスリン−NPHの作用のプロフィールのグラフ表示である。このグラフはμU/ml対注入時間である。この図によって、本発明の有利性が証明される。
【図2】 図2は、本発明のAspB28−ヒト・インスリン−プロタミン結晶の結晶構造を示す写真である。この写真は、微分位相差の1000×倍率で撮影した。
【図3】 図3は、本発明のLysB28ProB29−ヒト・インスリン−プロタミン結晶の結晶構造を示す写真である。この写真は、微分位相差の1000×倍率で撮影した。
Claims (6)
- LysB28ProB29−ヒトインスリン;プロタミン;亜鉛およびフェノール誘導体を含むインスリン類似体−プロタミン複合体。
- LysB28ProB29−ヒトインスリン、0.27〜0.32mgプロタミン/100IUのインスリン類似体、0.35〜0.9重量%の亜鉛、およびフェノール誘導体である請求項1に記載の複合体。
- 請求項1または2に記載の複合体を含むインスリン類似体−プロタミン非経口医薬製剤。
- 可溶性のLysB28ProB29−ヒトインスリンおよびLysB28ProB29−ヒトインスリン−プロタミンの結晶を含む請求項3に記載の非経口医薬製剤。
- 可溶性のLysB28ProB29−ヒトインスリンおよびLysB28ProB29−ヒトインスリン−プロタミンの結晶の混合物を含み、2つの成分の重量比が1:99〜99:1(インスリン類似体:プロタミン結晶)である非経口医薬製剤。
- 2成分の重量比が50:50、75:25、または25:75である請求項5に記載の非経口医薬製剤。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US260633 | 1994-06-16 | ||
US08/260,633 US5461031A (en) | 1994-06-16 | 1994-06-16 | Monomeric insulin analog formulations |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH083064A JPH083064A (ja) | 1996-01-09 |
JP3812962B2 true JP3812962B2 (ja) | 2006-08-23 |
Family
ID=22989963
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP14729695A Expired - Lifetime JP3812962B2 (ja) | 1994-06-16 | 1995-06-14 | 単体インスリン類似体製剤 |
Country Status (37)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US5461031A (ja) |
JP (1) | JP3812962B2 (ja) |
KR (1) | KR100386038B1 (ja) |
CN (1) | CN1145641C (ja) |
AT (1) | AT408611B (ja) |
BE (1) | BE1009409A5 (ja) |
BR (1) | BR9502797A (ja) |
CA (1) | CA2151564C (ja) |
CH (2) | CH689934A5 (ja) |
CO (1) | CO4410204A1 (ja) |
CZ (1) | CZ294556B6 (ja) |
DE (1) | DE19521753B4 (ja) |
DK (1) | DK176213B1 (ja) |
ES (1) | ES2091728B1 (ja) |
FI (1) | FI118208B (ja) |
FR (1) | FR2721215B1 (ja) |
GB (1) | GB2290294B (ja) |
GR (1) | GR1002494B (ja) |
HU (1) | HU218943B (ja) |
IE (1) | IE68852B1 (ja) |
IL (1) | IL114153A (ja) |
IT (1) | IT1276722B1 (ja) |
LU (1) | LU88627A1 (ja) |
MY (1) | MY116831A (ja) |
NL (2) | NL1000565C2 (ja) |
NO (1) | NO320808B1 (ja) |
NZ (1) | NZ272360A (ja) |
PE (1) | PE34496A1 (ja) |
PL (1) | PL183284B1 (ja) |
PT (1) | PT101723B (ja) |
RO (1) | RO115124B1 (ja) |
SE (1) | SE509295C2 (ja) |
SI (1) | SI9500199A (ja) |
TW (1) | TW347334B (ja) |
UA (1) | UA34468C2 (ja) |
YU (1) | YU39795A (ja) |
ZA (1) | ZA954941B (ja) |
Families Citing this family (98)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1607086A1 (en) * | 1993-01-29 | 2005-12-21 | Aradigm Corporation | Method of use of monomeric insulin as a means for improving the reproducibility of inhaled insulin |
US6024090A (en) * | 1993-01-29 | 2000-02-15 | Aradigm Corporation | Method of treating a diabetic patient by aerosolized administration of insulin lispro |
US5888477A (en) * | 1993-01-29 | 1999-03-30 | Aradigm Corporation | Use of monomeric insulin as a means for improving the bioavailability of inhaled insulin |
US6131567A (en) * | 1993-01-29 | 2000-10-17 | Aradigm Corporation | Method of use of monomeric insulin as a means for improving the reproducibility of inhaled insulin |
DK72793D0 (da) * | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Novo Nordisk As | Nyt produkt |
US5461031A (en) * | 1994-06-16 | 1995-10-24 | Eli Lilly And Company | Monomeric insulin analog formulations |
US5547929A (en) * | 1994-09-12 | 1996-08-20 | Eli Lilly And Company | Insulin analog formulations |
AR002976A1 (es) * | 1995-03-31 | 1998-05-27 | Lilly Co Eli | Formulaciones farmaceuticas parenterales de efecto prolongado de insulina; cristales de dichos analogos aplicables en dichas formulaciones yprocedimiento de las formulaciones mencionadas |
DE69630527T2 (de) * | 1995-06-30 | 2004-08-05 | Novo Nordisk A/S | Vorbeugung einer krankheit mit diabetes charakter |
