JP3805090B2 - Coloring aid for meat food - Google Patents
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Description
【0001】
【発明の属する技術分野】
この発明は、肉食品の改良の分野に属し、特に、肉食品の発色を促進するための新規な発色助剤に関する。
【0002】
【従来の技術とその課題】
ハム、ソーセージなど各種の肉製品においては、商品価値を高め購買意欲を引き起こすために、赤味色(鮮紅色)を促進する添加剤が使用されている。従来より肉製品の発色剤として添加が認められているのは亜硝酸またはその塩である。亜硝酸が添加されると、肉の還元作用により生じた一酸化窒素が肉中のミオグロブリンと反応することによって呈色が起こるものと解されている。一般には、この発色効果を助長する目的でアスコルビン酸またはその塩などの発色助剤が併用されることが多い。
【0003】
しかしながら、最近、亜硝酸(塩)は発ガン物質(ニトロソアミン)を生成する可能性があることが見出され、その使用をできるだけ抑制すべきであると指摘されている。従来より採用されているアスコルビン酸(塩)などの発色助剤では、亜硝酸(塩)の使用量を減少させると所望の発色効果を得ることはできない。そこで、亜硝酸(塩)の使用を可及的に削減させて、効果的に発色を高めることのできる新しいタイプの発色助剤の開発が望まれる。
【0004】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、従来から用いられている亜硝酸(塩)による肉食品の発色処理における効果的な発色助剤について研究を重ねたところ、各種の食用蛋白質由来のペプチドには、肉食品の発色を高める機能があることを発見し、本発明を導き出した。
【0005】
すなわち、本発明は、食用蛋白質を蛋白質分解酵素で分解して得られる分子量3000以下のペプチドを含むことを特徴とする肉食品の発色助剤を提供するものである。本発明の肉食品の発色助剤に含まれる好適なペプチドとしては、乳ペプチド、コーンペプチド、大豆ペプチド、卵白ペプチド、魚肉ペプチド等がある。
【0006】
特に好ましい例は、乳ペプチドであり、乳蛋白質を蛋白質分解酵素で分解した生成物をエタノール水溶液で抽出した後、該抽出液を固液分離した上清から得られるペプチドである。別の好ましい例は、乳蛋白質を蛋白質分解酵素で分解し、次いで乳酸発酵または乳酸添加を行い、必要に応じてアルカリを添加してpH調整を行うことにより得られる乳ペプチドである。
【0007】
【発明の実施の形態】
本発明は、各種の蛋白質(特に食用蛋白質)を蛋白質分解酵素(プロテアーゼ)で分解(加水分解)し低分子化して得られるペプチドを用いると、亜硝酸(塩)の使用量を減少させても肉製品の発色(赤味色ないしは鮮紅色)が認められるということに基づくものである。本発明者が見出した事実によれば、驚くべきことに、このような発色効果が奏されるのは、特定の蛋白質由来のペプチドに限定されるものではなく、さらに特定の蛋白質分解酵素により分解されて得られるペプチドに限られず、多くのペプチドにおいて一般に分子量が3000以下の成分が大部分を占めるようになると亜硝酸(塩)を大幅に減少させても優れた発色効果が発現されることが確認されている。
【0008】
このように本発明の発色助剤を用いると、亜硝酸塩の使用量を激減させても優れた発色効果が発揮される理由は未だ分からないが、蛋白質が蛋白質分解酵素でオリゴペプチドのレベルにまで低分子化されると蛋白質の高次構造がくずされて、肉食品の退色化を促進する酸化を抑制する作用あるいは還元作用が発現されるようになるものと推測される。
【0009】
本発明の発色助剤を構成するペプチドとしては、分子量3000以下の成分を可及的に多く含有するような分子量分布を有するものを用いる。実用上受け入れられるような肉製品の赤味発色効果を得るには、一般的に、分子量3000以下の成分が約60%以上、好ましくは約70%以上を占めるようにする。なお、本発明に関して用いる分子量は、特に言及していない限りHPLC(高速液体クロマトグラフィー)で測定されたものである。
【0010】
本発明の発色助剤を構成するペプチドは、動物性蛋白質または植物性蛋白質を問わず、各種の食用蛋白質が蛋白質分解酵素で分解されることによって得られるものである。好適な動物性蛋白質由来のペプチドの例としては、乳ペプチド、卵白ペプチド、魚肉ペプチド等がある。また、植物性蛋白質由来のペプチドとしては、コーンペプチド、大豆ペプチド等が好適である。
【0011】
前述したように、本発明の発色助剤を構成するペプチドを得るための蛋白質分解酵素は特に限定されるものではない。例えば、好適な蛋白質分解酵素としては、ペプシン、アクチナーゼ、スミチームなどがある。本発明者は、乳蛋白質を加水分解して乳ペプチドを得るには、微生物由来の酵素、たとえば、アルカラーゼおよびフレーバーザイムと称されているものが優れていることを見出しているが、これに限られるものではない。 なお、アルカラーゼは、ノボノルディスク(Novo Nordisk) 社から販売され、Bacillus licheniformisから得られるエンド型プロテアーゼであり、その主要な酵素成分は、サブティリシンA(Subtilisin Carlsberg) であり、活性中心はセリンである。また、フレーバーザイムは、やはりノボノルディスク(Novo Nordisk)社から販売され、Aspergillus oryzae由来のエンド型プロテアーゼとエキソ型プロテアーゼの両活性を有する複合酵素である。
【0012】
酵素による加水分解反応における反応温度や反応時間などの反応条件は用いる酵素によって幾分異なるが、前述したような分子量(分子量分布)のペプチドを得られるように分解反応を実施すればよい。本発明の発色助剤を得るのに好適な酵素の1種であるアルカラーゼやフレーバーザイムの場合、加水分解反応は一般に50〜55℃において2〜24時間行われる。反応は、一般に、高温下に加熱(例えば、90℃で20〜30分間)して酵素を失活させることにより終了させる。
