JP3782507B2 - Novel N-methylproline derivative - Google Patents

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は新規なペプチド化合物に関する。本発明の化合物は細胞成長抑制作用及び／又は抗新生物作用を有しており、抗癌、抗腫瘍剤として有用である。
【０００２】
【従来の技術】
海の軟体動物であるアメフラシ類縁のタツナミガイ（Dolabella auricularia）から細胞生長抑制作用及び／又は抗新生物作用を有する化合物の単離は今までにいくつかなされており、それらの化合物はドラスタチン１〜１５と称されている。このうち、ドラスタチン１０は、１９８７年ペチット等によりインド洋産のタツナミガイから抽出された下記構造式をもつペンタペプチドで、既知の化合物の中で最強の細胞生長抑制作用を有する化合物として知られている（ペチット等，ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソサイアティー，１０９巻，６８８３頁，１９８７年及び特開平２−１６７２７８号公報参照）。
【０００３】
【化４】

【０００４】
また、最近になって、ドラスタチン１０の全合成についても報告された（アメリカ特許第４９７８７４４号明細書参照）。
【０００５】
一方、本発明者らは先に、ある種のドラスタチン１０誘導体について開示した（国際公開ＷＯ９３／０３０５４号パンフレット参照）。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題及び課題を解決するための手段】
今回、本発明者らは、ドラスタチン１０のＮ末端のドラバリン（Ｎ，Ｎ−ジメチルバリン）をＮ−メチルプロリンに代替したある種のドラスタチン１０誘導体が、ドラスタチン１０に比べてはるかに強い抗腫瘍作用を有することを見いだした。
【０００７】
しかして、本発明によれば、一般式（Ｉ）
【０００８】
【化５】

【０００９】
式中、
Ａは水素原子又は
【００１０】
【化６】

【００１１】
を表わし、ここで
Ｙは水素原子又は−ＣＯＲ₁を表わし、
Ｒ₁はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、アラルキルオキシ基又は
【００１２】
【化７】

【００１３】
（ここで、Ｒ₂及びＲ₃は同一もしくは相異なり、それぞれ水素原子、低級アルキル基、フェニル基又はＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜７員の複素環式基を表わすか、或いはＲ₂とＲ₃はそれらが結合する窒素原子と一緒になってさらにＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１個のヘテロ原子を含んでいてもよい４〜７員の複素環式環を形成していてもよい）
を表わし、
Ｂは場合によりハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基を表わす、
で示されるＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩が提供される。
【００１４】
本明細書において「低級」なる語は、この語が付された基又は化合物の炭素原子数が６個以下、好ましくは４個以下であることを意味する。
【００１５】
前記式（Ｉ）において、「低級アルキル基」としては、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル基等が挙げられ、「低級アルコキシ基」としては、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ基等を挙げることができる。また、「アラルキルオキシ基」はアリール−低級アルキルオキシ基を意味し、例えばベンジルオキシ、フェネチルオキシ基等を包含し、「ハロゲン原子」にはフッ素、塩素、臭素及びヨウ素原子が包含される。
【００１６】
Ｒ₂又はＲ₃が「Ｓ、Ｏ及びＮから選ばれる１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜７員の複素環式基」を表わす場合の該複素環式基の例としては、アゼチジニル、フリル、チエニル、ピリジル、ピペリジニル、アゼピニル、チアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、ピリミジニル、ピリダジニル基等が挙げられ、一方、Ｒ₂とＲ₃が「それらが結合する窒素原子と一緒になってさらにＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１個のヘテロ原子を含んでいてもよい４〜７員の複素環式環」を表わす場合の該複素環式環の例としては、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、１−パーヒドロアゼピニル、ピペラジノ、モルホリノ、チオモルホリノ基等を挙げることができる。
【００１７】
しかして、
【００１８】
【化８】

【００１９】
の基の例としては、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、フェニルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアミノ、フリルアミノ、ピリジルアミノ、２−チアゾリルアミノ、イミダゾリルアミノ、ピリミジニルアミノ、ピロリジノ、ピペリジノ、モルホリノ基等を挙げることができる。
【００２０】
記号Ｂによって表される「場合によりハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基」とは、未置換のフェニル基又は１個のハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されているフェニル基を意味し、例えばフェニル、２−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−フルオロフェニル、３−ヨードフェニル、４−フルオロフェニル、４−クロロフェニル、４−ブロモフェニル、２−ヒドロキシフェニル、４−ヒドロキシフェニル、２−メチルフェニル、４−エチルフェニル、２−メトキシフェニル、４−エトキシフェニル基等を挙げることができる。
【００２１】
本発明の好ましい一群の化合物は、Ａが水素原子を表わし、Ｂが場合によりハロゲン原子、特にフッ素原子で置換されていてもよいフェニル基を表わす場合の前記式（Ｉ）の化合物である。
【００２２】
また、本発明の好ましい別の一群の化合物は、Ａが場合によりＮ−低級アルキルカルバモイルで置換されていてもよい２−チアゾリル基を表わし、Ｂが未置換のフェニル基を表わす場合の前記式（Ｉ）の化合物である。
【００２３】
なお、本発明の前記式（Ｉ）の化合物において、イソプロピル基、ｓｅｃ−ブチル基、メトキシ基及びメチル基がそれぞれ結合している炭素原子は不整炭素原子であるので、それらは任意の（Ｒ）−又は（Ｓ）−の立体配置を有することができ、それらは全て本発明の範囲に包含されるが、薬理活性の点からみると、ドラスタチン１０と同じ立体配置を有する化合物が好ましい。
【００２４】
前記式（Ｉ）のペプチド化合物は、また、塩として存在することができ、そのような塩の例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、トリフルオロ酢酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酢酸塩等を挙げることができる。
【００２５】
本発明によれば、前記式（Ｉ）のペプチド化合物は、例えばペプチド化学の分野で周知の液相合成法（イー・シュレーダー及びケイ・リュブケ著「ザ・ペプタイズ」第１巻、７６〜１３６頁、１９６５年アカデミック・プレス発行参照）に従って、各アミノ酸又はペプチドフラグメントを縮合させることにより製造することができる。
【００２６】
例えば、縮合時におけるラセミ化を避けるためには、下記式（ＩＩ）
【００２７】
【化９】