HU228094B1 (en) * | 1996-06-20 | 2012-10-29 | Novo Nordisk As | Insulin preparations containing nacl |
ATE294189T1 (de) * | 1997-02-07 | 2005-05-15 | Novo Nordisk As | Kristallisation von proteinen |
US5898067A (en) * | 1997-02-07 | 1999-04-27 | Novo Nordisk A/S | Crystallization of proteins |
ZA984697B (en) * | 1997-06-13 | 1999-12-01 | Lilly Co Eli | Stable insulin formulations. |
EP1283051B1 (en) * | 1997-06-13 | 2006-06-14 | Eli Lilly And Company | Stable insulin formulations |
CA2306905A1 (en) | 1997-10-24 | 1999-05-06 | Eli Lilly And Company | Fatty acid-acylated insulin analogs |
US6531448B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-03-11 | Eli Lilly And Company | Insoluble compositions for controlling blood glucose |
US20010053761A1 (en) * | 1998-01-08 | 2001-12-20 | Dimarchi Richard Dennis | Method for administering aspb28-human insulin |
US20040214747A1 (en) * | 1999-01-06 | 2004-10-28 | Dimarchi Richard Dennis | Method for administering monomeric insulin |
US6624141B1 (en) * | 1999-03-17 | 2003-09-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Protamine fragment compositions and methods of use |
US7169889B1 (en) | 1999-06-19 | 2007-01-30 | Biocon Limited | Insulin prodrugs hydrolyzable in vivo to yield peglylated insulin |
US7678364B2 (en) | 1999-08-25 | 2010-03-16 | Alkermes, Inc. | Particles for inhalation having sustained release properties |
CN1406131A (zh) * | 2000-12-25 | 2003-03-26 | 株式会社资生堂 | 活化交感神经的香料组合物 |
WO2002064627A2 (en) * | 2001-02-09 | 2002-08-22 | Genentech, Inc. | Crystallization of igf-1 |
US6867183B2 (en) | 2001-02-15 | 2005-03-15 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
US7060675B2 (en) | 2001-02-15 | 2006-06-13 | Nobex Corporation | Methods of treating diabetes mellitus |
US6828297B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of insulin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
US6828305B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-12-07 | Nobex Corporation | Mixtures of growth hormone drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
US6858580B2 (en) * | 2001-06-04 | 2005-02-22 | Nobex Corporation | Mixtures of drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
US6835802B2 (en) * | 2001-06-04 | 2004-12-28 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing substantially monodispersed mixtures of polymers having polyethylene glycol moieties |
US6713452B2 (en) | 2001-06-04 | 2004-03-30 | Nobex Corporation | Mixtures of calcitonin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same |
US7713932B2 (en) | 2001-06-04 | 2010-05-11 | Biocon Limited | Calcitonin drug-oligomer conjugates, and uses thereof |
US7238663B2 (en) * | 2001-08-28 | 2007-07-03 | Eli Lilly And Company | Pre-mixes of GLP-1 and basal insulin |
US6770625B2 (en) | 2001-09-07 | 2004-08-03 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of calcitonin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
US7166571B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-01-23 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
US7196059B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-03-27 | Biocon Limited | Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
US7312192B2 (en) | 2001-09-07 | 2007-12-25 | Biocon Limited | Insulin polypeptide-oligomer conjugates, proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
US7030082B2 (en) * | 2001-09-07 | 2006-04-18 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of drug-oligomer conjugates and methods of treating disease therewith |
US6913903B2 (en) | 2001-09-07 | 2005-07-05 | Nobex Corporation | Methods of synthesizing insulin polypeptide-oligomer conjugates, and proinsulin polypeptide-oligomer conjugates and methods of synthesizing same |