【0013】
本発明の発色助剤として用いられるのに好適なペプチドの例は乳ペプチド、すなわち、乳蛋白質を含有する各種の乳製品を蛋白質分解酵素で分解することによって得られるものである。使用可能な乳製品は、一般に、生乳、牛乳(普通牛乳)、脱脂乳、加工乳、濃縮乳、各種乳飲料などの液状乳であるが、粉末状、固形状、またはゼリー状の乳製品を再溶解または懸濁して得られるような液状物も同様に適用される。例えば、粉状脱脂乳、粉状ホエー等を液状化したものを原料として酵素分解することによっても本発明の発色助剤を得ることができる。
【0014】
乳蛋白質由来の乳ペプチドとしては、乳蛋白質(乳製品)を蛋白質分解酵素で分解した生成物をエタノール水溶液(一般に50%エタノール)で抽出した後、該抽出液を固液分離(例えば、遠心分離)した上清から得られるものが好ましい。このような乳ペプチドは、上述したような分子量3000以下のペプチド成分を多量に含んでいるので特に発色効果が優れている。 また、発色助剤として乳ペプチドを用いる場合、蛋白質分解酵素による分解に次いで、乳酸発酵または乳酸添加を行ってもよい。
【0015】
この乳酸発酵に用いられる乳酸菌は特に限定されるものではなく、市販されているものでもよい。好適な乳酸菌の例としては、Lactobacillus bulgaricusとStreptococcus thermophilusの混合菌体であり、この菌体はハンセン社より凍結乾燥菌体として販売されているものである。乳酸発酵は、pHが4.0 〜5.0 (好ましくはpH約4.5)になるまで実施し、所定のpHになるまで発酵を行わせた後、加熱殺菌(例えば、65℃で30分間)して発酵反応を停止させる。
【0016】
このような乳酸発酵を付加することによって発色効果の優れた発色助剤が得られるが、蛋白質分解酵素による分解生成の後に乳酸発酵の代わりに、乳酸を添加してpHを4.0 〜5.0 (好ましくはpH約4.5)とすることによっても同様に発色効果の優れた発色助剤が得られる。
【0017】
乳酸発酵させたもの、または乳酸を添加したものから得られる発色剤は発色効果の点で優れているが、得られる食品の酸味が幾分強くなる傾向がある。そこで、本発明の好ましい態様に従えば、発色助剤を調製するに当たり、乳酸発酵後または乳酸添加後、アルカリ(例えば、NaOH)を添加してpHを5.5 〜6.5 に調整する。
【0018】
本発明の発色助剤には、上述したような乳ペプチドの他、各種の食用蛋白質由来のペプチドが使用され得る。それらのペプチドは、各食用蛋白質を蛋白質分解酵素で所定の分子量(分子量分布)になるまで低分子化することによって容易に得ることができる。さらに、本発明者は、予め蛋白質分解酵素による処理を受け食品添加剤や栄養補給剤等として市販されている各種のペプチド素材もそのまま使用できることを見出している。
【0019】
本発明の発色助剤として使用可能な市販ペプチドの例としては、コーンペプチドである「ペプチーノ」(日本食品化工株式会社製)、大豆ペプチドである「ハイニュート」(不二製油株式会社製)、卵白ペプチドである「卵白ペプタイドEP−1」(キューピー株式会社製)、魚肉ペプチドである「ペプタイドF−2−30」(仙味エキス株式会社製)などが挙げられる。 本発明の発色助剤は、酵素分解後の液状で供することもできるが、一般的には酵素分解を受けた後(場合によっては、上述したような付加的な処理工程を受けた後)に乾燥された粉状物である。乾燥は、一般に、凍結乾燥またはスプレードライ(噴霧乾燥)による。また、単一のペプチドのみならず、複数種のペプチドを混合して本発明の発色助剤とすることもできる。
【0020】
本発明の発色助剤は、ヘム色素を有する各種の肉食品に適用でき、特に、各種の畜肉および魚肉由来のソーセージ、ハム、ベーコン、コーンビーフ、缶詰などの食品の発色に効果的である。本発明の発色助剤は、一般に、ケーシング前に、亜硝酸塩の他、食品の調整、加工に用いられる各種の添加剤とともに食品に添加されて混合される。
【0021】
本発明の発色助剤を用いると、亜硝酸塩の使用を完全になくすことはできないが、現在一般的に実施されている亜硝酸塩の使用量(75ppm 〜85ppm)の約1/2〜1/5程度で充分な赤味色の発色が確保される。なお、亜硝酸塩を含有する天然の物質(例えば、ダイコンの抽出液)を本発明の発色助剤とともに食品に添加すると、従来より用いられている合成の亜硝酸塩化合物を全く使用しなくても優れた発色が得られることも見出されている。
【0022】
【実施例】
本発明の特徴をさらに明らかにするため、以下に実施例に沿って本発明を説明するが、本発明はこの実施例によって制限されるものではない。
〔実施例1:乳ペプチドによる発色試験〕
試料の調製
乳蛋白質原料として脱脂乳を用い、次に示すように乳ペプチド由来の試料(発色助剤)を調製した。
(1)SFC400D:脱脂乳を限外濾過により4倍濃度に濃縮したものを凍結乾燥した後、粉体化した粉末。
(2)SFC400D分解物の上清:上記SFC400Dに蛋白質分解酵素として0.02%(V/V)アルカラーゼおよび0.042 %(W/V)フレーバザイム(共にノボノルディスク社製)を添加し、攪拌しながら50℃で酵素反応を行い、5時間後、90℃で20分間加熱し、酵素を失活させた後、凍結乾燥し粉体化してSF400D分解物を得た。この分解物を50%エタノール水溶液で抽出し、抽出液を遠心操作により分離して上澄み液を凍結乾燥により粉体化した粉末。
なお、上記上澄み液(上清)をゲル濾過により4つに分けた画分のうちの2つ(画分1および画分2)を凍結乾燥により粉体化して得た試料についても試験を行った。
【0023】
被検ソーセージの製造
