JP3519572B2 - 酵母エキス組成物およびそれを得るための酵母変異株 - Google Patents
酵母エキス組成物およびそれを得るための酵母変異株Info
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Description
少なくかつ甘味、旨味のバランスの優れた酵母エキス組
成物およびキャンディダ属の酵母変異株から該酵母エキ
スを得る方法に関するものである。
一般消費者の自然食品指向に伴って天然調味料の利用が
見直され、酵母エキスについても品質の高いものが望ま
れるようになってきた。一般に、酵母エキスの原料とし
てはパン酵母、ビール酵母に代表されるサッカロミセス
属の酵母が用いられている。サッカロミセス属の酵母エ
キスには独特の酵母臭があり、この酵母臭は肉風味を引
き立たせる調味目的には適しているが、和風料理の調味
には適さない。これに対し、キャンディダ属の酵母由来
の酵母エキス(以下、キャンディダ酵母エキスとい
う。)はサッカロミセス属の酵母由来の酵母エキス特有
の酵母臭をほとんど持たない。しかもキャンディダ属酵
母の持つ豊富な核酸を利用することで旨味の強い和風料
理の調味にも適した汎用性のある調味料とすることがで
きる。(特開昭62−201595号公報、特公平7−
93871号公報)
ようとするために、酵素分解法によりキャンディダ酵母
エキスを生産する場合、遊離アミノ酸の抽出率が低くな
りグルタミン酸含量以外のアミノ酸含量が相対的に低く
なり、アミノ酸由来の風味については単調なものとなら
ざるを得なかった。また、キャンディダ酵母エキスにも
特異臭があり、この特異臭を抑えることが望まれてい
た。一方、酵母エキス全般について遊離アラニン含量を
調節することにより酵母エキスの有する渋味を抑制する
ことが報告されている。(特公昭48−21507号公
報)しかしキャンディダ酵母エキスのアミノ酸バランス
を調整することで特異臭が抑えられ、かつ味質が改良さ
れた酵母エキスは存在しなかった。
解決すべく鋭意研究を重ねた結果、キャンディダ属酵母
エキスの遊離アミノ酸のうちアラニン、グルタミン酸、
ヒスチジンの組成比を高めることでキャンディダ酵母エ
キス特有臭が少なく非常に風味の改善された調味料とな
ることを見出し、本発明を完成した。すなわち本発明
は、酵母エキス中の全遊離アミノ酸含量が3.0以上
で、かつ全遊離アミノ酸含量中のアラニン含量が10%
以上、グルタミン酸含量が25%以上で、かつヒスチジ
ン含量が10%以上であるキャンディダ属の酵母由来の
酵母エキス組成物およびその製造方法である。本発明の
組成物中のアミノ酸含量は、3.0%以上であるが、そ
の量は多ければ多いほど好ましい。ただし、本発明であ
れば、組成物中のアミノ酸の含量が3〜5%程度であっ
てもアミノ酸の旨みを呈する調味料となる。
母エキスのアラニン、グルタミン酸、ヒスチジンの含有
量は、該酵母エキス組成物の全遊離アミノ酸量に対し
て、それぞれ10%以上、25%以上、10%以上、望
ましくは、それぞれ20%以上、40%以上、10%以
上である。これらのうちいずれかのアミノ酸の含有量が
前記範囲未満であると、核酸の旨味とアミノ酸の風味の
バランスが崩れ、特異臭が強くなることもある。
ミノ酸含量に占める各遊離アミノ酸組成比について述べ
ると、アラニンについては10%前後、グルタミン酸に
ついては15%前後、ヒスチジン5%前後である。本発
明の組成物中のアミノ酸の含量は3.0%以上である
が、その量は多ければ多いほど好ましい。ただし、本発
明の酵母エキスであれば組成物中のアミノ酸の含量が3
〜5%程度であってもアミノ酸の旨みを呈する調味料と
なる。
て説明する。まず、公知の方法によって得られたキャン
ディダ酵母エキスにアラニン、グルタミン酸、ヒスチジ