【００２８】
のトリペプチドフラグメントと、下記式（ＩＩＩ）
【００２９】
【化１０】

【００３０】
式中、Ａ及びＢは前記の意味を有する、
のフラグメントとを縮合させることにより合成するのが好適である。
【００３１】
また、数多くの本発明化合物を効率よく合成するには、下記式（ＩＶ）
【００３２】
【化１１】

【００３３】
のテトラペプチドフラグメントと、下記式（Ｖ）
【００３４】
【化１２】

【００３５】
式中、Ａ及びＢは前記の意味を有する、
のフラグメントとを縮合させることにより行うのが好ましい。
【００３６】
縮合反応は、一般に、不活性溶媒、例えばクロロホルム、酢酸エチル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル等の中で、必要に応じて有機塩基、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）等の存在下に、縮合剤、例えばジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、シアノリン酸ジエチル（ＤＥＰＣ）、ＢＯＰ試薬等で処理することにより行うことができる。
【００３７】
反応温度は、通常−１０℃乃至室温、好ましくは０℃前後であり、式（ＩＩ）の化合物に対する式（ＩＩＩ）の化合物、有機塩基及び縮合剤の各々の使用割合は、式（ＩＩ）の化合物１モル当り、式（ＩＩＩ）の化合は少なくとも１モル、好ましくは１．０〜１．１モル程度、有機塩基は１〜２モル程度、そして縮合剤は等モル程度用いるのが有利である。
【００３８】
また、式（ＩＶ）の化合物と式（Ｖ）の化合物との反応も、上記の式（ＩＩ）の化合物と式（ＩＩＩ）の化合物との反応と同様の条件下に行なうことができる。
【００３９】
なお、Ｙがカルボキシ基を表わす場合の式（Ｉ）の化合物は、Ｙが低級アルコキシカルボニル基を表わす場合の式（Ｉ）の化合物をアルカリで加水分解することにより製造することもできる。
【００４０】
かくして得られる式（Ｉ）のペプチド化合物の、反応混合物からの単離、精製は、再結晶、イオン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過、高速液体クロマトグラフィー等により行うことができる。
【００４１】
なお、前記反応において出発原料として使用される前記式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）の化合物は従来の文献に未載の新規な化合物であるが、その構成成分である各アミノ酸を液相合成法で縮合することにより容易に製造することができる。
【００４２】
本発明の式（Ｉ）のペプチド化合物は、ドラスタチン１０よりも強い抗腫瘍作用を有しており、また治療比も大きく、例えば、白血病、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、大腸癌、ＣＮＳ癌、黒色腫、卵巣癌、腎臓癌、胃癌、膀胱癌などの処置又は治療に有用である。
【００４３】
本発明の式（Ｉ）の化合物の抗腫瘍作用は次のようにして測定することができる。
【００４４】
７週齢のＣＤＦ１マウスの腹腔内に、マウス白血病Ｐ３８８細胞を０．１ｍｌ（１０⁶cells／マウス）ずつ移植した。移植第一日目（移植翌日）及び第五日目に薬物を腹腔内に投与し、マウスの生死を６０日間観察した結果から下記式により延命率（ＩＬＳ，％）を算出した。なお、下記式中、Ｔは薬物投与群のメディアン生存日数、Ｃはコントロール群のメディアン生存日数を意味している。
【００４５】
【数１】

【００４６】
その結果を下記表に示す。なお、抗腫瘍作用は、ドラスタチン１０の延命率を１とした場合の相対比で表わした。
【００４７】

本発明に係る化合物は、薬剤として用いる場合、その用途に応じて、固体形態（例えば錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、丸剤、トローチ錠など）、半固体形態（例えば坐剤、軟膏など）又は液体形態（注射剤、乳剤、懸濁液、ローション、スプレーなど）のいずれかの製剤形態に調製して用いることができる。しかして、上記製剤に使用し得る無毒性の添加物としては、例えばでん粉、ゼラチン、ブドウ糖、乳糖、果糖、マルトース、炭酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース又はその塩、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸アルキルエステル、シロップ、エタノール、
プロピレングリコール、ワセリン、カーボワックス、グリセリン、塩化ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、クエン酸等が挙げられる。該薬剤はまた、治療学的に有用な他の薬剤を含有することもできる。
【００４８】
該薬剤中における本発明の化合物の含有量はその剤形に応じて異なるが、一般に固体及び半固体形態の場合には０．１〜５０重量％の濃度で、そして液体形態の場合には０．０５〜１０重量％の濃度で含有していることが望ましい。
【００４９】
本発明の化合物の投与量は、対象とする人間をはじめとする温血動物の種類、投与経路、症状の軽重、医者の診断等により広範に変えることができるが、一般に１日当たり、０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ程度とすることができる。しかし、患者の症状の軽重、医者の診断に応じて上記範囲の下限よりも少ない量又は上限よりも多い量を投与することはもちろん可能である。上記投与量は１日１回又は数回に分けて投与することができる。
【００５０】
【実施例】
以下、参考例及び実施例により本発明をさらに説明する。
【００５１】
なお、参考例及び実施例において用いる化合物番号に対応する化合物の構造については、以下のフローシート１及び２を参照されたい。ここで、Ｂｕ^tはｔｅｒｔ−ブチル基、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基、Ｚはベンジルオキシカルボニル基、Ｍｅはメチル基を表わし、Ｂ及びＹは前記の意味を有する。
【００５２】
【化１３】