肉(豚もも肉または豚肩肉)を直径2mmのチョッパーで挽肉にしてフードプロセッサーで材料を混ぜ合わせてから、ビニール袋に入れ真空シールを行った後、豚もも肉混合物については75℃で20分間、また、豚肩肉混合物については75℃で30分間ボイルした。4℃で1夜放置した後、後述のように色差計による色度測定を行った。全体の配合組成は以下に示すとおりである。
豚もも肉または豚肩肉 100グラム
食塩 2グラム
水(氷) 15グラム
亜硝酸ナトリウム 17 ppm
試料(発色助剤) 10グラム
【0024】
発色試験
以上のようにして得られたソーセージを、ミノルタ製色差計CM−5081(主光源D65、視野10”)を用いて色彩測定を行った。その結果を表1および表2に示す。表1および表2は、JIS Z8729においても採用されているL・a・b表色系に沿って色度を示したものであり、このうちaが赤色の色度(色相と彩度)を表し、この値が大きくなるに従って赤色が鮮やかになる。なお、表において、対照(1)とは、上記の試料のいずれも添加せず亜硝酸ナトリウム濃度を17 ppmとして同様に調製したソーセージ、また、対照(2)とは、上記のいずれの試料も添加しないが、亜硝酸ナトリウムの濃度を75 ppmとして同様に調製したソーセージについての測定結果である。
【0025】
【表1】
【0026】
発色助剤として用いた各試料の分子量を測定した。測定はHPLCを用いて行ない、カラムとしてTSK-GEL G2000SWXL (東ソー社製)を使用した。試料はタンパク濃度が1mg/ml となるように移動相に溶解した後、0.45μm のフィルターで濾過した。移動相は、0.1 %TFAを含む45%アセトニトリルを用いた。測定は室温で行ない、流速0.5ml/分、検出器として紫外吸光光度計を用い215nm における吸光度を検出した。分子量のマーカーとして、インシュリン(MW:5749.5)、インシュリンchain B フラグメント22-30(MW:1086.3)、トリプトファン(MW:204.23) を用い、分子量分布検量線を作成し、分子量5000、3000、1500、500 、200 の溶出時間を求めた。その結果を図1および表2に示す。なお、表2には、後記の実施例2および実施例3において用いた試料の分子量分布も併せて示している。
【0027】
【表2】
【0028】
以上の結果から理解されるように、乳蛋白質を酵素分解した分解物の抽出液上清から得られる乳ペプチドを添加することによってaの値が高くなっており、ソーセージの赤色発色が増加していることが認められる。これらの乳ペプチドはいずれも分子量が実質的に3000以下の成分から構成されており、亜硝酸ナトリウムを従来より使用されているような濃度の1/4 〜1/5 にしても、従来の高濃度の亜硝酸ナトリウムを用いた対照と同等以上の発色効果が発揮されていることが分かる。
【0029】
〔実施例2:各種ペプチドによる発色試験〕
市販されている各種の食用蛋白質由来のペプチドを用いて発色試験を行った。
1)大豆ペプチド:不二製油(株)製「ハイニュートDL」および「ハイニュートR」を使用した。製品カタログによれば、これらのペプチドは、脱脂豆乳を酵素分解することによって得られたオリゴペプチドである。
2)コーンペプチド:日本食品加工(株)製「日食ペプチーノ」を使用した。製品カタログによれば、このペプチドは、とうもろこし蛋白(コーングルテンミール)をエンド型プロテアーゼにより加水分解することによって得られたものであり、蛋白質含有量90%以上である。
3)卵白ペプチド:キューピー(株)製「卵白ペプタイドEP−1」を使用した。製品カタログによれば、このペプチドは鶏卵白を酵素で加水分解することによって得られた平均分子量約1100の非熱凝固性ペプチドである。
【0030】
被検ソーセージを製造するために、豚肩肉(挽肉)100gに、水(氷)15g 、食塩2g、亜硝酸ナトリウム40ppm 、アスコルビン酸ナトリウム200ppm、各試料(ペプチド)5gを添加し、フードプロセッサーで材料を混合した後、三角ビニールに入れて真空シールを行った。4℃で3時間放置した後、75℃で30分間ボイルし、4℃で1夜放置した後、実施例1と同様に色差計による測定を行った。
【0031】
色差計による測定結果を表3に、またHPLCにより各ペプチドの分子量を測定した場合のクロマトグラフを図2、およびその分子量分布を表2に示す。なお、対照(1)とは、亜硝酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウムおよび試料(ペプチド)を添加せずに同様に製造したソーセージ、また、対照(2)とは、亜硝酸ナトリウムおよびアスコルビン酸ナトリウムを添加しているが試料(ペプチド)を添加せずに同様に製造したソーセージについての測定結果である。
【0032】
【表3】
【0033】
以上の結果から理解されるように、食用蛋白質由来の各種ペプチドを使用すると色差計測定におけるa値が高くなっており、赤味色の発色が向上している。これらのペプチドは、いずれも分子量3000以下の成分が大部分を占めていることが認められる。
【0034】
〔実施例3:各種酵素分解による乳ペプチドの発色試験〕
各種の蛋白質分解酵素を用いて、酵素の違いが発色効果に影響を及ぼすか否かを調べた。乳蛋白質としてカゼインナトリウムを使用し、酵素としてアルカラーゼ、フレーバーザイム、アクチナーゼ、スミチーム、ペプシン、トリプシン、を用いて加水分解を行うことにより以下のように乳ペプチドから成る発色助剤を調製した。
【0035】
先ず、65℃の熱水にカゼインナトリウムを溶解し、溶解後、50℃まで冷却して各酵素を添加した(ペプシンはpHを調製してから添加した)。50℃において所定時間、酵素反応を行った後、90℃で20分間加熱して酵素を失活させ、凍結乾燥により粉体化して発色助剤試料とした。
被検ソーセージは、豚赤身100g、水(氷)15g 、食塩2g、亜硝酸ナトリウム40ppm 、アスコルビン酸ナトリウム200ppm、試料(乳ペプチド)5gを混合し、実施例2と同様の操作により製造した。
【0036】