US20030068361A1 (en) * | 2001-10-09 | 2003-04-10 | Rimona Margalit | Liposome-encapsulated insulin formulations |
WO2003035099A1 (en) * | 2001-10-19 | 2003-05-01 | Eli Lilly And Company | Biphasic mixtures of glp-1 and insulin |
WO2003053460A1 (en) * | 2001-12-19 | 2003-07-03 | Eli Lilly And Company | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
WO2003105768A2 (en) * | 2002-06-13 | 2003-12-24 | Nobex Corporation | Methods of reducing hypoglycemic episodes in the treatment of diabetes mellitus |
US20060258561A1 (en) * | 2003-03-13 | 2006-11-16 | Novo Nordisk A/S | Novel NPH insulin preparations |
PT1633876E (pt) | 2003-06-17 | 2008-11-03 | Sembiosys Genetics Inc | Métodos para a produção de insulina em plantas |
US20050054818A1 (en) * | 2003-07-02 | 2005-03-10 | Brader Mark Laurence | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
DK1648933T3 (da) * | 2003-07-25 | 2009-09-07 | Conjuchem Biotechnologies Inc | Langvarige insulinderivater og fremgangsm der |
WO2005072803A1 (en) * | 2004-01-16 | 2005-08-11 | Biodel, Inc. | Sublingual drug delivery device |
US20080090753A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-17 | Biodel, Inc. | Rapid Acting Injectable Insulin Compositions |
US20080085298A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-10 | Biodel, Inc. | Rapid Mucosal Gel or Film Insulin Compositions |
CA2558835C (en) * | 2004-03-12 | 2011-06-28 | Biodel, Inc. | Rapid acting drug delivery compositions |
US20080096800A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-24 | Biodel, Inc. | Rapid mucosal gel or film insulin compositions |
US20080248999A1 (en) * | 2007-04-04 | 2008-10-09 | Biodel Inc. | Amylin formulations |
EP1773878B1 (en) | 2004-07-19 | 2015-03-04 | Biocon Limited | Insulin-oligomer conjugates, formulations and uses thereof |
US7597884B2 (en) | 2004-08-09 | 2009-10-06 | Alios Biopharma, Inc. | Hyperglycosylated polypeptide variants and methods of use |
EP1789074A4 (en) * | 2004-08-09 | 2009-08-12 | Alios Biopharma Inc | PROTEASE-RESISTANT HYPERGLYCOSYL SYNTHETIC POLYPEPTIDE VARIANTS, ORAL FORMULATIONS AND METHODS OF USING THE SAME |
LT2918286T (lt) * | 2004-10-05 | 2020-04-10 | Novo Nordisk A/S | Farmacinis preparatas, kurio sudėtyje yra kristalinės ir taip pat ištirpintos formos insulino |
JP4874989B2 (ja) | 2004-11-22 | 2012-02-15 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | 可溶性で安定なインスリン含有調合物 |
US7833513B2 (en) | 2004-12-03 | 2010-11-16 | Rhode Island Hospital | Treatment of Alzheimer's Disease |
US7713929B2 (en) * | 2006-04-12 | 2010-05-11 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
US8084420B2 (en) * | 2005-09-29 | 2011-12-27 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
CN100371346C (zh) * | 2005-12-14 | 2008-02-27 | 浙江大学 | 人工合成胰岛素模拟肽及其应用 |
ATE557037T1 (de) * | 2006-02-27 | 2012-05-15 | Novo Nordisk As | Insulin derivate |
JP2009533471A (ja) * | 2006-04-12 | 2009-09-17 | バイオデル, インコーポレイテッド | 即効型および長時間作用型組合せインスリン製剤 |
WO2007121318A2 (en) | 2006-04-12 | 2007-10-25 | Emisphere Technologies, Inc. | Formulations for delivering insulin |
CN101062948B (zh) * | 2006-04-29 | 2010-05-12 | 上海生物泰生命科学研究有限公司 | 单体速效胰岛素及其制法和用途 |
US20080260820A1 (en) * | 2007-04-19 | 2008-10-23 | Gilles Borrelly | Oral dosage formulations of protease-resistant polypeptides |
UA114700C2 (uk) | 2007-10-16 | 2017-07-25 | Біокон Лімітед | Тверда фармацевтична форма для перорального застосування та процес її виготовлення |
CN101951957A (zh) * | 2008-01-04 | 2011-01-19 | 百达尔公司 | 胰岛素释放作为组织的葡萄糖水平的函数的胰岛素制剂 |