【００５３】
【化１４】

【００５４】
【化１５】

【００５５】
参考例１
化合物１ ０．８５ｇ（１．７３ミリモル）をｔ−ブタノール−水（９：１）１５ｍｌに溶かし５％パラジウム炭素０．１ｇを加え、水素気流下で撹拌する。３時間反応したのち触媒を濾去洗浄し、濾洗液を減圧乾固する。残渣をベンゼン２０ｍｌに溶かし減圧乾固し、更にこの操作をもう一度繰り返して油状物を得る。この油状物をＺ−プロリン０．４８ｇ（１．９３ミリモル）及びシアノリン酸ジエチル（ＤＥＰＣ）０．３１ｇ（１．９０ミリモル）と共にジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）１０ｍｌに溶かし、氷冷撹拌下トリエチルアミン０．１９ｇ（１．８８ミリモル）をＤＭＦ１ｍｌに溶かした液を滴下する。
【００５６】
その後０゜で４時間、室温で一夜撹拌を続けたのち澄明な反応液を酢酸エチルで充分にうすめ、氷冷２Ｎ塩酸および飽和重曹水で洗い、乾燥し、溶媒を減圧で留去して油状物１．０１ｇを得る。シリカゲルのカラムクロマトグラフィ（溶出液：酢酸エチル−ヘキサン（２：１））で精製して、目的の化合物２を無色泡状物として得た。０．９７ｇ（収率９５．１％）。
【００５７】
［α］²⁷ _D−81.7゜(c=1.025、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.75-1.05(12H, m)、1.46(9H, s)、1.8-2.2(4H, m)、2.3-2.4(2H, m)、2.96(3H, s)、3.34(3H, s)、3.4-3.6(2H, m)、3.8-4.0(1H, m)、4.2-4.4(1H, m)、4.73(1H, dd, J=8.9Hz, 6.3Hz)、5.17(2H, br. s)、7.32(5H, s)。
【００５８】
参考例２
化合物２ ０．５０ｇ（０．８５ミリモル）をメタノール２０ｍｌに溶かし３７％ホルマリン１．０ｇと５％パラジウム炭素０．４ｇを加え、水素気流下にて４８時間撹拌を続ける。触媒を濾別し、メタノールで洗い、濾洗液を減圧乾固して得た油状物を酢酸エチル−ヘキサン（１：１）に溶かし不溶物を濾別する。濾液を減圧乾固し、残渣の油状物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（溶出液：酢酸エチル−ヘキサン（２：１））で精製して、目的の化合物３を無色油状物として得た。０．３６ｇ（収率９０．０％）。
【００５９】
［α］²⁵ _D−76.2゜(c=1.10、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.05(12H, m)、1.46(9H, s)、1.6-1.9(4H, m)、2.31(3H, s)、2.3-2.45(2H, m)、2.99(3H, s)、3.36(3H, s)、3.75-4.0(1H, m)、4.73(1H, dd, J=9.8Hz, 7.1Hz)、7.81(1H, br. d)。
【００６０】
参考例３
化合物３ ３１０ｍｇ（０．６６ミリモル）を０゜にて５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタンに溶かし、室温で１時間撹拌したのち減圧乾固する。
【００６１】
一方、化合物４ ２６３ｍｇ（０．７０ミリモル）を０゜にて４Ｎ塩化水素／ジオキサンに溶かし、室温で１時間撹拌したのち減圧乾固する。残渣をＤＭＦ３ｍｌに溶かし、氷冷下トリエチルアミン０．９ｍｌを加えたのち減圧乾固する。残渣をＤＭＦ３ｍｌに溶かし、氷冷下ＤＥＰＣ１３６ｍｇ（０．８３ミリモル）とトリエチルアミン０．１１ｍｌ（０．７９ミリモル）とを加え、そのまま一夜撹拌を続ける。
【００６２】
反応液を酢酸エチル−ベンゼン（４：１）混液でうすめ、飽和重曹水および飽和食塩水で洗い、乾燥し、溶媒を減圧で留去して油状物４４９ｍｇを得た。これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィ（溶出液：ジクロルメタン−メタノール（３０：１→１０：１）で精製して、目的の化合物５を無色油状物として得た。１８５ｍｇ（収率４１．５％）。
【００６３】
［α］_D n.d.
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.27(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.3(m)、2.34(3H, s)、2.3-2.9(m)、3.00(3H, s)、3.30(3H, s)、3.35(3H, s)、3.85-4.3(m)、4.68(1H, dd, J=8.7Hz, 4.9Hz)、5.13(2H, s)、7.34(5H, s)。
【００６４】
参考例４
化合物５ １８５ｍｇをｔ−ブタノール−水（９：１）３ｍｌに溶かし５％パラジウム炭素４０ｍｇを加え、水素気流下５時間撹拌する。触媒を濾去洗浄し、濾洗液を減圧乾固して、目的の化合物６を無色油状物として得た。１５５ｍｇ（収率９７．１％）。
【００６５】
［α］_D−83.3゜(c=0.365、MeOH)
実施例１
化合物６ ２３．４ｍｇ（４０マイクロモル）とフェネチルアミン１２．１ｍｇ（１００マイクロモル）とをＤＭＦ０．５ｍｌに溶かし、氷冷撹拌下ＤＥＰＣ９．６ｍｇ（５９マイクロモル）とトリエチルアミン８μｌとを加えそのまま一夜撹拌を続ける。反応液をジクロルメタンでうすめ、飽和重曹水および飽和食塩水で洗い、乾燥し、溶媒を留去して残渣２３．０ｍｇを得る。これをセファデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィ（溶出液：ヘキサン−メタノール−ジクロルメタン（４：５：１５））で精製して、目的の化合物７−Ａ（化合物７においてＢがフェニル基である化合物）を無色ワックス状物として得た。１８．８ｍｇ（収率６８．６％）。
【００６６】
［α］²⁵ _D−61.0゜(c=0.39、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.21(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.38(3H, s)、2.83(2H, t, J=7.0Hz)、3.01(3H, s)、3.32(3H,s)、3.36(3H, s)、3.2-3.6(m)、3.84(1H, dd, J=7.9Hz, 2.2Hz)、3.9-4.2(m)、4.71(1H, dd, J=9.2Hz, 7.0Hz)、6.3-6.6(1H, m)、7.23(5H, s)、7.7-8.1(1H, m)。
【００６７】
実施例１と同様にして化合物６とフェネチルアミン誘導体とを反応させて実施例２〜４の化合物を得た。
【００６８】
実施例２
化合物７−Ｂ（化合物７においてＢが２−フルオロフェニル基である化合物）
ワックス状物（収率７３．０％）
［α］²⁸ _D−61.7゜(c=0.326、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.21(3H, d, J=7.1Hz)、1.5-2.3(m)、2.33(3H, s)、2.3-2.6(m)、2.88(2H, t, J=7.3Hz)、3.01(3H, s)、3.32(3H, s)、3.37(3H, s)、3.2-3.7(m)、3.84(1H, dd,J=8.0Hz, 2.5Hz)、3.9-4.2(br)、4.5-4.9(1H, m)、6.4-6.6(1H, m)、6.8-7.3(4H, m)、7.6-8.1(1H, m)。