実施例1と同様に色差計による色度測定を行った結果を表4に示す。さらに、各試料(乳ペプチド)のHPLCによる分子量分布を表3に示し、また、そのクロマトグラムを図3に示す。なお、表4において、対照(1)とは、亜硝酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウムおよび試料(乳ペプチド)を添加せずに同様に製造したソーセージ、また、対照(2)とは、亜硝酸ナトリウムおよびアスコルビン酸ナトリウムを添加しているが試料(乳ペプチド)を添加せずに同様に製造したソーセージについての測定結果である。さらに、表4には市販ソーセージについての測定結果も併せて示す。
【0037】
【表4】
【0038】
以上の結果から、蛋白質分解酵素の種類を問わず、酵素分解による低分子化により得られるペプチドを使用すると、a値の向上が認められ赤色発色効果があることが認められる。また、分解反応時間を長くする等により分解が進み、特に3000以下の分子量の割合が多くなったペプチドを使用すると赤色発色が強くなることが認められる。
【0039】
〔実施例4:乳酸発酵または乳酸添加を付加した乳ペプチドの発色試験〕
乳蛋白質原料として、脱脂乳を限外濾過により4倍濃度に濃縮したものを用い、酵素分解の後に、乳酸発酵または乳酸添加を行い、次に示すようなAからEの発色助剤試料を調製した。
A:濃縮脱脂乳に0.02%(V/V)アルカラーゼおよび0.042 %(W/V)フレーバザイム(共にノボノルディスク社製)を添加し、攪拌しながら50℃で酵素反応を行った。5時間後、90℃で20分間加熱し、酵素を失活させた。次に、乳酸菌(Streptcoccus thermophilus およびLactobacillus bulgaricus)を0.005 %(W/V)を接種し、45℃でpH4.5 になるまで発酵を行った。65℃で30分間加熱して発酵を停止した後、凍結乾燥を行った。得られた乾燥物を細かく粉砕した。
B:濃縮脱脂乳に0.02%(V/V)アルカラーゼおよび0.042 %(W/V)フレーバザイム(共にノボノルディスク社製)を添加し、攪拌しながら50℃で酵素反応を行った。5時間後、90℃で20分間加熱し、酵素を失活させた。次に、pH4.5 になるまで乳酸を添加した後、凍結乾燥を行った。得られた乾燥物を細かく粉砕した。
C:濃縮脱脂乳に0.02%(V/V)アルカラーゼおよび0.042 %(W/V)フレーバザイム(共にノボノルディスク社製)を添加し、攪拌しながら50℃で酵素反応を行った。5時間後、90℃で20分間加熱し、酵素を失活させた。次に、乳酸菌(Streptcoccus thermophilus およびLactobacillus bulgaricus)を0.005 %(W/V)を接種し、45℃でpH4.5 になるまで発酵を行った。65℃で30分間加熱して発酵を停止した後、スプレードライを行い、粉体を得た。
D:濃縮脱脂乳に0.02%(V/V)アルカラーゼおよび0.042 %(W/V)フレーバザイム(共にノボノルディスク社製)を添加し、攪拌しながら50℃で酵素反応を行った。5時間後、90℃で20分間加熱し、酵素を失活させた。次に、乳酸菌(Streptcoccus thermophilus およびLactobacillus bulgaricus)を0.005 %(W/V)を接種し、45℃でpH4.5 になるまで発酵を行った。発酵物を1N NaOHでpH5.5 に調整した後、スプレードライを行い、粉体を得た。
E:濃縮脱脂乳に0.02%(V/V)アルカラーゼおよび0.042 %(W/V)フレーバザイム(共にノボノルディスク社製)を添加し、攪拌しながら50℃で酵素反応を行った。5時間後、90℃で20分間加熱し、酵素を失活させた。次に、乳酸菌(Streptcoccus thermophilus およびLactobacillus bulgaricus)を0.005 %(W/V)を接種し、45℃でpH4.5 になるまで発酵を行った。発酵物を1N NaOHでpH6.5 に調整した後、スプレードライを行い、粉体を得た。
【0040】
豚もも肉100g、食塩2g、水(氷)15g、亜硝酸ナトリウム17ppm および各発色助剤試料10グラムを混合して実施例1と同様に被検ソーセージを製造し色差計による測定を行ったところ、次のa値を得た:試料A(9.7)、試料B(9.8)、試料C(9.5)、試料D(9.2)、試料E(8.4)。
ちなみに、上記試料のいずれも添加せず、亜硝酸ナトリウムの濃度を75ppm として製造した被検ソーセージのa値は7.6 であった。したがって、乳酸発酵または乳酸添加を付加することによって発色効果が高められていることが分かる。
【0041】
【発明の効果】
本発明の発色助剤を用いれば、有害性が指摘されている亜硝酸(塩)の使用を可及的に減少させながら肉食品の赤味色発色を確保することができる。しかも本発明の発色助剤は、それ自身が食用蛋白質由来の栄養成分や機能成分を含有している点において肉食品の付加価値を高めるという利点もある。
【図面の簡単な説明】
【図1】本発明に従う発色助剤として実施例1で用いた試料の分子量分布を示すHPLCによるクロマトグラムである。
【図2】本発明に従う発色助剤として実施例2で用いた試料の分子量分布を示すHPLCによるクロマトグラムである。
【図3】本発明に従う発色助剤として実施例3で用いた試料の分子量分布を示すHPLCによるクロマトグラムである。なお、図中、矢印で示す数値はマーカーによる分子量値である。[0001]
BACKGROUND OF THE INVENTION
The present invention belongs to the field of improvement of meat foods, and particularly relates to a novel color development aid for promoting the color development of meat foods.