WO2010028175A1 (en) | 2008-09-08 | 2010-03-11 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Modulators of aldehyde dehydrogenase activity and methods of use thereof |
KR20110082180A (ko) | 2008-10-28 | 2011-07-18 | 더 보드 오브 트러스티스 오브 더 리랜드 스탠포드 쥬니어 유니버시티 | 알데히드 탈수소효소의 조절자 및 그것의 사용방법 |
US8940690B2 (en) | 2009-01-28 | 2015-01-27 | National Institutes Of Health (Nih) | Synthetic conjugates and uses thereof |
KR101635689B1 (ko) * | 2009-01-28 | 2016-07-01 | 스마트쎌스, 인크. | 제어 약물 전달을 위한 접합체 기재 시스템 |
JP2012517459A (ja) | 2009-02-12 | 2012-08-02 | プロイェクト、デ、ビオメディシナ、シーマ、ソシエダッド、リミターダ | 代謝障害治療のためのカルジオトロフィン1の使用 |
US9060927B2 (en) * | 2009-03-03 | 2015-06-23 | Biodel Inc. | Insulin formulations for rapid uptake |
JP2012520879A (ja) | 2009-03-20 | 2012-09-10 | スマートセルズ・インコーポレイテツド | 末端官能基化コンジュゲートおよびその用途 |
HUP0900482A2 (en) * | 2009-08-03 | 2011-03-28 | Cera Med Kft | Pharmaceutical formulation for oral administration |
AU2011282988A1 (en) | 2010-07-28 | 2013-01-31 | Smartcells, Inc. | Recombinantly expressed insulin polypeptides and uses thereof |
AU2011336896B2 (en) * | 2010-11-24 | 2015-12-24 | Durect Corporation | Biodegradable drug delivery composition |
EA201390796A1 (ru) | 2011-01-20 | 2014-07-30 | Зилэнд Фарма А/С | Применение ацилированного аналога глюкагона |
US10457659B2 (en) | 2011-04-29 | 2019-10-29 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Compositions and methods for increasing proliferation of adult salivary stem cells |
CA2890048C (en) | 2012-12-03 | 2022-05-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | O-glycosylated carboxy terminal portion (ctp) peptide-based insulin and insulin analogues |
WO2014160185A2 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Mitochondrial aldehyde dehydrogenase-2 modulators and methods of use thereof |
AU2014329567B2 (en) | 2013-10-04 | 2019-07-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Glucose-responsive insulin conjugates |
CN105764491A (zh) | 2013-12-09 | 2016-07-13 | 度瑞公司 | 药物活性剂复合物、聚合物复合物,以及包括其的组合物和方法 |
AU2015205621A1 (en) * | 2014-01-09 | 2016-07-14 | Sanofi | Stabilized glycerol free pharmaceutical formulations of insulin analogues and/or insulin derivatives |
KR102351111B1 (ko) | 2014-01-13 | 2022-01-14 | 써멀린 다이어비티즈, 엘엘씨 | 초속효성 인슐린 제형 및 약제학적 전달 시스템 |
AR099569A1 (es) | 2014-02-28 | 2016-08-03 | Novo Nordisk As | Derivados de insulina y los usos médicos de estos |
EP3006045B3 (en) | 2014-10-07 | 2021-03-17 | Cyprumed GmbH | Pharmaceutical formulations for the oral delivery of peptide or protein drugs |
WO2017163159A1 (en) | 2016-03-21 | 2017-09-28 | Wockhardt Limited | Biphasic pharmaceutical composition of insulin human |
PL3474820T3 (pl) | 2017-08-24 | 2024-05-13 | Novo Nordisk A/S | Kompozycje glp-1 i ich zastosowania |
US11110063B2 (en) | 2017-08-25 | 2021-09-07 | MAIA Pharmaceuticals, Inc. | Storage stable sincalide formulations |
EP3727424A4 (en) | 2017-12-18 | 2021-10-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | CONJUGATE-BASED SYSTEMS FOR CONTROLLED INSULIN RELEASE |
US11413352B2 (en) | 2017-12-18 | 2022-08-16 | Merck, Sharp & Dohme LLC | Conjugate based systems for controlled insulin delivery |
CN110063932A (zh) * | 2019-04-12 | 2019-07-30 | 浙江大学 | 一种多肽蛋白类药物的缓释组合物制剂及其制备方法 |
CA3165359A1 (en) | 2020-02-18 | 2021-07-22 | Dorthe Kot Engelund | Glp-1 compositions and uses thereof |
CR20220555A (es) | 2020-03-31 | 2023-01-23 | Protomer Tech Inc | Conjugados para reactividad selectiva a dioles vecinales |
EP4247429A1 (en) | 2020-11-19 | 2023-09-27 | Protomer Technologies Inc. | Aromatic boron-containing compounds and insulin analogs |
TW202409070A (zh) | 2022-05-18 | 2024-03-01 | 美商普羅托莫科技公司 | 芳族含硼化合物及相關胰島素類似物 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2538018A (en) * | 1944-04-04 | 1951-01-16 | Nordisk Insulinlab | Crystalline product of insulin and alkaline protein and process of making it |