【００６９】
実施例３
化合物７−Ｃ（化合物７においてＢが３−フルオロフェニル基である化合物）
無定形粉末（収率７０．９％）
［α］²⁸ _D−56.4゜(c=0.287、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.22(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.2(m)、2.34(3H, s)、2.3-2.7(m)、2.84(2H, t, J=6.8Hz)、3.02(3H, s)、3.32(3H, s)、3.36(3H, s)、3.3-3.6(m)、3.83(1H, dd, J=8.4Hz, 2.2Hz)、3.9-4.3(m)、4.5-4.9(m)、6.5-6.7(1H,m)、6.8-7.2(4H, m)、7.7-8.1(1H, m)。
【００７０】
実施例４
化合物７−Ｄ（化合物７においてＢが４−フルオロフェニル基である化合物）
無定形粉末（収率７２．７％）
［α］²⁸ _D−55.9゜(c=0.285、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.22(3H, d, J=7.3Hz)、1.5-2.2(m)、2.34(3H, br. s)、2.80(2H, t, J=7.0Hz)、3.01(3H, s)、3.32(3H, s)、3.36(3H, s)、3.2-3.6(m)、3.75-3.95(1H, m)、3.95-4.3(m)、4.5-4.9(m)、6.4-6.6(1H, m)、6.8-7.2(4H, m)。
【００７１】
実施例５
化合物３ １４．８ｍｇ（３２マイクロモル）に氷冷下５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタン０．４ｍｌを加え、室温にて４時間撹拌したのち窒素ガスをフラッシュして乾固する。一方、化合物８−Ａ（化合物８においてＹが水素原子である化合物）１４．３ｍｇ（３０マイクロモル）を同様に５０％トリフルオロ酢酸／ジクロルメタン０．４ｍｌで処理しついで乾固する。両方を合わせてＤＭＦ１ｍｌに溶かし、氷冷下トリエチルアミン８５μｌを加えたのち減圧乾固する。これを再びＤＭＦ０．４ｍｌに溶かし、氷冷撹拌下ＤＥＰＣ６．７ｍｇ（４１マイクロモル）とトリエチルアミン１０μｌ（７２マイクロモル）とを加え、そのまま一夜撹拌を続ける。
【００７２】
反応液を減圧乾固し、残渣をジクロルメタンに溶かし、飽和重曹水および飽和食塩水で洗い、乾燥する。溶媒を留去して得た残渣を分取ＴＬＣ（展開溶媒：ジクロルメタン−メタノール（１０：１））で精製して、目的の化合物９−Ａ（化合物９においてＹが水素原子である化合物）を白色粉末として得た。１４．５ｍｇ（収率６２．０％）。
【００７３】
［α］²⁵ _D−92.4゜(c=0.218、MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.2(m)、1.22(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.0(m)、2.35(3H, s)、3.01(3H, s)、3.33(3H, s)、3.36(3H, s)、3.89(1H, dd, J=7.0Hz, 2.2Hz)、4.0-4.3(1H, m)、4.66(1H, dd, J=7.9Hz, 6.6Hz)、5.5-5.7(1H, m)、7.21(5H, s)、7.73(1H, d, J=3.3Hz)。
【００７４】
実施例６
実施例５と同様にして化合物３と化合物８−Ｂ（化合物８においてＹがメトキシカルボニル基である化合物）とを反応させて、化合物９−Ｂ（化合物９においてＹがメトキシカルボニル基である化合物）を無定形固体として得た（収率７８．２％）。
【００７５】
［α］_D n.d.
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.11(3H, d, J=7.0Hz)、1.5-2.1(m)、2.35(3H, s)、3.02(3H, s)、3.32(3H, s)、3.33(3H, s)、3.95(3H, s)、3.8-4.3(m)、4.70(1H, dd, J=7.5Hz, 6.8Hz)、5.4-5.8(1H, m)、7.23(5H, s)、8.05(1H, s)。
【００７６】
実施例７
化合物９−Ｂ ３８．７ｍｇ（４７マイクロモル）に氷冷下７０％エチルアミン水溶液を加え、溶解したら室温に一夜放置し、ついで減圧、乾固する。残渣を分取ＴＬＣ（展開溶媒：ジクロルメタン−メタノール（１０：１））、ついでヘキサン−メタノール−ジクロルメタン（４：５：１５）を溶出液とするセファデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィで精製し、目的の化合物９−Ｃ（化合物９においてＹがＮ−エチルカルバモイル基である化合物）を無定形固体として得た。３４．８ｍｇ（収率８８．５％）。
【００７７】
［α］²⁸ _D−81.4゜(C=0.309, MeOH)
¹H-NMR(CDCl₃,δ) 0.7-1.1(m)、1.11(3H, d, J=7.3Hz)、1.26(3H, t, J=7.3Hz)、1.5-2.2(m)、2.36(3H, s)、3.02(3H, s)、3.33(6H, s)、3.2-3.7(m)、3.8-4.0(1H, br. dd)、4.0-4.3(m)、4.69(1H, dd, J=8.8Hz, 6.8Hz)、5.3-5.7(1H, m)、7.24(5H, s)、7.95(1H, s)。[0001]
[Industrial application fields]
The present invention relates to a novel peptide compound. The compound of the present invention has a cell growth inhibitory action and / or an anti-neoplastic action, and is useful as an anticancer or antitumor agent.
[0002]
[Prior art]
Several compounds having cell growth inhibitory activity and / or anti-neoplastic activity have been isolated from the marine mollusc, Dolabella auricularia, and these compounds are dolastatin 1-15. It is called. Of these, dolastatin 10 is a pentapeptide having the following structural formula extracted from Indian sea mussels by Petit et al. In 1987, and is known as a compound having the strongest cell growth-inhibiting action among known compounds. (See Pettit et al., Journal of the American Chemical Society, 109, 6883, 1987 and JP-A-2-167278).
[0003]
[Formula 4]