[0002]
[Prior art and its problems]
In various meat products such as ham and sausage, an additive that promotes a reddish color (bright red) is used in order to increase commercial value and cause purchase motivation. Nitrous acid or a salt thereof has been accepted as a color former for meat products. It is understood that when nitrous acid is added, coloration occurs when nitric oxide produced by the reducing action of meat reacts with myoglobulin in the meat. In general, a coloring aid such as ascorbic acid or a salt thereof is often used in combination for the purpose of promoting this coloring effect.
[0003]
Recently, however, nitrous acid (salt) has been found to produce carcinogens (nitrosamines) and it has been pointed out that its use should be minimized. With color formers such as ascorbic acid (salt) that have been conventionally used, the desired color development effect cannot be obtained if the amount of nitrous acid (salt) used is reduced. Therefore, it is desired to develop a new type of coloring aid that can effectively reduce coloration by reducing the use of nitrous acid (salt) as much as possible.
[0004]
[Means for Solving the Problems]
The present inventor has conducted research on an effective color developing aid for coloring food products using nitrous acid (salt), which has been conventionally used. The present invention has been derived by discovering that there is a function to enhance the above.
[0005]
That is, the present invention provides a coloring aid for meat foods characterized by containing a peptide having a molecular weight of 3000 or less obtained by degrading an edible protein with a proteolytic enzyme. Suitable peptides contained in the coloring aid for meat foods of the present invention include milk peptides, corn peptides, soy peptides, egg white peptides, fish peptides and the like.
[0006]
A particularly preferred example is a milk peptide, which is a peptide obtained from a supernatant obtained by solid-liquid separation of an extract obtained by extracting a product obtained by decomposing milk protein with a proteolytic enzyme with an aqueous ethanol solution. Another preferred example is a milk peptide obtained by degrading milk protein with a proteolytic enzyme, followed by lactic acid fermentation or addition of lactic acid, and adjusting the pH by adding an alkali as necessary.
[0007]
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
In the present invention, when peptides obtained by degrading (hydrolyzing) various proteins (especially edible proteins) with proteases (proteases) to lower the molecular weight are used, the amount of nitrous acid (salt) used can be reduced. This is based on the fact that the meat products are colored (reddish or bright red). Surprisingly, according to the facts found by the present inventors, such a coloring effect is not limited to a peptide derived from a specific protein, but is further degraded by a specific proteolytic enzyme. In many peptides, when the majority of the components with a molecular weight of 3000 or less generally occupy most of the peptides, the excellent coloring effect can be expressed even if nitrous acid (salt) is greatly reduced. It has been confirmed.
[0008]
As described above, when the coloring aid of the present invention is used, the reason why an excellent coloring effect is exerted even if the amount of nitrite used is drastically reduced is still unknown, but the protein is reduced to the level of oligopeptides by proteolytic enzymes. It is presumed that when the molecular weight is lowered, the higher-order structure of the protein is destroyed, and the action of suppressing oxidation or reducing action that promotes fading of meat foods is expressed.
[0009]
As the peptide constituting the coloring aid of the present invention, a peptide having a molecular weight distribution that contains as much as possible a component having a molecular weight of 3000 or less is used. In order to obtain a reddish coloring effect of meat products that are acceptable in practical use, generally, components having a molecular weight of 3000 or less occupy about 60% or more, preferably about 70% or more. The molecular weight used in the present invention is measured by HPLC (High Performance Liquid Chromatography) unless otherwise specified.
[0010]
The peptides constituting the color-developing aid of the present invention are obtained by degrading various edible proteins with proteolytic enzymes, whether animal proteins or plant proteins. Examples of suitable animal protein-derived peptides include milk peptides, egg white peptides, fish meat peptides and the like. Moreover, as a peptide derived from a vegetable protein, a corn peptide, a soybean peptide, etc. are suitable.
[0011]
As described above, the proteolytic enzyme for obtaining the peptide constituting the color development aid of the present invention is not particularly limited. For example, suitable proteolytic enzymes include pepsin, actinase, sumiteam and the like. The present inventor has found that enzymes derived from microorganisms, for example, so-called alcalase and flavorzyme, are excellent for hydrolyzing milk proteins to obtain milk peptides. It is not something that can be done. Alcalase is an endo-type protease sold by Novo Nordisk and obtained from Bacillus licheniformis . Its main enzyme component is subtilisin A (Subtilisin Carlsberg), and the active center is serine. . Flavorzyme is a complex enzyme that is also sold by Novo Nordisk and has both endo- and exo-protease activities derived from Aspergillus oryzae .