ンを規定量となるように添加する方法がある。また、別
法としてキャンディダ属に属する食用酵母を変異させた
変異株を用いる方法がある。すなわち、キャンディダ属
に属する食用酵母を、アスパラギン酸ヒドロキサメート
耐性を有しかつグリセリンのみを炭素源とする寒天培地
30℃でのコロニー形成に2日以上を要する株を利用す
ることにより、天然由来の該酵母エキス組成物を直接得
ることができる。以下にその方法を詳しく述べる。
ニトロソグアニジンなどの変異処理剤で処理するか、紫
外線、X線等を照射することで、アスパラギン酸ヒドロ
キサメート耐性株を取得する。この場合のアスパラギン
酸ヒドロキサメート耐性株とはアスパラギン酸ヒドロキ
サメートを含有する完全合成培地に生育するコロニーの
直径が感受性株の作るコロニーのそれの2倍以上のもの
を言う。キャンディダ属に属する食用酵母としてはキャ
ンディダ トロピカリス(Candida tropicalis)、キャン
ディダ リポリティカ(Candida lipolytica)、キャンデ
ィダ ユーティリス(Candida utilis)が挙げられるが、
更に好ましくはキャンディダ ユーティリスIFO06
26である。
メート耐性株を親株として、再び上記と同様な変異処理
を行い、グリセリンのみを炭素源とした寒天培地上30
℃でのコロニー形成に2日以上を要する株を選択する。
こうして得られた株を、50ml栄養培地に30℃、18
時間培養し、得られた菌体をビーズ摩砕器で摩砕して、
さらにエンドプロテアーゼを添加し50℃12時間反応
させる。その後遠心分離で残査を除去後、得られた上清
のアミノ酸分析を行う。このようにしてアラニン、グル
タミン酸、ヒスチジンを多く含む酵母エキス組成物を得
る原料酵母となり得る変異株を取得することができる。
こうして得られた変異株の例としてAHR4−24株が
ある。(微工研寄託番号:FERM BP−5956)
物を製造する方法について述べる。まず得られた変異株
を培養する。培地の炭素源としては、ブドウ糖、蔗糖、
酢酸、エタノール、糖蜜、木材糖化液、デキストロース
コーンシロップ、亜硫酸パルプ廃液等を用いることがで
きる。窒素源としては、尿素、アンモニア、硫安、塩化
アンモニウム、硝酸塩などが使用できる。燐酸、カリウ
ム、マグネシウム源は通常の工業用原料を用いることが
でき、その他、亜鉛、銅、マンガン、鉄イオン等の無機
塩を添加したり、またビタミン類、アミノ酸等、コーン
スティープリカーなどの有機含窒素物を添加しても良
い。培養温度は、20℃〜38℃、特に30℃〜36℃
が良く、pHは3.5〜8.0特に4.0〜6.0が望
ましい。
洗浄後、懸濁液を水で希釈して懸濁液とする。そして、
懸濁液を加熱したり、懸濁液を乾燥させることにより酵
母自身の持つ酵素を失活させる。失活された菌体の細胞
壁を物理的に損傷させる。この処理は、前記の懸濁液
や、熱風乾燥された菌体に水を加えた懸濁液をホモジェ
ナイザー等で攪拌することにより行えばよい。
酵母の細胞壁、菌体蛋白、高分子核酸を分解しうるもの
であればどのようなものを利用してもよい。例えば、エ
ンドプロテアーゼ、エキソプロテアーゼ、ヌクレアー
ゼ、デアミナーゼ、細胞壁溶解酵素等が挙げられる。酵
素処理は、酵素の最適温度、最適PH付近で一定時間、
例えば1時間〜15時間程度反応させればよい。酵素反
応終了後、遠心分離等で残査を除去し上澄液を得る。上
澄液に必要に応じて食塩を添加し、その後所望の濃度に
濃縮することで目的の酵母エキスを得る。該酵母エキス
の水分含量はペースト状製品の場合25%から35%、
エキス固形分は50%から65%が適当である。
する。
26)を使用し、これを完全合成培地(グルコース1
%、硫酸アンモニウム0.35%、燐酸1カリウム0.