[0004]
Recently, the total synthesis of dolastatin 10 was also reported (see US Pat. No. 4,978,744).
[0005]
On the other hand, the present inventors have previously disclosed certain dolastatin 10 derivatives (see International Publication WO 93/03054 pamphlet).
[0006]
SUMMARY OF THE INVENTION Problems to be Solved by the Invention and Means for Solving the Problems
This time, the present inventors have shown that a certain dolastatin 10 derivative in which N-methylproline is substituted for N-terminal dravaline (N, N-dimethylvaline) of dolastatin 10 has a much stronger antitumor effect than dostatatin 10 Found to have.
[0007]
Thus, according to the present invention, the general formula (I)
[0008]
[Chemical formula 5]

[0009]
Where
A is a hydrogen atom or
[Chemical 6]

[0011]
Where Y represents a hydrogen atom or —COR ₁ ;
R ₁ is a hydroxy group, a lower alkoxy group, an aralkyloxy group, or
[Chemical 7]

[0013]
(Wherein R ₂ and R ₃ are the same or different and are each a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl group, or a 4- to 7-membered heterocyclic ring containing 1 or 2 heteroatoms selected from S, O and N. R ₄ and R ₃ together with the nitrogen atom to which they are attached may further contain one heteroatom selected from S, O and N, 4-7 membered hetero A cyclic ring may be formed)
Represents
B represents a phenyl group optionally substituted with a halogen atom, a hydroxy group, a lower alkyl group or a lower alkoxy group,
The N-methylproline derivative shown by these, or its salt is provided.
[0014]
In the present specification, the term “lower” means that the group or compound to which this word is attached has 6 or less carbon atoms, preferably 4 or less.
[0015]
In the formula (I), examples of the “lower alkyl group” include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, n-hexyl group and the like. Examples of the “lower alkoxy group” include methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy group and the like. “Aralkyloxy group” means an aryl-lower alkyloxy group, and includes, for example, benzyloxy, phenethyloxy group, etc., and “halogen atom” includes fluorine, chlorine, bromine and iodine atoms.
[0016]
Examples of the heterocyclic group when R ₂ or R ₃ represents “a 4- to 7-membered heterocyclic group containing 1 or 2 heteroatoms selected from S, O and N” include azetidinyl, Furyl, thienyl, pyridyl, piperidinyl, azepinyl, thiazolyl, imidazolyl, oxazolyl, pyrimidinyl, pyridazinyl groups, etc., while R ₂ and R ₃ are “in combination with the nitrogen atom to which they are attached, further S, O and Examples of the heterocyclic ring in the case of “a 4 to 7-membered heterocyclic ring optionally containing one heteroatom selected from N” include azetidino, pyrrolidino, piperidino, 1-perhydroase Examples include pinyl, piperazino, morpholino, thiomorpholino groups and the like.
[0017]
But
[0018]
[Chemical 8]

[0019]
Examples of groups of amino, methylamino, ethylamino, isopropylamino, tert-butylamino, dimethylamino, diethylamino, phenylamino, N-methyl-N-phenylamino, furylamino, pyridylamino, 2-thiazolylamino, imidazolyl Amino, pyrimidinylamino, pyrrolidino, piperidino, morpholino groups and the like can be mentioned.
[0020]
The “phenyl group optionally substituted with a halogen atom, hydroxy group, lower alkyl group or lower alkoxy group” represented by the symbol B is an unsubstituted phenyl group or one halogen atom, hydroxy group, Means a phenyl group substituted by a lower alkyl group or a lower alkoxy group, such as phenyl, 2-fluorophenyl, 2-chlorophenyl, 2-bromophenyl, 3-fluorophenyl, 3-iodophenyl, 4-fluorophenyl, Examples include 4-chlorophenyl, 4-bromophenyl, 2-hydroxyphenyl, 4-hydroxyphenyl, 2-methylphenyl, 4-ethylphenyl, 2-methoxyphenyl, 4-ethoxyphenyl groups, and the like.
[0021]
A preferred group of compounds according to the invention are those compounds of the above formula (I) in which A represents a hydrogen atom and B represents a phenyl group optionally substituted with a halogen atom, in particular a fluorine atom.
[0022]
Another preferred group of compounds of the present invention is a compound of the above formula (wherein A represents a 2-thiazolyl group optionally substituted with N-lower alkylcarbamoyl, and B represents an unsubstituted phenyl group) It is a compound of I).
[0023]
In the compound of the formula (I) of the present invention, the carbon atom to which the isopropyl group, sec-butyl group, methoxy group and methyl group are bonded is an asymmetric carbon atom, so that they are any (R) -Or (S)-can have the configuration, and they are all included in the scope of the present invention, but from the viewpoint of pharmacological activity, a compound having the same configuration as dolastatin 10 is preferable.
[0024]
Said peptide compound of formula (I) can also be present as a salt, examples of such salts are hydrochloride, hydrobromide, trifluoroacetate, p-toluenesulfonate, Examples thereof include acetate.
[0025]
According to the present invention, the peptide compound of the above formula (I) can be prepared, for example, by a liquid phase synthesis method well known in the field of peptide chemistry ("The Peptize" Vol. 1, 76-136 by E. Schröder and Kay Lübke). Page, 1965, published by Academic Press), by condensing each amino acid or peptide fragment.
[0026]
For example, in order to avoid racemization during condensation, the following formula (II)
[0027]
[Chemical 9]

[0028]
A tripeptide fragment of the following formula (III)
[0029]
[Chemical Formula 10]

[0030]
Wherein A and B have the above meanings,
It is preferable to synthesize by condensing the fragment of
[0031]
In order to efficiently synthesize many of the compounds of the present invention, the following formula (IV)
[0032]
Embedded image

[0033]
A tetrapeptide fragment of the following formula (V)
[0034]
Embedded image