[0012]
The reaction conditions such as reaction temperature and reaction time in the hydrolysis reaction with the enzyme are somewhat different depending on the enzyme to be used, but the decomposition reaction may be carried out so as to obtain the peptide having the molecular weight (molecular weight distribution) as described above. In the case of alcalase or flavorzyme, which is one of the enzymes suitable for obtaining the coloring aid of the present invention, the hydrolysis reaction is generally carried out at 50 to 55 ° C. for 2 to 24 hours. The reaction is generally terminated by heating at high temperature (eg, 90 ° C. for 20-30 minutes) to inactivate the enzyme.
[0013]
Examples of peptides suitable for use as the color former of the present invention are those obtained by proteolytic degradation of various dairy products containing milk peptides, that is, milk proteins. Usable dairy products are generally liquid milk such as raw milk, cow's milk (ordinary milk), skim milk, processed milk, concentrated milk, various milk drinks, etc., but powdered, solid or jelly-like dairy products can be used. Liquid substances such as those obtained by redissolving or suspending are similarly applied. For example, the color-developing aid of the present invention can also be obtained by enzymatic degradation using a liquefied powdered skim milk, powdered whey or the like as a raw material.
[0014]
For milk proteins derived from milk proteins, products obtained by degrading milk proteins (dairy products) with proteolytic enzymes are extracted with an aqueous ethanol solution (generally 50% ethanol), and then the extract is subjected to solid-liquid separation (for example, centrifugation) ) Obtained from the obtained supernatant is preferred. Such a milk peptide is particularly excellent in coloring effect since it contains a large amount of peptide components having a molecular weight of 3000 or less as described above. In addition, when a milk peptide is used as a coloring aid, lactic acid fermentation or addition of lactic acid may be performed subsequent to degradation by a proteolytic enzyme.
[0015]
The lactic acid bacteria used for the lactic acid fermentation are not particularly limited, and may be commercially available. An example of a suitable lactic acid bacterium is a mixed cell of Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus , which is sold as a freeze-dried cell by Hansen. Lactic acid fermentation is carried out until the pH reaches 4.0 to 5.0 (preferably about pH 4.5), fermented until a predetermined pH is reached, and then subjected to a heat sterilization (for example, at 65 ° C. for 30 minutes) for a fermentation reaction. Stop.
[0016]
By adding such lactic acid fermentation, a coloring aid having an excellent coloring effect can be obtained, but instead of lactic acid fermentation after degradation by proteolytic enzyme, lactic acid is added to adjust the pH to 4.0 to 5.0 (preferably By setting the pH to about 4.5), a coloring aid having an excellent coloring effect can be obtained.
[0017]
Coloring agents obtained from lactic acid-fermented or lactic acid-added ones are excellent in terms of coloring effect, but the resulting food tends to have a somewhat stronger acidity. Therefore, according to a preferred embodiment of the present invention, in preparing the color forming aid, after lactic acid fermentation or after addition of lactic acid, an alkali (for example, NaOH) is added to adjust the pH to 5.5 to 6.5.
[0018]
In addition to the above-described milk peptides, peptides derived from various edible proteins can be used for the color developing aid of the present invention. Such peptides can be easily obtained by reducing the molecular weight of each edible protein to a predetermined molecular weight (molecular weight distribution) with a proteolytic enzyme. Furthermore, the present inventor has found that various peptide materials that have been previously treated with proteolytic enzymes and marketed as food additives, nutritional supplements, and the like can be used as they are.
[0019]
Examples of commercially available peptides that can be used as the color developing aid of the present invention include corn peptide “Peptino” (manufactured by Nippon Shokuhin Kako Co., Ltd.), soybean peptide “High New” (manufactured by Fuji Oil Co., Ltd.), Examples thereof include “egg white peptide EP-1” (manufactured by Kewpie Co., Ltd.) that is an egg white peptide, “peptide F-2-30” (manufactured by Senmi Extract Co., Ltd.) that is a fish peptide. The coloring aid of the present invention can be provided in a liquid state after enzymatic degradation, but generally after enzymatic degradation (in some cases after undergoing additional processing steps as described above). It is a dried powder. Drying is generally by freeze drying or spray drying (spray drying). Further, not only a single peptide, but also a plurality of types of peptides can be mixed to form the coloring aid of the present invention.
[0020]
The coloring aid of the present invention can be applied to various meat foods having a heme pigment, and is particularly effective for coloring foods such as sausages, ham, bacon, corn beef and canned foods derived from various livestock and fish meat. In general, the coloring aid of the present invention is added to and mixed with nitrite and various additives used for food preparation and processing before casing.
[0021]
Although the use of the nitrite cannot be completely eliminated by using the color forming aid of the present invention, it is about 1/2 to 1/5 of the amount of nitrite currently used (75 ppm to 85 ppm). Sufficient reddish color development is ensured by the degree. In addition, when a natural substance containing nitrite (for example, daikon extract) is added to the food together with the coloring aid of the present invention, it is excellent without using any synthetic nitrite compound conventionally used. It has also been found that a good color can be obtained.
[0022]
【Example】
In order to further clarify the features of the present invention, the present invention will be described below with reference to examples. However, the present invention is not limited to these examples.
[Example 1: Color development test using milk peptide]
Preparation of sample Using skim milk as a milk protein raw material, a milk peptide-derived sample (coloring aid) was prepared as follows.
(1) SFC400D: Powdered powder obtained by freeze-drying skim milk concentrated to 4 times concentration by ultrafiltration.