1%、硫酸マグネシウム0.05%、塩化ナトリウム
0.05%、塩化カルシウム0.05%、微量金属、ビ
タミン類 )で30℃、18時間培養した。得られた酵
母懸濁液10mlを無菌的にシャーレに取り、攪拌子で
液を攪拌しながら、15WUVランプにより20cmの
距離をおいて直接紫外線を照射した。紫外線を照射しな
かった同一の酵母懸濁液の生菌数と比べて、生存率が
0.1%以下になった被照射液を得た。この被照射液を
シャーレ上でコロニーが100から500得られる程度
に希釈し、上記と同じ完全合成培地に1mg/mlのア
スパラギン酸ヒドロキサメートを添加した寒天培地に塗
布した。寒天培地を30℃にて2日無菌培養し、同培地
上で紫外線非照射株から得られるコロニーの2倍以上の
直径を有するコロニーを取得した。
ヒドロキサメート耐性株を元株にして、上記と同様の変
異操作によりグリセリンのみを炭素源とする上記と同じ
完全合成培地上30℃でコロニー形成に2日以上を要す
る株を選択した。このようにして選択された変異株の中
から酵母エキス中の遊離アミノ酸含量が3.0%以上
で、かつ全遊離アミノ酸含量中のアラニン含量が10%
以上、グルタミン酸含量が25%以上、ヒスチジン含量
が10%以上の変異株を選んだ。このうち最もアラニ
ン、グルタミン酸、ヒスチジン含量が高かったキャンデ
ィダ ユーティリス AHR4−24株はFERM B
P−5956として微工研に寄託されている。なおキャ
ンディダ ユーティリス AHR4−24株はアミノ酸
組成比を除いて元株キャンディダ ユーティリス(IF
O0626)と全く同一の菌学的性質を有していた。
%、アンモニアにてpH5.5に調整)で培養し生菌体
を得た。800gの生菌体を水で洗浄後、菌体を水で希
釈し、煮沸した。煮沸した酵母懸濁液を高圧ホモジェナ
イザー(1000bar)で菌体破砕した。得られた菌
体に酵素処理を行った。まず、菌体破砕液に中性プロテ
アーゼ(天野製薬プロテアーゼN)160mgを添加
し、50℃にて12時間反応を行った。引き続き菌体破
砕液にヌクレアーゼ(天野製薬ヌクレアーゼ)60mg
を添加し、65℃にて4時間反応を行った。その後デア
ミナーゼ(天野製薬デアミザイム)60mgを添加し2
時間反応を行った。
0000回転10分間)し、上澄液を1260g得た。
この上澄液に24gの食塩を添加し、エバポレータで濃
縮した結果、ペースト状酵母エキス160gを得た。使
用した酵母の乾燥重量に対するエキス固形分抽出率は5
0%であった。得られた酵母エキスの成分は以下の通り
であった。 エキス固形分 50% 食塩 15% 全窒素 4.5% 核酸(5’−IG) 1.7% pH 6.0 全遊離アミノ酸量に占める各遊離アミノ酸重量比は以下
の通りであった。 アラニン 12.5% グルタミン酸 31.0% ヒスチジン 15.0% 酵母エキス中の全遊離アミノ酸含量 5.5%
いて実施例1のごとく調製したキャンディダ酵母エキス
(B)(実施例2)、および元株を用いて実施例1と同
様の方法で調製したキャンディダ酵母エキス(A)(比
較例1)を得た。酵母エキス(B)の成分、および遊離
アミノ酸重量比は実施例1と同じ組成比であった。一
方、酵母エキス(A)は下記の組成比を有していた。 エキス固形分 50% 食塩 15% 全窒素 4.5% 核酸(5’−IG) 1.7% pH 6.0 また、酵母エキス(A)の全遊離アミノ酸量に占める各
遊離アミノ酸重量比は以下の通りであった。 アラニン 6.0% グルタミン酸 25.0% ヒスチジン 8.0% 酵母エキス中の全遊離アミノ酸含量 5.5% サンプル濃度1%溶液、サンプル温度50℃の酵母エキ
ス(A),(B)について官能評価をパネル10名を2
点識別法で行った。その結果を表1に示す。
スは甘味、キャンディダ酵母特異臭の少なさについて5
%の有意差を持って(B)が優れているだけでなく、味
のバランスも(B)が優れていることが示された。
が強く、しかもキャンディダ酵母特異臭の少ない呈味バ
ランスの優れたものである。
Claims (6)
- 【請求項1】 酵母エキス中の全遊離アミノ酸含量が
3.0%以上であり、全遊離アミノ酸含量中のアラニン
含量が10%以上、グルタミン酸含量が25%以上、か
つヒスチジン含量が10%以上であるキャンディダ ト
ロピカリス、キャンディダ リポリティカ又はキャンデ
ィダ ユーティリスに属する酵母由来の酵母エキス組成
物。 - 【請求項2】 請求項1に記載された酵母エキス組成物
を含有する食品。 - 【請求項3】 請求項1に記載された酵母エキス組成物
を含有する飼料。 - 【請求項4】 アスパラギン酸ヒドロキサメート耐性を
有し、かつグリセリンのみを炭素源とする寒天培地上3
0℃でのコロニー形成に2日以上を要するキャンディダ
トロピカリス、キャンディダ リポリティカ又はキャ
ンディダ ユーティリスに属する酵母。 - 【請求項5】 キャンディダ ユーティリスAHR4−
24株。 - 【請求項6】 アスパラギン酸ヒドロキサメート耐性を
有し、かつグリセリンのみを炭素源とする寒天培地上3
0℃でのコロニー形成に2日以上を要するキャンディダ
トロピカリス、キャンディダ リポリティカ又はキャ
ンディダ ユーティリスに属する酵母を熱により失活さ
せた後、該酵母に酵素処理を行い、遠心分離を行った
後、その上澄液を得ることを特徴とする酵母エキス組成
物の製造方法。
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