[0035]
Wherein A and B have the above meanings,
It is preferable to condense with the above fragment.
[0036]
The condensation reaction is generally carried out in an inert solvent such as chloroform, ethyl acetate, tetrahydrofuran (THF), dimethylformamide (DMF), acetonitrile or the like, if necessary with an organic base such as triethylamine, N-methylmorpholine, diisopropylethylamine. In the presence of (DIEA) etc., it can be carried out by treatment with a condensing agent such as dicyclohexylcarbodiimide (DCC), diphenylphosphoryl azide (DPPA), diethyl cyanophosphate (DEPC), BOP reagent and the like.
[0037]
The reaction temperature is usually −10 ° C. to room temperature, preferably around 0 ° C. The ratio of each of the compound of formula (III), the organic base and the condensing agent to the compound of formula (II) is It is advantageous to use at least 1 mole of the compound of formula (III) per mole of the compound, preferably about 1.0 to 1.1 mole, about 1 to 2 mole of organic base, and about mole of condensing agent. .
[0038]
The reaction between the compound of formula (IV) and the compound of formula (V) can also be carried out under the same conditions as the reaction of the compound of formula (II) with the compound of formula (III).
[0039]
The compound of formula (I) when Y represents a carboxy group can also be produced by hydrolyzing the compound of formula (I) when Y represents a lower alkoxycarbonyl group with an alkali.
[0040]
The peptide compound of the formula (I) thus obtained can be isolated and purified from the reaction mixture by recrystallization, ion exchange chromatography, gel filtration, high performance liquid chromatography or the like.
[0041]
The compounds of the formulas (II), (III), and (IV) used as starting materials in the reaction are novel compounds that are not yet described in the conventional literature. It can be easily produced by condensation using a phase synthesis method.
[0042]
The peptide compound of formula (I) of the present invention has a stronger antitumor action than dolastatin 10 and has a higher therapeutic ratio, such as leukemia, non-small cell lung cancer, small cell lung cancer, colon cancer, CNS cancer. It is useful for treating or treating melanoma, ovarian cancer, kidney cancer, stomach cancer, bladder cancer and the like.
[0043]
The antitumor activity of the compound of formula (I) of the present invention can be measured as follows.
[0044]
0.1 ml (10 ⁶ cells / mouse) of mouse leukemia P388 cells were transplanted into the peritoneal cavity of 7-week-old CDF1 mice. The drug was administered intraperitoneally on the first day of transplantation (the day after transplantation) and on the fifth day, and the survival rate (ILS,%) was calculated by the following formula from the results of observing the life and death of mice for 60 days. In the following formula, T means the median survival days of the drug administration group, and C means the median survival days of the control group.
[0045]
[Expression 1]

[0046]
The results are shown in the table below. The antitumor action was expressed as a relative ratio when the survival rate of dolastatin 10 was 1.
[0047]

When the compound according to the present invention is used as a drug, depending on its use, it may be in a solid form (eg, tablet, hard capsule, soft capsule, granule, powder, fine granule, pill, troche tablet, etc.) It can be prepared and used in either a solid form (eg, suppository, ointment, etc.) or a liquid form (injection, emulsion, suspension, lotion, spray, etc.). Non-toxic additives that can be used in the above preparation include, for example, starch, gelatin, glucose, lactose, fructose, maltose, magnesium carbonate, talc, magnesium stearate, methylcellulose, carboxymethylcellulose or a salt thereof, gum arabic, Polyethylene glycol, p-hydroxybenzoic acid alkyl ester, syrup, ethanol,
Examples include propylene glycol, petrolatum, carbowax, glycerin, sodium chloride, sodium sulfite, sodium phosphate, and citric acid. The agent can also contain other therapeutically useful agents.
[0048]
The content of the compound of the present invention in the drug varies depending on the dosage form, but is generally 0.1 to 50% by weight in the case of solid and semi-solid forms and 0 in the case of liquid form. It is desirable to contain at a concentration of 0.05 to 10% by weight.
[0049]
The dose of the compound of the present invention can vary widely depending on the type of warm-blooded animal including human beings, administration route, symptom severity, doctor's diagnosis, etc. It can be set to about ˜50 mg / kg. However, it is of course possible to administer an amount less than the lower limit or greater than the upper limit of the above range depending on the severity of the patient's symptoms and the diagnosis of the doctor. The above dose can be administered once a day or divided into several times.
[0050]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be further described with reference examples and examples.
[0051]
For the structure of the compound corresponding to the compound number used in Reference Examples and Examples, refer to the following flow sheets 1 and 2. Here, Bu ^t is tert- butyl group, Boc is tert- butoxycarbonyl group, Bzl a benzyl group, Z is benzyloxycarbonyl group, Me represents a methyl group, B and Y are as defined above.
[0052]
Embedded image