(2) Supernatant of SFC400D degradation product: 0.02% (V / V) alcalase and 0.042% (W / V) flavorzyme (both manufactured by Novo Nordisk) were added to SFC400D as proteolytic enzymes while stirring. The enzyme reaction was performed at 50 ° C., and after 5 hours, the enzyme was deactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes, and then freeze-dried and powdered to obtain a SF400D decomposition product. This decomposition product is extracted with a 50% aqueous ethanol solution, the extract is separated by centrifugation, and the supernatant is pulverized by freeze-drying.
In addition, a test was also conducted on a sample obtained by pulverizing two of the fractions obtained by gel filtration of the supernatant (supernatant) (
[0023]
Manufacture of test sausages <br/> Meat (pork thigh or pork shoulder) is ground with a chopper with a diameter of 2 mm, mixed with a food processor, put into a plastic bag, vacuum sealed, and then pork thigh The mixture was boiled at 75 ° C. for 20 minutes, and the pork shoulder mixture was boiled at 75 ° C. for 30 minutes. After being allowed to stand at 4 ° C. overnight, chromaticity was measured with a color difference meter as described below. The overall blending composition is as shown below.
Pork thigh or pork shoulder 100 grams salt 2 grams water (ice) 15 grams sodium nitrite 17 ppm
Sample (coloring aid) 10 grams [0024]
Color development test The sausages obtained as described above were subjected to color measurement using a Minolta color difference meter CM-5081 (main light source D65,
[0025]
[Table 1]
[0026]
The molecular weight of each sample used as a coloring aid was measured. The measurement was performed using HPLC, and TSK-GEL G2000SWXL (manufactured by Tosoh Corporation) was used as a column. The sample was dissolved in the mobile phase so that the protein concentration was 1 mg / ml, and then filtered through a 0.45 μm filter. The mobile phase used was 45% acetonitrile containing 0.1% TFA. The measurement was performed at room temperature, and the absorbance at 215 nm was detected using an ultraviolet absorptiometer as a detector at a flow rate of 0.5 ml / min. As molecular weight markers, insulin (MW: 5749.5), insulin chain B fragment 22-30 (MW: 1086.3), tryptophan (MW: 204.23) were used, and a molecular weight distribution calibration curve was prepared.
[0027]
[Table 2]
[0028]
As understood from the above results, the value of a is increased by adding milk peptide obtained from the extract supernatant of the degradation product obtained by enzymatic degradation of milk protein, and the red color development of sausage is increased. It is recognized that All of these milk peptides are composed of components having a molecular weight of substantially 3000 or less, and even if sodium nitrite is used at a concentration of 1/4 to 1/5 that is conventionally used, It can be seen that the color developing effect is equivalent to or better than that of the control using the sodium nitrite at the concentration.
[0029]
[Example 2: Color development test with various peptides]
A color development test was carried out using commercially available peptides derived from various edible proteins.
1) Soy peptide: “High New DL” and “High New R” manufactured by Fuji Oil Co., Ltd. were used. According to the product catalog, these peptides are oligopeptides obtained by enzymatic degradation of defatted soymilk.
2) Corn peptide: Nippon Shokuhin Kogyo Co., Ltd. “Eclipse Peptino” was used. According to the product catalog, this peptide is obtained by hydrolyzing corn protein (corn gluten meal) with an endo-type protease, and has a protein content of 90% or more.
3) Egg white peptide: “Egg White Peptide EP-1” manufactured by Kewpie Co., Ltd. was used. According to the product catalog, this peptide is a non-thermocoagulable peptide having an average molecular weight of about 1100 obtained by hydrolyzing chicken egg white with an enzyme.
[0030]
To produce test sausage, add 100g of pork shoulder meat (ground meat) to 15g of water (ice), 2g of salt, 40ppm of sodium nitrite, 200ppm of sodium ascorbate, and 5g of each sample (peptide). After mixing the materials, they were placed in triangular vinyl and vacuum sealed. After standing at 4 ° C. for 3 hours, boiled at 75 ° C. for 30 minutes, left at 4 ° C. overnight, and then measured by a color difference meter in the same manner as in Example 1.
[0031]
Table 3 shows the results of measurement using a color difference meter, FIG. 2 shows the chromatograph when the molecular weight of each peptide was measured by HPLC, and Table 2 shows the molecular weight distribution. Control (1) is sausage prepared in the same manner without adding sodium nitrite, sodium ascorbate and sample (peptide). Control (2) is sodium nitrite and sodium ascorbate. However, it is a measurement result about the sausage manufactured similarly without adding a sample (peptide).
[0032]
[Table 3]
[0033]
As understood from the above results, when various peptides derived from edible proteins are used, the a value in the color difference measurement is increased, and the reddish color development is improved. As for these peptides, it is recognized that the components with molecular weight below 3000 occupy most.
[0034]
[Example 3: Color development test of milk peptide by various enzymatic degradations]
Using various types of proteolytic enzymes, it was investigated whether or not the difference in enzymes affects the coloring effect. By using casein sodium as the milk protein and hydrolysis using alcalase, flavorzyme, actinase, sumiteam, pepsin, and trypsin as enzymes, a color-development assistant comprising a milk peptide was prepared as follows.
[0035]
First, sodium caseinate was dissolved in hot water at 65 ° C., and after dissolution, each enzyme was added after cooling to 50 ° C. (pepsin was added after adjusting the pH). After carrying out the enzyme reaction at 50 ° C. for a predetermined time, the enzyme was inactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes, and pulverized by freeze-drying to obtain a color developing aid sample.
The test sausage was produced by the same operation as in Example 2 except that 100 g of pork lean, 15 g of water (ice), 2 g of sodium chloride, 40 ppm of sodium nitrite, 200 ppm of sodium ascorbate, and 5 g of a sample (milk peptide) were mixed.
[0036]
The results of chromaticity measurement using a color difference meter as in Example 1 are shown in Table 4. Furthermore, the molecular weight distribution by HPLC of each sample (milk peptide) is shown in Table 3, and the chromatogram is shown in FIG. In Table 4, the control (1) is sausage prepared in the same manner without adding sodium nitrite, sodium ascorbate and the sample (milk peptide), and the control (2) is sodium nitrite and It is a measurement result about the sausage manufactured similarly without adding a sample (milk peptide), although adding sodium ascorbate. Furthermore, Table 4 also shows the measurement results for commercially available sausages.
[0037]
[Table 4]
[0038]
From the above results, it is recognized that the use of a peptide obtained by reducing the molecular weight by enzymatic degradation, regardless of the type of proteolytic enzyme, improves the a value and has a red color developing effect. In addition, it is recognized that the decomposition progresses by extending the decomposition reaction time and the like, and particularly when a peptide having a high molecular weight ratio of 3000 or less is used, red color development becomes stronger.
[0039]
[Example 4: Color development test of milk peptide added with lactic acid fermentation or lactic acid addition]
A milk protein raw material obtained by concentrating skim milk to a 4-fold concentration by ultrafiltration is used, and after enzymatic degradation, lactic acid fermentation or addition of lactic acid is performed to prepare A to E coloring aid samples as shown below did.
A: 0.02% (V / V) alcalase and 0.042% (W / V) flavorzyme (both manufactured by Novo Nordisk) were added to the concentrated skim milk, and an enzyme reaction was performed at 50 ° C. with stirring. After 5 hours, the enzyme was inactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes. Next, lactic acid bacteria ( Streptcoccus thermophilus and Lactobacillus bulgaricus ) were inoculated with 0.005% (W / V) and fermented at 45 ° C. until pH 4.5 was reached. The fermentation was stopped by heating at 65 ° C. for 30 minutes, and then lyophilized. The obtained dried product was finely pulverized.
B: 0.02% (V / V) alcalase and 0.042% (W / V) flavorzyme (both manufactured by Novo Nordisk) were added to the concentrated skim milk, and an enzyme reaction was performed at 50 ° C. with stirring. After 5 hours, the enzyme was inactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes. Next, lactic acid was added until the pH reached 4.5, followed by lyophilization. The obtained dried product was finely pulverized.
C: 0.02% (V / V) alcalase and 0.042% (W / V) flavorzyme (both manufactured by Novo Nordisk) were added to the concentrated skim milk, and the enzyme reaction was carried out at 50 ° C. with stirring. After 5 hours, the enzyme was inactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes. Next, lactic acid bacteria ( Streptcoccus thermophilus and Lactobacillus bulgaricus ) were inoculated with 0.005% (W / V) and fermented at 45 ° C. until pH 4.5 was reached. After heating at 65 ° C. for 30 minutes to stop fermentation, spray drying was performed to obtain a powder.
D: 0.02% (V / V) alcalase and 0.042% (W / V) flavorzyme (both manufactured by Novo Nordisk) were added to the concentrated skim milk, and an enzyme reaction was performed at 50 ° C. with stirring. After 5 hours, the enzyme was inactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes. Next, lactic acid bacteria ( Streptcoccus thermophilus and Lactobacillus bulgaricus ) were inoculated with 0.005% (W / V) and fermented at 45 ° C. until pH 4.5 was reached. After adjusting the fermented product to pH 5.5 with 1N NaOH, spray drying was performed to obtain a powder.
E: 0.02% (V / V) alcalase and 0.042% (W / V) flavorzyme (both manufactured by Novo Nordisk) were added to the concentrated skim milk, and an enzyme reaction was performed at 50 ° C. with stirring. After 5 hours, the enzyme was inactivated by heating at 90 ° C. for 20 minutes. Next, lactic acid bacteria ( Streptcoccus thermophilus and Lactobacillus bulgaricus ) were inoculated with 0.005% (W / V) and fermented at 45 ° C. until pH 4.5 was reached. The fermented product was adjusted to pH 6.5 with 1N NaOH, and then spray-dried to obtain a powder.
[0040]
Pork thigh 100g, salt 2g, water (ice) 15g, sodium nitrite 17ppm and 10g of each coloring aid sample were mixed and the test sausage was produced in the same manner as in Example 1 and measured with a color difference meter. The following a values were obtained: Sample A (9.7), Sample B (9.8), Sample C (9.5), Sample D (9.2), Sample E (8.4).
By the way, none of the above samples were added, and the a value of the sample sausage produced with sodium nitrite concentration of 75 ppm was 7.6. Therefore, it can be seen that the coloring effect is enhanced by adding lactic acid fermentation or addition of lactic acid.
[0041]
【The invention's effect】
By using the coloring aid of the present invention, it is possible to ensure the reddish color development of meat food while reducing the use of nitrous acid (salt), which has been pointed out to be harmful, as much as possible. Moreover, the coloring aid of the present invention also has the advantage of increasing the added value of meat food in that it itself contains nutritional components and functional components derived from edible proteins.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a chromatogram by HPLC showing the molecular weight distribution of a sample used in Example 1 as a coloring aid according to the present invention.
FIG. 2 is a HPLC chromatogram showing the molecular weight distribution of a sample used in Example 2 as a color forming aid according to the present invention.
FIG. 3 is a HPLC chromatogram showing the molecular weight distribution of a sample used in Example 3 as a color forming aid according to the present invention. In addition, the numerical value shown by the arrow in a figure is a molecular weight value by a marker.
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