US2801953A (en) * | 1952-02-28 | 1957-08-06 | Hoechst Ag | Process of preparing crystallized insulin preparations |
US2849370A (en) * | 1953-06-04 | 1958-08-26 | Novo Terapeutisk Labortorium A | Injectable insulin preparations with protracted effect and process of producing same |
US3060093A (en) * | 1957-07-18 | 1962-10-23 | Nordisk Insulinlab | Slowly acting insulin preparation in crystalline form and method of preparation |
US3868358A (en) * | 1971-04-30 | 1975-02-25 | Lilly Co Eli | Protamine-insulin product |
DE3326473A1 (de) * | 1983-07-22 | 1985-01-31 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Pharmazeutisches mittel zur behandlung des diabetes mellitus |
DE3327709A1 (de) * | 1983-07-29 | 1985-02-07 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Insulin-derivat-kristallsuspensionen, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung |
DK119785D0 (da) * | 1985-03-15 | 1985-03-15 | Nordisk Gentofte | Insulinpraeparat |
PH25772A (en) * | 1985-08-30 | 1991-10-18 | Novo Industri As | Insulin analogues, process for their preparation |
IE62879B1 (en) * | 1987-02-25 | 1995-03-08 | Novo Nordisk As | Novel insulin derivatives |
DE3717370A1 (de) * | 1987-05-22 | 1988-12-01 | Hoechst Ag | Mischkristalle aus insulin und insulinderivaten, verfahren zur herstellung dieser mischkristalle, diese mischkristalle enthaltende pharmazeutische mittel und ihre verwendung zur behandlung von diabetes mellitus |
EP0425482B1 (en) * | 1988-07-20 | 1993-08-18 | Novo Nordisk A/S | Human insulin analogs and preparations containing them |
AU641631B2 (en) * | 1988-12-23 | 1993-09-30 | Novo Nordisk A/S | Human insulin analogues |
PT93057B (pt) * | 1989-02-09 | 1995-12-29 | Lilly Co Eli | Processo para a preparacao de analogos da insulina |
US5514646A (en) * | 1989-02-09 | 1996-05-07 | Chance; Ronald E. | Insulin analogs modified at position 29 of the B chain |
DK72793D0 (da) * | 1993-06-21 | 1993-06-21 | Novo Nordisk As | Nyt produkt |
AU6995794A (en) * | 1993-06-21 | 1995-01-17 | Novo Nordisk A/S | Aspb28 insulin crystals |
US5474978A (en) * | 1994-06-16 | 1995-12-12 | Eli Lilly And Company | Insulin analog formulations |
US5461031A (en) * | 1994-06-16 | 1995-10-24 | Eli Lilly And Company | Monomeric insulin analog formulations |
-
1994
- 1994-06-16 US US08/260,633 patent/US5461031A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-06-24 TW TW083105766A patent/TW347334B/zh not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-01 US US08/458,150 patent/US5650486A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-01 US US08/458,151 patent/US5747642A/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-12 CA CA002151564A patent/CA2151564C/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-13 HU HU9501717A patent/HU218943B/hu unknown
- 1995-06-13 YU YU39795A patent/YU39795A/sh unknown
- 1995-06-14 IE IE950435A patent/IE68852B1/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CH CH01764/95A patent/CH689934A5/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 JP JP14729695A patent/JP3812962B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 PT PT101723A patent/PT101723B/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 NL NL1000565A patent/NL1000565C2/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 FI FI952932A patent/FI118208B/fi not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 BR BR9502797A patent/BR9502797A/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 SE SE9502168A patent/SE509295C2/sv not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 IL IL11415395A patent/IL114153A/xx not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 LU LU88627A patent/LU88627A1/fr unknown