[0053]
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[0054]
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[0055]
Reference example 1
Dissolve 0.85 g (1.73 mmol) of Compound 1 in 15 ml of t-butanol-water (9: 1), add 0.1 g of 5% palladium carbon, and stir in a hydrogen stream. After reacting for 3 hours, the catalyst is removed by filtration and the filtrate is dried under reduced pressure. The residue is dissolved in 20 ml of benzene and evaporated to dryness, and this operation is repeated once more to obtain an oil. This oil was dissolved in 0.4 ml of Z-proline (1.93 mmol) and 0.31 g (1.90 mmol) of diethyl cyanophosphate (DEPC) in 10 ml of dimethylformamide (DMF), and 0.19 g of triethylamine was stirred with ice cooling. A solution prepared by dissolving (1.88 mmol) in 1 ml of DMF is added dropwise.
[0056]
After stirring at 0 ° for 4 hours and at room temperature overnight, the clear reaction mixture was thoroughly diluted with ethyl acetate, washed with ice-cold 2N hydrochloric acid and saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, dried, and the solvent was evaporated under reduced pressure to give an oil. 1.01 g of product is obtained. Purification by column chromatography on silica gel (eluent: ethyl acetate-hexane (2: 1)) gave the desired compound 2 as a colorless foam. 0.97 g (yield 95.1%).
[0057]
[Α] ²⁷ _D -81.7 ° (c = 1.025, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.75-1.05 (12H, m), 1.46 (9H, s), 1.8-2.2 (4H, m), 2.3-2.4 (2H, m), 2.96 (3H, s) 3.34 (3H, s), 3.4-3.6 (2H, m), 3.8-4.0 (1H, m), 4.2-4.4 (1H, m), 4.73 (1H, dd, J = 8.9Hz, 6.3Hz), 5.17 (2H, br. S), 7.32 (5H, s).
[0058]
Reference example 2
Dissolve 0.50 g (0.85 mmol) of Compound 2 in 20 ml of methanol, add 1.0 g of 37% formalin and 0.4 g of 5% palladium carbon, and continue stirring for 48 hours under a hydrogen stream. The catalyst is filtered off, washed with methanol, the filtrate is dried under reduced pressure, and the oily substance obtained is dissolved in ethyl acetate-hexane (1: 1), and the insoluble matter is filtered off. The filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure, and the residual oil was purified by silica gel column chromatography (eluent: ethyl acetate-hexane (2: 1)) to give the desired compound 3 as a colorless oil. 0.36 g (yield 90.0%).
[0059]
[Α] ²⁵ _D −76.2 ° (c = 1.10, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.05 (12H, m), 1.46 (9H, s), 1.6-1.9 (4H, m), 2.31 (3H, s), 2.3-2.45 (2H, m) 2.99 (3H, s), 3.36 (3H, s), 3.75-4.0 (1H, m), 4.73 (1H, dd, J = 9.8 Hz, 7.1 Hz), 7.81 (1H, br. D).
[0060]
Reference example 3
310 mg (0.66 mmol) of Compound 3 is dissolved in 50% trifluoroacetic acid / dichloromethane at 0 °, stirred at room temperature for 1 hour and then evaporated to dryness.
[0061]
On the other hand, 263 mg (0.70 mmol) of compound 4 is dissolved in 4N hydrogen chloride / dioxane at 0 °, stirred at room temperature for 1 hour and then dried under reduced pressure. The residue is dissolved in 3 ml of DMF, 0.9 ml of triethylamine is added under ice cooling, and then the solution is dried under reduced pressure. Dissolve the residue in 3 ml of DMF, add 136 mg (0.83 mmol) of DEPC and 0.11 ml (0.79 mmol) of triethylamine under ice cooling, and continue stirring overnight.
[0062]
The reaction mixture was diluted with an ethyl acetate-benzene (4: 1) mixture, washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, dried, and the solvent was evaporated under reduced pressure to give an oil (449 mg). This was purified by silica gel column chromatography (eluent: dichloromethane-methanol (30: 1 → 10: 1)) to obtain the target compound 5 as a colorless oil, 185 mg (yield 41.5%).
[0063]
[Α] _D nd
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.27 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.5-2.3 (m), 2.34 (3H, s), 2.3-2.9 (m), 3.00 (3H, s), 3.30 (3H, s), 3.35 (3H, s), 3.85-4.3 (m), 4.68 (1H, dd, J = 8.7Hz, 4.9Hz), 5.13 (2H, s), 7.34 (5H, s).
[0064]
Reference example 4
Dissolve 185 mg of Compound 5 in 3 ml of t-butanol-water (9: 1), add 40 mg of 5% palladium on carbon, and stir for 5 hours under a hydrogen stream. The catalyst was removed by filtration, and the filtrate was dried under reduced pressure to give the target compound 6 as a colorless oil. 155 mg (yield 97.1%).
[0065]
[Α] _D −83.3 ° (c = 0.365, MeOH)
Example 1
Compound 6 23.4 mg (40 μmol) and phenethylamine 12.1 mg (100 μmol) were dissolved in DMF 0.5 ml, and DEPC 9.6 mg (59 μmol) and triethylamine 8 μl were added under ice-cooling and stirring, and the mixture was stirred overnight. to continue. The reaction mixture is diluted with dichloromethane, washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, dried, and the solvent is evaporated to give 23.0 mg of residue. This was purified by column chromatography on Sephadex LH-20 (eluent: hexane-methanol-dichloromethane (4: 5: 15)) to obtain the target compound 7-A (compound 7 wherein B is a phenyl group) Was obtained as a colorless wax. 18.8 mg (yield 68.6%).
[0066]
[Α] ²⁵ _D −61.0 ° (c = 0.39, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.21 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.5-2.2 (m), 2.38 (3H, s), 2.83 (2H, t, J = 7.0Hz), 3.01 (3H, s), 3.32 (3H, s), 3.36 (3H, s), 3.2-3.6 (m), 3.84 (1H, dd, J = 7.9Hz, 2.2Hz), 3.9- 4.2 (m), 4.71 (1H, dd, J = 9.2 Hz, 7.0 Hz), 6.3-6.6 (1H, m), 7.23 (5H, s), 7.7-8.1 (1H, m).
[0067]
In the same manner as in Example 1, compound 6 and a phenethylamine derivative were reacted to obtain the compounds of Examples 2-4.
[0068]
Example 2
Compound 7-B (compound in which B is a 2-fluorophenyl group in compound 7)
Wax (yield 73.0%)
[Α] ²⁸ _D −61.7 ° (c = 0.326, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.21 (3H, d, J = 7.1 Hz), 1.5-2.3 (m), 2.33 (3H, s), 2.3-2.6 (m), 2.88 (2H, t, J = 7.3Hz), 3.01 (3H, s), 3.32 (3H, s), 3.37 (3H, s), 3.2-3.7 (m), 3.84 (1H, dd, J = 8.0Hz 2.5Hz), 3.9-4.2 (br), 4.5-4.9 (1H, m), 6.4-6.6 (1H, m), 6.8-7.3 (4H, m), 7.6-8.1 (1H, m).
[0069]
Example 3
Compound 7-C (compound in which B is a 3-fluorophenyl group in compound 7)
Amorphous powder (yield 70.9%)
[Α] ²⁸ _D -56.4 ° (c = 0.287, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.22 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.5-2.2 (m), 2.34 (3H, s), 2.3-2.7 (m), 2.84 (2H, t, J = 6.8Hz), 3.02 (3H, s), 3.32 (3H, s), 3.36 (3H, s), 3.3-3.6 (m), 3.83 (1H, dd, J = 8.4Hz 2.2Hz), 3.9-4.3 (m), 4.5-4.9 (m), 6.5-6.7 (1H, m), 6.8-7.2 (4H, m), 7.7-8.1 (1H, m).
[0070]
Example 4
Compound 7-D (compound in which B is a 4-fluorophenyl group in compound 7)
Amorphous powder (yield 72.7%)
[Α] ²⁸ _D -55.9 ° (c = 0.285, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.22 (3H, d, J = 7.3 Hz), 1.5-2.2 (m), 2.34 (3H, br.s), 2.80 (2H, t , J = 7.0Hz), 3.01 (3H, s), 3.32 (3H, s), 3.36 (3H, s), 3.2-3.6 (m), 3.75-3.95 (1H, m), 3.95-4.3 (m) 4.5-4.9 (m), 6.4-6.6 (1H, m), 6.8-7.2 (4H, m).
[0071]
Example 5
To 14.8 mg (32 μmol) of Compound 3 is added 0.4 ml of 50% trifluoroacetic acid / dichloromethane under ice-cooling, and the mixture is stirred at room temperature for 4 hours. On the other hand, 14.3 mg (30 μmol) of compound 8-A (compound in which Y is a hydrogen atom in compound 8) is similarly treated with 0.4 ml of 50% trifluoroacetic acid / dichloromethane and then dried. Both are combined and dissolved in 1 ml of DMF, and 85 μl of triethylamine is added under ice cooling, followed by drying under reduced pressure. This is dissolved again in 0.4 ml of DMF, and 6.7 mg (41 μmol) of DEPC and 10 μl (72 μmol) of triethylamine are added under ice-cooling and stirring is continued overnight.
[0072]
The reaction mixture is evaporated to dryness, the residue is dissolved in dichloromethane, washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and saturated brine, and dried. The residue obtained by distilling off the solvent was purified by preparative TLC (developing solvent: dichloromethane-methanol (10: 1)) to obtain the target compound 9-A (compound 9 in which Y is a hydrogen atom). Obtained as a white powder. 14.5 mg (yield 62.0%).
[0073]
[Α] ²⁵ _D −92.4 ° (c = 0.218, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.2 (m), 1.22 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.5-2.0 (m), 2.35 (3H, s), 3.01 (3H, s), 3.33 (3H, s), 3.36 (3H, s), 3.89 (1H, dd, J = 7.0Hz, 2.2Hz), 4.0-4.3 (1H, m), 4.66 (1H, dd, J = 7.9Hz, 6.6 Hz), 5.5-5.7 (1H, m), 7.21 (5H, s), 7.73 (1H, d, J = 3.3 Hz).
[0074]
Example 6
In the same manner as in Example 5, compound 3 and compound 8-B (compound in which Y is a methoxycarbonyl group in compound 8) are reacted to give compound 9-B (compound in which Y is a methoxycarbonyl group in compound 9) Was obtained as an amorphous solid (yield 78.2%).
[0075]
[Α] _D nd
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.11 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.5-2.1 (m), 2.35 (3H, s), 3.02 (3H, s), 3.32 (3H, s), 3.33 (3H, s), 3.95 (3H, s), 3.8-4.3 (m), 4.70 (1H, dd, J = 7.5Hz, 6.8Hz), 5.4-5.8 (1H, m ), 7.23 (5H, s), 8.05 (1H, s).
[0076]
Example 7
A 70% aqueous ethylamine solution is added to 38.7 mg (47 μmol) of Compound 9-B under ice cooling. The residue was purified by preparative TLC (developing solvent: dichloromethane-methanol (10: 1)) followed by Sephadex LH-20 column chromatography using hexane-methanol-dichloromethane (4: 5: 15) as an eluent. Compound 9-C (compound in which Y is N-ethylcarbamoyl group in Compound 9) was obtained as an amorphous solid. 34.8 mg (yield 88.5%).
[0077]
[Α] ²⁸ _D -81.4 ° (C = 0.309, MeOH)
¹ H-NMR (CDCl ₃ , δ) 0.7-1.1 (m), 1.11 (3H, d, J = 7.3 Hz), 1.26 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.5-2.2 (m), 2.36 ( 3H, s), 3.02 (3H, s), 3.33 (6H, s), 3.2-3.7 (m), 3.8-4.0 (1H, br.dd), 4.0-4.3 (m), 4.69 (1H, dd, J = 8.8Hz, 6.8Hz), 5.3-5.7 (1H, m), 7.24 (5H, s), 7.95 (1H, s).

Claims (4)

一般式

式中、
Ａは水素原子又は

を表わし、ここで
Ｙは水素原子又は−ＣＯＲ₁を表わし、
Ｒ₁はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、アラルキルオキシ基又は

（ここで、Ｒ₂及びＲ₃は同一もしくは相異なり、それぞれ水素原子、低級アルキル基、フェニル基又はＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜７員の複素環式基を表わすか、或いは
Ｒ₂とＲ₃はそれらが結合する窒素原子と一緒になってさらにＳ、Ｏ及びＮから選ばれる１個のヘテロ原子を含んでいてもよい４〜７員の複素環式環を形成していてもよい）を表わし、
Ｂは場合によりハロゲン原子、ヒドロキシ基、低級アルキル基又は低級アルコキシ基で置換されていてもよいフェニル基を表わす、
で示されるＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。General formula

Where
A is a hydrogen atom or

Where Y represents a hydrogen atom or —COR ₁ ;
R ₁ is a hydroxy group, a lower alkoxy group, an aralkyloxy group or

(Wherein R ₂ and R ₃ are the same or different and are each a hydrogen atom, a lower alkyl group, a phenyl group, or a 4- to 7-membered heterocyclic ring containing 1 or 2 heteroatoms selected from S, O and N. R ₄ and R ₃ together with the nitrogen atom to which they are attached may further contain one heteroatom selected from S, O and N, 4-7 membered hetero Which may form a cyclic ring)
B represents a phenyl group optionally substituted with a halogen atom, a hydroxy group, a lower alkyl group or a lower alkoxy group,
Or an N-methylproline derivative thereof or a salt thereof. Ａが水素原子を表わし、Ｂが場合によりハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を表わす請求項１記載のＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。The N-methylproline derivative or a salt thereof according to claim 1, wherein A represents a hydrogen atom and B represents a phenyl group optionally substituted with a halogen atom. ハロゲン原子がフッ素原子である請求項２記載のＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。The N-methylproline derivative or a salt thereof according to claim 2, wherein the halogen atom is a fluorine atom. Ａが場合によりＮ−低級アルキルカルバモイル基で置換されていてもよい２−チアゾリル基を表わし、Ｂが未置換のフェニル基を表わす請求項１記載のＮ−メチルプロリン誘導体又はその塩。The N-methylproline derivative or a salt thereof according to claim 1, wherein A represents a 2-thiazolyl group optionally substituted with an N-lower alkylcarbamoyl group, and B represents an unsubstituted phenyl group.