- 1995-06-14 PE PE1995271265A patent/PE34496A1/es not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CO CO95026236A patent/CO4410204A1/es unknown
- 1995-06-14 DE DE19521753A patent/DE19521753B4/de not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 ZA ZA954941A patent/ZA954941B/xx unknown
- 1995-06-14 ES ES09501196A patent/ES2091728B1/es not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-14 PL PL95309100A patent/PL183284B1/pl unknown
- 1995-06-14 GR GR950100228A patent/GR1002494B/el not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 BE BE9500527A patent/BE1009409A5/fr active
- 1995-06-14 CN CNB95106567XA patent/CN1145641C/zh not_active Ceased
- 1995-06-14 DK DK199500676A patent/DK176213B1/da not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 AT AT0101795A patent/AT408611B/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 UA UA95062796A patent/UA34468C2/uk unknown
- 1995-06-14 MY MYPI95001592A patent/MY116831A/en unknown
- 1995-06-14 IT IT95MI001277A patent/IT1276722B1/it active IP Right Grant
- 1995-06-14 KR KR1019950015781A patent/KR100386038B1/ko active IP Right Grant
- 1995-06-14 NO NO19952356A patent/NO320808B1/no not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CZ CZ19951543A patent/CZ294556B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 CH CH02083/99A patent/CH693019A5/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 RO RO95-01141A patent/RO115124B1/ro unknown
- 1995-06-14 GB GB9512105A patent/GB2290294B/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 NZ NZ272360A patent/NZ272360A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-14 FR FR9507095A patent/FR2721215B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 SI SI9500199A patent/SI9500199A/sl not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-11-29 NL NL1004643A patent/NL1004643C2/nl not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3812962B2 (ja) | 単体インスリン類似体製剤 | |
US5547929A (en) | Insulin analog formulations | |
RU2135205C1 (ru) | Инсулиновый препарат, способ получения препарата, способ лечения сахарного диабета | |
US5866538A (en) | Insulin preparations containing NaCl | |
US5834422A (en) | AspB28 insulin compositions | |
US20100069292A1 (en) | Insulin with a basal release profile | |
JP2009242400A (ja) | 炭水化物含有インスリン製剤 | |
AU3253697A (en) | Insulin preparations containing nacl | |
AU711428B2 (en) | Monomeric insulin analog formulations | |
RU2154494C2 (ru) | Комплекс аналога инсулина и протамина, способ получения, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета | |
AU738101B2 (en) | Monomeric insulin analog formulations | |
GB2327424A (en) | Insulin analog protamine complexes | |
Balschmidt et al. | Asp B28 insulin compositions | |
Balschmidt et al. | ASP B28 insulin crystals |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060124 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060421 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20060523 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20060530 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090609 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100609 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110609 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110609 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120609 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120609 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130609 Year of fee payment: 7 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |